淋病奈瑟菌耐药机制研究进展
淋球菌耐药现状及耐药机制研究进展
ａｄｐ ｅｙ ｉ ｄｓｏｉｏ Ｊ ． ｃａＮ ｕｏ Ｓａｄ，０ ７，１ ４ ｎ ｈｎｔ ｎ ｉ ｓｉ ｏ ｐ ｔｎ［ ］ Ａ ｔ ｅｒｌ ｅｎ ２ ０ １５（ ）：
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基金项 目： 安徽省 自然科学基金面上项 目（ ｏ０ ０ １ １３ Ｎ ９４ ３ ４ ） 作 者 简介 ： 祝 伦 ， ， 士 研 究 生 男 硕
安 徽 医 药
Ａ ｈ ｉ ｄｃｌ ｎ ｈ ｒ ａｅｔ ａ Ｊｕｎｌ ２ １ ｕ ；６ ６ ｎ ｕ ｉ ｄＰ ａｍ ｃｕｉ ｌ ｏ ｒａ ０ ２Ｊｎ １ （ ） Ｍｅ ａ ａ ｃ
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淋球菌耐药现状 及耐药机制研 究进 展
祝
（． １ 安徽 医科 大学附属省立 医院皮肤科 ， 安徽 合肥
ｄｎｃｏ ａ ｅｔ［ ］ Ｂｏ ｈｒ ｕｌ２ １ ，４ １ ：１ ． ｅｅｔ ｐｔ ｎｓ Ｊ ． ｉｌ ａｍ Ｂ ｌ ０ １３ （ ）７ —６ ｍｙ ｉ Ｐ ， ［ ］ 马晶 晶， ８ 李金恒 ， 晓梅 ， Ｃ ２ １ 曹 等． ＹＰ Ｃ ９基 因多态性对 奥美拉 唑 药动学与相对生物利用 度 的影 响 ［ ］ 中 国药理学通 报 ，００ Ｊ． ２ １，
２ （ ） ２ ８— ２ ６ ２ ：５ ６ ．
［６ １ ］李钟玉 ， 周宏灏 ． Ｙ ２２的生理功能及 其在心血管 疾病 中的作 Ｃ ＰＪ
淋球菌对喹诺酮耐药性进展论文
探讨淋球菌对喹诺酮耐药性的研究进展【摘要】目的探讨淋球菌对抗生素产生耐药性，在淋病治疗中的大难题之一是淋球菌对抗生素产生的耐药。
方法通过对近年来的相关文献的进行分析。
结论为临床应用喹诺酮治疗淋球菌感染提高临床参考。
【关键词】淋球菌喹诺酮耐药性中图分类号：r378.16 文献标识码：b 文章编号：1005-0515（2011）5-237-02近年来国内外的性传播疾病（std）发病率较高之一的是淋病，而且在国内淋病的发病率呈现明显的升高。
淋病的病原体为淋病奈瑟菌 (淋球菌 )。
随着淋病治疗的发展以及抗生素的广泛应用，尤其是对喹诺酮的耐药率达到了98.99%[1]。
1 淋球菌的耐药机制从分子生物学研究表明存在染色质的外部的双链环形dna是质粒，质粒通过形成超螺旋结构进行复制，并伴随着宿主细的进一步分裂而传给了宿主细胞的子代细胞，而这些存在于细菌细胞中的质粒与生俱来的拥有耐药性的基因，抗药性质粒通过这些耐药基因合成出具有抵抗和分解抗生素的活性酶可编码合成能分解破坏抗生素的酶。
另有质粒基因编码的蛋白质能使两个细菌间形成细管样接合,通过细管 , 在两个细菌之间使得遗传物质进行传递，而且许多的耐药细菌抗药性质粒在细菌间传播有关。
2 淋球菌喹诺酮的耐药机理喹诺酮类药物作用机理主要是作用于细菌的dna螺旋体（即拓扑异构酶 ii），通过对抗其酶活性，干扰dna的复制与转录，破坏其dna的结构，使染色体破裂而起到杀菌作用。
而对淋球菌喹诺酮类耐药机制，国内外学者多从基因水平进行研究，认为其主要耐药机制是染色体突变引起的dna旋转酶的改变，dna旋转酶是由gyra 和gyrb编码的2个a亚基和2个b亚基组成的一个四聚体，gyra 和gyrb的改变可引起parc编码的拓扑异构酶的变化，其中gyra基因和parc基因的突变与淋球菌喹诺酮类药物的耐药性密切相关。
叶萍等对78株淋球菌临床分离株环丙沙星最低抑菌浓度(mic)进行检测和gyra、parc基因进行pcr扩增后，分别对敏感菌、中介菌和耐药菌的gyra、parc基因进行dna序列测定，发现敏感菌株中未发现基因突变，而中介菌株和耐药菌株中均发现有异常基因，说明gyra、parc基因变异可能是导致淋球菌氟喹诺酮耐药的重要分子机制[2]。
淋病奈瑟菌的分子生物学检验
一、淋病奈瑟菌的基因组结构特征
淋病奈瑟菌FA1090菌株是最早被完成测序研 究的淋病奈瑟菌菌株之一，它的染色体DNA长度 为2.15Mbp，其中G+C含量为52.68%。编码区的 DNA长度占总长度的78%。共含有2069个基因，包 括2002个具有编码功能的基因和67个编码结构性 RNAs基。Chung GT等人在2008年报道了淋病奈瑟 菌新菌株NCCP11945的基因组结构。他们发现 NCCP11945染色体的DNA长度为2.23Mbp，据估计 可以编码2622个开放性阅读框。同时，NCP11945 含有一个能编码12个ORFs的质粒，其DNA长度为 4153bp。据他们估计，整个基因组的编码基因的 密度约为87%。全基因组平均G+C含量为52.4%。 这与FA1090菌株相类似。
4．链替代扩增技术
SDA是一种基于酶促反应的新的DNA体外等 温扩增技术。目前使用较多的是Becton Dikinson公司生产的Probe Tec ET，可以同时 对CT和NG进行检测，Probe Tec ET特异性扩增 NG染色体PivNg基因，然后用荧光标记的探针 检测其相应的DNA靶序列，2小时可以完成96份 标本检测。与培养法相比具有很高的敏感性和 特异性。
1．克服了淋球菌培养时间长等缺点，提高 了临床样本检测的阳性率和准确性。
2．通过分子生物学技术可以进行淋球菌感 染的分子流行病学调查。
3．可以准确、快速评价药物治疗的效果。 4．有利于淋病的鉴别诊断。
谢谢！
二、淋病奈瑟菌的分子生物学检验内容
（一）淋病奈瑟菌核酸的检测
1．聚合酶链反应
PCR是分子生物学中最常用检测基因的技术 手段，也是淋病奈瑟菌基因诊断中最基本的方法。 PCR引物的设计应选择与其相应的靶基因，多采 用：①隐蔽质粒cppB基因(cppBH01/3、1/2及 cppBN3/4)；②16s rRNA基因(SL67/59、NGPl/2)； ③porA假基因；④编码外膜蛋白基因（omp基 因）；⑤opa基因等；⑥胞嘧啶DNA甲基转移酶基 因(Roche Cobas Amplicor)。不同靶基因设计引 物对PCR的敏感性和特异性有一定的影响。
抗菌药物耐药性的研究进展及应对策略
抗菌药物耐药性的研究进展及应对策略研究方案：抗菌药物耐药性的研究进展及应对策略1. 研究背景与目的抗菌药物耐药性是当前全球面临的重大公共卫生问题，对于抗菌药物的有效应用和临床治疗产生了巨大挑战。
本研究旨在系统梳理抗菌药物耐药性的研究进展，探讨应对策略，并在已有研究成果的基础上提出新的观点和方法，为解决实际问题提供有价值的参考。
2. 研究方法2.1 文献综述：通过查阅相关的学术期刊、专业数据库和相关机构发布的报告，全面收集与抗菌药物耐药性相关的研究成果和文献，梳理目前的研究进展和热点问题。
