《仪器分析》学生实验：NBS-荧光素-CTAC化学发光体系测定尿素的含量
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• 根据测定方法的不同又可分为：
• 1)直接测定 CL分析法；
• 2)偶合反应CL分析法(通过反应的偶合，测定体 系中某一组份)；
• 3)时间分辨CL分析法(即利用多组份对同一化学 发光反应影响的时间差实现多组份测定)；
• 4)酶免疫CL分析法等。
4. 化学发光的测量装置
化学发光分析法的测量仪器主要包括 样品室、光检测器、 放大器和信号输出装置。
间接发光是被测物A或B，通过化学反应生成初始激发态 产物C* ， C* 不直接发光，而是将其能量转移给F，使F 跃迁回基态，产生发光。
A + B C* + D C* + F F* + E F* F + h 式中C*为能量给予体，而F为能量接受体 3.2 气相化学发光、液相和固相化学发光 按反应体系的状态分类，如化学发光反应在气相中进行 称为气相化学发光；在液相或固相中进行称为液相或固 相化学发光；在两个不同相中进行则称为异相化学发光。 （1）气相化学发光 主O3、要N有O、O3、SON2、O、H2SS的、化CO学、发NO光2等反。应，可用于监测空气中的 （2）液相化学发光 用于此类化学发光分析的发光物质有鲁米诺、光泽精等。
•按照进样方式，可将化学发光分析仪分为分离取样式和 流动注射式两类。
BPCL型微弱发光测量仪
IFFM-D型流动注射化学发光分析仪
5.流动注射分析介绍
• 流动注射分析是70年代中期诞生并迅速发展起来的溶 液自动在线处理及测定的现代分析技术。
• 流动注射分析方法主要有： • 流动注射分光光度法、 • 流动注射原子光谱法、 • 流动注射电化学分析法、 • 流动注射酶分析法、 • 流动注射荧光及化学发光法、 • 流动注射免疫分析法、 • 流动注射在线分离浓集、在线消解等操作方法和技术。
3.3 化学发光、生物化学发光和电致化学发光 分析法
根据供能反应的特点，可将化学发光分析法分 为：
1）普通化学发光分析法(供能反应为一般化学 反应；简称CL)；
2）生物化学发光分析法(供能反应为生物化学 反应；简称BCL)；
3）电致化学发光分析法(供能反应为电化学反 应，简称ECL)等。
• 3.4 直接测定、偶合反应、时间分辩和酶免疫化 学发光分析法
于反应焓。 （2）要有有利的化学反应历程，使化学反应的能量至少
能被一种物质所接受并生成激发态。 （3）激发态能释放光子或能够转移它的能量给另一个分
子，而使该分子激发，然后以辐射光子的形式回到基态。 化 定 子学 于 的发生发光成射反激效应 发 率效 态em率 产。物定cl分，义子又为的称：化化学学激发发光效的率总量ce子和产激率发，态决分
cl =发射光子的分子数/参加反应的分子数 = ce•em
3.化学发光反应的类型 3.1 直接化学发光和间接化学发光
直接发光是被测物作为反应物直接参加化学发光 反应，生成电子激发态产物分子，此初始激发态 能辐射光子。
A + B C* + D
C* C + h
式中A或B是被测物，通过反应生成电子激发态产 物C* ，当C* 跃迁回基态时，辐射光子。
化学发光反应在样品室中进行，样品和试剂混合的方式 有不连续取样体系，加样是间歇的。将试剂先加到光电 倍增管前面的反应池内，然后用进样器加入分析物。
另一种方法是连续流动体系，反应试剂和分析物是定时 在样品池中汇合反应，且在载流推动下向前移动，被检 测的光信号只是整个发光动力学曲线的一部分，以峰高 进行定量测量。
• 尿液和血清尿素氮的测定，对急性肾功能衰竭，尤其 是尿毒症的诊断有特殊价值，其增高程度与病情的严 重性成正比，对判断病情和预后的估价有重要作用。
• 建立快速、准确、灵敏的尿素测定方法，在药物分析、 临床治疗、医学诊断等方面有重要的意义。
• 仪器集成了高精度双蠕动泵数控宽调速流动注 射进样系统，多功能超微弱化学发光检测器及 功能强大的化学发光检测与数据采集及化学分 析动力学谱图分析软件。
• 可进行静态注射化学发光分析、流动注射化学 发光等分析。
