金黄色葡萄球菌肠毒素的检测及结果分析
食源性金黄色葡萄球菌肠毒素及其检测方法
2021年第09期金黄色葡萄球菌是自然界中普遍存在的病原菌,若是含水量及含淀粉量较多的食品被此球菌污染,在适宜温度下只需8~10h 便会产生大量肠毒素,从而引发食物中毒。
其中,金葡菌肠毒素所导致的食物中毒占比高达33%~45%左右。
因此,需重点对此病菌进行检测与预防。
1金葡菌肠毒素(S E )分析金葡菌肠毒素属于胞外蛋白质的一种,不同型之间的分子量较为相似,存在较为集中的谷氨酸、赖氨酸等氨期基酸。
SE 具有水溶性与盐溶性特点,对蛋白酶的抵御能力较强,耐热性极佳,沸水中30m i n 内活性不会丧失。
失活温度为218~248℃,且需30m i n 才可完全消除其毒性。
因其对蛋白酶分解抵抗能力强,因而易侵害胃粘膜。
针对T 细胞而言,SE 的有丝分裂原作用较为显著,可将多克隆T 细胞进行非特异性激活,且不必事先进行致敏,也不具备种属特异性。
SE 会与辅佐细胞M H C-Ⅱ类分子相结合,针对T 细胞受体协同发挥作用。
在有丝分裂原作用下,T细胞的免疫调节作用会被激活,会通过抑制或诱导作用而使T 细胞释放干扰素,或I L-2,并对后者进行表达,从而于体内或体外对体液及细胞免疫产生抑制效果。
SE 的不同种类的血清型均会导致食物中毒,使之食用者出现呕吐、腹泻现象,并出现体温升高或血小板下降现象,且存在心率加快等多种症状。
2常用的金葡菌肠毒素的检测方法分析此种动物敏感实验是对患者的呕吐物或感染病的食物进行采集,或对SA 菌株培养液进行分离,将其注射于试验动物体内观察病态反应,从而对待测物中是否含有金葡萄肠毒素进行判定的方法。
但此方法灵敏度不佳且流程复杂,必须使用猴或豚鼠作为试验动物,推广应用相对困难。
相关专家研制出了利用兔血T-细胞的体外检测方法,无需使用动物进行检测,灵敏度可提升至1pg/m L ,实现了可定量且高灵敏度的检测,且可节约检测成本。
可实现定量检测的方法需在免疫学技术基础上而实现的,免疫方法有多个类别,如电化学免疫法、化学发光免疫法,荧光免疫法等,这些方法均需利用特异性抗体进行抗原的捕获,再将其转化成光学或电信号,从而测定肠毒素含量,此方法的优点是灵敏度较高且检测耗时短,可实现实时检测。
金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒检测分析
１ 材 料 和 方 法
杀 白细胞 毒 素 、 表 皮剥 脱毒 素等 ， 侵袭 性酶 类有 血浆
凝 固酶 、 脂肪酶、 透 明质 酸 酶和溶 纤 维蛋 白酶 。一旦
１ ． １ 流行病 学调 查
某人 在食 用不 洁食 物后 ， 发生
恶心、 呕吐 、 腹痛 、 腹泻、 发热 等症 状 。通 过 流行病 学
早期诊断的临床研究 ［ Ｊ ］ ． 河 北 医药 ， ２ ０ １ ２， ３ ４ （ ２ ） ： ６ ６ １ —６ ６ ２ ．
［ ２ ］ 杨
斌． 慢 性 肾 脏 病 患 者 肾 小 球 滤 过 率 与血 清 Ｃ ｙ ｓ ｔ ａ ｔ ｉ ｎ Ｃ相 关
变 化 不显 著 ， 但 Ｔ ｃ —Ｄ Ｔ Ｐ Ａ清 除率 已下 降 ， 同时血 清 Ｃ ｙ ｓ ｔ ａ ｔ ｉ ｎ Ｃ也 已 开 始 升 高 ， 表 明 肾脏 已 经 受 到 损
害， 提示 Ｃ ｙ ｓ ｔ ａ ｔ ｉ ｎ Ｃ对早 期 发现 肾脏 功能损 害 较 Ｓ ｃ ｒ 、
２ ４ ｈ Ｃ ｃ ｒ 、 Ｃ ｃ ｏ ｃ ｋ ｃ ｒ ｏ ｆ 更 敏感 。
性分析 ［ Ｊ ］ ． 标记免疫分析与临床 ， ２ ０ １ １ ， １ ８ （ ５ ） ： ３ ０ ０—３ ０ ３ ． ［ ３ ］ 黄少文 ， 黄义双 ， 郭景涛 ， 等． 血 清 胱 抑素 Ｃ 和 尿 Ｎ Ｇ ＡＬ在 儿 童 脓 毒 症 早 期 肾损 害 中 的诊 断 价 值 ［ Ｊ ］ ． 中 国 当代 医 药 ， ２ ０ １ ３， ２ Ｏ
［ 中 图分 类 号 ］ Ｒ １ ５ ５ ． ３ ［ 文献标识码］ Ｂ ［ 文章编 号］ １ ０ ０ ８— ９ ２ ７ ６ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ６— ０ ７ ５ ３—０ ２
乳与乳制品病原微生物检验方法金黄色葡萄球菌肠毒素的检验
乳与乳制品病原微生物检验方法金黄色葡萄球菌肠毒素的检验 YLNB4.21. 仪器及器材1.1德国必发葡萄球菌肠毒素试剂盒 （套）1.2酶标仪1.3移液器 Termo Labsystems 50 μL 、100μL 、300μL （多道）1.4低温离心机及离心管：3500转/分1.5灭菌吸管：1ml （具0.01ml 刻度）、10ml （具0.1ml 刻度）1.6 NaH2PO4。
H2O 、 Na2HPO4。
2H2O 、NaCI 、 n--庚烷2. 检验程序：室温 ，1 h样品前处理加入100 µL 样品(A---G 孔)在H 孔中，加100 µL反复洗板（至少３次）将足够标准和样品所用数量的孔条插入微孔架加100 µL酶共轭化合物室温， 1 h反复洗板（至少３次）加５0 µL的培养基和５0 µL色液体室温， 0.5 h加100 µL终止液60min内测量吸光度值分析结果出报告3. 方法3.1样品前处理3.1.1 牛奶：取10ml样品于离心管内进行低温离心（10min/3500转/10℃）后去除上层油脂层，取上清液1ml，按1：20的比例用蒸馏水稀释后无菌过滤。
3.1.2 面、米、肉、奶油及其他脂肪含量低于40%的食品：取10g样品切碎（最好进行均质），添加15mL缓冲液，调节PH值至7.4，摇匀15min后进行离心（10min/3500转/15℃），如必要去除上层油脂层，过滤。
3.1.3 脂肪含量超过40%的食品：取10g样品切碎（最好进行均质），添加15mL缓冲液，调节PH值至7.4，摇匀15min 后进行离心（10min/3500转/15℃），取5mL上层液转移到另一个离心管内，加5mL的n—庚烷，充分混匀后再离心（5min/3500转/15℃），去除上层庚烷层，过滤。
3.2测试操作3.2.1 把所有试剂在使用之前均放至室温（20—25℃）。
金黄色葡萄球菌检测实验报告
金黄色葡萄球菌检测实验报告一、实验目的金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌，能够引起多种感染性疾病。
本次实验的目的是通过一系列的检测方法，准确检测出样本中是否存在金黄色葡萄球菌，并确定其数量和特性，为食品安全、临床诊断和环境卫生等领域提供可靠的检测依据。
二、实验原理金黄色葡萄球菌具有一些独特的生物学特性和生化反应，可通过以下几种方法进行检测：1、血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌能够产生血浆凝固酶，使血浆发生凝固。
2、甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇产酸。
3、革兰氏染色：金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄串状排列。
