实验八 植物染色体标本的制备与观察

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染色体标本的制备及组型观察实验报告

染色体标本的制备及组型观察实验报告

染色体标本的制备及组型观察实验报告细胞生物学实验报告染色体标本的制备及组型观察1.实验目的:掌握染色体标本制作的基本方法;认识不同生物的染色体的状态,学会做染色体组型图。

2.实验用品:(1)仪器及器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、离心管、离心机、小烧杯、冰箱、酒精灯、小烧杯(1)实验药品:蒸馏水、0.9% NaCl溶液、0.3% KCl溶液,固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、秋水仙素(2)实验材料:小鼠3.实验原理:(1)制作染色体标本的意义:了解染色体的特征(形态、大小、数目)——绘制染色体组型图染色体组型:把真核动物一个体细胞各染色体按长度、形状、着丝粒位置排列成一定顺序。

染色体核型:某一物种特有的一组或一套染色体的形态特征。

(2)染色体组型图的应用①鉴别生物种类:兔44条;小鼠40条;大鼠42条;鸡78条;猫38条;狗78条;马64条②遗传病的诊断和研究:三体综合征(含三条21号染色体)、卵巢退化症(含45条染色体,比正常人缺少一条性染色体)、睾丸退化症(含47条染色体,比正常人多一条X或Y染色体)等因此,我们可以给孕妇抽取羊水检查器胎儿的染色体,做遗传病早期诊断。

(3)染色体标本的制作①观察:由于分裂期中期的染色体染色体凝集程度最高,因而我们应尽量使细胞停留在分裂期中期以便观察。

②细胞:为尽量看到多的染色体,我们应当选取具有旺盛分裂能力的细胞,这样的细胞可以来自:胸腺、骨髓、睾丸、小肠等。

我们在此实验中使用的是小鼠的精巢细胞。

在做人的染色体标本时,我们使用的是血液里的淋巴细胞。

③药物:PHA(植物细胞凝集素):PHA具有促进细胞凝集和分裂的作用。

PHA可以使血液中的淋巴细胞还原至淋巴母细胞(只存在于骨髓中)秋水仙素:秋水仙素可以破坏微管的组装,纺锤体不能形成,细胞分裂停在中期。

与秋水仙素作用相同的药物还有长春花碱、鬼臼素、苯环己烯等。

可以促进胃管组装的药物有紫杉酚、重水等。

植物细胞染色体标本的制作与观察-教案

植物细胞染色体标本的制作与观察-教案

植物细胞染色体标本的制作与观察-教案第一篇:植物细胞染色体标本的制作与观察-教案植物细胞染色体标本的制作与观察1.实验背景与原理染色体的研究在生物进化、发育、遗传和变异中都有十分重要的作用。

因此,染色体标本的制备技术是遗传学、细胞生物学、染色体工程、分类学等众多学科的基本实验技术。

物种细胞内染色体数目、形态、长度等信息的总和根据实验的观察和测量绘制成的模式图称为核型(karyotype)。

核型分析在物种亲缘鉴定,染色体变异分析,杂种分析,细胞分裂过程分析,孤雌生殖等研究中均有重要的作用。

染色体标本的常规制片方法有切片法、涂片法、压片法、滴片法(空气干燥法)等。

压片法操作简单,是常用的植物染色体标本制备的方法。

不过,该法在制备中要注意避免压片所造成的染色体的扭曲、变形和丢失的现象。

染色体制备的重要环节如下:(1)取材:应取分生旺盛的组织或细胞。

在植物中通常取根尖,在分裂高峰时取材,可得到大量分裂相细胞。

而在动物细胞中通常选取骨髓等分裂活跃的细胞,或是植物血球凝集素等刺激下的淋巴细胞,也可选取分裂旺盛的体外培养的癌细胞或转化细胞等。

(2)预处理:使用秋水仙胺等药品破坏纺锤体形成,不但可得到大量分裂相细胞,而且可使染色体缩短变粗,有利于观察。

(3)固定:渗透力强的固定液将细胞迅速杀死,蛋白质沉淀,并可尽量保持细胞原有状态。

(4)解离或低渗:植物细胞要除去细胞间的果胶层,并使细胞壁软化,从而使细胞得以膨胀,为染色体的分散提供了空间。

常用解离方法有酸解法和酶解法。

动物细胞无细胞壁,通常不需解离,而是用低渗液使细胞膨胀。

(5)染色体分散:通过压片、滴片等机械力量使染色体分散, 有利于观察。

2.实验目的(1)掌握常规压片技术制作植物染色体标本的一般方法。

(2)了解显微镜下常规显色的植物细胞染色体的形态特点,熟练掌握显微镜的使用。

(3)理解染色体与生命遗传的意义及染色体核型检查的应用。

3.实验材料与试剂(1)材料:市售大蒜、洋葱。

植物染色体标本的制备和观察

植物染色体标本的制备和观察

植物染色体标本的制备和观察【实验目的】掌握常规压片法和去壁低渗法制备植物染色体标本的基本原理和方法。

【实验原理】植物染色体标本的制备,常用分生组织,如根尖、茎尖和嫩叶做材料。

常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法,其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤。

