结核病的实验室诊断方法及评价
肺结核的检查项目有哪些？
肺结核的检查项目有哪些？检查项目：病原学检查、X线胸片检查、胸部CT扫描、经皮肺穿刺术、结核菌素试验实验室诊断：1.细菌学检查痰涂片及培养查找结核菌是诊断肺结核最特异的方法，也是监测疗效、病原传染性和选择用药的重要依据。
沉淀或漂浮集菌法涂片，或采用荧光镜检可提高阳性率，若无痰可采用导痰法，或取气管灌洗液或取清晨胃液均可。
2.结核菌素试验：是判断结核感染的主要手段，但不论是旧结核菌素(OT)或纯蛋白衍生物(PPD)均非纯化抗原，对于鉴别是结核杆菌感染还是非结核杆菌感染或是卡介苗接种后反应有局限性。
结素试验强阳性(局部肿结>2cm或有水疱、坏死)提示处于结核超敏状态，对原发型肺结核、结核性胸膜炎有诊断参考价值。
3.血清学检查由于结核菌的弱抗原性以及抗原的非特异性，结核病的血清诊断学至今未取得实质性进展。
近年大量报道的酶联免疫吸附试验(ELISA)，敏感性颇高，但方法学尚不成熟，特异性也不满意。
采用PPD复合蛋白抗原剂，虽然敏感性和特异性可提高，但其仍非单一特异性抗原。
4.基因诊断近几年结核菌基因诊断技术受到广泛的关注。
有关文献报道最多的是PCR技术的应用，具有快速、特异、灵敏的特点，但其操作有很高的技术要求，可因扩增气溶胶污染而致假阳性或标本中抑制物的存在而致假阴性。
5.纤维支气管镜检查：可为病理学诊断和病原学诊断提供标本。
影像学诊断：1.X线检查不同类型和性质的病变表现不同，对于诊断肺结核无特异性，但是诊断肺结核的必备检查，可为进一步病因学检查提供对象，并为确定病变部位、范围、性质，了解其演变和选择治疗提供重要依据。
原发型肺结核典型X线表现为肺内原发灶、淋巴管炎和肿大的肺门或纵膈淋巴结组成的哑铃状阴影。
急性血行播散型肺结核胸片可见散布于两肺野，分布较均匀，密度和大小相近的粟粒状阴影，早期有时难以分辨;亚急性或慢性血行播散型肺结核粟粒大小和密度不一，或为结节状病变，范围较局限。
继发性肺结核，多为渗出，浸润和纤维结节的混合病灶，X线表现为云絮状或斑点结节状阴影，干酪性病变阴影密度偏高而不均匀，或有空洞形成而出现透亮区，结核空洞一般洞壁较光整液平少或仅见浅液平。
三种肺结核实验室诊断方法评估
三种肺结核实验室诊断方法评估发布时间：2023-02-24T03:39:06.796Z 来源：《医师在线》2022年32期作者：赵静2 田敏敏1 邓淑文1 李金方3 赵蓉芬1*[导读] 目的阐明LAMP技术联合痰涂片和培养检测在肺结核确诊诊断的价值，为制定和完善本区肺结核的防控指南提供依据.方法收集送检疑似肺结核患者痰标本563份，进行直接涂片镜检、固体培养和环介导恒温扩增检测（LAMP）检测。
赵静2 田敏敏1 邓淑文1 李金方3 赵蓉芬1*1苏州高新区人民医院检验科江苏苏州 2151292苏州市第五人民医院临床检验中心江苏苏州2151313苏州高新区疾病预防控制中心疾控科江苏苏州215011【摘要】：目的阐明LAMP技术联合痰涂片和培养检测在肺结核确诊诊断的价值，为制定和完善本区肺结核的防控指南提供依据.方法收集送检疑似肺结核患者痰标本563份，进行直接涂片镜检、固体培养和环介导恒温扩增检测（LAMP）检测。
结果检测563份结核门诊送检痰标本中，257份来自临床诊断肺结核病例痰标本，三种检测方法阳性率由高到低依次为：分子检测LAMP阳性率最高（53.7%），培养阳性率次之（47.5%），直接涂片阳性率最低（15.2%）；35例临床诊断肺结核患者三种方法检测同时阳性，占13.6%，培养和LAMP检测同时阳性率64例，最高（24.9%）；306份临床诊断非肺结核病例痰标本，272例三种检测方法检测未检到结核分枝杆菌，实验室检查阴性率占88.9%，假阳性率由高到低分别为LAMP检测5%，培养4.2%，涂片1%。
结论 LAMP（环介导恒温扩增）技术可以作为培养方法的替代技术，帮助临床医生早期诊断，确诊肺结核，并进行抗结核治疗。
【关键词】肺结核；涂片；固体培养；lamp2020 年苏州高新区发病率为 49.13/10 万，肺结核仍居苏州市法定报告甲、乙类传染病首位，防控形势仍旧严峻。
急需快速、准确、简便的诊断技术和预防结核病感染新疫苗、新药品的出现［1］。
结核实验室检查项目
结核实验室检查项目包括痰涂片、痰培养、结核菌素试验和胸部X线检查等。
1. 痰涂片：通过显微镜观察痰液中的结核杆菌是否存在，是诊断结核病的常用方法之一。
2. 痰培养：将痰液置于培养基上进行培养，检测结核杆菌的生长情况，可以确定病原体的种类和药物敏感性。
3. 结核菌素试验：注射结核菌素后观察皮肤反应，判断是否感染了结核杆菌。
阳性结果需要进一步确认是否为活动性结核病。
4. 胸部X线检查：通过X光照射胸部，观察肺部是否有结核病变，如结节、空洞等。
对于早期病变或隐匿性病变的发现具有重要意义。
这些检查项目可以帮助医生确定患者是否患有结核病，并指导治疗方案的选择和调整。
同时，这些检查也有助于监测治疗效果和预防结核病的传播。
结核病实验室检查
结核病实验室检查结核病是一种严重的传染病，通常由结核分支杆菌引起。
