第三讲 细胞相关生物学行为分析方法2003
细胞和组织的力学行为研究

细胞和组织的力学行为研究近年来,细胞和组织的力学行为研究备受关注。
这是因为了解细胞和组织的力学行为,可以为生物医学领域、材料科学领域等带来更多的应用。
细胞是构成生物体的最基本单位,是生物学、医学、生物工程学、生物物理学和生物化学研究的重要对象。
同时,细胞的力学行为是一种非常重要的现象。
由于细胞膜和细胞壁非常薄,所以细胞的强度极大程度上依赖于细胞的形态和内部结构。
然而,由于细胞和组织非常复杂,并且在生理的和病理的条件下可能发生各种不同的行为,研究这些问题是一项复杂而耗时的任务。
但是,通过这些研究,我们不仅可以深入了解生物学和医学,而且可以更好地开发出适合临床应用的技术和方法。
细胞力学的研究表明,细胞的力学特性可以被用于判断细胞的形态和内部结构,同时也反映了细胞对外界环境的响应。
因此,我们可以利用这些特性来研究不同类型的细胞和病理状态下的细胞行为。
例如,肿瘤细胞在生长和扩展方面具有不同的力学特性,这使得研究肿瘤生长和扩展的力学特性成为肿瘤研究的重要方向之一。
除了细胞力学,研究组织力学行为也是非常重要的。
由于生物组织是由细胞、基质和其他生物分子组成的,因此组织的力学行为更加复杂,并且更容易收到内部和外部因素的影响。
在过去的几十年里,研究者一直在努力探索组织特性与构成因素之间的关系。
乳腺组织的力学行为研究就是一个例子。
乳腺组织是乳房的主体,由包含脂肪细胞、纤维和乳腺小叶等组织构成。
乳腺组织的力学行为具有与乳腺癌、良性乳腺疾病以及女性健康相关的重要意义。
研究表明,乳腺小叶的组织特性可以用于检测与乳腺癌有关的组织生理变化。
这种力学行为变化的监测不仅可以发现乳腺癌的早期病变,还能指导乳房保护性手术等医疗手段的应用。
细胞和组织力学行为的研究不仅对生物医学有着重要的应用,同时也与材料科学密切相关。
由于细胞和组织的力学行为具有诸多复杂的特性,这些特性可以被用于设计和开发出新的生物材料,并且也可以推动新材料的小尺度力学研究。
常见的生物研究方法
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常见的生物研究方法目录1. 常见的生物研究方法概述 (2)1.1 定义和意义 (3)1.2 分类和特点 (4)2. 实验法 (5)2.1 实验室操作 (6)2.2 动物实验 (7)2.2.1 小鼠实验 (8)2.2.2 大鼠实验 (10)2.2.3 其他动物实验 (11)2.3 植物实验 (12)2.3.1 水培实验 (13)2.3.2 土壤实验 (15)2.3.3 其他植物实验 (16)3. 观察法 (17)3.1 直接观察法 (18)3.2 间接观察法 (19)4. 统计学方法 (20)4.1 描述性统计分析 (21)4.2 推断性统计分析 (23)5. 分子生物学技术 (24)5.1 DNA测序技术 (25)5.2 RNA测序技术 (27)6. 细胞学方法 (28)7. 生物信息学方法 (29)7.1 DNA序列分析 (30)7.2 RNA序列分析 (31)8. 其他方法 (32)8.1 建立模型方法 (34)8.2 采用计算机模拟的方法 (35)1. 常见的生物研究方法概述生物学研究是一门涉及广泛领域的科学探索,其研究方法多种多样,根据研究目的、研究对象和研究阶段的不同,选择合适的研究方法至关重要。
常见的生物研究方法主要包括观察法、实验法、文献研究法、数学建模法和生物信息学方法等。
这些方法在生物学研究中各有特色,为揭示生命的奥秘提供了有力的工具。
观察法是生物学研究中最基本的方法之一,通过对生物体行为、形态结构、生理生化等方面的观察,为后续的研究提供基础。
实验法则是通过控制实验条件,对生物体或生物过程进行干预,探究变量之间的关系,验证假说。
文献研究法则是对前人研究成果的梳理和分析,为新的研究提供理论依据和参考。
数学建模法利用数学模型对生物现象进行模拟和预测,有助于理解复杂的生物系统和过程。
生物信息学方法则运用计算机技术和数据分析手段,对生物数据进行分析和挖掘,为生物学研究提供新的视角和方法。
细胞形态学研究方法及应用
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细胞形态学研究方法及应用细胞形态学是研究细胞形态、结构和功能的学科,是现代生物学领域中至关重要的一部分。
随着科学技术的不断进步,研究人员不断开发出各种先进的方法来更深入地了解细胞的结构和功能,并将这些方法应用于医学、生物学和生物工程等领域。
一、光学显微镜光学显微镜是最基本的细胞形态学研究工具之一。
通过透射或反射光学系统观察标本,可以清晰地观察到细胞的形态和结构。
近年来,随着荧光显微镜技术的发展,研究人员可以利用荧光标记技术观察细胞内特定分子的位置和运动,从而更深入地研究细胞功能。
二、电子显微镜电子显微镜是一种分辨率更高的显微镜,能够观察到细胞内部的超微结构,如细胞器、细胞核和细胞膜等。
透过电子束照射样品,利用电子透镜和电子探测器来获取高分辨率的图像。
电子显微镜为研究细胞的亚细胞结构提供了强大的工具,对于研究细胞器的功能和相互关系具有重要意义。
三、原位杂交技术原位杂交技术是一种用来检测细胞中特定DNA或RNA序列的方法。
通过将标记有荧光或放射性同位素的探针与待检测的细胞样品杂交,可以在细胞内直接观察到目标序列的位置和数量,从而研究基因表达和基因组结构的变化。
四、免疫组化技术免疫组化技术是利用抗体与特定蛋白质结合的原理,通过染色或荧光标记来检测细胞内特定蛋白质的存在和分布。
这种技术可以用来研究细胞的功能、细胞周期和细胞信号传导等重要生物学过程,也常用于临床诊断和治疗。
五、细胞流式仪细胞流式仪是一种高通量的细胞分析技术,可以快速准确地分析大量细胞的形态、大小、表面标记和内部结构等特征。
通过流式细胞仪,研究人员可以对细胞群体进行精细的表征和分选,从而深入研究细胞的功能和代谢状态。
细胞形态学研究方法的不断进步和应用拓展,为人类对细胞生物学的理解提供了强有力的支持。
这些方法的发展不仅推动了基础科学的进步,也为生物医学领域的诊断和治疗提供了新的思路和手段。
随着科学技术的不断发展,相信细胞形态学研究将在更广泛的领域发挥出更多的作用,为人类健康和生命科学的发展作出更大的贡献。
第三讲-细胞相关生物学行为分析方法
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Anti-Brdu
DAPI