但压片法的不足之处是染色体很难分散开,染色体容易变形和断裂。

而去壁低渗法则能较好地克服这弊端,方法也较简单,不需要特殊设备。

它是借助纤维素酶和果胶酶将细胞间的果胶质和组成细胞壁的α-纤维素、半纤维素溶解掉,使植物细胞只有质膜,然后按哺乳类动物染色体标本制备的方法——低渗、火焰干燥法制备植物染色体标本。

实验证明,这一技术可以显著提高染色体的分散程度,现已广泛应用于植物染色体显带,姊妹染色单体交换等研究,大大促进了植物细胞遗传学研究的发展。

【实验仪器、材料和试剂】(一)仪器、用具培养箱、显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、盖玻片、玻璃板、酒精灯(二)材料蚕豆种子、洋葱鳞茎(三)试剂1.Giemsa 母液:原液的配制:Giemsa 粉0.5g甘油(AR)33ml甲醇(AR)33ml先将少量甘油加入研鉢中,将Giemsa 粉充分研细,再倒入剩余甘油,并在56℃温箱中保温2 小时,然后再加入甲醇混匀,贮存在棕色瓶内。

2.磷酸缓冲液、甲醇、冰醋酸、混合酶液、秋水仙素(或对二氯苯)3.改良苯酚品红染色液。

【方法与步骤】(一)压片法制备染色体标本1.取材把洋葱鳞茎置于盛水的小烧杯上,放在25℃温箱中发根,待根长至2cm左右,于上午9~11 时剪下根尖。

或者把蚕豆种子预先浸泡6小时,然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中,置25℃温箱中发芽,幼根长至1~2cm左右,于上午9~11时剪下根尖。

2.预处理将剪下的根尖置对二氯苯饱和水溶液,或0.02%秋水仙素溶液中,浸泡处理4 小时。

3.固定用水洗净处理过的根尖,经甲醇-冰醋酸(3∶1)固定6~12 小时,再经95%、85%酒精各半小时,最后转入70%酒精中,4℃保存备用。

染色体标本制作和观察实验报告

染色体标本制作和观察实验报告

【实验题目】染色体标本制作与观察【实验目的】1、掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法,了解各操作步骤的原理。

2、了解常用实验动物染色体的数目及特点。

3、认识不同生物染色体的特征,学会做染色体组型图。

【实验材料与用品】1.器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、离心管、离心机、小烧杯、冰箱、酒精灯、小烧杯等2.材料:小鼠3. 试剂:蒸馏水、0.9%NaCl溶液、0.3%KCl溶液,固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、秋水仙素【实验原理】一、制作染色体标本的先决条件①细胞具有旺盛的分裂能力:选择活跃的组织,如胸腺、骨髓、睾丸、小肠;或施加药物使细胞分裂(PHA)②设法得到大量的分裂中期细胞:利用秋水仙素二、染色体染色体是基因的载体。

真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传特性之一。

制备染色体标本是细胞学最基本的技术之一,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。

染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。

最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞、、和组织培养的细胞中制备染色体。

本实验采用的方法是从小鼠的睾丸细胞中获取。

染色体的形态结构在细胞增殖周期中是不断的运动变化的,一般在有丝分裂中期,染色体形态最典型、最易辨认和区分。

因此,制备染色体标本获取的是中期细胞。

染色体特征:数目、长度(绝对长度、相对长度)、着丝粒位置(M/SM/ST/T)、随体与次缢痕的数目大小和位置、带型分析描述染色体的四个参数:①相对长度=(每条染色体的长度)/(单倍常染色体之和+X染色体)*100,相对长度可以用来表示每条染色体的长度。

②臂指数=(长臂的长度)/(短臂的长度),臂指数可以用来确定臂的长度。

③着丝粒指数=(断臂长度)/(染色体全长)*100,着丝粒指数可以决定着丝粒的相对位置。

④染色体臂数(NF),根据着丝粒的位置来确定。

三、操作原理小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织(由于分裂活动旺盛,睾丸也可)利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作,但基本程序并不复杂。

植物染色体标本的制备和观察

植物染色体标本的制备和观察

植物染色体标本的制备和观察摘要:目的1、掌握常规压片法制备植物染色体标本的基本原理和方法;2、学会观察和统计植物细胞的染色体数目;3、了解和学习去壁低渗法进行植物染色体制片的基本原理和方法。

方法大蒜的根尖是分裂比较旺盛的,我们可以利用秋水仙素处理根尖使得大蒜根尖的细胞分裂处于分裂中期,然后经固定染色等处理将染色体染色固定,以便观察。

结果大蒜的染色体有16条,都被染色成红色的条状或细丝状物质。

结论大蒜染色体有16条。

关键词:植物染色体;大蒜;秋水仙素前言染色体是遗传物质的载体,本实验便是观察染色体的形态和数目。

植物染色体标本的制备,常用分生组织,如根尖、茎尖和嫩叶做材料。

常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法。

其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤,即可观察到较多的、处于有丝分裂中期的细胞和染色体。

