测序样品准备储存与运输指南
样品采集保存和运输
基因芯片样品的采集、保存和运输基因芯片实验、microRNA芯片实验、PCR芯片实验和实时定量PCR实验的样品准备一、动物组织样品保存与运输（每张芯片需50-100mg组织）1、新鲜组织样品的保存与运输A、使用RNA later试剂→取新鲜组织（注：生物体死亡后尽快在10分钟内取材），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，所用组织必须切至厚度在0.5 cm以下（长宽不限），然后放入装有5倍体积RNA later的离心管（或冻存管）中。
→4℃孵育过夜，此时样品管需要横置以便组织块充分接触到RNA later，然后转入- 20℃中保存。
样品在- 20℃不会冻结，但是溶液中可能有一些晶体出现，这并不影响后续的RNA抽提。
冻存样品也可以反复冻溶，其RNA含量和完整性不受影响。
→RNAlater处理的标本可用常规冰袋4℃低温运输（无需使用干冰- 70℃运输）。
B、使用Trizol试剂Trizol试剂可抑制RNA酶活性，破坏细胞膜结构以裂解细胞释放出RNA。
→取新鲜组织（注：生物体死亡后1分钟内取材料并保存好），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，每50~100 mg组织加1 ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品，操作最好在冰上进行。
→匀浆的裂解液4℃短期保存（1个月），-20度或- 70℃长期保存。
干冰运输，短期（5天以内）冷藏（4℃）运输亦可。
2、冻存组织的保存与运输生物体死亡后尽快（最好在10分钟内）切取新鲜组织，以PBS或生理盐水清洗干净切为小块，立刻放入液氮中冷冻2-3小时后可转入-70℃冰箱保存或着一直保存在液氮中。
冻存组织可放入干冰中直接运输，或者以Trizol 4℃下匀浆：冻存的组织块以液氮研磨后加Trizol或直接加Trizol以电动匀浆器匀浆，匀浆的裂解液干冰运输或短期（5天以内）冷藏（4℃）运输。
二、哺乳动物培养细胞样品采集、保存与运输——使用Trizol试剂（不建议使用RNAlater）1、悬浮细胞→悬浮细胞培养液倒入离心管中，离心沉淀细胞，弃去上清液。
高通量测序样品要求及注意事项高通量测序样品要求及注意事项
高通量测序样品要求及注意事项高通量测序样品要求及注意事项BIOPIC面向北京大学校内提供高通量测序服务，所使用的测序仪为Illumina公司的HiSeq 2000测序仪。
为保证获得高质量的测序结果，一个重要前提是提供给我们高质量的DNA、RNA样品。
请仔细阅读本说明并严格按照要求准备样品，这将帮助您得到最佳的测序数据和结果。
如果所递交的样品质量不能符合下述要求，您的样品将不被处理并将被通知退回。
接到我们的退回通知后，请到测序中心取回您的样品。
通知一个月后未被领取的退回样品我们将不再保留。
样品信息单一、样品信息单所有样品必须随同《样品信息单》一起递交，请在BIOPIC网站上下载表格或者联系中心的工作人员（62744052，sequencing@）索取表格。
请详细填写信息单上所要求的各项样品信息及您的测序要求，并打印两份、签名后随同样品一起递交至BIOPIC中心测序实验室。
样品要求二、DNA/RNA样品要求我们接受的样品包括提取好的Genomic DNA，Total RNA, ChIP-Seq产物等。
提交的DNA或者RNA样品由中心的工程师建立测序文库并上机测序，结果将以碱基序列的形式提交给用户。
针对基因组测序、mRNA转录组测序、外显子组测序、染色质免疫沉淀测序等不同测序要求，所需样品量略有不同，请参见下表：建议总量/(最低量*) 建议浓度/(最低浓度*)RNA转录组测序 10 / (1) μg 200 / (20) ng/μl链特异RNA测序 10 / (3) μg 200 / (60) ng/μlSmall RNA测序 10 / (3) μg 1000 / (500) ng/μlChIP测序 20 / (5) ng 5 / (1) ng/μlMulti-PCR产物高通量20 / (5) ng 5 / (1) ng/μlDNA重测序 10 / (1) μg 200 / (20) ng/μlHuman Exome测序 10 / (3) μg 200 / (60) ng/μl*最低量或浓度仅以Pico Green (Qubit)检测结果为准，建库有一定风险。
标本采集、运送、保存程序
标本采集、运送、保存成序1.目的规范标本采集程序，保证实验室检测前标本质量。
2. 范围微生物标本。
3. 职责3.1 医护人员和检验人员负责指导病人如何正确留取标本。
3.2 标本运输人员负责收取标本和运输标本至微生物室。
4. 程序4.1 采集标本前，采样人员根据检验申请单检验项目的要求，确认采样计划并进行适当的准备工作，包括核对遗嘱、打印条形码、选择合适的标本容器、粘贴条形码及指导病人做好采样前的准备工作等。
4.2 认真核对病人、标本容器和检验申请单是否一致，严防差错。
4.3 标本送到微生物室，标本运输人员必须与微生物室标本接收人员对标本进行核收登记并签名4.4 所有标本必须记录采样时间并立即送检，一般不得超过2h.5 采集方法5.1 血液及骨髓5.1.1 血液5.1.1.1采血时间：①在抗菌药物治疗前；②尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前30-60分钟内采血；③如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养；④同时或短时间内完成几套血培养采集，除非怀疑存在持续性菌血症时（如亚急性感染性心内膜炎1-2小时从不同部位采集3套标本）5.1.1.2采血量：成人一次采血5～10ml,儿童2～5 ml婴幼儿为1～2ml。