9
一、细胞增殖动力学检测方法
单个细胞在体外持续生长,其后代所形成的细胞群称为克隆或集落。 该方法可对单个细胞的增殖潜力做定量分析,也常用来确定抗癌药物 对肿瘤的杀伤能力。常用的方法包括平板集落形成实验(贴壁细胞) 和软琼脂集落形成实验(悬浮细胞)。
CFU-E
10
CFU-GM
一、细胞增殖动力学检测方法
结晶紫染色 Crystal violet
11
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
二、细胞凋亡(apoptosis)检测技术
细胞死亡有两种不同形式,即细胞坏死(necrosis)和细胞凋亡(apoptosis)。细胞 坏死是由外界因素导致的细胞急速死亡;凋亡是细胞在生理(physiological)或 病理(pathological)条件下由基因(gene)调控的死亡过程。细胞凋亡过程中膜 结构完整(integral membrane),染色体DNA断裂(DNA fragmentation),细胞膜 包裹这核碎片形成凋亡小体(apoptosis body)。 凋亡在胚胎发育、成年阶段衰老、病变细胞的清除发挥着重要的作用,也是 研究药物作用机理和进行药物筛选的的重要手段。
特点:快速,准确,可一次处理多个样品。由于脱氢酶非细胞数量的直接 表征,常被审稿人诟病。
类似方法:WST、MTS、XTT、CCK8等5 。
一、细胞增殖动力学检测方法
XTT法原理:XTT是异种与MTT类似的四唑氮衍生物,可被活细胞线粒体脱氢 酶还原成水溶性的棕色(brown)甲肷产物,当XTT与电子耦合剂(PMS)共 同使用时,甲肷的生成量与细胞的增殖程度呈正相关。 MTS法原理:与MTT法原理类似。MTS是MTT的类似物,能被活细胞线粒 体中脱氢酶还原成可溶于水的有色产物甲臜盐,可直接进行比色。特点: 步骤相对MTT更简单,相对更准确。 WST-1法原理:与MTS原理类似。检测范围宽于MTT和MTS。 CCK8法原理:基于WST-8。在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体 内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物。颜色的深浅与细胞 的增殖成正比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞 数量。
中国2003年人类胚胎干细胞研究的伦理准则
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中国2003年人类胚胎干细胞研究的伦理准则一、引言随着生物医学技术的迅速发展,人类胚胎干细胞研究已成为生物医学领域的重要前沿。
为了确保人类胚胎干细胞研究的道德性和伦理性,中国政府于2003年制定了《人类胚胎干细胞研究的伦理准则》。
这一准则旨在规范和指导相关研究人员、医疗机构和伦理委员会的行为,确保研究活动遵循伦理原则,保护人类权益和尊严。
二、准则内容1.研究目的的正当性人类胚胎干细胞研究必须以医学、科学和人类福祉为目的,不得以商业、经济利益或非科学理由为驱动力。
研究项目必须具有科学性和可行性,符合人类健康和福祉的需求。
1.研究过程的规范性研究过程必须遵守国家法律法规和伦理规范,尊重人类受试者的权利和尊严。
研究人员必须经过严格培训和授权,具备相关专业知识和道德素养。
研究过程必须经过伦理审查和批准,确保符合伦理原则和法律规定。
1.胚胎使用的合理性使用人类胚胎进行干细胞研究必须符合伦理原则和法律规定。
胚胎来源应当合法、合规,不得使用非法的胚胎来源。
胚胎使用应当合理、节约和负责任,不得滥用或浪费资源。
1.知情同意的充分性研究过程中必须确保受试者知情同意的权利得到充分保障。
研究人员必须向受试者提供充分的信息,包括研究目的、方法、潜在风险和可能的受益等,并获得受试者的自愿同意。
受试者有权随时退出研究,且不会受到任何不利影响。
1.胚胎命运的公正性研究过程中必须确保胚胎命运的公正性。
胚胎应当得到平等、尊重和善待,不得被歧视或虐待。
研究人员必须遵守胚胎处理、储存和使用等方面的规定,确保胚胎的安全和福祉。
1.研究结果的公开性和共享性研究人员必须公开和共享其研究成果,推动科学进步和人类福祉。
研究成果应当经过同行评议和公开出版,不得隐瞒或私藏。
研究数据应当得到共享和合理使用,促进科学研究的发展和创新。
1.伦理审查的独立性和透明性伦理审查过程必须保持独立性和透明性。
伦理委员会应当由独立于研究人员的专业人士组成,对研究项目进行严格的伦理审查和监督。
336编号陈阅增普通生物学全部课件pdf
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01生物学基础知识Chapter01细胞是生物体的基本结构和功能单位,具有细胞膜、细胞质和细胞核等基本结构。
020304细胞膜是细胞的外层结构,具有选择透过性,能控制物质进出细胞。
细胞质是细胞内的胶状物质,包含各种细胞器和细胞内液。
细胞核是细胞的控制中心,含有遗传物质DNA,能指导蛋白质的合成。
细胞结构与功能02030401遗传与变异遗传是指生物性状从亲代传递给子代的现象,由遗传物质决定。
变异是指生物性状在亲代与子代之间或子代个体之间存在的差异。
基因突变是生物变异的根本来源,可导致生物性状的改变。
基因重组和染色体变异也可导致生物性状的改变,是生物多样性的重要原因。
生物进化与分类A B C D02生物多样性及其保护Chapter生物多样性概念及意义生物多样性定义生物多样性是指在一定时间和一定地区所有生物(动物、植物、微生物)物种及其遗传变异和生态系统的复杂性总称。
生物多样性包括遗传多样性、物种多样性和生态系统多样性三个层次。
生物多样性的意义维护生态平衡、促进科学研究、提供生物资源等。
生态系统结构与功能生态系统的组成01生态系统的结构02生态系统的功能03生物多样性保护策略就地保护迁地保护建立基因库加强教育和宣传03植物生理生态及应用Chapter呼吸作用的过程与类型介绍植物呼吸作用的过程,包括糖酵解、三羧酸循环和电子传递链等,阐述呼吸作用的类型和特点。
光合作用与呼吸作用的关系分析光合作用和呼吸作用在植物体内的相互联系和平衡,探讨环境因素对两者的影响。
光合作用的过程与机理磷酸化等过程,探讨光合作用的机理和影响因素。
