Powerlab 数据采集分析系统

合集下载

PowerLab系统工作原理、功能及应用 2008.12.12

PowerLab系统工作原理、功能及应用 2008.12.12

多导电生理仪的介绍:PowerLab系统工作原理、功能及应用上海中医药大学附属龙华医院科研实验中心王佑华PowerLab生物信号采集处理系统(简称PowerLab系统)是由澳大利亚ADInstruments公司研制开发的计算机数据采集分析系统,可实现多通道生物信号数据的实时采集、记录和分析功能,包括软件和硬件两个部分。

该系统具有多种采样速率和卓越的分辨率,为生命科学的研究提供了强大的功能,己经成为全球使用最为广泛的生物信号采集分析系统之一,在世界各个国家已广泛用于生命科学的研究。

在Pubmed上输入“PowerLab”一词,就可以得到多达7000多个结果。

目前SCI影响因子TOP10的杂志上都时常可以看到应用该系统研究的报道,但多见于心血管、神经科学领域,目前在胃肠系统研究领域的应用有逐渐增多的趋势。

PowerLab系统经过ADInstruments公司近20年来的改良,已经成为全世界在该领域应用最为广泛的多导生理记录仪。

90年代初,PowerLab被部分科学家带进了中国。

1997年ADInstruments在上海成立了办事处,2000年成立了中国公司,2002年公司发布中文软件。

但时至今日,公司竟然还没有推出一份中文操作手册,chart for windows中文软件至今也没有中文操作指南。

ADInstruments公司官方网站上,尽管软件和硬件不断升级换代,但对该系统工作原理、功能及应用始终描述不多。

而中文网站翻译之后又省掉了许多信息,而且很久没有更新,现在基本还是4年前笔者博士期间看到的样子。

这在一定程度上影响了该系统的普及应用。

结合我院实际,本文就PowerLab系统工作原理、功能及应用作一简述。

1.PowerLab系统工作原理、功能应用PowerLab系统通过对生物电(心电、肌电、脑电等)与非生物电信号(压力、温度、pH等)进行采集,然后对采集到的信号进行加工处理,再由USB线将信号传输到计算机系统上的Chart软件,软件最后对采集到的生物电信号进行保存、显示、处理、将处理结果导入Excel 表格、定制实验、数据回放、在线分析、采样过程控制及打印输出结果等多种操作。

用压力-容积环评价大鼠心功能方法的改进及注意事项

用压力-容积环评价大鼠心功能方法的改进及注意事项

用压力-容积环评价大鼠心功能方法的改进及注意事项刘晓雨;谭文【摘要】Objective To investigate the key factors for PV Loop evaluation in rats and to improve this method. To provide examples of cardiac function measurements obtained from normal rats and from rats with cardiac hypertrophy induced by transverse aortic constriction ( TAC ) . To establish a more reliable method for rats heart measurements. Methods Rats underwent left ventricular catheterization through the right carotid artery. Through adjustments of the position of the pressure⁃volume conductance catheter, the optimal PV Loops and a number of cardiac functional parameters were acquired. The key influencing factors, calibration of volume, position of the catheter in the left ventricle ( LV) and suspension of ventilator were assessed. Results 1. The real volume of left ventricle were acquired by injecting appropriate volume of hypertonic saline through jugular vein, which deducted the parallel conductivities of ventricular wall. 2. To get better PV loops, it’ s important to adjust the position of the catheter in the left ventricle until all of the pressure and volume sensors were located in the ventricle as well as out of touch with the ventricular wall. 3. Suspension the ventilator during the test is conducive to stable and reasonable data acquisition. We further assessed the cardiac functions of healthy rats and rats with cardiac hypertrophy with this improved method, which showed better performances. Conclusions This study we have evaluated the influences of calibration of volume,position of the catheter in the left ventricle ( LV) and ventilator on measurements of rats PV loops, and further improved this method. Moreover, we have validated this method with measurements of cardiac functions of normal rats and cardiac hypertrophic rats.%目的:探讨应用压力⁃容积环( pressure⁃volume loop,PV Loop)评价大鼠心功能过程中的影响因素及方法改进原则,分析主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)诱导的压力负荷对大鼠心脏功能的影响,从而为大鼠健康或疾病状态下的心功能分析提供更为科学全面的方法。

4-苯基丁酸对糖尿病大鼠的心脏保护作用

4-苯基丁酸对糖尿病大鼠的心脏保护作用

4-苯基丁酸对糖尿病大鼠的心脏保护作用何玉莲;熊燕;张梅【摘要】目的:观察4-苯基丁酸(4-PBA)对糖尿病大鼠心脏功能的影响并初步探讨其机制。

方法♂Sprague-Dawley ( SD)大鼠随机分成3组:对照组、糖尿病组和糖尿病+4-PBA组。

单次腹腔注射链脲佐菌素(60 mg·kg-1)诱发大鼠糖尿病,在1型糖尿病模型制备成功后第5周开始每天给予大鼠4-PBA(1g·kg-1)灌胃,连续治疗20周。

实验结束后,经右颈总动脉插管检测大鼠大动脉和左心室血流动力学变化,同时收集血清和心脏,比色法检测血糖,血清和心肌组织中超氧化物歧化酶( SOD)和一氧化氮合酶( NOS)活性,丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量。

结果4-PBA治疗对糖尿病大鼠血糖、体重和心脏重量无明显影响,但可改善糖尿病大鼠血流动力学,表现为大动脉收缩压和舒张压、心率、左心室收缩压和左心室内压最大上升和下降速率(± dp/dt)的轻度升高,左心室舒张压的轻度降低和舒张时程的缩短(P>0.05),左心室弛缓时间明显缩短(P<0.05)。

4-PBA治疗尚可明显升高糖尿病大鼠血清和心肌组织SOD和NOS活力以及NO含量,并降低MDA含量(P<0.05)。

结论4-PBA治疗对糖尿病大鼠心脏有潜在保护作用,这一作用是通过改善糖尿病大鼠血流动力学和明显缓解其心脏舒张功能障碍而实现,并与其抑制动物体内氧化应激和促进心肌NO生成有关。

