培养基的制备与灭菌.

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培养基的制备和灭菌设备

5-培养基出口 6-喷淋冷却 7-冷却水
②.喷射加热－真空冷却连续灭菌流程
流程：喷射加热、管道维持、真空冷却
蒸汽
喷射加热器
真空
生培养液
❖培养基用泵打入喷射加
膨胀阀
热器与蒸汽混合升温
维持管
急聚蒸发室
❖进入管道维持器保温
一定时间
❖进入真空闪急蒸发室冷却降温
灭菌好的培养液
图2-5 加热-真空冷却连续灭菌流程
膨胀阀急聚蒸发室
❖ 真空冷却可能造成培养基重新污染
灭菌好的培养液
图2-5 加热-真空冷却连续灭菌流程
③.板式换热连续灭菌流程流程：薄板换热器加热、管道维持、薄板换
热器冷却
灭菌好的培养液
蒸汽
水冷却段
热回收段
加热段
冷却水
生培养液
维持段
图2-6 薄板换热器连续灭菌流程
特点
❖ 在一台薄板换热器中完成培养液的预热、加热及冷却三个过程
（二）灭菌方法
灭菌：射线灭菌、药物灭菌、热灭菌分离：离心沉淀、介质过滤
（三）加热灭菌方式
培养基→加热升温→维持保温→冷却降温→发酵
分批灭菌：三个过程在一个设备内完成连续灭菌：三个过程分别在不同的设备内完成
（四）灭菌要求
❖ 达到无菌程度 ❖ 尽量减少营养成分损失 ❖ 降低能量消耗
（五）理论灭菌时间
控制
缺点：需要专门设备，投资较大设备较多，染菌机会也相应较多
2、要求
①.加热设备：加热均匀， 144℃ 20s 2-3min 20s 快速升温到灭菌温度
（温度一致）
②.维持设备：使培养基按
温度
顺序流动，维持灭菌
温度达到灭菌时间

培养基的制备与灭菌

培养基的制备与灭菌培养基的制备与灭菌实验⼋培养基的制备与灭菌⼀、⽬的要求1.掌握微⽣物实验室常⽤玻璃器⽫的清洗及包扎⽅法。

2.掌握培养基的配置⽅法。

3.掌握⼲热灭菌和⾼压蒸汽灭菌的操作⽅法。

⼆、基本原理正确掌握培养基的配制⽅法是从事微⽣物学实验⼯作的重要基础。

由于微⽣物种类及代谢类型的多样性．因⽽⽤于培养微⽣物的培养基的种类也很多，它们的配⽅及配制⽅法虽各有差异。

但⼀般培养基的配制程序却⼤致相同．例如器⽫的准备，培养基的配制与分装，棉塞的制作，培养基的灭菌，斜⾯与平板的制作以及培养基的⽆菌检查等基本环节⼤致相同。

三、实验材料1.药品：待配各种培养基的组成成分、琼脂、1mol/L 的NaOH 和HCl 溶液。

2.仪器及玻璃器⽫：天平、⾼压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三⾓瓶、培养⽫、玻璃漏⽃等。

3.其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。

四、操作步骤(⼀)玻璃器⽫的洗涤和包装1.玻璃器⽫的洗涤玻璃器⽫在使⽤前必须洗刷⼲净。

将三⾓瓶、试管、培养⽫、量筒等浸⼊含有洗涤剂的⽔中.⽤⽑刷刷洗，然后⽤⾃来⽔及蒸馏⽔冲净。

移液管先⽤含有洗涤剂的⽔浸泡，再⽤⾃来⽔及蒸馏⽔冲洗。

洗刷⼲净的玻璃器⽫置于烘箱中烘⼲后备⽤。

2 ?灭菌前玻璃器⽫的包装(1)培养⽫的包扎：培养⽫由⼀盖⼀底组成⼀套，可⽤报纸将⼏套培养⽫包成⼀包，或者将⼏套培养⽫直接置于特制的铁⽪圆筒内，加盖灭菌。

包装后的培养⽫须经灭菌之后才能使⽤(2)移液管的包扎：在移液管的上端塞⼊⼀⼩段棉花(勿图8-1移液管的包扎⽤脱脂棉），它的作⽤是避免外界及⼝中杂菌进⼊管内，并防⽌菌液等吸⼊⼝中。