三、实验材料1、样本：食品样本（如乳制品、肉类）、临床样本（如脓液、血液）等。
2、培养基和试剂：血琼脂平板甘露醇氯化钠琼脂培养基兔血浆革兰氏染色液生理盐水3、仪器设备：恒温培养箱显微镜无菌接种环、移液管等四、实验步骤1、样本处理食品样本：称取一定量的样品，加入适量生理盐水进行均质处理，制成稀释液。
临床样本：直接进行涂片或适当稀释。
2、增菌培养将处理后的样本接种于 75%氯化钠肉汤中，置于 36±1℃恒温培养箱中培养 18 24 小时。
3、分离培养从增菌培养物中分别划线接种于血琼脂平板和甘露醇氯化钠琼脂培养基上，于 36±1℃培养 18 24 小时。
4、形态观察观察血琼脂平板上的菌落形态，金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，周围有明显的透明溶血圈。
观察甘露醇氯化钠琼脂培养基上的菌落，金黄色葡萄球菌能使培养基变黄。
5、革兰氏染色挑取可疑菌落进行革兰氏染色，在显微镜下观察，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄串状排列。
6、血浆凝固酶试验取兔血浆与可疑菌落混合，置于 36±1℃培养箱中观察，若血浆发生凝固，则为阳性。
7、甘露醇发酵试验接种可疑菌落于甘露醇氯化钠琼脂培养基中，观察是否产酸。
五、实验结果1、形态观察在血琼脂平板上观察到金黄色、周围有透明溶血圈的菌落。
在甘露醇氯化钠琼脂培养基上观察到变黄的菌落。
实验十二金黄色葡萄球菌
致病性金葡菌可产生血浆凝固酶。
精品课件
5
金葡菌镜下特征
精品课件
6
操作流程
检样25g(mL) +稀释液225mL，均质
7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤）
36℃±1 ℃， 18h~24h
Baird-Parker平板，血平板
36℃±1 ℃
B-P平板18h~24h或45h~48h 血平板 18h~24h
涂片染色
观察溶血
BHI肉汤和营养琼脂斜面 血浆凝固酶试验
结果报告
精品课件
7
菌落特征
Baird-Parker平板：呈灰色到黑色，边缘为淡色， 周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。直径 2mm~3mm。
长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典 型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干 燥。
精品课件
23
取新鲜配置兔血浆 0.5 mL，放入小试管中， 再加入 BHI培养物 0.2 mL～0.3 mL，振荡摇 匀，置 36 ±1 ℃温箱或水浴箱内，每半小时 观察一次，观察 6 h，如呈现凝固（即将试管 倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积大于原 体积的一半，被判定为阳性结果。同时以血浆 凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培 养物作为对照。也可用商品化的试剂，按说明 书操作，进行血浆凝固酶试验。
精品课件
3
生化特性
典型的金葡菌呈球形，大小0.5×1.0μm。致病 性菌较非致病性菌小。在液体培养基中生长， 常呈双球菌或短链状排列。
本菌无鞭毛及芽孢，一般不形成荚膜。革兰 氏染色阳性。
金葡菌耐盐性强，最适宜生长的盐浓度为 5%～7.5%,可利用此特性对金葡菌增菌，抑制 杂菌。
金黄色葡萄球菌定量检测能力验证结果与分析
doi:10.16736/41-1434/ts.2020.03.065
金黄色葡萄球菌定量检测能力验证结果与分析
Proficiency Testing Results and Analysis of Quantitative Detection of Staphylococcus aureus
冰箱保存，试验前从冰箱中取出，使其达到室温后开 启。后按此次能力验证作业指导书对样品进行处理。 依据 GB 4789.10-2010《食品安全国家标准食品微生 物学检验 金黄色葡球菌检验》第二法进行检验。由 于 GB 4789.10-2010 第二法要求每个稀释度分别吸取 1 mL 样品匀液以 0.3、0.3、0.4 mL 接种量分别加入 3 块 Baird-Parker 平板上，这样对于未知样品不确定其 菌含量时，容易出现可疑菌落在 BP 板上生长的太密集， 不方便观察及计数的缺点。因此按照国家标准方法操 作的同时，本实验以 0.3、0.3、0.3、0.1 mL 的接种量分 别加入 4 块 Baird-Parker 平板上涂布，再以 0.2、0.2、0.2、 0.2 mL 和 0.2 mL 的接种量分别加入 5 块 Baird-Parker 平 板上涂布。其它步骤与 GB 4789.10-2010 第二法相同。 实验得出数据与国家标准法得出数据进行对比。
Agricultural Byproducts, Urumqi 830011, China)
摘 要：采用 BP 平板计数法、显色培养法分别对金黄色葡萄球菌能力验证的两个样品进行定量检测。定量 比对结果显示，BP 平板上的金黄色葡萄球菌数明显大于显色平板上的金黄色葡萄球菌数，其原因可能是显色培 养基的检出率小于传统培养基的检出率，显色培养基存在假阴性。同时对涂布时不同的接种量进行比较，实验 发现涂布的次数越多且每次接种量越小，所得的实验结果越大。结果表明，采用国家标准法中的接种量，实验 所得数据的 Z 值更接近中位值。
实验三 食品中金黄色葡萄球菌的检验
计
MPN
三法特点及适用性：
第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌的定 性检验
第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的 食品中金黄色葡萄球菌的计数 第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而
杂菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌2、分组：每3人一组 3、评分标准：见附表1
大肠杆菌在普通营养琼脂上的菌落特征： 中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边缘 整齐
金黄色葡萄球菌在普通营养琼脂平板上的菌落
3、具有高耐盐性，在7.5%氯化钠肉汤中呈现浑浊生 长；
4、在BP平板上菌落特征：圆形、光滑凸起，湿润， 直径为2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色， 周围有一浑浊带，外层有一透明圈；
金黄色葡萄球菌性质及培养特征
1、革兰氏阳性球菌，排列为葡萄状，无芽 孢、无荚膜。
金黄色葡萄球菌的 扫描电镜照片
2、在普通营养琼脂平板上的菌落特征：
