酶标仪的使用方法

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酶标仪的使用方法和注意事项

酶标仪的使用方法和注意事项

酶标仪的使用方法和注意事项酶标仪是一种用于检测生物样本中酶的活性的仪器,常用于生物化学、生物医学、生命科学等领域的研究和应用。

下面将介绍酶标仪的使用方法和注意事项。

一、使用方法1.准备工作在使用酶标仪之前,需要先进行一些准备工作。

首先,需要将检测板(通常是96孔板)放入酶标仪中,并将所需的试剂和样本准备好。

其次,需要根据实验的需要设置酶标仪的参数,如波长、温度、时间等。

2.加样和测定加样前,需要将试剂及样本搅拌均匀,然后按照实验方案将其加入到检测板的相应孔中。

加样完成后,将检测板放入酶标仪中,并启动仪器进行测定。

测定完成后,可通过酶标仪的软件进行数据处理和分析。

3.清洗和维护在使用完毕后,需要对酶标仪进行清洗和维护。

首先,需要将检测板从仪器中取出,并用适当的方法清洗和干燥。

其次,需要对酶标仪进行日常的维护和保养,如清洁、校准、更换灯管等。

二、注意事项1.样本准备在进行酶标检测之前,需要对样本进行适当的处理和准备,以确保其质量和稳定性。

例如,需要对样本进行冷冻保存、离心分离、过滤、稀释等操作。

2.试剂和标准品在进行酶标检测之前,需要对所使用的试剂和标准品进行充分的了解和掌握,以确保其质量和稳定性。

例如,需要对试剂的配制、保存和稀释等进行掌握,对标准品的选取和制备进行了解。

3.仪器校准在进行酶标检测之前,需要对酶标仪进行校准,以确保其准确性和可靠性。

例如,需要对仪器的波长、光强、温度等参数进行校准,对仪器的光路、光源等进行定期检查和维护。

4.数据处理和分析在进行酶标检测之后,需要对所得到的数据进行充分的处理和分析,以达到准确、可靠和合理的结果。

例如,需要对数据进行统计、分布、比较等分析,对结果进行解释和说明。

5.安全注意事项在进行酶标检测之前,需要注意安全问题,以保护实验人员的身体健康和生命安全。

例如,需要佩戴适当的防护用品,对实验室环境进行清洁和消毒,对化学品和生物样本进行正确的处理和处置。

酶标仪是一种重要的生物检测仪器,在生物科学和医学领域具有广泛的应用前景。

Biotek ELx800酶标仪使用说明

Biotek ELx800酶标仪使用说明

C. REPORT 按对应“Soft Key“进入 Report 菜单。
RESULT MAP
ASSAY
LIST
打印前十次的结果。用[OPTION]键选择需要的结果。然后按 ENTER; 打印定义的酶标板布局。选择该项,然后输入要打印的程序号,按 ENTER,即可打
印出选择的程序中样品的布局; 打印程序的定义内容。包括波长,酶标板布局、公式,曲线等。选择该项,输入要
以下以 AUTO 为例: 选择排列时序号递增的方向。DOWN 表示编号从上到下递增,即 A1、B1、C1…..A2、B2、 C2…..增加,ACROSS 表示编号从左到右递增;即 A1、A2、A3…….B1、B2、B3……增加。 选择复管时排列的方向。即同一样品有多管时排列方向。DOWN 表示同样的样品是上下 相邻,ACROSS 表示左右相邻; 选择校零方式。AIR 表示在空气中校零,FULL 表示有空白较零孔; 空白校零孔 (BLANK)的数量,如果在上一步选择 AIR,则不会提问 BLANK 的数量 标准样品(STANDARD)的数量;如没有,输入 0;如果有,输入数量,输入复管的数量, 然后定义每个标准样品的浓度; 对照(CONTROL)的种类,以及每种如何表示,每种的数量; 待检测样品(SAMPLE)的数量及复管的数择波长是多少, 定义酶标板类型(24,48,96 孔板等);
MAP 酶标板排列 酶标板的布局和排列方式:AUTO 表示按照先空白校零孔(BLANK),然后是标准样品 (STANDARD)、对照样品(CONTROL)、检测样品(SAMPLE)的次序依次自动排列,MANUAL 表示自定义排列。
前后方向键 用于移动光标
开机后仪器会进行自检,LCD 会显示“INSTRUMET XXX SELF-TEST…”字样。由于型号不同, 自检过程大约持续几十秒到几分钟,自检结束后显示主菜单。

biorad酶标仪iMax使用指南

biorad酶标仪iMax使用指南

biorad酶标仪iMax使用指南
1.酶标仪开机:按下酶标仪机身左上角绿色按钮;仪器自检完成后,仪器显示
屏会显示开机选项,输入酶标仪密码-默认000000,enter确定。

