大肠埃希菌
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大肠埃希氏菌
制作人：xxxxx xxxxx
2020/3/4
目录：
一、引起疾病症状（致病性、流行病学情况）---3-4 二、基本情况及特征 ---5-12 三、培养特性 ---13-14 四、生化特性 ---15-18 五、抗原特征 ---19-20 六、检验方法（举例阐述检验某一食品、商品中该菌
的详细操作过程）---21-23
菌,不发酵乳糖的是病原菌（志贺菌,沙门菌）； 5. 易变异，可通过突变和“可移动遗传原件”的转移
而致变异； 6. 菌体抗原、鞭毛抗原及荚膜抗原是血清学分型、
鉴定的依据。
主要内容
• 一、概述 • 二、生物学性状
2020/3/4
2020/3/4
正常情况下 安分守己 竞争性抵御致病菌 互利共生
帮助合成维生素K2
机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激
兴风作浪 肠道以外 例如胆囊、尿道、膀胱、阑尾
大部分大肠杆菌是机会致病菌
2020/3/4
2Hale Waihona Puke Baidu20/3/4
2020/3/4
4、除少数菌株外，通常无可见荚 膜
，但常有微荚膜（0.2μm以下）。
2020/3/4
2020/3/4
麦康凯琼脂： 红色菌落
伊红美蓝琼脂： 紫黑色菌落
抵抗力
该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55℃ 经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。 在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低 的粪便中存活更久。胆盐、煌绿等对大肠杆菌有 抑制作用。对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感， 但易耐药，是由带有R因子的质粒转移而获得的。
2020/3/4
大肠艾希氏菌的鉴定
1.样品来源：从本市批发部、超市、另售点等12家 供货单位共采取鸡翅、鸡腿、鸡胸、鸡尖、鸡爪 、整鸡及鸭头、鸭掌等9个冻离类产品计20件样
2.检品验。项目：致泻性大肠艾希氏菌
3.检验方法：
3.1 增菌和分离培养：以无菌手续称取检验25g，加在225mL营养肉汤中， 以均质器打碎1min或用乳钵加灭菌砂磨碎。 取出适量，接种乳糖胆盐培养基，以测定大肠菌群MPN， 其余的移入500mL广口瓶内，于36±1℃培养6h。 挑取1环，接种于1管30mL肠道菌增菌肉汤内，于42℃培养18h。
3. 由常居菌转耶变尔森而氏来菌属的致病菌：如引起胃肠炎的
柠檬酸菌属
大肠埃希菌。
2020/3/4
肠杆菌科的共同特征
1. 革兰阴性杆菌，无芽孢，少数有荚膜或微荚膜 (K或vi抗原）；
2. 多数菌种（除志贺菌和克雷伯菌）有鞭毛和菌毛； 3. 营养要求一般，需氧或兼性厌氧； 4. 触酶阳性，还原亚硝酸盐；发酵乳糖的为非病原
3.3.1 假定试验：挑取经生化试验证实为大肠埃希氏菌的琼脂培养物， 用致病性大肠埃希氏菌、侵袭性大肠埃希氏菌和产肠毒素大肠埃希氏菌 多价O血清和出血性大肠埃希氏菌O157血清做玻片凝集试验。当与某一种 多价O血清凝集时，再与该多价血清所包含的单价O血清做试验。如与某 一个单价O血清呈现强凝集反应，即为假定试验阳性。 3.3.2 证实试验：制备O抗原悬液，稀释至与Mac Farland3号比浊管相当的浓度。 原效价为1：160～1：320的O血清，用0.5%盐水稀释至1：40。稀释血清与抗原 悬液在10mm×75mm试管内等量混合，做单管凝集试验。混匀后放于50℃水浴箱内，
2020/3/4
2020/3/4
甲基红试验（M）
细菌分解葡萄糖，产酸， 使甲基红指示剂显红色。
VP反应
VP试验（V）
细菌分解葡萄糖，产生丙酮 酸，脱羧生成乙酰甲基甲醇, 进而氧化生成二乙酰，与胍 基生成红色化合物。
枸橼酸盐利用
枸橼酸盐试验（C）