经18～24小时培养后形成圆形隆起、边 缘整齐、表面光滑、湿润、不透明的菌落，直径 为1～2mm，不同菌株可产生不同色素，出现 金黄色、白色、柠檬色。
2.2转种血平板
在三个平板上寻找周围有浑浊带的黑 色菌落，并从中任选五个菌落，分别接种 血平板， 于36℃±1℃培养24h后进行染 色镜检、血浆凝固酶试验，步骤同增菌培 养方法。
2.3 菌落计数
将三个平板中疑似金黄色葡萄球菌黑 色菌落数相加，乘以血浆凝固酶阳性数， 除以5，再乘以稀释倍数，即可求出每克 样品中金黄色葡萄球菌数。
2、直接计数方法
2.1 梯度稀释转种BP平板
吸取上述1：10混悬液，进行10倍第次稀释， 根据样品污染情况，选择不同浓度的稀释液1mL， 分别加入三块BP平板，每个平板接种量分别为 0.3mL、0.3mL、0.4mL，然后用灭菌涂布器涂布 整个平板，如水分多不易吸收，可将平板放在 36℃±1℃1h，等水分蒸发后反转平皿置 36℃±1℃培养。
金黄色葡萄球菌的测定
金黄色葡萄球菌的测定1 卫生学意义金黄色葡萄球菌定性检验（增菌培养法）：适用于检查含有受损伤的金黄色葡萄球菌的加工食品。
2 检验方法2.1 术语与定义金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为一种革兰氏染色阳性球形细菌。
显微镜下排列成葡萄串状，金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜。
是常见的引起食物中毒的致病菌。
常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。
2.2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：（1）恒温培养箱：36℃±1℃。
（2）冰箱：2℃～5℃。
（3）恒温水浴箱：37℃～65℃。
（4）天平：感量0.1g。
（5）无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。
（6）无菌锥形瓶：容量100mL、500mL。
（7）无菌培养皿：直径90mm。
（8）pH计或pH比色管或精密pH试纸。
2.3 培养基和试剂（1）7.5%氯化钠肉汤1）成分：蛋白胨：10.0g；牛肉膏：5.0g；氯化钠：75g；蒸馏水：1000mL；pH：7.4；2）制法：将上述成分加热溶解，调节pH，分装，每瓶225mL，121℃高压灭菌15min。
（2）B－P琼脂平板1）成分：胰蛋白胨：10.0g；牛肉膏：5.0 g；酵母膏：1.0g；丙酮酸钠：10.0g；甘氨酸：12.0g；氯化锂（LiCl·6H2O）：5.0g；琼脂：20.0g；蒸馏水：950mL；pH：7.0±0.22）增菌剂的配法：30%卵黄盐水50mL与经过除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL 混合，保存于冰箱内。
3）制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，调节pH。
分装每瓶95mL，121℃高压灭菌15min。
临用时加热溶化琼脂，冷至50℃，每95mL加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL摇匀后倾注平板。
培养基应是致密不透明的。
使用前在冰箱储存不得超过48h。
临床医学论文-金黄色葡萄球菌肠毒素的研究进展
临床医学论文-金黄色葡萄球菌肠毒素的研究进展【关键词】葡萄球菌葡萄球菌是革兰阳性球菌中的一种，广泛分布于自然界，如：空气、水、土壤等，同时存在于人体、动物体的皮肤及其与外界相通的腔道中。
绝大部分不致病，少数可引起人类感染，其中的金黄色葡萄球菌致病力最强，主要是因为其产生大量的侵袭性物质，如：各种酶类，多种毒素和菌体的一些成分等等。
金黄色葡萄球菌产生的主要酶类有：凝固酶、耐热核酸酶、葡激酶等；产生的主要毒素有：肠毒素、葡萄球菌溶素、杀白细胞素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素—1等。
目前国内外对金黄色葡萄球菌肠毒素的研究主要集中在检测方法和作为超抗原的致病性两个方面。
1 金黄色葡萄球菌肠毒素的临床意义1.1 食物中毒无论是过去还是现在，金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由其引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多为45%，我国发生此类事件也非常多，是卫生防疫部门重点检测项目。
一般情况下是进食了被金黄色葡萄球菌污染的食物，属于毒素型食物中毒，产生的肠毒素（一般认为约1μg/kg）刺激呕吐中枢而导致以呕吐为主要症状的食物中毒。
所以有关部门建议：储存食物，尤其是含蛋白质多水分多淀粉多的熟食，应在4℃，以防止微生物大量繁殖，继而产生大量的毒素，其中金黄色葡萄球菌肠毒素是主要毒素之一[7]。
1.2 肠道外感染近年来的研究表明金黄色葡萄球菌的肠毒素不仅引起食物中毒，在由金黄色葡萄球菌引起的化脓性感染中也起重要的作用。
姚咏明[9]等通过对烫伤脓毒血症大鼠急性肺损伤的研究，发现金黄色葡萄球菌肠毒素B型的单克隆抗体能够对烧伤合并葡萄球菌感染的肺损伤起到很明显的保护作用，同时金黄色葡萄球菌产生的肠毒素SEB能刺激淋巴细胞大量活化，促炎细胞因子产生显著增加，致使炎症细胞浸润，组织坏死，尤其是肺组织中的中性粒细胞聚集更加明显。
而肾脏有储蓄和排泄肠毒素的功能，所以毒素对肾脏的损伤也较明显，以至产生对全身其他各器官组织的损伤作用，最后可以发展到多个器官功能障碍，危及人类生命。
金黄色葡萄球菌生物危害评估报告
金黄色葡萄球菌生物危害评估报告一、金黄色葡萄球菌的传播与致病金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，在空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因而，食品受其污染的机会很多。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。
此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道；上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。
一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。
而肠毒素形成条件包括：存放温度，在37℃内，温度越高，产毒时间越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。
葡萄球菌性菌血症可发生于任何与血管内导管或其他异物有关的局限性葡萄球菌脓肿或感染,它是严重烧伤病人死亡的常见原因。
持续性发热常见,而且可伴有休克。