2.电脑开机,打开酶标仪软件MPM6。

3.打开酶标板置入舱门,放入酶标板(A1孔位于左上角),关闭舱门。

4.新建实验:依次单击File> new experiment;
5.单击工具栏上的Read Plate按钮(绿色向上箭头)。

6.在弹出的instrument control窗口中设置测定参数:默认读板模式为
endpoint-Fast;默认波长模式为single,可选measurement滤光片为415/450/490/595/655/750;其他选项默认未勾选。

此步一般只需选择与待测波长相近的滤光片即可。

7.instrument control窗口中单击start read,开始测定;测定结束(<10s),单
击done。

8.数据导出保存为excel:依次单击file>export data;在export setup窗口设
置格式为matrix - raw data,单击OK;选择保存的目的文件夹,保存。

9.使用完毕,依次单击file>exit,在弹出的close old experiment窗口中选择
No;关闭软件。

10.打开酶标板置入舱门,取出酶标板,关闭舱门。

11.酶标仪关机:长按酶标仪机身左上角绿色按钮;仪器显示屏显示关机选项,
enter确定。

MK3酶标仪使用手册

MK3酶标仪使用手册

Multiscan MK3使用手册一。

装机1.打开包装箱,取出仪器,去掉泡沫架,塑料封套,干燥剂。

将仪器后部白色外盖左右二个固定螺丝打开。

2.安装滤光片轮(图中3号位,注意:滤光片轮有齿缘朝向仪器后部)。

3.安装灯泡(图中1号位注意:灯泡边缘突起部向上)。

4.关上机盖,将盖左右二个固定螺丝固定好,连接仪器电源接口(图中2位)和打印机接口(图中6位,电脑接口为4位),将仪器和打印机电源打开.注意勿动仪器后部的二排(共16针)针式按钮(图中5和7位).二。

MULTISCAN MK3 技术性能 1. 卓越的光学系统:八通道光路检测系统,检测速度非常快,检测96孔酶标板仅需2秒准确性好(±2%或0.007Abs ),结果更可靠.测量范围宽:0-3。

5Abs,线性范围大:0—2。

5Abs 。

2. 可线性振板,振板速度/时间可选.3. 内部软件有四种测量程序模块: 基础酶联(包括简单的定性和 定量),临界值(可输临界值公式),曲线定量(可作标准曲线),凝集检测(供选装).4. 内部软件功能强大,人机对话,便于操作,机器内存可储存64个测试程序,可满足常规应用.5。

提供中文电脑软件,可满足临床检验科室打印综合报告和质控图。

三. 使用培训:(一)编制测量程序 :4 D1 A 清 除 测量参数 计算参数 测量模式计算模式7G8H 9P 0 N 5E6 F. L+ ¯5 ÷ 2 B 3 C 输入 开 始停 止转 换 进 纸 ↓ )↑ ( 保 存 调 出 参 数 打印 吸光值步骤:先进入测量程序模块(“转换+输入”)→设置“测量模式和测量参数”→设置“计算模式和计算参数”→储存所编程序→使用时再调出程序.1.定性测量:1)。

简单的定性测量(如固定单/双限值):可在“基础酶联”模式下设。

2). 定性测量(需输入临界值公式):可在“临界值"模式下设定。

•编程:按上述“步骤”(先进入测量程序模块→“测量模式和测量参数"→“计算模式和计算参数”)依次设定参数.•储存:先按“储存",再设置程序号.•调出:先按调出,再输入程序号。