%Aim Tostudytheeffectof4-phenlybuty-rate acid(4-PBA) on the heart function of diabetic rats and to explore its underlying mechanism. Methods MaleSprague-Dawley(SD)ratsweredividedintothree groups randomly: ( 1 ) control rats;( 2 ) diabetic rats;(3) 4-PBA treated diabetic rats. Type 1 diabetic mod-el was induced by single intraperitoneal injection of strepotozotocin (60 mg·kg-1 ) . After five weeks dia-betic model was established, diabetic rats weretreated with 4-PBA by P. O at the dose of 1 g·kg-1 per day for 20 weeks. At the end of the experiment, hemody-namics of the left ventricle and main artery were detec-ted through right carotid artery cannulation in rats. The level of blood glucose, the activity of superoxide dis-mutase( SOD) and nitric oxide synthetase ( NOS) and the content of malondialdehyde ( MDA ) and nitric ox-ide( NO) of serum and myocardial tissue in rats were measuredbycolorimetry.Results Thetreatmentof4-PBA had no effect on blood glucose, the weight of body and heart, but slightly increased systolic and diastolic pressure of artery, heart rate, systolic pressure of left ventricular, maximum increase rate and minimum de-crease rate of left ventricular pressure( ± dp/dt) in di-abetic rats. It also slightly decreased diastolic pressure of left ventricular, shortened diastolic duration of left ventricular ( P > 0. 05 ) . Moreover, it significantly shortened relaxation time of left ventricular in diabetic rats (P<0. 05). In addition, the treatment of 4-PBA obviously enhanced the activity of SOD and NOS, NO content, and reduced the content of MDA in serum andheartofdiabeticrats(P<0.05).Conclusion 4-PBA has a potential protective effect on heart function in diabetic rats, which is achieved by ameliorating he-modynamics and significantly improving diastolic dys-function in diabetic rats. The underlying mechanism may be related to the inhibition of oxidative stress and promoting the genesis of NO in myocardial tissue.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】5页(P1137-1141)【关键词】糖尿病;心功能;4-苯基丁酸;血流动力学;氧化应激;一氧化氮【作者】何玉莲;熊燕;张梅【作者单位】广州医科大学药学院蛇毒研究所,广东广州 510082;广州医科大学药学院蛇毒研究所,广东广州 510082;广州医科大学药学院药理学教研室,广东广州 510082【正文语种】中文【中图分类】R-332;R322.11;R331.31;R587.102.2糖尿病患者易并发心血管疾病,其中糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)是患者的主要致死原因之一。

甲泼尼龙琥珀酸钠对窒息型大鼠复苏后早期的心功能影响

甲泼尼龙琥珀酸钠对窒息型大鼠复苏后早期的心功能影响

甲泼尼龙琥珀酸钠对窒息型大鼠复苏后早期的心功能影响朱旻婕;李响;方唯一【摘要】目的:探讨甲泼尼龙琥珀酸钠(甲强龙)对窒息大鼠模型心肺复苏后早期心功能的影响及机制.方法:45只SD大鼠,雌雄不拘,分为对照组、常规复苏组(常规复苏+肾上腺素10μg/kg)和甲强龙组(常规复苏+肾上腺素10μg/kg+甲强龙1.8mg/kg).对窒息大鼠模型进行心肺复苏,记录平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)和左心室舒张末压(LVEDP)的变化,ELISA法检测大鼠心脏组织中肾上腺素能α1受体和β1受体水平.结果:在心肺复苏自主循环恢复(ROSC)30 min后,与对照组比较,常规复苏组及甲强龙组大鼠的MAP和LVSP均有明显下降(P均<0.05);在ROSE后0、15 min时,常规复苏组及甲强龙组LVEDP与对照组相比有显著性差异(P均<0.05).甲强龙组MAP在ROSC后60、120 min时,LVSP在ROSC后30、60、120 min时均显著高于常规复苏组(P均<0.05).心肺复苏后,甲强龙组与对照组、常规复苏组比较,心脏组织中肾上腺素能α1受体和β1受体水平均明显升高(P 均<0.05).结论:甲强龙可提高心肺复苏后心脏组织内肾上腺素能α1受体和β1受体含量,有利于心肺复苏后MAP和LVSP的稳定.%Objective:To investigate the effects and mechanism of methylprednisolone on myocardial function at early stage of resuscitation in the rats model of asphyxia. Methods:A totalof 45 health SD rats were randomly divided into the controlgroup,conventional resuscitation group (routine resuscitation + epinephrine 10 μg/kg ) and methylprednisolone group (routiner esuscitation +epinephrine 10 μg/kg + methylprednisolone 1.8mg/kg).Hemodynamic indexes of mean arterial pressure (MAP),left ventricular systolic pressure (LVSP)and left ventricular end-diastolicpressure (LVEDP)were collected to estimate myocardial function.The levels ofα1 andβ1 adrenoreceptors in the cardiac tissue were detected by ELISA. Results:At 30min,60 min and 120 min after recovery of spontaneous circulation (ROSC ), the MAP and LVSP of conventional resuscitation group and methylprednisolone group were significantly decreased compared with the control group (all P<0.05). The LVDEP of conventional resuscitation group and methylprednisolone group were significantly higher than that of the control group at 0 min and 15 min after ROSC (all P<0.05).However,the MAP of methylprednisolone group was significantly higher than that of conventional resuscitation group at 60 min and 120 min after ROSC (both P<0.05 ).The LVSP of methylprednisolone group was significantly higher than that of conventional resuscitation group at30min,60min and 120min after ROSC (all P<0.05).The levels ofα1 andβ1 adrenoreceptors in the cardiac tissue of methylprednisolone group were significantly increased compared with the control group and conventional resuscitation group after cardiopulmonary resuscitation (all P<0.05 ). Conclusion:The methylprednisolone can increase the levels of theα1 andβ1 adrenoreceptors in the cardiac tissue,which is beneficial to the stabilization of MAP and LVSP after cardiopulmonary resuscitation.【期刊名称】《国际心血管病杂志》【年(卷),期】2017(044)001【总页数】4页(P26-29)【关键词】心肺复苏;心功能不全;甲泼尼龙琥珀酸钠【作者】朱旻婕;李响;方唯一【作者单位】200030 上海交通大学附属胸科医院心内科;201199 上海市闵行区中心医院重症监护室;200030 上海交通大学附属胸科医院心内科【正文语种】中文心肺复苏后心功能不全是引起复苏成功后死亡的主要原因之一[1]。