葡萄球菌性心内膜炎特别好发于静脉注射给药者和装有人工心脏瓣膜的病人。
突然出现心脏杂音,脓毒性栓子和其他经典体征便可作出可疑诊断,确诊需依据超声心动图和血培养。
葡萄球菌性骨髓炎主要见于儿童,可引起寒战,发热和受累骨疼痛,继之出现红肿。
关节周围感染常引起关节积液,提示为化脓性关节炎而不是骨髓炎。
白细胞计数常＞15000/μl并且血培养常阳性。
金黄色葡萄球菌
1.血浆凝固酶试验：原理:金黄色葡萄球菌能产生结合型血浆凝固酶，可使血浆中可溶性的纤维蛋白原变为不溶性的纤维蛋白，附着于细菌表面，在玻片上形成凝集颗粒；游离型的血浆凝固酶则可使试管中血浆发生凝固。
大多数致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，而非致病株一般不产生。
因此，血浆凝固酶试验是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标之一。
葡萄球菌产生的血浆凝固酶有两种，一种是结合凝固酶（用玻片法测试），另一种是游离凝固酶（用试管法检测）。
方法：（1）玻片法：在1张洁净玻片中央加1滴9g／L氯化钠(生理盐水)溶液，用接种环取待检培养物与其混合（设阳性和阴性对照）制成菌悬液，若经10～20s内无自凝现象发生，则加入兔新鲜血浆1环，与菌悬液混合，观察结果。
（如出现颗粒状凝集现象即为阳性。
如不立即发生凝集，可稍待一，二分钟，并轻轻摇动玻片，加速反应，若无凝集时则为阴性。
）（2）试管法：用生理盐水将新鲜兔血浆4倍稀释，取0．5ml于试管再加0.5ml 待测菌浓菌悬液（需做阳性对照及阴性对照。
），混匀后置37℃水浴中，每30min 观察1次结果。
若3小时内试验管和阳性对照管出现凝固，阴性对照管（即浓菌液管）不凝固，为阳性；若阴性，继续观察到24小时，不凝固者为阴性。
（观察结果，将试管微微倾斜，血浆成冻胶样凝块者为阳性，血浆仍为液状者为阴性。
）【结果判断】（1）玻片法：5～10s内出现凝集者为阳性。
（2）试管法：如有凝块或整管凝集出现为阳性。
4h后无上述现象出现，则放置过夜后再观察。
【注意事项】（1）最好使用EDTA抗凝的兔血浆，因为如果使用枸缘酸盐抗凝血浆会产生假阳性结果（2）玻片法：10秒内观察结果，如超过10 秒可出现假阳性，因此必须用试管法验证凝聚因子试验。
2. 耐热核酸酶试验原理：致病性葡萄球菌能产生一种耐热核酸酶，它能分解DNA，使含甲苯胺蓝核酸琼脂显示粉红色玻片法：取融化好的甲苯胺蓝DNA琼脂3ml均匀浇在载玻片上，待琼脂凝固后打上6-8个孔径为2-5mm的小孔，各孔分别加一滴经沸水浴3分钟处理过的待检葡萄球菌和阳性阴性对照葡萄球菌培养物，35℃大气环境孵育3小时，观察有无粉红色圈及其大小。
金色葡萄球菌实验报告
金色葡萄球菌实验报告1. 引言金色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种常见的细菌，广泛存在于自然界和人体内。
它是一种革兰氏阳性细菌，通常以球状或卵圆形的形态出现。
金色葡萄球菌可以引起多种疾病，包括皮肤感染、血液感染和肺炎等。
本实验旨在研究金色葡萄球菌的生长特性和抗菌药物敏感性。
2. 材料和方法2.1 材料•金色葡萄球菌培养基•无菌琼脂平板•无菌培养皿•无菌试管•灭菌吸管•无菌移液器•紫外灯2.2 方法1.准备工作：将培养皿、试管、琼脂平板等器材进行灭菌处理，保证实验环境的无菌。
2.采集样品：使用无菌吸管，从待测样品中采集适量的金色葡萄球菌。
3.培养金色葡萄球菌：将采集的样品转移到金色葡萄球菌培养基中，轻轻摇匀，然后在无菌琼脂平板上均匀涂抹样品。
4.孵育：将涂有样品的琼脂平板置于恒温培养箱中，在37摄氏度下孵育24小时。
5.观察生长情况：观察琼脂平板上是否有金色葡萄球菌的生长，记录菌落的形态、颜色和大小等特征。
6.统计菌落数量：使用计数板或显微镜统计菌落数量，以评估金色葡萄球菌的生长情况。
7.抗菌药物敏感性测试：使用纸片扩散法或碟片扩散法，将不同种类的抗菌药物施加到含有金色葡萄球菌的琼脂平板上，观察是否形成抑制圈，评估菌株的敏感性。
3. 结果与讨论根据实验结果，我们观察到金色葡萄球菌在培养基上形成了典型的黄色菌落。
菌落呈圆形，直径约为2-4毫米，表面平整光滑。
这与金色葡萄球菌的形态特征相符合。
在抗菌药物敏感性测试中，我们使用了几种常见的抗菌药物。
结果显示，金色葡萄球菌对某些抗菌药物表现出抗性，即在药物施加区域没有形成抑制圈，而对其他抗菌药物则表现出敏感性，形成了明显的抑制圈。
这表明金色葡萄球菌对不同抗菌药物的敏感性存在差异。
4. 结论通过本实验，我们成功培养了金色葡萄球菌，并观察到了其典型的生长特征。
同时，通过抗菌药物敏感性测试，我们发现金色葡萄球菌对不同抗菌药物表现出不同的敏感性。
金黄色葡萄球菌肠毒素的快速检测
金黄色葡萄球菌肠毒素的快速检测魏晓敏【摘要】Staph ylococcus aureus toxins strain often causes poisoning and mainly occurs in the high temperatures of the season, foods easily contaminated are meat, jelly, leftovers, rice wine, eggs and egg products. Immunological methods are often used to detect staphylococcal enterotoxin, which is sensitive, specific, simple and fast. Wherein the reverse latex agglutination method, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method and colloidal gold method are more practical, which are commonly used in rapid detection of staphylococcus aureus enterotoxin.%金黄色葡萄球菌中的毒素型菌株常会引起人中毒，且多发于气温较高的季节，易被污染的食物有肉馅、凉粉、剩饭、米酒、蛋及蛋制品等。
常采用免疫学方法检测葡萄球菌肠毒素，该方法不仅敏感、特异，而且简便快速。
其中反向乳胶凝集、酶联免疫吸附（ELISA）和胶体金法3种方法较为实用，常用于金黄色葡萄球菌肠毒素的快速检测。
【期刊名称】《黑龙江科学》【年(卷),期】2016(007)019【总页数】2页(P36-37)【关键词】金黄色葡萄球菌;肠毒素;快速检测【作者】魏晓敏【作者单位】黑龙江省勃利县质量技术监督局，黑龙江勃利 154500【正文语种】中文【中图分类】R155.3+金黄色葡萄球菌中的毒素型菌株常会引起人中毒，由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒，多发于气温较高的季节，易被污染的食物有：加少量淀粉的肉馅、凉粉、剩饭、米酒、蛋及蛋制品、乳及乳制冷饮（如棒冰等）、含乳糕点等。
