多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mgml)
多聚赖氨酸处理
配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来sigma 公司的多聚赖氨酸，如是25mg，就需要250ml三蒸水，用移液管将少量三蒸水加到多聚赖氨酸的小塑料瓶中，然后将溶解的多聚赖氨酸加到200ml左右三蒸水中，(已置烧杯中)。
最后加三蒸水达250ml，过滤除菌分装与小瓶中即可。
保存于-20度，近期用的话可放于4度冰箱内保存。
注意每一小瓶的量不要太满，若20ml的瓶子，只装15ml可，若太满，放于-2度有可能会将瓶子弄碎，因冻后体积增加。
(我就有这个教训) 另外烧杯，小瓶、移液管都要灭菌处理的，泡酸高压什么的。
我们用的是一种用注射器过滤的过滤器，一次性的。
一个能最多有效过滤200ml。
铺板的操作:首先要在消毒实验室，包括超净台，紫外消度20-30分钟。
消毒后30分钟进入实验室。
事先准备100ml三蒸水，经高压灭菌处理。
具体细节就不多说了。
首先打开板子，用消毒好的试管将0.01%的多聚赖氨酸加入每一孔中，大概每孔3-4滴吧。
将板子盖好放到培养箱中(37度 5%CO2)30分钟。
取出板子，用吸管将多聚赖氨酸吸出。
换吸管，加入三蒸水，冲洗三次，即将每孔内加入三蒸水，没过底，多点也行。
再将水吸出来。
反复三次。
注意换吸管，要无菌操作的。
最后将铺好的板子放于培养箱待用。
如果你做免疫组化，需要放小的玻片到孔内，就在加多聚赖氨酸之前用无菌的镊子将无菌的玻片夹到孔内即可。
我曾用过多聚赖氨酸包被培养瓶,但浓度是0.1mg/ml,我都是放一夜,第二天吸掉晾干就用,当然要紫外消一下.我觉得时间长点没什么大碍。
我们这里的老师说，多聚赖氨酸不能用紫外线照射。
1.用赖氨酸包被培养板和培养瓶时，应该选用多聚左旋赖氨酸(分子量为15-30万) ；2.感觉你“浓度为50ng/1ml”有些低，我一般最后多聚赖氨酸使用浓度达到20－30ug/ml；3.包被时间一般为6－7h，或者过夜也可；4.使用时应该先用灭菌水洗三次＋PBS（起平衡盐作用）洗一次，洗液的量应该大于包被液的量；5.“多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间，太长了会有影响吗？”，我包被时间最长的经历有过48h,最后只是多聚赖氨酸随着时间延长蒸发一些而量变少了，但是对细胞生长并无大碍，这是我曾经有过的经历，所以我会负责地告诉你；6.“多聚赖氨酸能在4度冰箱里放多久？”，最好置于－20度保存，放置数月乃至半年都可以。
人脐静脉血管内皮细胞HUVEC
第三：铺板加样方法错误。
• 6孔、12孔、24孔、48孔与96孔的细胞接种铺板过程中，你的 加样方式是哪种？你觉得加样方式对后期的接种均匀度影响大 吗？例如你是否有过垂直加入96孔板的经历？是不是有的孔就 比较均匀，而有的孔就聚集在了一起？六孔板怎么摇晃也不均 匀？其实也许你离铺好板就差一种适合你的方法。
• 2、不是所有细胞消化后都会变成圆形
• 有些细胞(比如U87，U251)消化好了也不会变成圆形， 只是呈半沙状。
• 3、有些细胞即使变圆，也有脱落的细胞，但还是没消化好 • 比如7860，要等到大部分细胞脱落培养皿底部才可以停
止消化，否则很难吹打下来，这种情况一般发生于难以消化 的细胞。
• 4、对于一些特殊的细胞需要消化过一点 • 有些细胞吹成单个细胞反而对细胞的状态会好一点，一
6孔板、12孔板或24孔板
• 为防止表面张力导致的中间液面太低细胞聚集的现象。通常 每孔首先滴加少量培基，轻轻晃动浸润整个孔底以保证板子 的孔底都是湿润的，这样加液后细胞悬液会平铺在整个孔底， 可以避免加在中间位置和加在周边晃匀后周边细胞局部太多 的现象，细胞分散会较均匀。注意加完细胞悬液后要放工作 台静置一下（5-10分钟）。镜下观察细胞均匀度，如不均匀 可采用以下8字法、十字法及震荡法等方法进行细胞均匀度 处理
• HUVEC细胞培养难度较高，建议使用内皮细胞专用培养基， 选用优质胎牛血清。细胞推荐传代比例为1:2-1:3，胰酶消化室 温1-2分钟，传代周期通常为3-4天。需要注意的是，如 HUVEC出现聚团生长，可能由于培养板亲水性差或者血清中 促贴壁因子不足，可考虑用人纤维粘连蛋白包被培养板，能有 效预防细胞聚团。
第二：细胞吹打次数不够，细胞悬
液密度不均匀。
免疫组化,免疫检测
免疫组化,免疫检测北京华越洋生物-----------------------------------------------DMDC玻片硅化剂(2%) 100ml 免疫组化40% 室温,6个月玻片的硅化,包括盖玻片和载玻片主要由二甲二氯硅烷(DMDC)组成。
玻片硅化试剂盒(APES法) 3×100ml 免疫组化40% 4℃,6个月玻片的硅化,包括盖玻片和载玻片主要由APES、洗涤液、DEPC水组成。
玻片硅化试剂盒(APES法) 3×500ml 免疫组化40% 4℃,6个月玻片的硅化,包括盖玻片和载玻片主要由APES、洗涤液、DEPC水组成。
PBS-Triton去污剂100ml 免疫组化40% 室温,12个月去污主要由PBS、Triton-100组成。
Sorensen磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH5.3-8.04)500ml 免疫组化40% 4℃,6个月组织化学常用缓冲液主要由磷酸二氢盐(钠/钾)和磷酸氢二盐(钠/钾)溶液组成,按不同比例混合后获得对用PH值。