（附注：儿童的采血量不能超过其总血容量的1%）。
5.1.1.3采血方法：①成年病人，推荐同时在不同部位采集2～3套（每套包括一瓶需氧瓶、一瓶厌氧瓶）；对于感染性心内膜炎和真菌血症则应多次采集；对于婴幼儿病人，推荐同时在不同部位采集2～3瓶。
因为儿童患者很少见厌氧菌感染，因此推荐仅使用需氧瓶而不常规推荐同时做厌氧培养。
②采血量充足时，应先注入厌氧瓶，后注入需氧瓶；采血量不足时，应先注入需氧瓶，后注入厌氧瓶。
5.1.2 骨髓标本用骨髓穿刺针从髂骨采集。
5.1.3 标本保存：采集标本后立即送到实验室，不能及时送检可置于室温，切勿放入冰箱。
冬季血培养瓶在送检过程中应采取一定的保暖措施。
5.2 脑脊液标本：由临床医师以无菌要求做腰椎穿刺，抽取脑脊液2～3ml,盛于无菌容器中送检。
检验科实验室样本运输与保存方法
检验科实验室样本运输与保存方法实验室的样本运输与保存方法对于确保实验结果的准确性和可重复性起着至关重要的作用。
本文将就检验科实验室中常用的样本运输与保存方法进行详细探讨，以提供一个有效的指导。
一、样本运输方法1. 预处理在进行样本运输之前，应对样本进行适当的预处理，以确保样本的完整性和准确性。
这包括标记样本的详细信息，如样本编号、采样日期和时间等。
对于液体样本，还应注意密封和防漏。
2. 适当的容器选择选择适合样本的容器至关重要。
对于固体样本，应选择密封良好、耐压、耐腐蚀的容器，并确保容器内无杂质。
对于液体样本，除了上述要求外，还应选择耐化学试剂的容器，以避免与容器发生反应。
3. 温度控制在进行样本运输之前，需要根据不同样本的特性选择合适的温度控制方法。
对于对温度敏感的样本，应采用冰袋、干冰或低温冷藏的方式进行冷藏运输，确保样本在适宜的温度下保持稳定。
4. 充分填充在将样本装入容器时，应确保容器内充满样本，以减少样本在运输过程中的振荡和氧化。
如果样本量不足，可使用适当的辅助物质填充容器，如氧化铝球或无菌棉球等。
5. 安全包装为了保护样本的完整性，需要将样本容器进行适当的包装。
可以使用泡沫塑料、防震泡状膜等材料进行包装，以减少运输过程中的震动和外部冲击。
6. 运输记录在样本运输过程中，应及时记录运输的详细信息，如样本的出发地、目的地、运输人员和时间等。
这有助于追踪样本运输过程中的任何异常情况，并确保样本的安全到达目的地。
二、样本保存方法1. 冷藏保存对于一些需要长期保存的样本，冷藏是一种常见的保存方法。
将样本储存在恒温冰箱或冷冻柜中，以确保样本在低温下保持稳定。
同时，应注意样本的防止冻结和蒸发。
2. 干燥保存对于一些湿度敏感的样本，应选择干燥保存的方法。
可以使用干燥剂或密封良好的干燥容器，减少样本与湿度的接触，防止样本变质和损失。
3. 防光保存对于一些光敏样本，应选择防光保存的方法。
将样本存放在避光容器中或使用遮光布进行覆盖，以降低光照对样本的影响，保持样本的稳定性。
核酸检测标本采集保存运输
二、标本血量：5 ml，1支；
常规血液检测与核酸检测的试管
核酸检测标本 留样试管
常规检测标本 留样试管
第二步：标本的采集-离心
核酸易受核酸酶作用而迅速降解；
全血标本采集后72//4 小时内分离血浆； 离心要求： 800-1600g /20min
• 1、试管要求：无菌真空带分离胶试管(无RNase) • 2、抗凝剂要求： EDTA K2 或 枸橼酸盐； • 3、标本血量要求： 5.0 ml × 1 支 全血； • 4、标本采集后的要求：
a、无溶血、未稀释、标签完整； b、4-10小时内离心分离血浆； c、2-8℃ 临时保存和运输； d、72小时（48小时）内检测（厂家建议）； e、-80 ℃ 保存。
常规检测的标本要求
• 1、试管要求： 普通真空采血管； • 2、抗凝剂要求： EDTA K2 或枸橼酸盐； • 3、标本血量要求： 5.0 ml × 1 支 全血； • 4、标本采集后的要求：
a、无溶血、未稀释、标签完整； b、2-8℃临时保存和常温运输； c、1 周内检测； d、-20 ℃ 保存。
样本运输：冷藏运输
检测：在 2-8°C保存不超 过72小时
样本接收 然后 2-8°C 保存
血液标本采集、运输的重要性
血液标本质量的重要性
标本采集、保存和运输过程
采血管
离心
运输条件
献血员
采血管 血清管 血浆管
离心前 保存温 度保存 时间
离心后 保存温 度保存 时间
实验室 接收后
至检测 前的保
存
血液核酸检测标本的要求
4小时内离心然后28c保存样本采集处理运输储存的最佳流程结果记录运输条件献血员采血管血清管血浆管离心前保存温度保存时间离心后保存温度保存时间实验室接收后至检测离心采血管2抗凝剂要求
检验科实验室标本处理与运输指南
检验科实验室标本处理与运输指南在医疗机构中，检验科是非常重要的一个部门，负责分析和检测收集自患者身体的标本。
标本处理与运输是确保检验结果准确可靠的关键步骤。
本指南旨在提供关于标本处理与运输的准确指导，确保标本质量和安全，并保证检验结果的准确性。
一、标本采集标本采集是保证标本质量的首要步骤。
以下是一些标本采集的基本原则：1. 标本采集时间选择：根据不同检验项目的要求，合理选择标本采集时间，尤其是涉及时间敏感标本的检测项目。
2. 采集前准备：在采集前，确保准备充足的采集材料，包括合适的容器、采集针、消毒剂等，并确认采集管的标识正确无误。
3. 标本采集过程：遵循标本采集的正确步骤，如消毒、穿刺、采集等。
注意避免过度采集或不足采集。
4. 注意交叉感染：在采集过程中，要严格遵守感染控制原则，包括勤洗手、佩戴手套、消毒针头等，以防止交叉感染的发生。
二、标本处理标本处理是确保标本稳定性和完整性的关键步骤。