白藜芦醇对大鼠海马CA1区诱发癫痫样放电的影响

白藜芦醇对大鼠海马CA1区诱发癫痫样放电的影响

白藜芦醇对大鼠海马CA1区诱发癫痫样放电的影响尤竹燕;王斌生;解敏;李珍;王烈成【摘要】Aim To investigate the effects of resvera-trol with different concentrations on evoked epileptiform discharges in rat hippocampal CA1 region in order to provide a theoretical basis for the clinical development of antiepileptic drugs. Methods The epileptiform activity was induced by perfusing GABAA receptor antagonist, bicuculline, in normal hippocampal slices and the temporal lobe epilepsy( TLE ) model of rat was established by injecting kainic acid into the CA3 region of the right hippocampus. The population spike ( PS ) of CA1 pyramidal cell layer was recorded with extracellular recording in hippocampal slices by electrical stimulating Schaffer collaterals in stratum radiatum. Results The recorded PS was of a single peak in normal hippocampal slices. The amplitude of PS recorded in normal hippocampal slices was not significantly affected by perfusing ACSF with low, middle and high dose ( 5 μmol · L-1,15μmol · L-1 and 50 μmol · L-1 ) of resveratrol, respectively( n = 8, P > 0. 05 ). The recorded PS was of 4 ~ 6 peaks like multiple epileptiform discharges evoked by perfusing bicuculline ( 30 μmol· L-1 ). After perfusing low and middle dose of resveratrol, the amplitudes of the first four peaks of PS and the total peak numbers of PS were not significantly affected (n = 8, P > 0. 05). However, after perfusing high dose of resveratrol, the amplitudes of the first four peaks of PS and the total peak numbers of PS were all decreased obviously ( n =8,P <0. 01). The recorded PS was also of 4 ~ 6 peaks likemultiple epileptiform discharges in rat TEL model. After perfusing low and middle dose of resveratrol in rat TLE model, the amplitudes of the first four peaks of PS and the total peak numbers of PS were not significantly affected( n = 6, P>0. 05 ). However, after perfusing high dose of resveratrol, the amplitudes of the first four peaks of PS and the total peak numbers of PS were all decreased obviously( n = 6,P <0. 01). Conclusion High dose of resveratrol can partly inhibit evoked epileptiform discharges in rat hippocampal CA1 region.%目的观察不同浓度白藜芦醇(resveratrol,Res)对癫痫大鼠海马CA1区场电位的影响,为临床研发抗癫痫新药提供理论依据.方法正常大鼠海马脑片灌流γ-氨基丁酸受体拮抗剂bicuculline引起癫痫样活动以及在正常大鼠右侧海马CA3区注射海人藻酸(KA)建立颞叶癫痫(TLE)大鼠模型,应用离体脑片细胞外场电位记录,刺激辐射层Schaffer侧支通路,在海马CA1区锥体细胞层记录群峰电位(PS)的变化.结果正常大鼠海马脑片CA1区锥体细胞记录到的场电位为单个PS,分别灌流含有低、中和高剂量(分别为5、15和50 μmol*L-1)Res的ACSF,PS幅度均无明显变化(n=8,P>0.05).灌流bicuculline(30 μmol*L-1)后,记录到的场电位为多个PS的痫样电位,在此基础上灌流低和中剂量的Res,PS幅度和数目没有明显改变(n=8,P>0.05);而灌流高剂量的Res,前4个PS幅度均有明显降低(n=8,P<0.01),PS数目也有明显减少(n=8,P<0.01).在TLE模型大鼠海马脑片上记录到的场电位也为多个PS的痫样电位,灌流低和中剂量的Res,PS幅度和数目没有明显改变(n=6,P>0.05);灌流高剂量Res,前4个PS幅度均有明显降低(n=6,P<0.01),PS数目也有明显减少(n=6,P<0.01).结论高剂量的Res能部分抑制大鼠海马CA1区诱发癫痫样放电活动.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2012(028)002【总页数】6页(P260-265)【关键词】癫痫;海马;白藜芦醇;群峰电位;突触;场电位【作者】尤竹燕;王斌生;解敏;李珍;王烈成【作者单位】安徽医科大学基础医学院生理学教研室,安徽,合肥,230032;浙江大学医学院血液细胞生物学实验室,浙江,杭州,310058;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,安徽,合肥,230032;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,安徽,合肥,230032;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,安徽,合肥,230032【正文语种】中文【中图分类】R-332;R284.1;R322.81;R742.1;R971.6癫痫是由多种原因引起的局部脑区神经元群异常放电所致的行为和功能异常的发作性慢性中枢神经系统疾病。

芦丁片剂药学综合性实验的流程及方法研究

芦丁片剂药学综合性实验的流程及方法研究

芦丁片剂药学综合性实验的流程及方法研究陈莉;杜红丽;曾仁韬;张叶叶;鲁莹;蔡国君【摘要】目的:以芦丁为模型药物,探讨新药片剂制备及药效学评价的多学科综合性实验流程和方法。

方法采用薄层色谱定性鉴别槐米中的芦丁成分;采用高效液相色谱法测定槐米中芦丁含量及芦丁精制品的含量;采用紫外分光光度法测定芦丁片含量;采用离体大鼠胸主动脉环舒张实验考察芦丁的药效;利用粉末直接压片法制备芦丁片剂。

结果与结论本实验完成了槐米的质量评价,槐米中芦丁的提取纯化、含量测定,芦丁药效学考察及芦丁片处方工艺研究等内容,提高了实验操作技能,实践了芦丁临床前研究的部分内容。