pH值可选5.3，5.6，5.91，6.24，6.47，6.64，6.81，6.98，7.17，7.73，8.04。
Sorensen磷酸缓冲液(1×,pH6.2) 500ml 免疫组化40% 4℃,6个月少量细胞趋化实验主要由磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化镁、氯化钙组成,终浓度17mM。
Sorensen磷酸缓冲液(10×,pH6.2) 500ml 免疫组化40% 4℃,6个月少量细胞趋化实验主要由磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化镁、氯化钙组成,终浓度170mM。
TBS缓冲液(0.02mol/L,pH8.2) 500ml 免疫组化40% 室温,6个月免疫金银染色缓冲液主要由Tris、氯化钠组成。
TBS缓冲液(0.05mol/L,pH7.4) 500ml 免疫组化40% 室温,6个月免疫金银染色缓冲液主要由Tris、氯化钠、叠氮钠、BSA组成。
多聚赖氨酸包被培养皿原理
多聚赖氨酸包被培养皿原理多聚赖氨酸（Polylysine）是一种由赖氨酸分子组成的聚合物，具有一定的生物活性和生物相容性。
多聚赖氨酸包被培养皿是一种利用多聚赖氨酸在培养皿表面形成覆盖层的技术，用于改善细胞粘附和生长的培养方法。
本文将介绍多聚赖氨酸包被培养皿的原理及其在细胞培养中的应用。
多聚赖氨酸包被培养皿的原理是利用多聚赖氨酸分子的亲水性和静电吸附作用，使其在培养皿表面形成一层覆盖层。
多聚赖氨酸分子中的赖氨酸具有阳离子性，能够与细胞表面的阴离子结合，从而增强细胞与培养皿表面的相互作用力，促进细胞的附着和生长。
多聚赖氨酸包被培养皿的制备过程相对简单。
首先，将多聚赖氨酸溶液加入到无细胞培养皿中，然后将培养皿静置一段时间，使多聚赖氨酸分子在培养皿表面形成一层均匀的覆盖层。
接下来，将多聚赖氨酸包被培养皿置于无菌条件下，用适当的培养基培养细胞。
多聚赖氨酸包被培养皿在细胞培养中具有多个优点。
首先，多聚赖氨酸包被培养皿能够提供高度的细胞附着和生长支持。
多聚赖氨酸分子的阳离子性能够与细胞表面的阴离子结合，增强细胞与培养皿表面的黏附力，使细胞能够更牢固地附着在培养皿上，减少细胞脱落和死亡的情况。
多聚赖氨酸包被培养皿能够提供良好的细胞生长环境。
多聚赖氨酸分子的亲水性能够增加培养基与细胞之间的接触面积，促进养分和氧气的传输，有利于细胞的生长和代谢活动。
此外，多聚赖氨酸包被培养皿还可以调节细胞外基质的组成，模拟体内细胞所处的微环境，提供更适宜的细胞生长条件。
多聚赖氨酸包被培养皿具有良好的生物相容性。
多聚赖氨酸是一种天然存在的多聚物，具有较低的毒性和免疫原性，不会对细胞的正常生理功能产生不良影响。
因此，使用多聚赖氨酸包被培养皿进行细胞培养可以提高成功率和细胞生存率。
多聚赖氨酸包被培养皿在细胞培养中得到了广泛的应用。
它可以用于各种类型的细胞培养，如肿瘤细胞、干细胞、神经细胞等。
同时，多聚赖氨酸包被培养皿也可以用于细胞外基质的研究和组织工程学的研究。
10×多聚赖氨酸使用说明书
北京索莱宝科技有限公司
10×多聚赖氨酸使用说明书
货号：P2100
规格：10ml
保存：-20℃保存，有效期2年。
产品简介：
多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片粘合剂，该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。
适用于组织学，免疫组织化学，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等实验中玻片的防脱片处理，以防实验操作过程中组织掉片。
使用说明：
1．用灭菌的双蒸水按照9:1的比例稀释该多聚赖氨酸溶液。
如果用于细胞培养包被培养皿时需要过滤除菌。
2.使用之前将稀释后的多聚赖氨酸溶液放置于室温下，使其温度达到室温18-26℃。
3.将玻片浸在稀释过的多聚赖氨酸溶液中5分钟，增加时间不会提高包被效果。
4.包被后的玻片置于60℃烘箱1小时干燥，或室温18-26℃过夜干燥待用。
5.处理过的玻片可常温存放一年。
注意事项：
1.每100ml已稀释的多聚赖氨酸溶液可处理90张玻片，超过90张玻片会影响其黏合力。
2.包被之前玻片必须保持清洁，必要时用含1%HCl的70%乙醇溶液来清洗。
3.稀释过的多聚赖氨酸溶液可放在2-8℃，至少3个月内是稳定的。
4.用过的稀释液再次使用时要过滤，若出现浑浊或染菌应丢弃。
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多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mgml,无菌)
多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml,无菌)简介：多聚赖氨酸溶液英文名为Poly-L-lysine Solution 简称PLL 。
Leagene Poly-L-lysine 为Poly-L-lysine hydrobromide ，分子式为L-Lys-(L-Lys)n-L-Lys •xHBr ，分子量为150,000～300,000，CAS Number 25988-63-0。
