临床分子生物学检验复习提纲定稿版
临床分子生物学检验复习提纲
临床分子生物学检验复习提纲临床分子生物学是现代医学中非常重要的一个领域，它涉及到了分子生物学和临床医学的结合，以及各种分子生物学技术在临床诊断和治疗中的应用。
以下是一个临床分子生物学检验的复习提纲，希望能够帮助你更好地准备考试。
一、分子生物学基础知识复习1.DNA结构和功能-核苷酸的组成和结构-DNA链的方向性-DNA的雙螺旋结构-DNA复制的过程2.RNA结构和功能-mRNA、tRNA和rRNA的结构和功能-转录和翻译的过程3.基因组和染色体-基因组的组成和结构-染色体结构和功能-遗传密码子表4.基因表达调控-转录调控的机制-翻译调控的机制-转录后调控的机制5.基因突变和遗传变异-突变的类型和机制-染色体缺失、重复和易位等遗传变异二、临床分子生物学技术复习1.PCR技术-PCR的原理和步骤-PCR引物设计和优化-PCR产物的检测和分析2.DNA测序技术- Sanger测序法的原理和步骤-高通量测序技术的原理和应用3.基因组学研究技术-基因芯片技术的原理和应用-下一代测序技术在基因组学研究中的应用4.基因突变检测技术-PCR-RFLP分析-聚合酶链反应单链构象多态性分析-测序检测技术在基因突变检测中的应用5.基因表达分析技术-实时荧光定量PCR- Northern blotting-基因芯片技术在基因表达分析中的应用三、临床分子诊断和治疗复习1.临床遗传病的分子诊断-基因突变检测在临床遗传病诊断中的应用-基因芯片技术在临床遗传病诊断中的应用-高通量测序技术在临床遗传病诊断中的应用2.分子病理学的应用-分子病理学技术在肿瘤诊断中的应用-微卫星不稳定性的检测和分析-液体活检技术在肿瘤诊断中的应用3.分子靶向治疗技术-靶向药物的分子设计原理-靶向药物的应用和限制-基因突变检测在靶向治疗中的应用4.群体遗传学和个体化医疗-群体遗传学研究的意义和方法-个体化医疗的概念和发展-药物基因组学在个体化医疗中的应用。
《临床分子生物学检验》课程教学大纲详解
临床分子生物学检验课程教学大纲详解一、课程简介临床分子生物学检验是一项高科技检测方法，通过基因分析和生物物质的检测，帮助诊断、预防和治疗人类疾病。
本课程将对分子生物学检验从基础理论到实践操作进行全面讲解，帮助学生深刻理解分子生物学检验的意义、目的、方法和应用。
二、教学目标1.了解分子生物学检验的基本原理和方法；2.掌握分子生物学检验的实验操作技能；3.掌握分子生物学检验的数据分析和结果解释技能；4.培养学生分析和解决实际临床问题的能力。
三、教学内容1. 分子生物学基础知识介绍遗传基础知识、DNA与RNA的结构和功能、遗传密码、基因表达调控等基本概念。
2. 分子生物学检验方法（1） DNA、RNA的提取与纯化介绍从样本中提取和纯化DNA和RNA的方法，以及如何保证提取和纯化的质量。
（2） PCR技术介绍聚合酶链式反应（PCR）的基本原理、反应条件、PCR应用等内容，还需介绍扩增条件的设计、引物的设计和合成、扩增产物的检测等相关技术。
（3）四分子检测技术介绍四分子检测技术的基本原理、反应条件、应用范围等内容，并介绍四分子检测中的引物设计、反应条件的优化等相关技术。
（4）基因测序技术介绍基因测序的原理、流程和分析方法等内容，掌握基因测序技术的实验条件和实验方法。
3. 分子生物学检验应用介绍分子生物学检验在生物医学领域中的应用，如病毒检测、肿瘤诊断、遗传性疾病诊断等。
4. 临床分子生物学检验实验对PCR、基因测序等实验操作进行介绍和演示，让学生掌握实验操作技能和规范操作流程，同时注重实验数据处理和结果解释的技巧。
四、教学方法本课程使用的教学方法包括授课、讲解、小组讨论、实验操作练习等多种形式，注重理论联系实际，强调实验操作细节和规范操作流程。
五、教学评价方法采用综合性评价、实验考核等方式进行教学评价，期望通过教学活动，让学生体验到科学研究和实验探究的魅力，锻炼严密的思维和严谨的安全实验习惯。
六、参考书目1.David M. Clark and Nanette J. Pazdernik. Molecular Biology, 2ndedition.2.T. A. Brown. Gene Cloning and DNA Analysis: An Introduction, 5thedition.3.Sanchez-Ruiz and Kremsner. Molecular Diagnosis of InfectiousDiseases.4.Wolfram Ostertag and Navid Zohourian. Molecular Diagnosis ofGenetic Diseases.。
分子生物学 复习提纲
分子生物学复习提纲免责声明：本资料仅供临床医学10级学习交流使用，基本覆盖上课重点。
由于课程的特殊性，特列成专题形式，个专题中重复部分在相应专题中都会覆盖。
凡应只使用本资料应试而造成的一切不良后果，均由使用者承担，本人不承担任何责任。
第一讲基因表达调控（转录水平的调节是基因表达调控的关键）分子生物学：是以生物大分子为研究对象，从分子水平去研究并解释一切生物学现象并在分子水平上改造和利用生物的一门新兴科学。
基因：编码RNA或蛋白质的全部核苷酸序列，包括结构基因和调控基因。
基因组：一个单倍体生物所含有的全部DNA，即DNA上所有的基因。
结构基因：编码RNA或蛋白质的核苷酸序列。
（原核：多顺反子、无内含子；真核：单顺反子、有内含子）转录单位：从启动子到转录终止子之间的DNA节段。
基因表达：是指DNA携带的遗传信息通过转录传递给RNA，mRNA通过翻译将基因的遗传信息在细胞内合成具有生物功能的各种蛋白质的过程。
基因表达调控：是指对基因组中某一基因或一些功能相近的基因表达开启、关闭和表达强度的直接调节。
遗传密码：mRNA上按5’到3’方向排列的每三个核苷酸称遗传密码。
内含子：DNA或RNA中的非编码序列。
外显子：DNA或RNA中的编码序列。
多顺反子：一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码几条功能相关的多肽链。
单顺反子：一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码一条多肽链的生成。
启动子：是转录开始时RNA聚合酶识别、结合并开始转录起始所需的一段DNA序列。
终止子：提供转录终止信号的一段DNA序列。
增强子：能加强其上游或下游基因转录的DNA序列。
SD序列：mRNA5’端在起始密码子AUG 上游3～11bP处，含A-G 短序列，容易与16S r RNA3’-端含U-C 序列互补配对的序列称为SD 序列，它对mRNA与核糖体的有效结合并翻译至关重要。
开放阅读框ORF：始于起始密码子并终于终止密码子的一串密码子所组成的核苷酸序列。
生物分子学复习提纲
分子生物学复习提纲（附考试原题）一、了解基因工程的主要研究成就。
（一）植物基因工程当前已鉴定和克隆化的植物基因有数百种，重组植物的野外试验已达千余宗。
与农业中的除草剂、抗昆虫、抗病（抗真菌、抗病毒）、抗不良环境因素、提高产量的光合作用、以及提高蛋白质有关。
（二）动物基因工程最突出——转基因动物及其发展。
1983年美国将生长激素基因注入小鼠受精卵——超级鼠。
缺点在于其盲目性。
外源性DNA引入受体细胞后可随机地插入受体细胞基因组中的任意位置，容易导致内源性有利基因的破坏和识货或激活有害基因。
表达水平难以预料。
目标：提高基因正常转化的效率，实现基因的定位整合。
（三）基因工程多肽药物与疫苗多肽药物：人胰岛素、人生长激素、干扰素、白细胞介素、组织血纤维蛋白溶酶原激活剂、肿瘤坏死因子、集落刺激因子……疫苗：细菌疫苗：麻风杆菌、百日咳杆菌、淋球菌……病毒疫苗：乙肝、甲肝、带疱、巨细胞病毒……寄生虫疫苗：疟原虫、利什曼虫、血吸虫……（四）基因诊断与基因治疗原指遗传性疾病的诊断，主要利用DNA探针（单链DNA小片段用核素、酶、荧光分子或化学催化剂等标记，之后同被检测的DNA中的同源互补杂交，从而检出所要查明的DNA）技术。