以下是一些标本处理的基本原则：1. 标本接收：及时接收标本，并进行确认和登记。
对于需特殊处理的标本，如冷冻、离心、稀释等，要进行相应的处理。
2. 标本稳定性：针对不同的检测项目，要正确选择合适的保存条件，如温度、湿度等。
确保标本的稳定性，避免影响检验结果。
3. 标本分装：对于大容量的标本，需要分装成小容器进行保存，以减少样品破坏的风险。
同时，要确保标本的正确标识与标记，避免混淆。
4. 容器选择：选择适合不同检验项目的容器，确保容器的密封性和安全性，避免标本泄露或污染。
三、标本运输标本运输是确保标本能够及时、安全送达实验室的重要步骤。
以下是一些标本运输的基本原则：1. 运输温度：根据标本的要求，选择合适的运输温度。
对于需要低温保存的标本，如冰袋运输要注意不要让冰袋直接接触标本容器，以避免标本损坏。
2. 运输安全：确保标本容器完整无损，避免在运输过程中发生泄露或破碎。
在容器外部使用填充物来稳固容器，避免碰撞和摇晃。
如何做好实验室检测样品采集保存与运输
如何做好实验室检测样品采集保存与运输文│金彩虹（山东省龙口市畜牧兽医站）张碧雪（山东省龙口市新嘉街道畜牧兽医站）曲文（山东省龙口市石良镇畜牧兽医站）在动物疫病防控工作中，疫病监测起着非常重要的作用。
真实可靠的实验室检测数据为动物疫病的预防、诊断、治疗等工作提供了科学依据。
笔者认为，在实验室检测工作中，要想保证检测数据真实有效，首先要确保检测样品的可靠性，因此样品的采集、保存与运输至关重要。
一、样品的采集1.制定合理的采样方案。
采样前，要根据检测要求，制定合理的采样方案，明确采样目的、采样方法、采集对象、采集场所、使用器材、采集份数、数量以及采样人员等。
2.采样技术。
采样人员事先要经过严格培训，熟练掌握采样技术，避免因采样技术不熟练，导致被采样动物遭受过大的应激反应或伤害，甚至死亡。
例如采集幼鸡心脏血时，如果采样人员不熟练采样技术，就有可能造成因扎针位置、深浅度不规范，导致幼鸡内出血甚至死亡。
因此，采样前一定要熟练掌握操作技术。
3.采样原则。
在进行流行病学调查、监督检验工作中，一般采取随机抽样的原则对群体进行评价，根据抗体水平的高低和整齐度，评价疫苗的免疫效果和群体抗感染能力。
在疫病诊断过程中，需要选择有代表性的病死动物的新鲜胴体进行剖检，采取病灶附近的组织作为检验样品。
4.无菌采集。
采集的样品应保证无外源性污染，如在采血前，对进针局部进行酒精棉球擦拭消毒，使用灭菌针头和注射器采样。
采集环境样品和棉拭子时，使用的棉棒要提前进行灭菌，采集后将样品立即放入加盖离心管或密封袋内密封保存。
5.不同样品的采集要求不同。
在采集动物血清样品时，采完血首先要静置，待其完全凝固后再移动，如果采血后立即运输，会极易发生溶血或者呈现胶胨状，影响检测结果；采集含抗凝剂的样品后，应立即晃动采集管，使抗凝剂和样品充分混合，以免血液凝集；采集动物棉拭子时，要确保棉棒蘸取足够多的分泌物或排泄物等，否则视为无效采样；在采取病死动物的组织样品时，要选择刚死亡的新鲜动物胴体，最好不要超过死亡后6小时。
样品的采集运输保存ppt课件
炼钢厂发生煤气中毒事故，造成27人中毒，其 中3人死亡。 2005年我省共发生重大急性职业中毒11起，接 触人数7007人，发病人数44人。
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中国石油四川石油管理局所属的罗家16# 井突然喷出含有大量硫化氢气体的天然气； 含有高浓度硫化氢的天然气从井口喷出30 余米高
矿井周围有2个村落，最近的住户距井口 不到100米；
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样品采集 运输和保存
4. 未知原因事件中样本采集 对于毒物的种类难以肯定时，应采集与中毒可
能有关的所有样品，采集足够的样品量；此外， 采样容器和采样工具的材质不能含有干扰物质； 采样操作要防止交叉污染；样品运输和保存中 要确保不发生降解、泄漏和变质。
采样时应注意个人防护
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样品采集 运输和保存
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七 .样品采集 运输和保存
1. 采集原则 典型性
可根据流行病学调查初步结果采集与中毒 可能有关的样品；即典型样品。 适时性 采集样品要有时间概念，发生应急事件时 在接到报告的第一时间赶到现场，采集 怀疑样品。
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样品采集 运输和保存
2.采样要求 选择适合的采样方法
不同的样品有不同的采样方法,应了解并正确选 择 对那些可能有环境和生物本底的毒物要采集对照 样品，并采集足够的样品数量满足检验需要 采样时要防止交叉污染； 样品应尽量不加防腐剂或抗凝剂（个别类型的样 品除外） 按方法要求需要添加试剂的则应注明。
检验标本采集储存运输交接处理制度
检验标本采集储存运输交接处理制度临床检验的任务就是对临床标本进行检测分析，为临床疾病诊断、治疗及疗效观察提供实验室结果，并为临床提供咨询服务。
因此，检验标本的正确采集储存运输交接处理是确保临床检验顺利进行的重要条件。
为此，制订检验标本采集储存运输交接处理制度。
1检验标本采集按照检验标本采集与送检须知及采集标本注意事项（附件1，2）要求采集合格的标本，并及时送检。
2.标本的储存。
对不能及时检验的试样，应按试验要求妥善保管。
有一个专门用来存放标本的冰箱。
冰箱有温度记录。
报告结果后的样本应至少保存48小时，以便与重新采集的样本进行审查或对比分析。