PLL 是一种粘附剂，常用于载玻片的包被,可以直接稀释后用于细胞或组织培养方面的实验。
分子量大于70,000的多聚赖氨酸可以促进细胞贴壁生长，本产品可以用于促进细胞的贴壁生长和核酸杂交，制备好的载玻片可4℃保存半年。
组成:操作步骤(仅供参考)：1、 用于细胞培养① 根据实验需要Poly-L-lysine Solution 稀释至适当浓度溶液后即可使用。
不同的细胞，Poly-L-lysine Solution 包被(Coating)的时间和浓度，甚至稀释液的选择有所不同，请自行参考相关文献进行适当的包被。
②Poly-L-lysine Solution 用于细胞培养时，包被至少5min ，有些实验需要包被1～2h ，有些情况则需要包被过夜。
③包被完成后，吸Poly-L-lysine Solution ，干燥培养器皿，至肉眼观察完全干燥。
通风橱内吹风数分钟即可完成干燥，对于有些实验则需要干燥2h 或更长时间。
干燥时间较长通常会更加有利于后续的细胞粘附。
④进行细胞培养，也可以用水、PBS 或培养液等适当溶液润洗后再进行细胞培养。
2、 用于核酸杂交① 方法一：取事先准备好的载玻片或盖玻片经160℃冷却至室温，在Poly-L-lysine Solution 上下浸蘸几下，自然干燥，4℃备用，亦可室温保存1个月。
② 方法二：Poly-L-lysine Solution 涂于玻片上，自然干燥后即可使用，可用于细胞涂片和切片。
包被细胞培养板的相关问题
包被细胞培养板的相关问题培养板的包被及相关问题：为了适应不同的实验需要，可对培养板用不同的物质进行包被后使用，这其中有促进细胞黏附的，也有用于一些特殊检测需要的。
不同的实验目的可能具体的方案亦不同，根据需要灵活掌握。
(一)多聚赖氨酸包被：问：我要培养原代神经细胞培养，要用多聚赖氨酸铺细胞培养板，请问赖氨酸液怎么配，怎样铺扳子答：配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来sigma 公司的多聚赖氨酸，如是25mg，就需要250ml三蒸水，用移液管将少量三蒸水加到多聚赖氨酸的小塑料瓶中，然后将溶解的多聚赖氨酸加到200ml左右三蒸水中，(已置烧杯中)。
最后加三蒸水达250ml，过滤除菌分装与小瓶中即可。
保存于-20度，近期用的话可放于4度冰箱内保存。
注意每一小瓶的量不要太满，若20ml的瓶子，只装15ml可，若太满，放于-2度有可能会将瓶子弄碎，因冻后体积增加。
(我就有这个教训) 另外烧杯，小瓶、移液管都要灭菌处理的，泡酸高压什么的。
我们用的是一种用注射器过滤的过滤器，一次性的。
一个能最多有效过滤200ml。
铺板的操作:首先要在消毒实验室，包括超净台，紫外消度20-30分钟。
消毒后30分钟进入实验室。
事先准备100ml三蒸水，经高压灭菌处理。
具体细节就不多说了。
首先打开板子，用消毒好的试管将0.01%的多聚赖氨酸加入每一孔中，大概每孔3-4滴吧。
将板子盖好放到培养箱中(37度 5%CO2)30分钟。
取出板子，用吸管将多聚赖氨酸吸出。
换吸管，加入三蒸水，冲洗三次，即将每孔内加入三蒸水，没过底，多点也行。
再将水吸出来。
反复三次。
注意换吸管，要无菌操作的。
最后将铺好的板子放于培养箱待用。
如果你做免疫组化，需要放小的玻片到孔内，就在加多聚赖氨酸之前用无菌的镊子将无菌的玻片夹到孔内即可。
问：PLL的分子量有3-5万，7-15万，15-30万几种，应怎样选择？？谢谢：）答：我们养神经细胞，用的是分子量3万到7万的pll 。
多聚赖氨酸pdl溶解度
多聚赖氨酸pdl溶解度多聚赖氨酸（PDL）是一种具有广泛应用前景的生物材料，其溶解度是评估其在实际应用中稳定性和可控性的重要指标。
本文将系统地介绍多聚赖氨酸PDL的溶解度，从不同因素对溶解度的影响、溶解度测试方法以及如何优化多聚赖氨酸PDL的溶解度等方面进行探讨，旨在为相关研究和应用提供指导和借鉴。
首先，多聚赖氨酸PDL的溶解度受多种因素的影响。
其中，溶剂选择是影响溶解度的关键因素之一。
不同的溶剂对于多聚赖氨酸PDL 的溶解度具有不同的影响，常用的溶剂包括水、有机溶剂以及盐溶液等。
此外，溶剂的温度、pH值等因素也会对多聚赖氨酸PDL的溶解度产生影响。
其次，针对多聚赖氨酸PDL的溶解度测试方法有多种选择。
常用的方法包括溶解度曲线法、静态浸泡法以及动态流体法等。
溶解度曲线法通常通过改变溶剂温度或浓度来绘制溶解度曲线，从而确定多聚赖氨酸PDL的溶解度。
静态浸泡法则是将多聚赖氨酸PDL固体与溶剂静置一段时间后进行溶解度的测定。
动态流体法则是通过将溶剂在一定流速下流经多聚赖氨酸PDL来测定其溶解度。
根据不同的研究目的和实验条件，选择适合的测试方法十分重要。
最后，优化多聚赖氨酸PDL的溶解度有多种途径。
一种常见的方式是添加助溶剂或表面活性剂，能够提高多聚赖氨酸PDL在溶剂中的溶解度。
此外，调节溶剂的温度、pH值或使用其他聚合物进行共混也是提高多聚赖氨酸PDL溶解度的有效手段。
需要注意的是，不同的优化方法可能会对多聚赖氨酸PDL的特性产生一定的影响，因此在实际应用中需要综合考虑。
综上所述，多聚赖氨酸PDL的溶解度是其应用过程中的重要考量因素。
深入了解溶解度的影响因素、测试方法以及优化途径，对于更好地利用多聚赖氨酸PDL的特性，提高其应用性能具有重要意义。
希望本文的内容能够为相关领域的研究者和应用工作者提供指导和借鉴，推动多聚赖氨酸PDL的进一步应用和发展。