2.2 数据采集：针对其定量研究（如耐药基因变异等），设计合理的数据采集方案，收集抗菌药物耐药性相关数据，包括临床患者的样本数据、细菌的菌株数据和药物敏感性数据等。
2.3 数据整理与分析：a) 对文献综述中收集的研究成果进行整理和分类，对存在的研究缺口和不足进行分析，并总结归纳现阶段的研究进展和结果。
b) 对采集到的数据进行统计分析，包括描述性统计和推断性统计等，探究抗菌药物耐药性的流行特征、变异规律以及相关影响因素等。
c) 运用相关模型和算法（如机器学习算法），进行预测和建模，提高对抗菌药物耐药性的理解和预测能力。
3. 实验设计3.1 耐药性机制研究：针对常见临床细菌，设计和实施耐药基因变异的实验，通过基因测序和分析，探究耐药性的形成机制和变异规律。
3.2 药物敏感性检测：收集一定数量的临床患者标本，对常见细菌进行药物敏感性检测，探究耐药性的流行特征和变异情况，为抗菌药物的合理应用提供依据。
3.3 医院感染控制策略研究：选取多个医院，对不同感染控制策略的实施效果进行评价和比较分析，探究对抗菌药物耐药性的干预策略。
4. 数据采集与分析4.1 文献综述的数据采集：通过建立数据库，整理和存储文献综述收集到的研究成果，建立若干维度的数据表格，方便后续分析和总结。
4.2 实验数据采集：建立合理的数据采集流程，确保数据的完整性和准确性。
gyrA和parC介导的淋病奈瑟菌对环丙沙星耐药机制研究
万方数据为淋球菌Ａ爪Ⅺ４９２２６。
１．２．４模板制备采用煮沸法提取细菌ＤＮｋ取经４８ｈ生长的单个菌落，加入１００皿双蒸水，煮沸１５“ｎ，快速冷却，１５０００ｒ／商ｎ离心１０ｒｎｉｎ，上清液即可作为聊蚺模板进行Ｐ《’Ｒ扩增。
１．２．５ｇ卅和ｐａ￡基因的Ｐ（、Ｒ检测Ｐ（Ｒ反应体系为：１０×Ｂｕｆｆ盯（Ｍ９２＋）２．５皿，ｄＮＴＰＳ２一，ｒＴａｑ酶０．２５皿，上、下游引物各０．５皿，模板ＤＮＡ１皿，加灭菌双蒸水至２５一。
ＰＣＲ反应条件为：９４℃预变性５ｒｎｊｎ，９４℃３０ｓ．５５℃３０ｓ，７２℃１ｍｉＩｌ，３０个循环，最后７２℃延伸１０ｎｌｉｎ。
所得Ｐ（Ｒ产物行１％琼脂糖电泳分析。
１．２．６Ｐ《球产物测序分析随机选取１５株淋病奈瑟菌的ｇｙ．ｒＡ和ｐａ吒基因Ｐ（’Ｒ扩增产物测序。
测序结果直接在Ｇ朗Ｂａｎｋ中分别进行序列比对分析。
参考菌株为环丙沙星敏感的野生型淋病奈瑟菌标准株（Ａ爪Ｘ１９４２４）序列。
２结果２．１２７株淋病奈瑟菌对５种常用抗菌药物的耐药率见表２。
表２２７株淋病奈瑟菌对５种抗菌药物的耐药率（％）２．２ｇ舭和ｐａ￡基因检测结果２７株淋病奈瑟菌标本经ＰＣＲ扩增后，１％琼脂糖凝胶电泳、ＥＢ染色、凝胶成像系统观测。
均出现阳性条带．扩增产物大小与预测结果一致，见图１。
图１部分淋病奈瑟菌ｇ卅和ｐ甙基因的Ｐ（、Ｒ扩增图谱注：从左向右依次为１．Ｍ矶ｅｒ，２～３．刁Ｏｌ、刁０２菌株ｇ卅基因扩增图谱，４～５．ｚ１０１、ｚ１０２菌株ｐａｔｃ基因扩增图谱，６．阴性对照２．３ｇ蚋和ｐ们基因Ｐ隙产物测序分析随机选取１５株淋病奈瑟菌ｇｙｒＡ和ｐ越基因的Ｐ（浆产物测序。
序列分析表明：１５株淋病奈瑟菌共检测到８种类型的突变，其中ｇ），ｒＡ基因存在３种突变．Ｄ犯基因存在５种突变。
所有菌株均存在ｇ舭基因双位点突变合并ｐ酊基因单或双位点突变，其中ｐａ￡基因以单位点突变为主。
ｇｙｒＡ基因的突变位点发生在第９１位、９５位氮基酸。
替加环素临床有效性及耐药机制研究进展
替加环素临床有效性及耐药机制研究进展摘要替加环素是一种独特的甘氨酰环素类半合成抗菌剂，用于治疗由多重耐药革兰氏阳性和革兰氏阴性病原体引起的多种微生物感染。
通过在米诺环素的9 位添加甘环酰胺部分，替加环素避开了主要的四环素抗性遗传机制，例如四环素特异性外排泵获取和核糖体保护。
胃肠外形式的替加环素被批准用于成人复杂的皮肤和皮肤结构感染（不包括糖尿病足感染）、复杂的腹内感染和社区获得性细菌性肺炎。
新证据还表明替加环素治疗严重艰难梭菌的有效性感染。
替加环素在体外对Coxiella sPP.、立克次体sPP.和多药耐药淋病奈瑟菌菌株表现出易感性，这表明替加环素可能用于治疗由这些病原体引起的感染。
除了某些革兰氏阴性菌固有的或经常报告的耐药性外，替加环素对多种多重耐药的医院内病原体有效。
在此，我们总结了目前关于替加环素药代动力学和药效学、其作用机制、替加环素耐药流行病学及其临床有效性的可用数据。
介绍耐多药 (MDR) 或广泛耐药 (XDR) 细菌病原体的发病率不断增加，这是一个主要的公共卫生问题，由于住院时间延长、发病率和死亡率升高，给医疗保健系统带来了经济负担。
替加环素是一种四环素类抗菌剂，用于治疗多种微生物 MDR 感染，包括革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。
替加环素，称为 GAR-936 或 Tygacil，是第一个独特的甘氨酰环素类半合成药物，以肠胃外形式给药，并于 2005 年获得美国食品和药物管理局 (FDA) 的批准。
后来，在 2010 年，FDA 发布了一项警告，称使用替加环素治疗严重感染和败血症与全因死亡风险增加显着相关。
目前，替加环素已被批准作为成人单药治疗三种适应症，包括复杂性皮肤和皮肤结构感染 (cSSTI)，不包括糖尿病足感染、复杂性腹腔内感染 (cIAI) 和社区获得性细菌性肺炎 (CAP) ，最近的证据表明替加环素可能有效治疗严重的艰难梭菌感染。
对替加环素的耐药性包括染色体或辅助基因编码机制。
广州地区淋病奈瑟菌耐药性分析
菌科细菌产生，由质粒介导，从ＴＥＭ一１，ＴＥＭ一２和ＳＨＶ一１突变而来。
临床对Ｇ内酰胺类药物耐药（包括青霉素类、头孢菌素类和氨曲南），对碳青霉烯类和头霉烯类药物敏感，体外对酶抑制剂敏感。
在国内由于大量应用头孢噻肟，极易选筛出ＣＴＸ—Ｍ型的ＥＳＢＬｓ。
ＣＴＸ—Ｍ型ＥＳＢＬｓ属于ＡｍｂｌｅｒＡ类酶中Ｋ１一ｌｉｋｅ酶，其特点是对头孢噻肟耐药，对头孢他啶敏感［４］。
由于ＥＳＢＬｓ由质粒介导，可在菌株中传播，极易在病房内爆发流行，给临床抗菌治疗带来极大的困难。
在分离的革兰阳性球菌中，对万古霉素耐药率最低，其次为利福平，而对青霉素、红霉素、克林霉素和复方磺胺甲嗯唑的耐药率比较高。
链球菌属对青霉素的耐药率低于葡萄球菌。
２５株凝固酶阴性葡萄球菌和金葡菌中，检出耐苯唑西林的葡萄球菌（ＭＲＳ）分别为５６．２％和２２．２％。
ＭＲＳ对苯唑西林的耐药机制是由于染色体介导的青霉素结合蛋白（ＰＢＰ）２ａ所致，导致对所有Ｊ３内酰胺类抗生素的亲和力下降。
总之，为了延缓细菌耐药性的产生，控制耐药菌株的播散和流行，医院应加强综合管理，定期监测细菌的耐药趋势，合理使用抗菌药物。
