实验四细胞活体染色

实验流程 切取洋葱鳞茎的幼嫩鳞片（3~4mm3）
撕开面向下
Janus green B 染色(30min)
平浮于载玻片上 滴加一滴Ringer液 制备标本片
镜检
注意事项 • 活体染色的显著特点是选取的染色剂的毒性小， 可保持细胞的活性。 染色剂浓度小，溶质：溶 剂为1：3000左右． • 实验中取肝组织不要太大，在任氏液中充分洗去 肝组织内的血细胞， 浸入詹纳斯绿-B染液染色 时，要使部分肝组织暴露于空气中，保持组织块 的活性和正常呼吸，便于保持线粒体的氧化性． • 任氏液的作用是提供类似体内环境，保持肝组织 的活体状态． • 压片时在盖玻片两端各放一根发丝，防止压破细 胞并保持细胞的有氧呼吸状态．
实验结果

先用低倍镜找到肝细胞，再换高倍 镜观察细胞质内染为蓝绿色。呈颗 粒状或线状的线粒体。注意其分布 特点。
兔肝实验结果
洋葱实验结果
实验要求
• 活体染色制片课堂评定成绩 • 使用油镜后用擦镜液将镜头仔细擦净 • 实验报告要求同前
实验材料及试剂

材料：兔肝脏和洋葱鳞茎 试剂：Ringer 氏液； 詹纳斯绿-B染液
兔子肝脏
实验流程
切取兔肝组织（2~5mm3） 用Ringer液迅速洗涤至白色 Janus green B 染色(30min) 于载玻片上剥离肝细胞 清除较大肝组织 制备标本制片 图中虚线表示发丝
镜检
切取洋葱鳞茎表皮
实验四
细胞的活体染色
(必做，综合性实验，4学时）
前言


随着现代生命科学的发展, 人类拥有 了更多认识生命奥秘以及诠释生命活 动规律的技术手段和方法. 细胞活体染色作为经典技术不仅应用 于现代细胞生物学研究领域,而Βιβλιοθήκη Baidu在 临床医学领域, 广泛用于疾病的预防、 诊查和治疗.
实验目的

掌握活体染色方法 和原理，了解 光学显微镜下线粒体基本形态结 构及分布.
实验原理
细胞活体染色


活体染色是利用某些无毒或毒性较小的染色 剂，在不影响细胞生命活动的情况下显示细 胞内的天然构造，因此更具有真实性。活体 染色又分为体内活体染色和体外活体染色。 詹纳斯绿B（Janus green B）能够将线粒体 活染为蓝色，主要是由于线粒体内的细胞色 素酶系使染料始终保持在氧化状态（即有色 状态），在周围的细胞质内，这些染料被还 原为无色的色基（即无色状态）。