由于现在洋葱发根较难,我们采用的是大蒜根尖进行相关实验。

材料与方法1.实验材料大蒜根尖、白姜花的根尖、野百合的根尖等。

2.实验试剂:0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸,浓盐酸:95%乙醇(1:1)解离液。

3. 实验用具显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、吸水纸、滴管、载玻片、盖玻片。

4.实验植物和试剂大蒜根尖、 0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸;70%酒精;95%乙醇;85%乙醇;蒸馏水5.实验方法和步骤5.1 取材先将大蒜浸泡若干小时,然后转入一个垫有湿润滤纸的培养皿中,置25℃恒温培养箱中萌发,待幼根长至1~2cm时,于上午9~11时剪下根尖。

5.2 预处理将剪下的根尖放进装有0.02%秋水仙素溶液的烧杯中,浸泡处理3~4小时。

5.3 固定将经过预处理或没有预处理的材料,放到卡诺氏固定液中固定(固定液的量约为材料的10倍,要求一个容器中所装的材料不能太多,温度不能太高)。

固定2~24h后分别在95%和85%乙醇中各30min ,再转入70%酒精中,于4℃冰箱内保存,保存时间最好不超过二个月。

实验报告染色体的观察

实验报告染色体的观察

实验报告染色体的观察实验报告:染色体的观察引言:染色体是生物体内的遗传物质DNA(脱氧核糖核酸)在细胞分裂时可见的结构。

通过观察染色体的形态和数量,我们可以了解到生物的遗传特征和进化过程。

本实验旨在通过显微镜观察染色体的结构和变化,从而加深对遗传学的理解。

实验材料和方法:1. 显微镜:用于放大染色体的细节。

2. 染色体样本:可从动植物细胞中提取,如血液、植物叶片等。

3. 染色剂:如吉姆萨染液,可使染色体更清晰可见。

4. 盖玻片和载玻片:用于制作染色体样本的载体。

5. 显微镜玻璃片:用于制作染色体样本的压片。

步骤一:制备染色体样本1. 从动物或植物细胞中提取染色体样本。

2. 将提取的样本放在载玻片上,加入适量的染色剂。

3. 用盖玻片轻轻覆盖样本,使其均匀分布在载玻片上。

4. 用显微镜玻璃片轻轻压平样本,使其更加透明。

步骤二:观察染色体1. 将制备好的染色体样本放置在显微镜下。

2. 调节显微镜的放大倍数,逐渐增加放大倍数,观察染色体的形态和结构。

3. 注意观察染色体的数量、大小、形状以及有无异常。

结果与讨论:通过实验观察,我们可以发现染色体在显微镜下呈现出一定的特征。

正常情况下,人类细胞中的染色体通常呈现出46条,即23对。

其中,前22对为常染色体,最后一对为性染色体(男性为XY,女性为XX)。

不同物种的染色体数量和形态也存在差异,这是由于物种间的遗传差异和进化过程的结果。

染色体的形态也是观察的重点之一。

正常染色体通常呈现出X形或I形,两臂长度基本相等。

然而,在某些情况下,染色体可能发生异常,如染色体缺失、染色体重复、染色体交换等。

这些异常情况可能导致遗传疾病的发生,因此对染色体的观察和分析对于遗传学的研究具有重要意义。

实验中使用的染色剂吉姆萨染液,可以使染色体更清晰可见。

这是因为染色剂能够与染色体上的DNA结合,从而增加其对光的吸收能力。

通过染色剂的使用,我们可以更清楚地观察染色体的结构和细节,进一步了解其遗传特征。

染色体标本制作和观察实验报告

染色体标本制作和观察实验报告

染色体标本制作和观察实验报告染色体实验报告摘要:本次实验旨在制作和观察染色体标本,通过显微镜观察染色体的结构和数量。

实验过程中,我们成功制作了植物和动物染色体标本,并使用适当的显微镜对染色体进行了观察。

通过实验结果,我们可以清楚地了解染色体的结构和数量。

实验结果表明,植物细胞通常具有较大的数量和较小的染色体,而动物细胞通常具有较少的数量和较大的染色体。

引言:染色体是细胞内的遗传物质,它们包含了个体的遗传信息。

通过观察染色体的结构和数量,可以了解物种的特性和遗传模式。

本次实验通过制作染色体标本和使用显微镜观察染色体,以探究染色体的结构和数量对不同物种的差异性。

材料和方法:1.动物染色体标本制作:-从一个动物个体中取得组织样本。

-在显微镜盖玻片上加入一滴减数分裂阻滞剂。

-使用细针将细胞群收集到玻璃滴管中。

-在玻璃滴管中加入一滴适当的染料,例如鲭鱼绿。

-轻轻将标本放在显微镜盖玻片上。

-使用显微镜观察染色体的结构。

2.植物染色体标本制作:-从一个植物个体中取得组织样本。

-将组织样本切成细小片段。