植物光合作用与呼吸作用植物水分代谢与矿质营养植物水分代谢的过程与机理矿质营养的吸收与转运植物水分代谢与矿质营养的关系植物生长调节物质及其应用植物生长调节物质的种类与作用植物生长调节物质的应用技术植物生长调节物质的合成与代谢04动物生理生态及应用Chapter动物消化、呼吸与循环系统动物消化系统组成及功能口腔、食管、胃、小肠、大肠等消化器官的结构与功能,以及消化液分泌和食物消化吸收过程。
细胞信号通路的建模与分析方法
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细胞信号通路的建模与分析方法细胞信号通路是生物体内的一种重要的化学反应网络。
它通过化学信号在细胞之间进行传递,控制着细胞的生长、分化、凋亡和代谢等重要生物学行为。
对于细胞信号通路的研究,有助于我们更好地理解生物体的生命活动和发病机理,同时也有助于开发治疗疾病的精准药物。
在这篇文章中,我们将介绍细胞信号通路建模和分析的方法。
一、建立细胞信号通路模型的方法建立细胞信号通路模型的方法通常包括四个步骤:收集数据、确定关键信号分子、建立数学模型、校验模型。
1. 收集数据:收集信号通路相关的实验数据,包括信号分子之间的交互作用、信号转导的过程等等。
这些数据可以来自于文献综述、生物实验、基因组学数据等多种渠道。
2. 确定关键信号分子:根据收集到的数据,确定信号通路中的关键信号分子。
这些信号分子可以是蛋白质、配体、细胞因子等。
确定关键信号分子是细胞信号通路模型建立的基础。
3. 建立数学模型:根据收集到的数据和确定的关键信号分子,建立细胞信号通路的数学模型。
目前,常用的数学模型包括ODE 模型、网络模型、Boolean模型等。
其中ODE模型是最常用的模型,它可以精确地描述信号通路中信号分子浓度的变化和信号传递过程的动力学特性。
4. 校验模型:建立模型后,需要对模型进行校验。
校验模型可以通过实验数据验证模型的准确性和可靠性。
二、细胞信号通路模型的分析方法建立了细胞信号通路模型后,我们可以通过模型进行细胞信号通路的分析。
细胞信号通路模型的分析方法包括模型仿真、稳态分析、参数优化、灵敏性分析、控制分析等。
1. 模型仿真:模型仿真是指根据建立的细胞信号通路模型进行计算机模拟,以模拟信号分子的浓度变化和信号传递过程。
模型仿真可以帮助我们理解信号通路的动力学特性,预测不同条件下的信号分子浓度变化和信号传递过程等。
2. 稳态分析:稳态分析是指在信号通路系统达到平衡状态时,使用数学方法分析系统的性质,如稳定性、可达性、可观测性等。
细胞生物力学研究的方法与应用
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细胞生物力学研究的方法与应用细胞是生命的基本单位,理解细胞的力学特性对于揭示生命的奥秘具有重要意义。
因此,细胞生物力学成为现代生物学研究中的一个重要领域。
本文将探讨细胞生物力学研究的方法及其在生物学研究和医学应用中的意义。
1. 细胞力学的研究方法1.1 孤立细胞力学研究孤立细胞力学研究方法主要包括应用扭转矩法、拉伸法、压缩法等对单个细胞进行力学测试。
这些方法可以得到细胞的弹性模量、黏弹性特性、力学刚度等参数,从而揭示细胞结构与功能之间的关系。
1.2 细胞内部力学的研究细胞内部的力学状态对于维持细胞形态和功能至关重要。
通过使用纳米级力传感器,可以直接测量细胞内部的力学状态。
此外,近年来兴起的光学镊子和光学钳子技术,也为细胞内部力学的研究提供了新的手段。
1.3 细胞群体力学的研究除了单个细胞的力学性质,细胞群体组织的力学行为也是研究的重要方向之一。
通过应用细胞集群的硬度测量、纳米压痕等方法,可以揭示细胞集群的弹性、黏弹性和塑性等特性,深入理解细胞群体在生长、发育和组织形成过程中的力学行为。
2. 细胞生物力学研究的应用意义2.1 帮助解析疾病机理细胞生物力学研究可为疾病的发生和发展提供重要线索。
例如,癌细胞具有不同于正常细胞的弹性特性,研究细胞的力学变化可以用来识别和诊断癌症。
同时,研究细胞力学对于探索肿瘤细胞的侵袭和转移机制具有重要意义。
2.2 指导组织工程与再生医学细胞生物力学研究为组织工程与再生医学的发展提供了理论指导和技术支持。
通过在体外模拟细胞外基质条件,可以调控细胞的力学环境,进而指导干细胞分化、组织修复和再生。
此外,通过应用力学模型和仿真方法,可以优化组织工程材料的性能,提高修复效果。
2.3 引导药物筛选与递送细胞生物力学研究也可以用于药物筛选与递送领域。
通过测量药物对细胞力学的影响,可以评估药物的治疗效果和副作用。
同时,利用力学手段可以优化药物的递送方式,提高药物的局部浓度和效果。
2.4 推动器官功能研究细胞生物力学研究有助于了解不同组织和器官的功能特性。
王金发《细胞生物学》网络课件讲义全集
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王金发《细胞生物学》网络课件讲义全集课程学习:1.细胞概述>>目录1. 细胞概述1.1 细胞的发现及细胞学说的创立1.1.1 细胞的发现1.1.2 细胞学说(cell theory)的创立1.1.3 细胞学理论对细胞学发展的推动作用1.1.4 细胞生物学发展简史1.2 细胞的基本功能和特性1.2.1 细胞的基本功能1.2.2 细胞结构上的相似性1.2.3 细胞的形态1.2.4 细胞的大小及体积的恒定1.2.5 细胞及细胞器的计量单位1.3 细胞的分子基础1.3.1 水是细胞中最主要的物质1.3.2 无机盐1.3.3 小分子有机小分子1.3.4 生物分子的功能分类1.3.5 细胞结构体系的组装1.4 细胞的类型和结构体系1.4.1 原核细胞1.4.2 真核细胞的两种主要类型:动物细胞和植物细胞1.4.3 真核细胞的结构体系1.4.4 真核细胞与原核细胞的比较1.5 病毒--非细胞的生命体1.5.1 病毒是比细胞更小的生命体1.5.2 病毒的生活史1.6 细胞生命的进化1.6.1 细胞生命的起源与进化1.6.2 真核细胞的起源1.6.3 从单细胞向多细胞进化1.7 我国细胞生物学的发展战略1.7.1 细胞生物学的主要研究内容和发展方向1.7.2 我国细胞生物学发展战略学习指导课程学习:1.细胞概述>> 1.1.1 细胞的发现1. 细胞概述所有的生物都是由细胞(cell)构成的。
除了病毒、类病毒等是非细胞的生命体以外,其它生命有机体的结构和功能单位都是细胞。
细菌、酵母等微生物是以单细胞的形式存在,而高等动、植物则是由多细胞构成的,如人大约有3 ×1013个细胞,这些细胞组成不同的组织和器官。