如诊断镰贫、地贫，也可诊断传染性疾病如结核。
多聚酶链反应PCR是一种体外扩增特异性DNA片段的技术。
基因治疗一般指将正常外源基因导入生物体靶细胞内以弥补所缺失的基因、关闭或降低异常表达的基因，以达到治疗遗传性疾病的目的。
方法普片采用逆转录病毒作为载体的基因导入法。
作为载体的逆转录病毒已缺失功能蛋白基因。
目前研究多属于单基因缺陷引起的遗传疾病基因治疗，如血友病，贫血等。
肿瘤和传染病也在研究。
（五）环境检测与净化环境监测：可用基因探针或PCR技术检测水中微生物。
环境净化：重组质粒导入细菌，降解有机物、农药等——超级菌；促进酶工业进步，提升经济效益等。
*二、掌握分子生物学的中心法则。
*三、掌握核酸的基本组成成分、基本性质。
分子生物学复习提要(精)
分子生物学复习提要一、名词解释：1、分子生物学（Molecular Biology）:从分子水平研究生命现象的科学，通过生物的物质基础—核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及其相互作用等运动规律的研究来阐明生命分子基础，从而探索生命的奥秘。
2、核酸（nucleic acid）:是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子，携带和传递遗传信息。
3、DNA的一级结构：DNA中核苷酸的排列顺序称作DNA的一级结构。
4、DNA的二级结构：即双螺旋结构，是指两条脱氧多核苷酸链反向平行盘绕所形成的双螺旋结构。
5、DNA的变性：在某些理化因素的作用下，DNA双链解开成单链的过程。
6、DNA的复性：在适当条件下，变性DNA的两条互补链恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。
7、核酸分子杂交：序列互补单链的RNA和DNA，或DNA和DNA，或RNA 和RNA，根据碱基配对原则，借助氢键相连而形成双链杂交分子的过程。
8、基因（gene）：是核酸中贮存遗传信息的遗传单位，是贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列9：基因组（genome）:细胞或生物中，一套完整单倍体遗传特质的总和（包括一种生物所需的全套基因及间隔序列）称为基因组10.质粒（plasmid）:是独立于许多细菌及某些真核细胞染色体外共价闭合环状的DNA分子（covalant closed circnlar,cccDNA），能独立复制的最小遗传单位11.质粒的不相容性：当某种质粒在宿主细胞内存在时，将阻止其他质粒进入细胞寄宿，这种细菌质粒不能在相同细胞中同时存在的现象称为质粒的不相容性。
12、假基因：不能转录或转录后生成无功能蛋白质的基因称为假基因。
13、结构基因（structural gene）指能转录成为mRNA、rRNA或tRNA的DNA 顺序。
14、外显子（extron）：真核生物的结构基因是不连续的，其中的编码序列称为外显子。
临床分子生物学检验技术复习题(含答案)
临床分子生物学检验技术复习题（含答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.胰腺癌的肿瘤指标A、AFPB、本-周蛋白C、CA19-9D、CA125E、CEA正确答案：C2.用HRP作为酶法显色，其底物常用A、BCIPB、NBTC、DABD、X-galE、RPE正确答案：C3.APC基因的点突变主要集中的位点是A、CpG和CpTB、CpA 和CpCC、CpA和CpTD、CpG 和CpCE、CpG和CpA正确答案：E4.通常标记第二抗体的酶是A、ALTB、ASTC、ACPD、ACATE、AKP正确答案：E5.PCR反应的基本过程不包括A、预变性B、退火C、淬火E、延伸正确答案：C6.最早的肿瘤标志物是A、CEAB、AFPC、本-周蛋白D、CA19-9E、CA125正确答案：C7.一般来说核酸杂交的温度低于其Tm值多少度A、15~25℃B、40~50℃C、5~10℃D、10~15℃E、30~40℃正确答案：A8.BRCAI基因定位于人哪个染色体上A、染色体11q24B、染色体1p32C、染色体9p21D、染色体2p32E、染色体17q21正确答案：E9.关于带正电荷尼龙膜的描述下列不正确的是A、可结合DNAB、可结合 RNAC、对盐浓度要求不高D、核酸可通过UV交联共价结合E、本底较低正确答案：E10.淋病奈瑟菌耐大环内酯的分子机制与以下哪个基因有关A、ropBB、ermD、gyrAE、embB正确答案：B11.关于引物步移法测序策略的叙述正确的是A、是大型的测序计划最初的测序策略B、是一种非定向的测序策略C、使用载体的通用引物，从目的DNA 的一端开始测序D、根据已获得的测序信息重新设计引物，再通用引物测序E、需亚克隆，且每一轮测序的方向和位置是已知的正确答案：C12.嵌合型Down综合征患者的核型为A、46,XY,-13,+t(13q21q)B、45,XY,-13,-21,+t(13q21q)C、47,XY,+21D、46,XY/47, XY,+21E、46,XY,-21,+t(21q21q)正确答案：D13.GeneXpert全自动结核杆菌检测技术现可进行哪种药物的耐药检测A、链霉素B、异烟肼C、乙胺丁醇D、利福平E、吡嗪酰胺正确答案：D14.关于肿瘤分子诊断的说法正确的是A、肿瘤分子诊断的核心是基于细胞水平的分子诊断技术B、肿瘤分子诊断的研究成果仅用于临床肿瘤的诊断C、肿瘤分子诊断的含义主要表现在虽然检测对象众多，但大多数标志物是特异性的肿瘤标志物D、肿瘤分子诊断就是利用分子生物学原理和技术建立的肿瘤诊断方法E、肿瘤的分子诊断中根据目的、对象、类型的不同要采取相似的诊断策略与方法正确答案：D15.蛋白质染色中哪种方法易造成蛋白质末端封闭，不利于蛋白质序列分析A、荧光染色B、银染C、放射性核素标记染色技术D、考马斯亮蓝染色E、铜染正确答案：B16.PCR-ASO描述错误的是A、需要寡核苷酸探针B、检测点突变的技术C、PCR产物必须电泳分离D、需正常和异常两种探针E、需严格控制杂交条件正确答案：C17.IPG的特点描述中不正确的是A、IPG是丙烯酰胺衍生物，可形成pH梯度B、IPG-IEF较两性电解质具有更高的分辨率,可达到pH0.001C、IPG长度越长，能分辨出来的蛋白质数量越多D、IPGpH梯度越宽分辨率越高E、IPG在进行第二向电泳前必须进行平衡正确答案：D18.在人类基因组DNA序列中，DNA甲基化主要发生在A、腺嘌呤的N-6位B、胞嘧啶的N-4位C、鸟嘌呤的N-7位D、胞嘧啶的C-5位E、鸟嘌呤的C-5位正确答案：D19.以下不需要对引物或探针预先标记的实时定量PCR方法是A、TaqMan水解探针技术B、探针杂交技术C、分子信标技术D、SYBR GreenⅠ荧光染料技术E、数字PCR技术正确答案：E20.脆性X综合征的临床表现有A、智力低下伴头皮缺损、多指、严重唇裂及膊裂B、智力正常张力亢进，特殊握拳姿势、摇椅足C、智力正常、身材矮小、肘外翻、乳腺发育差、乳间距宽、颈蹼D、智力低下伴长脸、大耳朵、大下颌、大睾丸E、智力低下伴眼距宽、鼻梁塌陷、通贯手、趾间距宽正确答案：E21.单细胞基因扩增一般采用下列何种技术增加检测的敏感性和特异性A、巢式PCRB、多重PCRC、PCR-RFLPD、等位基因特异性PCRE、PCR-SSCP正确答案：A22.常用的肺癌远处转移检测标志物是A、EGFR基因B、K-rasC、TTF-1D、TPAE、CEA正确答案：D23.首个报道的由连锁分析得到的前列腺癌易感位点是A、RNASELB、ARC、COX-2D、MSR1E、CDKN1B正确答案：A24.