-在细胞裂变诱导剂中浸泡组织片段。

-在显微镜盖玻片上加入一滴适当的染料,例如鲭鱼绿。

-轻轻将标本放在显微镜盖玻片上。

-使用显微镜观察染色体的结构。

结果:我们制作了多个动物和植物染色体标本,并使用显微镜观察了它们的结构和数量。

通过观察,我们发现植物细胞的染色体通常比较小,数量较大,而动物细胞的染色体通常比较大,数量较少。

染色体呈现出普遍的线状结构,但也有一些不规则的染色体存在。

讨论:根据实验结果,我们可以得出结论,植物和动物细胞的染色体在结构和数量上存在差异。

这可能与物种的特点和遗传模式相关。

植物细胞通常需要更多的遗传信息来适应复杂的环境,因此具有较大的数量和较小的染色体。

相比之下,动物细胞通常需要更少的遗传信息,因此具有较少的数量和较大的染色体。

然而,本实验的主要限制在于只使用了一种染色剂来染色染色体,可能无法获取所有染色体的完整信息。

植物染色体标本制备的注意事项

植物染色体标本制备的注意事项

植物染色体标本制备的注意事项
1. 取材可得选对咯!就像你去挑衣服,得选合适的呀。

可别随随便便拿个植物就开始,一定要找生长旺盛、细胞分裂活跃的部位,不然怎么能制备出好的标本呢?比如说洋葱根尖就很不错哟!
2. 预处理很重要哇!这就好比给植物来个“美容前奏”。

不处理好,后面的步骤可就难搞啦。

比如固定的时候,时间和试剂都得掌握好,不然效果会大打折扣呀!
3. 解离也得小心呐!这可不能乱来,就跟拆玩具一样,得有技巧。

要是解离过度或者不足,都会出问题的嘞,怎么能看清染色体呀!就像切菜,不能切得太碎或太粗嘛!
4. 染色也有讲究滴!染色剂可不能乱选乱涂呀,那可是染色体的“华服”呢。

要选对染色剂,均匀上色,不然怎么能让染色体美美的展示出来呢,你说是不是?
5. 制片的时候轻点哟!千万别毛手毛脚的,这就像对待宝贝一样得小心翼翼。

压片要是太用力,把细胞都弄破了咋办呀?那不等于白忙啦!
6. 观察得仔细呀!这可是关键时刻呢,你得瞪大眼睛好好找。

别找半天啥都没看到,那不就悲剧了嘛!就好像找你丢了的东西一样,得仔细点呀!
7. 保持环境清洁呀!这可不是小事哦,脏兮兮的怎么能做出好标本呢?难道你能在垃圾堆里找出宝贝不成?所以一定得注意环境哦!
8. 操作得规范呐!每一步都要严格按照要求来,不能偷懒也不能乱搞哟!这就像走钢丝,一步错步步错呀!
总之,植物染色体标本制备可不能马虎,每个环节都得认真对待,这样才能成功呀!。

植物染色体标本的制备与观察 实验报告

植物染色体标本的制备与观察 实验报告

实验七植物染色体标本的制备与观察一、实验目的
学习植物染色体标本的制备技术,掌握染色体的技术方法,了解染色体的生物学意义。

二、实验用品
Carnoy固定液、0.1%秋水仙素溶液、1mol/HCL、Schiff溶液、亚硫酸水溶液(漂洗液)、混合酶液(纤维素酶、果胶酶各1%-2%)、Carbor fuchsin(卡宝品红)染液配方1、配方2
三、实验方法
1.取材:将大蒜培养,待胚根长达1-2cm时。

窃取0.5cm
长的根尖部分。

2.预处理:将切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中,室温下
处理3-4h
3.固定:取出根尖,投入Carnoy 液固定2-24h,换入70%
酒精,暂时保存
4.水解:把根尖投入预热的58-60℃1mol/HCL中,恒温下
水解14-15min.
5.染色:用配方2染5-10min
6.用蒸馏水西区多余染液
7.酶解:酶解20min左右
8.洗涤:用蒸馏水洗涤,除去残留酶液后加45%醋酸。

9.压片:将根尖置于载玻片上,滴半滴45%醋酸,盖上盖
玻片,压片
10.镜检
四、实验结果及分析
这是用大蒜根尖所制的玻片观察到的,只能看到被染色的核,但未能清晰观察搭配中期分裂相中染色体的排列。

分析实验失败原因如下:
1.处理时间不对,处理时细胞未处于分裂
中期
2.所用试剂配的有问题,导致最终只能看
到核被染色,但看不到中期染色体的清晰排布。

高中生物实验八 植物减数分裂过程中染色体行为的观察

高中生物实验八 植物减数分裂过程中染色体行为的观察

实验八植物减数分裂过程中染色体行为的观察一、实验目的1. 掌握制备植物细胞减数分裂玻片标本的技术和方法。

2. 了解植物花粉形成中的减数分裂各时期的特征及染色体变化。

二、实验原理减数分裂是进行有性生殖的动植物性母细胞成熟、形成配子过程中的一种特殊的细胞分裂方式。

在减数分裂过程中,染色体复制一次,细胞连续分裂两次,第一次为染色体数目减半,第二次分裂过程中每条染色体的两条染色单体分开,最终形成的配子中染色体数目仅为性母细胞的一半。