这种病菌会侵入肺部并引起肺结核，而也可以通过血液传播到其他部位，如淋巴、骨髓和肝脾等。
在许多地方，特别是在发展中国家，结核病仍然是一种普遍的疾病，因此及早诊断和治疗至关重要。
结核病实验室检查是确诊结核病的一种重要方法。
结核病实验室检查通常涉及多种类型的检测，例如：1.酸杆菌检测结核分支杆菌是酸杆菌，因此酸杆菌检测是一种常用的实验室检查方法。
该方法不需要复杂的设备并且具有高度的特异性和灵敏度。
患者的样本可以是咳嗽的痰液、唾液或肺组织，也可以通过胃镜获得胃肠液。
如果酸杆菌检测呈阳性，则可以确诊结核病。
但是，该方法也存在一些局限性，例如在一些情况下不能检测出结核分支杆菌，如某些菌株可以耐受某些药物。
2. 结核抗体检测结核抗体检测是另一种可以用于诊断结核病的实验室检查方法。
该方法通常使用ELISA（酶联免疫吸附试验）或其他类似方法检测患者的血清中是否存在结核抗体，如果测试结果呈阳性，则表示患者可能感染了结核分支杆菌。
但是，结核抗体检测的结果可能会出现假阳性或假阴性的情况，这限制了其在临床实践中的应用。
3.结核病PCR检测PCR检测是检查抗原核酸序列的一种方法。
由于PCR技术可以扩增极微量的DNA，并且非常特异和灵敏，因此可以检测出非常小的感染量。
在结核病中，PCR检测可以用于检测结核分支杆菌的DNA，以确认病原体的存在。
但是，该方法对样本中的DNA污染非常敏感，因此必须进行严格的实验室操作和质量控制。
总之，结核病实验室检查是确诊结核病的一种重要方法。
这些测试方法都具有不同的优缺点，并且结果可能受到许多因素的影响。
因此，必须在临床实践中综合考虑这些方法的结果和临床表现，以取得最佳的诊断结果。
同时，实验室技术人员必须受过专业培训，严格遵守操作规程，以确保准确诊断和最佳治疗效果。
肺结核确诊病例诊断标准
肺结核确诊病例诊断标准摘要：一、肺结核病概述二、肺结核确诊病例诊断标准1.疑似病例2.确诊病例三、肺结核病的诊断流程1.病史和体格检查2.影像学检查3.实验室检查4.鉴别诊断四、肺结核病的治疗与管理1.治疗方案2.治疗管理3.预防措施正文：肺结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，主要影响肺部，是全球重要的公共卫生问题之一。
肺结核病的诊断标准对于早期发现、诊断和治疗肺结核病具有重要意义。
一、肺结核病概述肺结核病是一种常见的慢性传染病，主要影响肺部，但也可侵犯其他器官。
肺结核病的主要传染源是痰中带菌的肺结核患者，通过呼吸道飞沫传播。
人群普遍易感，尤其是免疫力低下的人群。
二、肺结核确诊病例诊断标准1.疑似病例疑似病例是指具有肺结核病症状和体征，但尚未进行实验室检查或影像学检查证实的病例。
肺结核病的常见症状包括咳嗽、咳痰、发热、盗汗、乏力等。
2.确诊病例确诊病例是指根据实验室检查和影像学检查结果，确诊为肺结核病的病例。
实验室检查主要包括痰涂片检查和结核分枝杆菌培养，影像学检查主要包括胸部X光片和CT扫描。
三、肺结核病的诊断流程1.病史和体格检查了解患者的病史，包括症状、持续时间、加重或缓解因素等，以及体格检查，如肺部听诊、叩诊等，对肺结核病的诊断具有重要意义。
2.影像学检查胸部X光片和CT扫描是肺结核病的重要影像学检查手段，可以显示肺部病变的范围、形态、密度等，对诊断和鉴别诊断肺结核病具有重要价值。
3.实验室检查痰涂片检查和结核分枝杆菌培养是肺结核病的实验室检查方法，可以直接检测痰中的结核分枝杆菌，对确诊肺结核病具有决定性意义。
4.鉴别诊断肺结核病的鉴别诊断包括与其他肺部疾病、肺外结核病、非结核分枝杆菌病的鉴别。
四、肺结核病的治疗与管理1.治疗方案肺结核病的治疗方案根据病情、耐药情况等制定，主要包括一线抗结核药物和二线抗结核药物。
2.治疗管理肺结核病的治疗管理包括药物治疗、不良反应监测、疗效评估等，需要患者、医生和护士共同参与。
结核病实验室诊断技术介绍
1．结核分枝杆菌鉴定方法1. 1萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查目前萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查是我国结核病实验室使用最为普遍的方法，其操作简单快捷，特异性高，设备要求低，但是灵敏度较低，不能及时发现病人。
1.2 发光二极管荧光显微镜（LED荧光显微镜）发光二极管荧光显微镜管利用二极管光源，延长了显微镜使用寿命，不需要暗室，且价格低廉，可以提高涂片的阳性检出率。
目前在国内应用评估结果显示灵敏度较明场显微镜明显提高，已在部分区县开始使用。
1.3 交叉引物恒温扩增结核病诊断技术在恒定温度下，特殊的引物和特异性探针在酶的作用下，反应体系在一个密闭的反应管内反应。
扩增反应一般不超过一个小时，最短半小时。
目前应用玻璃化试剂，稳定性好，便于运输。
目前在国内区县级应用评估。
1.4 夹层杯结核病诊断方法将痰标本（或其它标本）用专用消化灭活液充分消化，完全暴露并保留抗酸杆菌，通过自动离心涂片机（或半自动制片染色机）对消化后的标本进行充分集菌。