细菌分解柠檬酸盐生成碳酸盐， 进而氨盐分目录：解，产生氨， 培养基变碱，显深蓝色。
H抗原： 即抗鞭原毛抗结原；构不及耐热分，类
80℃可破坏其抗原性。1个菌株 仅有1种H抗原。
K抗原：即荚膜抗原；个别位于 菌毛中。不耐热。O不凝集性： 具有K抗原的菌株不会被其相应的 抗O血清凝集。
O抗原：即菌体抗原，化学本质为多糖-磷脂-蛋白质 复合物。耐热——121℃ 2h不破坏其抗原性。每个菌 株只含有一种O抗原，其种类以阿拉伯数字表示；可 用2抗020/3O/4 单因子血清通过凝集试验鉴定。
2020/3/4
科 与医肠学杆菌有科关(E的nte属robacteria种ceae)
埃希氏菌属
沙门氏菌属
一大群寄居肠杆在菌人属 和动物肠道中大生肠埃物希学菌 性状近似、
革兰氏阴性、遗志传贺氏学菌上属 有亲缘关系蟑的螂肠埃希道菌杆菌。现已
肠杆菌科 知有44个菌属，克1雷7伯0氏多菌个属 菌种 ，包弗括格三森埃大希类菌 别： 摩根菌属 1. 致病菌：如沙门菌，志贺菌、鼠赫尔疫曼耶埃希尔菌森菌； 沙雷氏菌属 2. 机会致病菌变：形杆大菌肠属 埃希菌、奇异伤口变埃形希菌杆菌等；
状为发热37.5°~38.5°。腹痛，腹泻，头痛，
恶心，呕吐。腹泻呈水泻便，一般2-3次，最多9 次。经抗菌素治疗2-3天痊愈，无死亡。
2020/3/4
大肠艾希氏菌O157
• 大肠埃希菌(大肠艾希氏菌O157),通常称为大肠杆菌,是肠道中大量 存在的共生微生物. 大肠艾希氏菌O157是肠出血性大肠艾希氏菌的一个主要血清群,严 重危害人类身体健康.该菌能引起人的出血性腹泻和肠炎,并发溶血 性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等,严重的可致人死亡.目 前,多个国家已将“O157”列为必须报告的传染病,予以高度重视. 为防止大肠艾希氏菌O157感染事件的发生,我国于1997年5月建立了 全国性的监测网络,2000年卫生部将大肠艾希氏菌 O157列为重点监 测对象.大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli） 革兰氏阴性短杆 菌,大小0.5×1～3微米.周身鞭毛,能运动,无芽.能发酵多种糖类产 酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌.大肠埃希菌的致病物质 之一是血浆凝固酶.
经16h后观察结果。如出现凝集，可证实为该O抗原。将培养后的三糖铁 琼脂斜面上生长的菌落用侵袭性、产毒性大肠艾希氏菌诊断血清做玻片凝集试验。
2020/3/4
3.4 生化试验： 自鉴别平板上直接挑取数个菌落分别接种三糖铁琼脂(TSI)或克氏双糖铁琼脂(KI)。 同时将这些培养物分别接种蛋白胨水、半固体、pH7.2尿素琼脂、KCN肉汤和赖氨 酸脱羧酶试验培养基。以上培养物均在36℃培养过夜。TSI斜面产酸或不产酸，底 层产酸，H2S阴性，KCN阴性和尿素阴性的培养物为大肠埃希氏菌......
血平板： 一些致病性菌株 常β溶血
2020/3/4
生化特性
含酚红指示剂，酸性呈黄色，碱性呈红色
能发酵多种糖类，产酸产气。
多数菌株发酵乳糖；
2020/3/4
约半数菌株不分解蔗糖；
I M Vi C 实验现象为
“＋ ＋ − − ”
凡此实验有上述结果的，判为典型的大肠埃希菌
吲哚试验（I）
细菌分解色氨酸产生吲哚,与 二甲基氨基笨甲醛生成玫瑰 吲哚，显红色。
2020/3/4
3.2 分离：将乳糖发酵阳性的乳糖胆盐发酵管和增菌液分别划线接种 麦康凯或伊红美蓝琼脂平板；污染严重的检样，可将检样匀液直接划线 接种麦康凯或伊红美蓝平板，于36±1℃培养18～24h，观察菌落。不但 要注意乳糖发酵的菌落，同时也要注意乳糖不发酵和迟缓发酵的菌落。
3.3 血清学鉴定：
2020/3/4
一.引起疾病症状
案例：大肠艾希氏菌引起食物中毒，在国内已有 报道，现将2004年5月的一起由该菌引发的案例报 道如下。2004年5月30日，某乡镇干部于伊斯兰 餐厅就餐，随后该餐厅又接待了一对新人的婚宴。 17:00点发现首例病情，18:00病人增多。31日23 时停。潜伏期最短3h,最长33h,平均18h。主要症