受精时雌雄配子结合,恢复亲代染色体数,从而保持物种染色体数的恒定。

植物形成配子时,由花药或胚珠中的某些细胞分化为二倍性的小孢子母细胞或大孢子母细胞,这些细胞连续进行两次细胞分裂即减数第一分裂和减数第二分裂,结果一个小孢子母细胞形成4个小孢子,一个大孢子母细胞形成一个大孢子,它们都只具有单倍的染色体。

植物材料的减数分裂制片通常采用涂片法,制片过程包括:取材、固定、染色及压片几个步骤。

三、实验材料葱花(染色体数2n=16)四、实验步骤1. 取材:选取处于减数分裂期的葱花,剪下花序。

2.固定:用卡诺氏固定液固定12~24h,之后用95%酒精冲洗,再转入70%酒精中,可于4℃冰箱保存。

固定的目的与有丝分裂相同。

3.制片:用镊子小心拨开花药壁,挤出花粉粒,涂于载玻片上,用镊子轻轻捣碎,用卡宝品红染色3~5分钟,盖上盖玻片。

4.镜检用低倍镜找到分裂期细胞,再转用高倍镜仔细观察。

五、注意事项不同部位的花粉粒的成熟程度不同,取材时注意避免选取相同部位的材料,以便观察到更多的分裂相。

六、实验结果观察:绘制所观察到的减数分裂各任四个时期的图相,并简述其特征。

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染色体标本制作与观察实验报告

染色体标本制作与观察实验报告

染色体标本制作与观察实验报告一、引言染色体是细胞核中的遗传信息携带体,它是由DNA和蛋白质组成的长丝状结构。

染色体的数目、形态和大小等特征在不同物种和个体中是有差异的。

本实验旨在通过染色体标本制作和观察,了解染色体的基本结构和分类。

二、实验材料1.新鲜的玉米幼苗2.醋酸3.高锰酸钾4.盐酸5.电镜滴管6.镜片和盖玻片7.显微镜8.实验室用具:手套、显微刀、移液器等三、实验步骤1.将新鲜的玉米幼苗准备好材料摆放在实验台上;2.取一片净玻片,滴加一滴醋酸,然后用电镜滴管吸取一点玉米根尖细胞悬浮液,滴在玻片上;3.将盖玻片慢慢压在悬浮液上,使悬浮液扩散均匀;4.把制作好的染色体标本放在带有千倍放大倍数的显微镜下观察。

四、实验结果将制作好的染色体标本放在显微镜下观察,可以清晰地观察到悬浮液中的染色体结构。

在玉米根尖细胞中,染色体呈为长条状丝状物,一般成双出现。

根据染色体的位置和大小可以将其分为四组,分别为A、B、C、D组。

五、实验分析根据观察结果可以得出以下结论:1.染色体是由DNA和蛋白质组成的长丝状结构;2.染色体的数目、形态和大小等特征在不同物种和个体中是有差异的;3.在玉米根尖细胞中,染色体大多数成对出现,有些物种的染色体可能会出现多倍体现象。

六、实验总结通过本实验,我们成功制作了染色体标本并观察到了染色体的基本结构和分类。

染色体是细胞核中的遗传信息携带体,对于了解生物遗传学、进化与变异等方面具有重要意义。

然而,本实验只观察了玉米根尖细胞中的染色体,染色体在不同组织和细胞中可能会有差异,需要进一步研究和探索。

同时,在制作染色体标本的过程中需要注意操作规范,以免对实验环境和个人健康造成危害。

以上是本次染色体标本制作与观察实验的实验报告,通过本实验,我们对染色体的结构和分类有了一定的了解,并为进一步的研究提供了基础。

实验过程中需注意操作规范,确保安全性和准确性的同时保证结果的可靠性。

植物染色体标本的制备

植物染色体标本的制备

实验用品
一、 材料 蚕豆、豌豆(或玉米、水稻) 二、器材 显微镜,擦镜纸,剪子,镊子,小平皿,载玻片, 盖玻片。 三、试剂 Carnoy固定剂, 95%酒精 ,1mol/L HCl, Schiff 试剂,亚硫酸
实验方法
1、将植物种子放在潮湿的滤纸上,20℃使其发芽。
2、预处理:切取的0.5cm长的根尖浸入0.1%秋水仙 素液中,室温下处理3~4小时。
观察
蚕豆根尖2n=2x=12
豌豆根尖 2nபைடு நூலகம்2x=14
玉米根尖 2n=2x=20
水稻根尖 2n=2x=24
思考题
1、简述Feulgen反应的原理 2、欲得到一张好的Feulgen反应制片, 制片过程中应注意些什么 3、绘制细胞分裂图。
3、固定、水解及染色:
Carnoy固定剂固定10~30分钟→95%酒精10分钟 →70%酒精10分钟→蒸馏水→ 1mol/L HCl, 60 ℃ 15 分钟→ Schiff试剂40~60分钟 →亚硫酸水(1,2,3) → 换3次,每次5分钟自来水→将染色后的根尖漂洗干净, 选择染色效果好的材料→蒸馏水→压片→镜检
目的要求
学习植物染色体标本的制备技 术,了解Feulgen反应的基本原理, 学习其操作方法和压片法,初步掌握 细胞分裂各期的主要特点。
实验原理
Feulgen反应的原理是根据DNA经弱酸 (1mol/L)水解后,打开嘌呤和脱氧核糖连接的 键,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基.这些醛 基就在原位与Schiff试剂结合,形成含醌基的化 合物,醌基是一个发色团所以具有颜色,因此凡 有DNA的部位,就呈现紫红色。