3.标本的运输和交接按《临床实验标本送检暂行规定》（附件3）执行，防止标本丢失。
4检验后的标本要按照医疗废物处理规定处理（附件4）。
附件1检验标本采集与送检须知一、样本采集要求1．血细胞分析(包括血细胞五分类、细胞分类、eos计数、ret计数、疟原虫等)：紫色真空采血管(edta盐抗凝管、血细胞五分类试管)，只须采血1管至刻度充分混匀(注意：充分混匀：一般指迅速将血液和抗凝剂轻轻的颠倒混匀，避免用力振荡!)。
2.血氨和糖化血红蛋白：紫色真空采血管，取1管血液至刻度，搅拌均匀。
3.淋巴细胞亚群测定：紫色真空采血管，取1管血至刻度，混匀。
4.HLA组织匹配：紫色真空采血管，3根采血管至刻度，充分混合；PRA分析：取1管，不含抗凝剂3-4毫升。
5．血栓与止血项目(pt四项、凝血因子、d-二聚体、纤维蛋白原、3p试验等)：兰色真空采血管(枸橼酸钠抗凝管、pt试管)，只须采血1管至刻度充分混匀(注意：务必采血至刻度!若是凝血、溶血、血量少或血量多的标本，需要重新采血，否则检测结果不可靠!)。
6.HLA-B27检测：蓝色真空采血管，取1管血液至刻度，混匀。
7．三溶试验：采血2管，1管用兰色真空采血管，采血至刻度充分混匀，另1管采不抗凝血2-3毫升。
8.血沉：0.4毫升3.8%柠檬酸钠溶液和1.6毫升血液充分混合。
样品的采集运输保存【共28张PPT】
标本采集
4.血液
2）采样操作：通常采血部位为肘静脉，将止血带 扎在静脉取血部位的上方，采用商品化的一次性注 射器或真空采血管采血；
拿下止血带，用无菌棉压迫止血；
标本采集
三、采集方法
5.鼻咽抽吸物
用商品化的粘液抽吸器从双侧鼻孔中抽吸获得，导管在鼻 尖到外耳道中间的位置连接，不停的转动导管，采用负压
标本编号:无锡识别号+县区识别号+医疗机构识别号+标本序号
采集份数
具有PCR检测资质的县（市）级及以上（含二级、三级）医疗机构作为省级
监测点： ➢ PCR检测：对流感样病例详细询问流行病学史，开展相关医学检查、检验，
在抗病毒治疗前进行进行甲型流感病毒通用引物PCR检测，剩余核酸样本约 45ul于-20℃冻存 ➢ 标本采集：若胶体金检测结果阳性，在抗病毒治疗前再采集1份咽拭子（ 或呼吸道分泌物）3管。同时用5ml促凝管采集静脉血1份（5ml）标记编号 ，并填写阳性标本登记表。 ➢ 监测工作开展第一周同时采集咽拭子和血标本，第二周开始只采集咽拭子，血标本 可以不采。标本编号:无锡识别号+县区识别号+医疗机构识别号+标本序号。
将拭子头插入病毒采样管中。
监测工作开展第一周同时采集咽 和血标本，第二周开始只采集咽拭子，血标 拭子 用商品化的粘液抽吸器从双侧鼻孔中抽吸获得，导管在鼻尖到外耳道中间的位置连接，不停的转动导管，采用负压100mmHg持续15秒的间歇性抽吸后慢慢退出。
本可以不采。 于超声雾化器雾化杯中加入4％的NaCl溶液40ml，吸入高渗盐溶液15～25min，嘱病人漱口，用力咳出深部痰，收集入无菌采集容器中送检。
由临床医生按相应操作规程，采集标本置 入无菌采集容器中，标本量应≥5 ml，立即送检， 但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群 的污染。
检验标本采集运输指南【范本模板】
检验标本采集运输指南博兴县医院检验科2011年11月重要警示语将每一份标本都看作是无法重新获得、唯一的标本，必须小心地：采集、保存、转运。
按照时间顺序，从临床医生开出医嘱开始，到分析检验报告发回的步骤，包括：检验申请、患者准备、原始样品采集、运送到实验室完成分析前的质量控制.大部分工作都是医生、护士、运输人员、检验人员共同协调完成。
在实验室检测以外空间完成的分析前的质量管理最易出现问题。
临床反馈不满意的检验结果,60%报告最终可溯源到标本质量不合格。
可靠的检验结果，第一个环节必须依赖于标本的高质量.要获得高质量的标本：临床医生：应主动明确地告之患者如何配合好护理人员和检验人员：采集好、检测好标本运输人员：及时快速规范转运好标本在实验室进行检测、检验结果审核、报告数据发回.一、采集标本前质量保证、对策（一）加强沟通，合理选项医生应认真、完整地填写检验申请单,特别是:患者服药史、特殊病理变化、留取标本、送检标本的时间等。
（二）患者准备，至关重要医护人员应了解在标本采集前影响结果的非病理性因素(药物、饮食、运动、治疗、生理变化、生活环境和习性、标本采集时间）正确指导患者，采取切实措施，规范采集标本前患者的一切行为，保证采集的标本符合疾病的实际情况,留取合格的标本。
应告之患者：试验名称、所需标本类型、为什么要检测、检测报告时间、如何获得结果。
（三）采集前准备：1、条码生成与粘贴。
2、合格的采血人员。
3、标准化的采血程序。
4、合格的采血器材。
二.标本基本类别全血、血浆、血清、尿液、粪便、脑脊液、心包积液、胸腔积液和腹腔积液关节积液、前列腺液和精液、痰其他(包括乳汁、泪液、房水、唾液、脓液和各种分泌物等）各种穿刺物[血液标本的采集］一.血液标本基本要求保持标本完整性：控制各种干扰因素保持标本新鲜:最好的尺度是时间拒绝不合格血标本：脂血、溶血、凝固等二。
标本采集的时间（一）随机和急诊标本随机和急诊标本是指无时间限定或无法规定时限而必须采集的血和尿等标本，一般无法让患者进行准备.此类标本主要是门诊、急诊和抢救病人必须做的一些检查标本,或在体内代谢相对较稳定的检查物质，或受体内外干扰较小的检查物质。
样品的保存和运输(表达谱芯片)
无介质 Rnase-freeH2O
/DEPC H2O 75﹪或 无
水乙醇 dd H2O/TE 75﹪或 无
水乙醇
运输条件 液氮/干冰 （低于-70℃） 液氮/干冰 （低于-70℃）
/ 如加有 RNAlater 可用胶冰/常温
(短途)
