第18章-生殖毒性研究
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第十八章 生殖毒性研究
第一节 致畸胎研究研究概况
年份
1932 1935 1948 1950 1956 1963 1966 1971
事件
作者
维生素A缺乏可使猴胚胎畸形
Hale
X射线照射使大鼠胚胎发生各种畸形 Gob
氮芥导致大鼠胚胎畸形
Harriu
可的松致小鼠胚胎畸形
Baxter
反应停（Thalidomide）事件
母体毒性（embryo toxicity ）：指药物引起怀孕动物的毒效 应，如体重不增或减轻等，最严重的是死亡。
第二节 有关生殖毒性的基本概念
畸形（malformations）：永久性结构异常或功能异常的 胎儿和新生儿。通常不包括显微镜下细微结构的异常, 生 化代谢性缺陷。单纯功能异常(如精神缺陷、智力缺陷), 也不包括分娩过程中各种因素造成的缺陷。
第三节 一般生殖毒性试验
[目的]
一般生殖毒性试验（reproductive toxicity test） 是研究药物对整个生殖过程的影响。包括生殖细胞 （精子、卵细胞）的发生，卵细胞受精、着床胚胎 形成，胚胎发育阶段的影响并作出评价。
[动物及分组]
至少一种动物，一般为大鼠或小鼠，每组雄性 动物10只，雌性动物至少20只。
第三节 一般生殖毒性试验
[检查]
1. 雄性与雌性动物同笼交配后，每日检查小鼠阴道中有无 阴栓，大鼠则检查精子，以检查到阴栓或精子的当日作 为妊娠第0天。
2. 雌鼠于妊娠第13天解剖观察，以确定妊娠、胎儿的吸收 和死亡情况，并记录母鼠的一般状况、体重变化和胎盘 重量，以确定子宫内的活胎数，对活胎进行性别鉴定、 体重和身长的测量以及外表和内脏器官的形态学观察， 对骨骼进行茜红素染色后进行检查，必要时进行组织学 和组织化学的详细检查。
第二节 有关生殖毒性的基本概念
畸胎学：从胚胎学和病理学发展出来的一个分支学科，是研 究胚胎发育时期，由各种内外因子引起结构和功能异常的先 天性畸形的科学。
致畸性（teratogenicity）：药物接触胚胎发生期后引起 永久性结构或功能异常的性质。 胚胎毒性（embryo toxicity）：某些药物在一定剂量仅 对胚胎或胎儿有毒性作用而对母体没有毒性作用，此作用 被称为胚胎毒性。胚胎毒性表现为胚胎死亡、胚胎生长迟 缓、畸形和功能不全。
一般生殖毒 性试验
成年雄性/雌性动物的生殖功能；胚胎 发和大部分器官形成
成年雌性动物的生殖功能；胚胎生长发 育以及器官发育和生长
致畸试验
成年雌性动物的生殖功能；婴儿在宫外 生活的适应性；断奶前的发育和生长 围产期试验
断奶前的发育和生长；独立生活的能力； 完全达到性成熟
避孕药、性激素、性功能障碍药、促精子生成药、致突变试验 阳性或有毒作用的新药，必须进行生殖毒性试验。
第二节 有关生殖毒性的基本概念
生殖是机体繁衍种族的生理过程，包括生殖细胞的发 育形成、交配、受精、植入、胚胎形成和发育、分娩和哺 乳等过程。每一个环节均可能是化学物质毒性作用的靶部 位，机体接触化学物质后干扰了其生理过程，使生殖过程 的功能出现缺陷和损害，此即化学物质的生殖毒性。
生殖毒性有两个特点：（1）对化学物质的毒性作用 敏感，一定剂量下，其他系统尚未出现损害之前，生殖过 程中的某个环节或功能已经出现障碍；（2）化学物质毒性 作用对其损害更为深远，不仅表现在接触化学物的机体本 身，还可影响后代。
本试验检测药物对整个生殖过程的毒性作用，通过繁 殖试验可以了解药物对试验动物的性腺功能、交配能力、 受孕能力、妊娠过程、分娩、哺乳及对后代生长发育的影 响。
生殖毒性研究在限定临床研究受试者范围、 降低临床研究受试者和药品上市后使用人群的 用药风险方面发挥重要作用。
生殖过程分期
分期
研究内容
检测方法
交配前到怀 孕 怀孕到着床
着床到硬腭 闭合 硬腭闭合到 怀孕末期 出生到断奶
断奶到性成 熟
成年雄性/雌性动物的生殖功能；配子 的发育和成熟；交配行为及生育力
成年雄性/雌性动物的生殖功能；着床 前的发育和着床
出生缺陷(birth defect)：指任何解剖学的和功能的 异常。既包括形态结构的异常(大体的和细微的)，也包 括功能、代谢、行为的异常。