研究细胞及其生物学功能的科学称为细胞生物学(cell biology)。
1.1 细胞的发现及细胞学说的创立第一个发现细胞的是英国学者胡克(Rorbert Hooke),相隔170多年后,德国植物学家施来登(Mathias Schleiden)和动物学家施旺(Theodor Schwann)创立了细胞学说。
2024年生物学培训资料
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探讨植物资源的合理利用途径和保护措施,包括药用植物、食用植物 、工业用植物等的开发与利用。
植物生长发育调控机制
植物生长物质
了解植物生长物质的种类、作用机制和应用,如生长素、 赤霉素等。
植物发育过程
研究植物从种子萌发到成熟衰老的发育过程及其调控机制 。
环境因子对植物生长的影响
探讨光、温、水、肥等环境因子对植物生长的影响及其调 控机制。
03
微生物学专题研究
微生物分类鉴定及资源利用
微生物分类
基于形态学、生理生化特性、遗传学等方法的微生物分类体系。
微生物鉴定
利用现代生物技术手段,如16S rRNA基因测序、MALDI-TOF MS等,对微生物进行快速、准确的鉴定。
微生物资源利用
挖掘微生物在工业生产、农业生产、医药等领域的应用潜力,如 利用微生物发酵生产抗生素、酶制剂等。
生态系统与环境保护
生态系统结构
生态系统包括生物群落和非生物 环境两大部分,二者相互作用构
成一个有机的整体。
生态平衡
生态平衡是生态系统通过自我调节 达到的一种动态平衡状态,反映了 生态系统的稳定性和可持续性。
环境保护
环境保护是人类为维护生态平衡和 自然环境所采取的各种措施的总称 ,包括污染防治、生态恢复和自然 资源保护等方面。
动物社会行为
阐述动物社会行为的类型和特征,如亲缘关系、领域性、等级制度 等,并分析其进化意义和生态作用。
动物学习行为
探讨动物学习行为的类型、机制和影响因素,如习惯化、模仿学习 、试错学习等,并分析其在动物适应环境中的作用。
动物生理机能及其调控机制
动物生理机能概述
介绍动物各器官系统的生理机能及其相互关 系,包括消化系统、呼吸系统、循环系统、 排泄系统、神经系统等。
细胞生物学教学教案设计完整版
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直观演示法实施
实验演示
通过实验演示,让学生直 观感知细胞生物学的实验 方法和操作过程。
模型展示
利用细胞模型、分子模型 等教具,展示细胞结构和 功能,增强学生对知识的 印象。
视频播放
播放相关视频资料,展示 细胞生物学的动态过程和 微观世界,提高学生的学 习兴趣。
小组讨论法组织
分组讨论
将学生分成若干小组,围绕细胞生物 学的相关问题进行讨论,促进学生之 间的交流与合作。
03
营造积极、和谐的课堂氛围,激发 学生的学习兴趣和参与度。
04
激励机制设置和奖惩措施执行
01
设立多种形式的奖励机制,如表扬、 加分、颁发证书等,以激发学生的
学习动力。
03
奖惩要公平、公正,避免主观臆断 和偏见。
02
对于表现不佳的学生,要采取适当 的惩罚措施,如扣分、警告等。
04
教师要及时兑现奖惩承诺,树立信 誉和威信。
情感态度表现(20%)
能力发展水平(30%)
包括实验操作能力、问题解决能 力和创新能力等。
包括学习态度、团队合作精神和 科学素养等。
其他(10%)
包括课堂表现、出勤率等。
知识掌握程度(40%)
包括书面测试成绩和作业完成情 况等。
注
具体比例可根据实际情况进行调 整和优化。
07
教材分析与选用建议
主流教材特点对比分析
案例分析
提供与细胞生物学相关的案例,让学生分析并解决问题。
归纳小结要点
总结细胞膜、细胞器、细胞核的结构和功能要点。 强调细胞增殖的方式和过程,以及其在生物体生长发育和遗传变异中的重要作用。
指出细胞生物学在现代医学、生物工程等领域的应用前景。
细胞生物学-第3章-细胞生物学研究方法(翟中和第四版)
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基础上,添加 “环状光阑”和
“相差板”,将光程差或相位差, 转换成振幅差。 • 这是在构造上,相差显微镜不同于 普通光学显微镜两个特殊之处。
体外培养MDCK 细胞在普通(明视场)光学显微镜(A) 和相 差显微镜(B)下拍摄图像效果的比较
(二)相差显微镜和微分干涉显微镜
(一)普通复式光学显微镜——样品制备
甲醛
石蜡
5μm
(二)相差显微镜和微分干涉显微镜
相差显微镜
发明: 1934~1935 荷兰物理学家Zernike 设计和发明相差显微 镜,并获得诺贝尔奖。
原理:利用光线干涉的原理把透过标本的可见光的光程差变 成振幅差,表现为明与暗的对比,从而提高了各种结构之间 的对比度,使标本的各种结构变得更清晰。
(Байду номын сангаас)荧光显微镜——基本原理
特点: 1. 利用汞灯或氙灯作为荧光激 发光源,波长较短,分辨 率高于普通显微镜; 2 . 核心部件是滤光片系统及专 用物镜镜头; 3. 滤光片系统由激发滤光片和 阻断滤光片组成。 应用: 对细胞内生物大分子进行 定性、定位研究。
520~560nm的 绿色荧光透过
阻断滤光片
用超速离心技术分离细胞组分
组织匀浆
差速离心
密度梯度离心
分离出各组分
用途:于分离细胞器与生物大分子及其复合物 差速离心:分离密度不同的细胞组分
密度梯度离心:精细组分或生物大分子的分离
二、细胞成分的细胞化学显示方法
• 显色剂与细胞组分中特殊基团的结合 • 通过显色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断蛋白质、 核酸、多糖和脂质在细胞中的分布和相对含量
福尔根反应 Feulgen stain
生物学习中的问题发现与解决方法
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生物学习中的问题发现与解决方法生物学习是一门博大精深的学科,涉及生活的各个层面。
从细胞到生态系统,从基因到行为,每一个生物都会在特定的环境中展现出独特的生命现象。
然而,学习生物的过程中难免会面临各种问题。
这些问题可能源于知识掌握的不牢靠、概念理解的偏差、学习方法的不当或外部因素的影响。
为了更好地掌握这门学科,可以通过有效的方法来发现并解决这些问题。
常见学习问题的识别生物学习中常见的问题可以大致分为三个类别:概念混淆:生物学中涉及的概念多而繁琐,例如光合作用与呼吸作用之间的关系,或是细胞膜的流动性和选择透过性。