制作人：xxxxx xxxxx
2020/3/4
目录：
一、引起疾病症状（致病性、流行病学情况）---3-4 二、基本情况及特征 ---5-12 三、培养特性 ---13-14 四、生化特性 ---15-18 五、抗原特征 ---19-20 六、检验方法（举例阐述检验某一食品、商品中该菌
的详细操作过程）---21-23
菌,不发酵乳糖的是病原菌（志贺菌,沙门菌）； 5. 易变异，可通过突变和“可移动遗传原件”的转移
而致变异； 6. 菌体抗原、鞭毛抗原及荚膜抗原是血清学分型、
鉴定的依据。
主要内容
• 一、概述 • 二、生物学性状
2020/3/4
2020/3/4
正常情况下 安分守己 竞争性抵御致病菌 互利共生
帮助合成维生素K2
机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激
兴风作浪 肠道以外 例如胆囊、尿道、膀胱、阑尾
大部分大肠杆菌是机会致病菌
2020/3/4
2Hale Waihona Puke Baidu20/3/4
2020/3/4
4、除少数菌株外，通常无可见荚 膜
，但常有微荚膜（0.2μm以下）。
2020/3/4
2020/3/4
麦康凯琼脂： 红色菌落
伊红美蓝琼脂： 紫黑色菌落
抵抗力
该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55℃ 经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。 在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低 的粪便中存活更久。胆盐、煌绿等对大肠杆菌有 抑制作用。对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感， 但易耐药，是由带有R因子的质粒转移而获得的。
2020/3/4
大肠艾希氏菌的鉴定
1.样品来源：从本市批发部、超市、另售点等12家 供货单位共采取鸡翅、鸡腿、鸡胸、鸡尖、鸡爪 、整鸡及鸭头、鸭掌等9个冻离类产品计20件样
2.检品验。项目：致泻性大肠艾希氏菌
3.检验方法：
3.1 增菌和分离培养：以无菌手续称取检验25g，加在225mL营养肉汤中， 以均质器打碎1min或用乳钵加灭菌砂磨碎。 取出适量，接种乳糖胆盐培养基，以测定大肠菌群MPN， 其余的移入500mL广口瓶内，于36±1℃培养6h。 挑取1环，接种于1管30mL肠道菌增菌肉汤内，于42℃培养18h。
3. 由常居菌转耶变尔森而氏来菌属的致病菌：如引起胃肠炎的
柠檬酸菌属
大肠埃希菌。
2020/3/4
肠杆菌科的共同特征
1. 革兰阴性杆菌，无芽孢，少数有荚膜或微荚膜 (K或vi抗原）；
2. 多数菌种（除志贺菌和克雷伯菌）有鞭毛和菌毛； 3. 营养要求一般，需氧或兼性厌氧； 4. 触酶阳性，还原亚硝酸盐；发酵乳糖的为非病原
3.3.1 假定试验：挑取经生化试验证实为大肠埃希氏菌的琼脂培养物， 用致病性大肠埃希氏菌、侵袭性大肠埃希氏菌和产肠毒素大肠埃希氏菌 多价O血清和出血性大肠埃希氏菌O157血清做玻片凝集试验。当与某一种 多价O血清凝集时，再与该多价血清所包含的单价O血清做试验。如与某 一个单价O血清呈现强凝集反应，即为假定试验阳性。 3.3.2 证实试验：制备O抗原悬液，稀释至与Mac Farland3号比浊管相当的浓度。 原效价为1：160～1：320的O血清，用0.5%盐水稀释至1：40。稀释血清与抗原 悬液在10mm×75mm试管内等量混合，做单管凝集试验。混匀后放于50℃水浴箱内，
2020/3/4
2020/3/4
甲基红试验（M）
细菌分解葡萄糖，产酸， 使甲基红指示剂显红色。
VP反应
VP试验（V）
细菌分解葡萄糖，产生丙酮 酸，脱羧生成乙酰甲基甲醇, 进而氧化生成二乙酰，与胍 基生成红色化合物。
枸橼酸盐利用
枸橼酸盐试验（C）
细菌分解柠檬酸盐生成碳酸盐， 进而氨盐分目录：解，产生氨， 培养基变碱，显深蓝色。