致畸指数（teratogeny index）：为一种药物对母体的半数 致死量与最小致畸量的比值，是表示一种化学物质的致畸 强度指标。建议致畸指数在10以下定为不致畸，10 ~ 100为 致畸，100以上为强致畸。
[结果判定]
第三节 一般生殖毒性试验
畸胎率% =
畸胎总数 活胎仔总数
×100 %
活胎仔平均畸形数 =
畸形总数 活胎仔总数
母体畸胎出现率%
出现畸胎母体数 = 妊娠母体总数
×100 %
* 畸胎及畸形的计算方法
第四节 繁殖试验
[目的、原理]
凡受试物能引起生殖机能障碍，干扰配子的形成或使 生殖细胞受损，其结果除可影响受精卵或孕卵的着床而导 致不孕外，尚可影响胚胎的发生及胎仔的发育，如胚胎死 亡导致自然流产、胎仔发育迟缓以及胎仔畸形。如果对母 体造成不良影响，出现妊娠、分娩和乳汁分泌的异常，亦 可出现胎仔出生后发育异常。
美国药物安全委员会
美国FDA — 人用药生殖安全评价准则
WHO规定新药应有生殖毒性研究
先天愚型
海豹肢畸形
生殖毒性研究（Reproductive toxicity study）是药物非临床安全性评价的重要内容， 它与急性毒性、长期毒性、遗传毒性等毒理学 研究有着密切的联系，是药物进入临床研究及 上市的重要环节。
第三节 一般生殖毒性试验
[检查]Байду номын сангаас
3. 大鼠于孕期第20天处死（小鼠18天）。剖腹取 出子宫及卵巢，辨认和记录活胎数，早死胎数、 晚死胎数、吸收胎数和黄体数，对活胎仔应辨 别性别、称重，测量身长及尾长，仔细检查活 胎仔的外观有无畸形，将每只母鼠的2/3活胎 仔剥去皮肤和内脏，经脱水透吸及茜红素染色 后，检查骨骼畸形，将1/3活胎仔浸入Bouin氏 溶液中固定，供检查内脏畸形。
第三节 一般生殖毒性试验
[给药剂量及途径]
给药组设高、中、低三个剂量；高剂量应能产 生轻微毒性反应，如体重增长缓慢等，但不应出现 严重中毒或死亡。
给药途径应尽量接近临床。
[给药时间]
雄性动物交配前给药60 ~ 80天，雌性动物交配 连续给药14天。交配后继续给药至大多数器官发生 期（大鼠/小鼠为孕后13天）。
第一节 致畸胎研究研究概况
年份
1932 1935 1948 1950 1956 1963 1966 1971
事件
作者
维生素A缺乏可使猴胚胎畸形
Hale
X射线照射使大鼠胚胎发生各种畸形 Gob
氮芥导致大鼠胚胎畸形
Harriu
可的松致小鼠胚胎畸形
Baxter
反应停（Thalidomide）事件
母体毒性（embryo toxicity ）：指药物引起怀孕动物的毒效 应，如体重不增或减轻等，最严重的是死亡。
第二节 有关生殖毒性的基本概念
畸形（malformations）：永久性结构异常或功能异常的 胎儿和新生儿。通常不包括显微镜下细微结构的异常, 生 化代谢性缺陷。单纯功能异常(如精神缺陷、智力缺陷), 也不包括分娩过程中各种因素造成的缺陷。
第三节 一般生殖毒性试验
[目的]
一般生殖毒性试验（reproductive toxicity test） 是研究药物对整个生殖过程的影响。包括生殖细胞 （精子、卵细胞）的发生，卵细胞受精、着床胚胎 形成，胚胎发育阶段的影响并作出评价。
[动物及分组]
至少一种动物，一般为大鼠或小鼠，每组雄性 动物10只，雌性动物至少20只。
第三节 一般生殖毒性试验
[检查]
1. 雄性与雌性动物同笼交配后，每日检查小鼠阴道中有无 阴栓，大鼠则检查精子，以检查到阴栓或精子的当日作 为妊娠第0天。
2. 雌鼠于妊娠第13天解剖观察，以确定妊娠、胎儿的吸收 和死亡情况，并记录母鼠的一般状况、体重变化和胎盘 重量，以确定子宫内的活胎数，对活胎进行性别鉴定、 体重和身长的测量以及外表和内脏器官的形态学观察， 对骨骼进行茜红素染色后进行检查，必要时进行组织学 和组织化学的详细检查。
第二节 有关生殖毒性的基本概念
畸胎学：从胚胎学和病理学发展出来的一个分支学科，是研 究胚胎发育时期，由各种内外因子引起结构和功能异常的先 天性畸形的科学。