%Objective To imitate the development process of new drugs with rutin as the model and to do multidiscipli-nary experiments of preparation and pharmacodynamics of rutintablets .Methods Thin-layer chromatography was used to i-dentify rutin in Pagodatree flower bud .High-performance liquid chromatography was used for quantitative determination of ru-tin in Pagodatree flower bud and rutin products .The vasodilatation effect of rutin was investigated .The preparation of rutin tablets was completed .Results and Conclusion We completed the identification of Pagodatree flower bud ,extraction andpuri-fication of rutin from Pagodatree flower bud ,the assay of rutin ,the pharmaco-dynamics study and the formulation of rutin tab-lets .The experiments helped the postgraduates to be familiar with the research process of new drugs and to improve their ex-perimental operation skills .【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】4页(P359-362)【关键词】多学科综合性实验;芦丁;药效学;片剂【作者】陈莉;杜红丽;曾仁韬;张叶叶;鲁莹;蔡国君【作者单位】第二军医大学药学院,上海200433;第二军医大学药学院,上海200433;第二军医大学药学院,上海200433;第二军医大学药学院,上海200433;第二军医大学药学院,上海200433;第二军医大学药学院,上海200433【正文语种】中文【中图分类】R961;R943芦丁(rutin)又名芸香苷、维生素P,是一种典型的黄酮类化合物,几乎所有的芸香科和石楠科植物中均含有芦丁,尤其是在芸香科的芸香草、豆科植物的槐米中,芦丁含量较为丰富,可用作提取芦丁的原料[1-3]。

Powerlab系统简明操作规程

Powerlab系统简明操作规程

Powerlab系统简明操作规程1. 确认硬件设备连接,然后双击打开LabChart软件。

2. 在软件中设置通道数量,采样速率,量程,通道名称,显示特性等内容;同过Setup>Channel Settings打开通道设置窗口:选择通道数量,默认情况下,Chart软件会打开与记录仪通道相等的记录通道,比如8通道记录仪,Chart视图中会自动同时打开8个通道。

3. 选择通道采样速率:采样速率是指每秒钟采样的次数,单位为 Hz。

4. 选择通道的量程:常用信号采样速率的设置(仅供参考,采样速率单位为Hz,即每秒钟多少次)。

5. 显示特性:Setup>Display SettingsTime format:选择时间的显示格式Frome Start of file:从数据文件打开时计时,一直到记录结束;Frome Start of block:从每个Block 开始时计时,直到本Block 结束,从下个Block 重新计时;Time of Day:以电脑的时钟为准,显示记录数据时的实际时间。

Time as UTC:国际协调时间Always Seconds:以秒为单位计时Display Date:同时在文件的右上方显示日期Black Background:选择Scope 视图的背景色为黑色(关于Scope 视图背景色的设置,在Scope 视图中会有更多种选择)Graticule:选择是否需要背景的网格及网格颜色及线条类型General:选择是否在数据中显示Block 之间的界限,是否显示注释,是否在注释的地方加入竖线,是否在注释的竖线旁边显示注释的具体文本内容。

Sampling:选择采样时,数据是从左到右一直显示还是类似于示波器那样的一屏一屏地显示。

6. 时间轴和信号幅度轴的调整:时间轴(X 轴)的单位默认情况下是秒(S)时间轴的调整:可以通过 Chart 视图右下角的几个工具实现:点击一次,时间轴会压缩一定的倍数,最大的压缩比例为20K:1点击一次,时间轴会扩展一定的倍数,最大扩展比例为 1:1或者直选择水接平轴的压缩比例:Y 轴: Y 轴的坐标显示是由量程决定的,并随量程的变化而变化。

PowerLab生物信号采集系统在医学机能学教学中的应用与体会

PowerLab生物信号采集系统在医学机能学教学中的应用与体会

一直以来,实验教学中心作为一种具有科学管理、优良设施、先进教学内容的大型现代化生物医学实验教学平台,是培养应用型医学人才的重要基地。

我校病理生理学实验教学中心于2007年被批准为河北省高校实验教学示范中心(建设单位),随后省教育厅逐步加大了建设力度。

为了丰富和创新医学机能学实验教学方法,培养符合现代医疗需要的高素质医学人才,教学中心自2015年开始购入PowerLab 生物信号采集系统,并应用于医学机能学教学。

现回顾总结几年来的使用过程与经验体会,以求进一步扩展PowerLab 生物信号采集系统在医学机能学教学的应用范围,全力提高医学人才培养质量。

1PowerLab 生物信号采集系统简介目前,PowerLab 生物信号采集系统广泛应用于药理学、生物化学、心理学、生理学及病理生理学等学科的教学与科研工作,实现了对实验信号的采集与处理[1]。

PowerLab 生物信号采集系统包括两个重要组成部分及其相关的系统软件,分别是多通道生理信号记录仪、二通道记忆示波器,能够实现多通道生物信号数据的实时采集、记录和分析,能完成所有的经典机能学实验,也能完成创新性、探究性实验,实验操作简洁、方便,实验结果准确、可靠[2]。

此外,PowerLab 生物信号采集系统还包含多通道信号接口等系统硬件,其输出接口通过USB 连接线与计算机主机相接,输入接口则与信号换能器相接,由此形成Power-Lab 生物信号采集系统的工作闭环。

PowerLab 生物信号采集系统在实验教学中心培养应用型人才方面发挥了重要作用。

根据《关于加强医学教育工作提高医学教育质量的若干意见》,夯实应用型人才培养基础,建立新型实验教学管理体制,推进实验教学改革,加强实验技术队伍建设,强化实验教学中心平台功能,将实验教学中心建设成为应用型医学人才的培养基地。

由此,揭开了PowerLab 生物信号采集系统在医学机能学教学中广泛应用的帷幕。

运用诸如PowerLab 生物信号采集系统等教学软硬件设备,建立以学生为主体的新型人才培养模式,推进教学方法改革,并促成基础医学与临床医学教学相融合,提高学生终身学习能力、创新能力、批判性思维能力[3]。