规范化的临床基因扩增检验实验室工作区域不包括A、试剂储存和准备区B、标本制备区C、扩增区D、产物分析区E、隔离区正确答案：E25.关于 FISH 在白血病的应用中说法正确的是A、主要用于白血病的初诊和复发的检测B、只适用于体液、组织切片标本C、FISH只能检测处于分裂中期的细胞D、FISH的灵敏度高于 PCRE、FISH 是检测融合基因、确定染色体易位的首选方法正确答案：A26.质粒的主要成分是A、DNAB、蛋白质C、多糖D、氨基酸衍生物E、脂类正确答案：A27.下列哪个分子靶点的检测可以用于指导肺癌的靶向治疗A、EGFRB、Her-2C、G-6-PDD、VDRE、ER正确答案：B28.属于等温扩增技术的是A、荧光定量 PCR技术B、PCR-RFLP技术C、SDA技术D、PCR-SSCP技术E、基因芯片技术正确答案：C29.下面关于 mtDNA转录的描述不正确的是A、mtDNA转录是对称性转录B、重链和轻链的转录分别启动C、转录方向与复制方向相同D、转录过程类似于原核细胞E、成熟的mRNA 在3'末端加 poly尾,5'末端不加帽子结构正确答案：C30.寡核苷酸探针的Tm简单计算公式为A、Tm=4(G+C)+2(A+T)B、Tm=2(G+C)+4(A+T)C、Tm=6(G+C)+4(A+T)D、Tm=2(G+C)+6(A+T)E、Tm=6(G+C)+2(A+T)正确答案：A31.以下不属于MLPA技术优点的是A、特异性和重现性高B、灵敏度高C、方法简便D、可用于检测未知的点突变类型E、检测分辨率宽正确答案：D32.以下符合新生隐球菌基因组结构特征的是A、新生隐球菌为二倍体，有14条染色体B、同一基因型菌株间存在较大的遗传变异C、新生隐球菌主要基因型的致病特点相似D、目前全球范围内的新生隐球菌分为8种主要的基因型E、不同基因型菌株间遗传相似度很高正确答案：D33.检测靶分子是RNA的技术是A、Southern 印迹杂交B、Western 印迹杂交C、Northern印迹杂交D、Eastern 印迹杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：C34.病毒的遗传物质是A、DNAB、RNA和蛋白质C、DNA 或RNAD、RNA 和DNAE、DNA和蛋白质正确答案：C35.乙型肝炎病毒的核酸类型是A、双链RNAB、双链环状DNAC、单链DNAD、单链RNAE、双链线性 DNA正确答案：B36.具有母亲生育年龄偏大和单卵双生的一致性两个特点的是A、Down综合征B、着色性干皮病C、家族性高胆固醇血症D、猫叫综合征E、WAGR综合征正确答案：A37.Northern印迹杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、检测靶分子是RNAD、用于基因定位分析E、用于阳性菌落的筛选正确答案：C38.痕量检材分型最优选的技术是A、RFLP分型技术B、PCR-SSCP技术C、WGA技术D、PCR-SSO技术E、PCR-SSP技术正确答案：C39.关于K-ras说法不正确的是A、K-ras与肺癌的发生及预后有关B、80%~90%的突变是由第12密码子A→T引起的C、K-ras突变与EGFR突变是相互排斥的D、伴随K-ras突变的 NSCLC 患者 EGFR-TKIs药物敏感性较差E、20%~30%的NSCLC患者存在K-ras基因突变正确答案：B40.13-三体综合征又称为A、Klinefelter 综合征B、Patau 综合征C、Edward综合征D、猫叫样综合征E、Down综合征正确答案：B41.关于疟原虫的基因组结构特征，下列错误的是A、在蚊体内的有性繁殖阶段，疟原虫的基因组为二倍体B、疟原虫的基因组由染色体DNA、质体DNA和线粒体DNA三部分组成C、基因组DNA 富含A/T序列D、基因组DNA 富含重复序列E、在人或动物体内的无性繁殖阶段，其基因组为二倍体正确答案：E42.关于 TaqMan 探针技术的描述，不正确的是A、R基团与Q基团相距较远，淬灭不彻底，本底较高B、易受到 Taq DNA 聚合酶核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析，减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异的缺点正确答案：C43.第一个被发现可以预测晚期转移性结直肠癌患者是否能从靶向治疗药物西妥昔单抗中获益的生物标志物是A、K-rasB、EGFR基因C、TTF-1D、CEAE、bcl-2基因正确答案：A44.有关PCR的描述下列不正确的是A、是一种酶促反应B、引物决定了扩增的特异性C、由变性、退火、延伸组成一个循环D、循环次数越多产物量就越大，可增加循环次数提高产物量E、扩增的对象是DNA序列正确答案：D45.人类可遗传的变异中最简单、最常见的一种是A、RFLPB、VNTRC、STRD、SNPE、CNV正确答案：D46.与移植物排斥反应发生无关的细胞是A、B细胞B、Th1细胞C、黏膜上皮细胞D、Th2细胞E、Tc细胞正确答案：C47.第三代测序技术的最主要特征是A、对单分子 DNA 进行非 PCR的测序B、针对SNP进行非 PCR的测序C、高通量和并行 PCR测序D、直接分析SNPE、直接进行个体基因组测序和 SNP研究正确答案：A48.著名的Ph1染色体发生的易位是A、t(9;22)(q34;q1l)B、t(9;21)(q33;q11)C、t(9;22)(q11;q34)D、t(5;11)(q34;q22)E、t(5;22)(q34;q11)正确答案：A49.以下不是原癌基因的特点的是A、广泛存在于生物界，是细胞生长必不可少的B、在进化过程中，基因序列呈高度保守性C、通过表达产物DNA来实现功能D、在某些因素的作用下会形成能够致瘤的癌基因E、对正常细胞不仅无害，而且是细胞发育、组织再生、创伤愈合等所必需正确答案：C50.不符合 Down综合征的临床表型是A、严重智力低下B、小头畸形C、耳低位D、摇椅样足E、肌张力低下正确答案：D51.HBV DNA 中最大的一个开放阅读框是A、P基因区B、S基因区C、X基因区D、前S1基因区E、C基因区正确答案：A52.性染色体疾病的共同临床特征不包括A、身材矮小B、不育C、性腺发育不全D、智力低下E、两性畸形正确答案：A53.提高移植存活率的方法以下不可行的是A、HLA配型B、mH的鉴定C、ABO血型鉴定D、移植前输入补体和抗体E、移植前应用免疫抑制剂正确答案：D54.下列哪种病毒在复制过程中可产生RNA-DNA杂交体A、HIVB、HPVC、HBVD、HCVE、流感病毒正确答案：A55.与耐链霉素相关的结核杆菌靶基因是A、rpsL和rrsB、ropBC、katGD、pncAE、embB正确答案：A56.关于MHC Ⅰ类分子的描述不正确的是A、分布于所有细胞表面B、参与内源性抗原的加工提呈C、参与T细胞在胸腺内的发育D、是诱导同种移植HVGR的主要抗原E、是CD8⁺T细胞限制性识别的关键分子正确答案：A57.CYP450酶在哪个组织表达量最多A、心脏B、肝脏C、肾脏D、肺部E、小肠正确答案：B58.目前最常用的TB分子检测方法是A、PCRB、real-time PCRC、SDAD、LPAE、DNA chip正确答案：B59.下列不是MALDI-MS特点的是A、质量检测范围宽(已超过300kD)B、样品量只需1pmol甚至更少C、对样品要求很高D、分析速度快，分子离子峰强，信息直观E、质量的准确度高正确答案：C60.最容易降解的核酸探针是A、cDNA 探针B、dsDNA 探针C、ssDNA探针D、gDNA 探针E、RNA正确答案：E61.通过酶联级联反应检测每次核苷酸聚合所产生的PPi的测序方法是A、双脱氧终止法B、化学裂解法C、焦磷酸测序D、寡连测序E、边合成边测序正确答案：C62.染色体结构畸变的基础是A、染色体断裂及断裂后的异常重排B、姐妹染色单体交换C、染色体丢失D、染色体核内复制E、染色体不分离正确答案：A63.