《课程讲解》-3.鱼粉质量判断 (不错)

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(m/25.0)*(1.00/15.0)*1000
• 实例:鱼粉2.3455,取三氯乙酸提取液1.00ml,吸 光度A=0.257
• 2标准曲线:A=0.012380*c+0.01310
• 计算:c=(A-0.0131)/0.012380=19.70ug
• 组胺 =[19.70/(2.3455/25)*(1.0/15)*1000 ]*100=315mg /100g=3150ppm
• 步骤（1）样品处理 • 称取1~3克鱼粉于具塞三角瓶内，加入25.00ml
三氯乙酸(100g/L)每隔30min摇动一次，提取3 小时，过滤，取滤液2.00ml或 1.00ml于15ml试 管内，加氢氧化钠（250g/L）5滴，振荡一下， 再加5ml正戊醇振荡2min，静止分层，(如出现 乳化现象可滴加2-3滴无水乙醇)用移液枪小心 吸取上清液(正戊醇层)于50ml分液漏斗内,下层 沉淀再分别用盐酸(1mol/L)5ml ,5ml,3ml反萃取 3次.
发性盐基氮）综合下结论
• 各种指标互相验证：
• 镜检看：鱼小，粉状，部分被氧化。则 在组胺、盐基氮指标反映出来。
• 镜检看：砂子、鱼骨头多，则在Ash反映 出来。如Ash在12~14%，镜检可见鱼溶 浆很多（粉状）。
• 镜检看：有掺假物：NPN、羽毛粉、皮 革粉，AA数据就会有异常。
结合镜检、常规、氨基酸、新 鲜度感观结合下结论
2 、挥发性盐基氮的测定
• 计算: • 挥发性盐基氮(VBN)(mg/100g)= [ c(V-
• 问题：某个鱼粉1镜检：可见鱼体各部， 但鱼体较小，有很多粉状物，感观鲜度 差一点。
• 2常规：CP61%、Ash 13.1%、Ca2.12、 P2.05%
• 3AA：Lys5.95、Met1.43、Thr2.56 • 4鲜度：挥发性盐基氮195mgN/100g， 请问这个鱼粉正常吗？
6、镜检的操作流程
1、组胺的测定
• 收集水相(下层)于20ml刻度试管内,用水 定容至刻度,摇匀,吸取1.00ml(2.00ml)盐酸 提取液于10ml比色管内,加入碳酸氢钠溶 液(50g/L)3.0ml,摇匀,振荡下加入偶氮试 剂3.0ml,用水定容到刻度,室温下显色 10min,用1cm比色皿于480nm下测定吸光 度.
2 、挥发性盐基氮的测定(VBN)
• 原理:蛋白质变质分解时,氨基酸脱氨基生 成氨,氨基酸脱羧基生成胺,氨与胺在碱液 中被蒸发出来,用硼酸吸取,用标准盐酸反 滴定,测出其含量.
• 步骤:称取5-10克样品于250ml具塞三角瓶 内,准确加入100.00ml水,振荡30min,过滤, 取滤液10.00ml,按粗蛋白蒸馏操作,但加入 的碱为氧化镁溶液(10g/L)5-8ml.
• 1) 化学定性检查—I2 - KI等 • 2) 脱脂（最好采用索氏抽提法) • 3) 体视镜(生物镜)下观看 • 4)看到的可疑物质进一步确定 • 5)结合其它数据下结论
二、鱼粉新鲜度的检测方法
• 评价鱼粉新鲜度的方法有多种：酸价、 过氧化值、组胺、挥发性盐基氮、TBA （硫代巴比妥酸）
• 其中反映鱼粉中脂肪变化的有：酸价、 过氧化值、TBA；反映鱼粉中蛋白变化 的有：组胺、挥发性盐基氮。
1、组胺的测定
• 偶氮试剂配置 • 甲液：称取0.5g对硝基苯胺，加5ml盐酸
(1+11)溶解，再加水稀释到200ml，置冰 箱中（2--8度）保存 • 乙液：亚硝酸钠溶液5g/L，临用现配 • 甲液5ml、乙液40ml混和后立刻使用
1、组胺的测定
• 计算公式:
• 组胺(mg/100g)=
C
* 100
• 每一种方法均有其局限性，需综合分析。
1、组胺的测定
• 原理：鱼粉中组胺用三氯乙酸提取，之 后调PH=9，将游离的组胺用正戊醇提取 出，之后再用HCL反萃取，用偶氮试剂 显色。
• 组胺+三氯乙酸盐（溶于水）- （PH=9— —组胺（溶于正戊醇）——HCl—正戊醇 （组胺溶于稀HCl）
1、组胺的测定
鱼粉质量判断方法
鱼粉质量判断方法
• 镜检和感观检查----识别真假 的手段
• 新鲜度的测定--------决定用途 的工具
• 常规指标和氨基酸----指导配 方的依据
一 鱼粉的镜检方法
• （1）总则： • 找出剥去伪装的方法是关键 • 镜下来自百度文库到的掺假物要用其它方来
确认 • 抓主要问题，不要一叶障目 • 结合其它检测数据，综合下结论
和图谱
（4）抓主要问题不可草率下结论
• 鱼粉为海洋天然产品，种类繁多，形态 各异
• 加工过程有多种因素出现 • 看到可疑物要判断是故意掺假、偶然混
入、还是前批残留。 • 看到可疑的物质要判断：1是海洋生物吗？
2量多少？能重复吗？3其它指标能提示 什么吗？
（5）结合常规指标（CP、H2O、 Ash）、氨基酸及鲜度（组胺、挥
1、组胺的测定
• 步骤2:标准曲线法 • 称取磷酸组胺样品(Sigma公司)2.7671mg,置于
100ml容量瓶内,用水溶解并定容到刻度,此液组 胺含量为10ug/ml,分别取此标液 0.00,1.00,2.00,4.0,6.001于5支10比色管内,各加 盐酸(1mol/l)1.0ml,偶氮试剂3.0ml,振荡,用水定 容到刻度,摇匀后放置10min(室温下），用1cm 比色皿于480nm下测吸光值. • 参比液:试剂空白
（2）剥离伪装的方法---脱脂
• 纸包脱脂法------索氏提取法 • 快速脱脂法------丙酮、石油醚、
乙醚 • 浮选脱脂法---- 利用CCl4、CHCl3
密度不同来脱脂和选择目标
（3）镜检与其它方法相互验证
• 植物性物质-----淀粉变蓝、木质 素变红
• NPN------变色酸、尿素、铵盐 • 羽毛粉、皮革粉-----氨基酸数据
1、组胺的测定
• 应用: • 进口白鱼粉:组胺<10mg/100g(1~5mg/100g) • 进口水产级蒸汽鱼粉<100 mg/100g(50 mg/100g) • 优质国产鱼粉<150 mg/100g(50-150 mg/100g) • 新鲜度差的鱼粉(国产,进品)组胺200~340
mg/100g • 用于乳猪料的鱼粉 组胺<100 mg/100g