医学免疫学：双向免疫扩散
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确保每孔的液面基本一致。 • 加样时，不能将样品加到孔的外面。
源自文库 实验现象
• 在两孔间会看到白色的沉淀线。
结果判断的方法
• 将出现白色沉淀线的相应孔的抗体的最大 稀释度作为该抗体的效价。
该血清中抗IgG的效价为1：4。
实验结果的记录和判断
• 画出实验结果图并判断效价。
注意事项
• 浇板用的玻片要洁净。 • 制备抗体琼脂板时，琼脂温度要控制在60℃左右。
温度太低会导致琼脂凝固。 • 加样孔中的琼脂应挑干净，且不可损坏孔的边缘，
双向免疫扩散
实验原理
• 双向免疫扩散是指可溶性抗原与相应抗体 在琼脂介质中相互扩散,彼此相遇后形成一 定类型的特异性沉淀线。
主要的试剂和器材
• 抗体：抗IgG • 抗原：IgG • 巴比妥缓冲液 • 1.5%琼脂（巴比妥缓冲液配制） • 载玻片、打孔器、微量进样器 • 37℃水浴箱
实验步骤
• 制板 用移液管吸取4.5ml的琼脂，将其放 到水平放置的载玻片上，待冷凝。
• 打孔 打梅花孔，各孔间的距离为0.70.8cm。
1
• 倍比稀释抗体 （见表）
• 加样 用微量进样器将各孔加各样品10ul； 中央孔加抗原，周围6孔分别加不同稀释 度的抗体。
• 将玻片放在湿盒中，37℃ 18-24h。
1
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生理盐水
50 50 50 50 50
抗IgG 100 50 50 50 50 50
源自文库 实验现象
• 在两孔间会看到白色的沉淀线。
结果判断的方法
• 将出现白色沉淀线的相应孔的抗体的最大 稀释度作为该抗体的效价。
该血清中抗IgG的效价为1：4。
实验结果的记录和判断
• 画出实验结果图并判断效价。
注意事项
• 浇板用的玻片要洁净。 • 制备抗体琼脂板时，琼脂温度要控制在60℃左右。
温度太低会导致琼脂凝固。 • 加样孔中的琼脂应挑干净，且不可损坏孔的边缘，
双向免疫扩散
实验原理
• 双向免疫扩散是指可溶性抗原与相应抗体 在琼脂介质中相互扩散,彼此相遇后形成一 定类型的特异性沉淀线。
主要的试剂和器材
• 抗体：抗IgG • 抗原：IgG • 巴比妥缓冲液 • 1.5%琼脂（巴比妥缓冲液配制） • 载玻片、打孔器、微量进样器 • 37℃水浴箱
实验步骤
• 制板 用移液管吸取4.5ml的琼脂，将其放 到水平放置的载玻片上，待冷凝。
• 打孔 打梅花孔，各孔间的距离为0.70.8cm。
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• 倍比稀释抗体 （见表）
• 加样 用微量进样器将各孔加各样品10ul； 中央孔加抗原，周围6孔分别加不同稀释 度的抗体。
• 将玻片放在湿盒中，37℃ 18-24h。
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生理盐水
50 50 50 50 50
抗IgG 100 50 50 50 50 50