第十章体液电解质检查
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实验操作
1、待测标本准备 2、仪器准备 3、测定
吸入钾、钠标准应用液(Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ)分别记录各标准液读数, 吸入去离子水,待指针回到零点,再吸入待测标本,记录 测定标本读数。
4、关机
注意事项
1、标本溶血或延迟分离血清均可使血清钾浓度明显增高, 故应及时分离血清。若不能及时应将血清臵于试管内冰箱 保存。 2、测定用的玻璃器皿必须用去离子水冲洗干净,不得有离 子污染。 3、火焰光度计的各种管道应保持通畅,不得有堵塞。 4、所用燃料为易燃物,有潜在危险,应注意安全。
影响因素
1) 样品采集后尽快测量,时间不能超过1h
2) 使用肝素作为抗凝剂时浓度不能太高,不能 使用柠檬酸盐、草酸盐等抗凝剂。 3) 因废液中可能含有人体有害物质,故应按有 害品处理。
临床意义
1、血清钠降低
定义:血清钠浓度低于130mmol/L为低钠血症,临床上多见。 (1)胃肠道失钠:即临床上常见的缺钠性脱水。如腹泻、呕吐等。 (2)钠排出增多:如肾功能损伤、肾小管重吸收功能降低、糖尿病、使 用利尿剂等。 (3)皮肤失钠:如大量出汗后只补充水分不补充钠;大面积烧伤、创伤, 钠从伤口大量丢失等。
试剂与器材
1、硝酸汞溶液 2、二苯卡巴腙指示剂 3、氯化物标准液 4、钨酸蛋白沉淀剂 5、器材 试管、试管架、移液管、滴管。
实验步骤
1、直接滴定法 淡红色 淡紫色 2、血滤液滴定法
如果标本溶血、黄疸、浑浊时,用直接法难以判断终点,可 采用血滤液滴定法。
淡红色 淡紫色
【计算】
滴定血清时硝酸汞的用量 氯化物(mmol/L)=--------------------*100(mmol/L) 滴定标准液时硝酸汞的用量
而产生电位差,也就是膜电位。用比较法测
定待测溶液中钾、钠等离子的浓度。
试剂与器材
1、漂移校正液 2、斜率校正液 3、去蛋白液 4、电极活化液 5、参考电极电解液 6、晶体 7、器材 小试管、试管架等 8、电解质分析仪
实验步骤
1、开机 2、定标Ⅰ
3、定标Ⅱ 4、样品测量
测量范围
血清钠 136~145mmol/L 血清钾 3.5~5.3mmol/L
一、电解质的生理功能
(一)维持体液的渗透压和酸碱平衡
细胞内外渗透压处于动态平衡: 胞内:K+、HPO42-、Mg2+、蛋白质和SO42胞外:Na+、Cl-、HCO3-
(二)维持神经肌肉、心肌的应激性
体液中多种电解质与神经肌肉的应激性有关 [K+][Na+] 神经肌肉应激性∝------------------[Ca2+][Mg2+][H+]
仪器装置
FP640火焰光度计
火焰光度法分析示意图
1.光源系统2.光学系统3.检测系统
双通道火焰光度计
-用于测定食品中的钠含量、土壤
中的钾含量、矿石中的钠/钾含 量等。 -可同时测定钠、钾离子浓度。 -数据可以通过RS-232接口输出到 计算机或打印机。
试剂与器材
1、钾标准贮存液 2、钠标准贮存液 3、钾、钠标准应用液Ⅰ(钾0.04mmol/L,钠1.2mmol/L) 4、钾、钠标准应用液Ⅱ(钾0.04mmol/L,钠1.4mmol/L) 5、钾、钠标准应用液Ⅲ(钾0.04mmol/L,钠1.6mmol/L) 6、去离子水 7、器材 试管、试管架、移液管 8、火焰光度计
血清氯化物临床意义:
(1)增高:
①排出减少:急、慢性肾功能衰竭、肾小管性酸中毒、梗阻性肾病等。 ②摄入过多:高盐饮食、输入生理盐水过多,尤其在慢性肾功能不全时。 ③呼吸性碱中毒。 ④高渗性脱水(失水>失钠)。 ⑤溴化铋中毒。
(2)降低:
①严重呕吐、高位肠梗阻、慢性幽门梗阻等。 ②人工胃或肠瘘引起胃液、胰液、胆汁大量丢失等。 ③慢性肾上腺皮质功能减退。 ④严重糖尿病排尿过多致酸中毒。 ⑤出汗过多未及时补足氯化钠。 ⑥心功能不全和肾炎长期无盐或低盐饮食并大量利尿后。
【参考范围】
血清氯化物 96~108mmol/L 尿液氯化物 170~250mmol/24h 脑脊液氯化物 120~132mmol/L