直接在夹层杯装置中进行抗酸染色，取出基片或膜片置于普通显微镜进行观察。
夹层杯法操作方便快捷，便于标准化操作，通过消化灭活，安全性改善，阳性检出率也比直接涂片法大大提高。
夹层杯的装置有沉降式和虑过式，适用于不同工作量的医疗机构。
1.5 环介导等温扩增方法采用2对引物在等温条件下即可完成DNA的扩增，扩增结果通过肉眼观察荧光进行判定，诊断是否为结核病。
同时整个反应体系采用封闭系统减少了工作区域扩增子的污染，整个反应过程只需一个小时即可完成，通过肉眼观察荧光判读结果。
2．结核分枝杆菌培养方法2.1 固体培养培养是结核病诊断的精标准，也是获得分离菌株开展耐药检测的前提，我国结核病实验室最常用的是固体罗氏培养法，包括简单法和中和离心法。
虽然培养是诊断的精标准，但是花费时间长，需要4-8周时间。
2.2 液体培养液体培养通过添加生长刺激剂，改变检测方法提高检测灵敏度等方式缩短了阳性报告时间。
肺结核的诊断标准
肺结核的诊断标准
肺结核是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，严重威胁人类健康。
正确的
诊断对于肺结核的治疗和控制至关重要。
本文将介绍肺结核的诊断标准，帮助医生和患者更好地了解和识别这一疾病。
首先，肺结核的诊断需要综合临床表现、影像学检查、病原学检测和实验室检
查等多方面的信息。
临床表现包括咳嗽、咳痰、低热、盗汗、乏力、消瘦等症状，但这些症状并非特异性，容易与其他呼吸系统疾病混淆。
因此，临床医生需要结合影像学检查，如X线胸片、CT等，观察肺部病变的位置、形态和范围，以及有无
空洞、钙化等特征。
此外，病原学检测，如痰涂片、结核菌素试验、结核分枝杆菌培养等，可以直接检测结核分枝杆菌的存在，有助于确诊。
其次，根据世界卫生组织的标准，肺结核的诊断需要符合以下条件，①临床症
状和体征提示肺结核；②影像学检查显示肺部有结核病变；③实验室检查证实结核分枝杆菌的存在。
只有同时满足这三个条件，才能做出肺结核的诊断。
此外，对于HIV感染者、儿童、老年人等特殊人群，诊断标准可能有所不同，需要结合个体情况进行综合判断。
最后，肺结核的诊断还需要排除其他类似疾病，如支气管扩张、肺癌、肺炎等。
这需要医生综合分析患者的临床资料，排除其他可能性，最终做出准确的诊断。
总之，肺结核的诊断是一项综合性工作，需要临床医生充分了解疾病的临床表现、影像学特征、病原学检测等内容，综合分析患者的临床资料，做出准确的诊断。
只有准确诊断，才能及时治疗，防止疾病的传播和恶化。
希望本文能够帮助医生和患者更好地了解肺结核的诊断标准，提高对这一疾病的认识和识别能力。
结核病实验室诊断技术
GenoType MTBDR and 诊断结核感染及对利福 MTBDRplus；INNO- 平和异烟肼药物敏感性 LiPA Rif.TB
Frane; LW Scientific; Zeiss
诊断结核患者
Cepheid GeneXpert
诊断结核感染及对利福 平的耐药性
WHO推荐的结核新诊断技术
方法 DNA微阵列芯片法
有前景的几种新技术
❖ 分子诊断技术:GeneXpert（Cepheid公司） ❖ 分子线性探针技术:INNO-LIPA（Innogenetics公司） ❖ 反向点杂交技术:GenoType MTBDR （Hain Lifescience）
分枝杆菌菌种鉴定试剂盒（亚能生物） ❖ 基因芯片技术：微阵列芯片法（博奥生物） ❖ 细胞免疫学技术：T-SPOT.TB（Oxford Immunotec公司）
目前诊断方法回顾
细菌学检测方法 ： 涂片、常规培养、快培 其他辅助检查方法：皮试、结核抗体
目前诊断方法的局限性
涂片的缺点： 敏感性低； 特异性差； 无法区别死菌与活菌
培养的缺点： 耗时久，一般需4~8周； 阳性率低，约30%~50%；特异性差， 无法区别MTB与NTM
皮试的缺点： 敏感性低特异性差 抗体检测缺点：敏感性低特异性差
新型诊断技术产品比较
企业 美国 Cepheid
比利时 Innogenetics 德国 Hain Lifescience 中国 亚能生物
中国 博奥生物
英国 Oxford Immunotec
方法
产品特点
GeneXpert
同时检测MTBC和判断利福平耐药； 快速；简便；安全
线性探针杂交法 （INNO-LIPA）
➢ 新的实验诊断技术可弥补传统方法的不足，提高诊 断的灵敏度和特异性，但各有缺点或不足，难以完 全满足临床检测需求，因此，新型结核杆菌诊断技 术及产品的研发势在必行。
结核病实验室诊断技术2017.10.13
• 绝对浓度法 • 比例法
• 液体培养法
基于固体培养基；时间：4周 多种药物
基于液体培养基，时间：4-12天 INH/RFP/SM/EMB/PZA
结核分枝杆菌药物敏感试验
不同药敏方法的差异
三者在临界药物浓度接种菌量、结果判读方法等方面都有一定差 别，导致结果有很少一部分不相符
比例法和绝对浓度法检测结果的一致率4 药均高达96 %以上,对于 结核分支杆菌,二种方法测试 SM INH RFP EMB的耐药率均无显著 性差异
涂片显微镜检查的敏感性
观察到的AFB
