《食品微生物》第6章血清学反应(免疫学)
食品微生物学第2阶段江南大学练习题答案 共三个阶段,这是其中一个阶段,答案在最后。
江南大学网络教育第二阶段江南大学练习题答案共三个阶段，这是其中一个阶段，答案在最后。
考试科目:《食品微生物学》第章至第章（总分100分）一单选题 (共10题，总分值10分，下列选项中有且仅有一个选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。
)1. 在微生物实验室中最常用的高压蒸汽灭菌条件是（）（1 分）A. 135℃～140℃，5～15秒B. 72℃，15秒C. 121℃，15～20分钟D. 100℃，5小时2. 在微生物能量代谢过程中，底物脱氢产生的氢还原力不经呼吸链传递，而直接交给某一内源中间代谢物的氧化类型属于（）（1 分）A. 发酵B. 无氧呼吸C. 黄素蛋白水平呼吸D. 有氧呼吸3. 在微生物学研究与实践中，常用于菌种复壮的措施是（）（1 分）A. 控制传代次数B. 创造良好的培养条件C. 有效的保藏方法D. 纯种分离4. 下列哪种方法杀灭芽孢菌的效果最差（）（1 分）A. 干热灭菌B. 煮沸消毒C. 间歇灭菌D. 高压蒸汽灭菌5. 在现行国家标准中用于食品中大肠菌群检测初发酵试验的是（）（1 分）A. 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤B. 营养肉汤C. 乳糖胆盐培养基D. 伊红美兰培养基6. 下列物质中属于微生物次生代谢产物的是（）（1 分）A. 鞭毛B. 生长因子C. 内毒素D. 色素7. 在细菌总数测定时，结果用cfu表示，其中cfu的含义是（）（1 分）A. 细菌个数B. 细菌活力C. 细菌效价D. 菌落形成单位8. 以下不属于微生物次生代谢产物的是（）（1 分）A. 赤酵母的β-胡萝卜素B. 灰色链霉菌产的链霉素C. 大肠杆菌内毒素D. 啤酒酵母产的酒精9. 使用高压锅灭菌时，上磅前打开排汽阀的目的是（）（1 分）A. 防止高压锅内压力过高，使培养基成分受到破坏B. 排尽锅内有害气体C. 防止锅内压力过高，造成灭菌锅爆炸D. 排尽锅内冷空气10. 在工业发酵中，接种时采用的种子液应处于（）（1 分）A. 稳定期B. 对数期C. 延迟期D. 衰亡期二多选题 (共5题，总分值10分，下列选项中至少有2个或2个以上选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。
食品中微生物快速检验技术
第五章 食品中微生物标准检验与分析技术
第一节 3M测试片快速分析技 术
第一节 3M测试片快速分析技术
一、什么是3M测试片？
第六章 食品中微生物快速检验技术
第一节 3M测试片快速分析技术
二、3M测试片的优点
1. 工作效率的极大提高 根据大量数据统计，使用 3M Petrifilm， 可以提高实验室工作效
腺苷一磷酸 荧光
第五节 利用酶促反应定量检测微生物
三、 MTT法检测总菌落数
检测原理为活体微生物线粒体中含有琥珀酸脱氢酶，能 使外源性MTT（噻唑蓝）还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜 (Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。
Formazan结晶形成的量与活菌数成正比。用酶联免疫检 测仪在490nm波长处测定其光吸收值， 可间接反映活菌细胞数量。
因此只要先用标准方法对比 做出标准曲线，就可以达到快速 定量检测菌数的目的。
第六章 食品中微生物快速检验技术
第三节 利用电导率快速分析测试技术
一、 电导率快速检测微生物技术原理