注意事项
1、本法不仅对氯离子敏感,对一些卤族元素也敏感。 2、如果氯化物含量>125mmol/L,<80mmol/L时,应将标本1:1 稀释或标本量加大0.5倍。 3、本显色法温度不低于200C,室温低易混浊,影响比色。
4、血清钾增高
定义:血清钾浓度高于5.5mmol/L为高血钾。 临床上可见于: (1)钾排出减少:如少尿症、闭尿症、急性肾衰竭等。 (2)细胞内钾外移:如严重溶血、大面积烧伤、细胞内钾外移、组织缺氧及 酸中毒等。
测定方法
1、滴定法
如:硝酸汞滴定法 优点:操作简单,不需要特殊仪器, 缺点:干扰因素多。
临床意义
3、血清钾降低
定义:血清钾浓度低于3.5mmol/L为低血钾。 临床上常见于: (1)胃肠道失钾:如严重腹泻、呕吐、胃肠引流等丢失大量消化液,引起低 血钾。 (2)钾排出增多:如肾上腺皮质功能亢进,肾小管排钾增多。 (3)钾的进食量不足:如患者长期不能正常饮食、手术后长期禁食等。 (4)细胞外钾内移:如碱中毒时:氢离子从细胞内转入细胞外,同时钾由细 胞外转入细胞内。
主要内容:
第一节:概述
第二节:血清(尿)钾、钠测定
第三节:血清氯化物测定 第四节:血清钙测定 第五节:血清无机磷测定 第六节:血清铁及总钙结合力测定
概述
电解质是人体体液的主要组成成分,参与机体许多 重要的生理和生化过程。 正常情况:完善的缓冲和调节系统 病理情况: 易造成水、电解质、酸碱平衡紊乱。特 别胃肠道疾病、感染、创伤或环境剧烈 改变等。
铁作为人体必需的重要元素,用于合成血红蛋白、肌红蛋白、 细胞色素、过氧化氢酶和过氧化物酶等物质,广泛参与物质 代谢。
钾、钠、氯的代谢
(一)钠氯代谢:
来源:食物中的氯化钠。 代谢:主要分布于细胞外液,维持晶体渗透压 排出:肾、汗。 Na+是细胞外液最多阳离子 肾脏的调节机制:多吃多排
少吃少排 不吃可不排
2、离子选择电极分析法
3、化学比色法
如:硫氰酸汞比色法
4、电量分析法
优点:操作简便、快速。但需要专用仪器。
硫酸汞滴定法
原理:
用标准硝酸汞溶液滴定血清或尿液中的氯离子,生成溶解但 不解离的氯化汞。当到达滴定终点时,过量的汞离子与指示 剂二苯卡巴腙作用,生成淡紫色的络合物。根据硝酸汞溶液 的用量推算氯离子的浓度。
测量范围
血清钠 尿钠 血清钾 尿钠 136~145mmol/L 130~260mmol/24h 3.5~5.3mmol/L 25~100mmol/24h
离子选择电极法测定血清(尿)钾、钠
定义:离子选择性电极是一种以电位法测定某些特定离子活度的指示电极 构造:是一种电化学传感器,由敏感膜、电极帽、 电极杆、内参比电极和内参比溶液组成 测定原理:基于内部溶液与外部溶液之间产 生的电位差,即膜内外被测离子活度的不同
电解质测定方法:
1. 火焰光度法------参考方法
用于测定K+、Na+和Ca+ 优点:结果准确可靠
2. 化学试剂显色法
用于测定Cl-、Fe3+、Ca2+ 和无机磷 优点:操作简单,不需要特殊仪器。临床上广泛应用。
3. 滴定法
用于测定Cl-、Mg2+、Ca2+ 缺点:滴定过程中易受多种因素的影响,结果不是十分理 想。临床上少用。
(二)钾的代谢:
来源:食物 代谢:主要在细胞内液(肌肉、皮肤、红细胞、骨、脑、肝等) 去路:尿、汗、粪 K+是细胞内液主要的阳离子 肾脏的调节机制:多吃多排
少吃少排 不吃也要排
二、电解质的测定方法
标本的采集和处理 1. 血清和肝素抗凝全血、尿液等均可测K+、Na+ 2. 溶血标本不宜于测定血钾 注意:血清K+稍高于血浆K+
例如:激酶类中的Mg2+ 淀粉酶的激活剂Cl电解质直接参与物质代谢过程 例如:K+参与糖原、蛋白质合成与分解 Na+参与小肠对葡萄糖的吸收
(四)其他
磷、钙是构成骨骼和牙齿的主要成分
钙作为凝血因子参与血液凝固,影响心肌、神经肌肉的应激 性,作为许多酶的激活剂。 磷构成磷脂、核酸等重要物质,参与体内物质代谢。
【参考范围】
血清氯化物 96~108mmol/L 尿液氯化物 170~250mmol/24h 脑脊液氯化物 120~132mmol/L
注意事项