多聚赖氨酸的配置、保存、使用
四、我现在要配多聚赖氨酸,书上写的用PBS配,但没写PH,浓度，向各位请教。
答：
PH应该在
7.0~
7.4，PBS：
取氯化钠
7.650 g，无水磷酸氢二钠
0.724 g，磷酸二氢钾
0.210g溶于蒸馏水1000 mL中，以1N氢氧化钠溶液调pH值为
2.感觉你“浓度为50ng/1ml”有些低，我一般最后多聚赖氨酸使用浓度达到20－30ug/ml；
3.包被时间一般为6－7h，或者过夜也可；
4.使用时应该先用灭菌水洗三次＋PBS（起平衡盐作用）洗一次，洗液的量应该大于包被液的量；
5.“多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间，太长了会有影响吗？”，我包被时间最长的经历有过48h,最后只是多聚赖氨酸随着时间延长蒸发一些而量变少了，但是对细胞生长并无大碍，这是我曾经有过的经历，所以我会负责地告诉你；
0.22-μmfilter. Store in 100-μlaliquots at?20°
C. When ready to use, dilute one aliquot in 40 ml water to prepare 13μg/mlworking solution.Sterilize coverslips by autoclaving prior to coating. Dip coverslips in the working solution, then incubate 15 min to several hours in a humidified 37°C, 5% CO2 incubator. Allow surface to dry.To coat culture dishes or 8-well chamber slides:
原位杂交组织化学常用试剂及处理一、杂交前准备（一）DEPC水是经DEP..
原位杂交组织化学常用试剂及处理一、杂交前准备（一）DEPC水是经DEPC处理过的灭菌蒸馏水。
DEPC即二乙基焦碳酸酯（diethylprocarbonate），可灭活各种蛋白质，是RNA酶的强抑制剂。
原位杂交在杂交及其以前的各步处理中，所有液体试剂都应经DEPC处理。
方法是：取市售DEPc 1ml，加入1L待处理水（蒸馏水等）中，经猛烈振摇后，于室温静止数小时，然后高压灭菌，以除去降解DEPC（DEPC 分解为CO2和乙醇）。
有些试剂可直接加入DEPC，终浓度一般为0.1%～0.4%，原则上在杂交及其以前的步骤中，所有液体试剂均需用DEPC处理，或用DEPC水配制，包括乙醇的稀释。
此外，接触标本以及标本有关的空中的洗涤也需DEPC水洗涤。
注意：DEPC是一种潜在的致癌物质，在操作中应尽量在通风的条件下进行，并避免接触皮肤。
②含有Tris缓冲液的溶液中，不能加入DEPC。
（二）载玻片的处理组织原位杂交，常在载玻片上进行，故载玻片的洗涤至关重要，必须保持清洁，并且不能有任何核酸的污染。
处理方法如下：（1）先经洗衣粉浸泡过夜，次日自来水冲洗后，泡酸数小时以上，取出后再用流水冲洗，双蒸水冲洗2～3次，置160℃以上烤箱中烧烤4h以上，或经15磅高压灭菌20min。
经以上处理可清除载片上的核酸酶。
（2）HCl处理法（三）硅化【方法１】（1）将一扎新的盖玻片散开，在通风条件下于0.1mol/L的HCI中煮20min,等其冷却后,倒掉盐酸。
（2）用去离子水沉漂洗玻片，竖放在架子上自然干燥。
（3）硅化盖玻片：通风条件下，将单块的盖玻片在二甲二氯硅浣（dimethyldichorsilane,DMDC）液中浸几下，竖入在架子上干燥。
（4）收集干燥的盖玻片于一可耐热的petri氏盘（或培养皿）中，用去离子水漂洗数次，彻底清洗。
（5）用铝箔将装有盖玻片的培养皿包好，于180℃烘烤4h过夜。
取出待冷至室温后，即可进行后续处理。
多聚赖氨酸处理玻片
多聚赖氨酸处理玻片1. 引言1.1 概述概述多聚赖氨酸是一种生物相容性强且多功能的天然生物聚合物，具有广泛的应用前景。
在生物材料领域，多聚赖氨酸因其良好的生物相容性和可调控性受到了广泛的研究和应用。
除此之外，多聚赖氨酸还可以作为一种优秀的载体用于药物传递、基因转染和组织工程等领域。
然而，尽管多聚赖氨酸在生物医学领域中具有巨大的潜力，但其在玻片处理中的应用却相对较少被研究。
在病理学和细胞学等领域，制备高质量的玻片是重要的实验步骤之一。
目前常用的方法是通过利用多聚赖氨酸修饰玻片表面，提高玻片的附着力、细胞黏附和显微观察效果。
本文将重点介绍多聚赖氨酸处理玻片的方法和步骤。
首先将详细介绍多聚赖氨酸的特性，包括其生物相容性、成膜性、附着性以及与细胞相互作用的特点。
接着，将介绍利用多聚赖氨酸处理玻片的具体方法和步骤，包括材料准备、玻片表面修饰和处理等方面的内容。
通过本文的研究，相信可以有效地应用多聚赖氨酸处理玻片，并提高玻片的性能和实验结果的准确性。
此外，探索多聚赖氨酸在玻片处理中的应用还能够为其他领域的研究提供新的思路和方法。
因此，本文的研究对于推动多聚赖氨酸的应用和促进细胞学、病理学等领域的研究具有重要的意义和价值。
1.2 文章结构本文总共分为三个部分，即引言、正文和结论。
下面将对每个部分的内容做详细的介绍。
1. 引言部分在引言部分，首先会进行概述，介绍多聚赖氨酸处理玻片的背景和研究意义。
多聚赖氨酸作为一种天然产物，具有许多特殊的化学和物理性质，因此在生物医学领域有着广泛的应用前景。