电生理实验报告

电生理实验报告
③保存采集数据:点击Chart应用窗口中的“File”→“Save”,设置保存类型为.txt文件。
④将.txt文件导入BWDrawer软件,叠加1000次,分别作绘制、FFT、滤波图,分析。
【注意事项】
1.佩戴自制闪光激发装置后,被测试者进行10分钟的暗适应。
2.在测量过程中,要求被测者保持心情放松以及身体放松,特别是头颈部放松,3.不要思考问题,尽量减少身体移动,集中注意力于LED灯闪烁,周围人员尽量保持安静,不要说话或行走。
3.由于刺激频率是20Hz,在稳态闪光诱发电位可以看到一连串较为明显的峰值。
4.分析瞬态闪光诱发电位波形过于尖锐的原因,可能是由于外部环境造成的干扰,如测试者说话声,受试者触摸了电极和视觉敏感等。因此与标准诱发电位形成一定的误差。
5.分析稳态闪光诱发电位波形中间段较为平坦的原因,可能是由于受试者在测量过程中闭眼,造成闪光对视网膜的刺激变小,因此波形也变小。
3.点击“设置”→“Display Channels”,设置channel数量为1。
Powerlab参数设置
4.点击“设置”→“Stimulator”,弹出如下窗口:Mode设为“Pulse”,刺激状态设为“Continuous”。
5.在Chart应用窗口中设置采样率为2K,在通道功能下拉菜单中选择“Bio Amplifier”,在弹出窗口:在“EEG Mode”和“50Hz Notch”前打上√,如果有“AC Couple”和“Mains Filter”,也需打上√。High Pass设为1Hz,Low Pass设为30Hz,观察High Pass和Low Pass设置之前和之后的信号有什么区别。
【实验原理】
1.Powerlab生物信号采集处理系统,是由澳大利亚ADInstruments公司研制开发的计算机数据采集分析系统。搞系统可实现多通道生物信号数据的实时采集、记录和分析功能。

PowerLabLabTutor系统与机能学实验交互式教学介绍

PowerLabLabTutor系统与机能学实验交互式教学介绍

必须使学生充分认识到有机化学实验的重要性。

这就必须改革传统考核方法,提高实验成绩在总分中所占的比例。

以前,不对学生进行专门的实验考核,只以学生的平时表现作为实验成绩,因此很多学生都不认真做实验,每次实验都是出人不出力,在教师查看时就假装表现得很认真,在这种状况下学生的实验动手操作能力可想而知。

现在我们应吸取以前的教训,将实验考核分成2部分:平时实验表现占70%,期末考试成绩占30%。

平时实验表现主要分为实验预习情况、出勤率、实验操作、实验结果和实验报告。

在平时的实验课中往往会有学生对实验内容没有好好预习,在做实验时就亦步亦趋,遇到这样的学生教师一定要严厉批评,并且明确告知其会被扣分。

期末考试则分为实验操作和笔试2个部分。

目前,考虑到实验课课时有限,我们实行的是上半学期期末考试为实验操作,而下半学期期末考试为笔试。

不过,以后会尽量让每个学期的期末考试都有实验操作和笔试2个部分。

实验操作考试题目由学生随机从已经做过的实验中抽取,就这个题目再加两三个基本的实验问题,让学生口述回答,所得分数也算在期末考试成绩中。

同时考试的学生所抽题目都不一样,不能互相抄袭。

这种实验考核方法促使学生必须重视每次实验,认真对待实验的每一个环节。

通过以上3个方面的改革,有机化学实验教学展现出了崭新的面貌,有利于培养适应新时代、具备综合实验能力的应用型人才。

几年的实验教学改革实践也证明,现在的实验教学方式大大提高了学生的积极性,实验教学质量有了明显提高,学生在毕业论文研究和毕业后的工作中都表现出了极高的专业素质和独立性。

参考文献:[1]尹爱萍,赵三虎,赵明根.大学有机化学实验教学体系改革探讨[J].忻州师范学院学报,2008,24:2.[2]董镜华,陈才元.有机化学实验教学改革———绿色环保模式的探索[J].湖北师范学院学报(自然科学版),2003,23:1.蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉蒉实验与实习卫生职业教育机能学实验是一门专门研究生物正常机能、疾病发生机制和药物作用规律的实验学科,其继承和发展了生理学、病理生理学、药理学等实验课程的核心内容。

多酚化合物LM49对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及机制

多酚化合物LM49对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及机制

多酚化合物LM49对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及机制作者:张梦如高燕杨彩红赵承孝冯秀娥李青山来源:《中国药房》2022年第13期關键词多酚化合物;2,4′,5′-三羟基-5,2′-二溴二苯甲酮;血管环;舒张作用;钾通道;钙通道高血压的全球发病率逐年升高,长期高血压会导致多种并发症。

高血压病程的进展,可诱发冠状动脉粥样硬化,造成心脏损伤,严重威胁人类健康[1]。

高血压发病后会出现血管张力异常。

主动脉平滑肌的舒张对高血压的治疗尤为关键,诸多有效的高血压治疗药物最终都会直接或间接地引起血管舒张效应[1-2]。

海洋来源的多酚化合物具有抗炎、抗氧化、细胞毒、抑菌等多重生物活性[3-6],是海洋生物研究过程中发现的一类新型化合物。

本课题组前期以海洋来源的卤酚化合物为先导化合物进行了结构优化和修饰,合成了系列多酚化合物。

其中2,4′,5′-三羟基-5,2′-二溴二苯甲酮(LM49)具有显著的保护血管内皮细胞[7-8]、抗动脉粥样硬化[9]、保护缺血再灌注引发的心肌损伤[10]等药理作用,提示其对于高血压及心血管疾病的治疗具有重要研究价值。

鉴于此,本研究选择本课题组前期获得的高活性多酚化合物LM49 为研究对象,考察其对大鼠离体胸主动脉的舒张作用,并进一步研究其作用机制,以期为LM49用于心脑血管疾病的治疗提供实验依据。

1 材料1.1 主要仪器SV-8 型离体组织器官恒温灌流装置购自成都泰盟软件有限公司;MLT0201/D 型高灵敏度张力传感器、PowerLab 数据采集分析系统购自埃德仪器国际贸易(上海)有限公司。