1、所用器材必须洁净 2、硝酸汞易潮解,称取时要迅速。 3、取血后应尽快分离血清,避免红细胞内氯化物溢出。 4、尿液标本如混浊或含有血液应先离心后取上清液。
乙二胺四乙酸二钠滴定法
【原理】
血清中的钙离子在碱性溶液中与钙红指示剂结合形成可溶 性复合物,使溶液呈淡红色。EDTA-Na2对钙离子的亲和力很 大,能与钙离子形成络合物。使钙红指示剂游离,变成蓝色。 根据EDTA-Na2 滴定用量与标准管EDTA-Na2 滴定用量比较,可 计算出血清钙的含量。
试剂与器材
试剂与器材
1、饱和硫氰酸汞溶液
2、硝酸汞溶液 3、显色应用液 4、氯化物标准液 5、空白试剂
6、器材
试管、试管架、移液管、滴管。
实践步骤
加入物(ml) 测定管 测定空白管 标准管 试剂空白管
血清 氯化物标准Hale Waihona Puke Baidu 蒸馏水 空白试剂 显色应用液
0.05 3.0
0.05 3.0 -
0.05 3.0
0.05 3.0
火焰光度法测定血清(尿)钾、钠
火焰光度法-------发射光谱法 原理:
高温---K、Na---激发态---返回基态---释放能量
发出特有波长的光谱
Na K 589nm 767nm
方法:
内标准测定法:标本中加入定量的锂或铯 外标准测定法:K、Na标准溶液 发谢光谱强度与K、Na浓度成正比。用已知浓度的标准液与待测 标本比较,即可计算出标本中钾、钠浓度。
4. 电量分析法
用于测定Cl-、Fe3+ 优点:属于物理方法,简便快速,在控制好电流的条件下, 是较好的方法。
电解质测定方法:
5. 原子吸收分光光度计法
用于测定Cu2+、Fe3+、Ca2+ 、Zn2+和Mg2+ 优点:结果准确,灵敏度高。 在临床上主要用于微量元素的测定
6. 酶动力学法
用于测定K+和Na2+ 优点:特异性强,准确性高 在临床上已受到普遍重视
7. 离子选择电极分析法
用于测定K+、Na2+ 、Cl-、Ca2+ 和H+ 优点:操作简便,选择性强,结果准确可靠 在临床上普遍采用的方法
测定方法
1、火焰光度法---广泛应用
缺点:所用燃料为易燃物,有一定的潜在危险
2、离子选择电极分析法 3、酶法
新近发展的方法,未被普及
4、原子吸收分光光度法
缺点:设备昂贵,需要特殊元素灯,不能广泛应用
1、钙标准液
2、钙红指示剂 3、0.25mol/L氢氧化钾溶液 4、EDTA-Na2溶液 5、器材 试管、试管架、移液管、滴管。
概述
血清钙主要以离子钙(Ca2+)和结合钙两种形式存在 47.5% 46% 少部分与柠檬酸等结合 发挥生理作用的是 离子钙
结合钙大部分与血清清蛋白结合
测定方法
1、原子吸收分光光度法---参考方法 优点:结果准确,灵敏度高。基层实验室少用。 2、乙二胺四乙酸二钠滴定法 虽简便易行,但终点判断易受主观因素的影响 3、甲基麝香草酚蓝比色法和邻甲酚酞络合铜法比色法 实验室常规方法 4、离子选择电极法 优点:操作简便,迅速,灵敏度高,临床上较广泛应用
[Ca2+] [Na+][OH-] 心肌应激性∝---------------------[K+] [Mg2+][H+]
主要是K+、Ca2+影响较明显。发生变化时,易引起一 些临床症状
低血钾:肌肉软弱无力、胃肠蠕动弱、肌麻痹 高血钾:心率慢
低血钙:手足抽搐和惊厥
(三)维持细胞的正常新陈代谢
电解质可以作为酶的辅助因子或激活剂
混匀后,室温10min,用分光光度计在波长460nm处,以试剂空白管调零,读 取各管吸光度。
硫氰酸汞比色法
原理:
Hg(SCN)2 + 2CL3SCN- + FeHgCl2 + 2SCNFe(SCN)3(橙红色)
【计算】
测定管吸光度-测定空白管吸光度 氯化物(mmol/L)=-------------------------*100(mmol/L) 标准管吸光度
2、血清钠增高
定义:血清钠浓度高于150mmol/L为高血钠,临床上较少见。 (1)肾上腺皮质功能亢进:如库欣综合征、原发性醛固酮增多症等,使 血清钠增高。 (2)严重高渗性脱水:如高热、大量出汗、大面积烧伤等体内水的丢失 大于钠的丢失,使血清钠增高。 (3)体内钠潴留:但常伴有水潴留,临床表现为水肿。如心力衰竭、肝硬 化等。