参考文献［２］［３］［４］张卓然，倪语星，洪秀华，等．临床微生物学和微生物检验［Ｍ］．第３版．北京：人民卫生出版社，２００３．李景云，马越，张力，等．临床５２家医院常见分离菌株的药物敏感性监测［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００６，２９（５）；４５２—４５３．褚海青，李惠萍，何国钧．铜绿假单胞菌的耐药机制［Ｊ］．中国抗感染化疗杂志，２０（）３，３（１）：５４—５７．倪语星，王金良，徐英春，等．抗微生物药物敏感性试验规范［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，２００２．收稿日期：２（）０６—１１—１４广州地区淋病奈瑟菌耐药性分析吴兴中，郑和平，黄进梅，曾维英，潘慧清，李美玲，薛耀华・实验研究・摘要：目的监测广州地区２００５年分离的淋病奈瑟菌对青霉素、四环素、大观霉素、头孢曲松和环丙沙星的耐药性，分析耐药菌株的流行特点。
淋病奈瑟菌的耐药性及分子流行病学观察
淋病奈瑟菌的耐药性及分子流行病学观察淋病是由淋病奈瑟菌( 淋球菌) 引起的性传播疾病，在世界范围内广泛流行，每年新发感染患者达到1. 06 亿，已严重影响人类的公共卫生安全。
在我国，淋球菌的治疗主要以广谱头孢菌素为主，如头孢曲松、头孢克肟［1］。
近年来，随着抗菌药物的广泛使用，已经出现了对头孢菌素敏感性下降的淋球菌，甚至出现了头孢菌素治疗失败的临床病例报道［2-3］。
各国研究人员均在寻找有效的抗菌疗法，如联合疗法、替代药物、新药研发等。
然而控制感染的蔓延更是重中之重，不同地区感染淋球菌的型别有所差异，NG-MAST 分型是基于测序技术的淋球菌基因分型方法，通过具有高度变异性的porB 基因( 编码孔蛋白) 和tbpB 基因( 编码转铁结合蛋白) 测序分析并与数据库比对后得到基因型，对于了解区域感染淋球菌的分子流行特征及预防控制有一定的意义。
因此，本研究对本区域分离的淋球菌进行耐药性分析及分子分型，报告如下。
1 材料与方法1. 1 菌株收集126 株淋球菌分离自2015 －2016 年浙江萧山医院就诊的泌尿生殖道感染患者，男性标本采自尿道分泌物，女性标本采自宫颈分泌物，剔除同一患者中分离的重复菌株。
所有菌株经过革兰染色镜检、氧化酶试验以及API NH 鉴定试剂条( 法国Bio-Merieux 公司) 鉴定为淋球菌，菌株保存于20%甘油肉汤，置－80℃冰箱备用; 质控菌株ATCC49226 由浙江大学医学院Stijn 教授惠赠。
1. 2 仪器和试剂GeneAmp PCＲSystem 9600 为美国ABI 公司产品( Applied Biosystems) ，EPS-100 电泳仪为上海天能科技有限公司产品，UV-3B 紫外成像仪为珠海黑马医学仪器有限公司产品; Premix Taq Version2. 0 及DNA Marker 购自宝生物工程( 大连) 有限公司。
引物合成及PCＲ扩增产物测序均由上海生物工程有限公司完成。
淋病奈瑟菌mtrR基因启动子区的IR区碱基缺失与其耐药性关系的研究
巾国皮肤性病学杂志２００６年１月第２０卷第１期ＣｈｉｎＪＤｅｒｍＶｅｎｅｒｅｏｌ，Ｊａｎ．２００６，Ｖ０１．２０，Ｎｏ．１・论著・＜基础研究＞淋病奈瑟菌ｍｔｒＲ基因启动子区的ＩＲ区碱基缺失与其耐药性关系的研究张丽霞，涂亚庭，林能兴，黄长征，陈宏翔，陶娟，林云［摘要］目的探索淋病奈瑟菌（ＮＧ，简称淋球菌）多传递耐药系统Ｒ基因（ｍｔｒＲ）启动子区反向重复序列（ＩＲ）区基因缺失与淋病奈瑟茵染色体所介导的耐药性的关系。
方法以琼脂稀释法做药物敏感试验，选择一临床敏感株采用自身配对法以次抑菌浓度法诱导筛选出对不同抗生素耐药的淋球菌株，以聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增包含ＩＲ区在内的目的基因后，对扩增产物测序，并将其ＩＲ区基因突变与临床分离自然耐药株比较。
结果８株敏感株及２４株单独耐１种药物菌株及１株诱导的多重耐药株无ＩＲ区基因突变，７株诱导多重耐药菌株ＩＲ区有碱基Ａ／Ｔ缺失，与自然多重耐药株两者相比较碱基缺失无差异。
结论淋球菌染色体ＩＲ区基因缺失与单独耐一种药物菌株产生无关，ＩＲ区基因缺失参与了淋球菌多重耐药株的产生，人工诱导的多重耐药株与自然多重耐药株ＩＲ区碱基突变无差异。
［关键词］淋病奈瑟茵；基因突变；反向重复序列；微生物敏感性试验［中图分类号］Ｒ３７８．１［文献标识码］Ａ［文章编号］１００１—７０８９（２００６）０１—０００１—０３ＳｔｕｄｙｏｆＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐＢｅｔｗｅｅｎＩＲＧｅｎｅＤｅｌｅｔｉｏｎｉｎＴｈｅｍｔｒＲＧｅｎｅＰｒｏｍｏｔｅｒａｎｄＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃＲｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＮｅｉｓｓｅｒｉａＧｏｎ－ｏｒｒｈｏｅａｅＺＨＡＮＧＬｉ—ｘｉａ，ＴＵＹａ—ｔｉｎｇ，ＬＩＮＮｅｎｇ—ｘｉｎｇ，ｅｔａｌ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，ＸｉｅｈｅＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｏｎｔ才ｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｗｕｈａｎ４３００２２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＩＲ’ＳｇｅｎｅｄｅｌｅｔｉｏｎｉｎｔｈｅｐｒｏｍｏｔｅｒｏｆｍｔｒＲｇｅｎｅａｎｄａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔ—ａｎｃｅｏｆＮｅｉｓｓｅｒｉａＧｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ（ＮＧ）．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｄｒｕｇｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄｂｙａｇａｒｏｓｅ—ｄｉｌｕｔｉｏｎ—ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｄｉｆｆｅｒ－ｅｎｔａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｎｄｕｃｅｄｗｉｔｈｓｕｂｏｒｄｉｎａｔｅｍｉｎｉｍａｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｓＭＩＣ）ｆｒｏｍｃｌｉｎｉｃｉｓｏｌａｔｅｄｓｅｎｓｉｔｉｖｅｓｔｒａｉｎｓ．