从活体上取下的组织应在15分钟内用液氮浸没迅速降温干冰或低温冰箱降温速度慢可能会引起降解冻存管试管无介质液氮干冰低于70加抗凝剂采血管冻存管抗凝剂干冰长途冰需要研磨的组织藻类
样品保存及运输的注意事项
(适用于 Total RNA 和 DNA)
一、样品的保存方法与运输条件
样品分类
处理方法
储存方式
完整个体
小块，长、宽、高至少有一维长度小于 5mm，按 1 体积组织加入 10 倍体积的 RNAlater，将组 织块完全浸没。在 4℃冰箱放置过夜，使 RNAlater 充分浸润组织。第二天转移至-20℃冰箱保存。 细胞不建议用 RNAlater 保存（不利于细胞收集）。 4. 由于 TRIzol 无法完全渗透到体积较大的组织中，因此未经研磨或匀浆的组织不宜用 TRIzol 保 存。 5. 如用液氮运输，除冻存管外其他各类试管也必须是螺口的，最好用封口膜密封；不建议用国产 试管(密封性较差)，装大量组织的大容积国产管（如 50ml 离心管）要打孔。 6. 培养瓶中的细胞收集：小心轻到出培养液后，（如培养液粘稠，可先用 1×PBS 洗去培养液）按 比例加入 TRIzol，用力振下贴在壁上的细胞，可用枪反复吸打帮助细胞脱壁。 每 5×106 加 1mlTRIzol，加入过量的 TRIzol 反而会减少 RNA 抽提的得率。 7. 酒精保存的样品在干冰及冰中为液态，建议用封口膜（尤其是国产试管）以防样品泄漏。 8. 已溶解的 RNA 和 DNA 尽量用离心管保存，可以避免转管造成的损耗。 9. 常规贴纸和医用胶带在干冰和液氮等低温环境中会因失去粘性而脱落，因此试管上应用不溶于 水的记号笔标明样品编号。 10. 单份样品的送样量不要过多，就常规物种而言，抽提所需量为：植物组织<1g，动物组织<100mg， 细胞<107。如果担心抽提得率低，可以分装在若干管中作为备份样品。 11. 务必在接样服务单上写清以下信息：所有样品的类型、样品编号、保存的介质、细胞数、已溶 解的 RNA 和 DNA 的准确体积、特殊要求（合并抽提、等量混合、剩余组织保留、特殊物种的抽 提方法）…
实验样品采集运输保存方法
1.R N A实验样品采集、保存方法使用范围及样品量类别：Microarray Service；Sequencing Service; PCR Array& PCR Service 样本量：样本样本量1*107个哺乳动物培养细胞样品（悬浮细胞）15cm2哺乳动物培养细胞样品（贴壁细胞）植物组织样品100mg-1g，根据植物不同部位的组织决定组织需要量，尽可能多些，但不必超过1g动物组织样品新鲜组织样品A. 使用RNAlater试剂取新鲜组织（注：动物死亡后尽快在10min内取材），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，所用组织必须切至厚度在一下，然后放入装有5倍体积RNAlater的离心管（或冻存管）中。
4度孵育过夜，此时样品管需要横置以便组织块充分接触到RNAlater，然后转入-20中保存，样品在-20不会冻结，但溶液中可能会有一些晶体出现，这并不影响后续的RNA抽提。
B. 使用Trizol试剂取新鲜组织（1min以内），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，每50-100mg 组织加入1ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品，最好冰上进行操作。
匀浆的裂解液4度短期保存（1month），-20或者-70度长期保存。
冻存组织生物体死亡后尽快（10min以内）切取新鲜组织，并以PBS或生理盐水清洗干净切成小块；培养液倒入离心管中，离心沉淀细胞，弃去上清液。
细胞沉淀（1*107个）中加入1ml Trizol裂解液反复吸打几次后，目视可见细胞层溶液完全-70保存贴壁细胞从培养容器中吸出并弃去培养液培养瓶直接加入Trizol试剂，Trizol用量与细胞贴壁面积有关，15cm2细胞贴壁面积加入1mlTrizol。
反复吸打几次后，目视可见细胞层溶解完全。
-70度保存。
植物组织样品准确取得所需新鲜组织后，如有必要可用PBS清洗干净，将所用组织切碎，装入冻存管中或者用锡箔包裹好。
立即投入液氮中保存。
2.血液类样品采集、保存方法适用范围及样品量全血/血细胞：Microarray Service；Sequencing Service; PCR Array& PCR Service血清/血浆：Microarray Service；PCR Array& PCR Service样本量样本样本量全血1-2ml （即每份样品2-4管）血浆1-2ml （即每份样品2-4管）血清1-2ml （即每份样品2-4管）在样品保存及转移过程中，应避免反复冻融样品一般建议用新鲜的血液标本进行试验，如果标本已经保存较长时间，请先联系技术部门确认样本是否适合进行实验。
脂质代谢组学测序操作流程
脂质代谢组学测序操作流程一、测序前的准备。
咱得先把样本准备好呀。
样本这一块可不能马虎呢。
一般来说，样本的采集得特别小心，像是从生物组织或者细胞里面取样本的时候，动作要轻，还要保证样本的新鲜度。
要是样本采集的时候就出问题了，那后面的测序可就全乱套啦。
然后就是样本的保存。
不同的样本保存条件还不太一样呢。
有的需要低温保存，就像放在超低温冰箱里，零下80度那种，感觉就像给样本一个超级冷藏的小窝，让它在里面安安静静地待着，等着被测序。
二、测序的具体操作。
接下来就到了测序的大环节啦。
把样本放到测序仪器里面，这个过程就像是把宝贝放进一个超级高科技的小盒子里。
不过在放进去之前，还得对样本进行一些处理呢。
比如说提取样本中的脂质，这个就有点像从一堆东西里面把我们想要的小宝石挑出来一样。
然后仪器会按照它的程序开始工作啦。