AFB估计数量 涂片阳性的可能性(%)
数量
( /ml)
• 0 in ≥100 fields
< 1,000
<10
• 1-2 in 300 fields 5,000 – 10,000
50
• 1-9 in 100 fields about 30,000
80
• 1-9 in 10 fields
结核分枝杆菌药敏试验-菌型鉴定
利用固体罗氏鉴别培养基的鉴别：
中性罗氏 培养基
+
噻吩-2-羧酸 肼TCH
+
对硝基苯 甲酸PNB
+
菌型鉴定 NTM
+
+
-
人型Mtb
+
-
-
牛型Mtb
结核分枝杆菌药敏试验-菌型鉴定
• 原理：硝基苯甲酸还原酶机制
绝大部分非结核分枝杆菌能将对硝基-苯甲酸（PNB ）还原为细菌能够利用的对氨基-苯甲酸（PABA），而 绝大部分（98%以上）MTBC缺乏对硝基-苯甲酸（PNB ）还原酶活性，为对氨基-苯甲酸（PABA）将对硝基苯甲酸（PNB）还原为细菌能够利用的对氨基-苯甲酸 （PABA） • 局限：鉴定周期长15天-30天，特异性不高
结核病实验室检测流程标准
结核病实验室检测流程标准结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，其传染性强，严重威胁人类健康。
为了及时发现和诊断结核病，实验室检测是必不可少的一环。
本文将从标本采集、实验室检测和结果判读三个方面，介绍结核病实验室检测流程标准。
一、标本采集结核病的标本采集是实验室检测的第一步，其质量直接影响后续检测结果的准确性。
标本采集应在严格的无菌条件下进行，采集的标本应包括痰液、胸腔积液、尿液、脑脊液等。
在采集痰液时，应让患者深呼吸数次，然后咳出痰液，避免口腔分泌物的污染。
采集胸腔积液时，应在穿刺前进行消毒，并在穿刺后立即将标本送至实验室。
采集尿液时，应让患者在清晨第一次排尿时采集，避免尿液的稀释。
采集脑脊液时，应在穿刺前进行消毒，并在穿刺后立即将标本送至实验室。
二、实验室检测结核病的实验室检测主要包括涂片法、培养法、PCR法等。
涂片法是最常用的检测方法，其操作简单、快速，但灵敏度较低。
培养法是检测结核分枝杆菌的“金标准”，其灵敏度高，但需要较长的培养时间。
PCR法是一种新兴的检测方法，其灵敏度高、特异性强，但需要较高的技术水平和设备支持。
实验室检测应在严格的无菌条件下进行，避免标本污染和交叉感染。
检测结果应及时记录和报告，确保患者能够及时接受治疗。
三、结果判读结核病的实验室检测结果应根据临床表现和其他检查结果进行综合判读。
涂片法和PCR法的阳性结果可以初步诊断结核病，但需要进一步的确认。
培养法的阳性结果可以确诊结核病，但需要排除其他细菌感染。
实验室检测结果应及时通知临床医生，以便制定合理的治疗方案。
综上所述，结核病实验室检测流程标准包括标本采集、实验室检测和结果判读三个方面。
标本采集应在严格的无菌条件下进行，实验室检测应遵循相应的操作规范，结果判读应综合考虑临床表现和其他检查结果。
只有严格按照标准操作，才能确保结核病的及时发现和诊断，保障人民群众的健康。
结核病的实验室诊断方法及评价
耐多药结核病的实验室诊断条件：因耐多药结核分枝杆菌的生物危险性，1）需P2及以上实验室，目前我院实验室条件基本具备即将投入运行，2）日常培养及涂片用的生物安全柜滤膜已超出使用年限，工作人员生物安全得不到保障，应定期予以更换。
耐多药结核分枝杆菌主要以结核分枝杆菌体外药物敏感性测定作为其诊断依据。
因此其基础是培养，只有培养出阳性结核分枝杆菌才能进一步通过结核分枝杆菌体外药物敏感性测定诊断是否为耐多药结核分枝杆菌。
1.已进人临床常规应用的测定方法:目前包括绝对浓度法、比例法及应用BACTEC460、BACTEC 960、BacT/ ALERT 3D、ESPII等仪器系统快速检测结核分枝杆菌的药物敏感性。
其中:绝对浓度法以最低抑菌浓度或以无生长为终点作为判断标准，是我国目前普遍采用的方法;比例法以是否能够抑制99%的细菌生长作为判断标准，是世界卫生组织推荐使用的方法;后四种仪器方法则是比例法的特化，其特点是以细菌的代谢过程指示细菌生长状况。
2.处于研究探索阶段的测定方法:此类方法很多，抗性比例法、Etests法、噬菌体生物扩增法、液体变色培养基测定法、荧光素酶测定法、硝酸盐还原试验等。
3分子生物学方法对结核分枝杆菌耐药性检测已有一些进入临床检测。
基因突变是引起抗结核药物耐药性的最主要的原因。
多种以PCR为基础的分子生物学技术用于检测与耐药相关基因的突变，作为快速耐药性检测方法在实验室或临床得到开展。
这些方法具体包括：主要是DNA序列分析法，聚合链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP），另外还包括基因芯片技术、异质性双链构象分析、变性梯度凝胶电泳、线性探针杂交技术、RNA/RNA错配检测技术和分子灯塔技术等。
由于结核分枝杆菌的耐药性与基因突变的确切关系未完全阐明，检测耐药相关基因的分子生物学方法虽然能快速准确地检测到耐药相关基因的突变，但由于判断药物敏感性时存在固有的缺陷，检测结核分枝杆菌耐药性的基因型鉴定法不能完全替代表型鉴定法。
