保健食品中总蒽醌的测定
保健食品中总蒽醌的测定
Ⅰ.总蒽醌的测定1 原理蒽醌类化合物在天然药物中以游离状态与苷的形式混合存在，游离态的约占总蒽醌的1/10～1/3，结合态常见的是葡萄糖苷。
结合蒽醌的两相水解溶剂为硫酸氯仿，游离总蒽醌用氢氧化钠、氨水混合碱液萃取，测定波长为510nm。
蒽醌类成分在碱性溶液中能显红色反应，在500～510nm波长处有吸收峰，在一定浓度范围内符合朗伯-比尔定律，含量多少在一定范围内与吸光度成正比。
2 试剂蒸馏水、0.5mol/L硫酸、氯仿、甲醇。
5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液：10%氢氧化钠溶液与4%氢氧化铵溶液等量混合；对照品：1，8-二羟基蒽醌(AR)。
3 仪器分析天平、分光光度计、移液管、容量瓶。
4标准品溶液的制备精密称取1，8-二羟基蒽醌对照品(105℃干燥至恒重)20.0 mg置200mL量瓶中，加甲醇至刻度，振摇，使对照品完全溶解，即得100μg/mL的标准品溶液。
5 标准曲线的制备精密吸取上述标准品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0mL，分别置50mL量瓶中，在水浴上蒸干，加5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液溶解并稀释至刻度，放置1h，以混合碱液为空白，在510nm波长处测定吸收度，以浓度为横坐标、吸收度为纵坐标制作标准曲线。
6供试液的制备及总蒽醌含量的测定精密称取2g本品，加蒸馏水40mL溶解，0.5mol/L硫酸10mL，加热，水解2h，放冷，过滤，取续滤液15mL，移至分液漏斗中，加氯仿提取3次，（30mL、15mL、15mL），合并氯仿液，摇匀，分取氯仿液20mL，加5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液萃取4次，每次20mL，分取混合碱液置100mL容量瓶中，加混合碱液溶液稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。
以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白对照，在510nm波长处测定吸收度，按以下公式即可得出蒽醌的含量（mg/100g）。
7 结果计算A样×C标×1000X= ×100A标×m样式中：X为试样中总蒽醌的含量，mg/100g；A样为供试品溶液在510nm波长处的吸光度；A标为标准品溶液在510nm波长处的吸光度；C标为标准品的浓度，mg/mL；m样为取样量，g。
决明子袋泡茶中总蒽醌含量测定方法探讨
西北药学杂志2000 年7 月第15 卷增刊TLCS 归一化法侧得含量为100纬复方青黛胶囊及原药材红色斑点经证明是紫草成分吕说明样品回流提取至无色约陕西愉林中药厂。
需5h .锭玉红可被基本提取完全。
2 方法衰 2 10 批胶，与 4 批药材中他玉红含f2. 1 供试液创备取本品10 粒，倾出内容物，精密称研细，批号百分含量mg/ 较取适量相当于4 粒加海沙2g搅匀，加扳置索氏提取器中，胶炭980409 0. 0 115 0 . 0 60仿适量，水浴回流提取至提取液无色，提取液通过氧化铝往9 8 04 1 0 0. 0 12 1 0 . 0 62 98 04 11 0 . 0 10 8 0 . 0 54 玻瑞柱，干法装入120 200 目中性氧化铝内径约lc- ，97120 4 0 . 0 20 0 0 . 10 4 洗液通过氧化铝柱再l og . 容器以锐仿约20. 1分数次洗涤，9 70 62 2 0. 0197 0 . 10 0 盆水浴上回收抓仿至以抓仿洗至流出液近无色合并流出液，98030 9 0. 0 114 0. 05 9 作为供试品溶液。
另取靛用叙仿转溶并稀释至l oml ，1- 2. 1。
980206 0 . 0 242 0 . 115玉红对照品，抓仿温热溶解，加制成0. 03mg/ ml 对照品溶液。
96120 6 0 . 0 179 0 . 096 970505 0 . 0 20 4 0 . 10 12. 2 薄层扫描条件吸取供试品溶液21 对照品溶液2闰与.1，98 0 4 08 0 . 00 74 0 . 037 以苯一41 分别交叉点于同一硅胶G 薄层板上，x1，丙酮5 : 抓仿一青黛1福建产0. 134 : 1展开，取出，立即贾盖玻璃板，晾干，用胶布固定，进行扫青燕2福建产0 . 14描，二700nm测I 供试品吸收度积分值与波长:. 536nm1，t 青黛3西安药市0 . 15对照品吸收度积分值. 青黛 4 广西产0 . 142. 3 线性关系吸取靛玉红对照品溶液0. 032mg/ mD12 按2. 分别点于同一硅胶G 薄层板上，2项下操作，345 611，③提取液上氧化铝柱纯化后，薄层色谱几乎无杂质斑点。
决明子复方降脂茶总蒽醌含量测定
决明子复方降脂茶总蒽醌含量测定第24卷,第1期2007年1月光谱实验室ChineseJournalofSpectroscopyLaboratoryV o1.24.No.1January,2007决明子复方降脂茶总蒽醌含量测定①王慧高晓霞张立伟②(山西大学分子科学研究所太原市030006)摘要以醋酸镁一甲醇液为显色剂,分光光度法测定决明子复方降脂茶中总蒽醌的含量.对照品在3.775—22.65yg/mL范围内.吸光度值与浓度呈良好的线性关系(r=0.9993),回归方程为=0.01384+0.04794C,样品平均回收率为101.9,RSD为0.75(=6).关键词决明子复方降脂茶,蒽醌,紫外吸收光谱.中图分类号:0657.32文献标识码:B文章编号:1004—8138(2007)O1—0019—041前言复方决明子降脂茶由决明子提取物和山楂总黄酮组成,具有降脂,减肥,通便的功能.其中起主要药效的是决明子葸醌类化合物和山楂总黄酮,为了更好的控制生产工艺及产品质量,本实验利用醋酸镁一甲醇液反应法对产品中总蒽醌含量测定进行了研究.2实验部分2.1仪器与试剂HP8453UV—Vis吸收光谱仪(美国惠普公司),Unic7200分光光度计(四川分析仪器厂);决明子复方降脂茶(自制);1,8一二羟基葸醌标准品(中国药品生物制品检定所),氯仿,无水甲醇,5mol/I硫酸,0.5醋酸镁甲醇液等均为分析纯,实验用水为三次蒸馏水.2.2供试品溶液铜备[1]准确称取3份降脂茶(9.2803g),B(8.8098g),C(9.5637g)置于250mL圆底烧瓶中,加人5mol/L硫酸100mL,加热水解2h,冷却后加入氯仿80mL,在70"C加热回流30min,冷却后过滤,将得到的澄清液用氯仿萃取,酸水层加氯仿,如此重复4次,至酸水层中蒽醌成分提取完全,将得到的残渣再加氯仿回流提取4次,合并氯仿提取液,用少量蒸馏水洗至中性后,将提取液分别浓缩至干.