在器官移植中HLA 配型最重要的位点是A、HLA-DRB、HLA-AC、HLA-BD、HLA-DPE、HLA-C正确答案：A64.离子交换层析有效分离蛋白质的依据是A、配体的特异性亲和力B、蛋白的分子大小C、蛋白的pID、蛋白的溶解度E、蛋白所带电荷正确答案：E65.未来基因诊断的主要发展方向是A、胚胎着床前诊断B、母体外周血中胎儿细胞分析技术C、对常见病进行分子诊断D、对多发病进行分子诊断E、以上都是正确答案：E66.用于病毒基因突变检测的技术是A、荧光定量PCR技术B、PCR-RFLP技术C、PCR微卫星检测技术D、原位杂交技术E、cDNA表达芯片技术正确答案：B67.编码HIV 衣壳蛋白的是A、gag基因B、pol基因C、tat基因D、vif基因E、env基因正确答案：A68.关于 mtDNA的描述正确的是A、结构基因编码mtDNA复制所需要的酶、调控蛋白、NADH氧化还原酶、ATP酶等B、重链有编码功能，轻链无编码功能C、含22个结构基因D、含tRNA基因，可转录20种tRNA，以满足线粒体内蛋白质翻译的需要E、含rRNA 基因,编码2种rRNA,即12S rRNA 和18S rRNA正确答案：D69.属于探针序列扩增技术的是A、PCRB、RT-PCRC、巢式PCRD、链置换扩增E、bDNA正确答案：D70.关于核酸探针的描述下列不正确的是A、可以是DNAB、可以是RNAC、可用放射性标记D、可用非放射性标记E、必须是单链核酸正确答案：E71.PCR-SSCP 描述中错误的是A、检测核酸点突变的技术B、需制备成单链DNAC、根据空间构象由DNA 的碱基组成决定的原理D、不需电泳E、敏感性与待分离DNA 的长度有关正确答案：D72.操纵子结构不存在于A、细菌基因组中B、病毒基因组中C、原核生物基因组中D、真核生物基因组中E、大肠杆菌基因组中正确答案：D73.以下不是在移植配型中常用的分子生物学检测技术是A、核酸分子杂交技术B、PCR技术C、基因芯片技术D、免疫组化技术E、基因测序技术正确答案：D74.生物芯片根据芯片上固定的探针种类不同可分为几种，其中不包括A、DNA芯片B、蛋白质芯片C、细胞芯片D、组织芯片E、测序芯片正确答案：E75.目前通过何种技术扩增致病基因仍是PGD诊断单基因疾病的主要手段A、单细胞PCR技术B、微卫星DNA序列C、基因芯片D、变性高效液相色谱分析法E、原位杂交技术正确答案：A76.导致世界范围内性传播疾病的最为普遍的因素是A、鼠衣原体B、沙眼衣原体C、豚鼠衣原体D、鹦鹉热衣原体E、肺炎衣原体正确答案：B77.G-6-PD缺乏时导致机体下列哪些物质增多(↑)或减少(↓)A、H₂O₂、GSH和NADPH↑B、H₂O₂和GSH↑,NADPH↓C、H₂O₂↑,GSH和NADPH↓D、GSH和NADPH↑,H₂O₂↓E、H₂O₂和NADPH↑,GSH↓正确答案：C78.下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争PCRB、巢式PCRC、多重PCRD、普通PCRE、PCR-RFLP正确答案：C79.mtDNA中基因数目为A、39个B、27个C、22个D、37个E、13个正确答案：D80.氟喹诺酮类药物主要作用靶位是A、糖基转移酶B、DNA 旋转酶C、泵蛋白D、吡嗪酰胺酶E、DNA依赖RNA聚合酶正确答案：B81.结核杆菌的分子生物学检验临床意义中不包括A、疗效评价B、快速诊断C、鉴别诊断D、早期诊断E、耐药检测正确答案：D82.SDS是一种阴离子表面活性剂，其可断开蛋白质分子内和分子间的A、氢键B、离子键C、二硫键D、酯键E、疏水键正确答案：A83.下列不属于血友病B间接诊断方法的是A、PCR-RFLPB、PCR-SSCPC、双脱氧指纹图谱D、毛细管电泳E、变性高效液相色谱正确答案：D84.巢式PCR错误的是A、是对靶 DNA 进行二次扩增B、第二次扩增所用的模板为第一次扩增的产物C、巢式PCR可提高反应的灵敏度和特异性D、常用于靶基因的质和(或)量较低时E、第二对引物在靶序列上的位置应设计在第一对引物的外侧正确答案：E85.一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链，这一过程称A、杂交B、复杂性C、探针D、复性E、变性正确答案：A86.次氯酸钠去除临床分子生物学实验室污染源的原理是A、诱导同一 DNA链上相邻的两个嘧啶之间形成嘧啶二聚体B、氧化损伤核酸C、水解核酸D、与扩增产物的嘧啶碱基形成单加成环丁烷衍生物E、与胞嘧啶形成羟氨基胞嘧啶正确答案：B87.以下关于 PR、ER的说法不正确的是A、PR的形成受ER的控制和调节，故 PR阳性的乳腺癌，ER也多为阳性B、ER、PR与乳腺癌患者内分泌治疗的选择、预后密切相关C、刺激激素作用可以达到治疗 ER及PR阴性肿瘤的目的D、正常乳腺细胞存在ER和PR的表达，雌激素和孕激素可通过它们参与调控细胞功能E、其测定可采用多种技术进行，如细胞学、生物化学、免疫学与分子生物学技术B型题正确答案：C88.衣原体中能够引起沙眼的血清型为A、A;B; Ba;CB、A;B;D;EC、A;B;F;HD、A;B;C;KE、A;B;F;L正确答案：A89.mtDNA 突变不会导致A、综合征型耳聋B、非综合征型耳聋C、神经性耳聋D、药物性耳聋E、氨基糖苷类抗生素耳毒性正确答案：C90.PCR-RFLP检测点突变和SNP 时酶的质量控制要求是A、酶体积不要超过总体积5%B、酶体积不要超过总体积10%C、酶体积不要超过总体积15%D、酶体积不要超过总体积2.5%E、酶体积不要超过总体积7.5%正确答案：B91.某临床分子生物学检验项目每2周检测1次，最适用的统计学质控方法是A、累积和质控方法B、Levey-Jennings质控图方法C、Westgard 多规则质控方法D、6 Sigma质控方法E、即刻法质控方法正确答案：E92.对药物代谢个体差异起决定作用因素的是A、年龄与性别B、遗传C、所患疾病D、身体状态E、给药方式正确答案：B93.下列DNA序列中的胞嘧啶易发生甲基化修饰的是A、5'-CCCCCT-3'B、5'-GGGGCC-3'C、5'-CGCGCG-3'D、5'-GCACAC-3'E、5'-CTCTCCC-3'正确答案：C94.判断HBV复制及传染性的直接指标是检测A、HBV DNA多聚酶活力B、HBsAgC、HBV DNAD、HBeAgE、HBcAg正确答案：C95.下列实验材料中不能用于制备染色体的有A、绒毛膜细胞B、骨髓细胞C、胸水细胞D、红细胞E、腹水细胞正确答案：D96.目前基于 MALDI-TOF-MS进行细菌鉴定的主要标志物是A、16S rRNAB、IS6110C、katGD、特异性保守蛋白-核糖体蛋白E、丰度较高的管家基因正确答案：D97.作为芯片固相载体的材料描述正确是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理，其表面存在活性基团(如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理——活化正确答案：A98.下列疾病中发病率与母亲年龄增大有关的是A、血友病 AB、着色性干皮病C、Patau 综合征D、猫叫综合征E、WAGR综合征正确答案：C99.下列不是临床分子生物学实验室分析前质量控制内容的是A、实验室严格分区B、进行核酸提取的有效性评价C、定期进行仪器设备的功能检查、维护和校准D、所用试剂和耗材的质量符合要求E、临床标本的采集、运送和保存符合要求正确答案：B100.迪谢内肌营养不良(DMD)说法错误的是A、基因缺失是 DMD发生的主要原因B、DMD属于X连锁性隐性遗传C、最常用的诊断技术为多重PCRD、抗肌萎缩蛋白结构改变导致DMDE、发病者都为女性正确答案：E。
分子生物学复习提纲
分子生物学复习提纲分子生物学复习提纲一、重组DNA技术1、基本概念1)DNA克隆：获得DNA相同副本或拷贝的过程。