错误的理解会导致知识的误用,进而影响后续的学习。
记忆问题:生物学中涉及大量的术语和过程,如基因的表达、细胞周期等。
部分学生往往感到难以记忆这些信息,导致对内容的表面理解而缺乏深刻的掌握。
应用能力不足:在面对真实世界的生物现象时,学生可能难以将课堂上学到的知识与实际问题联系起来。
这种缺乏应用能力的现象会让他们在实践中感到迷茫。
对这些问题的识别是解决问题的第一步。
通过自我反思、与同学讨论或向老师请教,可以帮助学生找到学习中的盲点和不足。
解决概念混淆针对概念混淆的问题,可以采用多种策略:图像化学习:对于复杂的生物过程,制作图示或思维导图可以有效帮助理解。
例如,绘制光合作用的流程图,标注各个步骤和相关因素,能够清晰展示过程的前后关联。
同义词联想:找到相关概念或术语的同义词,建立关联。
有时把复杂的生物术语转化为更易理解的词汇,能够帮助学生在思考时简化过程,从而减少混淆。
例子分析:通过实际案例来强调抽象的概念。
比如,通过观察身边植物的生长与生理特点,来深刻理解光合作用的意义。
记忆生物术语和过程记忆生物学的术语和过程是另一个挑战。
以下方法可以提升记忆效率:编故事法:将生物的知识点编织成一个故事情节,可以帮助学生建立联系。
例如,把细胞分裂描述成一个关于“细胞家庭”的故事,解释每个“家庭成员”的角色及其变化。
北师大北京课标版初中生物七年级上册第二单元第三章第三节细胞通过分裂而增殖
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北师大版生物第三章第三节细胞细胞通过分裂而增殖一、教学目标1.知识目标:(1)解释细胞体积为什么这么小;(2)观察并描述细胞分裂的基本过程和意义。
(3)认识细胞分裂过程中遗传物质的变化规律。
2.能力目标:(1)利用数学模型研究细胞体积与表面积的关系;(2)运用记录、分析数据和根据数据获得结论的方法。
3.情感态度与价值观目标:体验模拟探究过程以及科学方法在科学研究中的作用。
二、学情分析本节教学内容是在学生了解了细胞的基础知识了以后,来了解细胞为什么这么小及细胞分裂的过程和意义,这样有了前面所学的知识铺垫,能很好的让学生建立有关细胞的系统知识体系。
三、教学策略通过设置情境,引出问题:细胞为什么这么小?再引导学生思考、提出假设,引出“研究细胞体积与表面积的关系”活动。
针对模拟探究实验设计一系列问题,组织学生讨论,理解细胞体积较小与物质交换的关系,进而引出细胞如何保持较小的体积的问题。
对此学生容易想到细胞可以一分为二,即通过细胞分裂。
细胞分裂使细胞体积减小,细胞数目增多。
细胞分裂比较抽象,学生先观看细胞分裂过程的课件,然后讨论,再用自己的语言表达,最后归纳、总结。
四、教学重点1.细胞分裂的过程;2.细胞分裂的意义。
五、教学难点1.活动“研究细胞体积与表面积的关系”中预测的提出、数据的处理、结论的得出。
2.染色质、染色体的概念及其在细胞分裂过程中的变化。
六、教学方法模拟探究、计算、分析、讨论、分析讲解等方法。
七、教学用具1. .红墨水2.动物、植物细胞分裂过程的课件;3.细胞核在细胞分裂时,染色质、染色体变化课件;4.用萝卜制作棱长为1厘米、2厘米、3厘米的正方体。
八、教学过程(一)创设情境,导入新课问:通过前面的学习,大家看生物体是由什么构成的呢?出示ppt课件并设问:大象的身体比小老鼠大得多,大家有没有想过,如果把两者的细胞比较一下,结果会怎样呢?大象的身体大的原因在哪儿呢? (激起了学生好奇心,纷纷进行推测。
细胞学研究方法(完整)
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细胞学研究方法第一章植物染色体制片技术染色体是细胞核中由DNA、蛋白质和少量RNA组成的易被碱性染料着色的一种丝状或杆状物。
也是遗传物质的载体。
它可被苏木精、蕃红、结晶紫、吉姆萨、醋酸洋红、地衣红和孚尔根染液等染色。
染色体为细胞中最重要的遗传结构。
一、染色体研究技术的发展历史1888年瓦尔德第一次提出了染色体这一名词。
1910年摩尔根研究果蝇的染色体以来,染色体研究进入了鼎盛时期。
染色体的制作方法和技术始终是一大难关。
在E.B.Wilson的巨著((The Cell)的1947年版本中,H.de Winiwarter于1912和1921两次定的人的二倍体染色体数是47和48,T.S.PainLer于1921和1922定的数目,单倍体是24,二倍体是48。
1956年J.H.与A.1evan在瑞典的Hereditas 上发表…人的染色体数‟时,确切是46。
而技术上加以突破性改进的两人竟都是搞植物细胞遗传的,而且第一作者,Tjio是一位中国人,名字叫蒋有兴。
其发表的照片质量高,它可以使任何未经专门训练的人,不但能数清染色体数目,而且还能给每个染色体找到它的同源伙伴。
Belling(1921)创用的乙酸洋红染色压片法,带动了以研究染色体数目、结构和行为变异与遗传的细胞遗传学和细胞分类学的建立和发展;Caspersson(1969)首创的染色体分带技术,揭示了染色体的内部结构分化,使对染色体的鉴别和分析更为准确;同年,Gall等创建的DNA分子原位杂交技术及其以后的不断改进,现已发展可以对单拷贝基因、重复序列以及整个基因组DNA进行准确定性、定位和相对定量的研究。
二、染色体制片技术2.1制片方法的选择国内外通用的制备植物染色体标本的基本方法是压片法和去壁低渗——火焰干燥法。
前者为传统技术,后者为70年代末由陈瑞阳创用的新方法。
国外,仍以压片为主;在国内,两种方法都普遍应用,只是个人有偏爱而已。
其具体的染色体制片方法如下图:2.2制片程序2.2.1取材(基础)原则:进行细胞分裂的分生器官、组织或单个细胞均可。
高中生物细胞的增殖教案(热门7篇)
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高中生物细胞的增殖教案(热门7篇)高中生物细胞的增殖教案第1篇一、教学内容分析“细胞增殖”人教版生物(必修1)第6章第1节的内容。
它与前面所学的遗传信息的携带者——核酸,细胞核——代谢活动的调控中心,高尔基体的功能,中心体的结构与功能等内容有密切的联系,本节内容主要包括细胞不能够无限长大、细胞增殖及其意义、细胞周期、有丝分裂等。
其中模拟探究细胞大小与物质运输的关系和有丝分裂的过程是教学重点也是教学难点。
通过模拟探究实验可使学生明白细胞分裂的必要性。