塞⼊此⼩段棉花应距管⼝约0.5cm 左右，棉花⾃⾝长度纟勺1~1.5cm。

塞棉花时.可⽤⼀外围拉直的曲别针、将少许棉花塞⼊管⼝内。

棉花要塞得松紧适宜，吹时以能通⽓⽽⼜不使棉花滑下为准。

先将报纸裁成宽勺5cm 左右的长纸条，然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的⼀端，约成45C⾓，折叠纸条包住尖端，⽤左⼿握住移液管⾝，有⼿将移液管压紧.在桌⾯上向前搓转，以螺旋式包扎起来。

培养基的配制及灭菌实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除培养基的配制及灭菌实验报告篇一：培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。

2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。

三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。

2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。

四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。

（2）n源：包括无机氮和有机氮。

（3）c源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。

（4）无机盐：如nacl、Kh2po4等。

微量元素：cu、K、mg、s、p、Zn。

有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。

2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。

培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。

3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。

（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1mpa、121℃、15~30min可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。

若是含糖培养基，110℃、30min。

（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。

因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。

（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DnA复制。

（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。

除病菌需更小。

五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gnacl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。

细菌培养基的制备、灭菌及接种、培养技术ppt课件

20
目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从而获得若干种细菌纯培养技能。掌握几种接种技术。
21
实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶，无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
22
c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
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实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法：不能用加热灭菌的液体物质（如维生素、血清），一般可用细菌过滤器进行除菌。
19
第二部分细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求实验材料实验程序
9
实验程序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭菌及接种、培养技术
1
第一部分细菌培养基的制备、灭菌
目的要求实验材料实验程序
2
目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。掌握培养基和无菌水的制备方法。掌握高压蒸气灭菌技术。
3
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻璃珠等。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告一、引言在微生物学研究中，培养基的制备与灭菌是非常重要的步骤。

培养基是供养微生物生长和繁殖所必需的营养物质的混合物，而灭菌则是为了消除其中的有害微生物，保证培养基的纯净度。

本实验旨在探讨培养基的制备与灭菌的方法与步骤，以及其对微生物培养的影响。

二、培养基的制备2.1 选择培养基成分培养基的成分根据所需培养的微生物种类和目的而定，常见的成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。

在制备培养基之前，需要明确所需微生物的营养需求，选择合适的成分。

2.2 配制培养基根据所选的成分和配方，按照一定比例将各种成分溶解在适当的溶剂中，常见的溶剂包括蒸馏水和生理盐水。

注意溶解顺序和温度，保证各种成分充分溶解。

2.3 调节pH值微生物对pH值的要求各不相同，因此在制备培养基时需要调节pH值。

使用酸碱溶液逐滴加入培养基中，同时使用pH试纸或pH计检测pH值，直到达到所需的范围。

2.4 灭菌前的处理在灭菌之前，需要对培养基进行一些处理，包括过滤、加热和冷却等。

过滤可以去除其中的固体杂质和大颗粒微生物。

加热可以杀灭其中的有害微生物，常用的方法包括高温灭菌和压力灭菌。

冷却后的培养基可以用于微生物的培养。

三、灭菌实验3.1 高温灭菌高温灭菌是常用的灭菌方法之一，其原理是利用高温杀灭微生物。

将配制好的培养基倒入培养瓶中，盖上瓶盖，放入高温灭菌器中。

设置合适的温度和时间，一般为121℃，15-20分钟。

高温灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。

3.2 压力灭菌压力灭菌是一种利用高温和高压杀灭微生物的方法。

将配制好的培养基倒入培养瓶中，盖上瓶盖，放入压力灭菌器中。

设置合适的温度和压力，一般为121℃，15-20分钟。

压力灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。

3.3 灭菌效果验证灭菌后的培养基需要进行灭菌效果验证，以确保其中没有活菌存在。

常用的方法包括接种试验和平板计数法。

接种试验是将灭菌后的培养基接种到无菌平板上，观察是否有菌落生长。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告培养基的制备与灭菌实验报告引言：在微生物学研究中，培养基是不可或缺的工具。