遗传学实验操作规程:染色体标本制备与观察实验操作规程染色体制片

遗传学实验操作规程:染色体标本制备与观察实验操作规程染色体制片

遗传学实验操作规程:染色体标本制备与观察实验操作规程染色体制片技术显示染色体一般的形态和结构,成功的关键是获得大量染色体缩短适宜的分裂细胞。

1. 压片法1.1 取材在适当的时间选取细胞分裂旺盛的组织。

1.2 预处理秋水仙素进行活体或离体处理。

1.3 固定卡诺固定液固定,迅速杀死生活细胞使染色体的组成蛋白变性,保持染色体形态和结构。

1.4 解离1mol/L HCl60℃进行酸解,不同的材料的酸解时间不同。

1.5 染色改良石炭酸品红染色。

1.6 压片染色后盖上盖片,用大拇指按压有材料的部位,粗滤纸吸干多余染液,再用铅笔头轻敲,使重叠细胞分散,得到理想的分裂相。

1.7 观察低倍镜找到分散良好的分裂相后换高倍镜或油镜。

1.8 绘图会制分散良好的细胞染色体图或拍照进行核型分析。

2. 去壁低渗法2.1 前低渗经预处理的材料转入0.075mol/L或蒸馏水中室温下30min。

2.2 酶解去壁纤维素酶和果胶酶混合液处理2~4h。

2.3 后低渗洗去酶液,蒸馏水处理10~30min。

2.4 固定制备细胞悬液倒去蒸馏水将材料充分夹碎,加入固定液。

2.5 制片用吸管吸取细胞悬液,高度30~40cm,滴在预冷的载玻片上,在酒精灯火焰上微微加热,室温晾干。

2.6 染色10% Giemsa染液染色。

2.7 观察低倍找到分散良好的分裂向后换高倍镜观察。

2.8 绘制分散良好的细胞染色体图或拍照进行核型分析。

3. 注意事项显微镜使用完毕后须对油镜头进行清洁,并将电源关闭,罩上防尘罩。

染色体组型分析实验操作规程染色体组型分析是对染色体组中处于有丝分裂中期时染色体的数目、大小、形态、着丝点的位置以及次缢痕、随体的有无等形态特征作一描述.将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像就称为该细胞的组型。

1. 染色体制片→显微照相→放大。

2. 测量测量染色体的长短臂长度,并记录。

3. 计算臂比值、相对长度,根据臂比值确定染色体类型。

染色体标本制作与观察实验报告

染色体标本制作与观察实验报告

染色体标本制作与观察实验报告实验报告:染色体标本制作与观察一、实验目的1.掌握染色体标本制作的基本原理和方法。

2.学习并掌握染色体观察的基本技巧和特点。

3.通过实验加深对遗传学基础知识的理解和应用。

二、实验原理染色体标本制作是生物学实验中的一项基本技术,其目的是将细胞中的染色体以一种可见且易观察的形式展现出来。

染色体观察有助于我们了解细胞分裂过程中染色体的行为和变化,进一步理解遗传物质的复制、分离和交换等基本过程。

本实验将通过植物根尖细胞的有丝分裂过程来制作染色体标本,并通过显微镜观察其形态和分布。

三、实验步骤1.准备试剂和器材:碱性染料(如龙胆紫溶液)、生理盐水、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜等。

2.选取植物根尖:选择新鲜的植物根尖,长度约为5-10mm。

3.预处理:将根尖放入冰箱冷藏(4℃)约24小时,然后放入25℃的温水中浸泡约6小时。

4.固定:用镊子将根尖取出,放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时,然后转移到70%酒精中保存。