肺结核的诊断标准
肺结核的诊断标准肺结核是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，严重威胁着人们的健康。
在临床诊断中，准确的诊断标准对于及时治疗和控制疾病的传播至关重要。
下面将介绍肺结核的诊断标准，以帮助医务人员更好地识别和治疗这一疾病。
一、临床症状。
肺结核患者常常表现出慢性咳嗽、咳痰、咯血、低热、盗汗、消瘦、乏力等症状。
这些症状是肺结核的常见表现，但并非特异性症状，因此在诊断时需结合其他检查结果进行综合分析。
二、影像学检查。
胸部X线片是肺结核诊断的重要辅助手段，可显示肺部病变的位置、范围和性质。
肺结核的X线表现多种多样，可出现浸润性病变、结节状病变、空洞形成等。
此外，CT检查对于肺结核的诊断也有一定的帮助，能够更清晰地显示肺部病变的细节。
三、痰涂片检查。
痰涂片检查是一种直接检测结核分枝杆菌的方法，对于肺结核的诊断具有重要意义。
通过痰涂片检查，可以快速发现结核分枝杆菌，为确诊提供重要依据。
四、结核菌素皮肤试验。
结核菌素皮肤试验是一种常用的辅助诊断方法，通过皮内注射结核菌素后观察局部反应情况，来判断患者是否感染了结核分枝杆菌。
然而，需要注意的是，结核菌素皮肤试验并非特异性诊断方法，存在一定的假阳性和假阴性结果。
五、痰培养。
痰培养是诊断肺结核的金标准，通过培养痰液中的结核分枝杆菌，可以明确诊断肺结核。
同时，对于耐药结核菌的检测也是通过痰培养进行的，有助于选择合适的抗结核药物进行治疗。
六、基因检测。
近年来，基因检测技术在肺结核的诊断中得到了广泛应用。
基因检测能够快速、准确地检测出结核分枝杆菌的存在，并且可以对耐药菌株进行鉴定，为个体化治疗提供了重要依据。
综上所述，肺结核的诊断标准包括临床症状、影像学检查、痰涂片检查、结核菌素皮肤试验、痰培养和基因检测等多个方面。
在实际诊断中，需要综合运用各种方法，结合患者的临床表现和检查结果，进行综合分析，以确保准确诊断和及时治疗。
希望本文能对肺结核的诊断有所帮助，提高对该疾病的认识和诊断水平。
肺结核检查方法
肺结核检查方法肺结核是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，其对人体健康造成严重威胁。
及早发现和治疗肺结核对控制疾病传播和减少病患的病情恶化至关重要。
因此，肺结核的检查方法显得尤为重要。
一、症状检查。
肺结核的常见症状包括持续咳嗽超过三周、咳痰或咳血、胸痛、体重减轻、食欲不振、乏力等。
如果出现这些症状，应及时就医并进行相关检查。
二、胸部X光检查。
胸部X光检查是诊断肺结核的重要方法之一。
X光片可以显示肺部结核病变的位置、大小和数量，有助于医生进行初步判断和诊断。
三、结核菌素试验。
结核菌素试验是通过皮内注射结核菌素制剂，观察注射部位是否出现硬结以判断个体对结核分枝杆菌的感染情况。
但需要注意的是，结核菌素试验可能存在假阳性和假阴性结果，因此需结合临床症状和其他检查结果来综合判断。
四、痰涂片检查。
痰涂片检查是一种直接检测结核分枝杆菌的方法，通过显微镜下观察痰液中是否存在结核分枝杆菌。
这是一种简便、快速的检查方法，有助于早期诊断和治疗。
五、基因检测。
基因检测是近年来新兴的肺结核检查方法，通过检测痰液中结核分枝杆菌的DNA，可以更准确地诊断肺结核，尤其是对于耐药性结核菌的检测更为有效。
六、CT扫描。
CT扫描可以清晰地显示肺部组织的情况，对于肺结核的病灶范围、侵犯程度等有着更详细的了解，有助于制定更精准的治疗方案。
七、血液检查。
血液检查可以检测患者的免疫状态、炎症指标等情况，有助于全面评估患者的健康状况和病情严重程度。
总之，肺结核的检查方法有多种，每一种方法都有其独特的优势和适用范围。
在实际应用中，医生会根据患者的具体情况，综合运用各种检查方法，以期尽早发现肺结核，提高治疗效果。
希望广大患者能够重视肺结核的检查工作，及时就医，有效预防和控制肺结核的传播。
结核病诊断的金标准是
结核病诊断的金标准是
结核病的金标准诊断方法是通过病原学检查来确定患者是否感染了结核分枝杆菌。
病原学检查包括痰涂片涂片检查、痰液培养和PCR检测等。
其中，痰涂片检
查是最常用的方法之一，通过显微镜下观察痰液中是否存在结核分枝杆菌，但其敏感性较低，约为50%~60%。
痰液培养是目前最为可靠的诊断方法，但需要较长时
间（一般需要3~6周），且需要较高的实验室技术水平。
PCR检测则是近年来发
展起来的一种新技术，其敏感性和特异性较高，能够快速、准确地检测出结核分枝杆菌的存在。
除了病原学检查外，结核病的诊断还需要结合临床表现和影像学检查。
临床上，结核病的典型症状包括慢性咳嗽、咯血、低热、盗汗、消瘦等，但这些症状并不特异，易与其他疾病混淆。
因此，结核病的诊断还需要结合X线胸片、CT、MRI等
影像学检查来进行综合分析，以确定是否存在结核病的病变。
在进行结核病的诊断时，医生需要全面了解患者的病史、症状和体征，同时结
合实验室检查和影像学检查的结果，进行综合分析，最终确定诊断。