再用甲醇溶解定容至10mL容量瓶中,待用.准确称取山楂总黄酮样品13.7mg,加入甲醇溶解,定容至50mL容量瓶中,备用. 2.3对照品溶液制备准确称取105℃干燥2h的1,8一二羟基蒽醌15.lmg置100mL容量瓶中,加人甲醇溶解并稀释至刻度,作为对照品溶液(0.1510mg/mL).①山西省自然科学基金(20041102)资助项目②联系人.电话:(0351)7017924;E-mail:***************.Cn作者简介:王慧(1981一),女.山西省忻州市人,2004级硕士研究生,从事中草药有效成分提取,分离研究.收稿日期:2006-11-13;接受日期;2006-1卜30.光谱实验室第z4卷2.4校准曲线的制备准确量取1,8一二羟基蒽醌对照品溶液0.25,0.5,0.75,0.9,1.0,1.25,1.5mL,分别置于1OraL容量瓶中,在水浴上挥去甲醇,残渣加0.5醋酸镁一甲醇液溶解并稀释至刻度,摇匀,于512nm测定其吸光度,以0.5醋酸镁一甲醇液作空白对照.以吸光度为纵坐标,浓度C(Mg/mL)为横坐标,绘制校准曲线.3结果与讨论3.1测定波长的选择[.]o?准确吸取1,8一二羟基蒽醌标准品液0.75mL,一份加甲醇稀释定容至10mL,另一份于水浴蒸干,残渣加0.5%醋酸镁一甲醇液溶解,并稀释定容至10mL,摇匀,于320~550nm波长范围内扫描测定,分别以甲醇和醋酸镁一甲醇为空白,观察对照品络合前后吸光度的01变化,见图1.由图1可见,1,8一二羟基蒽醌甲醇液最大吸收波4oo波长oo长位于428nm,加入醋酸镁显色后,最大吸收峰移至图1l,8-二羟基蒽醌的吸收光谱512nm.卜～甲醇为溶剂;卜醋酸镁.甲醇为溶剂.准确吸取山楂总黄酮样品溶液5mL,供试品溶液1.3mL各2份,以下步骤同上,用甲醇及0.5醋酸镁一甲醇液作为空白,在230~550nm区间作二者吸收光谱,见.图2,3.1.O0.6富5O.2300400500波长A/nm250350450550'波长A/nm图2山楂总酮的吸收光谱图3样品吸收光谱卜一甲醇为溶剂;2—一醋酸镁.甲醇为溶剂.卜一甲醇为溶剂I一醋酸镁-甲醇为溶剂.由图2可见,山楂总酮最大吸收波长位于280nm,加入醋酸镁后,最大吸收峰无明显变化,说明样品中山楂总酮的存在对决明子总蒽醌含量测定不干扰.由3可见,样品甲醇溶液在500nm以上没有吸收,而在加入醋酸镁后,供试品溶液在512nm处有明显的吸收,说明决明子中所含其他成分对决明子总蒽醌含量测定不干扰,故可选择以醋酸镁甲醇液作显色剂,512nm作为测定波长,测定样品中决明子总蒽醌含量.3.2样品稳定性考查取供试品溶液适量,在水浴上蒸去甲醇后加0.5醋酸镁一甲醇液显色,于512nm处测定阳光直射下被检测液对吸光度的稳定性.结果见表 1.由表1可见,在阳光直射下放置90min,溶液的呈色反应仍很稳定.2840●O00第1期王慧等:决明子复方降脂茶总蒽醌含量测定213.3回归方程结果表明,对照品浓度在3.775—22.65/~g/mL范围内,吸光度值与浓度呈良好的线性关系,得回归方程=0.o1384+0.04794C,相关系数r=0.9993.3.4样品含量测定分别准确量取2组待测样品储备液各0.5mL,在水浴上挥去甲醇后,残渣加0.59/5醋酸镁一甲醇液溶解并稀释至5mL,各组待测样品平行测定3次,取平均值,然后用校准曲线方程计算各样品中总蒽醌的含量.见表2.3.5加标回收率试验表2供试样品含量测定结果(,l=3,)准确吸取6份已知浓度药液各0.25mL,置于5mL容量瓶中,分别加入0.3mL1,8一二羟基蒽醌标准品液,0.5醋酸镁一甲醇液定容后测定每份的吸光度值,计算加标回收率为101.9;/6,RSD为0.75;,6(=6),见表3.表3加标回收宰样品号原含量()加标量(g)测得量(g)回收率()平均回收率()77.678.178.578.678.478.31OO.6101.61O2.51O2.71O2.31O2.O4讨论山楂,决明子均具有较好的疗效和保健作用,对其复合物中蒽醌的含量测定未见报道.本文选用醋酸镁一甲醇法显色,显色后在90min内很稳定,测定稳定性好;样品中山楂总酮的存在以及决明子中所含其他成分对决明子总蒽醌含量测定不干扰;本法简便快速,平均回收率为101.8%,相关系数为0.9993;因而,此方法可用于对决明子及其制剂的质量评价.参考文献[1]陆惠英,吴银生.分光光度法测定决明子中的蒽醌类成份[j].苏州医学院.1999.19(5):503.[2]田逸民,赵彩云,高爱军.差示分光光度法测定决明子中总蒽醌含量[j].徐州医学院.200t,21(5):422 DeterminationofAnthraquinoneinCompoundJuemingzijiangzhichaW ANGHuiGAOXiao—XiaZHANGLi—Wei (InstituteofMolecularScience.ShanxiUniversity.Tab,M"030006,P.R.China)光谱实验室第24卷AbstractAmethodforthedeterminationofanthraquinoneincompoundJuemingzijiangzhic hawasestablished,whichwasbasedondifferentialspectrophotometrywithmagnesiumacetat e—methanolasdeveloper.TheregressionequationisA=0.01384+0.04794Cintherangeof3.775—22.65 /~g/mLwithagoodhnearity(r=0.9993)betweentheabsorbanceandconcentration.Theaver agerecoveryiS101.9withRSDof0.75(=6).KeywordsJuemingzijiangzhicha,Anthraquinone,UltravioletAbsorptionSpectrum.本刊论文发表的正常周期:n8个月您的发明创造得到"优先权''荣誉的必要保障缩短论文发表周期,是尽早实现学术论文的社会效益的前提,也是作者创造性劳动得到尊重,为其在世界上取得"优先权"荣誉的必要保障,因为发明创造的"优先权"通常是以出版时间为准的.因此,本刊在严格保证质量的条件下,把尽快发表作者的论文,视为自己的神圣职责.来稿要符合"《光谱实验室》投稿须知"(见本刊1994—2003年每年第1期),特别是其中第4—7项要求,做到"齐,清,定"("齐"即全稿包括表,图和照片等齐全,符合本刊对稿件的各项要求;"清"即书写清楚,段落分明,便于排版和校对;"定"即做到稿件内容完整,在排校过程中无须增删修改)是保证论文质量不可缺少的条件.如果您希望论文早日发表(如2—8个月),请务必按"须知"写稿.如果来稿附有同行专家评语及单位推荐信,论文还可以更快发表(O.5—2个月). 