酶标仪的操作规程

酶标仪的操作规程

酶标仪的操作规程
《酶标仪操作规程》
一、仪器准备
1. 将酶标仪放置在水平台面上,并连接电源线。

2. 打开酶标仪,待仪器启动完成后进行下一步操作。

3. 检查酶标仪是否连接正确,仪器灯光是否正常。

二、试剂准备
1. 准备好所需的酶标板、酶标板孔板、洗涤缓冲液、标准溶液和样品。

2. 将试剂按照操作手册中的说明配制好,并标注好试剂名称和浓度。

三、操作步骤
1. 将酶标板放置到酶标板孔板上,并标注好每个板孔对应的试剂。

2. 使用移液器向每个板孔中加入标准溶液和样品。

3. 加入洗涤缓冲液,并按照操作手册中的指示进行洗涤步骤。

4. 加入底物液,待反应一定时间后停止反应。

5. 使用酶标仪读取各孔的吸光度值,并记录下来。

四、数据处理
1. 使用酶标仪附带的软件进行数据处理,计算出样品中所含酶的活性。

2. 将数据保存并打印出来,作为实验结果。

五、清洁和关闭
1. 将酶标板和孔板清洗干净,并存放在干燥的地方。

2. 关闭酶标仪,并拔掉电源线,清洁仪器表面。

六、实验记录
1. 实验过程中的详细操作步骤和观察结果都要记录在实验记录表中。

2. 实验完毕后,对实验结果进行分析和总结,并写出实验报告。

以上就是关于酶标仪的操作规程,希望对您有所帮助。

酶标仪使用流程

酶标仪使用流程

酶标仪使用流程
酶标仪是一种常用的生物技术实验设备,可以用于测定样品中特定分
子(如蛋白质、核酸等)的含量。

下面将介绍酶标仪的使用流程。

一、准备工作
1.准备所需试剂和材料:酶标板、标准品、待测样品、洗涤缓冲液、底物液等。

2.调节酶标仪:根据所需检测物质的波长,调节酶标仪的光源波长和滤光片。

3.进行预热:开机后,需要进行预热,一般为10-15分钟。

二、操作步骤
1.样品处理:将待测样品和标准品分别加入到已经预处理好的酶标板孔中。

2.添加底物液:加入底物液后,等待反应时间(一般为10-30分钟)。

3.停止反应:在反应时间结束后,加入停止溶液停止反应。

4.读取吸光度值:将酶标板放入酶标仪中,读取吸光度值。

一般会有两个值,一个是样品吸光度值,一个是对照吸光度值。

5.数据处理:根据吸光度值计算出样品中所含有的分子的含量。

三、注意事项
1.操作时要注意无菌操作,避免污染样品。

2.底物液和停止溶液的使用要按照说明书进行配制和使用。

3.读取吸光度值时要确保酶标板上没有气泡和杂质,否则会影响结果。

4.在使用过程中,要定期对酶标仪进行维护和保养,保证其正常运行。

以上就是酶标仪的使用流程及注意事项。

在实验中需要严格按照步骤操作,并注意安全。

只有正确地使用才能得到准确的实验结果。

酶标仪工作原理及使用方法

酶标仪工作原理及使用方法

酶标仪简介:酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。

可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。

测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。

酶标仪原理:酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单.微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。

人们之所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。

绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光,但对绿色不吸收,反射出来,所以植物呈现为绿色。

酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。

随着检测方式的发展,拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。

酶标仪使用方法及注意事项

酶标仪使用方法及注意事项

操作过程
1.开启仪器电源开关,同时启动电脑。

2.启动程序,进入程序主界面。

3.根据不同的测量要求,设置测定波长和测量范围。

4.弹出板架,放入待测样品,启动检测,命名测试样品,进行检测。

5.导出excel表格数据,并保存数据。

6.关闭计算机和主机电源,登记使用记录。

注意事项
1.开机预热,待自检结束后方可使用。

2. 孔板底部需要保持干净,避免测量误差。

3. 请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成注意做好清洁工作
4.侧紫外波段的吸光值,须使用特殊孔板。

5.加样的溶剂量应适当,太少影响测定结果,太多则容易溢出,推荐每孔至少使用100ul溶剂
6.仪器如果出现故障,请立即与技术人员,切勿擅自拆卸酶标仪。

7. 使用结束后必须关掉仪器和电脑,
8. 每次使用需要登记使用人姓名、时间以及仪器状态。

680酶标仪使用培训指南

680酶标仪使用培训指南

680酶标仪使用培训指南一、680 酶标仪简介680 酶标仪是一种常用于生物化学、医学、免疫学等领域的实验室仪器,它能够快速、准确地测量样本在特定波长下的吸光度值,从而实现对样本中各种物质的定量分析。