从一份速冻食品中同时检出单增李氏菌和金黄色葡萄球菌结果分析
从一份速冻食品中同时检出单增李氏菌和金黄色葡萄球菌结果分析目的为了解南京市速冻食品中食源性致病菌的污染情况，初步确定被污染的高危食品，从而更好地开展食品安全预警预防控制食源性疾病发生。
方法参照国家标准方法，采用进口生物梅里埃生化培养基和试剂条，对样本进行食源性致病菌的分离、生化鉴定。
结果20份速冻食品中5份受到污染,分别检出单核细胞增生李斯特菌4株和金黄色葡萄球菌3株，其中1份市售速冻水饺中同时检出单增李氏菌和金黄色葡萄球菌。
结论检测结果表明,该类速冻荤馅食品已受到致病菌严重污染，需加强监测，严防食品安全事件发生。
标签：食源性致病菌; 李斯特菌; 金黄色葡萄球菌; 食品安全Analysis and investigation on food-borne pathogens in frozen-rice-food WANG Wei，JIANG Xiao.Center for Disease Control and Prevention，Nanjing 210003，China【Abstract】Objective In order to investigate food-borne pathogens in deepfreeze foods in Nanjing.Confirming highly dangerous foods primly so as to prevent and control food borne disease happen.Methods According to international standard method and API biochemical medium to isolate and identify three kinds of pathogens in samples.Results We detected 20 deepfreeze samples,four Listeria-moncytogens and three staphylococcs aureus were detected in which Listeria monocytogenes and staphylococcus were detected simultaneously from one marked dumpling.Conclusion The results showed this kinds of foods had been polluted because of two pathogens detected .【Key words】Food-borne pathogens; Listeria-moncytogens; Staphylococcs aureus; food-Safety单核细胞增生李斯特菌和金黄色葡萄球菌均为致病菌，它们可以通过食物、水源污染和接触传播使人类感染致病或发生食物中毒，各国食品安全卫生指标对这些致病菌均规定禁止检出。
金黄色葡萄球菌及其肠毒素
一、金黄色葡萄球菌及其肠毒素葡萄球菌属（Staphylococcus）至少包括有20个种。
其中金黄色葡萄球菌是一种引起人类和动物化脓感染的重要致病菌，也是造成人类食物中毒的常见致病菌之一，可引起许多严重感染。
本菌广泛分布于自然界，如空气、土壤、水及其它环境中。
在人类和动物的皮肤及外界相通的腔道中也存在次菌。
1.病原学特征革兰氏阳性球菌，直径为0.8-1.0μm，成对或成短链状排列，或呈葡萄状聚集，无芽孢，无鞭毛（见图6-6）。
图6-6 金黄色葡萄球菌显微形态结构不能运动，一般不形成荚膜，但在少数菌株的外层可见有荚膜样的粘液物质。
需氧或兼性厌氧菌，营养要求不高，于普通培养基上生长良好，37℃孵育24~48h形成直径1~2mm 圆形、隆起、表面光滑、湿润、有光泽、不透明、边缘整齐的菌落。
在室温下长时间培养产生脂溶性色素，使菌落呈金黄色。
于血液琼脂平板上培养，金黄色葡萄菌菌落周围可形成完全透明溶血环（β溶血）。
在液体培养基中呈混浊生长。
生长温度在6.5-46℃之间，最适温度为30-37℃，能在冰冻环境下生存，能在质量分数为15%NaCl和40%胆汁中生长。
在水分活度为0.87的条件下仍能存活。
分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气。
分解甘露醇产酸在鉴定致病性方面有一定意义。
在不形成芽胞的细菌中金黄色葡萄球菌抵抗力最强。
于干燥的脓汁或痰液中可存活2～3个月；加热60℃1h或80℃30min才能将其杀死。
在2%石炭酸中15min或在0.1%升汞中10-15min死亡。
耐盐，在含有10%~15%NaCl的培养基中仍能繁殖。
对某些染料较敏感。
如1︰10-20万倍稀释的龙胆紫溶液能抑制其生长。
对青霉素、金霉素、红霉素和庆大霉素高度敏感，对链霉素中度敏感，对万古霉素也敏感；但对磺胺、氯霉素敏感性差。
近年来由于抗生素的选择作用，耐药菌株逐年增多，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为医院内感染最常见的致病菌。
由金黄色葡萄球菌引起食物中毒的实验室检测分析
由金黄色葡萄球菌引起食物中毒的实验室检测分析摘要】目的调查本次食物中毒的原因，为临床诊断和现场处理提供可靠的依据。
方法依据GB/T4789-2010、GB17012-1997、WS/T8、T13、T80、T81、T82-1996 等方法对样品进行致病菌检测。
结果 3份腹痛、腹泻病人的肛拭子标本中均检出金黄色葡萄球菌，3份可疑食品中有一份检出金黄色葡萄球菌。
结论这是一起由金黄色葡萄球菌感染引起的食物中毒。
【关键词】食物中毒实验室检测金黄色葡萄球菌1 调查资料梧州市某大酒店200多名员工于2012年6月11日11时左右，在单位食堂集体进午餐，其中9名员工进食了同事从广州带回的卤鸭食品（封口塑料袋包装），中午13时30分左右，该9名员工中有5名出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状，其中3名症状较重的患者到当地医院就珍；其他未食卤鸭食品的员工未出现上述症状。
2 实验室检测2.1 标本来源2.1.1 采集3名到医院就诊的患者肛拭子标本，置C-B运送培养基中保存。
2.1.2 在酒店现场采集患者吃剩的周黑鸭脖、绝味鸭脖、绝味鸭翅共3份可疑食品。
2.1.3 上述标本采集完毕后均在4h内送达实验室进行检测。
2.2 培养基与试剂各种常见食物中毒致病菌的增菌培养基、分离及鉴定培养基、各种生化鉴定管均由北京陆桥生物技术有限公司生产，各种显色培养基由上海科玛嘉公司生产，沙门氏菌、志贺氏菌和致泻性大肠埃希氏菌诊断血清由宁波天润生物药业有限公司生产，兔血浆由青岛海博生物公司生产，以上培养基与试剂均在有效期内使用。
