水样中苯酚测定

反相色谱法测定环境水样中苯酚的含量

一．实验目的

1. 熟悉液相色谱仪的基本构造和操作方法

2. 学会利用内标法对物质进行色谱定量分析

二．仪器与试药

仪器：

高效液相色谱仪（日本岛津10AVP型）、溶剂过滤器、样品溶液过滤器、微量进样器

试药：甲苯（分析纯）、苯酚（分析纯）、甲醇

三、色谱条件

色谱柱：C18（250×4.6，5um）

流动相：甲醇-水=70：30 （v/v）

检测器及检测波长：紫外检测器254nm

流速：1.0ml/min

四、实验操作

1. 内标物溶液的配制：准确称取一定量的甲苯，加甲醇溶解后制成0.5 mg/mL的内标溶液。2．对照品溶液的配制：准确称取苯酚对照品适量，加甲醇溶解后制成0.4 mg/mL的对照品溶液。

3. 调用或创建咖啡因测定方法并运行方法

4. 测定

⑴校正因子的测定：取400uL内标溶液和200uL对照品溶液混合。待基线平稳后，吸取5μL 进样。

⑵样品测定：取400uL内标溶液和200uL样品溶液混合。待基线平稳后，吸取5μL进样。

五、数据处理及计算

六、思考题

1.如何判断第一个色谱峰就是苯酚的峰？

2.简述三种定量方法的优缺点。