培养基的制备和灭菌是保证实验结果准确性和可重复性的重要步骤。

本实验旨在探究培养基的制备方法和灭菌技术的应用。

一、培养基的制备1.1 选择合适的培养基成分培养基的成分根据微生物的需求而定。

常见的培养基成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。

在制备培养基时，需根据所研究的微生物特性选择合适的成分。

1.2 制备培养基的步骤制备培养基的步骤主要包括称量、溶解、调pH、加热消毒和装瓶。

首先，按照配方称取所需成分，并逐一溶解于适量的蒸馏水中。

随后，根据微生物的需求，调节溶液的pH值。

最后，将溶液装入试管或培养皿中，并加热消毒。

二、灭菌技术的应用2.1 灭菌的目的灭菌是指将培养基、培养器具和实验室环境中的微生物杀灭或去除的过程。

灭菌的目的是为了避免外来微生物的污染，确保实验结果的准确性。

2.2 常用的灭菌方法常用的灭菌方法包括高温灭菌、化学灭菌和紫外线灭菌。

高温灭菌是指将培养基或器具在高温条件下进行加热消毒，常用的方法有烘箱灭菌和压力灭菌。

化学灭菌则是通过使用化学物质如酒精、乙醛等来杀灭微生物。

紫外线灭菌则是利用紫外线的辐射杀灭微生物。

2.3 实验中的灭菌操作在实验中，常用的灭菌操作包括培养基灭菌、器具灭菌和工作台灭菌。

培养基灭菌是将制备好的培养基加热消毒，以杀灭其中的微生物。

器具灭菌则是通过高温、化学物质或紫外线对实验器具进行消毒。

工作台灭菌则是通过紫外线辐射对实验台面进行灭菌处理。

结论：培养基的制备和灭菌是微生物学研究中的重要环节。

正确的培养基制备和灭菌操作可以确保实验结果的准确性和可重复性。

通过本实验，我们学习了培养基的制备方法和常用的灭菌技术，为今后的微生物实验打下了基础。

参考文献：[1] 陈晓玲, 赵莉, 邱晓红, 等. 基础微生物学实验教程[M]. 2版. 北京: 高等教育出版社, 2017.[2] 郭燕妮, 张晓红. 微生物学实验指导[M]. 北京: 高等教育出版社, 2019.。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告一、实验目的本实验旨在掌握培养基的制备方法和灭菌技术，为后续的微生物培养提供保障。

二、实验原理1. 培养基的制备方法：（1）选用适当的基质：如蛋白胨、肉汤、蔗糖等；（2）添加必需元素：如氮源、碳源、矿物质盐等；（3）调节pH值：使其接近微生物生长最适pH值；（4）加入琼脂：使液态培养基凝固成固态培养基。

2. 灭菌技术：灭菌是指将微生物及其孢子全部杀灭或去除，以保证培养基无菌。

常用的灭菌方法有高温灭菌法和化学药剂灭菌法。

三、实验材料和设备材料：蛋白胨、肉汤、琼脂、氧化钠等。

设备：量筒、天平、自动移液器、恒温水浴器等。

四、实验步骤1. 制备液态培养基：（1）称取所需的蛋白胨和肉汤，按比例混合加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀；（2）调节pH值至7.0-7.2，若pH值过高可加入适量的氧化钠溶液；（3）将制好的液态培养基分装到不锈钢培养皿中，每个培养皿约20ml；（4）将分装好的液态培养基在恒温水浴器中加热至沸腾，持续煮沸10分钟。

2. 制备固态培养基：（1）按照液态培养基制备方法制备好液态培养基；（2）将琼脂加入到液态培养基中，搅拌均匀；（3）将制好的固态培养基分装到无菌试管或无菌平板中；（4）在恒温水浴器中加热至琼脂完全溶解。

3. 灭菌：将制备好的液态和固态培养基放入高压灭菌锅中进行灭菌处理，温度和时间根据不同材料和设备而定。

五、实验结果经过灭菌处理后，制备好的液态和固态培养基均无菌，可以用于微生物培养。

六、实验注意事项1. 实验过程中要严格遵守无菌操作规范，以保证培养基无菌。

2. 制备液态培养基时，要注意加入必需元素的比例和pH值的调节。

3. 制备固态培养基时，要注意琼脂的加入量和溶解度。

4. 灭菌处理时，要根据实验材料和设备选择合适的灭菌方法和时间。

5. 实验结束后，要对实验器材进行消毒处理。

七、实验结论本实验通过制备液态和固态培养基以及灭菌处理等操作，掌握了培养基制备和灭菌技术。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告实验目的，掌握培养基的制备方法和灭菌技术，保证培养基无菌，为微生物实验提供良好的生长条件。