然后，会详细说明本文的研究结构和目的，以引出后续的研究内容。
2. 正文部分正文部分主要包括两个小节，分别是多聚赖氨酸的特性和多聚赖氨酸处理玻片的方法和步骤。
- 2.1 多聚赖氨酸的特性在这一小节中，将详细介绍多聚赖氨酸的化学结构、物理性质以及其在生物医学领域的应用。
多聚赖氨酸具有丰富的氨基、羧基和假胺基团，以及良好的溶解性和可调节的电荷性质，这些特性使其成为理想的生物材料用于玻片表面的处理。
包被细胞培养板的相关问题
培养板的包被及相关问题：为了适应不同的实验需要，可对培养板用不同的物质进行包被后使用，这其中有促进细胞黏附的，也有用于一些特殊检测需要的。
不同的实验目的可能具体的方案亦不同，根据需要灵活掌握。
(一)多聚赖氨酸包被：问：我要培养原代神经细胞培养，要用多聚赖氨酸铺细胞培养板，请问赖氨酸液怎么配，怎样铺扳子答：配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来sigma 公司的多聚赖氨酸，如是25mg，就需要250ml三蒸水，用移液管将少量三蒸水加到多聚赖氨酸的小塑料瓶中，然后将溶解的多聚赖氨酸加到200ml左右三蒸水中，(已置烧杯中)。
最后加三蒸水达250ml，过滤除菌分装与小瓶中即可。
保存于-20度，近期用的话可放于4度冰箱内保存。
注意每一小瓶的量不要太满，若20ml的瓶子，只装15ml可，若太满，放于-2度有可能会将瓶子弄碎，因冻后体积增加。
(我就有这个教训) 另外烧杯，小瓶、移液管都要灭菌处理的，泡酸高压什么的。
我们用的是一种用注射器过滤的过滤器，一次性的。
一个能最多有效过滤200ml。
铺板的操作:首先要在消毒实验室，包括超净台，紫外消度20-30分钟。
消毒后30分钟进入实验室。
事先准备100ml三蒸水，经高压灭菌处理。
具体细节就不多说了。
首先打开板子，用消毒好的试管将0.01%的多聚赖氨酸加入每一孔中，大概每孔3-4滴吧。
将板子盖好放到培养箱中(37度 5%CO2)30分钟。
取出板子，用吸管将多聚赖氨酸吸出。
换吸管，加入三蒸水，冲洗三次，即将每孔内加入三蒸水，没过底，多点也行。
再将水吸出来。
反复三次。
注意换吸管，要无菌操作的。
最后将铺好的板子放于培养箱待用。
如果你做免疫组化，需要放小的玻片到孔内，就在加多聚赖氨酸之前用无菌的镊子将无菌的玻片夹到孔内即可。
问：PLL的分子量有3-5万，7-15万，15-30万几种，应怎样选择？？谢谢：）答：我们养神经细胞，用的是分子量3万到7万的pll 。
以PBS配成1mg/ml的母液，－20度保存。
Poly-D-lysine多聚赖氨酸
¾ 本产品为进口分装。分子量大于70,000的多聚赖氨酸可以用于促进细胞贴壁生长，本产品可以用于促进细胞的贴壁生长。 ¾ 本产品也可以用于组织学(Histology)分析时的粘片剂。
包装清单：
产品编号
ST508 －
产品名称 Poly-D-lysine/多聚赖氨酸
说明书
包装 10mg 1份
保存条件：穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 用于促进细胞的贴壁生长时：根据实验需要把多聚赖氨酸配制成适当浓度溶液后即可使用。不同的细胞，多聚赖氨酸铺 被(Coating)的时间和浓度有所不同，请自行参考相关文献进行适当的铺被。配制成溶液后可-20℃保存。多聚赖氨酸用于 细胞培养时，较为常用的铺被(Coating)浓度为0.1mg/ml，铺被至少5分钟，有些实验需要铺被1-2小时，有些情况则需要铺 被过夜。随后吸除多聚赖氨酸溶液，干燥培养器皿，至肉眼观察完全干燥。通风橱内吹风数分钟即可完成干燥，对于有 些实验则需要干燥2小时或更长时间。干燥时间较长通常会更加有利于后续的细胞粘附。随后即可直接进行细胞培养，也 可以用水、PBS或培养液等适当溶液润洗后再进行细胞培养。
注意事项：
¾ Poly-L-lysine和Poly-D-lysine都可以用于促进细胞的贴壁生长。Poly-L-lysine可以被某些细胞所消化并吸收，摄入过多的 Poly-L-lysine会产生一定的细胞毒性。如果遇到Poly-L-lysine有细胞毒性的情况，可以考虑选购Poly-D-lysine。
Poly-D-lysine/多聚赖氨酸
多聚赖氨酸的配置
多聚赖氨酸的配置、保存、使用一、常用的多聚赖氨酸包被可以用三蒸水，或者PBS，浓度一般为用0.1 mg/ml进行包被。
二、其他常用包被方法比较(以各种免疫分析为例)：49456826.snap三、我配成1mg/ml的储存液，用Mini-Q(超纯水)配制，放在－20℃储存，使用时稀释10倍（也用超纯水），即终浓度100ug/ml，过滤后使用。
工作液过滤使用，如一次用不完，放在4℃储存。
多聚赖氨酸在水溶液中易分解，所以一次不要配太多工作液。
四、我现在要配多聚赖氨酸,书上写的用PBS配,但没写PH,浓度，向各位请教。
答：PH应该在7.0~7.4，PBS：取氯化钠7.650 g，无水磷酸氢二钠0.724 g，磷酸二氢钾0.210g 溶于蒸馏水1000 mL 中，以1N 氢氧化钠溶液调pH值为7.0~7.4，经121℃灭菌15 分钟五、我准备用多聚赖氨酸涂片培养细胞,不知道多聚赖氨酸涂过的玻片如何灭菌？能否干烤灭菌？答：Sigma的产品说明书上写的很明白的。