2.3 检测方法参照GB/T4789-2010《食品卫生微生物学检验》、GB17012-1997感染性腹泻的诊断标准和处理原则、WS/T8-1996病原性大肠埃希氏菌食物中毒诊断标准及处理原则、WS/T13、T80、T82-1996 沙门氏菌、葡萄球菌、副溶血性弧菌、蜡样芽胞杆菌等致病菌食物中毒诊断及处理原则。
2.4 病原菌分离2.4.1病人肛拭子把病人肛拭子直接划到选择性平板分离培养后，用生理盐水把肛拭子冲洗稀释，分别接种到各种致病菌增菌培养基中作增菌培养，6-24h后划选择性平板作分离培养。
PCR法检测原料乳中金黄色葡萄球菌肠毒素A基因型
ｒ ｓ ｅ ｔ ｅｙ ａ ｄ ｔ ｅ ｒ ｓ ｌ ｅ ｅ ｎ ｇ ｔ ｅ Ａ ｈ ａ ｉ ｅ ｐ ｃｉ ｌ， ｎ ｈ ｅ ｕ ｔ ｗ ｒ ｅ ａｉ ． ｔｔ ｅ ｓ ｍｅ ｔ ｖ ｓ ｖ ｍｅ， ｅ ｔｔ ｅ ａ ｑ ｉ ｔ ｎ ｓ ｍｐｅ ， ｔ ｈ ｌｃ ｃ ａ ｔ ｔｓ ｈ ｃ ｕｓ ｉ ａ ｌ ｓ Ｓ ａ ｙｏ ｏ ｃ ｌ ｏ ｉｏ ｐ
１ ．２ Ｃ ．３ Ｐ Ｒ反应体系 ２．
在 Ｅ ｐｎ ｏｆ 中添加 下 列 扩 增 反应 液 ：ｒｍ ｘ ｐ ｅｄｒ 管 Ｐｅ ｉ
ｌ Ｌ 引物 Ｉ 引物 ２各 ０ Ｌ 模板 １ ， ０ｔ ， ｘ 和 ．ｔ ， ４ｘ 加无 菌
１１ 仪器 ．４ ．
Ｌ５２ Ｔ ０ Ｅ电子天平 ：常熟市 天量仪 器有 限责任 公 司 ；Ｄ Ｘ ５ Ｋ Ｓ Ｌ Ｚ 一 ０ Ｂ 灭菌锅 ： 上海 申安 医疗 器械厂 ； Ｐ 一 ＨＸ ９ ８ ＭＢ ０ ２ Ｅ数显 电热培养箱 ： 上海博讯实业 有限公 司医 疗 器械厂 ； Ｃ 一 ０ Ｔ 海 尔电冰箱 ：青 岛海尔股 份有 Ｂ Ｄ ２６ Ｓ 限公 司 ； Ｋ ９ 一Ｉ Ｄ 一 ８ Ｉ 电热恒温 水浴锅 ：天津市泰斯 特仪 器有 限公 司 ； Ｚ — Ｏ 恒温振荡 培养箱 ： Ｈ Ｑ ＸＩ０ 太仓市 实验 设备 厂 ； ８Ｄ ３ Ｎ Ｐ Ｇ （Ｏ） Ｇ ０ ２ Ｃ Ｉ — ５ Ｓ 格兰仕 微波炉 ： 山市 佛 顺 德 区格 兰仕微 波 炉 电器 有 限公 司 ； ｅ Ｄ ｃ Ｍ Ｘ ＋ Ｇ ｌ ｏＴ Ｒ
提供 。
１１ 试 剂 ．３ ．
取适量原料乳 １ ， 分别 加入 ２ ０ ｍＬ ０ Ｌ无水 乙醇 、 ２ ０Ｉ ０ Ｌ石油 醚（ 乙醚 ）２ ０Ｉ ｘ 或 、０ Ｌ丙酮 ， Ｌ 充分混匀。 将混
合物以 １ ０ ０／ ｉ 离心 １ ｍ ｎ弃上清液 。再将沉淀用 ２０ ｒ ｎ ｍ ０ ｉ， ３ ０ Ｅ ｐ ．） ０ Ｌ （Ｈ８ 溶解 ， １０ 溶菌酶 （ｏｍ ／ Ｌ Ｔ ０ 加 ８ ｓ ｇ ） ｍ 破 壁处理 ， 提取 方法参 照试剂 盒说 明进行操作 。
金黄色葡萄球菌肠毒素分型及药敏分析
实验研究金黄色葡萄球菌肠毒素分型及药敏分析伊怀文济宁市第一人民医院医学检验科（山东，济宁，272100)摘要目的分析住院患者生物标本中检出金黄色葡萄球菌肠毒素分型特点及其耐药性。
方法使用酶联免疫吸附法对我院2018年1月-2019年6月住院患者送检痰液、血液、尿液、分泌物、胸腹水、引流液、肺泡灌洗液等标本中分离出的226株金黄色葡萄球菌进行肠毒素S E A~S E E分型；仪器法进行药敏试验，纸片扩散法（K-B法）验证。
结果226株金黄色葡萄球菌中，其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（M R S A)92株（40.71%)，甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（M S S A)134株(59.29%);其中184株细菌检出肠毒素，阳性率为81.42%，其中M R S A85株（92.39%)检出肠毒素，M S S A99株(73.88%)检出肠毒素。
金黄色葡萄球菌对青霉素、四环素、环丙沙星、左氧氟沙星、克林霉素、红霉素等抗菌药物整体耐药率超过了 50%;对万古霉素、利奈唑胺、替加环素的敏感率为100%。
结论金黄色葡萄球菌特别是M R S A肠毒素检出率高，对多种抗菌药物呈现高耐药性，临床重点科室应加强措施，防止院内感染。
关键词金黄色葡萄球菌肠毒素耐药性院内感染中图分类号R978.1 文献标识码 B doi 10.3969/j.issn.l008-5777.2020.01.005Enterotoxin Typing and Drug Sensitivity Analysis of Staphylococcus AureusYi HuaiwenDepartment of Medical Laboratory,The First People's Hospital of Jining (Jining,Shandong,272100)Abstract Objective To analyze the enterotoxin typing characteristics and drug resistance of Staphylococcus aureus which i s detected from biological specimen o f hospitalized patients.Methods Enzyme-linked immunosorbent assay (E LISA) was used t o detect enterotoxin S E A-S E E typing of Staphylococcus aureus from 226 cases of sputum,blood,urine,secretions,pleural and ascites,drainage fluid,alveolar lavage fluid,etc.i n hospitalized pat ients from January 2018 t o June 2019 i n our hospital ；Instrumental method for drug susceptibility test,paper diffusion method (KB method) verification.Results Among 226 strains of Staphylococcus aureus,92 strains of m e-thicillin-resistant Staphylococcus aureus(M R S A)(40.71%) and 134 strains of methicillin-sensitive Staphylococcus aureus(M S S A)(59.29%) ；184 strains of bacteria were detected. The positive rate of enterotoxin was 81.42%. Among them,85 strain(92.39%) of M R S A detected enterotoxin,99 strain(73.88%) of M S S A detected enterotoxin. The overall resistance rate of Staphylococcus