5.解离:将根尖放入1N的盐酸盐酸盐酸KOH溶液中,在60℃的水浴中解离10分钟。

6.漂洗:用镊子取出根尖,用清水冲洗3次,每次5分钟。

7.染色:将根尖放在载玻片上,用滴管吸取龙胆紫溶液滴在根尖上,染色3-5分钟。

8.制片:盖上盖玻片,避免产生气泡。

然后在显微镜下观察。

四、实验结果与讨论1.实验结果:通过显微镜观察到清晰的染色体形态,可以看到细胞分裂的不同阶段,如前期、中期和后期。

在中期可以看到染色体整齐地排列在赤道板上,而在后期则可以看到染色体的分离和移动。

这证明了实验方法的可行性。

2.结果讨论:实验中观察到的细胞分裂过程与教科书中的描述基本一致,说明我们的实验方法是有效的。

此外,通过观察不同阶段的细胞分裂,我们可以更好地理解细胞周期和遗传物质的复制、分配等过程。

然而,我们也注意到实验过程中存在一些问题。

例如,解离过程中可能会出现过度解离的情况,导致染色体形态不完整。

植物染色体的制片与观察

植物染色体的制片与观察

植物染色体的制片与观察以及核型分析组员:郑石悦陈雨佳吴俊强植物染色体的制片与观察一.实验目的:1.了解预处理,固定,解离,染色,烤片,及压片的步骤和作用。

2.掌握植物有丝分裂染色体常规制片技术。

3.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征以及动态变化。

二.实验原理:1.植物根尖分生组织的细胞有丝分裂比较旺盛,每天都有分裂高峰时期。

2.不同植物分裂高峰时期是不同的。

大蒜和洋葱细胞的有丝分裂高峰时期通常在上午九点到十一点。

3.把分裂时期的根尖用固定液固定,再经染色后压片,在显微镜下进行观察,就能看到处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。

4.预处理可以使染色体缩短变粗,易于计数。

同时抑制细胞分裂过程中纺锤丝的形成,使更多细胞停留在分裂中期。

这时,染色体分散在整个细胞质中,有利于染色体的形态数目观察。

三.实验材料:洋葱实验用具:显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,镊子,解剖针,恒温培养箱,恒温水浴箱,棉签,刀片试剂:95%乙醇,冰醋酸,盐酸,醋酸洋红染色液,秋水仙素,2甲苯四.实验步骤:1.材料的培养:洋葱置于盛有湿沙的托盘中,20~25度培养至根长1~2厘米时取材。

取材时使用解剖针及镊子。

2.预处理:(1)化学药物处理:0.05%~0.2%秋水仙素水溶液在室温条件下处理2~4个小时(注意时间不能过长,过长染色体会变得很短,不利于研究)(2)冷冻处理:将根尖置于盛有冰雪混合物的烧杯中,保存于1~4度的冰箱20~24个小时(化学药物处理对染色体有破坏。

冷冻处理无破坏,对禾本科植物效果良好)3.固定:将材料再用蒸馏水冲洗两次,转入卡诺氏固定液(乙醇和冰醋酸以三比一混合)中固定24个小时(注意取材和固定时要在有丝分裂高峰期)。

4.解离:将根尖用蒸馏水冲洗后放入已经在60度恒温水浴箱中预热的1mol每升的盐酸中,60度水浴约十分钟,当根尖的伸长区变透明而分生区呈米黄色或乳白色时即可取出,用蒸馏水冲洗后备用。

5.染色及压片:取出根尖,去掉伸长区,留1~2mm的分生组织区滴一滴醋酸洋红染色液,染色2~3分钟,然后盖上盖玻片,在酒精火焰上方加热至手背触摸盖玻片时感到微烫(酒精灯加热的作用是1.软化细胞,易于压片2.使细胞质颜色变浅,使染色体颜色反差加大,利于观察)。

植物染色体制片与观察实验报告

植物染色体制片与观察实验报告

植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组)同组成员:曹鉴云陈锦容刘艳马彦霞一、中文摘要:染色体(Chromosome),是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,又叫染色质。

其本质是脱氧核甘酸,是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体,是基因的载体。

这里我们用洋葱染色体作为代表使用压片法制片并且进行观察。

二、关键词:染色体洋葱压片法三、引言:洋葱(onion)是百合科(Liliaceae)葱属中以肉质鳞片和鳞芽构成鳞芽的2年生草本植物,其学名为Allium cepa L,染色体数为2n=2x=16。

由表1和图1可见,洋葱的8对染色体中,有7对(第1~7对)染色体,臂比在1·01~1·70之间,为中部着丝点染色体,1对(第8对),臂比为4·74,为近端部着丝点且带随体的染色体;依据STEB-BINS[4]的核型分类标准,洋葱的染色体核型在遗传进化上属较古老的2A型。

100多年来有关染色体与染色体组结构功能的研究一直是生命科学最活跃的研究领域之一,现今人们完成基因组测序后回到对染色体上进行基因定位和作图,因此有关染色体的研究在基因组合功能基因组时代都有重要意义,陈瑞阳教授历时25年的研究完成的《中国主要植物染色体研究》对我国2834种植物染色体数目进行了报道,完成了1045种植物的核型分析,积累了宝贵的染色体基础数据创建了我国植物染色体研究信息平台。

研究染色体进化与生物进化的有不可分割的关系,国际对染色体的化学成分,DNA含量,碱基组成和以染色体数目、形态、结构、大小等为特征的核型进化与物种形成和演化关系的研究,为揭示生物进化趋势提供染色体方面的科学资料,总的来说对染色体的研究在各类学科领域内都有着重要的意义。