另外，有本书上是这么写的，供参考：Poly-lysine-coated tissue cultur e surfac esTo coat covers lips: Prepar e a stocksoluti on by dissol ving25 mg/ml polyly sinein 4.73 ml wa ter(both poly-L-lysine and poly-D-lysine are used to coat tissue cultur e surfac es; checkspecif ic pr otoc ol for choice of isomer) and filter steril ize throug h a 0.22-μm filter. Storein 100-μl aliquo ts at 20°C. When readyto use, dilute one aliquo t in 40 ml waterto prepar e 13 μg/ml workin g soluti on. Steril ize covers lipsby autocl aving priorto coatin g. Dip covers lipsin the workin g soluti on, then i ncuba te 15 min to severa l hoursin a humidi fied37°C, 5% CO2 incuba tor. Allowsurfac e to dry.To coat cultur e dishes or 8-well chambe r slides: Prepar e a stocksoluti on by dissol ving100 m g poly-lysine in 100 ml water(both poly-L-lysine and poly-D-lysine are used to coat tissue cultur e surfac es; checkspecif ic protoc ol for choice of isomer) and filter steril ize throug h a 0.22-μm filter. Storein 5-ml aliquo ts at ?20°C. When readyto use, dilute 1 part stocksoluti on with 9 partswaterto prepar e 100 μg/ml workin g soluti on. Fill tissue cultur e dishes or slidewellswith the workin g so luti on and incuba te 1 hr in a humidi fied37°C, 5% CO2 incuba tor, then remove soluti on by vacuum aspira tionand allowsurfac e to dry.Storecoated tissue cultur e ware up to 3 months at 4°C. Use dilute d soluti ons only once, but unused dilute d aliquo ts can be stored up to 3 months at 4°C.你可以配置好PLL后单独将其过滤除菌，分装，待用。
多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine)的配制、保存、使用总结
因为自己做PC12细胞培养，想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被，到园子里搜索了下，关于多聚赖氨酸的帖子不少，看了一些帖子，将大部分收集在此。
个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题，这些帖子里面都解释了。
注：我只是摘了一个帖子里某段或某句话。
一般一段话来自某一位战友。
一、常用的多聚赖氨酸包被可以用三蒸水，或者PBS，浓度一般为用0.1 mg/ml进行包被。
二、其他常用包被方法比较(以各种免疫分析为例)：49456826.snap三、我配成1mg/ml的储存液，用Mini-Q(超纯水)配制，放在－20℃储存，使用时稀释10倍（也用超纯水），即终浓度100ug/ ml，过滤后使用。
工作液过滤使用，如一次用不完，放在4℃储存。
多聚赖氨酸在水溶液中易分解，所以一次不要配太多工作液。
四、我现在要配多聚赖氨酸,书上写的用PBS配,但没写PH,浓度，向各位请教。
答：PH应该在7.0~7.4，PBS：取氯化钠7.650 g，无水磷酸氢二钠0.724 g，磷酸二氢钾0.210g 溶于蒸馏水1000 mL 中，以1N 氢氧化钠溶液调pH 值为7.0~7.4，经121℃灭菌15 分钟五、我准备用多聚赖氨酸涂片培养细胞,不知道多聚赖氨酸涂过的玻片如何灭菌？能否干烤灭菌？答：Sigma的产品说明书上写的很明白的。
