动物细胞融合与单克隆抗体(公开课)PPT课件
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16
谢谢大家
荣幸这一路，与你同行
It'S An Honor To Walk With You All The Way
演讲人：XXXXXX
时 间：XX年XX月XX日
17
10
二、单克隆抗体
1.设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖
杂种细胞
原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大 量增殖，又能足够数量的单一抗体。
2.制备过程：
11
免疫小鼠
注射特定 抗原蛋白
培养骨髓瘤细胞
单
克
B淋巴细胞
隆
融合 骨髓瘤细胞
抗
体
制
多种杂交细胞
单克隆抗体
13
3.单克隆抗体的应用：
单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产 量大 ①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与 特异性结合 优点：准确、高效、简易、快速
治疗疾病：主要用于癌症治疗
②用于
运载药物：制成“生物导弹”
14
知识结构
两个过程
动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程
三个“一”
一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活的病毒
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
如何让不同种的动物体细胞进行杂交？
1
植物体细胞杂交 植物细胞A
植物细胞B
纤维素酶、
去细胞壁
果胶酶 原生质体A
原生质体B
物理法 原生质 化学法 体融合
杂种细胞
筛选
杂种植株
组织培养
2
动物细胞与植物细胞的差别：
•无细胞壁 •全能性受限制，不能发育成杂种动物
动物细胞融合与植物细胞杂交的不同： •不需去除细胞壁 •不能发育成新的动物个体
3
一、动物细胞融合 1、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞
的过程。 2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性
物理法：离心、振动、电激 4、诱导方式 化学法：聚乙二醇（PEG)
生物法：灭活的病毒
4
5、过程：
动 物 细 胞 融 合 过 程 示 意 图
不同DNA的 两个细胞
灭活的病毒
7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、 肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体
7
小结1 植物、动物细胞融合的比较
比较项目 融合的原理
步骤 诱导方法
结果
植物体细胞杂交 动物细胞融合
பைடு நூலகம்
细胞膜的流动性 细胞膜的流动性
去壁—原生质体 融合—诱导新壁 —杂种植株
直接诱 导细胞融合
有丝分裂
两个完整的 杂交细胞
5
动物细胞 A
动物细胞 B
诱导，融合（膜融合、质融合）2个完整的
有丝分裂 （核融合）
杂交细胞 AB
注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放 在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细 胞
6
6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种 间、属间、科间、动植物之间）成为可能。
动物在免疫反应过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上。
4. 简述获得抗体的传统途径？
抗原 刺激 动物体 浆细胞 抗体
抗原不纯
抗体不纯
9
5.这种方法获得的抗体有什么缺陷？
产量低，纯度低，特异性差
6.如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？
体外培养单个Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体
7.体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?怎样解决这个问题？
备
过
选择培养基上培养
程
专一抗体
示
检验阳性
意
克隆杂交细胞
图
专一抗体 检验阳性
注射到小鼠体内
分开不同杂交细胞，克隆 专一抗体，检验阳性细胞
体外培养
12
单克隆抗体
2、过程
B淋巴细胞 诱导
融合
骨髓瘤细胞
B-B细胞 B-瘤细胞 选择培养
瘤-瘤细胞
杂交瘤细胞 （ B-瘤细胞）
克隆化培养
杂交瘤细胞
抗体检测
体外培养 小鼠腹腔内增殖
一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
15
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
物理（离心、振 荡、电激）
物理、化学方法 （同左）
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
获得杂种植株
主要用于单克 隆抗体 8
二、单克隆抗体
提
1.抗体是由何种细胞产生的？
问
效应B细胞（浆细胞）。
？ 2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
3. 抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种 吗？
谢谢大家
荣幸这一路，与你同行
It'S An Honor To Walk With You All The Way
演讲人：XXXXXX
时 间：XX年XX月XX日
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二、单克隆抗体
1.设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖
杂种细胞
原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大 量增殖，又能足够数量的单一抗体。
2.制备过程：
11
免疫小鼠
注射特定 抗原蛋白
培养骨髓瘤细胞
单
克
B淋巴细胞
隆
融合 骨髓瘤细胞
抗
体
制
多种杂交细胞
单克隆抗体
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3.单克隆抗体的应用：
单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产 量大 ①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与 特异性结合 优点：准确、高效、简易、快速
治疗疾病：主要用于癌症治疗
②用于
运载药物：制成“生物导弹”
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知识结构
两个过程
动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程
三个“一”
一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活的病毒
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
如何让不同种的动物体细胞进行杂交？
1
植物体细胞杂交 植物细胞A
植物细胞B
纤维素酶、
去细胞壁
果胶酶 原生质体A
原生质体B
物理法 原生质 化学法 体融合
杂种细胞
筛选
杂种植株
组织培养
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动物细胞与植物细胞的差别：
•无细胞壁 •全能性受限制，不能发育成杂种动物
动物细胞融合与植物细胞杂交的不同： •不需去除细胞壁 •不能发育成新的动物个体
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一、动物细胞融合 1、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞
的过程。 2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性
物理法：离心、振动、电激 4、诱导方式 化学法：聚乙二醇（PEG)
生物法：灭活的病毒
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5、过程：
动 物 细 胞 融 合 过 程 示 意 图
不同DNA的 两个细胞
灭活的病毒
7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、 肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体
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小结1 植物、动物细胞融合的比较
比较项目 融合的原理
步骤 诱导方法
结果
植物体细胞杂交 动物细胞融合
பைடு நூலகம்
细胞膜的流动性 细胞膜的流动性
去壁—原生质体 融合—诱导新壁 —杂种植株
直接诱 导细胞融合
有丝分裂
两个完整的 杂交细胞
5
动物细胞 A
动物细胞 B
诱导，融合（膜融合、质融合）2个完整的
有丝分裂 （核融合）
杂交细胞 AB
注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放 在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细 胞
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6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种 间、属间、科间、动植物之间）成为可能。
动物在免疫反应过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上。
4. 简述获得抗体的传统途径？
抗原 刺激 动物体 浆细胞 抗体
抗原不纯
抗体不纯
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5.这种方法获得的抗体有什么缺陷？
产量低，纯度低，特异性差
6.如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？
体外培养单个Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体
7.体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?怎样解决这个问题？
备
过
选择培养基上培养
程
专一抗体
示
检验阳性
意
克隆杂交细胞
图
专一抗体 检验阳性
注射到小鼠体内
分开不同杂交细胞，克隆 专一抗体，检验阳性细胞
体外培养
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单克隆抗体
2、过程
B淋巴细胞 诱导
融合
骨髓瘤细胞
B-B细胞 B-瘤细胞 选择培养
瘤-瘤细胞
杂交瘤细胞 （ B-瘤细胞）
克隆化培养
杂交瘤细胞
抗体检测
体外培养 小鼠腹腔内增殖
一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
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写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
物理（离心、振 荡、电激）
物理、化学方法 （同左）
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
获得杂种植株
主要用于单克 隆抗体 8
二、单克隆抗体
提
1.抗体是由何种细胞产生的？
问
效应B细胞（浆细胞）。
？ 2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
3. 抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种 吗？