需要注意的是，结核病的诊断并非一蹴而就，常常需要反复检查和观察，以排除其他疾病的可能性，最终确定诊断。
总的来说，结核病诊断的金标准是通过病原学检查（痰涂片检查、痰液培养和PCR检测）来确定患者是否感染了结核分枝杆菌。
但在临床实践中，医生还需要
结合临床表现和影像学检查进行综合分析，以最终确定诊断。
希望通过本文的介绍，能够帮助大家更加了解结核病的诊断方法，提高对结核病的认识和诊断水平。
结核杆菌的三种实验方法的应用评估
结核杆菌的三种实验方法的应用评估目的比较痰涂片法、荧光定量PCR法和结核抗体检测法对结核病的诊断意义。
方法选取2014年7月～10月在我院诊疗疑似或确诊患者172例，进行涂片抗酸染色、荧光（PCR）检测和采集血样进行结核抗体检测。
结果172例检样中，抗酸染色痰液标本阳性例只有20例阳性率为11.6%。
荧光PCR法阳性率55例，阳性率31.2%，结核抗体阳性例为87例；阳性率为50.6%。
结论三种方法中，以结核抗体阳性率最高，荧光PCR法次之，抗酸染色法阳性率最低，如果三种方法联合运用，相互佐证，可提高准确性。
标签：结核杆菌；检测方法结核杆菌又称分枝杆菌，是引发结核病的病原菌，可能对全身的各大器官造成侵害，临床中以肺结核最为常见。
结核杆菌细胞含有大量分枝菌酸，染色后能抵抗强脱色剂盐酸乙醇的脱色，故又称抗酸杆菌，结核杆菌是引起结核病的病原菌，可侵犯全身器官，但以肺结核为多见。
结核病至今仍为重要的传染病，近年来，因艾滋病、吸毒等社会原因及免疫制剂的应用，其发病呈上升趋势。
鉴定结核杆菌的方法有很多[1]。
本研究应用痰涂片染色法、PCR-荧光法、结核分枝杆菌抗体检测，对172例标本同时进行比较和评价。
1资料与方法1.1一般资料收集自2014年7月～10月在我院诊疗疑似或确诊的患者标本172例。
所有患者均通过痰涂片抗酸结核杆菌检验、胸部X线片、临床表现以及结核菌素试验等诊断为肺结核。
涂片法和荧光PCR为痰标本。
嘱患者留取晨痰2～5ml（结核患者需停抗结核药3d）。
结核抗体检测则采静脉血2ml。
1.2方法1.2.1涂片染色镜检是临床常用的简易快速的检查方法：取痰或其他已外理好的标本0.1ml，于载玻片上均匀涂抹成2cm×2.5cm椭圆形范围，以自然干燥和火焰固定后，进行抗酸染色，采用珠海贝索生物技术有限公司的结核染色液。
染色步骤：①石碳酸复红溶液染色20min；②5%盐酸酒精脱色3min；③亚甲基蓝溶液染色30S。
淋巴结核诊断标准
淋巴结核诊断标准1. 简介淋巴结核是一种常见的传染病，主要特点是淋巴结的病理性增大和干酪样坏死。
准确的淋巴结核的诊断对于疾病的治疗和控制起着至关重要的作用。
本文将介绍淋巴结核的诊断标准，帮助医生准确诊断和治疗该病。
2. 临床表现淋巴结核的症状并不明显，但通常可观察到以下临床表现： - 被侵犯的淋巴结的明显肿大 - 淋巴结表面光滑，质地坚硬 - 皮肤上可能出现红斑、溃疡等改变 - 患者可有发热、乏力等全身症状3. 实验室检查淋巴结核的诊断需要通过实验室检查来确定。
以下是常用的实验室检查方法：- 淋巴结穿刺活检：通过对淋巴结进行穿刺活检，观察淋巴结病理变化，确定是否为淋巴结核。
- 结核抗体检测：通过检测患者血清中的结核抗体水平，确定是否感染了结核分枝杆菌。
- 结核菌培养：从淋巴结活检或其他感染部位获取标本，进行结核菌培养，对药物敏感性进行测试。
4. 影像学检查影像学检查可以帮助医生确定淋巴结的位置和大小，以进一步提供诊断确定的依据。
以下是常用的影像学检查方法： - X射线检查：通过拍摄胸部或其他部位的X射线片，观察淋巴结的形态和位置。
- CT扫描：利用计算机重建断层扫描图像，观察淋巴结病变的范围和程度。
- MRI扫描：通过磁共振成像技术，观察淋巴结的形态和病变特征。
- 超声检查：利用超声波对淋巴结进行实时成像，评估淋巴结的内部结构和血流情况。
5. 淋巴结结核的诊断标准淋巴结结核的诊断标准主要包括以下几个方面： - 临床症状：有明显的淋巴结肿大和相应的全身症状，如发热、乏力等。
- 实验室检查：淋巴结穿刺活检或其他实验室检查结果显示淋巴结存在干酪样坏死和结核分枝杆菌感染证据。
- 影像学检查：影像学检查结果显示淋巴结的形态和位置与淋巴结结核相一致。
6. 淋巴结结核的鉴别诊断在诊断淋巴结结核时，需要与其他疾病进行鉴别，以避免误诊。
下面是常见的鉴别诊断： - 淋巴瘤：淋巴瘤也可以引起淋巴结肿大，但其病理特征和治疗方法与淋巴结结核有所不同。
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耐多药结核病的实验室诊断条件：因耐多药结核分枝杆菌的生物危险性，1）需P2及以上实验室，目前我院实验室条件基本具备即将投入运行，2）日常培养及涂片用的生物安全柜滤膜已超出使用年限，工作人员生物安全得不到保障，应定期予以更换。
耐多药结核分枝杆菌主要以结核分枝杆菌体外药物敏感性测定作为其诊断依据。
因此其基础是培养，只有培养出阳性结核分枝杆菌才能进一步通过结核分枝杆菌体外药物敏感性测定诊断是否为耐多药结核分枝杆菌。