来稿请用Word或北大方正排版,用电子邮件发到本部电子信箱[E—mail;1)*************;2)gpsys81@;3)*********************.cn;4)*********************.cn].为避免某一电子信箱的服务器发生故障而延误收稿,建议作者向本刊几个信箱同时发送电子邮件,并请作者发了邮件后,打电话通知编辑部,以便及时查询;在尚未开通电子邮件业务的情况下,作者也可向本刊投稿处直接邮寄纸质稿件两份.稿件邮寄地址:北京市81信箱66分箱《光谱实验室》编辑部联络处刘建林,100095.本刊收到作者来稿后,都会及时(1—3日)回信,并发出.关于收到稿件的通知".因此,作者发送稿件后1O日以上都没有消息,一定要及时来电查询.一篇论文出版,常常需要反复沟通.作者一编辑部一审者一编辑部一作者"之间的联系,其中与作者的联系是最重要的一环,一旦脱节,必然中断编辑过程.因此作者来稿时,务必将联系人的详细地址,办公室和家中的电话,手机号码,传真号码和电子信箱等(通讯方式要尽可能全)告诉编辑部,以便能与您及时联系.否则.由此而耽误出版由作者自己负责.《光谱实验室》编辑部。
药典大黄中总蒽醌含量的测定
药典大黄中总蒽醌含量的测定说到大黄，大家都知道它是一味常见的中药，特别是用来治疗便秘，通大肠，简直是“肠道清道夫”。
大黄的药用价值早在古代就被发现了，大家都知道它的功效吧？可是你知道吗？大黄里面有一种重要的成分叫总蒽醌，像个隐藏的“宝藏”，虽然看不见摸不着，但它的作用可不小。
今天，我们就来聊聊，如何测定大黄中这个神秘的总蒽醌含量。
说起测定，听起来可能有点复杂，其实也不难。
总蒽醌的测定是通过化学分析来实现的，简单说，就是通过一系列化学反应，让我们可以量化出大黄中到底含有多少这种成分。
要知道，总蒽醌可不是随便什么成分，它可跟大黄的药效息息相关，直接影响着药物的质量和疗效。
所以，测定它的含量，不仅是为了保证质量，还为了确保使用效果，避免过多或过少的总蒽醌影响疗效。
好啦，不废话，直接进入主题。
大黄中总蒽醌含量的测定，一般是采用紫外分光光度法，这听起来很高大上，实则操作起来并不复杂。
简单来说，就是用紫外光去照射大黄的提取液，看它吸收光的情况。
光吸收的程度，直接就和总蒽醌的含量成正比。
咋一听是不是有点像魔法？但实际上，就是通过测量光的吸收强度，来算出其中含有多少总蒽醌。
我们要从大黄中提取出蒽醌成分。
这个步骤好比是打破大黄的外壳，把里面的精华给提取出来。
我们一般使用的是醇水混合液来进行提取，醇水混合液就是那种既能溶解蒽醌，又能保持成分稳定的液体。
提取液经过滤和浓缩之后，最后我们得到的是一个可以分析的溶液。
使用紫外分光光度计。
这可不是随便什么普通仪器，紫外分光光度计就像一位严格的“守门员”，它能精确测量溶液吸收紫外线的程度。
每种物质吸收光的波长和强度都不一样，所以我们就能通过这些数据，判断大黄中蒽醌的含量是多少。
就像看一张高分考卷，分数的多少一目了然。
在测试过程中，别以为光测总蒽醌就行了。
测定过程中还有很多细节，稍微不注意，结果可能就不准确了。
比如溶液的浓度，要控制得刚刚好，不然光线吸收的效果就会偏差，测出来的结果也就不靠谱了。
保健食品中总蒽醌衍生物的测定
附 录 A
（规范性附录）
总蒽醌衍生物的测定
A.1 总蒽醌衍生物的测定
A.1.1 试剂：
对照品溶液的制备：精密称取1,8-二羟基蒽醌25.0毫克，加冰乙酸溶解并稀释至50ml 。
混合酸溶液：25%盐酸溶液2ml 加冰乙酸18毫升混合。
混合碱溶液：取等量的10%氢氧化钠溶液和4%的氨溶液混合。
A.1.2仪器：
分光光度计
A.1.3测定：
精密称取25mg 样品置于100ml 圆底烧瓶中，加混合酸溶液6ml 混匀，在沸水浴中回流15分钟，放冷，加乙醚30ml 提取，提取液通过脱脂棉滤入分液漏斗中，继续用乙醚洗涤残渣二次，每次5ml ，药渣再加混合酸溶液4ml ，在沸水浴中回流15分钟，放冷，用乙醚20ml 提取，并用乙醚洗涤残渣二次，每次5ml ，合并乙醚液，用水30，20ml 振摇洗涤二次，弃去水洗液，乙醚液用混合碱溶液50，20，20ml 提取三次，合并碱提取液，置100ml 容量瓶中，加混合碱溶液至刻度，混匀，取约50ml 置100ml 锥形瓶中，称重（准确至0.01g ），置沸水浴中回流 30分钟，取出，迅速冷却至室温，称重，补加10%氨溶液到原来的重量，混匀。
同时精密量取对照品溶液2.0ml ，置于100ml 容量瓶中，加混合碱溶液稀释至刻度，混匀，于暗处放置30分钟。
以混合碱溶液为空白，在525nm 波长处，分别测定吸亮度。
A.1.4计算：
()
%101%E W E ⨯⨯=总蒽醌衍生物 式中：E1为样品的吸收度值；E 为对照品的吸收度值；W 为样品重g 。
A.2方法来源：
本方法全文摘自《功能因子协作组方法》（第一次会推荐）中“总蒽醌衍生物的测定”。
不同商品等级的巴戟天中总蒽醌含量测定
二， 其含量测定 也是鉴别 胶囊使用 药用 明胶 与工业 明胶 的重
要参 考指标之一 ， 本实验采用硝酸． 氢氟酸对 空心胶囊进 行样 品前处理 ， 用 原子吸收分 光光度法 （ Ａ Ａ Ｓ ） 测 定 明胶 空心 胶囊
中铬 的含量 ， 从实验结 果看 ， 实验稳定性 、 重复性好 ， 有较 低检
瓶必须经过硝酸溶液浸泡后 ， 再用去离子水荡洗干净 ； ③操作
不规 范 ： 实验人员应该规 范操 作避免引人污染 。 ４ ． ４ 试验 中存在样 品铬含量测定重现性 的问题 ， 主要原 因是
改进 ［ Ｊ ］ ． 药物分析杂志 ， ２ ０ １ ２ ， ３ ２ （ ６ ） ： ９ ２ ４ － ９ ２ ６ ． ［ ６ ］ 孙洁 ， 薛飒 ， 张丽娜 ． 石 墨炉原子 吸收法测 定药用 空心胶 囊 中的 微量铬 ［ Ｊ ］ ．现代 中西 医结合杂 志， ２ ０ １ １ ， ２ ０ （ １ ６ ） ： ２ ０ ２ ３ － ２ ０ ２ ４ ． ［ ７ ］ 刘童 ， 王爱民 ， 关焕玉 ， 等 ．炉内消解一 石墨炉原子吸收法测定 明胶 空心胶囊 中铬 的含量 ［ Ｊ ］ ．中国实验 方剂 学杂 志 ， ２ ０ １ ３ ， １ ９ （ ７ ） ：
等结果看 ， 该样 品消解温度取得 了不错 的消解效果。 ４ ． ３ 在实验 的过程 中， 如果存 在空 白样 品溶 液 吸收值偏 高 ，
也会影 响样 品中的铬 的准 确测定 ， 分析原 因可能是 如下几种
［ １ ］ 国家药典委员会 编 ．中 国药 典（ 四部 ） ［ Ｓ ］ ． ２ ０ １ ５年版 ．北京 ： 中
［ ３ ］ 魏攀 ， 龚治湘 ， 张玉玺 ． 多种 前处理方 法对 明胶 空心胶 囊 中铬元 素进行定 量分析 ［ Ｊ ］ ． 药物分析杂志 ， ２ ０ １ ２ ， ３ ２ （ ６ ） ： ９ ２ ７ － ９ ３ ０ ．
紫外分光光度法在保健食品检测中的应用研究与分析
