广藿香的组培快繁技术研究

广藿香的组培快繁技术研究

黄锋;曾劲松

【摘要】以广东省遂溪县乌塘镇广藿香嫩茎为外植体,研究影响丛生芽诱导、增殖与壮苗生根的主要因素.结果表明:遂溪乌塘广藿香的外植体处理过程中,用0.1％升汞(加2滴吐温-80)溶液消毒8min.,污染率和褐变率最低;适宜丛生芽诱导分化的培养基是MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L;最佳增殖培养基是MS+6-

BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L;生根培养基以MS+IAA0.5 mg/L+IBA0.5 mg/L最佳,生根率达100％,而且根系发育良好.

【期刊名称】《热带林业》

【年(卷),期】2018(046)001

【总页数】3页(P4-6)

【关键词】遂溪乌塘;广藿香;组织培养

【作者】黄锋;曾劲松

【作者单位】湛江市林业科学研究所,广东湛江 524033;海南渊源农业科技有限公司,海南海口 570276

【正文语种】中文

【中图分类】S722.3+7

广藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth.为唇形科刺蕊草属多年生草本植物，喜温暖湿润和光照充足环境，怕霜冻，宜疏松肥沃和排水良好的沙壤土，生长最适

温度为22～28℃。原产菲律宾、马来西亚、印度等国，目前广东是主要产地。广藿香作为中国传统药料由来已久，其挥发油具有抗菌、抗病毒、消炎、促进消化、抗氧化药理活性[1]。此外，广藿香还广泛应用于食品、香料等领域。

广东省遂溪县乌塘镇地处雷州半岛北部，螺岗岭脚下，110°00′15″E，

21°16′14″N。属于亚热带气候，雨量充沛、长年无霜，土地肥沃，有雷州青运河

横贯全镇，还有两条自然河流贯穿，灌溉便利，非常适合广藿香生长。自1960年起，当地群众开始种植广藿香，广藿香是当地传统的经济作物，药效佳，销路广、效益高。随着种植规模不断扩大，传统的剪枝扦插种植模式虽然简单易行，但长期采用扦插繁殖,引起植株生长缓慢、参差不齐,且病虫害发生率高、抗逆性弱,单位产量低[2]。故采用新的繁殖方式以助提高广藿香的品质和产量的必要性。喻良文等

在做不同繁殖方式的广藿香药材挥发油分析表明，用组织培养繁殖与扦插繁殖的遂溪广藿香，其挥发油差异微小[3]。因此，研究广藿香种苗组培快繁技术，可为今

后遂溪乌塘镇广藿香种植的种源提纯、优化以及工厂化育苗提供技术基础。

1 材料和方法

1.1 材料

（1）以乌塘镇生长健壮、无病虫害的优良广藿香（以下简称乌塘广藿香）单株芽条作外植体。

（2）外植体诱导分化与芽增殖培养基：均采用MS基本培养基+适量细胞分裂素

和生长素；添加3%白糖、0.6%琼脂，pH 值为 5.8。

（3）生根培养基：1/2MS+适量生长素。添加3%白糖、0.5%琼脂，pH 值为 5.8。

1.2 方法

（1）外植体选择与消毒处理：在天气条件良好时，选择生长健壮、无病虫害的优良单株幼嫩茎段，用自来水冲洗30min.，在无菌条件下用75%酒精浸泡8～10s，再用0.1%升汞加2滴吐温-80溶液浸泡,按不同时长分别处理，4、6、8、10、12、

14min.，无菌水冲洗各5次，然后切成2～3cm带节小段，接种于诱导培养基上。（2）培养条件：培养室温度为28℃，光照约2500Lx，光照时间约14h/d（外植体诱导和材料增殖转接采用暗培养7d）。

（3）外植体诱导：将不同消毒处理后的外植体接种于诱导培养基，诱导培养基采用MS培养基+6-BA1.0m g/L+N AA0.2m g/L组合，每个处理接种40个外植体，比较外植体的污染、褐化情况。外植体接种大约20d左右，没有褐变和污染的外

