一种新的染色体制片永久封片法

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种新的染色体制片永久 封片法。该方法用水溶
换至载玻片的另一端 () 然后再沿盖片 另一 B, 端的边缘滴 1 -2滴胶液,待胶液渗人盖、 载玻 片之间以后平置制片, 存放于干燥 、 冷凉、 黑暗 的条件下。3 天之后, -5 待刻片胶完全干结后 便可用于分析和摄影。实验表明经该方法封片 后的染色体制片透明程度好,染色体分裂图象 清晰 ( 见图 2 , )与封片前效果基本一致。
遗 卫EE IБайду номын сангаас (ei ) () 3一; 19 竺匕 RDT S i g 1 1: 9 0 1 Bj n 3 9
实验技术 与方法
一种 染 体制 久封 法 新的 色 片永 片
卢 宝 荣
( 四川农业大学小麦研究所, 江堰市,180 都 613)
细胞的有丝分裂和减数分裂制片是植物细
胞学和细胞遗传学研究不 可缺少的技术。对 于
染色体 图象
完 善。 参 考 文 献
Lbrt y na f It dco M c g. t aoa r Maul r r ut n yl y B - o o no i o u
gs P b. . Mina oi Min es u l C , n epl , n . o s
L ] D rnt , D ad . LCu: 6. T e 2 al g n C . L F aor 1 0 I: i o . n . 9 n h H nl g C r oo s L no, og Al & adi o ho s . dn G re e n f m me o e ln
盖、 载玻片之间以后( 5 1 约 - 0分钟)将 火柴棍 ,
酒精,而染色体的压片则一般在醋酸等的水溶
液中进行, 在永久封片之前, 为了保证染色体制 片的质量,需对制片进行脱水和透明等过程的 处理, 这不仅手续繁杂, 而且在这一过程中还会 进一步引起细胞材料的脱落,如果处理不当会 造成细胞材料变形而影响分析。为了解决这一 矛盾, 笔者通过多次的实验和摸索, 总结出了一
解 2 4小时 , 当阿拉伯胶完全溶解 后,加人水合
大树脂 (aaa s ) Eprl Cnd bl m , a 胶和 D X aa u a P
胶等『。 用这些制剂对染 色体制片进行永久封 幻 片均有以下不足之处:()在染色体制片 进行 1
氯醛在室温下继续溶解 2 小时, 4 然后再加人浓 甘油,充分搅拌后在棉纱中过滤胶液。制成的
胶液贮藏于 0 ℃ 的低温下 。 -4
永久封片之前必须将盖玻片从 载玻片 上 揭下 来, 这不仅需要一定的超低温制冷条件( 冷冻揭
片 )而且在 揭片过程 中会损失一定数 目的细胞 ,
分裂相;() 2 由于加拿大树脂或 Epr ua l胶等 a
均只溶于如二甲苯等有机溶剂中,不溶于水或
封片步骤: 将认为满意的染色体制片置 于桌面并在载玻片的一端 ( ) A 垫上一根火柴棍 或类似粗细的木条, 使制片稍带倾斜度(-8 5 度 角)然后将配制好的胶液沿盖玻片一端的边缘 , 滴上 1 滴( -2 如图 1 所示)当胶液基本渗透人 。
注意事项
性的阿拉伯胶 ( u a b , c s ea G m ai A ai e gl r c c a n
(. Wid)和保护剂在一定的浓度 下 均匀 L) l . l 地渗透到染色体制片中, 待胶液干结后, 载玻 盖、
片紧密粘合而达永久封片之 目的。该封片过程 既不需要将盖片从载片上揭下 ,也不需一系列
图 1 封片胶液的使 用
片时要求玻片清洁,玻片在使用前最好浸泡于
酒精 中, 现用现擦。
然简便、 经济、 易行,但应该说明该方法也存在 着不足。通过笔者反复的试验和观 察 之 后 发 现,经该方法封片一年以_的有些染色体制片 _ 七 有颜色褪减的现象。因此,该法还 需 进 一 步
图 2 用该方法进行永久 剖片后的植物有丝分裂中期( ) A 和减数 分裂中期一I ) ( B
的脱水、 透明过程, 这样节省了大量的时间,并 且经济、简单易行。同时使用该方法也没有细 胞分裂相损失的忧虑。 封片胶配方; 该封片胶在 Hoe 配 yr氏
3在实验中发现,经醋酸地衣红染色的材 . 料用该方法封片之后染色体有褪色的现象,如 需长期保留制片,此法最好不用于醋酸地衣红 染色的细胞压片材料。 利用该方法对染色体制片进行永久封片虽
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由江三多等专家编著的《 遗传与精神疾病》 一书, 已由科学出版社出版。全书约 2 万字, 5 估价 1.元, 1 9 邮购每本另加 1务 的邮费。汇款请寄北京东黄城根北街1号科学出版社刘安同志收, 0 6 注 明所购书名和册数。如通过银行汇款, 请汇至:中国工商银行北京东四分理处, 帐号4 12-5 , 620 8 科学出版社收, 注明所购书名和册数即可。
1由于该封片胶是以稀醋酸为溶剂,该方 .
法特别 实用于醋酸压片法的染色体制片。 2 由于该封片法没有揭去盖玻片 的 过 程 , . 所以在制片过程 中应尽量避免气泡存 留 于 盖、 载玻片之间 ,否则封片 以后气泡很难排除。制
L B oog A e Meh d Ma ig r n n a rn : w to o a N f k n P ma et e C rmo o e e aain h o s m P p rt r o 本文于 18 年 8月 2 99 4日收到.
方[ 1 1 1 的基础上加以改良而成:
一些重要的染色体制片进 行永 久 封片,不 仅 为 实验 结果保 存了必要的细胞学证据,而且 也为特殊细胞学现象的重新观察和研究提供了 可能性。传统染色体制片的封片剂主要有加拿
蒸馏水1 毫升; 0 0 冰醋酸1毫升; 拉伯 0 4 阿
胶 1.克; 1 5 水合氯醛 10 浓甘油 8 0 克; 毫升。 封片胶配制方法: 冰醋酸稀释于蒸馏水 中然后将阿拉伯胶加人该醋酸溶液在室温下溶
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