一、培养基的制备。

1.1 培养基的组成。

培养基是微生物生长和繁殖的营养物质，通常包括碳源、氮源、矿物质盐和生长因子等。

根据不同微生物的需求，培养基的组成也有所不同。

1.2 制备步骤。

（1）称取适量的葡萄糖、蛋白胨、氯化钠等原料；（2）加入适量的蒸馏水，搅拌均匀；（3）调节pH值，通常为7.0-7.2；（4）分装至试管或培养皿中，加入琼脂（如需要固体培养基）；（5）高压蒸汽灭菌15分钟。

二、培养基的灭菌实验。

2.1 灭菌方法。

培养基的灭菌是为了保证培养基中无菌，通常采用高压蒸汽灭菌法。

在高压下，微生物及其孢子、病毒等能够被有效杀灭。

2.2 实验步骤。

（1）将制备好的培养基分装至试管或培养皿中；（2）密封好容器，放入高压灭菌锅中；（3）加水至适当高度，密封锅盖；（4）加热至121摄氏度，压力达到1.05kg/cm2后开始计时，持续15分钟；（5）关火，等待冷却后取出培养基。

实验结果，经过高压蒸汽灭菌处理后，培养基中无任何微生物生长。

证明培养基已达到无菌状态，可以用于微生物的培养和实验。

结论，通过本次实验，我们掌握了培养基的制备方法和灭菌技术，为后续的微生物实验提供了良好的条件。

同时，也加深了对无菌技术的理解和应用。

参考文献：[1] 陈华. 微生物学实验指导. 北京，高等教育出版社, 2015.[2] 王明. 实验室微生物学. 上海，上海科学技术出版社, 2018.以上为培养基的制备与灭菌实验报告。

（文档结束）。

培养基的配制与灭菌技术

培养基的配制与灭菌技术⼀、培养基的配制与灭菌技术培养基是将微⽣物⽣长繁殖所需要的各种营养物质，⽤⼈⼯的⽅法配制⽽成的⽤于培养微⽣物的营养基质。

培养基种类很多，不同的微⽣物所需培养基不同。

就培养基中营养物质的来源可分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。

按培养基特殊⽤途可分加富培养基，选择培养基、鉴别培养基。

按培养基制成后的物理状态可分为固体培养基，液体培养基和半固体培养基。

固体培养基是在液体培养基中加⼊1.5 %-2.0 %琼脂作凝固剂; 半固体培养基则加⼊0.5 %-0.8 %的琼脂。

⼀般培养基除含有⼤量⽔分外, 还含有碳素、氮素、⽆机盐类和维⽣素等。

此外, 由于徽⽣物⽣长繁殖必须在最适的酸碱度范围内, 才能表现出最⼤的⽣命活⼒, 因此应根据不同种类的徽⽣物. 将培养基调节到⼀定的pH值范围。

培养基配制后还必须进⾏灭菌, 灭菌是指杀死或消灭所有微⽣物, 包括营养体、孢⼦和芽孢。

灭菌的⽅法很多，可分为物理⽅法与化学⽅法两⼤类。

物理⽅法包括湿热灭菌、⼲热灭菌、紫外线灭菌、过滤除菌等; 化学⽅法主要是利⽤化学药品对接种室空间、⽤具和其它物体表⾯进⾏灭菌与消毒。

消毒⼀般是指消灭有害微⽣物的营养体和病原菌。

(⼀) 培养基的配制⽅法⼀般培养基的配制⽅法如下 (各种天然培养基的配制⽅法略有不同)：l. 按照配⽅的组分及⽤量先分别称量并配成液体；2. 根据要求调到⼀定的酸碱度(pH值)；3. 若要制成固体则加⼊2%琼脂并加热融化；4. 根据需要的数量分装⼊试管或三⾓瓶中, 加上棉塞或盖上纱布；5. 包扎好灭菌后备⽤。

配制斜⾯培养基的⼀般操作步骤为：称量→溶解→调pH值→加琼脂→过滤→分装→加棉塞→包扎→灭菌→摆斜⾯→⽆菌检查。

(图9-7)(⼆) 培养基及常⽤器⽫的灭菌培养微⽣物常⽤的玻璃器具主要有试管、三⾓瓶、培养⽫、吸管等, 在使⽤前必须先进⾏灭菌, 使容器中不含任何杂菌；培养微⽣物⽤的营养基质(培养基), 在接⼊纯种前也必须先⾏灭菌, 使培养基呈⽆菌状态。