1.2 主要药品与试剂多酚化合物LM49(批号20190315,纯度≥99%)为本课题组自制;乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA,批号E8050)购自北京索莱宝科技有限公司;羟乙基哌嗪乙硫磺酸(HEPES,批号H7523,纯度≥99%)、去甲肾上腺素原料药(批号SML0305,纯度≥97%)、乙酰胆碱原料药(批号A6625,纯度≥99%)、左旋硝基精氨酸甲酯原料药(L-nitro-arginine methyleste,L-NAME,批号N5751,纯度≥98%)、吲哚美辛原料药(批号I7378,纯度≥98%)、四乙基胺(批号T0886,纯度≥99%)、4-氨基吡啶(批号A78403,纯度≥98%)、格列苯脲原料药(批号Y0001511,纯度≥99%)、BaCl2(批号202738,纯度≥99%)、硝苯地平原料药(批号N7634,纯度≥98%)、维拉帕米原料药(批号V4629,纯度≥99%)、毒胡萝卜素原料药(批号T9033,纯度≥98%)均购自德国Sigma 公司;其余试剂均为分析纯,水为双蒸水。

腺相关病毒不同转染策略应用于心脏光遗传学的研究

腺相关病毒不同转染策略应用于心脏光遗传学的研究

心血管病学进展2023年12月第44卷第12期 AdvCardiovascDis,December2023,Vol.44,No.12腺相关病毒不同转染策略应用于心脏光遗传学的研究樊哲儒1 王龙1 王 2 周芳1(1.武汉大学人民医院麻醉科,湖北武汉430060;2.武汉大学人民医院心内科武汉大学心血管病研究所心血管病湖北省重点实验室,湖北武汉430060)【摘要】目的 探究腺相关病毒不同转染策略构建大鼠心脏光遗传学模型的可行性与有效性。

方法 20只SD大鼠,随机分为4组:心肌注射组、心包注射组、心外膜滴涂组、正常对照组,每组5只,分别心肌注射、心包注射、心外膜滴涂rAAV9 CAG hChR2(H134R) eYFP,正常对照组只开胸。

造模4周后,超声测量4组大鼠左室射血分数及左室短轴缩短率;记录体表心电图,测量RR间期、PR间期和QRS时限。

开胸进行473nm波长蓝光照明实验,根据光输出信号与心电图判断心脏节律是否被光脉冲夺获。

对心脏组织石蜡切片进行HE染色和荧光观察。

结果 心肌注射组、心包注射组、心外膜滴涂组大鼠与正常对照组大鼠相比,心电参数无显著差异(P>0.05),左室射血分数及左室短轴缩短率无显著差异(P>0.05)。

用一定频率和功率的473nm蓝光照射心肌注射部位或心脏,能夺获心肌注射组和心包注射组心脏的节律,但不能夺获心外膜滴涂组。

HE染色显示心肌注射组注射部位心肌纤维排列紊乱、炎症细胞浸润。

荧光显示心肌注射组、心包注射组、心包滴涂组心室切片均有ChR2(H134R)转染。

结论 心包注射途径能有效构建大鼠心脏光遗传学模型。

【关键词】光遗传学;腺相关病毒;光敏蛋白质;光起搏;心包注射【DOI】10 16806/j.cnki.issn.1004 3934 2023 12 020DifferentTransfectionStrategiesofAdeno AssociatedVirusAppliedtoCardiacOptogeneticsFANZheru1,WANGLong1,WANGXi2,ZHOUFang1(1.DepartmentofAnesthesiology,RenminHospitalofWuhanUniversity,Wuhan430060,Hubei,China;2.DepartmentofCardiology,RenminHospitalofWuhanUniversity,CardiovascularResearchInstituteofWuhanUniversity,HubeiKeyLaboratoryofCardiology,Wuhan430060,Hubei,China)【Abstract】Objective Toinvestigatethefeasibilityandeffectivenessofdifferenttransfectionstrategiesofadeno associatedvirustoconstructaratcardiacoptogeneticmodel.Methods Atotalof20SDratswerepurchasedandrandomlydividedintofourgroups:myocardialinjectiongroup,pericardialinjectiongroup,epicardialdripcoatinggroupandnormalcontrolgroup.Therats(n=5)wereinjectedwithrAAV9 CAG hChR2(H134R) eYFPbymyocardialinjection,pericardialinjectionandepicardialdripcoatingrespectively.AfterFourweeks,leftventricularejectionfractions(LVEF)andleftventricularfractionalshortening(LVFS)ofallratsweremeasuredbyultrasound;recordthebodysurfaceECGtomeasuretheRRinterval,PRintervalandQRSwavetimeframe.Open chestlightexperimentswith473nmbluelightwereperformedtodeterminewhethertheheartrhythmwascapturedbythelightpulsebasedonthelightoutputsignalandthebodysurfaceECG.Results Theratsinthemyocardialinjectiongroup,pericardialinjectiongroupandepicardialdripcoatinggroup,comparedwiththeratsinthenormalcontrolgroup,showednosignificantdifferencesinECGparameters(P>0.05)andnosignificantdifferencesinLVEFandLVFS(P>0.05).Therhythmofmyocardialinjectionandpericardialinjectiongroupscouldbecapturedbyirradiatingthemyocardialinjectionsiteorheartwith473nmbluelightofcertainfrequencyandpower,butnottheepicardialdripcoatinggroup.HEstainingshoweddisorganizedmyocardialfiberarrangementandinflammatorycellinfiltrationattheinjectionsiteinthemyocardialinjectiongroup.FluorescenceshowedChR2(H134R)transfectioninventricularsectionsofthemyocardialinjectiongroup,pericardialinjectiongroup,andpericardialdripcoatinggroup.Conclusion Thepericardialinjectioncaneffectivelyconstructcardiacoptogeneticsmodel.【Keywords】Optogenetics;Adeno associatedvirus;Photosensitiveprotein;Opticalpacing;Pericardialinjection基金项目:国家自然科学基金面上项目(81772044);湖北省重点实验室开放项目(2021KFY035)通信作者:王龙,E mail:wanglongwhu@163.com 光遗传学是利用遗传技术,将光敏感元件导入细胞或组织,与光学技术结合[1],对生物特定功能进行研究。