样品中微生物数量越多，越快进入对数生长期。培养基电导率 发生跃迁的时间越短。
第六章 食品中微生物快速检验技术
第三节 利用电导率快速分析测试技术
• 3. 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留
其③酶酶的作活用性的。底物（显色剂）
第六章 食品中微生物快速检验技术
酶 酶标记抗体
抗体 抗原
1.将抗体包被在固相载体上。 2.如样品中含有抗原，则结合 为抗原抗体复合物。 3.再加入酶标记抗体，则结合 为抗体-抗原-酶标记抗体复合 物。
4.酶催化底物并显色。
第五节 利用酶促反应定量检测微生物
一、利用葡萄糖醛酸酶定量检测E. Coli
微生物的免疫技术—微生物的血清学技术
沉淀反应——可溶性抗原与相应 抗体结合所发生的沉淀反应 沉淀反应是指可溶性抗原（细菌 培养滤液、细胞或组织的浸出液、 血清蛋白等）与相应抗体在液相 中特异结合后，形成的免疫复合 物受电解质影响出现的沉淀现象。
反应中的抗原称为沉淀原 （precipitinogen），可以是类 脂、多糖或蛋白质等；抗体称为 沉淀素（precipitin）。
不被结合而游离存在。 此时如在上述反应系统中加入绵羊红细胞(Ag)和溶血素(Ab)系统，即可与游离的补体结合而出现溶
血现象。因此，根据溶血现象是否产生，即可得知检测系统中有无相应的抗原或抗体存在。
3、补体结合反应(complement fixation reaction)
补体结合试验：（CFT） 抗原、抗体、 补体、红血球悬液、溶血素
凝集试验 ： 直接凝集试验、间接凝集试验、 乳胶凝集试验
补体参与的试验： 补体结合试验
沉淀试验： 环状沉淀试验、絮状沉淀试验、 琼脂扩散试验、免疫电泳
中和试验： 病毒中和试验
1、凝集反应 (agglutination)
凝集反应——颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的凝集反应 细菌和红细胞等颗粒性抗原，当与相应抗体特异结合后，在适量 电解质存在的条件下，可逐渐聚集，出现肉眼可见的凝集现象称 为凝集反应。 反应中的抗原称为凝集原（agglutinogen） 抗体称为凝集素（agglutinin）。 根据凝集反应的原理，以后又发展建立了各种直接凝集试验、间 接凝集抑制试验以及固相免疫吸附血凝试验等新方法。
2、电解质： 生理盐水做稀释液
3、温度：
37-45摄氏度
4、酸碱度 ： pH6-8
思考与讨论、任务
思考与讨论：我学到什么？
1、血清学反应的类型 2、血清学反应的特点 3、血清学反应的主要影响因素
第六章食品安全现代生物检测技术第一节免疫学检测技术第
• 5 酶反应终止液
• 6 阳性对照品和阴性对照品
• 7 参考标准品
• 三、磺胺二甲嘧啶的间接竞争ELISA检测 • （一）人工完全抗原的合成 • （二）合成抗原的鉴定 • （三）抗体的制备与纯化 • （四）标准竞争抑制曲线的制作 • （五）畜产品中SM2残留的ELISA检测 • （六）方法评价 • 1 特异性 • 2 灵敏度 • 3 准确度 • 4 精确度
酶标抗原或抗体既保留其免疫活性．又保留酶的活性。
• （二）ELISA的类型
•
ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。用于临床检验
的ELISA主要有以下几种类型。
• 1 双抗体夹心法测抗原
• 2 双抗原夹心法测抗体
• 3 间接法测抗体
• 4 竞争法测抗体
• 5 竞争法测抗原
• （三）ELISA的材料与试剂
• （1）PCR基本原理 PCR技术由美国Centus公司