二、仪器的主要部件及功能1、显示屏:用于显示操作界面、测量结果等信息。

2、操作按钮:包括电源开关、菜单选择、确认等按钮,方便用户进行操作。

3、样本架:用于放置待测样本的微孔板。

4、光源:提供稳定的特定波长的光线。

5、检测器:检测透过样本后的光强度,并将其转化为电信号。

三、使用前的准备工作1、环境要求仪器应放置在平稳、无震动、无强电磁场干扰的实验台上。

环境温度应保持在15℃30℃之间,相对湿度应在45% 85%之间。

2、电源连接确保仪器连接到稳定的电源插座,并检查电源线是否完好无损。

3、仪器预热打开仪器电源后,让仪器预热 15 30 分钟,以保证测量的准确性和稳定性。

四、样本准备1、选择合适的微孔板根据实验需求选择 96 孔或 384 孔的微孔板。

2、样本处理对样本进行适当的稀释、提取等处理,确保样本的浓度在仪器的检测范围内。

3、加样使用移液器准确地将处理后的样本加入到微孔板的相应孔中。

五、软件操作1、打开软件在电脑上双击酶标仪对应的软件图标,进入操作界面。

2、新建实验在软件中选择“新建实验”,输入实验名称、样本数量、测量波长等相关信息。

3、微孔板布局设置根据样本的实际布局,在软件中设置微孔板的孔位信息,如空白对照、标准品、样本等。

4、测量参数设置设置测量模式(如单波长、双波长)、测量时间、读数次数等参数。

六、仪器操作步骤1、放入微孔板小心地将加好样并设置好布局的微孔板放入仪器的样本架中。

2、启动测量在软件中点击“开始测量”按钮,仪器将按照设定的参数进行测量。

3、测量过程中的注意事项测量过程中避免震动仪器和打开仪器门。

七、数据读取与分析1、数据读取测量完成后,软件将显示测量结果,包括每个孔的吸光度值。

美国伯乐iMark酶标仪简要操作使用说明书

美国伯乐iMark酶标仪简要操作使用说明书

美国伯乐iMark酶标仪简要操作使用说明书美国伯乐iMark 酶标仪简要操作使用说明书2012-2-21 整理:王刘祥操作面板说明0、电源开关左上绿色按钮1、舱门开/关【功能:打开/关闭舱门。

】2、读板开关开始/停止【功能:按此键开始用当前设置进行读板;可中途停止读板。

】一般不要按。

3、主菜单【功能:按此键直接回到主界面。

】4、上箭头【功能:向上移动光标,并在按下“转换”键后,可从A..Z输入字母或符号。

】 5、左箭头【功能:回到上一界面,向左移动光标。

】6、输入【功能:确认完成输入或者某一设置。

】7、下箭头【功能:向下移动光标,并在按下“转换”键后,可从Z..A输入字母或符号。

】 8、右箭头【功能:改变或者选择某一值或者类型,向右移动光标】9、转换【功能:输入小数点,改变输入模式。

】 10、数字键【功能:输入数字或者酶标板布局的情况。

】0/EMP:空孔1/SMP:样品孔2/BLK:空白孔3/STD:标准品孔4/CO:阀值对照孔5/QC:质控品孔6/CAL:校准品孔7/CP:阳性对照孔8/CN:阴性对照孔9/CW:弱阳性对照孔11、进纸【功能:安装打印纸/走纸。

】12、打印【功能:打印酶标板实验结果和当前仪器实验程序设置信息。

】13、编辑【功能:进入编辑菜单,进行程序设置。

】 14、储存检索【功能:调用实验程序或者酶标板结果。

】第一步接上电源,打开机器左上绿色开关,机器开启后,自检。

根据机器提示,输入00000 后按Enter键即可进入机器的操作界面。

程序权限滤光片日期一、程序如果试验程序已编好,则可直接调出在储存检索菜单里的程序,直接读板。

如果试验的程序需要重新编辑,则按编辑菜单里面的程序设置,进行新的试验程序的编辑。

阈值设置,报告种类设置,限值标准品设置,试验模式设置,酶标板布局设置。

试剂盒名称1、阈值设置如定量试验则直接选择不使用,跳过此项设置。

定性试验一般要求对阈值进行设置,阈值设置里有以下几个小分项:不使用,常数,质控,公式,比值公式阈值:将光标移到公式阈值处,,机器里面存有五个公式可供选择,根据试剂盒上的说明选择相应的公式,然后连续按输入键进入公式里面修改里面的K值参数和灰区值(K 值参数和灰区值的修改,根据试剂盒说明所给的数据),修改完后按输入键。