这个时候我们就只能在旁边等着，看着那些小灯闪呀闪的，就像看着一场科技的小魔术在进行。
不过在仪器工作的时候，我们也不能完全放松，要时刻关注仪器有没有出现什么异常情况，比如说突然的警报声或者奇怪的显示数字。
要是有这种情况，那可就要赶紧采取措施啦，就像医生抢救病人一样，要迅速又准确。
三、测序后的分析。
等测序完成了，就到了分析结果的时候啦。
这一步可不像前面那么简单机械，而是需要我们动脑子的。
得到的数据就像一堆乱麻一样，我们要把它们梳理清楚。
比如说看看脂质的种类有哪些，它们的含量是多少。
这就好比是在清点宝藏，一个一个地数清楚。
我们还得把这些数据和正常的标准数据进行比较呢。
如果发现有很大的差异，那就像是发现了宝藏里面有个特别不一样的东西一样，得好好研究研究。
这个差异可能就代表着某种特殊的生理或者病理状态哦。
四、注意事项。
还有就是操作人员要经过专业的培训，可不能随便找个人就来操作这么精密的仪器。
这就像开飞机得有专业的飞行员一样，我们测序也得有专业的操作人员，不然很容易出问题的。
脂质代谢组学测序操作虽然有点复杂，但只要我们认真对待每一个步骤，就像对待自己的小宠物一样细心，就一定能得到准确的结果啦。
水质样品采集、保存与运输技术要点
9
石油类
玻璃瓶
10
粪大肠菌群
灭菌玻璃瓶
采样量
洗涤方式
1L
洗涤剂洗一次，自来水三次，蒸馏水一次
1L
洗涤剂洗一次，自来水三次，蒸馏水一次
500mL 500mL 500mL
洗涤剂洗一次，自来水两次，1+3硝酸荡洗一次，自来水 三次，去离子水一次
洗涤剂洗一次，自来水两次，1+3硝酸荡洗一次，自来水 三次，去离子水一次
❖ 冰封期根据需要选用冰钎 、电动钻冰机或手摇冰 钻等。
二、采样点位设置
❖ 使用GPS或固定标志物保证监测断面位置的准确和 固定，使用测距仪确定河流河面宽度。
❖ 按表1、表2、表3的要求设置采样垂线和采样点数。
表1 采样垂线数的设置
水面宽 ≤50m 50~100m ＞100m
垂线 1条（中泓） 2条（近左、右岸明显水流处） 3条（左、中、右）
洗涤剂洗一次，自来水三次，蒸馏水一次
500mL
铬酸洗液一次，自来水三次，蒸馏水一次
500mL
洗涤剂洗一次，自来水三次，蒸馏水一次
500mL
洗涤剂洗一次，自来水三次，蒸馏水一次
1L 250mL
洗涤剂一次，自来水两次，1+3硝酸荡洗一次，自来水三 次，蒸馏水一次
1，经160℃干热灭菌2h，必须在两周内使用，否则应重 新灭菌；2，经121℃高压蒸汽灭菌15min，如不立即使用，
2、断面所处河段水位较浅，无法行船，附近没有桥梁等特殊情况，无法按 规定布设垂线，需拍照并记录。
3、因其他客观原因，断面无法按规定设置垂线，需拍照并记录。 断面断流（水面不连续、仅有零星水样或冰层下无水）可不采样，需拍
照并记录。 冰封期断面采集要求： 1、钻冰采样，采集冰下水深0.5m处的水样，水深小于0.5m时，在水深1/2 处采样。 2、如破开冰面后，有水涌出，需进行采样，否则可不采样，但需拍照并做 好记录。
锐博生物高通量测序样品质量及运输要求
Level A Level B Level A Level B Level A
Level B
检测标准说明： 1. 上表中对样品RNA总量(m)的要求主要针对人、鼠来源的样品。对于其他来源的
样品，建议以m更高的要求进行送样。 2. 微量建 （包括培养微生物样本） 1、 准备：高速离心收集细胞，存于 TRIzol/ RNAlater 中。 2、 贴壁或悬浮细胞：>5X106 细胞/样品。（注：不同类型的细胞 DNA/RNA 产量差别较大，
具体送样量以达到质检要求为准。） 3、 微生物：建议选取处于对数生长期的菌液，高速离心收集菌体后，弃上清，加入 TRIzol/
标准。为了保障项目的顺利进行，推荐按照Level A标准进行送样。 4. 如果样品无法满足Level A或B中的任何一项指标，同时由于特殊原因无法再准
备更多样品，可根据实际情况进行风险建库测序，但不保证测序质量。 5. 如有任何问题，请在送样前咨询销售代表或技术支持。
检测结果说明（样品分类） Level A：A类样品，指的是质量满足建库测序要求，且总量可以满足2次或者2次以 上建库需要的样品。 Level B：B类样品，指的是质量满足建库测序要求，且总量可以满足1次但不足2次 建库需要的样品。
应降低，但建库价格比常规建库高。建议只针对细胞、组织等样品的total
RNA。对于特殊的微量RNA样本，如血清、血浆、免疫共沉淀或Exosome等来 源的小RNA，m≥200ng，c≥1 ng/μL。对于客户自行分离的小RNA（<200nt），送 样量≥1 μg。 4. 浓度、总量以Agilent 2200检测结果为准，纯度参考NanoDrop检测OD值。
判定结论 Level A
Level B
实验室检测样品包装和运送程序
实验室检测样品包装和运送程序1 目的维护检测样品的质量，防止病原的泄漏和扩散，保障样品检测的顺利开展。
2 适用范围适用于检测样品的包装和运送。
3 职责3.1 操作者必须严格按照本程序操作，不可擅自做出超出本程序的操作，所有实验人员对所从事的工作负相应的责任。
3.2 实验室负有对样品包装、运输的监督和管理职责，并监督检查相关工作人员的安全工作程序和行为。
4 过程要求拟运输的样品，要求严密包装，外表加以消毒，编号、登记后，贴上“生物危险”标识，并严防标识脱落。
样品必须经三层包装。
4.1 样品的包装4.1.1 内包装4.1.1.1 必须是不透水、防泄漏的主容器，保证完全密封。
4.1.1.2 必须是结实、不透水和防泄漏的辅助包装。
4.1.1.3 必须在主容器和辅助包装之间填充吸附材料。
吸附材料必须充足，能够吸收所有的内装物。
多个主容器装入一个辅助包装时，必须将它们分别包装。