其中有丝分裂是学生学习减数分裂和遗传规律的基础,还是学生学习DNA复制及遗传信息传递的重要基础,甚至是学生学习选修模块的基础。
二、教学目标知识目标(1)模拟探究细胞大小与物质运输的关系,探讨细胞不能无限长大的原因。
(2)举例说明细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。
(3)简述细胞的生长和增殖的周期性。
(4)观察细胞的有丝分裂并概述其过程。
2、能力目标(1)尝试用模拟的方法进行科学研究。
(2)运用数学分析、归纳和推理方法处理和分析实验数据。
(3)通过学习有丝分裂过程培养学生分析图像、解读图像的能力。
(4)学习用曲线图描述DNA和染色体数量的变化规律3、德育目标(1)树立生物体的结构与功能、局部与整体相统一的观点。
(2)形成学生实事求是的科学态度和一丝不苟的科学精神。
(3)养成学生批判性思考的能力。
三、学习者特征分析高中学生的基础知识比较扎实,学习的自觉性和主动性较高,对生物课程的学习,他们也有着浓厚的兴趣,抽象思维能力和综合思维能力较强。
他们在初中曾学过“细胞通过分裂产生新细胞”,但是在当时对细胞分裂的了解还是很浅,没有深入到细胞分裂过程的水平。
因此,教学中可以充分利用学生已有的知识基础并遵循学生的认知规律,通过适当的教学策略,使新知识有效地整合进学生原有的知识网络中,使学生的知识体系得到丰富和发展。
四、教学策略选择与设计1、教学策略本节课教学内容理论性很强,比较抽象繁杂,所以课前我会指导学生预习和搜集有关资料,课堂上充分利用多媒体辅助教学,增强教学的直观性和形象性。
北师大版生物七年级上册3.3《细胞通过分裂而增殖》教学设计
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4.鼓励学生发挥创意,将所学知识运用到实际生活中,提高生物学素养。
-学生能够列出细胞周期的主要阶段,如G1期、S期、G2期和M期。
-学生能够描述各阶段的主要特点和功能。
3.掌握细胞分裂中染色体行为的改变及其意义。
-学生能够解释染色体在细胞分裂过程中的行为变化,如有丝分裂中的染色体复制、分离和分配。
-学生能够理解染色体行为改变对遗传稳定性的影响。
(二)过程与方法
1.通过观察细胞分裂的图像,培养学生观察、分析和推理能力。
3.细胞分裂与生物体生长、发育关系的理解。
-学生可能难以将细胞分裂与生物体的整体生长、发育联系起来,需要教师进行引导和解释。
(三)教学设想
1.采用问题驱动的教学方法,激发学生的探究兴趣。
-教师通过提问方式引导学生思考,如:“为什么细胞需要分裂?”“细胞分裂过程中染色体如何变化?”等,激发学生的好奇心。
5.加强课堂互动,关注学生的个体差异。
-教师在课堂上及时关注学生的学习情况,给予个性化指导,确保每个学生都能掌握重点知识。
6.设计形式多样的巩固练习,帮助学生巩固所学知识。
-提供选择题、填空题、简答题等不同类型的练习题,让学生在解答过程中加深对细胞分裂知识的理解。
7.开展课外拓展活动,提高学生的科学素养。
3.分组进行课题研究,选择一个与细胞分裂相关的主题,如“细胞分裂与生物体发育的关系”、“细胞分裂过程中的染色体行为”等。要求小组成员分工合作,查阅资料、设计实验、分析结果,并撰写一篇研究报告。
4.家庭作业:请同学们向家人或朋友解释细胞分裂的概念和过程,了解他们对这一生物学现象的认识和看法。通过这种互动交流,提高学生的表达能力和科普传播能力。
生物学中的细胞弹性和变形行为分析
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生物学中的细胞弹性和变形行为分析细胞是构成我们生命的基本单位,而细胞的振动、变形和弹性等现象对细胞功能的发挥起着重要的作用。
因此,在生物学中,研究细胞的弹性和变形行为是非常重要的。
在细胞中,膜结构是一个重要的组成部分。
细胞膜由磷脂双层组成,并由许多不同的蛋白质和其他分子组成。
膜的柔韧性使细胞可以变形、伸展和收缩,并与周围环境相互作用。
在重要生理过程中,如细胞移动和细胞分裂中,细胞膜会发生显著的变形和形变。
因此,细胞膜的弹性和变形行为成为研究的重点。
小分子和大分子对于细胞变形有不同的作用。
小分子,如离子和水分子,可以通过细胞膜进行扩散和渗透,从而导致膜张力的变化。
这种分子水平的调节是细胞弹性行为的重要组成部分。
大分子,如蛋白质和多糖,会与细胞膜相互作用,形成复杂的分子网。
这个网格在细胞膜的变形和弹性中发挥了关键作用。
例如,在细胞迁移中,膜的前端区域必须保持柔软和可变形性,以便细胞的形态和方向可以随着外部环境变化而改变。
除了细胞膜的分子组成外,近年来还有知名学者将细胞看成是一种复杂的材料。
细胞内的组织和细胞膜的结构与材料学中常用的橡胶和弹性体的结构非常相似。
通过类似于材料学中的理论和方法,可以定量地描述细胞的弹性和变形行为。
例如,常数k值和剪切模块G可以用来描述细胞的弹性变形的程度。
这些理论和方法可以帮助科学家更好地理解细胞内部以及和周围外部环境互动的复杂性。
此外,利用显微镜和纳米材料学技术也是分析细胞弹性和变形行为的常用方法之一。
例如,通过原子力显微镜(AFM)技术,可以探测到微米范围内的细胞弹性。
这种技术利用细针或探头测量细胞的力学性能,并能够进一步推断细胞内部分子结构及其作用方式。
通过这种技术,科学家们可以直接探测到不同类型细胞的弹性,从而深入研究细胞的变形行为和相应的生理过程。
总之,分析细胞弹性和变形行为在生物学中起着非常重要的作用。
无论是分子层面的调节还是材料学的方法,都提供了研究细胞行为的新思路和新方法。
细胞生物学行为
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细胞生物学行为《细胞生物学行为:微观世界的奇妙之旅》我常常觉得细胞这个微观世界就像一个热闹非凡的小社会。
在这个小社会里,每个细胞都有着自己独特的行为,就像社会里形形色色的人一样。
有一回,我和我的朋友阿明聊起细胞。
阿明是个生物学爱好者,他眼睛放光地跟我说:“你知道吗?细胞的移动就像是一场精心编排的舞蹈。
”我好奇地看着他,“怎么个像法呢?”阿明笑着比划起来,“就拿白细胞来说吧,当身体某个地方发炎了,白细胞就像接到紧急任务的士兵一样,它们会通过变形运动,从血管里钻出来,朝着炎症的部位进军。
这过程中,它们就像一个个灵动的舞者,扭动着自己的身体,穿过层层障碍,准确地到达目的地。
”我听了不禁感叹,“哇,还真是神奇呢。