国内外对洋葱的研究主要在其成分和药用方面,在细胞遗传上张自力和陈瑞阳等对洋葱的C带显示法进行过研究,田秋元等对洋葱的核型分析及有关制片方法进行了探讨。

实验八 牛蛙骨髓染色体标本的制备与观察2009-5

实验八 牛蛙骨髓染色体标本的制备与观察2009-5
3.离心速度太高,细胞团块不易打散, 速度太低,则会丢失大量细胞。
作业:
1.找出最好的几个分裂相,数出染色体条 数.
2. 画出两个好的分裂相的显微图。画图里 用铅笔,对照着显微镜视野来画,不要 画“想象图”。
3. 取骨髓前,为什么要给牛蛙注射秋水仙 素?
牛蛙染色体,2n = 26
牛蛙染色体,2n = 26
吸去上清
900μl , 吸20μl滴片
残液悬浮 × 片/人
15cm
定液悬浮
定液悬浮
干燥
镜检
干燥 自来水洗 去浮色
2张吉姆
萨染色20
分钟
实验注意事项
1.骨髓染色体标本的制备成败决定于取材, 若抽取的骨髓太少或太稀,细胞数目过少, 不易获得较多的中期分裂相。
2.低渗处理极为重要,低渗不够,则染 色体聚在一起,分散不好。太过,则造成细 胞破碎,染色体丢失。
动物的药物处理(课前已经完成)
牛蛙称重,按每克体重2微克的剂量 腹腔注射秋水仙素溶液(用0.65%生理盐 水配制)。注射后3.5~4小时,用过量乙醚 或氯仿麻醉牛蛙。
实验操作
1.每组同学取前肢、后肢各一,取出肱 骨、股骨和胫腓骨等长骨。用骨剪(使用 骨剪时要小心,不要剪到硬骨部分损坏骨 剪韧口),剪去骨两端膨大部的半透明软 骨,程度以刚刚露出骨髓组织为宜。
开始实验
实验操作(续)
5.在每管细胞悬液中加蒸馏水lml,吹打混匀,室温下静置,低 渗处理20分钟。
6.3000转/分离心5分钟,小心吸去上清液(弃去),每管加入甲 醇-冰醋酸固定液 lml,用吹打法将细胞充分悬浮,固定15分钟。
7.重复(6)一次。
8.3000转/分离心5分钟,小心吸去上清液(每管约900微升弃 去),留少量残液用吹打法将沉淀充分悬浮。取悬液20微升,从 约15厘米的高处滴加到预先冷冻、用酒精浸泡的载玻片上(滴加 在载玻片靠近一端处, 以节省染液),并吹口气令细胞自然散开,
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实验八 植物染色体标本的制备与观察
一、实验目的
1、掌握常规压片法制备植物染色体标本。

2、了解中期染色体的形态和结构以及染色体的生物学意义。

二、实验原理
染色体是细胞分裂时期遗传物质存在的特定形式,是染色质紧密包装的结果,对染色体的观察在研究生物进化、发育、遗传和异变中有十分重要的作用。

植物染色体标本的制备,常用分生组织如根尖、茎尖和嫩叶做材料。

常规压片法仍是当今观察植物染色体常见的方法,其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤,简单易操作,但是染色体易变形、难分散开。

三、实验仪器、材料和试剂
(一)仪器、用具:显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、盖玻片、玻璃板、酒精灯。

(二)材料:蚕豆(Vicia faba , 2n=2x=12)、黑麦(Secale cereale , 2n=2x=14)、大麦(Hordeum sativum, 2n=2x=14)、普通小麦(Triticum aestivum , 2n=2x=42)、玉米(Zea mays , 2n=2x=20)、豌豆(Pisum sativum , 2n=2x=14)、洋葱(Aillum cepa ,2n =16)等根尖。

(三)试剂
1、 Carnoy 固定液、1%秋水仙素(或对二氯苯)。

2、苯酚品红染色液。

四、实验方法与步骤压片法制备染色体标本:
(1) 取材:把蚕豆种子预先浸泡12h ,然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中上面蒙上湿纱布,置25℃温箱中暗培养发根,经过48h 后幼根长至1—2cm 左右,于上午9—11时剪下根尖。

(2) 预处理:将剪下的根尖置于对二氯苯饱和水溶液或0.1%秋水仙素溶液中,浸泡处理2-4 h 。

(3) 固定:用水洗净处理过的根尖,经Carnoy 固定液中固定2-4h ,转入70%乙醇中,4℃保存备用。

(4) 解离:取出根尖,用蒸馏水洗净,放入l M HCl 中60℃解离8-10min ,再用蒸馏水洗净。

(5) 染色:改良苯酚品红 染色5—10min 。

(6) 压片:把根尖放在载玻片上、切取分生区部分、加一滴45 %醋酸,盖上盖玻片,用力垂直猛压,盖玻片上放上一滤纸,用铅笔上的橡皮头轻轻敲打盖片,使细胞和染色体分散。

(7)镜检
五、实验结果
六、作业:绘制出中期染色体图。

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