DMO用于大鼠麻醉效果的观察

DMO用于大鼠麻醉效果的观察

DMO用于大鼠麻醉效果的观察时静;刘海玉;白鸽;姜胜;贾烁;付礼胜;刘思浩;范宏刚【摘要】针对国内外没有大鼠专用的复合麻醉剂,本研究将右旋美托咪啶、咪达唑仑、强痛定和阿托品配成复合制剂(DMO)经腹腔给药麻醉大鼠,观察其对大鼠的镇静、镇痛、肌松等效果及对主要生理机能的影响.结果显示,注射DMO后,心率呈先降低后上升的趋势,与0 min相比变化范围在11.11%~16.67%;平均动脉压呈先升高后降低的趋势,20~30 min维持高血压状态,在其生理耐受范围内.DMO诱导迅速,维持时间适宜,苏醒后可迅速恢复;镇痛、镇静、肌松效果良好.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2016(052)001【总页数】4页(P113-116)【关键词】DMO;大鼠;麻醉;效果观察【作者】时静;刘海玉;白鸽;姜胜;贾烁;付礼胜;刘思浩;范宏刚【作者单位】东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030【正文语种】中文【中图分类】R-332大鼠常被用于药物营养代谢、内分泌、行为学、老年病学、肿瘤、感染性疾病、心血管疾病、心理学等科研过程中。

而在研究中为实验动物选择适宜、安全、有效的麻醉方法是保证实验安全性及数据可靠性的重要基础[1]。

现有大鼠麻醉和保定仍然停留在上述单一药物的使用、剂量的探讨及几种药物的相互比较阶段,亟需一种新的复方麻醉制剂解决现有的大鼠麻醉剂在镇静、镇痛、诱导时间、麻醉维持时间等方面存在的不足,以及大鼠应激性过大引起的心率过快、血压过高等突出问题[2]。

利用微血管环技术检测肠系膜动脉三级分支张力的方法

利用微血管环技术检测肠系膜动脉三级分支张力的方法

利用微血管环技术检测肠系膜动脉三级分支张力的方法李浩;张苏丽;杨艳;曾晓荣;刘慧荣【摘要】目的:以肠系膜动脉三级分支为样本,观察利用微血管技术检测血管张力功能的整个过程,以便研究各种微血管相关疾病中的微血管功能状态.方法:利用DMT 张力测定仪和PowerLab数据采集系统检测微血管收缩、舒张功能,将肠系膜三级动脉血管游离,固定,标准化和激活后,通过加入血管收缩药物及舒张药物,完成对微血管张力功能的检测.结果:本文制备的肠系膜动脉三级分支血管环对血管活性药物出现良好的收缩、舒张反应,加入10-5 mol/L的去甲肾上腺素(NE)后收缩张力达19 mN,之后依次加入10-9 ~ 10-5 mol/L的乙酰胆碱(ACh)或硝普钠(SNP),血管张力呈梯度降低,ACh和SNP引起的最大舒张率分别为80%和95%.结论:利用该微血管环技术成功检测出肠系膜动脉三级分支的收缩舒张功能.【期刊名称】《中国应用生理学杂志》【年(卷),期】2014(030)003【总页数】4页(P214-217)【关键词】肠系膜动脉三级分支;微血管环;张力【作者】李浩;张苏丽;杨艳;曾晓荣;刘慧荣【作者单位】首都医科大学生理学与病理生理学系,北京100069;首都医科大学代谢紊乱相关心血管疾病北京市重点实验室,北京100069;首都医科大学生理学与病理生理学系,北京100069;首都医科大学代谢紊乱相关心血管疾病北京市重点实验室,北京100069;泸州医学院心肌电生理研究室,四川泸州646000;泸州医学院心肌电生理研究室,四川泸州646000;首都医科大学生理学与病理生理学系,北京100069;首都医科大学代谢紊乱相关心血管疾病北京市重点实验室,北京100069【正文语种】中文【中图分类】R331.3+2机体微血管对组织器官的血流供应以及血压的维持具有至关重要的作用[1],微血管功能结构障碍也是高血压、冠心病、中风等心脑血管疾病发生发展的病变基础。