1.已进人临床常规应用的测定方法:目前包括绝对浓度法、比例法及应用BACTEC460、BACTEC 960、BacT/ ALERT 3D、ESPII等仪器系统快速检测结核分枝杆菌的药物敏感性。
其中:绝对浓度法以最低抑菌浓度或以无生长为终点作为判断标准，是我国目前普遍采用的方法;比例法以是否能够抑制99%的细菌生长作为判断标准，是世界卫生组织推荐使用的方法;后四种仪器方法则是比例法的特化，其特点是以细菌的代谢过程指示细菌生长状况。
2.处于研究探索阶段的测定方法:此类方法很多，抗性比例法、Etests法、噬菌体生物扩增法、液体变色培养基测定法、荧光素酶测定法、硝酸盐还原试验等。
3分子生物学方法对结核分枝杆菌耐药性检测已有一些进入临床检测。
基因突变是引起抗结核药物耐药性的最主要的原因。
多种以PCR为基础的分子生物学技术用于检测与耐药相关基因的突变，作为快速耐药性检测方法在实验室或临床得到开展。
这些方法具体包括：主要是DNA序列分析法，聚合链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP），另外还包括基因芯片技术、异质性双链构象分析、变性梯度凝胶电泳、线性探针杂交技术、RNA/RNA错配检测技术和分子灯塔技术等。
由于结核分枝杆菌的耐药性与基因突变的确切关系未完全阐明，检测耐药相关基因的分子生物学方法虽然能快速准确地检测到耐药相关基因的突变，但由于判断药物敏感性时存在固有的缺陷，检测结核分枝杆菌耐药性的基因型鉴定法不能完全替代表型鉴定法。
结核病的实验室诊断方法及评价(一)标本的采集1．痰标本采集新发病人应在抗结核药物治疗前留取痰标本。
治疗中的病人应停药2～3天后留取痰标本。
病人于清晨漱口后，留取3～5ml合格的痰标本(深咳后吐出的黏液痰、脓样痰、干酪样痰、褐色血样痰或含少量新鲜血液的血痰)，遇到唾液或口永，应重新留取。
至少采集3次。
WHO推荐的采集容器为国际通用的螺旋盖痰瓶、可密封塑料盒或蜡纸盒。
痰容器上应标明病人姓名、编号、检查项目和容器序号。
2.胃冲洗液幼儿不会吐痰，常将痰液咽下，故可用清晨空腹胃洗出液，直接涂片染色或进行结核杆菌培养，连续作三次可提高培养阳性率。
胃液结核杆菌检出率以浸润性肺结核和干酪性肺炎为最高，其次为粟粒型肺结核。
胃液、痰液或其他分泌物中结核杆菌检查，有时对诊断有决定性意义。
3.支气管肺泡灌洗和支气管冲洗支气管肺泡灌洗和支气管冲洗液至少5ml并以无菌容器盛装，以用于检验。
4.病灶组织或干酷块等先用组织研磨器磨碎后再行涂片。
5．尿液留全量夜尿，静置4或5小时后，弃上清液，取沉淀部分尿液10ml，3000rpm．离心30min，取沉渣涂片。
6.体液或脑脊液无菌操作收集体液或脑脊液，放置冰箱或室温24h，待薄膜形成后涂片。
也可将脑脊液离心沉淀，3000rpm，离心30min，弃上清液，取沉淀物涂片。
(二)试验方法及评价1．细菌学诊断方法(1)涂片检查法：包括直接涂片法、荧光染色涂片法和集菌涂片珐。
痰液、脓液可直接涂片。
用萋尔-尼尔逊染色法(Ziehi-Neelsen)简称萋尼染色法，若镜检找到抗酸性杆菌，则可能是结核杆菌。
此法简便、快速，技术要求低，无需特殊仪器且能当天出结果，十分经济，符合我国国情。
但其敏感性差，一般需5000～10000条菌／ml才能得到阳性结果；特异性差，各种分枝杆菌均可着色，要进一步鉴定是否为结核分枝杆菌；不能区分死菌与活菌。
【萋尼氏染色法】①涂片：取经95％乙醇擦拭脱脂过的干燥、清洁、无油污、无划痕的新玻璃片(玻片不能重复使用)，于玻片背面的左端1／3处以蓝色或黑色记号笔(玻璃铅笔)编号。
用接种环挑取痰标本的脓样，干酪样部分约0.05～0.1ml，于玻片正面的右侧2／3处，均匀涂沫成10mm×20mm的卵圆形痰膜，自然干燥后待检。
②试剂：⊙碱性复红乙醇染色储存液：碱性复红液：8克碱性复红溶于95％乙醇100ml中。
5％石碳酸水溶液：5克石碳酸溶于100ml蒸馏水中。
③染色步骤；【荧光染色法】①试剂：染色剂z金胺“O”0．1g溶于95％乙醇10ml，加5％石炭酸90ml。
脱色剂：3％盐酸乙醇液。
复染剂：0.5％高锰酸钾水溶液。
②染色步骤：③镜检与报告方式：在暗色背景下，抗酸杆菌呈黄绿色或橙色荧光。
必须用40×物镜确认菌体形态，应具有萋-纳氏抗酸染色镜经检验后，方可应用荧光染色法，注意勿过读或漏判。
荧光染色后涂片应在24h内检查，遇需隔夜时，置4℃保存，次日完成镜检。
物镜20×检查结果按下列标准报告：阴性(-)：0条／50视野可疑(+)；1～3条／50视野阳性(1+)：l1～99条／50视野(2+)：1～9条／每视野(3+)：10～99条／每视野(4+)：≥100条／每视野物镜40×检查细菌细胞形态。
(2)常规培养法：结核分枝杆菌培养阳性是确诊结核病的“金标准”。
改良罗氏培养法是目前较为成熟的分离培养方法，根据结核杆菌生长缓慢，菌落干燥、颗粒状、乳酪色像菜花状，菌体染色抗酸性强等特点判断是否为结核杆菌。
如菌落、菌体染色都不典型,则可能为非典型分枝杆菌，应进一步作鉴别试验。
此法培养时间长，不适于快速检测结核杆菌，且阳性率也只有30％～40％，使大量结核病人漏诊或误诊。