培养基的制备与灭菌

培养基的制备与灭菌1. 前言在微生物学和生物实验中，培养基作为微生物生长的基础和载体起到了至关重要的作用，因而它的质量和制备过程显得尤为重要。

本文将介绍培养基的制备与灭菌，旨在为读者提供一些帮助和参考。

2. 培养基的制备培养基的制备需要注意的是材料和配方的准确性和环境卫生的保证。

2.1 材料与仪器•试剂、培养基成分•纯净水•称量器具（称量皿、电子天平）•烧杯、棒子等常规实验仪器•玻璃仪器（试管、培养皿等）•分液漏斗、滤纸、滤膜•火源（酒精灯、燃气炬等）2.2 制备流程1.准备培养基的配方首先，需根据培养菌的要求和实验目的精准配制培养基。

要使用高纯度的试剂，避免杂质的干扰。

2.称量、倒量利用称量皿和电子天平精准的称量各种试剂，比如：氨基酸、盐酸、氢氧化钠等。

按照一定的顺序，向烧杯中慢慢地加入每一种试剂，倒入固定量的纯净水，搅拌，使溶液均匀。

3.混合、调PH值得到每种成分的溶液后，冷却并混合每种成分的溶液，盂内笛声触目激动 (pH Meter Calibration by Fattyd58, 免费使用).调整pH 值，使其达到正确的值。