Ｔｈｅｍｕｌｔｉｐｌｅｔｒａｎｓｆｅｒａｂｌｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｙｓｔｅｍ’Ｓ（ｍｔｒ）ｉｎｖｅｒｔｅｄｒｅｐｅａｔｓｅｑｕｅｎｃｅ（ＩＲ）ｏｆＮｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅｗａｓｓｅｑｕｅｎｃｅｄａｆｔｅｒａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｂｙｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）．ＲｅｓｕｌｔｓＥｉｇｈｔｓｅｎｓｉｔｉｖｅｏｒｔｗｅｎｔｙ—ｆｏｕｒｓｉｎｇｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｏｒｏｎｅｍｕｈｉｐｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓｈａｄｎｏｂａｓｅｄｅｌｅｔｉｏｎｉｎＩＲｇｅｎｅｂｕｔｓｅｖｅｎｉｎｄｕｃｅｄｍｕｌｔｉｐｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓｈａｄａｓｉｎ—ｇｌｅｂａｓｅｄｅｌｅｔｉｏｎ（Ｔ／Ａ），ａｎｄｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎＩＲｇｅｎｅｍｕｔａｔｉｏｎｏｆｉｎｄｕｃｅｄｍｕｌｔｉｐｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓａｎｄｔｈｏｓｅｏｆｃｌｉｎｉｃｏｎｅｓ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｒｅｉｓｎｏｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｍｕｔａｔｉｏｎｏｆＩＲｇｅｎｅａｎｄｓｉｎｇｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＮＧ，ａｎｄｔｈｅｒｅｉｓｎｏｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｍｕｔａｔｉｏｎｏｆＩＲｇｅｎｅｏｆｃｌｉｎｉｃｓｔｒａｉｎｓａｎｄｔｈａｔｏｆｉｎｄｕｃｅｄｏｎｅ，ｂｕｔｓｉｎｇｌｅ—ｂａｓｅｄｅｌｅｔｉｏｎｏｆＩＲｇｅｎｅｍｉｇｈｔｒｅｓｕｌｔｉｎｍｕｌｔｉｐｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ；Ｇｅｎｅｍｕｔａｔｉｏｎ；Ｉｎｖｅｒｔｅｄｒｅｐｅａｔｓｅｑｕｅｎｃｅ；Ｍｉｃｒｏｂｉａｌｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔｅｓｔｓ目前的研究认为淋病奈瑟菌（ＮＧ，简称淋球菌）多重耐药性的产生主要与其染色体基因的多传递耐药系统（ｍｕｌｔｉｐｌｅｔｒａｎｓｆｅｒａｂｌｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｙｓｔｅｍ，ｍｔｒ）有关，其主要机制有两个，一是ｍｔｒ系统的ｍｔｒＲ基因发生突变导致细胞外膜蛋白ｍｔｒＣＤＥ表达增多，细胞外排能力增加；二是ｍｔｒＲ基因启动子区域反向重复序列（ｉｎ－ｖｅｒｔｅｄｒｅｐｅａｔｓｅｑｕｅｎｃｅ，ＩＲ）调控ｍｔｒＲ基因的转录和表达，进而引起淋球菌耐药性的变化…。
细菌耐药性临床研究
细菌耐药性临床研究
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七、控制细菌耐药性策略 1、合理用药，预防耐药菌株产生
细菌耐药性临床研究
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七、控制细菌耐药性策略
● 严格掌握抗菌药品应用适应症 病毒性感染和发烧原因不明者，除并
发细菌感染外，不宜轻易采取抗菌药品。
细菌耐药性临床研究
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七、控制细菌耐药性策略
● 正确选择抗菌药品和配伍 在使用抗生素前，标准上除危重患 者外，应先从患者体内分离出致病菌， 并做细菌药敏试验，方便选择敏感抗生 素治疗。 尽可能使用窄谱、价廉抗生素，保留 广谱、新型和价昂抗生素作备用。
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五、耐药性产生分子机制
（1）耐药性质粒接合转移
R质粒主要以接合方式从耐药菌传递 给敏感菌，使后者变为耐药菌，甚至多重 耐药性。
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五、耐药性产生分子机制
R质粒不但在同一个、属细菌之间转 移，而且可在不一样种、属细菌之间传递， 造成耐药性广泛传输，尤其在肠杆菌科和 假单胞菌属中比较普遍，给临床治疗带来 很大困难 。
mecA大小为30～50kb，是一段非金黄 色葡萄球DNA，可能是经过转导或转座方 式整合到金黄色葡萄球菌染色体上。
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五、耐药性产生分子机制
（4）转座
当转座子发生转座，在插入部位引入 一个或多个耐药基因。
经过转座方式，转座子可造成在单个 质粒中多个耐药基因聚集成簇，这是多重 耐药菌株产生主要原因。
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干扰核糖体50S亚基
（3）大环内酯类抗生素：红霉素、克 拉霉素、螺旋霉素、酮内脂（泰利霉素、 Cethromycin）等
淋病奈瑟菌耐药流行病学及机制研究进展
（硎Ｇ）和高水平耐四环索的淋病奈瑟菌（骶矾Ｇ）分别
占钙％和１８。８％；对阿谢霉褰的耐药率为９４。７％；对 氧氟沙星、洛美沙星和环丙沙墅的耐药率分别为 ９７。５％、９５。０％程９５。０％［６１。 ２耐药机制