Kary Mullis发明，20世纪90年代逐渐成熟应用。 简单地说PcR就是利用核酸DNA聚合酶、引物和 4种脱氧单核苷酸在试管内完成模板DNA的快速 复制．
• （2）PCR技术检测转基因食品的技术关键和理
论依据
• （3）PCR检测转基因食品的基本步骤
自生物活性。
•
ELISA分析基本步骤如下：①将抗原（Ag）或
抗体Ab结合到固相载体平板的孔里；②待测溶液的
特殊抗原或抗体结合到敏化载体表面；③加入酶标抗
体使之与抗原或抗体化合物相结合；④结合物通过标
记酶催化底物的颜色改变而被检测；⑤通过最后溶液
的颜色深浅对待侧抗原或抗体进行定量分析。
• 2.ELISA分析法的灵敏度
• 3.ELISA分析法的要点
食品微生物学_第二阶段练习及答案
江南大学网络教育第二阶段练习题考试科目:《食品微生物学》第章至第章（总分100分）__________学习中心（教学点）批次：层次：专业：学号：身份证号：姓名：得分：一单选题 (共10题，总分值10分，下列选项中有且仅有一个选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。
)1. 在微生物实验室中最常用的高压蒸汽灭菌条件是（ C ）（1 分）A. 135℃～140℃，5～15秒B. 72℃，15秒C. 121℃，15～20分钟D. 100℃，5小时2. 在微生物能量代谢过程中，底物脱氢产生的氢还原力不经呼吸链传递，而直接交给某一内源中间代谢物的氧化类型属于（ A ）（1 分）A. 发酵B. 无氧呼吸C. 黄素蛋白水平呼吸D. 有氧呼吸3. 在微生物学研究与实践中，常用于菌种复壮的措施是（ D ）（1 分）A. 控制传代次数B. 创造良好的培养条件C. 有效的保藏方法D.纯种分离4. 下列哪种方法杀灭芽孢菌的效果最差（A ）（1 分）A. 干热灭菌B. 煮沸消毒C. 间歇灭菌D. 高压蒸汽灭菌5. 在现行国家标准中用于食品中大肠菌群检测初发酵试验的是（ A ）（1 分）A. 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤B. 营养肉汤C. 乳糖胆盐培养基D. 伊红美兰培养基6. 下列物质中属于微生物次生代谢产物的是（ D）（1 分）A. 鞭毛B. 生长因子C. 内毒素D. 色素7. 在细菌总数测定时，结果用cfu表示，其中cfu的含义是（ D ）（1 分）A. 细菌个数B. 细菌活力C. 细菌效价D. 菌落形成单位8. 以下不属于微生物次生代谢产物的是（C ）（1 分）A. 赤酵母的β-胡萝卜素B. 灰色链霉菌产的链霉素C. 大肠杆菌内毒素D. 啤酒酵母产的酒精9. 使用高压锅灭菌时，上磅前打开排汽阀的目的是（ D ）（1 分）A. 防止高压锅内压力过高，使培养基成分受到破坏B. 排尽锅内有害气体C. 防止锅内压力过高，造成灭菌锅爆炸D. 排尽锅内冷空气10. 在工业发酵中，接种时采用的种子液应处于（ B ）（1 分）A. 稳定期B. 对数期C. 延迟期D. 衰亡期二多选题 (共5题，总分值10分，下列选项中至少有2个或2个以上选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。
《食品微生物检验》习题库完整
习题库项目一食品中的微生物及其检验一、名词解释1、微生物：2、食品微生物检验：3、食品变质：4、腐败：5、酸败：6、菌落总数：7、大肠菌群：8、MPN：二、填空题1、食品中的微生物的主要来源是、和。
2、引起食品腐败变质的原因主要有、、和等方面，其中，最普遍、最主要的因素是。
3、分解蛋白质的微生物以为主，其次是和。
4、分解糖类的微生物以为主，其次是和。
5、分解脂肪的微生物以为主，其次是和。
6、国家食品卫生标准一般包括三个方面的内容：、和。