7.尿素及其分析方法
• 尿素，又称为脲，其作用与山梨醇基本相同，为渗透 性利尿药。
• 临床用于脑水肿、颅内压增高、青光眼，烧伤、创伤 和术后的尿少症，外用可治疗某些皮肤病。
流动注射法具有以下优点
• ①测量在动态条件下进行，反应条件和分析 操作能自动保持一致，结果重现性好;
• ②耗样量少、分析速度快，特别适合于大批 量样品分析；
• ③不仅易于实现连续自动分析，且可方便地 用于比色、离子电极、原子吸收分析。
ຫໍສະໝຸດ Baidu
6.流动注射化学发光分析仪简介
• IFFM-E型流动注射化学发光分析仪是国内最 早推出的全自动化学发光检测分析系统。
一、概述
• 1.化学发光及化学发光分析
• 化学发光（Chemiluminescence）又称为冷光（Cold Light），是在没有任何光、热或电场等激发的情况下， 由化学反应而产生的光辐射。
• 生命系统中的化学发光，称为生物发光 （Bioluminescence），它不依赖于有机体对光的吸收， 而是一种特殊类型的化学发光。
• 化学发光分析（Chemiluminescence Analysis）就是 利用化学反应所产生的发光现象进行分析的方法。
• 是近30多年来发展起来的一种新型、高灵敏度的痕量 分析方法。在痕量分析、环境科学、生命科学及临床 医学、食品安全等领域得到愈来愈广泛的应用。
生物化学发光图
2.化学发光分析的基本原理 化学发光是吸收化学反应过程产生的化学能，使反应产 物分子或者其它物质分子被激发而发射的光辐射。 任何一个化学发光反应都应包括化学激发和发光两个步 骤，必须满足如下条件： （1）化学反应必须提供足够的激发能，激发能主要来源
《仪器分析》学生实验课件
NBS-荧光素-CTAC化学发光体系 测定尿素的含量
• 2010年秋期
目录
• 一、概述 • 二．实验的目的意义和要求 • 三、实验原理 • 1.实验装置示意图 • 2.化学发光原理 • 四、仪器药品 • 1．主要仪器 • 2．主要药品及储备液配制 • 五、实验内容及操作步骤 • 1.实验的主要内容 • 2.实验操作步骤 • 六、数据处理 • 七、思考题
• 1)直接测定 CL分析法；
• 2)偶合反应CL分析法(通过反应的偶合，测定体 系中某一组份)；
• 3)时间分辨CL分析法(即利用多组份对同一化学 发光反应影响的时间差实现多组份测定)；
• 4)酶免疫CL分析法等。
4. 化学发光的测量装置
化学发光分析法的测量仪器主要包括 样品室、光检测器、 放大器和信号输出装置。
间接发光是被测物A或B，通过化学反应生成初始激发态 产物C* ， C* 不直接发光，而是将其能量转移给F，使F 跃迁回基态，产生发光。
A + B C* + D C* + F F* + E F* F + h 式中C*为能量给予体，而F为能量接受体 3.2 气相化学发光、液相和固相化学发光 按反应体系的状态分类，如化学发光反应在气相中进行 称为气相化学发光；在液相或固相中进行称为液相或固 相化学发光；在两个不同相中进行则称为异相化学发光。 （1）气相化学发光 主O3、要N有O、O3、SON2、O、H2SS的、化CO学、发NO光2等反。应，可用于监测空气中的 （2）液相化学发光 用于此类化学发光分析的发光物质有鲁米诺、光泽精等。
•按照进样方式，可将化学发光分析仪分为分离取样式和 流动注射式两类。
BPCL型微弱发光测量仪
IFFM-D型流动注射化学发光分析仪
5.流动注射分析介绍
• 流动注射分析是70年代中期诞生并迅速发展起来的溶 液自动在线处理及测定的现代分析技术。
• 流动注射分析方法主要有： • 流动注射分光光度法、 • 流动注射原子光谱法、 • 流动注射电化学分析法、 • 流动注射酶分析法、 • 流动注射荧光及化学发光法、 • 流动注射免疫分析法、 • 流动注射在线分离浓集、在线消解等操作方法和技术。
3.3 化学发光、生物化学发光和电致化学发光 分析法
根据供能反应的特点，可将化学发光分析法分 为：
1）普通化学发光分析法(供能反应为一般化学 反应；简称CL)；