ｐｒｏｊｅｃｔ，ＧＩＳＰ）２００５年共收集了６１９９
２。ｌ染色体介导淋病奈瑟菌耐药：染色体上的基因位 熹的突变孳ｌ起戆游病奈瑟蕊在一定水平上对抗生索的 耐受理象被髂为染色嚣分导的耐蕊，一般必低拳乎耐 药，丽多位点突变可导致多重耐药。染色体介导的与 青霉素及岛四环素耐药相关的主要位点包括ｐｅｎＡ、 ｐｏｎＡ、ｐｅｎＢ、ｐｅｎＣ、ｍｔｒ及ｔｅｔ［引。研究发现，编码ＰＢＰ２的
２．３．２
粒按其分子太小分海３释：◇３９。５ｋｂ结会覆粒或传递
质粒，又称“亚洲糍”Ｒ质粒，它与耐药质粒在菌株间传
播有关；②７—７。４ｋｂ和５，５．３ｋｂ的耐药性质粒，具有 编码争痰酰胺酶纂透穗关鹃嚣霞子，叉稼“非溯鎏”嚣
质粒；③４．２ｋｂ的隐蔽质粒，几乎存在予所有淋瘸奈瑟 菌。耐隐蔽性质粒能整合予细菌染色体上（包括无质
疆ｊ｜｜羧学２００９冬５月繁３０卷（第５期）Ｓｉｄ，ｕｕｍｌｔｅｎｄｒｉｌＪⅫ＇ｎｄ，２００９，Ｖｏｌ。３０。觞。５
・７５３・
淋病奈瑟菌耐药流行病学及机制研究进展
雒玉辉。综述；林昭春审校
（蹬ｊｌｌ翁人民医院疫默性病辨变麟，ｌ莲ｔＪｌｌ成都６１（Ｘ）３１＞
ｉ关键谲】辩痛；琳病奈瑟菌；流静病学；耐筠机制 【巾图分类号】Ｒ ７５９。２ 【文献标识码】Ｂ
＊
膏霉素结合蛋自２基因（ｐｅ畦）出现点突变，在对毒霉
素敏感的淋病奈瑟菌株的ｐｅｎＡ插入一个精氨酸序列
《泓），就会导致其编磁的青霉素结合凝自２（弼砣）
结构的改变，使ＰＢｐ２与霄霉素的亲和力下降，细胞膜 对青霉素的渗透性降低，缨菌耐药承警升赢ｌ豁。ｐｅｎＣ
淋病的最新研究进展有哪些
淋病的最新研究进展有哪些淋病是一种由淋病奈瑟菌引起的性传播疾病，其发病率在全球范围内一直居高不下，给患者的身心健康带来了严重影响。
近年来，随着医学研究的不断深入，淋病的诊断、治疗和预防等方面都取得了一些新的进展。
一、诊断技术的改进传统的淋病诊断方法主要依赖于细菌培养和涂片检查，但这些方法存在一定的局限性，如培养时间长、敏感性不高等。
近年来，分子生物学技术在淋病诊断中的应用越来越广泛。
核酸扩增技术（NAATs）是目前常用的分子诊断方法之一，如聚合酶链反应（PCR）和连接酶链反应（LCR）。
这些技术能够快速、准确地检测淋病奈瑟菌的核酸，大大提高了诊断的敏感性和特异性。
此外，NAATs 还可以同时检测多种病原体，有助于发现混合感染的情况。
血清学诊断方法也在不断发展。
通过检测患者血清中的特异性抗体，可以辅助诊断淋病。
但需要注意的是，血清学诊断在急性感染期的价值相对较低，主要用于慢性感染或回顾性诊断。
二、治疗药物的研究淋病的治疗主要依赖抗生素，但由于淋病奈瑟菌对抗生素的耐药性不断增加，治疗变得越来越困难。
头孢菌素类药物曾经是治疗淋病的首选药物，但目前淋病奈瑟菌对头孢曲松的敏感性有所下降。
因此，一些新型抗生素正在研究和开发中。
大观霉素是一种传统的治疗淋病的药物，其疗效相对稳定，但由于注射给药的方式不太方便，限制了其广泛应用。
此外，研究人员还在探索联合用药的方案，以提高治疗效果和减少耐药的发生。
例如，头孢曲松联合阿奇霉素的治疗方案在一些研究中显示出较好的疗效。
三、耐药机制的研究了解淋病奈瑟菌的耐药机制对于制定有效的治疗策略至关重要。
目前认为，淋病奈瑟菌的耐药机制主要包括以下几个方面：1、抗生素靶点的改变：例如，某些菌株的青霉素结合蛋白发生变异，导致青霉素类药物失效。
2、外排泵的作用：淋病奈瑟菌可以通过外排泵将进入细胞内的抗生素排出，从而降低药物浓度。
3、生物膜的形成：生物膜可以保护细菌免受抗生素的作用，增加耐药性。
临床淋病奈瑟氏菌为何会对内胺类药物耐药论文
临床研究淋病奈瑟氏菌为何会对内胺类药物耐药摘要：淋病奈瑟菌是淋病的病原体。
淋病是常见的性传播疾病之一，也是我国目前监测的8种主要性传播疾病中发病人数最多的一种。
通过对淋病奈瑟菌体外药物敏感性的监测，掌握其药物敏感谱变迁和发现其新的耐药菌株，对淋病的防治工作是十分重要的。
结论：說明在我國青霉素已不能作為治療淋病奈瑟氏菌的藥物。
说明在我国青霉素已不能作为治疗淋病奈瑟氏菌的药物。
关键词：淋病奈瑟氏菌；内胺类药物耐药；临床研究【中图分类号】r969【文献标识码】b【文章编号】1672-3783（2012）10-0056-01我们收集了158例淋病奈瑟菌，并对其耐药性进行分析如下。
1材料和方法1.1菌株来源：158株淋病奈瑟菌来源于本院妇产科与石河子二附院性病门诊送检的女性宫颈分泌物。
1.2细菌培养与菌种鉴定：淋病奈瑟菌选用生物-梅里埃生产的淋病奈瑟菌选择性培养基，烛缸35℃，孵育24～48小时。
菌种鉴定采用杭州天和微生物试剂有限公司生产的奈瑟菌属细菌生化微量鉴定管。
1.3药物敏感性：抗菌素纸片选用生物-梅里埃生产的青霉素、壮观霉素、头孢曲松、头孢噻肟、四环素、环丙沙星、氧氟沙星等7种。
药敏采用纸片扩散法，按美国nccls药敏纸片法规定的标准判定结果。
2结果淋病奈瑟菌对7种抗菌素药物敏感性监测显示，对壮观霉素敏感率最高达100%。
3讨论（1）β-内胺类药物治疗淋病奈瑟氏菌感染的传统药物是青霉素，其是通过与细菌内膜靶蛋白青霉素结合蛋白（penicillin bindi 淋病奈瑟氏菌proteins，pbps）结合，使转失活，破坏细菌细胞膜的完整性，使细菌死亡。
細菌對β-內胺類藥物的耐藥機制是：一是產生β-內胺：1975年首次報道產β-內胺淋球菌（pp淋病奈瑟氏菌），pp淋病奈瑟氏菌為淋病奈瑟氏菌獲得tem-1基因質粒所致，因其產生的β-內胺可以特異性的打開青霉素等藥物分子結構中的β-內胺環，使藥物完全失去抗菌活性，tem-1基因檢測陽性即可確定為pp淋病奈瑟氏菌菌。
淋病奈瑟菌多重传递耐药主动外排系统的研究进展
控子相似 ， 尤其与 四环素抑制子家族、ｕ Ｒ转录活 工ｘ 化子具 有 同源 性【。Ｌ 【 等 用凝 胶 漂 移 法 和 “ ｍ∞ ０ Ｊ Ｄ Ａ酶 Ｉ Ｎ 足纹分析证明 Ｍ ｒ ｔ Ｒ能特异地结合在 Ｔ Ｒ ｄ 口 — ｔ ｍｒ Ｃ之间的一段 Ｄ Ａ序列上， Ｎ 这段序列正好包括 ｍ． Ｅ ｔＤ 的转录启动子和 眦 启动子的． ， Ｃ ３ ５区。 （ ＇Ｍ Ｃ的编码基因及其结构和功能 －） Ｕ
ｍｒ（３ ｐ 编 码 ， 录 的方 向与 ｍ Ｃ Ｅ相 反。 ｔ ６３ｂ ） Ｒ 转 ｕＤ Ｍ Ｒ含有 ２０ ａ １ 个氨基 酸残基， 结构与大多数转录调
量增加 ， 或者引起膜化学上的某些变化 ， 从而降低了 细胞对染料等疏水性物质的吸附能力以及阻止该类 物质的进入 ， 因而表现 出多重耐药（ 性。但是 ， Ｍ ）
维普资讯
淋 病 奈瑟 菌 多重传递 耐 药主 动 外排 系统的研 究 进 展
重庆医科大学微生物学及免疫学教研室 江 山 综述 朱道报 审棱