紫外分光光度法在保健食品检测中的应用研究与分析作者：朱颖异来源：《现代营销·理论》2019年第01期摘要：为了建立能简易、准确测定保健食品中总黄酮、总皂苷、总蒽醌含量的方法，笔者对紫外分光光度法的应用进行了研究分析，分别采用紫外分光光度法、香草醛-高氯酸分光光度法、酸解处理后分光光度法对保健食品样品中的总黄酮、总皂苷、总蒽醌的含量进行了测定，发现应用紫外分光光度法检测保健食品具有简易且重现性好的优点。
关键词：紫外分光光度法保健食品黄酮皂苷蒽醌1.紫外分光光度法概述紫外分光光度法是一种用于定性、定量、结构分析的方法，方法原理是不同物质分子对波长在200至760纳米范围内电磁波的吸收特性不同。
该方法具有操作方便、成本低、重现性好、准确度高的优点，目前保健食品检测中普遍应用紫外分光光度法进行检测。
紫外分光光度法在保健食品检测中的应用主要是检测有效成分含量，如总黄酮、总皂苷、总蒽醌等。
黄酮类化合物是自然界中广泛存在的一类化合物，大多数的黄酮类化合物都具有颜色，该类化合物具有抗氧化、抗突变、抗肿瘤等多项功能，基于此，其被做成药品、保健品，是药品、保健品中的重要有效成分。
保健食品中总黄酮含量测定的方法主要有硝酸铝显色法、紫外分光光度法，前者的专属性不强，为此结果可靠性不足，用紫外分光光度法检测则具有较高的准确性。
得到广泛应用的总皂苷的含量测定方法是香草醛-高氯酸法，同时，显色法在总皂苷的含量测定中也得到了一定的应用，显色法的原理是皂苷中的糖基会与蒽醌显蓝绿色。
显色法和香草醛-高氯酸法在皂苷含量测定中都具有良好的重现性和较高的准确性。
蒽醌类化合物的含量测定方法如下：甲醇提取，酸解氧化，醋酸镁或混合碱显色。
2.检测材料与方法用紫外分光光度法检测总黄酮、总皂苷、总蒽醌在样品中的含量所用的材料如下：仪器方面是UV-1800紫外分光光度計、恒温水浴锅、电子天平;试剂方面，芦丁、人参皂苷、蒽醌的标准品，分析纯的乙醇、甲醇、苯、香草醛、冰乙酸、高氯酸、醋酸镁、盐酸等。
紫外分光光度法测定芦荟胶囊中总蒽醌的含量
Ｕ ．０ ０型 紫 外 可 见 分 光 光 度 计 ；Ａ ２ ４ Ｖ３ １ Ｒ １０电 子 分 析天 平 （ 万分 之一 ） 。 １ ８二 羟基 蒽醌 （ ，－ 中国药 品生 物制 品检 定 所 ， 号 批
Ｃ ｏＱｎ ｃ ｅ ＬｕＷｅ Ｌ ｏ ｇａ Ｇ ｏＹ ｎ ａ ｉｇｈｎ ｉ ｉ ｉ ｎ ｙｎ Ｇ ａ ｏ ｇ
（ ． ｌａ ｎｃｐ ｌ ｓｉ ｌｏ ｒｄｔ ｎ ｌＣ ｉｅｅＭｅ ｉｉｅ Ｌａ ｎｎ ａｉｎ １ ０ １ Ｄａｉｎ Ｍｕ ｉｉａ ｐｔ ｆＴ ｉｉｏ ａ ｈｎ ｓ ｄｃｎ ， ｉｏ ｉｇ Ｄ ｌ ６ Ｈｏ ａ ｉ ａ １ １ ３，Ｃｈｎ ； ｉａ
ＮＯ ａ Ｈ和 ２ Ｎ Ｈ混 和碱 液 萃取 ３次 （ ０ ３ ，０ ， ％ ＨＯ ３ ，０ ２ ）
合 并萃 取 液 ， 去 二 氯 甲烷 层 ， 混 合 碱 液移 置 ５ ｍ 弃 将 ０ｌ
量 瓶 中 ， 碱液 至 刻度 ， 加 摇匀 ， 用 。 备
２ ４ 测 定 波 长 的选 择 精 密 吸 取 １ ８二 羟 基 蒽醌 标 ． ，。
为 ０ ２ ．７ ２， 含 量测定 ） 其 他试 剂 均为 分析 纯 。 ８ ９９ ０ 供 ，
作 者 单 位 ：．辽 宁 大 连 市 中 医 医 院 （ 连 １６ １ ） １ 大 １０ ３ ； ２ ．辽 宁 中 医 药 大 学 （ 阳 １ ６０ ） 沈 １０ ０ ； ３ ．辽 宁 大 连 市 第 二 人 民 医 院 （ 大连 １６ １ ） １０ １
２ ５ 线性 关 系考 察 精 密 吸取 １ ８二羟 基 蒽醌标 准 ． ，－ 溶液 ０ ４ ０ ８ １２ １６ ２ ０ ｍ１ 别 置 １ ｍｌ 瓶 中 ， ． 、． 、． 、 ． 、 ． １ 分 ０ 量 水 浴上 挥净 乙醚 ， 凉 ， ５ Ｎ Ｏ 和 ２ Ｎ Ｈ混 放 加 ％ ａＨ ％ ＨＯ
采用HPLC法对一种保健食品中总蒽醌含量的测定方法
2019年6月| 33酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚均达到基线分离，理论板数按大黄素峰计算均不低于5000，拖尾因子均在0.95～1.05，阴性对照无干扰。
见图1。
A. 混合对照品溶液；B. 供试品溶液；C. 阴性供试品溶液1.芦荟大黄素；2.大黄酸；3.大黄素；4大黄酚；5大黄素甲醚图1 对照品、供试品及阴性供试品的色谱图2.6 线性关系考察按照2.2项下的方法，取各对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL 含芦荟大黄素58.78μg、大黄酸116.00μg、大黄酚67.93μg，大黄素41.40μg，大黄素甲醚22.06μg 的混合标准储备液。
再以甲醇对倍稀释，摇匀，即得系列混合对照品溶液。
吸取各浓度混合对照品溶液10μL，进样，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。
回归方程及线性范围分别为芦荟大黄素Y=49.092x+2.0575，1.84～58.78μg ·mL -1，r=1；大黄酸Y=43.821x+4.6572，3.63～116.00μg ·mL -1，r=1；大黄素Y=35.906x+0.9923，1.29～41.40μg ·mL -1，r=1；大黄酚Y=52.149x+3.8537，2.12～67.93μg ·mL -1，r=1；大黄素甲醚Y=40.763x+0.5908，0.69～22.06μg ·mL -1，r=1。
2.7 定量限将对照品溶液稀释进行测定，芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的定量限分别为0.92、1.59、1.48、0.71、0.78ng。
0 引言一种保健食品减肥片由制大黄、泽泻等有效成分组成，具有辅助减肥的保健功能。
其中制大黄含蒽醌类化合物，具有多种活性[1-3]。
本试验采用HPLC 法建立了总蒽醌5个成分的含测方法，结果表明此法专属性、重复性好，为大黄类保健食品的质量标准研究提供了依据。
1 仪器与试剂Agilent 1200液相色谱仪，芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚均购自中国食品药品检定研究院，甲醇、乙腈为色谱纯。
高效液相色谱法测定益之康胶囊中总蒽醌(大黄素和大黄素甲醚)的含量