4.灭菌将混合好的培养基倒入试管、培养皿中，使用微量注射器，将培养基填充至需要的培养皿内。

然后使用高压蒸汽灭菌器进行灭菌。

灭菌时间和温度以及一些细节部分操作灵活处理即可。

5.保存灭菌后离火并放置冰箱内，保持冷藏状态。

开封后，最好在 1-2周内使用完成。

3. 培养基的灭菌在实验中，灭菌至关重要，可以有效去除细菌、霉菌等污染物，保证培养基的纯度和实验的成功。

3.1 灭菌方法常见的灭菌方法有：高温高压法、滤过法和辐射法。

其中高温高压法是最普遍也是最常用的灭菌方式。

3.2 操作步骤1.洗涤器皿将试管、培养皿等器皿用清洁刷和流动水清洗干净，在滤器芯中装入过滤棉花。

2.分配培养基用微量注射器等方法将分配好的培养基填充到需要的器皿中。

3.高温高压灭菌将器皿密闭，放入高压锅或者高压蒸汽灭菌器内，进行高温高压灭菌。

培养基的配制与灭菌实验报告

培养基的配制与灭菌实验报告培养基的配制与灭菌实验报告引言：在微生物学研究中，培养基的配制和灭菌是非常重要的实验步骤。

培养基是供养菌落生长和繁殖所必需的营养物质的混合物，而灭菌则是为了杀灭培养基中可能存在的有害微生物，以保证实验结果的准确性和可靠性。

本实验旨在探究不同培养基的配制方法以及灭菌的效果，并提供一种简单可行的实验方案。

一、培养基的配制1. 培养基的种类在微生物学实验中，常用的培养基有固体培养基和液体培养基两种。

固体培养基主要用于菌落计数、分离纯种菌落以及观察微生物生长形态等实验，而液体培养基则适用于大规模培养、生物化学分析等实验。

2. 培养基的配方培养基的配方根据不同微生物的需求而定，常见的培养基配方包括营养物、水和琼脂。

营养物可以是有机物如蛋白胨、肉汤，也可以是无机盐如硝酸钠、磷酸氢二钾等。

水的选择要注意纯净度，最好使用经过蒸馏或纯化的水。

琼脂是一种提供凝胶状基质的物质，常用于制备固体培养基。

3. 培养基的制备步骤（1）称取所需的营养物和琼脂，按照一定比例加入适量的水中。

（2）将容器密封，并在高压蒸汽灭菌器中进行高温高压灭菌，以杀灭培养基中的有害微生物。

（3）取出灭菌后的培养基，待其冷却至适宜生长温度后，即可使用。

二、灭菌实验1. 灭菌的重要性灭菌是为了消除培养基中的有害微生物，以保证实验结果的准确性和可靠性。

如果培养基未经灭菌处理，其中可能存在的细菌、真菌等微生物会与待测微生物相互干扰，导致实验结果的偏差。

2. 灭菌方法（1）高温高压灭菌：将培养基密封于容器中，放入高压蒸汽灭菌器中进行高温高压处理。

高温高压可以有效杀灭细菌、真菌等微生物。

（2）化学灭菌：使用化学消毒剂如酒精、过氧化氢等进行灭菌处理。

这种方法适用于一些耐热菌种，但需要注意化学消毒剂的浓度和作用时间，以避免对待测微生物产生不良影响。

3. 灭菌效果的验证为了验证灭菌效果，可以将灭菌后的培养基分别接种于无菌平板上，并进行培养观察。

5.培养基的制备和消毒灭菌

6.灭菌塞棉塞，包扎，灭菌。培养基做完后，要求在2-4小时内灭菌，否则会被污染。 7.摆斜面灭菌完毕，冷却到60℃左右再摆斜面，以免产生过多冷凝水。
棉塞制作
牛肉膏蛋白胨培养基（ g/L,培养细菌用）
牛肉膏
3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 琼脂 15-20g（取18g）水 1000ml pH 7.0-7.2 121℃灭菌20min
3.调节pH值培养基溶解用pH试纸测pH，然后根据要求加酸或碱（一般用1M HCl和1M NaOH），要缓慢少量且多加搅拌。培养基配方为自然pH时，不用调节。 4.过滤用滤纸或多层纱布过滤，一般无特殊要求可省去。
5.分装将制好的培养基分装入试管内或三角瓶内，管（瓶）口塞上棉塞。固体培养基要趁热装。分装时要避免培养基粘染管（瓶）口，引起污染。分装量可分为下面几方面：（1）斜面：装量为管长的1/5。（2）液体培养基：装量为管长的1/4。（3）半固体培养基：装载量为管长的1/3。
高氏1号（ g/L,培养放线菌用）
可溶性淀粉 KNO3 NaCl
K2HPO4
MgSO4 FeSO4
琼脂
水 pH
20g 1g 0.5g 0.5g 0.5g 0.01g 15-20g（取18g） 1000ml 7.2-7.4
121℃灭菌20min
马丁氏培养基（g/L,分离真菌用）
NaCl、K2HPO4、 KH2PO4、 KNO3、MgSO4、 FeSO4、孟加拉红、1mol/L NaOH、
2.器材：
试管、烧杯、三角瓶、量筒、玻璃棒、铁架台、漏
斗、天平、牛角匙、高压锅、微波炉、 pH试纸（5.5-9.0）、棉花、纱布、线绳、聚丙烯袋等。

实验-培养基的制备和灭菌

实验步骤
原料称量溶解定容调节pH （加琼脂熔化）（过滤澄清）
分装塞棉塞、包装灭菌
培养基的制备和灭菌
注意事项
1. 配制培养基前先算好需要量，杜绝浪费； 2. 原料称量中，快接近终点时，用左手轻轻拍打右手手
腕，将少量药品振落，以免过量； 3. 牛肉膏用玻璃棒称取； 4. 成分中如含有磷酸盐和钙盐应分开溶解，否则会产生
生胨培养基：（%）
➢ 牛肉膏 0.5
➢ 蛋白胨 1.0
➢ NaCl
0.5
➢ pH 7.2-7.4
每组：
肉汤蛋白胨培养基：100mL
肉汤固体斜面（琼脂 1.3%）—— 3支 1-4号
肉汤固体三角瓶（琼脂1.0%）——1瓶 80mL/250ml瓶
沙保固体三角瓶（琼脂1.8%）——1瓶
在同样的条件下，为什么湿热灭菌的效果好于干热灭菌？
高压蒸汽灭菌后，为什么排气不能过猛？为什么须待降到零磅才能打开锅盖取出物件？
为什么配制好的培养基须立即灭菌？
培养基的制备和灭菌
培养基配方与实验安排
沙保培养基：（%） ➢ 葡萄糖 4.0 ➢ 蛋白胨 1.0 ➢ pH 5.4-5.8（自然）
干热灭菌火焰灼烧：适用于接种环等金属用具热空气灭菌：160℃～170℃灭菌2h 射线灭菌：一般用于无菌室灭菌湿热灭菌：高压蒸汽灭菌
培养基的制备和灭菌
实验步骤之灭菌
高压蒸汽灭菌灭菌条件：一般温度为121℃（压力1kg/cm2 ）
下,维持15～30 min。高压蒸汽灭菌原理是水的沸点随着压力的增加
培养基的制备和灭菌
高压蒸汽灭菌注意事项
1. 灭菌完毕后，用排气阀排气不能太猛，否则，压力骤降，导致锅内液体剧烈沸腾，打湿棉塞，容易造成染菌；

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告实验目的，通过本次实验，掌握培养基的制备方法和灭菌技术，为后续微生物培养实验打下基础。