摘要 淋病奈瑟茼 多重传递耐药 系 统属 于细茵的主动外排 系 ， 统 与淋球 茼多重耐药的发生有密切关系。 本文就谊象统的组成、 功能、 因 基 调控度与淋球茼多重耐药问关 系等方面的研究现状作一概速 ， 并讨论 对谊
药株 ） 更易在男性同性恋直脑感染者中分离到 ， 同时 实验证明 Ｍｒ ｔ株对粪便中的胆盐 、 脂肪酸的抗性较 Ｍｒ 株强。圆此推潮淋球菌对疏水性抗生素、 、 ｔ 一 染料 清洁剂、 脂肪酸、 盐 （ Ａ ） 胆 Ｈ ｓ的抗 性可能与 ｍ 口系统 有关 ， 但具体 的机制并不清楚。
Ｌｗ ｎｅ ａｔ ｒ 发现 Ｍｒ 中相 对分 子质 量 ５ ×ｌ ￣， ｔ株 ２ 的外 膜脂蛋 白古量较 Ｍｒ 株增加 ７ ， 之为 Ｍｒ ｔ 倍 称 ｔ 相关置白。当时认为： 口 ｍ 位点突变引起外膜置白数
淋病奈瑟菌综述
淋病奈瑟菌的研究现状淋病(gonorrhea)是由淋病奈瑟菌，简称淋病奈瑟菌引起的经典性病之一。
人类是淋病奈瑟菌唯一的自然宿主，主要通过性接触而传播。
感染淋病奈瑟菌之后，患者发生泌尿生殖系统的损害，表现为尿道炎和宫颈炎，以及附睾炎、盆腔炎等并发症，女性患者还可由于并发症造成不育、富外孕等严重后果。
淋病常见，在世界范围内广为流行；据近年来世界卫生组织估计，全世界每年约有6200万新病例发生，其中以欧美和非洲一些国家尤甚。
发病与病人因素，诸如年龄、性别、种族、受教育程度、性行为方式及免疫力有关，并随地区和季节的不同会有所变化。
关键词：淋病奈瑟菌、耐药、淋病奈瑟菌PI蛋白、检测方法1.淋病奈瑟菌的感染淋病奈瑟菌主要侵犯粘膜，尤其对单层柱状上皮和移行上皮细胞有很强的亲和力，淋病奈瑟菌侵入前尿道或子宫颈后，借助菌毛、外膜蛋白粘附到柱状上皮细胞表面进行繁殖，之后被柱状上皮细胞吞饮，进入细胞内大量繁殖，导致细胞损伤裂解。
淋病奈瑟菌在逸入粘膜下层，通过内毒素与补体、IgM等协同作用，诱导中性粒细胞聚集吞噬，引起局部急性炎症，出现充血、水肿、粘膜糜烂和尿痛，形成典型尿道脓性分泌物。
当细菌进入尿道腺体和隐窝后，腺管开口及隐窝被阻塞，潜藏的细菌可引起慢性淋病。
2.淋病奈瑟菌PI蛋白目前已知的淋球菌表面抗原有PI(Porin，Por，主要外膜蛋白)，PII(0pa，热修饰蛋白)，PIII(还原反应可修饰蛋白、或浓度相关蛋白)等外膜蛋白，及菌毛蛋白和LPS(脂多糖)、LOS(脂寡糖)，均能诱导相关的特异性体液免疫和细胞免疫。
在这几种抗原中，PI是外膜蛋白中含量最高的蛋白成分，约占60％，且仅有中等程度的抗原变异。
抗PI抗体具有杀菌作用，故而PI抗原最有可能用于制备成功的淋病疫苗，这使其成为目前这一领域的研究热点。
PI 蛋白是淋球菌主要外膜蛋白，它是液态的跨膜蛋白通道，以利于某些离子和大分子通过外膜屏障。
PI蛋白在淋球菌感染致病过程中也起重要作用，因为体外试验显示它能从淋球菌外膜贯穿入中性粒细胞膜，该过程在体内淋球菌粘附至上皮细胞表面中可能起了关键性的作用。
2003-2008年335株淋病奈瑟菌的临床分布及耐药性分析
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ｏｆ ｔｈｅ ｏｍｅｎｔｕｍ－ｍｅｄｉａｔｅｄ １４７—１５４．
・２２３・
体瘤中有表达。ＣＡ是一种良性乳头瘤样增生性疾病，其临床 上部分疣体富含新生血管，增生快，治疗后常易复发。本研究 结果显示。正常组织中ＶＥＧＦ仅有少量表达，但ＣＡ组织中的 阳性表达率为８３．３％．明显高于正常对照组。表达强度也明 显高于正常对照组。提示ＶＥＧＦ的高表达与ＣＡ发病有关。 ＶＥＧＦ可引起血管内皮细胞的增殖．又能促进血管渗漏。在 ＣＡ的生长中起着较为重要的作用。 由于ＨＰＶ感染免疫功能正常和免疫功能抑制病人的黏 膜和皮肤．产生黏膜和皮肤的疣状增生．其增生和复发的机 制除与ＨＰＶ分型、免疫等有关外．可能还与ＶＥＧＦ有一定的 密切相关性。研究ＶＥＧＦ在ＣＡ中的表达及所起作用，不仅 有助于阐明ＣＡ复杂的发病机制．而且可能为探讨其治疗措 施及预防复发提供新的思路。
２．２
４０岁一３４ ５０岁一 ６０岁以上 合计
１８ ３ ３３５
合计
３３５
３３５株淋病奈瑟菌对１２种抗生素的耐药率见表２。
表２
３３５株淋病奈瑟菌对１２种抗生素的耐药率
３讨论 本研究表明。３３５株淋病奈瑟菌在年龄分布上以２０岁组 和３０岁组为主，分别为３４．９％和３０．１％。提示与该年龄组的 性生活频繁和紊乱相关，再次是０～１月组占１１％．为新生儿 经产道感染引起的淋菌性眼结膜炎…。 淋病奈瑟菌青霉素耐药机制包括获得含ＴＥＭ一１基因质 粒和染色体上ｐｅｎＡ基因突变，前者产青霉素酶水解青霉 素形成耐药，后者导致其青霉素结合蛋白２（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ—
新型抗菌药物治疗淋病奈瑟球菌感染的研究进展
综述新型抗菌药物治疗淋病奈瑟球菌感染的研究进展钟娇娇 苏晓红【摘要】 淋病奈瑟球菌（淋球菌）是引起淋病的病原菌。
随着抗菌药物的广泛使用，淋球菌的耐药性问题日益严重，近年来国内外出现对一线治疗药物（如头孢曲松钠）耐药的菌株。
WHO 已将淋球菌列入急需新型抗菌药物的重点病原体清单。
近年来，已有多项研究探讨新型抗菌药物治疗淋球菌的疗效，包括拓扑异构酶抑制剂、新型大环内酯类、胸膜多肽类、小分子抗菌药物等。
该文主要介绍上述药物的结构、体外药敏试验、耐药突变、临床试验和不良反应等研究进展，为淋球菌治疗药物的进一步研究以及临床应用提供参考。
【关键词】 新型抗菌药物；淋病奈瑟球菌；淋病；细菌耐药Research progress on new antibiotics in the treatment of Neisseria gonorrhoeae infection Zhong Jiaojiao， Su Xiaohong. Institute of Dermatology， Peking Union Medical College， Chinese Academy of Medical Sciences， Nanjing 210042， China Corresponding author， Su Xiaohong， E -mail:****************【Abstract 】 Neisseria gonorrhoeae is the pathogen of gonorrhea. With the widespread use of antibiotics ， drug resistance of Neisseria gonorrhoeae is a growing