２ ． Ｚ ｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｆ ｏ ｒ Ｆ ｏ ｏ ｄ ａ ｎ ｄ Ｄ ｒ ｕ ｇ Ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ， Ｈ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ３ １ ０ ０ ５ ２， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ） Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ Ｈ ｉ ｇ ｈ Ｐ ｅ ｆ ｒ ｏ ｒ ｍ ａ ｎ ｃ ｅ Ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ Ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ（Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ）ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏｒ ｄ ｅ ｔ ｅ ｍｉ ｒ ｎ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ
ｉ ｎ Ｙｉ ｚ ｈ ｉ ｋａ ｎｇ ｃ ａ ｐｓ ｕ ｌ ｅ ｂｙ ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｎｃ ｅ ｌ ｉ ｑｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐｈ ｙ
Ｓ ＨＯＵ Ｌ Biblioteka ｎ — ｊ Ｉ ｌ Ｉ Ｉ ， Ｃ ＨＥ Ｎ Ｇ Ｑｉ ａ ｏ — ｙ ｕ ａ ｎ 。 ， Ｈ ＵＡ Ｎ Ｇ Ｌ ｉ ｕ — ｑ ｉ ａ ｎ ， Ｚ ＨＯＵ Ｍｉ ｎ ｇ — ｈ ａ ｏ （ １ ＿ Ｚ ｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ｃ ａ ｌ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ， Ｈ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ３ １ ０ ０ １ ４ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ；
保健食品中总蒽醌的测定
保健食品中总蒽醌的测定1 仪器及试剂1.1仪器(1 分析天平(感量0.00001g ;(2 分光光度计(751型;(3 水浴锅;(4 刻度吸管。
1.2试剂1.2.1对照品:1, 8-二羟基蒽醌(中国生物制品鉴定所;1.2.2 5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液:10%氢氧化钠溶液与4%氢氧化铵溶液等量混合;1.2.3标准品溶液:精密城区25mg 1, 8—二羟基蒽醌对照品,置200ml 容量瓶中, 用乙醚溶解并稀释至刻度,摇匀,备用;1.2.4氯仿;1.2.5乙醚;1.2.6 5N 硫酸;1.2.7蒸馏水。
2 测定步骤中2.1标准曲线的绘制:精密量取上述标准溶液1ml 、2ml 、3ml 、4ml 、5ml , 分别至于25ml 容量瓶中,在水浴上挥净乙醚,放凉,分别加5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液至刻度,摇匀,以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照,在490nm 下,以1cm 比色杯测定吸光度,用回归法求标准曲线方程。
2.2供试品溶液的制备及总蒽醌含量的测定:取本品50粒, 倾出内容物, 精密称定供试品内容物3g , 于250ml 烧瓶中,加5N 硫酸45ml ,直火加热水解2h ,加入氯仿40ml ,萃取3次(40ml , 30ml , 30ml ,萃取液用蒸馏水洗涤2次(20ml , 20ml ,再用5% 氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取4次(30ml , 20 ml , 20ml , 20ml ,合并萃取液,用氯仿洗涤数次至氯仿层无色,弃去氯仿层,用5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液定容至100ml ,摇匀,以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照,在490nm 下,以1cm 比色杯测定吸光度,由线性方程计算即得供试品溶液的浓度。
2.3结果计算:C1( μ g/ml ×5ml ×100mlC2 =———————————— ×( μg/100mgm ×10C=C2×1×100(g/Kg式中C :1kg 分析样品中含蒽醌量(gC2:100mg 分析样品中含蒽醌量( μgC1:由回归方程计算所得5ml 容量瓶中蒽醌的浓度( μ g/mlM : 所用分析样品的重量(g蒽醌类化合物按结构的不同可分成羟基蒽醌类、氧化蒽酚及蒽酚类、二蒽酮类。
减肥类保健食品中总蒽醌限量要求分析
Analysis of Limit Requirements of Total Anthraquinone Content in HealthWeight-reducing FoodHUANG Yuan 1，LüXi-yuan 2（1.Liaoning Inspection,Examination &Certification Centre ，Shenyang 110036，China ；2.Liaoning Institute of Standardization ，Shenyang 110004，China ）Abstract ：By comparing the dosage of traditional Chinese medicine with anthraquinone compounds as the main component in the Chinese Pharmacopoeia with that of traditional Chinese medicine preparations ，and studying the mechanism of anthraquinone compounds metabolizing through the intestine ，preliminary discussion on the limit requirements of total anthraquinone content in weight-reducing food ，to provide reference for the formulation of limit standards for anthraquinone components in weight-reducing food.Key words ：weight-reducing food ；anthraquinone ；limit standard减肥类保健食品中总蒽醌限量要求分析黄媛1，吕锡源2（1.辽宁省检验检测认证中心，辽宁沈阳110036；2.辽宁省标准化研究院，辽宁沈阳110004）【摘要】通过比较《中国药典》中以蒽醌类化合物为主要成分的中药材与中药制剂的用量，以及研究蒽醌类化合物经肠道代谢的作用机制，初步探讨减肥类保健食品中总蒽醌含量的限量要求，为减肥类保健食品中蒽醌类成分限量标准的制定提供参考。