酶标仪使用方法

酶标仪使用方法

酶标仪使用方法
酶标仪使用方法
(一)安装设备:
1.首先要准备设备,包括:酶标仪主机、样本架、样本演变分析仪、计算机系统、扩展套件。

2.将主机置于平稳的工作台上,注意空间的宽度和深度,主机前面至少要保留25mm的控制台。

3.将样本演变分析仪及样本架安装在主机底端,滑动样本架侧边固定装置,使
样本架自由滑动,但不改变位置。

4.将计算机系统及扩展套件连接到主机上,包括USB键盘、鼠标、屏幕、U盘、蜂鸣器等,上电后准备工作。

(二)启动设备:
1.在计算机系统上,双击鼠标左键,进入酶标仪选择界面,进行后续操作。

2.操作者使用特定键盘输入指定的必要参数,进行测定方法选择。

3.点击“启动”,酶标仪便会自动进行后续实验,在指定时间内得到实验结果。

4.可以通过调节启动过程中的参数来更改实验结果,完成更准确的分析。

(三)清洁和维护设备:
1.实验结束后,应及时清洁实验装置,以保证下次实验的质量。

2.定期检查并更换流体部件,及时更换耗材,保证流程的顺畅。

3.定期清理过滤器及设备内部的积污物,防止设备内部杂质影响实验结果。

4.对于涉及到精密部件的维护及调整,建议选择正品配件保证质量。

5.正确使用设备,定期维护,可以延长酶标仪的使用寿命。

酶标仪使用方法

酶标仪使用方法

酶标仪使用方法
酶标仪是一种用于测定物质浓度的仪器,尤其是用于酶活性测定,具有高灵敏度和高精度的特点。

以下是酶标仪使用方法的详细解释,以帮助用户更好地操作仪器。

一、准备工作
1. 解决方案准备:根据需要预先准备好标准品或样品的浓度级别和体积,以及所需的缓冲液和试剂。

2. 仪器准备:打开酶标仪的电源,将检测板插入指定的孔中,并确保板完全插入。

然后按照仪器说明书的指导,正确连接线缆并放置适当的标准品和质控品。

3. 光谱扫描:对于需要进行标准曲线的实验,使用酶标仪进行吸收波长范围的光谱扫描。

二、测量操作
1. 标准曲线建立:在准备好的标准品上进行光谱扫描(或直接设置吸光度值),然后按照酶标仪的操作提示进行标准曲线建立。

确保检测范围内的标准品充分,特别是对于较低的检测范围,需要加强校准。

2. 样品测定:根据操作手册,将样品加入检测板中。

可以依次进样,或者采用多通道进样。

在进行测定前,必须确保样品和标准品在同一缓冲液中。

然后按照酶标仪的操作提示进行数据收集。

3. 数据分析:将通过检测得到的吸光度值转换为标准品的浓度值,并计算样品中分析物的浓度。

三、清洗与维护
1. 关闭仪器:完成实验后,关闭酶标仪的电源。

2. 检测板清洗:用去离子水或适当的洗涤剂清洗检测板,并放在干净的地方晾干。

3. 仪器保养:定期清洁仪器的外壳,并更换灯管等易损部件。

以上就是酶标仪使用方法的详细解释,希望能够帮助用户更好地进行仪器操作,顺利进行实验并得到准确的测量结果。

酶标仪使用流程

酶标仪使用流程

酶标仪使用流程酶标仪使用流程简介酶标仪是一种常用的实验仪器,广泛应用于生物化学、分子生物学、免疫学等领域。

它可以用来检测目标物质的含量,了解其在样品中的浓度或活性。

本文将详细介绍酶标仪的使用流程,帮助您更好地掌握这一实验技术。

一、准备工作1. 检查设备:先确保酶标仪的电源和仪器的连接正常,仪器处于工作状态。

2. 准备试剂:根据实验需要,准备好所需的试剂和标准品,注意按照规定的浓度和容量配置好。

3. 样品处理:如果需要对样品进行处理,如离心、稀释等,根据实验要求进行预处理。

二、实验设置1. 设定波长:根据所使用酶标仪的要求和实验需求,选择合适的波长进行测定。

常见的波长有450nm、490nm等,具体波长需根据实验所用底物的特性来确定。

2. 标定仪器:使用标准品进行仪器的校准,确保仪器的准确性和稳定性。

3. 设置实验参数:设定所需的实验参数,如反应时间、温度等。

根据实验目的,调整仪器的灵敏度和测量范围。

三、样品测定1. 建立样品曲线:根据需要,使用标准品制作一系列浓度不同的标准曲线,用于确定未知样品的含量。

2. 取样测定:取一定量的样品和标准品,分别放入酶标板的孔中。

注意每个孔的样品量要相同,避免误差。

3. 开始测试:将装有样品和标准品的酶标板放入酶标仪,按下开始按钮,仪器即开始自动化测试。

4. 读取结果:等待一定时间后,酶标仪会自动读取各个孔的吸光度值。

记录下每个孔的吸光度值,供后续数据分析使用。

四、数据处理和分析1. 进行质控:对实验数据进行质控,检查各个样品的结果是否符合期望。

如有异常结果,需重新检测或检查实验操作是否正确。

2. 绘制标准曲线:使用标准品的吸光度值绘制标准曲线,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标。

常用的绘图软件有Origin、Excel等。

3. 计算未知样品含量:根据未知样品的吸光度值,在标准曲线上找到对应浓度,即可计算出样品的目标物质含量。

可以通过线性回归等方法进行计算。

4. 分析结果:对实验结果进行分析和解释,结合实验目的和背景知识进行全面的研究。

酶标仪使用方法

酶标仪使用方法

酶标仪使用方法酶标仪的使用方法作为微孔板比色计的酶标仪,其基本功能不外乎一个比色测定,所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异,当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。

在临床实验室实际工作中,实验人员在使用酶标仪进行测定操作时,有时难免会对酶标仪的一些性能指标产生迷惑,甚至对酶标仪的应用产生错误的理解。

如诸如使用酶标仪较用肉眼观察测定的阳性率明显增加这样的问题。

一、测定波长目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,-二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。