另外，有本书上是这么写的，供参考：Poly-lysine-coated tissue culture surfacesTo coat coverslips: Prepare a stock solution by dissolving 25 mg/ml polylysine in 4.73 ml water (both poly-L-lysine an d poly-D-lysine are used to coat tissue culture surfaces; check specific protocol for choice of isomer) and filter sterilize throu gh a 0.22-μm filter. Store in 100-μl aliquots at ?20°C. When ready to use, dilute one aliquot in 40 ml water to prepare 13 μg/ml working solution. Sterilize coverslips by autoclaving prior to coating. Dip coverslips in the working solution, then incubate 15 min to several hours in a humidified 37°C, 5% CO2 incubator. Allow surface to dry.To coat culture dishes or 8-well chamber slides: Prepare a stock solution by dissolving 100 mg poly-lysine in 100 ml water (both poly-L-lysine and poly-D-lysine are used to coat tissue culture surfaces; check specific protocol for choice of isom er) and filter sterilize through a 0.22-μm filter. Store in 5-ml aliquots at ?20°C. When ready to use, dilute 1 part stock solutio n with 9 parts water to prepare 100 μg/ml workin g solution. Fill tissue culture dishes or slide wells with the working solution and incubate 1 hr in a humidified 37°C, 5% CO2 incubator, then remove solution by vacuum aspiration and allow surface to dry.Store coated tissue culture ware up to 3 months at 4°C. Use diluted solutions only once, but unused diluted aliquots can be stored up to 3 months at 4°C.你可以配置好PLL后单独将其过滤除菌，分装，待用。
多聚d赖氨酸包被96孔板的试验方案
多聚d赖氨酸包被96孔板的试验方案下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
多聚d赖氨酸包被96孔板的试验方案该文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢!本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document 多聚d赖氨酸包被96孔板的试验方案 can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!标题：多聚D赖氨酸包被96孔板的试验方案摘要：多聚D赖氨酸（PLL）是一种生物材料，在生物医学领域有着广泛的应用。
多聚d赖氨酸和多聚l赖氨酸
多聚d赖氨酸和多聚l赖氨酸
多聚-D赖氨酸（Poly-D-lysine）和多聚-L赖氨酸（Poly-L-lysine）是由赖氨酸分子通过化学键连接而成的聚合物。
它们
具有相似的化学结构，但立体结构上的差异使它们具有不同的性质和用途。
多聚-D赖氨酸是由D-赖氨酸分子组成的聚合物，D-赖氨酸是
一种手性分子，具有与L-赖氨酸相同的化学结构，但其分子
构型与L-赖氨酸相反。
多聚-D赖氨酸具有良好的溶解性，可
溶于水和一些有机溶剂中。
它具有较高的阳离子性质，可以吸附在带负电荷的表面上。
这使得多聚-D赖氨酸在细胞培养和
组织工程等领域中被广泛应用，例如用作细胞培养基质的涂层，可以增强细胞的附着和生长。
多聚-L赖氨酸是由L-赖氨酸分子组成的聚合物，L-赖氨酸是
一种自然存在于生物体内的氨基酸。
多聚-L赖氨酸也具有良
好的溶解性，可溶于水和一些有机溶剂中。
与多聚-D赖氨酸
相似，多聚-L赖氨酸也具有阳离子性质，可以吸附在带负电
荷的表面上。
它也被广泛应用于细胞培养、组织工程和药物传递等领域，作为细胞培养基质的涂层、生物材料的包覆层或药物的载体等。
总的来说，多聚-D赖氨酸和多聚-L赖氨酸是类似的聚合物，
具有类似的特性和应用，但它们的分子构型不同，这使得它们在某些领域中表现出不同的特点和性能。
PC12细胞的培养整理总结
一、PC12细胞的折光性本来就比较好，刚传代以及新分裂的细胞都是亮的，至于你说的贴壁的细胞，不知道是否是圆的，在牛血清的刺激下，特别是国产的，会使pc12细胞发生定向的分化，长突起，贴壁就比较牢。