紫外-可见分光光度法测定保健食品口服液中总蒽醌的含量
紫外-可见分光光度法测定保健食品口服液中总蒽醌的含量Ultraviolet-visible Spectrophotometry to Determine the Content of Anthraquinone in HealthyFood Oral Liquid◎ 郭丽仪1,2,3，梁咏瑜1,2,3（1.广东省质量监督食品检验站，广东 广州 510308；2.广东省食品工业研究所，广东 广州 510308；3.广东省食品工业公共实验室，广东 广州 510308)Guo Liyi 1,2,3，Liang Yongyu 1,2,3(1.Guangdong Food Quality Supervision and Inspection Station, Guangzhou 510308, China;2.Guangdong Food Industry Institute, Guangzhou 510308, China;3.Guangdong Provincial Food Industry Public Laboratory, Guangzhou 510308, China)摘 要：建立保健食品口服液中总蒽醌含量的紫外-可见分光光度测定方法。
通过单因素实验和正交实验对影响测定总蒽醌含量关键点进行分析，在520 nm 波长处测定吸收度，平均加标回收率为105.25%。
对实验中各个关键点进行了细化，方法简单，有较好的适应性，适用于保健食品口服液中总蒽醌的测定。
关键词：总蒽醌；可见分光；保健食品Abstract：To establish a UV-Vis spectrophotometric method for the determination of total anthraquinone in health food oral liquid. Methods The single factor experiment and orthogonal experiment were used to analyze the key points of total anthraquinone content. The absorbance was measured at 520 nm, and the average recoveries were 105.25%. The key points in the experiment were refined, the method was simple and the adaptability was applied to the determination of total anthraquinone in oral liquid of health food.Key words：Total anthraquinone; Visible spectroscopy; Health food 中图分类号：R155.5蒽醌类化合物是大黄、何首乌、芦荟和決明子等中草药的功效成分，具有抑菌、利尿、泻下、抗癌等作用[1-2]，广泛应用于保健食品中。
中蒽醌的含量
中蒽醌的含量测定及其重要性中蒽醌是一类具有显著生物活性的化合物，广泛存在于植物、微生物和动物体内。
由于其独特的化学结构和药理作用，中蒽醌在医药、保健品、化妆品等领域具有广泛的应用价值。
因此，准确测定中蒽醌的含量对于保证产品质量、确保用药安全以及推动相关领域的科学研究具有重要意义。
一、中蒽醌的含量测定方法目前，测定中蒽醌含量的方法主要有重量法、荧光法、比色法、极谱法、薄层扫描法、高效液相色谱法等。
其中，高效液相色谱法（HPLC）因具有分离效果好、灵敏度高、重现性好等优点而被广泛应用。
该方法通过色谱柱将样品中的各组分分离，然后利用检测器对分离后的组分进行检测，最后根据标准曲线计算中蒽醌的含量。
在HPLC法中，选择合适的色谱柱、流动相以及检测波长是关键。
常用的色谱柱为C18柱，流动相为甲醇、乙腈等有机溶剂与水按一定比例混合的溶液。
检测波长的选择则根据中蒽醌的紫外吸收特性来确定，一般在200-400nm范围内。
此外，为了提高测定的准确性和重现性，还需要对样品进行适当的前处理，如提取、纯化等。
二、中蒽醌含量测定的应用1. 医药领域：中蒽醌具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用，因此在医药领域具有广泛的应用。
准确测定药物中中蒽醌的含量，对于保证药物疗效、控制药物剂量以及确保用药安全具有重要意义。
例如，在研发新药时，需要通过含量测定来评估药物的活性成分含量；在生产过程中，需要通过含量测定来控制药物的质量；在临床用药时，医生需要根据药物中中蒽醌的含量来确定用药剂量。
2. 保健品领域：中蒽醌作为一种天然活性成分，也被广泛应用于保健品中。
在保健品中添加适量的中蒽醌可以增强产品的保健功能，如抗氧化、抗衰老等。
因此，准确测定保健品中中蒽醌的含量对于保证产品质量和功效具有重要意义。
同时，含量测定还可以用于评估不同来源、不同生产工艺的保健品中中蒽醌的含量差异，为消费者提供更多选择。
3. 化妆品领域：中蒽醌在化妆品领域也有广泛的应用，主要用于美白、祛斑等方面。
分光光度法测定保健茶中总蒽醌含量
裹６ ｏ 鼻 胶羹 果 ３ 讨 论 １批 潮 含量 定结
Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ
３
Ｏ Ｏ
Ｏ
Ｏ
Ｏ
Ｏ
序 大 蓉 量孔 ３ 对茜 大叶 素 号 产 ． 嬲 ∞ １ 草中 茜草
４ ３ ２ ８ ７ ８ ９ ８ ３
取 同一 批样 品溶 液 １ 于 ｏ ２ Ｏ１ 、、
ｌ６８ ｌ 、 ｈ进 样 ， 别测 定 峰 面 积 ， 果 Ｒ Ｄ 为 ０ ５ ６ 、 分 结 Ｓ ． ３／ ９
减 少 大 叶 茜 草 素 的 保 留 时
间。
２７ 精 密度试验 ．
衰 。 精 密 度 试 验 结 果
取 大 叶 茜 草 素对 照 品 溶 液 连 续
分 光 光 度 法 测 定 保 健 茶 中 总 蒽 醌 含 量
郑 娟（ 福建 省 医药 工 业公 司 福 州 ３ ０ ０ ） ５ ０ ３
摘要： 目的 测定保健茶 中总葸醌含量。 法 用分光光度法在 ５ ０ ｍ 处进行测定 。 果 最 大变异 系数 为 １ １ ． 方 ２ｎ 结 ． 加标回收率 为 ９ ． ３ ４３ ％
１ ２ ３ ４ Ｓ ６ ７ ８ ９
圈 １ 标 准 曲线 图
根 据 实验 结 果 鼻 渊胶 囊 中大 叶茜 草 素 的含 量 应 不 小
于 ０２ ｇ粒。 ．ｒ ／ ａ
峰 面 积