当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有最大吸收,当pH值降为 0时,最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。

TMB 的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数,如果HRP量少,H:O:和TMB过量时,则形成蓝色的阳离子根。

降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌,使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min.因此,450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。

各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件,可以同时安装6~8片滤光片,所配备的滤光片均应包括一般酶标仪的测定波长上述两个波长,有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm 滤光片,影响不大 .在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。

除了这两个基本滤光片外,考虑到双波长比色的需要,还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片,其他滤光片可根据自己的需要选择。

有时,有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定,故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能,此时需要一个340nm波长滤光片。

酶标仪的使用方法和实验操作技巧

酶标仪的使用方法和实验操作技巧

酶标仪的使用方法和实验操作技巧酶标仪(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)是一种广泛应用于生物学领域的分析方法,能够对特定抗原或抗体进行灵敏、快速的检测。

本文将介绍酶标仪的使用方法和实验操作技巧,帮助读者更好地了解和应用这一技术。

一、酶标仪的基本原理酶标仪基于酶的催化作用来检测分子的存在。

其基本原理是将待测分子与特异性抗体结合,在酶标记抗体的作用下,通过酶反应产生可视化的信号。

常见的酶标记包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP),通过其催化底物的转化,可以得到颜色或荧光信号。

二、酶标仪的使用步骤1. 酶标仪的预热和设置在开始实验前,酶标仪需要预热至合适的温度,并设置所需的波长和光强。

一般情况下,450 nm的波长被广泛应用于酶标仪实验。

2. 样品制备和反应板处理样品的制备包括对待测物体的收集、处理和提取。

蛋白质的浓度测定、稀释和标准曲线的制作也属于这一步骤。

反应板则需根据实验设计选择合适的板型并进行预处理,如洗涤、孵育等。

3. 样品的加样和反应将待测样品、标准品和对照加入准备好的反应孔中,控制好反应时间并按照实验要求进行孵育。

注意避免交叉污染和误操作。

4. 反应终止和底物加入根据实验需要,在合适的时间点将反应终止剂加入反应孔中,阻断酶反应的进行。

接着,加入合适的底物,使颜色或荧光信号表现出来。

5. 数据采集和分析使用酶标仪读取反应孔中的信号,记录吸光度或荧光强度数值。

根据实验设计,采集所需的数据并进行统计和分析,包括标准曲线的拟合、样品浓度的计算等。

三、实验操作技巧1. 严格遵循操作规程在操作酶标仪时,必须遵循严格的操作规程,包括个人防护、培训和实验室安全等。

遵循实验设计、正确操作仪器设备,确保实验的准确性和重复性。

2. 反应条件的优化反应时间、反应温度和底物浓度等条件的优化对于获得准确、灵敏的结果至关重要。

通过试验调整这些条件,找到最佳工作范围,提高实验结果的可靠性。

酶标仪使用方法范文

酶标仪使用方法范文

酶标仪使用方法范文酶标仪(ELISA)是一种广泛应用于生物医学和生物科学研究中的实验技术,用于检测和测量特定分子的存在和浓度。

下面将介绍酶标仪的使用方法。

一、准备工作1.准备样品:根据实验需要,收集并处理样品,将样品离心或过滤以去除杂质。

2.准备试剂:根据实验方案,准备好所需的抗体、酶标记物、底物等试剂。

二、实验步骤1.修复:将样品滴在固定载玻片上,加入适当的修复液,使细胞固定。

2.清洗:用磷缓冲盐水或PBS缓冲液洗涤载玻片上的固定样品,去除细胞外的杂质。

3.阻断:在载玻片上加入阻断剂,封闭非特异性结合位点,降低背景信号。

4.加入抗体:将特异性抗体加入载玻片上,与样品中的目标分子结合。

5.清洗:用洗涤缓冲液仔细洗涤载玻片上的抗体,去除非特异性结合的抗体。

6.加入酶标记物:加入与抗体免疫复合物特异性结合的酶标记物。

如酶标记的二抗。

7.清洗:仔细清洗载玻片上的酶标记物,去除非特异性结合的酶标记物。

8.加入底物:加入酶标记物所需的底物,使酶标记物产生明显的色反应或荧光。

9.反应停止:加入反应停止液,终止底物的反应,并阻断颜色或荧光的进一步发展。

10.读取结果:将载玻片放入酶标仪中,根据实验方案设置相应的波长,读取样品与标准曲线相对应的吸光度或荧光强度。

三、数据分析将吸光度或荧光强度的数据输入电脑软件中,根据标准曲线计算出样品中目标分子的浓度。

四、注意事项1.实验操作要严格按照实验方案进行。

2.所使用的试剂要保持干燥和避光,以免影响实验结果。

3.吸光度或荧光强度的读取要在规定的时间内进行,否则可能影响实验结果。

4.清洗步骤要充分,以去除非特异性结合的抗体和酶标记物。

5.实验过程要注意避免气泡的产生,并避免试剂的交叉污染。

6.实验结束后要及时清洗和消毒实验器材。

SPARK酶标仪操作流程和使用注意

SPARK酶标仪操作流程和使用注意

SPARK酶标仪操作流程和使用注意
操作流程
