马铃薯,大辣椒样品分析实验报告

马铃薯，大辣椒样品分析

摘要：

用3种不同的3,5-二硝基水杨酸比色法测定不同马铃薯品种块茎中还原糖含量,结果表明:方法二的准确性和精密性均好于其余2种方法,且操作简便。主要介绍了钼蓝比色法测定青椒中还原型雏生素C含量的基本原理和方法。并对最大吸收波长和最佳显色条件进行了探究，实验结果是在波长839nm处有强吸收，维生素C含量在0.004-0.024mg/mL范围内呈线性关系，方法的变异系数小于2.51％，回收率为97.2％。该方法简单、快速、准确，用此法测得市售青椒样品中的还原型维生素C的含量为0.2390mg／g。

关键词：马铃薯;还原糖;比色法;3,5-二硝基水杨酸

前言：测定维生素C有多种方法，包括采用I2或二氯靛酚（DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的选择性，是一种理想的氧剂。传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定的实验方法。

1.实验材料与方法

1.１实验材料

1.1.1实验仪器：半微量滴定管﹑酸式滴定管、研钵、离心管、离心机、刻度吸管、微量取样器、具塞试管,具塞刻度试管。

1.1.2 试剂：精密PH试纸

1.1.3 材料：马铃薯、大辣椒

1.2 试验方法：

1.2.1 大辣椒ｖｃ含量的方法：

（１）实验目的：学习掌握用钼蓝比色法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法;掌握微量滴定管的使用方法。

（２）实验原理：2,6—b在碱性条件下呈蓝色酸性条件下呈桃红色，用此变化鉴别滴定终点。

（３）实验步骤：

〈1〉取大辣椒２ｇ切碎加少许２﹪草酸研碎。

〈2〉定容至50ml容量瓶中2﹪草酸过滤备用。

〈3〉取滤液10ml，用已标定的2，6-b滴定至桃红色15s不退色（记录）。

〈4〉再吸取2%草酸10ml用2，6-b做空白滴定记录用量。

1.2.2：马铃薯蛋白质含量的测定方法：

（1）实验目的：学习掌握考马斯亮蓝G250测定蛋白质含量的原理和方法。

（2）实验原理：G250在游离时呈红色，当他与蛋白质结合时呈青色，前者在465nm，后者在595nm具有最大吸收值。在一定蛋白质浓度范围内（0—1000ug∕ml）的蛋白质—色素结合物在595nm吸收值与蛋白质含量成正比。

（3）实验步骤：

〈1〉.取样品2g放入研钵中，加入2ml水匀浆，在用6ml水分次洗涤研钵，转移到离心管中

〈2〉.放置20min。

〈3〉.离心20min后定溶至10ml（刻度管）

〈4〉.吸取提取液0.1ml（重负一次）加入50mlG-250，放置2min在595nm处比色以水做空白对照

试管 1 2 3

水0.1 - -

提取液- 0.1 0.1

G-250 5 5 5

1.2.3马铃薯还原糖含量的测定方法：

1.2.3.1样品还原糖含量的测定：

（1）实验目的：植物体内的还原糖在植物体内的分布不仅仅反应植物体内碳架来源和呼吸作用机制。含糖量是鉴定品质的重要指标。淀粉、蔗糖水解后也成为还原糖。故测定还原糖方法在研究植物体内生理变化和植物体内碳水化合物含量很重要。

（2）实验原理:还原糖有羟基，将其他物质还原而其自身被氧化，还原糖在碱性条件下及有酒石酸钠存在时加热，可以定量的还原二价铜离子，产生砖红色氧化亚铜沉淀，而本身被氧化。

（3）实验步骤

〈1〉.取马铃薯4g加2ml蒸馏水研磨。

〈2〉.加入6ml蒸馏水洗涤转到小烧杯中。

〈3〉.50℃水浴15min。

〈4〉.冷却至室温后离心10min取上清液定溶至50ml混匀

。二：含量测定.(1):

项目1# 2# 3# 4#

提取液（ml）0 2 2 2

蒸馏水 2 0 0 0

DNS(ml) 1.5 1.5 1.5 1.5

（2）：将4支试管沸水浴5min后冷却用蒸馏水稀释至25ml，450nm处比色查标准曲线。2.结果与分析：

2.1：大青椒Vc含量结果：

公式：样品Vc含量=（平均体积-标准体积）×A/B*b/a*100

解得Vc=147.85ml。

2.2：马铃薯还原糖测定结果：

公式：还原糖（%）=查得还原糖mg数/1000*提取液体积/测定体积/样品mg数解得：还原糖=0.51%

2.3马铃薯蛋白质测定结果：蛋白质含量=平均标准蛋白含量*定溶体积/样品重（g）

解得：样品蛋白含量=1620ug/g。

粉色为vc含量绿色为还原糖含量蓝色为蛋白含量

3实验总结与讨论：

3.1：（1）：在操作过程中可能出现操作误差导致结果不够准确，导致淀粉酶没有准确结果。

（2）：操作过程中一定要注意准确按照操作过程进行。

（3）：还原糖测定中转移时一定要减少溶液残留，以免影响结果，稀释后要摇匀。

（4）：基本操作不规范或错误也会影响结果。

(5)：仪器本身不灵敏也会影响结果。

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