2)基因工程：实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程，又称重组工艺学。
3)限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。
4)DNA载体：携带目的基因，实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。
5)DNA体外重组：在DNA连接酶的催化作用下，将外源DNA分子（目的基因）与载体DNA分子连接成一个重组分子的过程。
6)粘性末端：在双链DNA分子的末端，有一条链的3’或5’端比另一条链的3’或5’端要长，这样的双链DNA分子的末端称为粘性末端。
7)基因组DNA文库：存在于转化细胞内由克隆载体所携带的所有基因组DNA的集合。
2、重组DNA技术的基本过程1)分2)切3)接4)转5)筛6)表达3、重组DNA技术中常用工具酶有哪些？各有什么特点和作用。
限制性核酸内切酶：识别特异序列，切割DNA。
DNA连接酶：催化DNA中相邻的5´磷酸基和3´羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接。
DNA聚合酶：以DNA为模板合成双链DNA分子。
4、作为基因工程载体所需具备的基本条件：1)能自主复制2)有多个单一酶切位点，称为多克隆位点（MCS），利于外源DNA分子插入3)具有两个以上的选择性遗传标记，便于重组体的筛选和鉴定4)分子量小，以容纳较大的外源DNA5)拷贝数高6)具有较高的遗传稳定性人工染色体载体包含的调控元件7、人工接头有什么特点？有什么用途？人工接头特点：有限制性核酸内切酶的酶切位点人工接头用途：在平末端上形成粘性末端8、宿主细胞应具备的条件1)处于感受态2)对载体无严格限制3)限制酶和重组酶缺陷4)不对外源DNA进行修饰5)能表达重组体所提供表型特征9、原核表达体系有什么特点？其优点：简单、迅速、经济、适合大规模生产。
分子生物学复习题纲
下列关于 DNA 复制的说法不正确的有（ A ）。 按 3′ → 5′方向进行 需要 4 种 dNTP 的参与 需要 DNA 连接酶的作用 涉及 RNA 引物的形成 有关滚环复制不正确是（ B ） 可以使复制子大量扩增 产生的复制子总是双链环状 是噬菌体 DNA 在细菌中最通常的一种复制方式 复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的
2．一个复制子是（ ）。 A．细胞分裂期间复制产物被分离之后的 DNA 片段 B．复制的 DNA 片段和在此过程中所需的酶和蛋白质 C．任何自发复制的 DNA 序列（它与复制起点相连） D．任何给定的复制机制的产物（如单环） E．复制起点和复制叉之间的 DNA 片段
13．一个复制子是（ C ）。 A．细胞分裂期间复制产物被分离之后的 DNA 片段 B．复制的 DNA 片段和在此过程中所需的酶和蛋白质 C．任何自发复制的 DNA 序列（它与复制起点相连） D．任何给定的复制机制的产物（如单环） E．复制起点和复制叉之间的 DNA 片段 14．下述特征不是所有（原核生物、真核生物和病毒）复制起始位点都共有的是（ B ）。 A．起始位点是包括多个短重复序列的独特 DNA 片段 B．起始位点是形成稳定二级结构的回文序列 C．多聚体 DNA 结合蛋白专一性识别这些短的重复序列 D．起始位点旁侧序列是 A-T 丰富的，能使 DNA 螺旋解开
在DNA修复过程中除了需要DNA聚合酶外，还需要DNA连接酶
3
，其作用是将DNA中相邻的碱基链接起来，原核生物DNA聚合酶
4
具有两种外切酶活性，分别从5’→3’和3’→5’降解DNA
5
DNA聚合酶Ⅱ和Ⅲ只有3’→5’外切酶活性。
6
DNA修复包括三个步骤： DNA修复核酸酶 对 DNA链上不正
分子生物学复习提纲
分子生物学复习提纲1 绪论P1 现代生物学研究的目标生物学发展的四个重大事件：创世说与进化论、细胞学说、经典生物化学和遗传学、DNA的发现P4 现代生物学的两大支柱？遗传学研究目标；生物化学研究目标生物化学的双重使命P6 噬菌体侵染细菌的过程P8 分子生物学是什么的科学？P11 分子生物学的3条基本原理分子生物学研究的四个方面：DNA重组技术；基因表达调控研究；结构分子生物学；基因组、功能基因组研究2 染色体与DNA核酸的单位，碱基的种类，糖的种类，化学键。
图2-1，2-1P19 一段话P22 染色体特征；真核细胞染色体构成：蛋白质；DNA；染色质和核小体P29 真核生物基因组的结构特点P30 原核生物基因组：结构、转录单元、重叠（有三种情况）P32 DNA一级结构；DNA二级结构；P36 DNA的高级结构，第一段话P38 半保留复制；复制的起点、方向和速度P40 复制的几种主要方式P44 原核生物DNA复制的特点P48 整合生物DNA复制的特点P51 DNA的修复P56 转座子、种类和结构特征P62 转座作用的特征，转座的种类3 生物信息的传递（上）P66 第二与第三段P67----P95都很重要，全部看。
P99 RNA的编辑，第二段P101 RNA编辑生物学意义；RNA的在编码P102 RNA的化学修饰；核酶P104 核酶种类和特点4 生物信息的传递（下）P107----P147都很重要，全部看。
5 分子生物学研究方法P155----p166重要。
P170 基因文库构建第一段P172本页全看P176 基因文库筛选方法有哪些P178 什么是SNP，分为哪三类P182 基因克隆技术第一段P187 蛋白质组学，第一段P188 双向电泳技术依赖蛋白质什么特性，做什么用的？7 基因的表达与调控（上）P231----P244，都很重要，全部看P246----P249 色氨酸操纵子8 基因的表达与调控（下）P280 最后一句话P281 一段话P282----P296，全部看P298 增强子特性9 疾病与人类健康P338 癌，肿瘤医学研究的三项成就；癌基因分类；P351 人类免疫缺陷病毒：病毒颗粒的形态结构和传播；P355 HIV的复制过程62 感染及致病机制P364 乙型肝炎病毒：病毒粒子结构；P368 HBV的复制过程自己学习人禽流感病毒。
分子生物学复习提纲资料讲解
分子生物学复习提纲1绪论证明基因就是DNA的实验。
中心法则的内容2 核苷酸的组成与结构（DNA RNA 组成结构）Chromosome Genome chromatin nucleotide pyrimidine purine Histon e真核细胞染色体的组成组蛋白的性质构成染色体的非组蛋白C value C value paradox Overlapping genes真核细胞DNA序列大致可分为3类：不重复序列中度重复序列高度重复序列Nucleosome组成DNA包装成染色体的过程chromatin structure 10nm fiber 30nm fiber原核细胞DNA的特点Semiconservative replication Replicon Semidiscontinuous replication SSB 蛋白DNA helicase Okazaki fragment PrimaseDNA的一级结构二级结构的特点A－B－Z－DNA的比较Z－DNA如何调控转录的DNA的高级结构为什么在DNA中通常只发现A—T和G—C碱基配对？那些条件可以促使DNA退火？