1、先打开电脑电源,再打开仪器的电源(在仪器的后方黑色开关);
2、打开电脑桌面的SPARKCONTROL软件(软件会自动寻找机器联机);
3、按仪器上方右下角按钮弹出板架,将酶标板放在板架上,点击“plate in”图标将酶标板入机内;
4、在软件控制接面依次选择使用的酶标板型号,要测量的酶标孔,然后选择光吸收的具体波长(可
在230-1000 nm 之间选择),选择读数的次数(flashes, 一般选择5次),最后点击软件左上角start 键开始测量。

(见下图)
5、在测量时软件会自动弹出Excel表格,测量完毕点击“SAVE”保存测量结果;
6、将板取出,关闭仪器电源。

操作环境要求
温度:15℃-30℃
湿度:<90%(无冷凝)
通风:仪器后侧至少有10cm的通风空间
避光:避免直射阳光
酶标板注意事项
不推荐使用小于1/3最大体积的样品体积来测量(96孔100微升)
确保酶标板平稳地放在酶标板架上(孔A1在左上角的位置)
不要强行将酶标板架推入到仪器中
结束测量后,先取出酶标板,再退出软件和关闭仪器
确保酶标板架不会被身体或物品碰撞
清洁
定期护养:每周用温和的去污剂清洁机身和酶标板托架
液体溅出时的处理:立刻用吸水布擦去溅出的液体,
用温和的去污剂清洁仪器表面(对于有生物毒性的污染,将5-10%的漂白粉溶于去离子水中,擦拭仪器)
消毒处理
仪器移出实验室或接受维修前必须进行彻底的消毒。

选择消毒液:70%乙醇溶液
消毒步骤:使用浸过消毒液的棉布擦拭仪器外表面和酶标板托架,清洁任何附件。

酶标仪测硝态氮的操作流程

酶标仪测硝态氮的操作流程

酶标仪测硝态氮的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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酶标仪的使用方法
作为微孔板比色计的酶标仪,其基本功能不外乎一个比色测定,所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异,当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。

在临床实验室实际工作中,实验人员在使用酶标仪进行测定操作时,有时难免会对酶标仪的一些性能指标产生迷惑,甚至对酶标仪的应用产生错误的理解。

如诸如使用酶标仪较用肉眼观察测定的阳性率明显增加这样的问题。

一、测定波长
目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,-二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。

当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有最大吸收,当pH值降为L 0时,最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。

TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数,如果HRP量少,H:O:和TMB过量时,则形成蓝色的阳离子根。

降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌,使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min.因此,450nm和492 nm两个波长是目前ELISA 测定最常用的。

各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件,可以同时安装6~8片滤光片,所配备的滤光片均应包括上述两个波长,有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片,影响不大一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。

除了这两个基本滤光片外,考虑到双波长比色的需要,还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片,其他滤光片可根据自己的需要选择。

有时,有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定,故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能,此时需要一个340nm波长滤光片。

此时,酶标仪的测定波长范围就成为340-750nm或800nm。

酶标仪有单波长和双波长检测功能有时使用者不知在什么情况下使用单或双波长检测。

所谓的“单波长”就是使用一种对显色具最大吸收的
波长即450 nm或492 nm进行比色测定;而“双波长”则除了用对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定外,同时用对特异显色不敏感的波长如630 nm进行测定,酶标仪最后打印出来的吸光度则为二者之差。

630 nm波长下得到的吸光度是非特异的,来自于板子上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。

因此,在ELISA比色测定中,最好使用双波长,且不必设空白孔。

二、测定的吸光度范围
通常,酶标仪的吸光度测定范围在。

0-2.5之间即可以满足ELISA的测定要求。

早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0-2.5之间,但现在基本上都做了拓宽,可达到 3.5以上,并且能保持很好的精密度与线性。

如Labsystems公司Dragon Wellscan MK-2的吸光度测定范围为0-3.5,而Multiskan Ascent的吸光度测定范围(Abs)达0-4.0,在0-4.0范围,线性误差不超过±2.0%,在0.3-3.0吸光度范围内,测定精密度CV小于±0.2%;3.0-4.0 Abs范围内,测定精密度CV小于士0.2%。