”细胞的分裂也很有趣。
我和邻居家的小孩小辉讲细胞分裂的时候,小辉眨着大眼睛问我:“叔叔,细胞为什么要分裂呀?”我想了想,笑着说:“小辉啊,细胞分裂就像是盖房子。
一个房子住不下了,就得再盖一间。
细胞也是这样,当它长到一定大小,原来的空间就不够用了,就得分裂成两个小细胞,这样才能继续生长和工作呀。
”小辉似懂非懂地点点头,“那细胞分裂的时候是不是像搭积木一样,一块一块地搭起来呢?”我被他这个可爱的想法逗笑了,“哈哈,也有点像呢。
细胞里面有遗传物质,就像搭房子的蓝图一样,在分裂的时候,这些遗传物质会先复制一份,然后均匀地分到两个新细胞里,这样新细胞就知道自己该怎么生长啦。
”细胞之间的通讯就像是人们之间的对话。
我在一次生物小组讨论会上听到一位同学讲的很有趣的比喻。
他说:“细胞之间会发送各种信号分子,这就好比我们互相发消息。
比如说,神经细胞会释放神经递质,这些神经递质就像一个个小信使,在细胞之间跑来跑去,告诉其他细胞要做什么。
就像你给朋友发个短信说‘我们一起去玩吧’,然后朋友收到消息就会回应你一样。
”大家都觉得这个比喻很贴切,都笑了起来。
细胞的分化更是一个奇妙的过程。
我和我的老师探讨过这个问题。
老师说:“细胞分化就像是一群学生选择不同的专业方向。
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共培养条件诱导内皮细 胞迁移
MTLn3: GFP-expressing rat mammary adenocarcinoma cells (乳腺癌细胞) U87MG: GFP-expressing human glioblastoma cell line (胶质瘤细胞) 10T ½: Mouse smooth muscle precursor cells (平滑 肌祖细胞)Cells were stained for actin by Rhodamine-phalloidin (yellow) and nuclei by DAPI (blue). HMVEC (内皮细胞)were stained for vWF(green) to distinguish them from 10T 1/2.
一、细胞增殖(proliferation)动力学检测方法 二、细胞凋亡(apoptosis)检测技术 三、细胞侵袭/迁移(invasion/migration)检测技术 四、细胞生物力学特性(biomechanics)检测技术
一、细胞增殖动力学检测方法
培养中,细胞的生长、繁殖(proliferation)和死亡(death)是一个动
一、细胞增殖动力学检测方法
XTT法原理:XTT是异种与MTT类似的四唑氮衍生物,可被活细胞线粒体脱 氢酶还原成水溶性的棕色(brown)甲肷产物,当XTT与电子耦合剂(PMS) 共同使用时,甲肷的生成量与细胞的增殖程度呈正相关。 MTS法原理:与MTT法原理类似。MTS是MTT的类似物,能被活细胞线粒 体中脱氢酶还原成可溶于水的有色产物甲臜盐,可直接进行比色。特点: 步骤相对MTT更简单,相对更准确。 WST-1法原理:与MTS原理类似。检测范围宽于MTT和MTS。 CCK8法原理:基于WST-8。在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体 内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物。颜色的深浅与细胞 的增殖成正比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞 数量。
四、细胞生物力学特性检测技术
原理:采用微管吸吮方法捕获表征特异性相互作用分子的细胞或小球,通 过压电晶体驱动器操控微管,实现两细胞或小球间靠近-接触-回拉的动力 学循环,并记录回拉过程中细胞变形与否、变形大小和解离时间长短等信
息来研究分子间相互作用(interaction between molecules)的动力学性质。
BrdU掺入法根据选择抗体标记物的不同, 还可以通过免疫组化(IHC)、流式细胞术 (FACS)、ELISA检测细胞的增殖情况。 同类方法:EdU法
Anti-Brdu DAPI
一、细胞增殖动力学检测方法
单个细胞在体外持续生长,其后代所形成的细胞群称为克隆或集落。 该方法可对单个细胞的增殖潜力做定量分析,也常用来确定抗癌药物 对肿瘤的杀伤能力。常用的方法包括平板集落形成实验(贴壁细胞) 和软琼脂集落形成实验(悬浮细胞)。
四、细胞生物力学特性检测技术
光是一种特殊的物质,携带有能量和动量,光与物质相互作用时彼 此交换能量和动量,产生各种效应。捕获微小粒子的光镊是一个特 别的光场,这个光场与物体相互作用时,物体整个受到光的作用从 而达到被钳的效果,然后可以通过移动光束来实现迁移物体的目的。
光镊可以捕获和操控几十纳米到 几十微米大小的粒子(optical tweezer can capture particles with diameters of dozens of nanometer/micrometer ),它还可 以作为微小力的探针,测量皮牛 亚皮牛量级的力,正好可以用来 研究生物细胞的力学行为,以及 细胞与生物大分子如蛋白质等的 相互作用等,进而从单细胞、单 分子层次上揭示细胞生命活动的 基本规律。
control
0.1 μg /ml
0.5 μg /ml
1 .0 μg /ml
OPN
三、细胞迁移/侵袭检测技术
划线法又叫做wound healing法,是体外模拟体内伤痕愈合过程的实验方法。
三、细胞迁移/侵袭检测技术
基底膜(basement membrane)是普遍存在的一种连续的细胞外基质成份构成 的膜性结构,主要含层粘连蛋白(laminin)和胶原(collagen)。局部蛋白质水解 导致基底膜降解有利于肿瘤细胞的穿出。常用的人工基底膜材料为Matrigel。
三、细胞迁移/侵袭检测技术
细胞迁移(migration) 和侵袭(invasion)的概 念最初来自于肿瘤学。 侵袭是指恶性肿瘤细胞 从起源部位沿组织间隙 向周围组织浸润的过程, 其标志是肿瘤细胞突破 基底膜。肿瘤侵袭是肿 瘤细胞与周围间质相互 作用的结果。 细胞侵袭的研究侧重于 细胞与胞外基质(ECM) 的相互作用。
三、细胞迁移/侵袭检测技术
VEGF诱导内皮细胞
迁移
Migrating cells into soft
(pH 7.4) and rigid (pH.