致畸性（teratogenicity）：药物接触胚胎发生期后引起 永久性结构或功能异常的性质。 胚胎毒性（embryo toxicity）：某些药物在一定剂量仅 对胚胎或胎儿有毒性作用而对母体没有毒性作用，此作用 被称为胚胎毒性。胚胎毒性表现为胚胎死亡、胚胎生长迟 缓、畸形和功能不全。
一般生殖毒 性试验
成年雄性/雌性动物的生殖功能；胚胎 发和大部分器官形成
成年雌性动物的生殖功能；胚胎生长发 育以及器官发育和生长
致畸试验
成年雌性动物的生殖功能；婴儿在宫外 生活的适应性；断奶前的发育和生长 围产期试验
断奶前的发育和生长；独立生活的能力； 完全达到性成熟
避孕药、性激素、性功能障碍药、促精子生成药、致突变试验 阳性或有毒作用的新药，必须进行生殖毒性试验。
第二节 有关生殖毒性的基本概念
生殖是机体繁衍种族的生理过程，包括生殖细胞的发 育形成、交配、受精、植入、胚胎形成和发育、分娩和哺 乳等过程。每一个环节均可能是化学物质毒性作用的靶部 位，机体接触化学物质后干扰了其生理过程，使生殖过程 的功能出现缺陷和损害，此即化学物质的生殖毒性。
生殖毒性有两个特点：（1）对化学物质的毒性作用 敏感，一定剂量下，其他系统尚未出现损害之前，生殖过 程中的某个环节或功能已经出现障碍；（2）化学物质毒性 作用对其损害更为深远，不仅表现在接触化学物的机体本 身，还可影响后代。
本试验检测药物对整个生殖过程的毒性作用，通过繁 殖试验可以了解药物对试验动物的性腺功能、交配能力、 受孕能力、妊娠过程、分娩、哺乳及对后代生长发育的影 响。
生殖毒性研究在限定临床研究受试者范围、 降低临床研究受试者和药品上市后使用人群的 用药风险方面发挥重要作用。
生殖过程分期
分期
研究内容
检测方法
交配前到怀 孕 怀孕到着床
着床到硬腭 闭合 硬腭闭合到 怀孕末期 出生到断奶
断奶到性成 熟
成年雄性/雌性动物的生殖功能；配子 的发育和成熟；交配行为及生育力
成年雄性/雌性动物的生殖功能；着床 前的发育和着床
出生缺陷(birth defect)：指任何解剖学的和功能的 异常。既包括形态结构的异常(大体的和细微的)，也包 括功能、代谢、行为的异常。
致畸指数（teratogeny index）：为一种药物对母体的半数 致死量与最小致畸量的比值，是表示一种化学物质的致畸 强度指标。建议致畸指数在10以下定为不致畸，10 ~ 100为 致畸，100以上为强致畸。
[结果判定]
第三节 一般生殖毒性试验
畸胎率% =
畸胎总数 活胎仔总数
×100 %
活胎仔平均畸形数 =
畸形总数 活胎仔总数
母体畸胎出现率%
出现畸胎母体数 = 妊娠母体总数
×100 %
* 畸胎及畸形的计算方法
第四节 繁殖试验
[目的、原理]
凡受试物能引起生殖机能障碍，干扰配子的形成或使 生殖细胞受损，其结果除可影响受精卵或孕卵的着床而导 致不孕外，尚可影响胚胎的发生及胎仔的发育，如胚胎死 亡导致自然流产、胎仔发育迟缓以及胎仔畸形。如果对母 体造成不良影响，出现妊娠、分娩和乳汁分泌的异常，亦 可出现胎仔出生后发育异常。
美国药物安全委员会
美国FDA — 人用药生殖安全评价准则
WHO规定新药应有生殖毒性研究
先天愚型
海豹肢畸形
生殖毒性研究（Reproductive toxicity study）是药物非临床安全性评价的重要内容， 它与急性毒性、长期毒性、遗传毒性等毒理学 研究有着密切的联系，是药物进入临床研究及 上市的重要环节。
第三节 一般生殖毒性试验
[检查]Байду номын сангаас
3. 大鼠于孕期第20天处死（小鼠18天）。剖腹取 出子宫及卵巢，辨认和记录活胎数，早死胎数、 晚死胎数、吸收胎数和黄体数，对活胎仔应辨 别性别、称重，测量身长及尾长，仔细检查活 胎仔的外观有无畸形，将每只母鼠的2/3活胎 仔剥去皮肤和内脏，经脱水透吸及茜红素染色 后，检查骨骼畸形，将1/3活胎仔浸入Bouin氏 溶液中固定，供检查内脏畸形。
第三节 一般生殖毒性试验
[给药剂量及途径]
给药组设高、中、低三个剂量；高剂量应能产 生轻微毒性反应，如体重增长缓慢等，但不应出现 严重中毒或死亡。
给药途径应尽量接近临床。
[给药时间]
雄性动物交配前给药60 ~ 80天，雌性动物交配 连续给药14天。交配后继续给药至大多数器官发生 期（大鼠/小鼠为孕后13天）。