problem. In recent years ，drug -resistant strains to the fi rst -line treatment drugs （such as ceftriaxone sodium ） have emerged at home and abroad. The WHO has included Neisseria gonorrhoeae as one of the priority pathogens in urgent need of new antibiotics. In recent years ， a number of studies have been conducted to evaluate the e ffi cacy of novel antibiotics in the treatment of Neisseria gonorrhoeae ， including topoisomerase inhibitors ， novel macrolides ， pleural polypeptides and small molecule antibacterial drugs ， etc. In this article ， research progress on the structure ， in vitro drug sensitivity ， drug resistance mutation ， clinical trials and adverse reactions of these drugs was reviewed ， aiming to provide references for further research on Neisseria gonorrhoeae and their clinical application.【Key words 】 New antibiotics ； Neisseria gonorrhoeae ； Gonorrhea ； Bacterial drug resistance基金项目：中国医学科学院医学与健康科技创新工程（2016I2M -3021）；美国国立卫生研究院（NIH ）资助项目（AI084048，AI116969）作者单位：210042 南京，中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所性病科通信作者，苏晓红，E -mail:****************DOI: 10.3969/j.issn.0253-9802.2022.11.002淋病奈瑟球菌（淋球菌）是一种临床常见的性传播病原体，是引起淋病的病原菌，在全球范围内造成严重的公共卫生问题。
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淋病奈瑟菌为革兰阴性球菌，是淋病的病原 体。据ＷＨＯ估计，全球每年新发病例超过６０００ 万，发展中国家发病率更呈明显上升的趋势。在我 国淋病的感染率居性传播疾病之首…。随着抗生 素的广泛使用，淋病奈瑟菌对抗生素的耐药率越来 越高，其机制主要由染色体和质粒的基因改变而引 起，按耐药性一般将淋病奈瑟菌分成以下几型：质 粒介导的产青霉素酶的淋病奈瑟菌（ＰＰＮＧ）；质粒 介导的高度耐四环素淋病奈瑟菌（ＴＲＮＧ）；ＰＰＮＧ／ ＴＲＮＧ质粒介导的对青霉素和四环素都耐药的淋病 奈瑟菌；ＣＭＲＮＧ染色体介导的对青霉素和四环素 都耐药的淋病奈瑟菌；ＱＲＮＧ染色体介导的对喹诺 酮类耐药的淋病奈瑟菌。因此，研究对淋病奈瑟菌 的耐药机制，对指导临床用药，从而有效地控制淋 病的传播有着十分重要的意义。
Ｂ Ａ
抗生素有不同的耐药率及耐药机制，对青霉素耐药
的主要机制是产生１３一内酰胺酶；对四环素耐药的 主要机制是细胞膜对药物的通透性降低；对大环内 酯类、大观霉素耐药的主要机制是作用靶位的改 变；对氟喹诺酮类耐药的主要机制是ｇｙｒＡ及ｐａｘＣ 基因的突变；对第三代头孢菌素类敏感性降低或耐 药的机制尚未明确。 ２．１青霉素青霉素属于１３一内酰胺类抗生素，淋 病奈瑟菌对其已普遍、高度耐药，这种耐药主要表 现为质粒和染色体介导两种机制。 ２．１．１质粒介导的耐药机制 质粒介导的耐药机
１．１．１
ＰＢＰｓ是一些位于细胞膜上的酶类，包括：
淋病奈瑟菌的耐药机制 ｓｙｓｔｅｍ）起着重要作用。
肽聚糖转肽酶、葡萄糖转基酶、羧肽酶，对维持细菌 胞壁的稳定起着重要作用，同时也是Ｂ一内酰胺类 抗生素的主要靶位点，Ｂ一内酰胺类抗生素是通过 与淋病奈瑟菌细胞膜上ＰＢＰｓ结合，影响细胞壁的 合成来杀灭淋病奈瑟菌。在淋病奈瑟菌的耐药机 制中，已知ｐｏｎＡ、ＰｅｎＡ等基因是编码ＰＢＰｓ的基 因，当ｐｏｎＡ及ＰｅｎＡ基因突变时，可以使相应氨基
率增加，亦可导致高水平的耐药。 ２．５大环内酯类临床常用的大环内酯类药物有 红霉素、阿奇霉素等。淋病奈瑟菌对红霉素已高度 耐药，对阿奇霉素还比较敏感，但近年来很多地区 也已发现越来越多的耐阿奇霉素的菌株。ＤｉＵｉｏｎ 等报道拉丁美洲等国家阿奇霉素敏感性都有一定 程度的下降。淋病奈瑟菌对阿奇霉素的耐药机制 有３个方面：①作用靶位点的改变，这也是其主要 的耐药机制。淋病奈瑟菌核糖体５０ｓ亚基蛋白是大 环内酯类药物的作用靶位。ｅｒｍＦ、ｅｒｍＢ基因分别编 码ＥｒｍＦ、ＥｒｍＢ酶，产生的这两种酶可对ｒＲＮＡ进行 甲基化，使核糖体５０ｓ亚基蛋白结构发生改变，导致 药物与作用靶位的结合能力下降而引起耐药。 Ｍａｒｉｌｙｎ等研究发现，ｅｒｌｎ基因很可能与ｔｅｔ基因一 起对大环内酯类的耐药起协同作用。当ｅｒｌｎ集邮 与ｔｅｔ基因同时存在时，淋病奈瑟菌对阿奇霉素的 ＭＩＣ比只有ｅｒｍ基因存在时高４倍Ⅲ】。②膜通透 性降低；③通过Ｍｔｒ系统的外排泵作用。 ３多重耐药机制 如今多重耐药现象在淋病奈瑟菌感染的治疗 中十分常见，也是临床一个比较棘手的问题。深入 探讨淋病奈瑟菌的多重耐药机制就十分有必要。 染色体介导的多重可传递耐受基因系统（即Ｍｔｒ系 统）调节着淋病奈瑟菌对疏水水性制剂（ＨＡｓ）的敏 感性，包括抗生素，胆盐和脂肪酸。此多重可传递 Ｍｔｒ系统的产物ＭｔｒＣＤＥ是细胞膜的能量依赖排除 泵系统，它将ＨＡｓ在ＡＴＰ酶的作用下从细菌内移 出而引起细菌的多重耐药（ＭＤＲ）ⅢＪ。Ｍｔｒ系统对 淋病奈瑟菌多重耐药的调节机制在转录水平上可 分为两种，一种是Ｍｔｒ依赖调节，另一种是非Ｍｔｒ依 赖调节。
通讯作者：陈建国电子信箱：ｃｊ舭＠１２６．ＣＯ／ｉｌ联系电话：
１３７０５２翟１７９１７
河南预防医学杂志２００８年第１９卷第５期Ｈｅｎａｎ Ｊ
Ｐｒｅｙ Ｍｅｄ，２００８，Ｖ０１．１９，Ｎｏ．５