7、微生物指标一般分为、和三项。
8、食品微生物检验包括和两个方面。
三、选择题1、下列描述的微生物特征中，不是所有微生物共同特征的是（）A.个体微小B.分布广泛C.种类繁多D.可无致病性E.只能在活细胞内生长繁殖2、土壤中，数量和种类最多的微生物是（）A、细菌B、霉菌C、酵母菌D、放线菌3、我国城市饮用水卫生标准规定（）A、每1000ml水中大肠杆菌＜3个B、每1000ml水中大肠杆菌＜30个C、每100ml水中大肠杆菌＜3个D、每100ml水中大肠杆菌＜30个E、每500ml水中大肠杆菌＜3个4、我国城市饮用水卫生标准规定（ E ）A、每ml水中细菌总数＜1000个B、每ml水中细菌总数＜10个C、每100ml水中细菌总数＜10个D、每500ml水中细菌总数＜10个E、每ml水中细菌总数＜100个四、判断题1、菌落计数以菌落形成单位（CFU）表示。
（）2、MPN是指可能产气的数量。
（）3、食品中病原微生物的检验，可以检验出少量的病原微生物（）五、问答题1、食品微生物检验的特点有哪些？2、食品微生物检验的任务是什么？3、食品微生物检验的内容主要包括哪些方面？每一个方面的检验项目是什么？4、食品质量的评价指标有哪些？并具体解释之。
5、食品微生物检验的意义是什么？6、食品中细菌总数检验的意义是什么？7、食品中大肠菌群检验的意义是什么？项目二食品微生物检验的基本条件与设备一、名词解释1、分辨力：2、相位：3、振幅：二、填空题1、无菌室通常包括和两部分，这两部分的比例一般为，高度一般 m左右。
血清学基础知识
１）环状沉淀反应：
是一种定性试验方法，可用已知抗 体检测未知抗原。将已知抗体注入 特制小试管中，然后沿管壁徐徐加 入等量抗原，如抗原与抗体对应， 则在两液界面出现白色的沉淀圆环。
环状沉淀反应示意图
２）絮状沉淀反应：
将已知抗原与抗体在试管（如凹玻 片）内混匀，如抗原抗体对应，而 又二者比例适当时，会出现肉眼可 见的絮状沉淀，此为阳性反应。
2、什么是抗体
机体受外来抗原物质刺激后，产生的一种与该抗原发 生特异性结合的免疫球蛋白(Ig) 被分为G，A，M, E, D等 几类. 最典型的抗体是IgG, 有Y型三维结构, 包含两套重 链和轻链。
IgG抗体的结 构及与抗原的
反应
二、血清学反应的一般特点：
1、抗原抗体的结合具有特异性，但有共同抗原体存 在时，会出现交叉反应。
一种塑料试验板
b.试管凝集法
是一种定量试验方法。多用已知抗原来检测血清中 有无相应抗体及其效价。因为要测定抗体的含量， 故将待检查的血清用等渗盐水倍比稀释成不同浓度， 然后加入等量抗原，37℃，2—4小时后观察，血清 最高稀释度仍有明显凝集现象的，为该抗血清的凝 集效价。
试管凝集法示意图
c. Microtiter Agglutination 微皿板（96孔板）凝集法
血清学基础知识
血清学基础
免疫学反应：抗原抗体反应 The Immune Response: Antigen-Antibody Reactions 是抗原与抗体的反应，仅在高等脊椎动物中存在. 这是
已知的最精妙复杂的身体抵御外部物质的系统。
In vivo reactions 活体中的反应:抗体与入侵细胞结合， 补体与抗体结合，导致入侵细胞裂
《食品微生物学》思考题和作业题-
《食品微生物学》思考题和作业题-work Information Technology Company.2020YEAR《食品微生物学》课堂教学用思考题和作业题0 绪论本章作业题：教材P8的第1、6、9题：什么是微生物它包括那些类群微生物有哪五大共性其中最基本的是哪一个为什么什么是微生物学学习微生物学的主要任务是什么微生物学的基本实验技术有哪些？试分别阐述之。