因此,对于酶标仪的吸光度范围不必去刻意追求大的吸光度范围,主要要看在一定的吸光度范围内的线性和精密度如何。

三、光学系统
酶标仪的光学系统采用的是垂直光路多通道(通常为8或12通道,亦有单通道)检测,一般为硅光管或光导纤维,除测定通道外,有的酶标仪还有一个参比通道,每次测定可进行自我校准。

酶标仪的光学系统功能如何,均可通过酶标仪测定的吸光度范围、线性度、精密度和准确度等体现出来。

光学系统好的话,则上述指标也应较佳。

测定的精密度与测定通道之间的均一性有直接关系。

单通道可避免因通道不同所致的差异。

四、检测速度
酶标仪的检测速度是指其完成比色测定所需要的时间。

检测速度快,有利于提高检测的精密度,即避免由于测定过程中,因测定时间不同所致的各微孔间吸光度间的差异。

目前市场上常见的酶标仪检测速度都非常快,通常在数秒钟内,如Labsystems公司Dragon Wellscan MK-2和MK-3检测96孔只需2s(连续模式)或5s(步进模式)。

Multiskan Ascent为单通道检测,亦只需9s(连续模式)或14s(步进模式)。

又如BioRad公司的Benchmark的检测速度单波长为7s,双波长为15s。

五、震板功能
酶标仪的震板功能是指酶标仪在对ELISA板孔进行比色测定前对其进行振荡混匀,使板孔内颜色均一。

目前市场上常见的酶标仪均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋转等方式及振荡幅度等任意调节,如Labsystems的MK-2;有的则较为固定,如BioRad 550。

使用有震板功能的酶标仪,在进行ELISA测定显色反应完成加入终止剂后,可不必振荡混匀,直接放人酶标仪上测定即可。

六、温育功能
温育功能是指酶标仪本身能按要求自动精确地控制仪器内部的温度,使得ELISA测定中微孔板条的温育过程可在仪器内部完成,而无需再外配温箱。

目前,只有少部分酶标仪具有此种功能。

七、软件功能
软件功能是指酶标仪所具有的对ELISA定性和定量测定及其他测定方式如酶标动力学、紫外和凝集等数据的统计分析并报告结果的功能。

软件功能是中高档酶标仪的一个非常重要的功能。

如果硬件方面区别不大,则软件就成为判定酶标仪优劣的惟一指标。

对于用户来说,好的软件功能,对实际工作会有较大的帮助。

ELISA定性测定,酶标仪如具有阳性判断值(cut-off)及其测定“灰区”(即指测定吸光度处于cut-off周围的一定区域,此区域内结果应为“可疑”)的统计计算功能,不但方便了实验室工作人员,而且在某些特定的情况下,有很高的实用价值。

如血站实验室为筛检献血员血进行HBsAg、抗HCV和抗HIV等的ELISA测定时,常会遇到测定吸光度处于cut-off附近但又低于cut-off的血,按照试剂盒的标准,可判为阴性,血为合格血,可用于患者输血,但直觉告诉我们,这样的血如输给患者,导致输血后相应疾病发生的可能性较大,这是由ELISA现有的测定技术的不确定性所造成的,也就是ELISA测定的“灰区”的存在使得ELISA测定试剂盒cut-off的设定只是相对的准确,此时的假阳性和假阴性出现的可能性较低。

因此,在血站筛检献血员血时,如以测定“灰区”的下限作为判断献血员血筛检不合格标准,就可以避免因“灰区”所致结果判断错误而引起输血后疾病发生的可能性。

合适的软件功能对于ELISA定量测定同样很重要。

有研究表明,四参数方程能较好地反映免疫测定的剂量反应曲线,最为适合于定量酶免疫测定的曲线拟合。

因此,如目的是定量测定,则在酶标仪的软件功能中,最好要有这种曲线回归方程计算分析功能。

其他诸如连点、直线等回归计算,则可根据酶标
仪的应用目的而定,如兼用于微量生化测定,则此类回归计算就很有必要。

八、语言界面
通常进口的中高档酶标仪人机对话多采用英文。

这对于某些基层实验室可能会存在语言方面的困难,从而难以最大限度地发挥酶标仪的作用。

为解决这方面的问题,已有一些酶标仪采用了中文界面,如Labsystems的MK-3。

这样就大大方便了广大基层实验室技术人员的使用。

综上所述,尽管酶标仪的发展极为快速,种类繁多,功能也不断加强,但其最根本的功用是不变的,即比色测定。

大凡比色测定,其基本要求就是在一定吸光度范围内要有好的测定准确性、线性和精密性。

同样的吸光度范围,测定的准确性、线性和精密性越好则酶标仪亦越佳。

而且,由于用于酶标仪比色测定的为多孔(通常为96孔)微孔板条,为保证测定的孔间重复性,则测定速度也是一个较重要的性能指标。

至于其他如震板、温育及有关的软件功能,则可根据各自实验室的需要去比较选择。

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