肠杆菌鉴定及药敏分析测试板标准操作规程

1 目的

规范肠杆菌鉴定及药敏分析系统测试板标准操作规程。

2 原理

系统测试板由生化反应孔和抗菌药物MIC测定试验孔组成，在生化反应孔中加入细菌悬液，抗菌药物MIC测定试验孔中加入细菌药敏培养基，经35—37℃孵育，生化反应在细菌代谢作用下直接产生颜色变化或经加入辅助试剂后产生颜色变化，抗菌药物MIC测定是根据试验孔是否出现浑浊（沉淀）确定是否有细菌生长。

3 试剂盒组成

3.1微生物（肠杆菌）鉴定及药敏分析系统测试板（珠海美华）

3.2稀释液

3.3M-H肉汤培养基

4 质控

大肠埃希菌ATCC25922

5 操作步骤

5.1生化试验操作方法

5.1.1菌悬液制备：挑取纯培养单个菌落于稀释液瓶内壁研磨，呈细菌悬液（0.5麦氏单位）。

5.1.2使用移液器（配无菌吸头）吸取该菌液加入测试板A1-A12孔，B1-B12孔，每孔100ul。

5.1.3在A1-A6孔分别滴加无菌石蜡油2滴。

5.2药敏试验操作方法

5.2.1吸取菌悬液50ul，加至M-H肉汤培养基内混匀，继续加入测试板的其余各孔（所

有的药敏孔及生长对照孔C+及6.5%NaCL），每孔100ul。

5.2.2撕开不干胶的纸（对齐孔）贴于鉴定板（把鉴定板两侧的凹槽页贴上），孵育18-24h

参考文献

[1]Patrick R.Murray,Mannal of clinical Microbiology,7th edition.

[2]闻玉梅，现代医学微生物学，第一版，上海医科大学出版社。

[3]《全国临床检验操作规程》

[4]《Clinical and Laboratory Standards Institute》文件