左卡尼汀对离体蟾蜍心率的影响

左卡尼汀对离体蟾蜍心率的影响

DOI:10.19392/j.cnki.1671 ̄7341.201934220左卡尼汀对离体蟾蜍心率的影响吕锐宁延边大学㊀吉林延吉㊀133000摘㊀要:目的:探索不同浓度左卡尼汀(L ̄carnitine)对离体蟾蜍心脏心率的影响ꎮ方法:将蟾蜍随机分为实验组和对照组ꎬ实验组分为低浓度㊁较低浓度㊁较高浓度㊁高浓度组ꎻ对照组蟾蜍制备离体心脏模型后只灌流任氏液ꎬ低浓度组蟾蜍灌流0.04mmol/L的左卡尼汀任氏液ꎬ较低浓度组蟾蜍灌流0.07mmol/L的左卡尼汀任氏液ꎬ较高浓度组蟾蜍灌流0.10mmol/L的左卡尼汀任氏液ꎬ高浓度组蟾蜍灌流0.13mmol/L的左卡尼汀任氏液ꎮ用Powerlab数据采集分析系统描记心脏收缩曲线ꎮ结果:左卡尼汀具有增强蟾蜍心率的作用(P<0.05ꎬ较高浓度㊁高浓度组P<0.01)ꎬ且此作用具有浓度依赖性ꎮ结论:在一定浓度范围内ꎬ左卡尼汀具有提高心率的作用ꎬ且此作用具有浓度依赖性ꎮ关键词:左卡尼汀ꎻ蟾蜍ꎻ心率㊀㊀左卡尼汀(L ̄carnitine)是在正常人体组织中存在的一种氨基酸ꎬ是脂肪进入线粒体氧化供能的必需载体ꎬ其含量决定了脂肪在氧化供能时进入线粒体的速度ꎮ近年来左卡尼汀被广泛的添加于食品㊁保健药品等ꎮ目前已有的文献中有报道左卡尼汀对心衰心脏具有正性肌力作用[1]ꎬ但鲜有文献报道左卡尼汀对正常离体蟾蜍心肌的作用ꎮ本文通过分组对照的实验方法ꎬ报告左卡尼汀对蟾蜍心率的影响ꎮ1材料和方法1.1实验动物取中华蟾蜍50只ꎬ体重100g左右ꎬ雌雄各占50%ꎮ1.2实验分组将中华蟾蜍随机分为五组ꎬ分别为对照组㊁低浓度组㊁较低浓度组㊁较高浓度组㊁高浓度组ꎮ中华蟾蜍制备离体蛙心灌流模型后ꎬ对照组灌流正常任氏液㊁低浓度组灌流含0.04mmol/L的左卡尼汀任氏液㊁较低浓度组灌流含0.07mmol/L左卡尼汀的任氏液㊁较高浓度组灌流含0.10mmol/L左卡尼汀的任氏液㊁高浓度组灌流含0.13mmol/L左卡尼汀的任氏液ꎮ1.3实验试剂99.9%左卡尼汀固体(西安瑞盈生物科技有限公司生产)ꎬ任氏液(1000mL蒸馏水中NaCl6.50gꎬKCl0.14gꎬCaCl20.12gꎬNaHCO30.20gꎬNaHPO40.01g)ꎮ1.4实验设备Powerlab系统㊁张力换能器ꎮ1.5实验方法将蟾蜍脑㊁脊髓破坏处死后在胸部剪去一倒三角形皮肤ꎬ剪去胸骨ꎬ剪开心脏包膜ꎬ在左右主动脉下穿线2根ꎬ在左主动脉上剪一倒V型切口ꎬ将蛙心插管从切口中插入ꎬ进入动脉圆锥后稍微退出改变方向ꎬ在收缩期插入心室ꎬ一根线固定蛙心插管ꎬ另一根线在静脉窦下结扎ꎮ用胶头滴管将血液吸出ꎬ插管中给予1mL任氏液ꎮ将插管与张力换能器相连ꎬ使用Powerlab记录蟾蜍心肌收缩平均周期(s)ꎮ1.6数据统计使用SPSS24.0数据分析软件进行单因素方差分析检验ꎬP<0.05时具有统计学意义ꎮ2结果心率与心肌收缩平均周期呈反比ꎬ心肌收缩平均周期越短ꎬ心率越快ꎮ实验中随着给予左卡尼汀任氏液溶液浓度增加ꎬ蟾蜍心肌收缩平均周期出现明显下降(见右表)ꎬ即心率明显上升ꎬ收缩平均周期均可表示为̄XʃSDꎬ受试组与对照组相比出现显著差异(P<0.05)ꎬ当左卡尼汀浓度>0.10mmol/L时ꎬ出现极显著差异(P<0.01)ꎮ更高浓度的左卡尼汀是否对蟾蜍心率产生负性作用仍待后续研究ꎮ不同浓度的左卡尼汀对蟾蜍离体心脏收缩周期㊁心肌收缩幅度的影响表(̄xʃSDꎬn=4)左卡尼汀浓度心肌收缩平均周期(s)正常任氏液3.08ʃ0.170.04mmol/L2.72ʃ0.020.07mmol/L2.33ʃ0.020.10mmol/L2.20ʃ0.02∗0.13mmol/L2.12ʃ0.02∗㊀㊀∗P<0.013讨论肉碱ꎬ化学名β ̄羟基 ̄γ ̄氨基丁酸ꎬ共有三种ꎬ分别为L型㊁D型㊁LD型ꎬ自然界中只存在L型ꎬ即左卡尼汀ꎬ正常人体内约含20gꎮ左卡尼汀在动物性食品中含量最为丰富ꎬ故红肉是人体每日左卡尼汀摄取的主要来源ꎮ左卡尼汀在体内通过调节线粒体内乙酰CoA/CoA比例㊁促进长链脂肪酸的氧化㊁加快乳酸代谢[2]发挥生物活性ꎬ有助于机体在运动时提高脂肪供能的效率㊁增强运动表现ꎬ故被广泛添加于食品㊁保健品中ꎮ实验证明ꎬ左卡尼汀对于离体产出心脏具有正性频率作用ꎬ且此作用具有浓度依赖性ꎮ据相关文献报道ꎬ左卡尼汀是乙酰CoA进入线粒体必不可少的载体ꎬ与脂肪的氧化供能有关ꎬ而心肌细胞的能量来源有60% ̄70%来自于脂肪酸的氧化ꎮ因此服用含左卡尼汀的食物㊁保健品具有提高机体消耗脂肪的效率ꎬ增加脂肪的消耗量的作用ꎮ心肌收缩幅度增强可改善血流供应ꎬ增加动脉供血ꎬ减轻静脉淤血ꎻ使心肌舒张期延长ꎬ心肌获得的休息时间增加且冠脉供血供氧增加ꎬ与强心苷类合用可对抗乏氧性心衰[3]ꎻ心衰使补充左卡尼汀至正常水平可加强衰心的收缩力ꎬ减轻离体心脏的心衰程度和推迟心衰的发生时间[4]ꎮ其临床应用和更高浓度的左卡尼汀对于离体蟾蜍心脏的影响有待后续研究ꎮ参考文献:[1]汪洋ꎬ唐泽耀ꎬ王珂萌ꎬ等.茶色素对离体蟾蜍心肌收缩力的保护作用[J].中国实验方剂学杂志ꎬ2015.6ꎬ90 ̄94.[2]杨静.左旋肉碱的生理功能及在功能性食品中的应用[J].农业工程ꎬ2012.1ꎬ54 ̄59.[3]韩八斤ꎬ万宝松ꎬ汤允昭ꎬ等.乙酰肉毒碱和肉毒碱抗乏氧性心衰及其与强心苷合用的对比研究[J].药学学报ꎬ1985ꎬ20(8)ꎬ606 ̄609.[4]韦文哲ꎬ高世嘉ꎬ李红ꎬ等.肉毒碱对实验性衰竭心脏功能的影响[J].药学学报ꎬ1982ꎬ11ꎬ809 ̄814.作者简介:吕锐宁(1999 ̄)ꎬ男ꎬ汉族ꎬ山东济南人ꎬ本科ꎬ研究方向:预防医学ꎮ442理论研究科技风2019年12月。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
相关文档
最新文档