表 ２ 对 照 品 峰 面 积 对 照 品 浓 渡 腿 ・ｍｒ ＿
２ ． Ｏ ２
０ ７ ６ ． １ ２ ０ ８ ８ ． ０ １ ４ ０６ ． ８ ９ ． ４ ７ １
０ ７ １ ． Ｏ ０ Ｏ ６ ８ ． ７ ５ ０ ７ ０ ． ２ ６
０ ６ ８ ． ５ ５
０ ８ ８ ． ０ ０ ６ ６ ． ０ ０ ６ ６ ． ０
保健食品中6种蒽醌类成分的测定
分析与检测保健食品的本质是一种特殊的食品，适合特定人群食用，具有调节身体的功能，不以治愈疾病为目的，并且不会对人体产生任何急性、亚急性或者慢性危害。
随着生活条件的改善，保健食品的需求逐年增加，具有减肥或润肠通便功能的保健食品也越来越受到消费者的青睐。
其中以植物及其加工品为主要原料的保健食品以安全性高、药用价值高、机体作用明显的特点，占有大部分保健食品市场。
蒽醌类化合物是减肥保健食品中最主要的功效成分或标志性指标，具有清热泻火、凉血解毒、抗菌消炎、抗病毒、抗癌、抗衰老、抗诱变、保肝利胆等作用[1-2]，近年来，此类化合物引起了越来越多的关注。
但是，过量食用也可能对人体造成严重伤害。
根据德国联邦公告，含蒽醌的植物泻药可能具有遗传毒性和致瘤作用，长期使用会引起水、盐代谢和肠道功能障碍[3]。
《保健食品理化及卫生指标检验与评价技术指导原则》（2020年版）中只规定了保健食品中芦荟苷的测定方法，没有针对蒽醌类成分的测定方法，因此有必要建立准确测定保健食品中主要的蒽醌类化合物的含量的方法，以限定熟大黄、制大黄、生何首乌、芦荟、番泻叶和决明子等中草药在保健食品中的使用，该方法操作简便，可快速、准确、有效检测此类化合物，为评估保健食品的质量提供参考。
1 实验材料与方法1.1 主要试剂标准品：芦荟苷、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚和大黄素甲醚（批号分别为：110787-201507、110756-201512、110795-201609、110757-201607、110796-201621和110758-201616）；标准物质来源：中国食品药品检定研究院。
磷酸（H3PO4）、盐酸（HCl）、乙酸（CH3COOH）、甲醇（CH3OH）、醋酸铵（CH3COONH4）等试剂均为色谱纯，实验用水为超纯水。
试样：市面出售的5批具有减肥功效的保健食品。
1.2 主要仪器Agilent 1260 高效液相色谱仪；Sartourious BT125D型电子天平；Elmasonic E60H 超声波提取器。
减肥类保健食品中总蒽醌的测定
蒽醌类化合物在百合科的芦荟尧豆科的决明子和番泻叶中有较高含量[1]袁各种蒽醌及其苷都具有多方面的生物活性袁重要的是致泻和抗菌作用[2]遥许多保健食品如减肥茶尧降脂胶囊和芦荟制品都含有蒽醌类物质袁总蒽醌在减肥产品中的主要起泻下作用袁但是蒽醌类化合物袁也有一定的副作用袁剂量过大会引起胃肠的各种不适遥严重的可能会导致胃肠出血尧呼吸困难尧心悸[3-4],故而蒽醌类成分的保健食品的质量控制十分重要遥其含量测定方法有重量法尧荧光法尧高效液相色谱法尧超临界流体萃取法等遥目前保健食品中总葸醌含量检测还没有国家标准方法袁本文参照保健食品生产企业提供的方法并对其进行优化袁制定出更为合理可控的检测方法遥由于蒽醌苷元是一个极性大的物质袁先将蒽醌用酸水解成极性较小游离蒽醌后袁根据野相似相溶冶原理袁选择极性较小的溶剂或溶剂系统为提取剂[5]遥1试剂与仪器1.1试剂1,8-二羟基蒽醌对照品袁批号院10120222袁纯度院98%袁上海同田生物技术有限公司乙醚尧冰醋酸尧盐酸尧氢氧化钠尧氨水袁均为AR级混合碱溶液院10%NaOH与4%氨水等量混合混合酸溶液院25%盐酸2ml加冰醋酸18ml1.2实验仪器电子分析天平型号院XP205袁梅特勒-托利多仪器渊上海冤有限公司紫外可见分光光度计型号院UV-2450袁日本岛津数显恒温水浴锅型号院HH-6袁国华电器有限公司2实验方案2.1样品测定精密称取样品100mg袁置于100ml圆底烧瓶中袁加混合酸溶液6ml摇匀袁在沸水浴中回流15min袁放冷袁加乙醚30ml提取袁提取液通过脱脂棉滤入分液漏斗中袁继续用乙醚洗涤残渣两次袁每次5ml袁药渣再加混合酸4ml袁在沸水浴中回流15min袁放冷袁加乙醚20ml提取袁用乙醚洗涤残渣两次袁每次5ml袁合并乙醚液遥用30,20ml振摇洗涤两次袁弃去水洗液遥乙醚液用混合碱液50,20,20ml提取三次袁合并碱提取液袁置100ml容量瓶中袁加混合碱液定容袁混匀遥取约50ml置锥形瓶中袁称重袁置沸水浴中回流30min袁冷却袁称重袁补加10%氨溶液到原来的重量袁混匀袁525nm测定吸光度遥2.2标准曲线的制备精密称取1.8-二羟基蒽醌对照品9.32mg袁加冰乙酸溶解并稀释至10mL袁分别吸取上述标准液0.10ml尧0.20ml尧0.30ml尧0.40ml尧0.50ml尧0.60ml尧0.70ml置于50ml容量瓶中袁用混合碱液定容袁于暗处放置30min袁以混合碱液为空白袁于525nm处测定吸光度遥以吸光度为横坐标袁浓度为纵坐标袁绘制标准曲线遥3结果与讨论3.1混合酸比例的优化分别用100%冰醋酸袁25%盐酸院冰醋酸渊1:19冤袁25%盐酸院冰醋酸渊1:9冤袁25%盐酸院冰醋酸渊1:4冤袁25%盐酸院冰醋酸渊1:1冤袁25%盐酸6种混合酸进行水解遥结果见表1遥表1不同混合酸比例下的提取结果由表2可知袁当单纯为冰醋酸或25%盐酸时袁水解效果均不理想袁而采用混合酸时水解效率大大提高袁故选择25%盐酸院冰醋酸渊1:9冤作为混合酸比例遥3.2水解时间的优化分别使用10尧20尧30尧45尧60尧90分钟的水解时间袁结果见表2遥表2不同酸水解时间下的提取结果随着水解时间的增加袁样品所测得的总蒽醌浓度也随之相应增加遥说明水解时间按对蒽醌的水解有较大的影响袁提取时间在10耀30min之间呈直线上升趋势袁而到了30min之后袁随着提取时间的增加袁总蒽醌浓度没有明显增加袁因此合适的水解时间为30min遥3.3线性范围1,8-二羟基蒽醌在525nm袁浓度1.864耀13.048ug/ml范围内线性关系良好减肥类保健食品中总蒽醌的测定吴聿玫福建省药品检验所福州350001摘要院目的院建立适用性强袁可操作性强及具有可靠性的总蒽醌测定方法遥方法院样品经混合酸水解后采用乙醚提取袁在碱性溶液中处理后用紫外分光光度法进行测定遥结果院回收率为97.5%耀100.1%袁精密度RSD0.90%遥结论院应用本方法检测5种含蒽醌的减肥类保健食品袁方法操作简单可行袁重现性好遥关键词院总蒽醌曰减肥类保健食品曰分光光度法线性方程院y=0.051x+0.002袁R 2=0.9997遥3.4回收率实验分别称取5批已测知含量的样品进行加标实验袁测得回收率范围在97.5%耀100.1%袁RSD 范围在1.33%耀1.59%袁表明该方法准确度良好袁结果见表3遥表3回收率试验3.5精密度试验精密称取批号20100602样品6份袁测得含量袁RSD 为0.90%袁结果见表4遥表4精密度试验结果3.6稳定性试验分别于0min袁5min袁10min袁20min袁30min袁60min袁90min 测定样品溶液吸光度袁结果表明袁显色产物在90min 内稳定,RSD 为0.17%遥讨论院参考文献院[1]段淑娥袁李敏.