H抗原： 即抗鞭原毛抗结原；构不及耐热分，类
80℃可破坏其抗原性。1个菌株 仅有1种H抗原。
K抗原：即荚膜抗原；个别位于 菌毛中。不耐热。O不凝集性： 具有K抗原的菌株不会被其相应的 抗O血清凝集。
O抗原：即菌体抗原，化学本质为多糖-磷脂-蛋白质 复合物。耐热——121℃ 2h不破坏其抗原性。每个菌 株只含有一种O抗原，其种类以阿拉伯数字表示；可 用2抗020/3O/4 单因子血清通过凝集试验鉴定。
2020/3/4
科 与医肠学杆菌有科关(E的nte属robacteria种ceae)
埃希氏菌属
沙门氏菌属
一大群寄居肠杆在菌人属 和动物肠道中大生肠埃物希学菌 性状近似、
革兰氏阴性、遗志传贺氏学菌上属 有亲缘关系蟑的螂肠埃希道菌杆菌。现已
肠杆菌科 知有44个菌属，克1雷7伯0氏多菌个属 菌种 ，包弗括格三森埃大希类菌 别： 摩根菌属 1. 致病菌：如沙门菌，志贺菌、鼠赫尔疫曼耶埃希尔菌森菌； 沙雷氏菌属 2. 机会致病菌变：形杆大菌肠属 埃希菌、奇异伤口变埃形希菌杆菌等；
状为发热37.5°~38.5°。腹痛，腹泻，头痛，
恶心，呕吐。腹泻呈水泻便，一般2-3次，最多9 次。经抗菌素治疗2-3天痊愈，无死亡。
2020/3/4
大肠艾希氏菌O157
• 大肠埃希菌(大肠艾希氏菌O157),通常称为大肠杆菌,是肠道中大量 存在的共生微生物. 大肠艾希氏菌O157是肠出血性大肠艾希氏菌的一个主要血清群,严 重危害人类身体健康.该菌能引起人的出血性腹泻和肠炎,并发溶血 性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等,严重的可致人死亡.目 前,多个国家已将“O157”列为必须报告的传染病,予以高度重视. 为防止大肠艾希氏菌O157感染事件的发生,我国于1997年5月建立了 全国性的监测网络,2000年卫生部将大肠艾希氏菌 O157列为重点监 测对象.大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli） 革兰氏阴性短杆 菌,大小0.5×1～3微米.周身鞭毛,能运动,无芽.能发酵多种糖类产 酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌.大肠埃希菌的致病物质 之一是血浆凝固酶.
经16h后观察结果。如出现凝集，可证实为该O抗原。将培养后的三糖铁 琼脂斜面上生长的菌落用侵袭性、产毒性大肠艾希氏菌诊断血清做玻片凝集试验。
2020/3/4
3.4 生化试验： 自鉴别平板上直接挑取数个菌落分别接种三糖铁琼脂(TSI)或克氏双糖铁琼脂(KI)。 同时将这些培养物分别接种蛋白胨水、半固体、pH7.2尿素琼脂、KCN肉汤和赖氨 酸脱羧酶试验培养基。以上培养物均在36℃培养过夜。TSI斜面产酸或不产酸，底 层产酸，H2S阴性，KCN阴性和尿素阴性的培养物为大肠埃希氏菌......
血平板： 一些致病性菌株 常β溶血
2020/3/4
生化特性
含酚红指示剂，酸性呈黄色，碱性呈红色
能发酵多种糖类，产酸产气。
多数菌株发酵乳糖；
2020/3/4
约半数菌株不分解蔗糖；
I M Vi C 实验现象为
“＋ ＋ − − ”
凡此实验有上述结果的，判为典型的大肠埃希菌
吲哚试验（I）
细菌分解色氨酸产生吲哚,与 二甲基氨基笨甲醛生成玫瑰 吲哚，显红色。
2020/3/4
3.2 分离：将乳糖发酵阳性的乳糖胆盐发酵管和增菌液分别划线接种 麦康凯或伊红美蓝琼脂平板；污染严重的检样，可将检样匀液直接划线 接种麦康凯或伊红美蓝平板，于36±1℃培养18～24h，观察菌落。不但 要注意乳糖发酵的菌落，同时也要注意乳糖不发酵和迟缓发酵的菌落。
3.3 血清学鉴定：
2020/3/4
一.引起疾病症状
案例：大肠艾希氏菌引起食物中毒，在国内已有 报道，现将2004年5月的一起由该菌引发的案例报 道如下。2004年5月30日，某乡镇干部于伊斯兰 餐厅就餐，随后该餐厅又接待了一对新人的婚宴。 17:00点发现首例病情，18:00病人增多。31日23 时停。潜伏期最短3h,最长33h,平均18h。主要症