PC12分为未分化的和分化的.前者是球状,成团生长;后者形成很多丝状体;而丁香园里有人说楼主的这种细胞严格来讲已经不能算是PC12了.前几天为自己养的PC12是未分化还是分化型困扰,查了一些资料,现发上来希望能给有同样问题的战友有一点帮助!培养条件:ＰＣ12细胞培养于铺有鼠尾胶原的玻璃培养瓶中,置于ＣＯ2培养箱(37℃,95%空气5%ＣＯ2),培养基选用ＤＭＥＭ(ｐＨ,高糖),加入10%灭活小牛血清及5%灭活马血清。
分化前:ＰＣ12细胞在培养基中多呈圆形,直径15～20μｍ,也有椭圆或多角形的,扁平的细胞少见,倾向于聚集成小团簇状(A图)。
分化后:加入ＮＧＦ后的24ｈ内细胞停止分裂,长出似交感神经元样的突起;第4～14ｄ,细胞体积增大,突起增多并增长,形成网络,数周后,突起可长达500～1000μｍ(B图)。
NGF可促进PC12细胞向类似交感神经元样的形态分化,最终导致PC12细胞在生理、生化方面都具有神经元样的功能[12]。
分化后的PC12细胞对ACh的敏感性增大5~7倍有的战友提到分化的PC12药敏性更好是不是因为分化后的PC12细胞对ACh的敏感性增大5~7倍二、我养这个细胞一年多了，有点经验和大家交流一下。
1.我用的是15％的马血清和%的胎牛，胎牛要用进口的，国产的容易分化。
2.关于表面处理的问题，值得注意的是胶原和多聚赖氨酸使细胞贴壁的原理不太一样。
多聚就是纯粹的物理黏附作用，而胶原则是刺激的细胞，使细胞的表达一些能有助于贴壁的蛋白，这种刺激作用还涉及到MAPK途径，所以如果做细胞信号转导的战友要注意到这点。
相关的文献可以自己到pubmed上查找。
3.完全分化的细胞不能传代，因为贴壁已经很牢固，强迫其脱离可能造成，尤其是细胞的突起断裂，细胞存活率很低。
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多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml)
简介：
多聚赖氨酸溶液英文名为Poly-L-lysine Solution 简称PLL 。
Leagene Poly-L-lysine 为Poly-L-lysine hydrobromide ，分子式为L-Lys-(L-Lys)n-L-Lys •xHBr ，分子量为150,000～300,000，CAS Number 25988-63-0。
PLL 是一种粘附剂，常用于载玻片的包被,可以直接稀释后用于细胞或组织培养方面的实验。
分子量大于70,000的多聚赖氨酸可以促进细胞贴壁生长，本产品可以用于促进细胞的贴壁生长和核酸杂交，制备好的载玻片可4℃保存半年。
组成:
操作步骤(仅供参考)：
1、 用于细胞培养
①_x0001_ 根据实验需要Poly-L-lysine Solution 稀释至适当浓度溶液后即可使用。
不同的细胞，Poly-L-lysine Solution 包被(Coating)的时间和浓度，甚至稀释液的选择有所不同，请自行参考相关文献进行适当的包被。
②Poly-L-lysine Solution 用于细胞培养时，包被至少5min ，有些实验需要包被1～2h ，有些情况则需要包被过夜。
③包被完成后，吸Poly-L-lysine Solution ，自然干燥培养器皿，至肉眼观察完全干燥。
通风橱内吹风数分钟即可完成干燥，对于有些实验则需要干燥2h 或更长时间。
干燥时间较长通常会更加有利于后续的细胞粘附。
④进行细胞培养，也可以用水、PBS 或培养液等适当溶液润洗后再进行细胞培养。
2、 用于核酸杂交
①_x0001_
方法一：取事先准备好的载玻片或盖玻片经160℃冷却至室温，在Poly-L-lysine Solution 上下浸蘸几下，自然干燥，4℃备用，亦可室温保存1个月。
②_x0001_
方法二：Poly-L-lysine Solution 涂于玻片上，自然干燥后即可使用，可用于细胞涂片和切片。
③_x0001_ 方法三：滴加5～10μl Poly-L-lysine Solution 至玻片上，用另一盖玻片以血涂片方法推片或用另一玻片紧贴于其上，相互摩擦以使两玻片相对的一面涂布上明胶包被溶液。
编号 名称 IH0091 IH0091 Storage Poly-L-lysine Solution(1mg/ml) 10ml 50ml -20℃ 避光 使用说明书
注意事项：
1、Poly-L-lysine可以被某些细胞所消化并吸收，摄入过多的Poly-L-lysine会产生一定的
细胞毒性。
2、避免反复冻融，如果大量使用，可以取适量溶液置于4℃保存，6个月有效。
3、浸蘸Poly-L-lysine Solution时，务必使玻片完全浸入液体中，否则易使包被不完全产
生样本脱落现象。
4、干燥过程中注意避免尘埃污染。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关：
编号名称
CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)
DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
IH0305 柠檬酸钠抗原修复液(50×)
IH0340 免疫染色一抗稀释液
NR0003 Lezol(总RNA提取试剂)
PE0103 Acr-Bis(30%,29:1)
PW0082 丽春红S染色液(1×Ponceau S)
TC0699 葡植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)。