区别于其它生物，微生物有何特点你有何体会认真阅读教材的“绪论”和“结束语”，结合自己的亲身经历谈谈你打算怎样学好“微生物学”这门课程。
补充思考题：用具体事例说明人类与微生物的关系。
简述微生物学在生命科学发展中的地位，并描绘其前景。
为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人?微生物学研究的基本方法和技术有哪些你现在了解哪些技术你认为微生物学的理论和技术有怎样的联系试从微生物的特点分析其分布比动植物更广泛的原因，为什么无菌操作技术是一切微生物学工作的基础？一、微生物分类鉴定与命名本章作业题•教材P366-367的第4、5、6、7、8：什么是种什么是新种任何表示一个种和新种什么是学名什么是双名法熟悉一批学名对每个生命科学工作者有何重要性何谓菌株它如何表达正确理解菌株的涵义有何重要意义什么是模式菌株它和模式菌种有何关系概念：菌株、品系、克隆、无性繁殖系、毒株、菌落、菌苔、斜面、分离物、纯培养以及菌种等名词有何区别？本章思考题•教材的第12、15、16题：试比较古生菌、细菌和真核微生物间的主要区别。
用于微生物鉴定的经典指标有哪些随着新的理化技术在微生物鉴定中等应用，经典的分类指标会被淘汰吗何故现代微生物鉴定技术队发展趋势如何？试举例加以说明。
•教材第21题中微生物的学名(着重于勾画的)。
二、原核微生物1 观察细菌为何要用染色法，Gram染色法哪步最关键为什么如何保证结果的正确性2 研究芽孢有何重要的理论和实践意义？3 放线菌的典型形态特征是怎样的？4 会描绘原核细胞的构造模式图，并能说明各构造的重要特点和功能（思考题）三、真核微生物补充的思考题：1 霉菌的繁殖方式有哪些？2 试比较发酵工业中常见常用霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉和红曲霉）的菌丝特点（指分枝分隔和核的数量）、子实体及特化菌丝名称和无性孢子、有性孢子名称等。
第6章 免疫学检测技术在食品检测中的应用2
第四节 食品中藻毒素残留的免疫检测
| 淡水藻毒素
微囊藻 鱼腥藻 束丝藻 颤藻 ……
肝毒素：微囊藻毒素、节球藻 毒素和柱孢藻毒素 神经毒素：鱼腥藻毒素、石房 蛤毒素、新石房蛤毒素和膝沟 藻毒素 内毒素
| 海洋藻毒素/海洋生物毒素/贝毒素
麻痹性贝类毒素 如石房蛤毒素
PSP
神经性贝类毒素
NSP
如短裸甲藻毒素
图 3.4 表面等离子共振原理 Fig 3.4 Principle of surface plasmon resonance
L: 光源 D: 光电二极管阵列检测器 P: 棱镜 S: 传感器表面 F: 流通池 两条粗线代表 t1 和 t2 两个时间由共振现象引起的投向检测器的反射光强度 t1 时的投影代表抗原抗体未结合在传感器表面，t2 时的投影代表抗原抗体结合在传感器表面
图 3.3 自装配 HRP 和抗体分子的纳米金电极原理 Fig 3.3 Schematic illustration of self-assembling HRP and antibody molecules onto gold
nanoparticles electron
2009年，Piermarini等利用抗原包被的磁珠建立了酶
Daly 等（2000）和 Wang 等（2008）根据 SPR 传感 器技术对 AFB1进行了检测研究，他们的检测线性范 围分别达到了 3.0～98.0 ng/mL 和 0.3～7.0ng/mL Wang 等（2009）研究出一种新颖的表面等离子体增 强荧光技术。使得方法灵敏度显著提高。利用此技 术检测 AFM1，检测限达到了 0.6 pg/mL
联免疫磁珠电化学方法检测玉米粉中的AFB1