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蛋白，对Ｍｔ尤ＤＥ的转录起抑制作用一Ｊ。
１３一内酰胺类，大环内酯类，四环素类，喹诺酮类，氨 基糖甙类，多烯类，磺胺类等。淋病奈瑟菌对常用
１
酸序列发生改变，从而影响到淋病奈瑟菌与Ｂ一内 酰胺类抗生素的结合力，使Ｂ一内酰胺类抗生素对 细胞壁的酰化速度下降，从而增强细菌耐药 性‘２—３Ｉ。
１．１．２
ＤＮＡ螺旋酶（ｇｙｒＡ）及拓扑异构酶（ｐａｒＣ）
的改变：该酶是一种Ⅱ型的ＤＮＡ拓扑异构酶，ＤＮＡ 螺旋酶的Ａ亚基由ｇｙｒＡ基因编码，这一基因的突 变可造成药物靶位点Ａ亚基发生改变，影响与药物 结合的能力，使淋病奈瑟菌表现出对该类药物耐受 性Ｍ Ｊ。Ｔａｎａｋａ Ｍ等人¨ｏ发现ｇｙｒＡ的基因突变可以 使淋病奈瑟菌的耐药性明显增强。在Ｄｅｇｕｃｈｉ∞１的 进一步研究中发现：耐药菌株ｇｙｒＡ的基因突变出现 在９ｌ、９５密码子，ｐａｒＣ存在８６、８７、８８、９ｌ位点的突 变，而药物敏感菌株无此突变。这一研究表明ｇｙｒＡ 及ｐａｒＣ位点改变是淋病奈瑟菌重要的耐药机制。 Ｂｅｌｌａｎｄ＂－ｓ］等人还对耐药菌株ｇＣｒＡ和ｐａｒＣ的关系 进行了深人研究，结果表明：ｇｙｒＡ位点突变是淋病 奈瑟菌最重要耐药机制，该位点的突变可以引起低 水平及中等水平的耐药，而ｐａｒＣ的突变对淋病奈瑟 菌的耐药仅起辅助作用，ｇｙｒＡ与ｐａｒＣ突变的共同 作用引起较高水平的耐药。 １．２对药物的外排机制 中Ｍｔｒ外排系统（Ｍｔｒ
ｔｒａｎｓｆｅｒａｂｌｅ
ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）即多
重可传递耐药系统，该基因系统是１个多重可传递 耐药操纵子，主要由１个抑制子ＭｔｒＲ基因和３个结 构基因ＭｔｒＣ、ＭｔｒＤ、ＭｔｒＥ基因构成，它们分别编码 相应的蛋白质（ＭｔｒＲ、ＭｔｒＣ—ＭｔｒＤ—ＭｔｒＥ），其中 ＭｔｒＣ—ＭｔｒＤ—ＭｔｒＥ是细胞膜上的脂蛋白。ＭｔｒＣ 是膜融合蛋白，ＭｔｒＤ是外排蛋白，位于细胞膜上， ＭｔｒＥ是外膜通道蛋白，位于细胞膜外，ＭｔｒＲ是调控
传递需要借助传递因子才能实现。淋病奈瑟菌的
２４．５ＭＤａ原生性质粒具有性因子的活性，能动员耐 药质粒高效地在淋病奈瑟菌间传递，完成接合传递 过程。在此基础上，ＴＥＭ一１基因编码形成Ｂ一内 酰胺酶，该酶是多种类型不同的以１３一内酰胺环为 底物的降解酶ｕ ８｜，它可以使抗生素的抗菌作用减弱 或消失。 ２．１．２染色体介导的耐药机制淋病奈瑟菌染色 体分子质量为９８０ＭＤａ，可编码约５０００个基因。深 入研究发现，染色体上有多种与Ｐ抗性有关的遗传 位点，主要是ｐｅｎＡ，ｐｅｎＢ，ｐｅｎＣ，他们引起对青霉素 的低水平耐药。染色体介导的耐药机制主要有以
制为１３一内酰胺酶的产生，这是产生耐药的主要机 制。淋病奈瑟菌质粒按分子大小一般分为２．６ＭＤａ 隐蔽性质粒、耐青霉素质粒、高度耐四环素质粒 （２５．２Ｄａ）和接合型质粒（２４．５ＭＤａ）¨６。。研究表明 淋病奈瑟菌耐药质粒中包含了起源于大肠埃希菌 的１３一内酰胺酶基因ＴＥＭ一１¨“，ＴＥＭ—ｌ主要以 转座子ＴｎＡ基因的形式在许多细菌的耐药质粒间 通过结合和转座不规则转移重组。淋病奈瑟菌的 耐药质粒可以通过转化和接合两种方式在菌株间 传递，但淋病奈瑟菌的耐药质粒并非传递性质粒，
淋病奈瑟菌的Ｍｔｒ基因复合体是一个由ＭｔｒＣ
—ＭｔｒＤ—ＭｔｒＥ细胞膜蛋白构成的主动外排蛋白 泵，ＭｔｒＣ—ＭｔｒＤ—ＭｔｒＥ复合物能有效将各种结构 不同的抗生素、脂溶性因子（ＨＡ ８）主动运出细胞 体外，整个过程由细胞膜上脂蛋白在ＡＴＰ酶催化下 完成¨ｏ｜。淋病奈瑟菌通过这种能量依赖系统主动 地泵出抗生素分子来阻止药物在细胞内的蓄积，因 而抗生素无法达到其发挥选择性细胞毒作用所需 要的浓度，故该类淋病奈瑟菌可以表现出对抗生素 的多重耐药性。 近来发现淋病奈瑟菌细胞膜上还存在另外一 种系统，即Ｆａｒ系统，该系统对长链脂肪酸及一些 脂溶性因子有耐受性，但有学者研究发现虽然Ｆａｒ 系统和Ｍｔｒ系统独立对各种脂溶性因子及抗生素起 作用，但是Ｆａｒ系统仍需依靠外膜通道蛋白ＭｔｒＥ， 同时也会受到ＭｔｒＲ蛋白的调控¨¨。 １．３产生抗生素的灭活酶Ｂ一内酰胺类抗生素选 择性地作用于细菌胞壁，１３一内酰胺环能与合成粘肽 的转肽酶结合，使转肽酶丧失活性，进而抑制细胞 壁的合成，而该类药物对无细胞壁的动物细胞毒性 较小，因此１３一内酰胺类药物常用于淋病的临床治 疗¨２【。有些淋病奈瑟菌可以通过产生１３一内酰胺酶 形成对１３一内酰胺类抗生素的耐药。该酶是多种类 型不同的以１３一内酰胺环为底物的降解酶，它可以 使抗生素抗菌作用减弱或消失。其作用机制：青霉素 酶或头胞菌素酶的活性中心均为蛋白质多肽链中的 丝氨酸，它作为亲核剂和１３一内酰胺环的羧基结合， 形成酰化酶中间体，在其与Ｈ２０分子的作用下导致 Ｂ一内酰胺环失活，这是淋病奈瑟菌对１３一内酰胺类 抗生素产生耐药性的一个重要原因¨３Ｉ。 １．４细胞膜通透性的改变细胞膜通透性发生改 变是淋病奈瑟菌的一个重要耐药机制，抗生素和其 它复杂的分子一样必须通过脂多糖外膜通道进入 细胞，这一条通道由孔蛋白（ｐｏｒｉｎ）提供，抗生素通 过这条通道的能力会受到其形状、大小、电荷的影 响，一旦孔蛋白发生变异，细菌易产生耐药性【ｌ引。 淋病奈瑟菌的外膜蛋白包括Ｐ Ｉ、ＰＩＩ、ＰⅢ，其中Ｐ Ｉ又被称为主要膜蛋白（ＭＯＭ Ｐ），由Ｐ Ｉ Ａ和Ｐ Ｉ 两种蛋白组成，它们的功能相当于孔蛋白，当Ｐ Ｉ
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河南预防医学杂志２００８年第１９卷第５期Ｈｅｎａｎ Ｊ
Ｐｒｅｙ Ｍｅｄ，２００８，Ｖ０１．１９，Ｎｏ．５
・综述・
淋病奈瑟菌耐药机制研究进展
夏威为１，刘超２，陈建国１
摘要：淋病在我国的感染率仍居性传播疾病之首，淋病奈瑟菌目前仍采用抗生素治疗。近年来随着抗生素的广泛使 用，淋病奈瑟菌耐药菌株对各种抗生素产生不同程度的耐药。只有严密监测淋病奈瑟菌的耐药情况，才能更好地指导临床用 药，并采取有效的措施预防、治疗及控制淋病。本文针对淋病奈瑟菌对几种常用抗生素的耐药机制的研究进展做简要概述。 关键词：淋病奈瑟菌；耐药机制；抗生素；多重耐药 中图分类号：Ｒ７５９．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—８４１４（２００８）０５一０３２６一０４
和Ｐ Ｉ Ｂ的表达下降或者完全不表达时，进入细菌 胞质的抗生素的数量就会减少，淋病奈瑟菌就会表 现出对抗生素的耐受性【ｌ