一、培养基的制备。

1.准备所需试剂和设备，蔗糖、蛋白胨、酵母提取物、琼脂、蒸馏水、培养皿、量筒、坩埚、移液器等。

2.称取适量蔗糖、蛋白胨、酵母提取物加入蒸馏水中，充分溶解后调节pH值至7.0。

3.加入适量琼脂，搅拌均匀。

4.分装至培养皿中，待凝固后进行灭菌处理。

二、培养基的灭菌。

1.将制备好的培养基装入培养皿中，封口。

2.将培养皿放入高压灭菌锅中，进行高压灭菌处理。

3.灭菌条件，121℃，压力为15psi，持续20分钟。

4.取出培养皿，放置在无菌工作台上待凉，避免细菌再次污染。

5.观察培养基表面是否有凝固不均匀或气泡，如有则说明灭菌不彻底，需重新处理。

三、实验结果。

1.经过灭菌处理的培养基表面平整，无气泡，无明显异物。

2.在无菌条件下打开培养皿，用无菌移液器移取适量微生物菌种接种于培养基表面。

3.将接种好的培养皿放入培养箱中，进行培养观察。

4.培养箱条件，温度控制在37℃，培养时间根据不同微生物而定。

四、实验结论。

本次实验通过制备培养基和灭菌处理，成功培养出微生物菌种，并观察到了微生物的生长情况。

培养基的制备和灭菌是微生物实验中非常重要的步骤，只有保证培养基的无菌，才能得到准确的实验结果。

通过本次实验的学习，相信对于今后的微生物实验有了更深入的认识和理解。

五、实验注意事项。

1.在制备培养基时，需注意称取试剂的准确性和加入顺序。

2.灭菌处理时，要确保培养基充分接受高压蒸汽的灭菌作用。

3.实验操作要在无菌条件下进行，避免外界污染。

4.培养箱的温度和培养时间要根据不同微生物的生长特性进行调整。

六、实验延伸。

在今后的实验中，可以尝试不同种类的培养基制备和灭菌处理，观察其对微生物生长的影响，进一步探索微生物的生长规律和特性。

总之，培养基的制备和灭菌是微生物实验中不可或缺的重要环节，只有掌握了这些基本技能，才能进行准确可靠的微生物实验。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告实验目的：掌握培养基制备的基本操作技巧，理解培养基的重要性以及灭菌操作的必要性。

