吸附法思考!直接使用酶固定化酶与固定化细胞各有什么优缺点

5、固定化酵母细胞
以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 CaCl2溶液中，观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。 将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右。
这一阶段成功与否呢？怎样评价？
观察凝胶珠的颜色和形状: 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏 低，固定的酵母细胞数目较少； 如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度 偏高，制作失败，需要再作尝试。
B、固定化细胞比固定化酶对酶的活性影响更小
C、固定化细胞固定的是一种酶
D、将微生物的发酵过程变成连续的酶反应应选择固定化细
胞技术
（二）固定化细胞技术
将酶或细胞固定化的方法
将酶（或细胞）包
包埋法
埋在细微网格里
将酶（或细胞）
化学结合法
相互连接起来 将酶（或细胞）吸
吸附法
附在载体表面上
课堂讨论：
1．从操作角度来考虑，你认为固定化酶技术与固定化 细胞技术哪一种方法更容易？
固定化细胞技术 2. 哪一种方法对酶活性的影响更小？
固定化细胞技术 3．固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？
练习:
1、制备固定化酵母细胞的过程中错误的是（
）
A、取干酵母，加入蒸馏水，使其活化
B、配制海藻酸钠时，加热用大火，直到海藻酸钠溶化为止
C、将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵
母细胞
D、将凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右
2、下列叙述不正确的是（
）
A、从操作角度来考虑，固定化细胞比固定化酶容易
（一） 固定化酶的应用实例
阅读P49，并思考： 1、解决酶应用中存在问题的方法是？ 2、这种方法的优点是什么？ 3、什么是高果糖浆？使用它有何好处？ 4、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是
什么？这种酶有何特点？ 5、了解高果糖浆生产过程。
在生产实际中使用固定化酶技术 有无不足?如有不足,怎么办?
有 一种酶只能催化一种化学反应， 而在生产实际中很多产物的形成 都通过一系列的酶促反应才能进 行，所以操作比较麻烦。 可采用固定化细胞技术。
固定化细胞固定的是一系列酶 4．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应，应 该选择哪种方法？ 固定化细胞技术
5．如果反应底物是大分子物质，又应该采用哪种方法？ 固定化酶技术
1、 对固定酶的作用影响较小的固定方法 是什么？
吸附法。
2、 将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵 过程变为连续的酶反应，应当固定（酶、 细胞）；若将蛋白质变成氨基酸，应当固 定（酶、细胞）。
2、配制物质的量浓度为0.05mol/L 的CaCl2溶液
3、配制海藻酸钠溶液
应当注意什么问题？ 1、加热时要用小火，或者间断加热 2、海藻酸钠的浓度 浓度过高——将很难形成凝胶珠； 浓度过低——形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，
影响实验效果。
4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合
为什么海藻酸钠溶液要冷却至室温？
一种酶只能催化一种 化学反应，而在生产 实践中，很多产物的 形成都通过一系列的 酶促反应才能得到的。
固定后的酶或细胞与
成本低，操作更容易。
反应物不容易接近， 可能导致反应效果下
降等。
三、实验操作
（一）制备固定化酵母细胞
1、酵母细胞的活化
思考： 关于酵母菌你知道哪些知识？ 什么是活化？ 怎样活化？ 应注意什么？
直接使用酶、固定化酶与固定化细胞各有什么优缺点？
类型 直接使用酶
优点
Hale Waihona Puke Baidu
不足
对环境条件非常敏感，
容易失活；溶液中的
催化效率高，低耗能、 低污染等。
酶很难回收，不能被 再次利用，提高了生 产成本；反应后酶会
混在产物中，可能影
响产品质量。
固定化酶 固定化细胞
酶既能与反应物接触， 又能与产物分离，同 时，固定在载体上的 酶还可以被反复利用。
（二）固定化酵母细胞的发酵
冲洗：将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲 洗2～3次。
发酵：150mL10％葡萄糖＋固定化酵母细胞 →200mL锤形瓶→密封→25℃发酵24h。
1、发酵过程中锥形瓶为什么要密封？
2、锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？
3、在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的 过程中，需要无菌操作吗？