DNA复制的主要方式（线性环状分几种类型）复制的起点方向速度原核生物复制的特点、过程DNA polymerase（原核真核）Klenow 酶DNA repair大肠杆菌中DNA的修复系统Mismatch repair Base excision repair Nucleotide excision repair Direct repair SOS repairTransposon 分类结构特征转座机制遗传效应真核生物中的转座子Ac element Ds element3转录Transcription translation sense strand coding strand template strand antisense strand Antisense gene Pseudogene initiator转录的基本过程（模板识别起始延伸终止）RNA polymerase 组成core enzyme holoenzyme σ亚基真核生物种三类RNA polymerase转录起始复合物的转换Promoter terminator transcription unit transcription factor core promoter initiation elongation termination转录起点真核原核生物启动子的结构原核生物转录的过程真核生物RNA polymerase I RNA polymerase II RNA polymerase III的启动子的结构RNA polymerase II 指导的基因转录过程-10 -35 区的最佳距离Enhancer 特点功能Upstream promoter element upstream activating sequence真核生物与原核生物mRNA的特征比较Cap ployA Cistron依赖、不依赖ρ因子的终止子抗终止作用Intron exon RNA splicing heterogeneous nuclear RNA ORF、splicesomeAlternative splicing生物体内的内含子的种类不同内含子的加工机制RNA editing snoRNA RNA processing Ribozyme GU-AG rule hnRNP4 翻译cognate RNA genetic codon mutation frameshift mutation Nonsense mutation codon biasinitiation codon terminator codon null mutation密码的性质简并性degeneracySynonymous codon wobbletRNA的结构种类ribosome 结构功能氨酰tRNA合成酶作用机制rRNA 种类为什么rRNA和tRNA分子比mRNA分子稳定？翻译的机制protein translocation 蛋白质前提的加工修饰蛋白质合成抑制剂蛋白质的转运降解Ubiquitin Molecular chaperone Signal peptide leader peptide5 原核真核基因表达调控Constitutive expression Negative regulation Repressor induction repression Regulator gene AttenuationGene expression coactivator inducer inducible gene negative/positive control negative/positive inducible Negative/positive repressible regulator gene structural gene pppGpp（ppGpp）operon operatorLactose operon 结构调控机制色氨酸操纵子的结构及调控机制Leucine zippe zinc fingercis-acting elements trans-acting factor Transcription factor Gene family interrupted gene euchromatin gene cluster housekeeping gene hypersensitive site真核生物DNA水平上的基因表达调控染色质结构对基因表达的影响基因的丢失基因的扩增基因的重排DNA的甲基化DNA甲基化乙酰化与基因的活性调控真核生物与原核生物在基因转录、翻译及DNA空间结构方面存在的差别？常见的顺式作用元件有哪些怎样作用的转录因子的DNA结合域分别有哪些，各自的作用特点是什么？分子生物学研究方法及实验技术cloning RNAi cDNA/genomic library Gene chip Transformation Hybridization Proteome probeYeast artificial chromosome plasmid Physical map ligation cloning vector expression vectorVector PCR blotting Restriction and modification DNA ligase denaturation endonuclease gene knockout蓝白斑筛选（α互补实验）重组DNA操作的基本步骤是什么基因工程中良好载体的条件分子杂交的原理southern northern blotting步骤基因工程常用的几种酶各自的作用特点质粒DNA 基因组DNA 提取的方法有哪些提取过程中常见试剂的作用PCR反应过程反应体系基本要素组成利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA一级结构的原理与方法？对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面？。
分子生物学复习题总结教学提纲
分子生物学复习题总结一、简述DNA二级结构的特点双螺旋：DNA两条核苷酸链反向平行，以一定平行距离绕一个轴盘旋，形成一个右旋的双螺旋体。
主链：磷酸和核苷酸排列在双螺旋外侧，彼此通过3-5磷酸二脂键相连接，形成主链。
碱基配对：两条主链相对应的碱基按照AT和GC的配对原则由氢键相连，其中AT之间由两个氢键相连，GC之间由三个氢键相连。
主链上碱基排列顺序储藏了遗传密码信息。
结构尺寸和大小沟：DNA双螺旋分子直径为2nm，螺距为3.4nm，其中包括10个碱基对，碱基与碱基之间距离为0.34nm。
螺旋外部有两个凹槽，根据大小分为大小沟，都能使蛋白质分子进入而与碱基相接触。
二、核酸的变性DNA二级结构和三级结构受到物理化学因素的破坏而解体，但其一级结构核苷酸间共价键并不断裂。
DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象。
变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂，碱基间的堆积力遭到破坏，但不涉及到其一级结构的改变。
凡能破坏双螺旋稳定性的收集于网络，如有侵权请联系管理员删除因素，如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等，均可引起核酸分子变性。
三、核酸的复性变性DNA在适合的条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合，按原来的碱基对配对形成双螺旋结构的过程。
影响因素：DNA长度、序列、浓度四、核酸杂交不同来源但具有同源性的两条DNA或RNA单链按照碱基配对原则结合在一起，这一过程就是杂交。
杂交充分利用了核酸的变性和复性的特性，在DNA之间，DNA和RNA之间以及RNA之间均可进行，已成为分子生物学中重要的技术。
五、DNA损伤、修复与基因突变三者的关系。
由体内因素和环境因素原因导致DNA分子结构的任何异常改变都可看作是DNA损伤。
细胞内还存在着长期进化中建立和发展起来的DNA修复保障系统，可针对DNA的损伤及时进行清除和修复。
收集于网络，如有侵权请联系管理员删除突变是指突变生物体内DNA结构的任何改变，主要指DNA分子中核苷酸序列的改变，包括替换、插入、重排、缺失等。
医学分子生物学复习提纲.doc