11.0) scaffolds were studied.
Cells were stained for actin by Rhodamine-
phalloidin (yellow) and
CFU-E
CFU-GM
一、细胞增殖动力学检测方法
结晶紫染色 Crystal violet
二、细胞凋亡(apoptosis)检测技术
细胞死亡有两种不同形式,即细胞坏死(necrosis)和细胞凋亡(apoptosis)。细 胞坏死是由外界因素导致的细胞急速死亡;凋亡是细胞在生理(physiological) 或病理(pathological)条件下由基因(gene)调控的死亡过程。细胞凋亡过程中 膜结构完整(integral membrane),染色体DNA断裂(DNA fragmentation),细 胞膜包裹这核碎片形成凋亡小体(apoptosis body)。 凋亡在胚胎发育、成年阶段衰老、病变细胞的清除发挥着重要的作用,也是 研究药物作用机理和进行药物筛选的的重要手段。
优点:是分子生物学和形态学相结合 的方法,并可检测出早期和极少量的 凋亡细胞,灵敏度比DNA Ladder法高。
二、细胞凋亡检测技术
溴化丙锭(propidium iodide, PI)可与细胞内DNA结合,流式细胞术检测到 的PI荧光强度直接反映了细胞内DNA含量的多少。凋亡细胞由于总DNA量 降低,将于正常G1/G0期细胞群前出现一亚二倍峰,即凋亡细胞群。
优点:可直观观察粘附事件的发生
(directly observe the adhesion
events),而且每次粘附事件均可控。 局限性:在于通量低、每次只能实现
单一细胞对检测,且由于测试周期
较长、体外难以长时间维持细胞功 能状态的限制,难于获得大样本的 统计数据。
四、细胞生物力学特性检测技术
Long M, 2007, JBC, Two-dimensional Kinetics of P-selectin-PSGL-1 Interactions
(4)集落(克隆)形成实验:测定单个细胞(single cell)增殖能力。
一、细胞增殖动力学检测方法
在培养瓶或孔板中准确接种相同数量的细胞,每天计数(count everyday),测 出培养瓶或孔板中的细胞总数,持续7天(也可根据需要而定)。细胞接种 量以7天能长满,而不发生接触抑制(contanct inhibition)为度。
电镜观察细胞超微结构
Hoechst33258染色细胞核观察凋亡
二、细胞凋亡检测技术
细胞凋亡最突出的生化特 征是由凋亡引起的核酸内
切酶(endonuclease)的活
化,使染色质核小体 (nucleosome)间连接断裂, DNA裂解为长度为 180~200bp及其倍数的片
段,在琼脂糖凝胶电泳上
呈现DNA梯形电泳图谱。
常用检测方法: 1. 形态观察(morphology) 2. DNA琼脂糖凝胶电泳(electrophoresis) 3. MTT细胞活性检测 4. 流式细胞仪分析(FACS) 5. 原位末端标记(TUNEL)
二、细胞凋亡检测技术
可通过HE染色,Giemsa染色等方法观察凋亡细胞染色质浓缩,凋亡 小体等现象,也可用电镜、荧光显微镜观察细胞凋亡。
二、细胞凋亡检测技术
凋亡细胞染色体DNA的断 裂首先降解为50~300kb 的大片段,然后在核小体 间随机断开,形成 180~200bp的小片段。 脱氧核糖核酸末端转移酶 (TDT)的作用下,生物 素或荧光素标记的dUTP 可以掺入到凋亡细胞双链 或单链DNA的3’-OH端, 通过颜色反应,特异准确 的定位凋亡细胞。
一、细胞增殖动力学检测方法
各种细胞增殖/毒性检测方法的优势比较
一、细胞增殖动力学检测方法
于细胞培养载玻片上进行,定时取出玻片进行固定染色,并观察计 数,也可将数据绘制成曲线。
细胞培养载玻片
骨髓细胞Giemsa染色
细胞分裂过程荧光染色
一、细胞增殖动力学检测方法
5-溴脱氧尿嘧啶核苷是胸腺嘧啶的衍生物,可以通过与胸腺嘧啶竞争掺 入到S期细胞单链DNA中,再利用抗BrdU单克隆抗体显示增殖细胞核。 通常用DAPI和BrdU荧光染色复染的方法来分析细胞的增殖情况。 BrdU competes with thymine in the synthesis of DNA during proliferation.
0.01cm2×0.01cm=0.1mm3
一、细胞增殖动力学检测方法
MTT(四唑盐)法
酶标仪
摇床
96孔板
原理:活细胞线粒体(mitochondrion)中脱氢酶(dehydrogenase)能将四唑盐 还原成不溶干水的蓝紫色产物甲臜(formazan),并沉淀在细胞中。二甲 亚砜(DMSO)能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含 的formazan量成正比。用酶标仪(microplate reader)测定OD值即可获得间 接的细胞数量表征。 特点:快速,准确,可一次处理多个样品。由于脱氢酶非细胞数量的直接 表征,常被审稿人诟病。 类似方法:WST、MTS、XTT、CCK8等。