2）生物化学发光分析法(供能反应为生物化学 反应；简称BCL)；
3）电致化学发光分析法(供能反应为电化学反 应，简称ECL)等。
• 3.4 直接测定、偶合反应、时间分辩和酶免疫化 学发光分析法
于反应焓。 （2）要有有利的化学反应历程，使化学反应的能量至少
能被一种物质所接受并生成激发态。 （3）激发态能释放光子或能够转移它的能量给另一个分
子，而使该分子激发，然后以辐射光子的形式回到基态。 化 定 子学 于 的发生发光成射反激效应 发 率效 态em率 产。物定cl分，义子又为的称：化化学学激发发光效的率总量ce子和产激率发，态决分
cl =发射光子的分子数/参加反应的分子数 = ce•em
3.化学发光反应的类型 3.1 直接化学发光和间接化学发光
直接发光是被测物作为反应物直接参加化学发光 反应，生成电子激发态产物分子，此初始激发态 能辐射光子。
A + B C* + D
C* C + h
式中A或B是被测物，通过反应生成电子激发态产 物C* ，当C* 跃迁回基态时，辐射光子。
化学发光反应在样品室中进行，样品和试剂混合的方式 有不连续取样体系，加样是间歇的。将试剂先加到光电 倍增管前面的反应池内，然后用进样器加入分析物。
另一种方法是连续流动体系，反应试剂和分析物是定时 在样品池中汇合反应，且在载流推动下向前移动，被检 测的光信号只是整个发光动力学曲线的一部分，以峰高 进行定量测量。
• 尿液和血清尿素氮的测定，对急性肾功能衰竭，尤其 是尿毒症的诊断有特殊价值，其增高程度与病情的严 重性成正比，对判断病情和预后的估价有重要作用。
• 建立快速、准确、灵敏的尿素测定方法，在药物分析、 临床治疗、医学诊断等方面有重要的意义。
• 仪器集成了高精度双蠕动泵数控宽调速流动注 射进样系统，多功能超微弱化学发光检测器及 功能强大的化学发光检测与数据采集及化学分 析动力学谱图分析软件。
• 可进行静态注射化学发光分析、流动注射化学 发光等分析。
7.尿素及其分析方法
• 尿素，又称为脲，其作用与山梨醇基本相同，为渗透 性利尿药。
• 临床用于脑水肿、颅内压增高、青光眼，烧伤、创伤 和术后的尿少症，外用可治疗某些皮肤病。
流动注射法具有以下优点
• ①测量在动态条件下进行，反应条件和分析 操作能自动保持一致，结果重现性好;
• ②耗样量少、分析速度快，特别适合于大批 量样品分析；
• ③不仅易于实现连续自动分析，且可方便地 用于比色、离子电极、原子吸收分析。
ຫໍສະໝຸດ Baidu
6.流动注射化学发光分析仪简介
• IFFM-E型流动注射化学发光分析仪是国内最 早推出的全自动化学发光检测分析系统。
一、概述
• 1.化学发光及化学发光分析
• 化学发光（Chemiluminescence）又称为冷光（Cold Light），是在没有任何光、热或电场等激发的情况下， 由化学反应而产生的光辐射。
• 生命系统中的化学发光，称为生物发光 （Bioluminescence），它不依赖于有机体对光的吸收， 而是一种特殊类型的化学发光。
• 化学发光分析（Chemiluminescence Analysis）就是 利用化学反应所产生的发光现象进行分析的方法。
• 是近30多年来发展起来的一种新型、高灵敏度的痕量 分析方法。在痕量分析、环境科学、生命科学及临床 医学、食品安全等领域得到愈来愈广泛的应用。
生物化学发光图
2.化学发光分析的基本原理 化学发光是吸收化学反应过程产生的化学能，使反应产 物分子或者其它物质分子被激发而发射的光辐射。 任何一个化学发光反应都应包括化学激发和发光两个步 骤，必须满足如下条件： （1）化学反应必须提供足够的激发能，激发能主要来源
《仪器分析》学生实验课件
NBS-荧光素-CTAC化学发光体系 测定尿素的含量
• 2010年秋期
目录
• 一、概述 • 二．实验的目的意义和要求 • 三、实验原理 • 1.实验装置示意图 • 2.化学发光原理 • 四、仪器药品 • 1．主要仪器 • 2．主要药品及储备液配制 • 五、实验内容及操作步骤 • 1.实验的主要内容 • 2.实验操作步骤 • 六、数据处理 • 七、思考题