基因：具有特定生物遗传信息的DNA序列，在一定条件下能够表达这种遗传信息，产生特定的生理功能。
基因是遗传的基本单位。
移动基因(movable gene):又叫转位因子(transposable elements),由于它可以在染色体基因组上移动，甚至可在不同染色体间跃迁，故又称跳跃基因(jumping gene),后来称这种DNA片段为插人序列(insertion sequences, IS),现在一般叫做IS因子(IS elements),其长度介于数百个到数千个碱基对之间。
断裂基因(split gene):在真核细胞的核昔酸序列中间插入与氨基酸编码无关的DNA间隔区段，使一个有功能的结构基因分隔成不连续的若干区段,将含有该间隔区段的DNA片段称为断裂基因(split gene)。
重叠基因(overlapping gene):不同基因的核昔酸序列有时为相邻两个基因共用，将核昔酸彼此重叠的两个基因称为重叠基因。
假基因(Pseudogenesi):在珠蛋白基因簇(gene cluster)各片段核昔酸序列分析时发现，除了有正常的功能基因之外，还有功能失活的特殊序列片段，它不能行使表达功能。
该类无表达功能的畸变核昔酸序列片段，称为假基因。
常用W表示。
重复序列及重复基因：指序列的重复性。
可分为四种类型：1单拷贝序列(unique sequence)(不重复序列)：2低重复序列：3中度重复序列 (moderatedly repetitive sequence):4 高度重复序歹0 (highly repetitive sequence)：卫星 DNA (satellite DNA)及微卫星 DNA 微卫星：同一物种的基因组DNA含量总是恒定的，一个单倍体基因组中的全部DNA量称为该物种DNA的C 值(C value)。
与进化复杂性不一致的C值反常现象称为C值矛盾启动子是启动基因转录所必需的一段DNA顺式调控元件。
《分子生物学》复习资料.docx
分子生物学“95%疾病产生的原因源自基因的无序表达。
”分子生物学的意义，就是消除疾病。
第一章绪论分子生物学研究：核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。
1861年，孟德尔的豌豆杂交试验揭示遗传的物质性（性状表征）1909年,Wilhelm Ludvig Johannsen使用"基因"代表遗传学最基本单位。
1910年，Morgan （美）通过果蝇实验证明：基因遗传性状分离，基因连锁交换现象。
1928年，Griffith （英）肺炎双球菌转化实验。
10年后，Avery （美）证明DNA分子是遗传信息的有效载体。
即标记核昔酸，％标记氨基酸。
噬菌体侵染过程：1尾端吸附，2 DNA注入，3利用细菌生命过程合成自身物质，4合成新 DNA和蛋白质，并组装为新子代噬菌体，5细菌裂解，噬菌体释放。
1953年，Watson和Crick提出脫氧核糖核昔酸的双螺旋膜型。
1958年,Crick提出中心法则。
基因表达调控主要表现：信号转导、转录因子、RNA剪辑。
基因组：人体全部基因总和。
蛋白组：人体全部蛋白总和基因组计划：人体全部基因序列测序。
蛋口组计划（后基因组计划）：鉴定基因产物和功能。
第二章染色体与DNA真核细胞染色体蛋白质组成：组蛋片（染色体结构蛋白，组成核小体）、非组蛋白（RNA聚合酶、肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白）组蛋白特点：1进化上的极端保守性。
2无组织特异性。
3肽链上氨基酸分布不对称。
4具有修饰作用：甲基化、磷酸化5富含赖氨酸的组蛋白H5真核生物基因组DNA分类：1不重复序列：结构基因基本为单拷贝基因2中都重复序列：3髙度重复序列：只在真核生物内出现，不转录。
包含：卫星DNA.反相重叠序列（互补序列重复）、较攵杂单位的重攵（灵长类特有）DNA包装步骤：1核小体的组成：组蛋白+200bp DNAo•核小体组蛋白:H2A S H2B、出、出各两分子生成的八聚体，并伴有Hi在核小体在外边, 直径lOnmo2将200bp的DNA分子（2nm）缠绕在核小体外,从68nm压缩到10nm中，压缩率1/73六个核小体形成一个螺线管，压缩率1/6,直径30血4螺线管形成超螺线管，压缩率1/40,直径4000nni5超螺线管形成染色单体，压缩率1/5原核生物基因组特点：1结构简单2存在转录单元3有重壳基因DNA的一级结构：四种核昔酸的连接排列顺序。
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临床分子生物学检验复习提纲精编W O R D版 IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】临床分子生物学检验1.DVA的一级结构是由哪种化学键连接？两条单链间：碱基氢键；相邻碱基间：范德华力；脱氧核苷酸间：3’-5’磷酸二酯键2.可以出现在人体循环系统中的游离核苷酸是？脱氧核苷酸，核糖核酸3.原核生物DNA的复制方式是？θ型半保留复制4.核小体结构中的组蛋白是哪些蛋白各自的作用有5.H2A、H2B、H3、H4：核心颗粒，形成核小体。
H1：连接线上，锁定核小体、参与包装6.PCR体系中抑制Taq酶活性的物质有哪些过量加入什么会减少Mg2+浓度导致Taq酶活性降低7.游离的Mg2+浓度；dNTP、引物和模板DNA等中的磷酸基团，螯合剂如EDTA均可与镁离子结合减少Mg2+浓度。
8.PCR扩增时，链的延伸从什么地方开始对于引物是哪一端模板链呢从引物的3’端开始，方向5’到3’；模板DNA序列的3’端；3’端9.在波长260nm的紫外线下，A值=1时双链DNA的浓度大约相当于？50ug/ml的双链DNA。
（40ug/ml的单链DNA或单链RNA ，33ug/ml的单链寡聚核苷酸）（紫外分光光度法，核酸浓度的鉴定）计算公式：双链DNA ＝ 50×A260样本×稀释倍数÷1000（ug/ul）单链DNA／RNA ＝ 40×A260样本×稀释倍数÷ 1000（ug/ul）单链寡聚核苷酸DNA ＝ 33×A260样本×稀释倍数／1000（ug/ul）10.关于基因的定义正确的是？能编码有功能的蛋白质多肽链或合成RNA所必需的全部核酸序列，是核酸分子的功能单位。
是遗传的结构和功能单位。
一个基因大都包括编码蛋白质多肽链或RNA的编码序列，保证转录和加工所必须的调控序列（启动子，增强子），5’端、3’端非编码序列。
11.β—地中海贫血患者的基因缺陷主要是？12.基因突变中的点突变10.Taq酶的特性有？有很高的耐热稳定性酶量增加使反应特异性下降，酶量过少影响反应产量；Taq DNA聚合酶无3′→ 5′外切酶活性，因而无校正功能，在复制新链的过程中会发生碱基错配；Taq DNA聚合酶在每次循环中产生的移码突变率为1/30000，碱基替换率为1/8000，因此扩增的片段越长，错配的机率越高。
11.实时荧光定量PCR技术中非特异性荧光染色技术？SYBR Green I12.人类基因组DNA多态性的形式？限制性片段长度多态性（RFLP）；短序列重复序列（STR）;单核苷酸多态性（SNP）13.常用于菌种鉴定的分子标志物是？16sRNA14.真核生物染色体的DNA三级结构不是闭环双链超螺旋结构的是？15.原核生物RNA聚合酶的特性有？原核生物细胞中只有1种RNA聚合酶，可参与合成mRNA、tRNA和rRNA。
RNA聚合酶催化聚合反应时需要Mg2+或Mn2+。
该酶无校正功能。
16.PCR反应的特异性取决于？引物17.DNA的变性是指？在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。
变性后其它理化性质变化：增色效应粘度下降比旋度下降浮力密度升高酸碱滴定曲线改变生物活性丧失18.参与DNA复制的酶有哪些？（1）DNA聚合酶（2）拓扑异构酶：:兼具内切酶和连接酶活力，能迅速将DNA超螺旋或双螺旋紧张状态变成松驰状态，便于解链。