同年，Tan等建立了一种利用电极上金属银沉积的变
第七节 血清学反应
1
2
3
4
Ag Ab 1:25 1:50 1:100 1:200
（二）沉淀反应 可溶性抗原(如血清蛋白、细菌培养滤液)与
相应抗体结合，在适量电解质存在条件下，经过
一定时间，形成肉眼可见的沉淀物的反应。 沉淀原可以是类脂、多糖或蛋白质等。 环状法、絮状法和琼脂扩散法3种。
双向琼脂扩散试验
定性分析的方法
用该抗体浸染可能含抗原的细胞或组织切片，
则抗原与荧光抗体特异性结合，形成复合
物固着在细胞上，不易洗脱，在荧光显微镜下
成为发出荧光的可见物体，达到鉴定和定位抗
原的目的。
最常用的荧光素有异硫氰酸荧光素和罗丹明
等。荧光抗体技术有直接法、间接法和补体法3种
2、免疫酶技术 酶标抗体与抗原特异性结合后，需用酶的底物
健康
病毒＋抗体
动物
发病
四、免疫标记技术
灵敏、快速
用标记物(如荧光素、放射性同位素、酶)标
记抗体或抗原的，通过测定标记物，检测抗原或
抗体的技术。 定位作用 的分布、位置。 免疫荧光技术、放射免疫测定技术和酶免疫 可以了解抗原在细胞中和组织中
测定技术三类。
1、免疫荧光技术
原理 是用荧光素标记的已知抗体作为试剂
第六节
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ血清学反应
体外进行的抗原抗体反应，反应常需要抗血清参
与而得名。
基本原理 是根据抗原与抗体反应的特异性，
在体外采用非常简便易行的方法检测未知抗原或抗体 病原微生物分类、鉴定；疾病诊断；在其它学科 如生物化学、遗传学等研究方面也起到了重要作用。
二、血清学反应的类型及应用
(一)凝集反应 颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体特 异性结合，在适量电解质作用下，出现肉眼可见 凝集现象。 定性检测 性或阴性。 根据凝集出现与否判定结果阳
附免疫学及血清学反应[可修改版ppt]
![附免疫学及血清学反应[可修改版ppt]](https://img.taocdn.com/s3/m/012294073186bceb18e8bbbd.png)
化学组成：
• 单一氨基酸组成的聚合物，免疫原性弱； • 不同氨基酸构成的共聚物，免疫原性良好； • 有芳香簇氨基酸，可大大提高免疫原性； • 多糖的免疫原性取决于单糖的数目和类别； • 核酸的免疫原性很低，但与蛋白质结核则具有强
的免疫原性（核酸抗体）
三 、 抗 原 的种类
抗原能特异性与相应的抗体 或致敏淋巴细胞反应的能力
二、抗原的基本特性
1、异物性 2、具一定的理化性质
1、异物性（foreignness）
①异种物质 ②同种异体物质 ③改变和隐藏的自身抗原
①异种抗原（xenogenic antigen）
机体本身成分以外的各种具有免疫原性 的抗原物质。
通常种属关系越远，免疫原性越强。 病原体
疫
扩
1
散
试
验
2
返回
3、补体结合试验
指示系统：绵羊红细胞和溶血素 待测系统：已知抗体或抗原
待测抗原或抗体 补体系统：豚鼠的新鲜血清
补体可以与任何抗原抗体复合物结合
补 体 结 合 试 验 原 理
4、免疫标记技术
（1）免疫荧光技术 （2）免疫酶技术 （3）放射免疫测定法 （4）免疫电镜技术 （5）发光免疫测定法
FLASH
返回
双重染色标本的单色和双色观 察
WU
WIB
DUAL BAND
DAPI+FITC
WIBA
WIG
WIB
FITC+PI
1、按抗原性能分类
（1）完全抗原 （2）半抗原
完全抗原 （complete antigen）
凡同时具有免疫原性 和反应原性的物质
半抗原 (incomplete antigen or hapten)