4.1.1.4 主容器的表面贴上标签，注明样品类别、编号、名称、数量等信息。
4.1.1.5 相关文件，例如毒种或样本数量表格、危险性声明、信件、毒种或样本鉴定资料、发送者和接收者的信息等应当放入一个防水袋中，并贴在辅助包装的外面。
4.1.2 外包装4.1.2.1 外包装的强度应当充分满足对于其容器、重量及预期使用方式的要求。
4.1.2.2 外包装应当印上生物危险标识并标注“高致病性动物疫病病原微生物，非专业人员严禁拆开！”的警告语。
4.1.3 包装要求4.1.3.1 液体或者固体样品在辅助包装周围必须放置冰、干冰或者其他冷冻剂，或者按照规定将冷冻剂放在由一个或者多个完整包装件组成的合成包装件中，内部要有支撑物，干冰或者干冰消耗掉以后，仍可以把辅助包装固定在原位置上。
如果使用冰，包装必须不透水；如果使用干冰，外包装必须能排出二氧化碳气体；如果使用冷冻剂，主容器和辅助包装必须保持良好的性能，在冷冻剂消耗完以后，仍能承受运输中的温度和压力。
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《样品准备储存与运输指南》一、样本准备应该遵循的基本原则z代表性原则：取样的代表性关系到实验结果是否具有科学意义，因此您应该根据实验目的慎重选择您的取样方案。
病变组织样本中应不夹带正常组织，正常组织样本中不能含有病变组织。
有条件时，应做到实验组与对照组的样本在取材时间、部位、处理条件等方面尽可能保持一致，否则可能会影响实验结果的可信度。
z准确性原则：代表性样本的各种特征数据必须被准确记录，并按要求（低温、迅速）采集、制备、贮存、运输，最终正确地按实验设计进行实验和数据处理。
z迅速性原则：样本质量是表达谱芯片实验中影响实验结果的最关键因素，因此用于表达谱芯片研究的样本，在采集、制备、贮存、运输过程中应尽可能地做到迅速，最大限度的缩短从样本采集到实验的时间。
z低温原则：所取样本离体后，应立即置于液氮中，并保证在实验前始终处于-70℃以下，以避免RNA的降解。
二、样本采集、包装z样本采集、包装过程中的注意事项1. 在包裹样本的铝箔或冷冻保存管表面，用油性记号笔标明样本编号及样本类型。
并且不要与乙醇等有机溶剂接触。
2. 不要用纱布、纸张直接包裹样本，而是用铝箔或冷冻保存管包裹后再装入样本袋中。
3. 不要把标签纸或其他纸制的说明性文件放入样本袋内，因为纸张在液氮中是易碎的。
4. 不要用玻璃容器在液氮中保存样本；样本包装中不要使用透明胶带。
5. 标签纸应该贴于样本袋绳上，不要贴于容器表面以免脱落造成样本混乱。
6. 不要在一只样本袋中放过多的样本，以防无法放入液氮罐或无法从液氮罐中取出。
样本袋在使用前先在液氮中预冷。
7. 客户在填写《样本登记单》时应当详细描述样本的类型、处理方法、储存条件以及储存时间等相关细节，以便技术人员确定合理的实验方案。
三、样品储存与运输z样品储存组织样品储存于液氮或超低温冰箱中。
RNA样品储存于超低温冰箱中，在-200C冰箱保存时间不宜太久。
细胞样品经Trizol处理后储存于超低温冰箱中。
在-200C冰箱中储存不宜太久。
血液样品分离白细胞后用Trizol处理，然后储存于超低温冰箱中。
z样品运输样品运输建议采取液氮或干冰保存下的超低温运输。
一、液氮运输１．液氮运输最好在人员监护下进行。
长途应采用液氮罐，短途可采用保温杯。
应保证液氮足够，以免运输过程中液氮挥发掉，影响材料质量。
２．液氮为危险品，受到交通部门的管制。
飞机运输应用空运型液氮罐，可以作为行李托运，不能随身携带。
火车运输可用普通液氮罐，可随车托运，不能随身携带。
托运时应有固定基座，以免倾倒，使液氮泄露。
３．托运前应到学校保卫科或校办开具《非危险品证明》（非易燃易爆，无毒无害，无腐蚀），并加盖公章。
４．液氮罐口较为狭小，所以放入的物品不易过大，以免无法取出。
最好将样品放入编过号的冻存管中，再根据不同类别放入合适的小布袋，用线绳栓住，线绳另一端用布条做标记，拴在罐口提手上，以方便取出和分辨。
５．冻存管应用进口高质量的冻存管，放入液氮前应拧紧，以免取出时发生炸裂伤人。
二、干冰运输１．飞机运输干冰上限约为２公斤，超过２公斤原则上不能运输。
火车运输不受限制。
２．干冰运输应采用壁厚且质量完好的泡沫箱，材料用编号后的冻存管存放，用塑料袋包装后埋入干冰中，泡沫箱应扣严并用封箱带封严。
外套纸壳箱包装，以免碰裂。
并标明轻取轻放提示，以保证安全运输。
３．干冰运输可委托当地快递公司，注意一定要确保48小时送达我方手中，不能送货上门的应提前通知我方。
４．２４小时到达的，干冰数量不得低于５公斤；４８小时到达的，干冰数量不得低于８公斤。
夏季可以适当再多增加部分干冰（平时的1.5倍）。
超过４８小时到达的，建议不要用此法运输。
５．运输时可在干冰上再放一排液体冰带。
６．如委托快递运输，运输过程中应随时跟踪货物的情况，记录货单号，并保持与发出地和接收地的快递公司的联系。
三、ＲＮＡ运输RNA运输须经乙醇(两倍体积)或异丙醇(等体积)沉淀,沉淀后的ＲＮＡ，可以用低温冰袋冰盒运输，但时间也不易太久，以２４小时为限。
未经沉淀的RNA应用干冰或液氮运输。
四、细胞及血液运输细胞短距离可３７度培养瓶（细胞培养液）运输（24小时内）。
长途运输可以Trizol处理后干冰运输。
血液当地短距离可以加入抗凝剂（或直接用抗凝管乘后）后冰块运输（2小时内），长途运输可先分离白细胞，Trizol处理后干冰运输。
四、其它保存样品的方式介绍如果用液氮或干冰运输非常困难,建议以 RNAlater或RNAsecure保存样品进行运输,具体如下:(一)RNAlater的使用方法1. RNAlater的简介z产品描述 RNAlater是一种液态的，无毒的组织保存试剂。