(3）DNA解链酶（4）单链结合蛋白(SSB)：结合在解开的DNA单链上，防止重新形成双螺旋。
(5）引物酶和引发体：启动RNA引物链的合成。
(6）DNA连接酶19.第一个分离到的抑癌基因是？视网膜母细胞瘤基因（Rb基因）20.1978年简悦威采用Southen分子杂交技术检测出了什么疾病？镰状细胞贫血症21.核酸的分离和纯化中，沉淀DNA的常用试剂是？常用的有机溶剂有：乙醇、异丙醇、聚乙二醇常用的盐类有：醋酸钠、醋酸钾、醋酸铵、氯化钠、氯化钾、氯化镁等。
22.通过紫外分光光度法可对核酸纯度进行鉴定，怎么鉴定反过来是否成立否23.通过A260与A280的比值来判断有无蛋白质的污染。
在TE缓冲液中：纯DNA的A260／A280比值为1.8；纯RNA的A260／A280比值为2.0【注意事项：（1）蛋白质及酚的污染均可使比值下降，可通过蛋白质在280nm的高吸收峰与酚在270nm的高吸收峰来鉴别。
（2）RNA污染可致DNA样品的比值高于1.8。
（3）比值为1.8的DNA溶液不一定是纯DNA溶液，可能兼有蛋白质、酚、RNA的污染。
（4）2.0是高质量的RNA的标志，但由于RNA二级结构的不同，其读数可能会在1.8～2.1之间波动。
（5）RNA溶液的pH值会影响A260／A280的读数，在水溶液中A260／A280的比值比在Tris缓冲液（pH7.5）的读数低0.2～0.3。
因此，精确测定RNA的浓度应使用水溶液，精确测定RNA的纯度应使用Tris10mmol/L（pH7.5）溶液。
】23.对于等位基因突变位点已被阐明的一些遗传病，可以采用基因诊断的方法是？直接诊断：Southern 印迹技术多重PCR技术PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）等位基因特异性寡核苷酸（ASO）DNA芯片技术（DNA chip）单链构象多态性（SSCP）变性梯度凝胶电泳（DGGE）DNA序列分析（DNA sequencing）24.限制性内切酶的（通常指Ⅱ类）特点是（Ⅱ类限制性核酸内切酶识别序列特点）回文结构CCTAGGGGTACC切口：平端切口 -- 平末端粘端切口 -- 粘性末端【同功异源酶：来源不同的限制酶，能识别和切割同一位点。
同尾酶：有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同，但切割DNA后产生相同的粘性末端】例如:淀粉液化芽胞杆菌（Bacillus amyloliguefaciens）H株第1种限制性内切酶，命名为Bam HⅠ25以mRNA为模板合成cDNA的酶是（RT—PCR内容）逆转录酶26.Sanger法DNA测序时ddNTP（双脱氧核苷酸，少一个羟基）的作用是？ddNTPs 是反应终止剂，可以当作正常碱基参与复制，一旦链入DNA中，其后就不能再继续连接。
27Southern印迹法的步骤有？①待测核酸样品的制备②琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品③电泳凝胶预处理④转膜⑤探针标记⑥预杂交⑦Southern杂交⑧洗膜⑨放射性自显影检测28.DVA芯片技术的本质？核酸分子杂交技术29.影响限制性内切酶活性的物质有？乙醇、EDTA、SDS、酚、氯仿和Mg2+等某些高浓度金属离子,均会降低限制酶的催化活性,甚至使限制酶不起作用.30.大肠杆菌（原核生物）基因组的特点？DNA较小；基因数目较少；通常为一条环状双链DNA（dsDNA）；只有一个DNA复制起始点；GC含量差异很大；基因组DNA位于细胞中央的核区，无核膜，形成类核结构；结构基因中无内含子；多数为单拷贝基因，编码rRNA、tRNA的基因为多拷贝；具有编码同功酶的基因。
31.乙肝病毒（病毒）基因组特点？①分子较小，基因数少；②双链DNA病毒（逆转录：是一类特殊类型的单链正链RNA病毒，含有RNA指导的DNA聚合酶，能使RNA反转录生成DNA。
）【每种病毒只含一种核酸（RNA或DNA），可为双链或单链、环状或线性】③基因组中有基因重叠现象；④有操纵子结构和相关基因丛集；⑤少或无重复序列；⑥基因组中编码序列占90%以上；⑦含有不规则结构基因。
32检测目标是RNA的杂交技术是？Northern印迹杂交32.检测目标是DNA的杂交技术是？Southern印迹杂交、反向点杂交（RDB）、原位杂交33.细胞内寿命最短的RNA是？mRNA34.细胞内含量最多的RNA是？rRNA35.细胞内具有调控功能的RNA是？miRNA37.PCR结果电泳图的阅读，各个条带分别代表的意义哪些是marker, 哪些是有效条带38.39.哪些是非特异扩增哪些是引物二聚体产生这些条带的原因①DNA模板浓度过高引物浓度过高，形成引物二聚体Taq DNA聚合酶酶量过多dNTP浓度过高Mg2+浓度过高退火温度过低延伸时间过长C+G碱基含量在引物中比例过高②【引物二聚体是在PCR反应中，两条引物上的互补碱基相结合形成的聚合体，这种聚合体出现了，就相当于原本可以扩增的原料链减少了，即会导致扩增的效率降低。
】其中很重要的一个就是引物自身的原因，也就是设计的引物特异性不好，不能有效的和模板进行结合，而出现引物自身配对结合的情况其次还可能是PCR体系及反应条件的问题，如果PCR体系中引物、镁离子以及酶浓度过高，模板量过低，退火时间过长等，都容易产生二聚体39.根据碱基互补原则计算DNA中ATGC各种的含量？40.和人类线粒体基因组有关的疾病有哪些（了解）耳聋，糖尿病41.RNA链的合成方向？5’→ 3’42.抑癌基因的作用？（存在于正常细胞内的一类可抑制细胞过度生长与增殖的基因，从而有潜在抑癌作用，当这类基因发生突变、缺失或失活时，可引起细胞恶性转化而导致肿瘤的发生。
）①诱导终末分化②维持基因稳定③触发衰老，诱导细胞程序性死亡④抑制蛋白酶活性或改变DNA甲基化酶活性⑤调节血管形成⑥促进细胞间联系43.参与原核生物转录终止的因子是？ρ因子【原核生物转录的终止有两种主要机制.一种机制是需要蛋白质因子ρ（Rho）的参与,称为依赖ρ因子(ρfactor)的转录终止机制,另一种机制是在离体系统中观察到,纯化的RNA 聚合酶不需要其他蛋白质因子参与,可使转录终止,称为不依赖ρ因子的转录终止机制.】44.原核生物DNA聚合酶Ⅰ具有的酶活性有？主要用于修复DNA5’→ 3’聚合酶活性与延伸能力3’→ 5’外切酶活性与校对功能（保真性）5’→ 3’外切酶活性与切口平移45.编码血红蛋白β链第六位谷氨酸的密码由GAG突变为GTG所引起的血红蛋白病为?46.镰刀状红细胞贫血47.PCR反应中的污染最主要的来自于？污染主要来自于：扩增产物的污染（为最主要的来源）、试剂及器材污染、标本间的交叉污染、实验人员的污染等。
【污染是导致PCR假阳性的主要原因。
】48.翻译的基本方式（基本过程/进位、转钛、移位）成为什么循环？核糖体循环49.核酸的分离与纯化的步骤有哪些第一步是什么50.①核酸的释放②核酸的纯化③核酸的浓缩和沉淀④核酸的鉴定与贮存49.基因诊断的方法对感染性疾病进行诊断的主要优点是？快速、灵敏、特异等优点50.原核生物DNA聚合酶具有的酶活性有？5’→ 3’聚合酶活性与延伸能力3’→ 5’外切酶活性与校对功能（保真性）5’→ 3’外切酶活性与切口平移51.影响融解温度（Tm值）的因素/影响DNA变性的因素有？①Tm值取决于核酸分子的G-C含量②温度；溶液PH值；变性剂（如尿素、酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等）52.基因诊断的间接诊断策略中的不确定性的原因是？遗传标志所带的信息有限新突变基因重组家系成员不够完整53.在基因组DNA的提取过程中为了保护DNA一级结构的完整性而应该采取的措施有？苯酚的使用：（1）使用还原酚：氧化酚可使DNA断裂。