aureus t o Penicillin,Tetracycline,Ciprofloxacin,Levofloxacin , Clindamycin,Erythromycin and other antibacterial drugs exceeded 50% ；for Vancomycin ,Linezolid ,Tigecycline The sensitivity rate i s 100%. Conclusion Staphylococcus aureus especially M R S A has a high detection rate of enterotoxin and i s highly resistant t o various antibacterial drugs. The key clinical departments should strengthen measures to prevent nosocomial infections.Key words Staphylococcus aureus Enterotoxin Drug resistance Nosocomial infection金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S A U)是临床上常见的一类病原菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素的检测及结果分析
金黄色葡萄球菌肠毒素的检测及结果分析李红玉;龙军;徐霞【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2006(024)004【摘要】目的了解引起临床感染的金黄色葡萄球菌(SA)携带肠毒素(SE)的情况.方法对从临床标本中分离出的260株SA,用反向间接血凝试验检测其肠毒素,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测按2005年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的检测头孢西丁方法进行.结果 260株SA中有172株携带肠毒素,占66.2%,主要为SEA型10.8%(28/260)、SEB型14.6%(38/260)、SEC型10.0%(26/260),同时携带二种或二种以上肠毒素的占23.8%(62/260);其中MRSA134株,全部携带肠毒素,且以SEA、SEB、SEC为主,分别为19.4%、16.4%、13.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)126株,携带肠毒素率为30.0%(38/126),以SEB为主,占9.5%.结论临床上SA分离株大部分都携带肠毒素,且以SEA、SEB、SEC为主,MRSA的带毒率高于MSSA.【总页数】3页(P291-292,353)【作者】李红玉;龙军;徐霞【作者单位】510120,广州,中山大学附属二院检验科;510120,广州,中山大学附属二院检验科;510120,广州医学院检验系【正文语种】中文【中图分类】R446.5;Q935;R378.1+1【相关文献】1.AlphaLISA检测金黄色葡萄球菌肠毒素E方法的建立 [J], 张力文;赵俊清;郑玉玲;律清宇;姜永强2.利用特异性抗体建立金黄色葡萄球菌肠毒素B快速检测方法 [J], 周刘忠;胡乃静;张丁木;王志宏;吴佳果;罗龙龙;石艳春3.食源性金黄色葡萄球菌肠毒素及其检测方法 [J], 左佳4.食物中毒样本及日常食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的分型检测研究 [J], 张晓英5.食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因及其表达检测 [J], 张婧;张易;施春雷因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
盒购自法国梅里埃公司， 操作方法按说明书进行， 结果观察有无凝集颗粒出现， 如出现凝集颗粒即判 定为 ＭＲＳＡ 株。
２．３ 肠毒素检测： 用反向间接血凝试验（ ＲＰＨＡ） ， 具 体 操 作 参 照 文 献［２］进 行 。
表 １ ２６０ 株 ＳＡ 不同方法 ＭＲＳＡ 检测情况
ＦＯＸ方 法（％）
ＰＢＰ２ａ 方法（％）
１３４ 株 ， ＭＳＳＡ １２６ 株 ； 用 检 测 ＰＢＰ２ａ 的 方 法 ， 检 测 １９．４％、１６．４％、１３．４％； ＭＳＳＡ １２６ 株， 产肠毒 素 率 为
出 ＭＲＳＡ １２４ 株， ＭＳＳＡ １３６ 株。经卡方检验， Ｐ ＞ ３０．２％（ ３８／１２６） ， 以 ＳＥＢ 为主， 占 ９．５％。ＭＲＳＡ 与
江西医学检验 ２００６ 年 ８ 月 第 ２４ 卷 第 ４ 期
·３５３·
２．１ 毒检能迅速检出中毒患者所中毒物种类， 为临床提供 诊疗依据。不醒人事的中毒病人， 被送到医院后， 当医生问及 病史时， 亲朋好友众说不一， 临床医生则往往举棋不定， 通常 只好按常规洗胃洗肠， 对症治疗， 其效果常常不能令人满意。 有时还会适得其反， 例如： 有机磷和氨基甲酸酯中毒时均有 胆碱能毒蕈碱样和烟碱样症状［１３］。有机磷中毒， 一般说不能应 用高锰酸钾洗胃洗肠， 因为高锰酸钾能使有机磷氧化成毒性 更强的氧化型有机磷。敌百虫变成敌敌畏， 对硫磷变成对氧 磷等。２００２ 年 ８ 月一位面色苍白、抽搐不止的儿童被送到我 院抢救， 其父叙述病史说： 母亲精神不好， 可能吃了抗感冒 药。致使临床医生无法对其抢救治疗， 经我毒检中心检测， 血 样中有大量有机磷成分， 胆碱脂酶活力 ３０％。急诊医生迅速 采取针对治疗， 使患儿转危为安， 毒物检测可以及时的检测 出送检物品所含毒物成分， 对病人的确诊以及医生的及时救 治， 提高治愈率起着至关重要的作用。
方法 １： 参照 ＮＣＣＬＳ ２００５ 年推荐的用 Ｋ－ Ｂ 法 检测头孢西丁（ ＦＯＸ） 的抑菌环直径， 当 ＦＯＸ 的抑菌 环直径≤１９ｍｍ 时即判定为 ＭＲＳＡ 株。
方法 ２： 乳胶结合试验的方法检测 ＰＢＰ２ａ， 试剂
·２９２·
Ｊｉａｎｇｘｉ Ｊ． Ｍｅｄ Ｌａｂ Ｓｃｉ．Ａｕｇｕｓｔ ２００６， Ｖｏｌ ２４， Ｎｏ４
ＭＳＳＡ（１２６ 株）
检出数（３８ 株）ຫໍສະໝຸດ 检 出 率（％）Ａ
２８
１０．８
２２
１６．４
Ｂ
３８
１４．６
２６
１９．４
Ｃ
２６
１０．０
１８
１３．４
Ｄ
１６
６．２
１０
７．４６
Ｅ
８
３．１
８
５．９７
ＡＢ
１０
３．８
８
５．９７
ＡＣ
８
３．１
８
５．９７
ＡＤ
１２
４．６
１０
７．４６
ＢＣ
８
３．１
６
４．４７
ＡＢＣ
６
２．３
６
４．４７
ＡＣＤ
［关键词］ 金黄色葡萄球菌； 肠毒素
Ｄｅｔｅｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒ ｅｕｓ ｅｎｔｅｒ ｏｔｏｘｉｎ ＬＩ Ｈｏｎｇｙｕ， ＬＯＮＧ Ｊｕｎ， ＸＵ Ｘｉａ． Ｔｈｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｓｕｎ Ｙａｔ－ Ｓｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０１２０， Ｃｈｉｎａ
２．５ 数据统计 卡方检验。
６６．２％， 主要为 ＳＥＡ 型 １０．８％（２８／２６０）、ＳＥＢ 型 １４．６％
结果
（３８／２６０）、ＳＥＣ 型 １０．０％（ ２６／２６０） ， 同时产二种或二种
１ ＭＲＳＡ 检测结果
以上的肠毒素的占 ２１．５％（ ５６／２６０） ； 其中 ＭＲＳＡ１３４
２６０ 株 ＳＡ， 用检测 ＦＯＸ 的 方法， 检测出 ＭＲＳＡ 株 ， 全 部 产 肠 毒 素 ， 以 ＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ 为 主 ， 分 别 为
６
２．３
６
４．４７
ＡＢＤ
６
２．３
６
４．４７
未检出肠毒素
８８
３３．８
０
０．００
６
４．８
１２
９．５
８
６．３
６
４．８
－
－
２
１．６
－
－
２
１．６
２
１．６
－
－
－
－
－
－
８８
６９．８
合计
２６０
１００．０
１３４
１００．０
１２６
１００．０
讨论 本 文 采 用 乳 胶 结 合 试 验 的 方 法 检 测 ＰＢＰ２ａ 判 定 ＭＲＳＡ， 其原理为 ＰＢＰ２ａ 单克隆抗体致敏的 乳胶 颗粒与 ＭＲＳＡ 的膜蛋白提取作用， 产生肉眼可见的 凝集颗粒； 从表 １ 可见， 与 ＮＣＣＬＳ 推荐的检测头孢 西 丁 方 法 来 判 定 Ｍ Ｒ Ｓ Ａ 相 比 ， 结 果 无 差 异（Ｐ ＞ ０．０５）， 说明在方法学上无差异， 两者的一致性较好。 近年来革兰阳性菌引起的院内感染明显上升， 主要表现为革兰阳性菌脓毒血症的发生率显著提 高， 至上世纪 ９０ 年代已占脓毒血症发生率的 ４０％， 其中金黄色葡萄球菌肠毒素致脓毒血症的能力居 首位［２］， 金黄色葡萄球菌， 特别是 ＭＲＳＡ 能产生许多 外毒素， 包括肠毒素（ ＳＥ） 和中毒性休克综合症毒素 － １， 这两类毒素在 ｐｇ／ｍｌ 水平即可引起体内产生强 大生物学效应， ＳＥ 是 ＳＡ 产生的重要外毒素之一， 除 ＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ、ＳＥＤ、ＳＥＥ 外 ， 近 几 年 又 发 现 了 ＳＥＧ、ＳＥＨ、ＳＥＩ、ＳＥＪ、ＳＥＫ、ＳＥＬ、ＳＥＭ、ＳＥＮ、ＳＥＯ 等 新
型 的 肠 毒 素 ［３］， 其 中 ＳＥＡ 型 毒 力 最 强 ， 最 常 见 ， ０．１ｐｇ／ｍｌ 即可引起中毒。
从表 ２ 结果可见： 从临床各标本中分离出的 ２６０ 株 ＳＡ 中 产肠毒素的 有 １７２ 株 ， 占 ６６．２％， 主 要 为 ＳＥＡ 型 、ＳＥＢ 型 、ＳＥＣ 型 １０．８％（２８／２６０）、 １４．６％ （３８／２６０）、１０．０％（ ２６／２６０） ， 同时产二种或二种以上的 肠毒素的 占 ２１．５％（ ５６／２６０） ， 与文献 ［４～６］ 报 道 相 符 。 另 ＭＲＳＡ 产肠毒素率为 １００．０％（ １３４／１３４） ， 以 ＳＥＡ、 ＳＥＢ、ＳＥＣ 为主， 分别为 １９．４％、１６．４％、１３．４％； ＭＳＳＡ 产 肠 毒 素 率 为 ３０．２％ （ ３８／１２６） ， 以 ＳＥＢ 为 主 ， 占 ９．５％， 与相关的报道［３，５］接近， ＭＲＳＡ 与 ＭＳＳＡ 的产肠 毒素率存在显著的差异 （ Ｐ＜ ０．０１） ， 提示 ＭＲＳＡ 较 ＭＳＳＡ 有 更 强 的 毒 力 和 致 病 性 ， ＭＲＳＡ 对 临 床 病 人 特别是免疫力低下的患者构成的潜在的威胁更大。 ＳＡ 产毒株的存在给临床治疗和预防院内感染方面 带来了许 多 困 难 ， 因 此 ， 在 检 测 ＭＲＳＡ 耐 药 性 趋 势 的同时检测其肠毒素的产生情况， 把 （下转第 ３５３ 页）
江西医学检验 ２００６ 年 ８ 月 第 ２４ 卷 第 ４ 期
·２９１·
金黄色葡萄球菌肠毒素的检测及结果分析 ＊
李红玉 １ 龙 军 １ 徐 霞 ２ 中图分类号 Ｒ４４６．５，Ｑ９３５，Ｒ３７８．１＋１
文献标识码 Ａ 文章编号 １００８－ ００２３（２００６）０４－ ０２９１－ ０３
·论 著·
［摘要］ 目的 了解引起临床感染的金黄色葡萄球菌（ ＳＡ） 携带肠毒素（ＳＥ）的情况。 方 法 对 从 临 床 标本中分离出的 ２６０ 株 ＳＡ， 用反向间接血凝试验检测其肠毒素， 耐 甲 氧 西 林 金 黄 色 葡 萄 球 菌 （ ＭＲＳＡ） 检 测按 ２００５ 年美国临床实验室标准化委员会（ ＮＣＣＬＳ） 推荐的检测头孢西丁方法进行。 结果 ２６０ 株 ＳＡ 中 有 １７２ 株 携 带 肠 毒 素 ， 占 ６６．２％， 主 要 为 ＳＥＡ 型 １０．８％（２８／２６０）、ＳＥＢ 型 １４．６％（３８／２６０）、ＳＥＣ 型 １０．０％ （ ２６／２６０） ， 同时携带二种或二种以上肠毒素的占 ２３．８％（ ６２／２６０） ； 其中 ＭＲＳＡ １３４ 株， 全部携带肠毒素 ， 且 以 ＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ 为 主 ， 分 别 为 １９．４％、１６．４％、１３．４％； 甲 氧 西 林 敏 感 金 黄 色 葡 萄 球 菌 （ ＭＳＳＡ） １２６ 株 ， 携 带肠毒素率为 ３０．０％（ ３８／１２６） ， 以 ＳＥＢ 为主， 占 ９．５％。 结论 临床上 ＳＡ 分 离 株 大 部 分 都 携 带 肠 毒 素 ， 且 以 ＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ 为主， ＭＲＳＡ 的带毒率高于 ＭＳＳＡ。
［Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ］ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ； Ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ
金黄色葡萄球菌至今仍是国内外医院获得性 感 染的常 见 病 原 菌 之 一 ， 除 引 起 皮 肤 、组 织 及 器 官 的化脓性炎症外， 其产生的毒素因超抗原特性以及 在 中 毒 性 休 克 综 合 征 、多 器 官 功 能 障 碍 综 合 征 的 发 病中的特殊意义而倍受关注。因此， 对临床分离的 金黄色葡萄球菌进行肠毒素的检测有重要的临床 意义。
材料与方法 １ 材料
＊基金项目： 广州市医药卫生科技项目（ ２００５－ ＹＢ－ １３５） 作 者 单 位 ： ５１０１２０ １、广 州 ， 中 山 大 学 附 属 二 院 检 验 科 ； ２、广 州医学院检验系 作者简介： 李红玉， 女， １９６７ 年出生， 副主任技师， 主要从事临 床微生物检验及耐药性研究。