它能迅速稳定组织，保护非冷冻细胞RNA于原位。
获得组织块后，迅速浸泡在RNAlater中保存，而不会引起RNA 的降解，这样可以不必马上处理样本或将样本冷冻在液氮之中以备以后处理。
RNAlater 应保存在室温下，保质期6个月。
如放置在4℃条件下则会引起沉淀，此时需加热到37℃才可澄清。
RNAlater可广泛应用于多种脊椎动物样本。
包括脑、心、肾、脾、肝、睾丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺。
RNAlater对大肠杆菌、果蝇、组织培养细胞、全血细胞和一些植物也有效。
z RNAlater能否与RNA提取试剂盒兼容？ RNAlater可与大多数RNA提取方法相协调。
特别是TRI Reagent®, RNAwiz, TōTALLY RNA, RNAqueous, and Poly(A)Pure。
2. 如何使用RNAlate r RNAlater 只能用于新鲜组织，在浸入RNAlater之前不能冷冻组织。
简单切碎组织样本，任何一边的最大厚度不能大于0.5cm, 然后将组织碎块放入到5倍体积的RNAlater中保存。
z动物组织 RNAlater不会溶解或破坏组织样本的结构。
如果需要的话，仍可将已经平衡在RNAlater溶液中的组织取出并分割成更小的块再重新放入到RNAlater中。
小器官如鼠肝、肾和脾可以完整地保存在RNAlater中。
z植物组织 许多植物组织可以简单浸泡在5倍体积的RNAlater中保存。
具有自然屏障防止扩散的植物如蜡表皮的叶组织可能需要先破坏其屏障，以允许RNAlater进入组织z组织培养细胞 沉淀细胞，用PBS洗一次，再用少量的PBS悬浮细胞，然后加5~10倍体积的RNAlater保存。
z白细胞 如果将白细胞从红细胞和血清中分离出来，并按组织培养细胞一样处理后，白细胞便能有效地保存在RNAlater中。
不要将全血、血浆或血清中的RNA保存在RNAlater 中，因为它们蛋白含量过高，与RNAlater混合后易形成不溶的沉淀。
z细菌(以下内容是根据Ambion公司的产品说明书编译的，仅供参考) RNAlater是抑菌的，虽然细菌在RNAlater中不能生长，但细胞仍保持其完整性。
大肠杆菌保存在RNAlater中4℃条件下1个月仍很完整，产生不降解的RNA。
3. RNAlater中样品的保存z保存于-80℃ 建议用于批量保存。
将样本在4℃条件下孵育过夜，然后从RNAlater溶液中取出样本保存于-80℃。
对于组织培养细胞，不必移去RNAlater，只需简单冻存整个溶液。
实验证明，细胞在-80℃条件下冻存于RNAlater溶液中并未出现溶解。
样本可随后在室温下解冻及再冻存，其RNA的质和量都不会受到影响。
z保存于-20℃ 建议用于批量保存。
将样本在4℃条件下孵育过夜，然后转移到-20℃。
样本在-20℃条件下不会冻结，但在存贮缓冲液中会有结晶形成，这并不影响随后的RNA 提取。
样本可随后在室温下解冻及再冻存，其RNA的质和量都不会受到影响。
z保存于4℃ 厂家认为，目前尚无证据证明样本存于4℃ 1个月内会出现RNA降解。
z如果没有冰箱： 将样本放在尽可能冷的环境中。
如果周围温度超过25℃，应尽可能使RNAlater中的样本冰浴数小时。
4. RNAlater 中样本的RNA提取z组织 用消毒镊子将组织从存贮溶液RNAlater中取出，浸泡在RNA提取溶液中。
一旦将组织放入RNA提取溶液中，匀浆一定要迅速进行。
z细胞 从存贮在RNAlater中的细胞中提取RNA有两种操作方法可供选择：去除RNAlater 或者从细胞与RNAlater的混合物中直接提取RNA。
5. 从RNAlater 中取出样品z去除RNAlater 因为RNAlater的浓度比典型的细胞培养介质的浓度高，因此用通常沉淀活细胞的离心力无法沉淀RNAlater中的细胞。
离心沉淀细胞，去除RNAlater。
（HeLa 细胞大约需要3000×g，但其他细胞可能不能容忍这个速度，或者他们需要更大的离心力。
）z从RNAlater中的细胞直接提取RNA 作为选择，我们可以用一步法破碎/提取溶液（如TRI Reagent和 RNAwiz）从没有去除RNAlater的细胞中纯化RNA。
这可通过向细胞混合物中加入10倍体积的一步提取溶液完成，其他照常。
(二)RNAsecure的使用方法1. 简介 在分子生物学试剂中用Ambion公司的RNAsecure代替DEPC，有很多优点：1) 可以加入到不能用DEPC处理的溶液中（如：Tris或MOPS缓冲液）；2) 可以加入到不能被高压灭菌的溶液中；3) 可以加入到加酶之前的酶促反应中。
Ambion已经测试了有RNAsecure 试剂存在的如下酶促反应（先于酶加入）：RNA多聚酶T7，T3和SP6的体外转录（37℃），MMLV和AMV逆转录（42℃），以及SuperTaq PCR（94℃），均没有出现酶抑制现象。
2. 使用方法1) 用缓冲液或经过处理的溶液稀释RNAsecure试剂到1×，充分混匀。
2) 将混合物在60℃水浴温浴20 min，冷却至室温。
这样的溶液可备用于接下来的RNA提取和分析，或者保存于室温、4℃或-20℃以备将来使用。
3) 为了消除任何可能发生在经过初处理之后的RNA酶的污染，在使用前可以将RNAsecure 溶液在60℃水浴中重新温浴10~20分钟。
3. 注意事项 RNAsecure 试剂只在高于45℃的条件下才有活性，但当反应体系孵育温度超过该温度时可能会使一些酶失活。
因此，用RNAsecure处理反应缓冲液时要以加入酶之前做为临界点，然后进行酶促反应时孵育温度低于45℃。
注意：这不适用于Taq 多聚酶。
上海生物芯片有限公司2008/1/1~2008/12/31。