植体节间萌发出小芽。

(4)增殖培养：将诱导出的芽转接到增殖培养基中开始扩繁，转入增殖培养阶段。

增殖培养阶段,不同浓度的6-BA和NAA组合对乌塘广藿香丛芽增殖的效果进行比较。以乌塘广藿香丛芽在不同培养基中转接3次（每次以25d为一个周期）后的

生产情况进行观察和分析。6-BA浓度分别为0.2、0.5、1.0、2.0.mg/L，NAA 浓度为 0.1、0.2、0.5mg/L，每种培养基分别接种20个芽。

(5)生根培养：生根阶段采用1/2MS培养基，然后对NAA和IBA在芽苗诱导生根过程中的效果进行比较。分别设 NAA 浓度为 0.2、0.5、1.0、2.0m g/L，IBA浓

度为 0.2、0.5、1.0、2.0mg/L，每种培养基分别接种100株苗，比较生根情况，25d后统计生根指标。

(6)试管苗移栽：把不同生根培养基中诱导生根的试管苗炼苗后，移栽到泥炭土、

椰糠、珍珠岩、谷壳的混合基质中，30d后比较成活率和生长情况。

2 结果与分析

2.1 外植体消毒处理

从表1可知，升汞消毒时间对外植体的污染率和褐变率影响非常明显，消毒时间

低于4min.污染率达100%，消毒时间超过14min.后，褐变率达100%。而消毒

时间为8min.时，诱导成功率最高，诱导率达51%。这一结果与伍彧、李明的实

验发现[4]基本吻合，但与叶片做为外植体时的结果有较大差异[5]。

表1 不同消毒处理时间对外植体诱导成功率的影响Table 1 The effect of different disinfecting time in the success rate of ex-plant induction外植体

污染率（%）消毒时间(min.) 接种数量（个）褐化率（%）诱导率（%）6 0嫩

茎4681 0 100 68 31 22 20 51 31 12 14 40 40 40 40 40 40 82 12 18 47 84 100 80

2.2 不同浓度的生长素和细胞分裂素对广藿香丛芽增殖的影响

没有褐变和污染的外植体在诱导培养基中培养10d左右，节间处开始萌发出芽点，继续培养15d左右，芽点长成长度大约2cm的嫩芽后，将其从外植体切下转接到新的增殖培养基中培养，从而进入继代苗增殖阶段。增殖培养基选择不同浓度的

6-BA和NAA进行比较，挑选最合适的增殖培养基。

表2 不同激素水平对增殖培养的影响Table 2 The effect of different hormone levels in the tissue culture and propagation培养基代号激素水平(mg/L)NAA

6-BA 增殖倍数苗高（cm）生长情况M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10 0.2 0.2 0.5 0.5 0.5 1.0 1.0 1.0 2.0 2.0 0.1 0.5 0.1 0.2 0.5 0.1 0.2 0.5 0.2 0.5 2.5 2.8 5.5 5.8 5.6 8.0 8.2 7.5＞20＞20 1.0～1.8 1.2～2.0 1.0～1.5 1.2～2.0 1.5～2.0 0.5～1.0 0.5～1.2 0.8～1.5＜0.4＜0.4长势较好,叶片较大长势不均匀，个体

差异较大长势较好长势好,高度适中，个体比较均匀长势一般，苗矮小长势一般，

苗矮小、丛芽多长势一般，丛芽多长势一般，丛芽多，生长不均匀(丛芽数量非常多，呈簇状，基本不伸长，有效芽数量少)

从表2显示，激素浓度对乌塘广藿香的增殖培养影响很大，尤其是6-BA的浓度对芽苗的增殖起着决定性的影响。M1和M2（6-BA浓度为0.2m g/L）培养基中，芽苗增殖率相对较低，但苗木长势较好。M3、M4、M5（6-BA浓度为0.5m g/L）培养基中苗木生长都较好，尤其是M4，苗木高度比较一致，而且生长良好，适合进一步扩繁。M6、M7、M8（6-BA浓度为1.0m g/L）培养基中，苗木增殖率较