同时各种分枝杆菌均可生长，也需进一步鉴定是否为结核分枝杆菌。
⊙培养结果报告方式：抗酸杆菌培养阴性：斜面无菌落生长。
抗酸杆菌培养阳性(1+)：菌落生长占斜面面积的1／4。
抗酸杆菌培养阳性(2+)：菌落生长占斜面面积的1／2。
抗酸杆菌培养阳性(3+)：菌落生长占斜面面积的3／4。
抗酸杆菌培养阳性(4+)：菌落生长布满全斜面。
抗酸杆菌培养阴性应以“(培养阴性)”报告。
菌落生长不足以斜面面积1／4时，实报菌落数。
(3)快速培养法：①BactecMGIT960分枝杆菌快速培养、药敏检测系统的基本原理是，其所使用的培养瓶底部含有包被于树脂上的荧光显示剂，由于该显示剂为氧抑制性，当分枝杆菌生长使氧消耗后，荧光显示剂被激活而发出荧光。
检测系统每隔60分钟连续测定培养管内荧光强度，来判断管内分枝杆菌生长情况。
②BacTALERT3D培养系统：是另一类分枝杆菌快速培养、药敏检测系统，也可用于普通细菌的培养。
其原理是所使用的培养瓶底部，有颜色感应器，当分枝杆菌在瓶中生长，有CO2产生时，颜色感应器由绿色变为黄色。
系统自动连续检测数据输入计算机，根据计算结果自动显示有无分枝杆菌生长。
此法无放射性，显著缩短培养时间，且操作简便、自动化强，还可进行快速菌型鉴定。
但液体培养基中不能观察菌落形态，仪器与试剂价格较贵。
(4)液体变色培养基(MBRedox系统)：该系统由改良米氏7H9培养基、促生长添加剂(血清、复合维生素等)、抗生素混合物PACT(多黏菌素B、两性霉素B、茶啶酸、甲氧苄胺嘧啶)和氧化还原显示器(即无色四鎓盐)组成。
促生长添加剂可加速分枝杆菌的生长和甲臜(formazan)的形成。
其原理是当分枝杆菌在此培养基生长时，通过氧化还原系统，使培养基中的无色四唑鎓盐还原成粉红色、红色或紫色甲臜。
由于甲臜不溶于水．以颗粒形式分泌到细胞表面，分枝杆菌菌落就变成了用肉眼可见的红或紫色，取培养液涂片，染色镜检。
此法操作简便，培养时间短，肉眼观察结果，无需特殊仪器，无放射性污染，还可用于分枝杆菌的药敏试验和菌种鉴定。
但阳性率还不够高，结果观察存在主观性。
(5)噬菌体裂解试验：由于耻垢分枝杆菌噬菌体是一种DNA病毒，能特异感染相应的活的分枝杆菌，并在菌体内迅速增殖?裂解菌体，释放出的子代噬菌体，又可感染随后加入的指示细胞(也是一种分枝杆菌)，并使指示细胞裂解，在培养平板上出现噬菌斑。
根据噬菌斑的有无，即可确定待检标本中是否含有相应的活的分枝杆菌。
此方法简便、快速，不需特殊仪器；特异性和灵敏度较高；检测的是活菌，但传染性小；可相对定量可测定药物敏感性。
其主要步骤为：①标本前处理：同常规培养法(若用菌株则勿需此步)，经前处理后的标本于Middlebrook7H9培养基中(含有改良的OADC营养添加剂)37℃温育24h。
②噬菌体浸染：取0.5ml上述处理后的样品(或菌液)，加入0．1ml分枝杆菌噬菌体，震荡混匀，37℃孵育1b。
③中止浸染：于上述浸染液中加人0.1ml杀毒剂，彻底混匀，室温作用5min，加入5mlMiddlebrook7H9培养液和1ml指示细胞。
④浇注平皿和培养：将上述混合培养液与5ml 溶化的琼脂共同倾注于无菌平皿中，旋转混匀，静置成形后，于37℃培养18～24h。
每次检测同时设空白对照、嘴菌体对照、杀毒剂对照、指示细胞对照和阴性及阳性对照。
⑤结果观察：在各对照组结果正确的条件下，观察试验样品结果。
阳性结果可见有大小和数量不等的噬菌斑出现(彩图2)，或许多嘴菌斑相互融合成透明状；阴性结果可见指示细胞在琼脂培养基中均匀生长．无噬菌斑出现。
2．常用的免疫学诊断方法(1)酶联免疫吸附试验(enzymeLinkedimmunosorbentas-say，ELISA)：ELISA是结核抗体。
研究和应用报道最多的实验方法。
①ELISA间接法：其基本原理是吸附在固相载体上的结核抗原可与待检标本中的结核抗体结合，形成抗原-抗体复合物，后者与酶标记的抗人IgG结合，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物，酶使底物显色。
颜色的深浅与待检标本中的结核抗体含量成正比。
本法主要用于测定结核抗体。
②双抗体夹心ELISA：其原理是吸附在固相载体上的结核抗体可与待检标本中的结核抗原结合，形成抗体-抗原复合物，后者与酶标记的结核抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，酶使底物显色，颜色的深浅与待检标本中的结核抗原含量成正比。
本怯主要用于特异性结核抗原的测定。
③抗原竞争ELISA：其原理是吸附在固相载体上的结核抗体，可与标本中的待检结核抗原及同时加入的酶标的结核抗原发生竞争结合，形成抗体抗原和抗体-酶标抗原两种复合物，后者可使酶作用的底物显色，颜色的深浅与待检标本中结核抗原的含量成反比。
本法主要用于小分子抗原的测定。
(2)生物素-亲和素-酶免疫测定法(biotin-avidin-system，BAS-酶免法)：基本原理类似于ELISA，只是用BAS来标记酶，而不是用抗体或抗原标记酶。