实验原理：培养基是一种提供营养物质和环境条件的物质，用于微生物的培养和繁殖。

通常包括碳源、氮源、无机盐和其他必需营养物质等。

培养基的配制主要包括以下步骤：1.称取所需的化学试剂和溶质，按照一定比例称取固体试剂和溶液试剂。

2.将固体试剂加入蒸馏水中，溶解并搅拌均匀。

然后加入相应量的溶液试剂。

3.调节溶液的pH值，通常使用酸和碱进行调节，直至达到所需的pH 值。

4.将培养基溶液装入培养瓶或试管中，密封和标记。

灭菌操作是为了杀灭或去除试验中的微生物，以保证实验的可靠性和安全性。

常见的灭菌方法有高温热处理、高压灭菌和化学灭菌等。

实验材料和设备：1.培养基配制所需化学试剂和溶液。

2.培养瓶和试管。

3.电子天平、酸碱仪和pH计。

4.高压灭菌锅。

实验步骤：1.根据实验要求选择合适的培养基配方。

2.按照所需比例称取固体试剂和溶液试剂。

3.将固体试剂加入适量蒸馏水中，溶解并搅拌均匀。

4.加入相应量的溶液试剂。

5.使用酸和碱调节溶液的pH值，直至达到所需值。

6.将培养基溶液装入培养瓶或试管中，密封和标记。

7.准备好待灭菌的培养基样品和高压灭菌锅。

8.将培养基样品放入高压灭菌锅中，进行高压灭菌操作。

9.灭菌结束后取出培养基样品，观察样品的无菌性。

实验结果：制备完成的培养基溶液应该是透明且无悬浮物的。

经过高压灭菌处理后的培养基样品应该是无菌的，没有任何微生物的生长。

实验讨论：在实验中，我们使用了高压灭菌锅进行灭菌操作。

高压灭菌通常可以在较短时间内灭菌，且能够彻底杀灭微生物，保证培养基的无菌性。

然而，操作时需要注意灭菌锅的安全使用，并遵循相应的操作规程，确保操作人员的安全。

总结：通过本实验，我掌握了培养基制备的基本操作技巧，了解了培养基的重要性以及灭菌操作的必要性。

制备无菌培养基是微生物实验中的基础工作，对于后续实验的结果和判断具有重要影响。

培养基的配制和灭菌实验报告（共8篇）

培养基的配制和灭菌实验报告(共8篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。

2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。

三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。

2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。

四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。

（2）N源：包括无机氮和有机氮。

（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。

（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。

微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。

有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。

2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。

3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。

（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。

若是含糖培养基，110℃、30min。

（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。

因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。

（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。

（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。

除病菌需更小。

五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。

培养基的制备与灭菌

培养基的制备与灭菌
1. 培养基的制备
制备培养基需要先准备好各种化学试剂，并按照配方将其称量、混合。

通常情况下，培养基的配方会包括以下成分：碳源、氮源、矿物质、维生素等。

其中，碳源可以是葡萄糖、蔗糖等简单的单糖或复糖；氮源可以是氨基酸、蛋白胨等；矿物质可以是磷酸盐、镁盐、钙盐等；维生素可以是叶酸、核黄素等。

将配制好的各种化学试剂按照配方溶解在蒸馏水中，制得液体培养基。

根据不同的需求，还可以将液体培养基加入琼脂糖等凝胶剂制成固体培养基。

2. 培养基的灭菌
培养基的灭菌是为了保证培养基中不含有任何杂菌或细菌，避免其对微生物学实验结果产生影响。

常用的灭菌方法有以下几种：
(1) 煮沸法：将液体培养基放入自减压锅或常压锅内进行煮沸，时间一般为20-30分钟，可杀死绝大多数的细菌和孢子。

(2) 高压灭菌法：将液体培养基放入压力灭菌锅内，压力升至1.5kg/cm2，温度达到121℃，时间一般为15-20分钟。

(3) 紫外线灭菌法：将液体培养基放入紫外线灯下，辐照时间一般为30-60分钟，可以杀灭一部分的细菌和孢子。

(4) 过滤灭菌法：利用过滤膜过滤液体培养基，可杀灭微小的细菌和病毒。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告一、实验目的1、了解培养基的制备原理和方法。

2、掌握培养基的灭菌技术和操作流程。

3、熟悉无菌操作的基本要求和注意事项。

二、实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。

不同的微生物对营养物质的需求不同，因此需要根据培养目的和微生物的特点来选择和配制合适的培养基。

培养基的制备一般包括以下几个步骤：计算、称量、溶解、调节pH 值、分装、包扎。

灭菌是指用物理或化学方法杀死或去除物体上所有微生物（包括芽孢和孢子）的过程。

常用的灭菌方法有干热灭菌、高压蒸汽灭菌、过滤灭菌等。

本实验采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。

三、实验材料与设备1、实验材料牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂1mol/L NaOH 溶液1mol/L HCl 溶液蒸馏水2、实验设备电子天平高压蒸汽灭菌锅电炉移液管锥形瓶培养皿玻璃棒pH 试纸四、实验步骤1、培养基的制备计算：根据配方计算所需各种成分的用量。

称量：用电子天平准确称量各种成分。

溶解：将称量好的成分依次加入到一定量的蒸馏水中，在电炉上加热搅拌，使其完全溶解。

调节 pH 值：用 1mol/L NaOH 溶液或 1mol/L HCl 溶液调节培养基的 pH 值至所需值（本实验中为 72-74）。

分装：将配制好的培养基趁热分装到锥形瓶和培养皿中。

锥形瓶的装量一般不超过其容积的 2/3，培养皿的装量一般为 15-20ml。

包扎：在锥形瓶口和培养皿盖上包上牛皮纸或报纸，用绳子扎紧。

2、灭菌检查灭菌锅的水位和安全阀，确保正常。

将包扎好的培养基放入灭菌锅中，注意不要摆放过于紧密。

关闭灭菌锅的盖子，拧紧螺丝。

设定灭菌条件：一般为 121℃，15-20min。

启动灭菌锅，开始灭菌。

灭菌结束后，待压力降至零，打开灭菌锅的盖子，取出培养基。

3、无菌检查将灭菌后的培养基放置在 37℃的恒温培养箱中培养 24-48h，检查有无杂菌生长。

五、实验结果与分析1、培养基的制备成功按照配方配制出了所需的培养基，外观呈均匀的液体状态，无沉淀和浑浊现象。