中草药中蒽醌化合物的研究进展[J].西安文理学院学报,2005(8):24-28.[2]刘晓燕袁曹祥燃.保健食品中总蒽醌测定方法的研究[J].公共卫生与预防医学,2006(6):43-43[3]李慧敏袁李伟.紫外分光光度法测定润肠通便类保健食品中总蒽醌的含量[J].中南药学,2012(12):27-29[4]封淑华袁韩桂茹袁冯丽.酸水解条件对大黄及其制剂中蒽醌类成分含量的影响研究[J].中成药,2010(07):33-35[5]蔡晓袁李宏.紫外分光光度法测定保健食品中总蒽醌的含量[J].中国食品卫生杂志,2007(19):47-48作者简介院吴聿玫性别院女袁福建省福州市人袁1985年出生袁学历院本科职称院助理工程师福建省药品检验所袁研究方向院生物科学与工程。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
保健食品中总蒽醌的测定
1 仪器及试剂
1.1仪器
（1）分析天平（感量0.00001g）；
（2）分光光度计（751型）；
（3）水浴锅；
（4）刻度吸管。
1.2试剂
1.2.1对照品：1，8-二羟基蒽醌（中国生物制品鉴定所）；
1.2.2 5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液：10%氢氧化钠溶液与4%氢氧化铵溶液等量混合；
1.2.3标准品溶液：精密城区25mg 1，8—二羟基蒽醌对照品，置200ml容量瓶中，用乙醚溶解并稀释至刻度，摇匀，备用；
1.2.4氯仿；
1.2.5乙醚；
1.2.6 5N硫酸；
1.2.7蒸馏水。
2 测定步骤中
2.1标准曲线的绘制：精密量取上述标准溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别至于25ml容量瓶中，在水浴上挥净乙醚，放凉，分别加5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液至刻度，摇匀，以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照，在490nm下，以1cm比色杯测定吸光度，用回归法求标准曲线方程。
2.2供试品溶液的制备及总蒽醌含量的测定：取本品50粒，倾出内容物，精密称定供试品内容物3g，于250ml 烧瓶中，加5N硫酸45ml，直火加热水解2h，加入氯仿40ml，萃取3次（40ml，30ml，30ml），萃取液用蒸馏水洗涤2次（20ml，20ml），再用5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取4次（30ml，20 ml ，20ml，20ml），合并萃取液，用氯仿洗涤数次至氯仿层无色，弃去氯仿层，用5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液定容至100ml，摇匀，以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照，在490nm下，以1cm比色杯测定吸光度，由线性方程计算即得供试品溶液的浓度。
2.3结果计算：
C1（μg/ml）×5ml×100ml
C2 =————————————×（μg/100mg）
m ×10
C=C2×1×100(g/Kg)
式中
C：1kg分析样品中含蒽醌量（g）
C2：100mg分析样品中含蒽醌量（μg）
C1：由回归方程计算所得5ml容量瓶中蒽醌的浓度（μg/ml）
M：所用分析样品的重量（g）
蒽醌类化合物按结构的不同可分成羟基蒽醌类、氧化蒽酚及蒽酚类、二蒽酮类。
目前其提取方法主要采用溶剂提取法，如浸渍、渗漉、连续回流提取等方式，所用的溶剂主要有乙醇、甲醇、氯仿、乙醚、苯、石油醚、吡啶、丙酮、硫酸溶液、盐酸溶液及氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化铵等溶液。
其含量测定方法有重量法、荧光法、比色法、极谱法、薄层扫描法、高效液相色谱法等，而单味植物药或其复方制剂中的蒽醌化合物含量，一般以大黄素或大黄酸、1，8-二羟基蒽醌为标准测定游离蒽醌或总蒽醌，结合蒽醌的量等于总蒽醌减去游离蒽醌。
1 比色法
根据蒽醌类及其苷大多数是黄色或橙红色的，羟基蒽醌能溶于碱溶液中而显红或紫红色；蒽酚和二蒽醌与碱液不显红色，只能呈黄色，需经氧化成羟基蒽醌后才与碱作用显红色；羟基蒽醌类因结构不同与醋酸镁的
甲醇溶液反应可显橙、红、蓝、紫等色的性质而比色测定。
1.1 标准曲线的绘制：取经五氧化二磷干燥24 h的大黄素(或大黄酸、1，8-二羟基蒽醌)对照品适量用碱液(1 mol/L 氢氧化钠溶液或其与2%氢氧化铵溶液的混合溶液)或0.5%～1%醋酸镁甲醇溶液定溶，在500～550 nm波长处扫描，在最大吸收波长处测定吸收度，以吸收度对浓度绘制标准曲线，线性范围4～24 μg/ml。
1.2 游离蒽醌的测定：取药物细粉或其制剂粉末适量(约相当于游离蒽醌1.5 mg)加乙醚(或氯仿)溶解或用索氏提取器回流提取至提取液无色。
将乙醚挥干，残渣用甲醇溶解，加醋酸镁甲醇溶液至定容；或将乙醚提取液移入分液漏斗中，用碱液提取并定容[1]，比色测定，依标准曲线计算含量。
1.3 总蒽醌的测定
1.3.1 先水解后提取：取供试品适量(约相当于总蒽醌1.5 mg)，用酸液(1～7.5 mol/L硫酸溶液或1.5～6 mol/L盐酸溶液)20～30 ml[2，3，4]，水浴回流1～2 h，以使结合态的蒽醌苷水解，使蒽醌游离，再用乙醚(或氯仿)萃取，并将过滤的药物残渣及滤纸经50℃干燥后用乙醚回流提取，待索氏提取器内提取液无色，合并乙醚液，照游离蒽醌测定法测定。
对含还原型蒽酮苷(如番泻苷)的样品，根据其可被三氯化铁氧化，酸水解成氧化型蒽醌苷元这一原理，称取供试品适量，加水30 ml超声处理15～30 min(提高溶解、提取效率，大大缩短溶解、提取时间)，加10.5%三氯化铁溶液20 ml，回流20～60 min[3]，再加盐酸1～3 ml继续回流30 min，放冷，再进行萃取与测定。
因蒽醌类与碱液显色后，过氧化氢不能使其褪色，而其它有色物质可被其氧化褪色的原理，对含有干扰测定成分的碱萃取液[2]，加1%过氧化氢溶液少量，在沸水浴中加热4 min氧化，冷却，定容，比色测定。
1.3.2 先提取后水解：取供试品适量，加甲醇(或乙醇、氯仿等)，对含蒽醌的浸膏制剂，超声处理30 min[5]，使溶解，对含蒽醌的原植物药粉末制剂，应置索氏提取器中回流提取，至提取液无色，将甲醇回收至干，残渣用酸液水解，乙醚(或氯仿)萃取，依法测定。
如果对以上检测方法不满意，可以查阅药典上的检测方法。