血浆蛋白质代谢紊乱

（4）肾病综合征
图谱 特征
选择性蛋白质丢失时，小分子Alb 等丢 失后，α2-MG, Hp（为聚合体）大分子 蛋白代偿性合成增多，使α2区带增加。
（5）浆细胞病与M蛋白
图谱 特征
浆细胞病(plasma cell dyscrasia)时，血 清或尿液中可出现结构单一的 M蛋白，在蛋 白电泳时呈现一个色泽深染的窄区带，此区 带较多出现在γ或β区。
第三节
嘌呤核苷酸代谢紊乱
一、嘌呤核苷酸代谢
二、高尿酸血症
(一)尿酸排泄障碍
(二)尿酸生成过多
1．嘌呤合成代谢紊乱
(1)次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺乏 (2)PRPP合成酶亢进 (3)葡萄糖-6-磷酸酶缺乏
2．嘌呤吸收增多 3．嘌呤分解增加
三、高尿酸血症与痛风
由于遗传性或获得性的尿酸排泄减少 或嘌呤代谢障碍，导致高尿酸血症， 当出现尿酸盐结晶形成和沉积，并引 起特征性急性关节炎、痛风石、间质 性肾炎、尿酸性尿路结石时，即为痛 风，严重者有关节畸形及功能障碍。
临床生物化学检验
血浆蛋白质与 含氮化合物的代谢紊乱
林孟戈
第一节
体液蛋白质及其代谢紊乱
一、血浆蛋白质的功能和分类
(一)血浆蛋白质的功能
①营养作用 ②维持血浆胶体渗透压③ 运输功能 ④作为pH缓冲系统的一部分 ⑤抑制组织蛋白酶 ⑥一些酶在血浆中 起催化作用 ⑦代谢调控作用⑧参与凝 血与纤维蛋白溶解 ⑨免疫功能
第四节 血清蛋白质测定
一、血清总蛋白测定
假定： 1、所以蛋白质都是单纯的多肽链，糖脂 类和金属有机物等不计在内，含氮量平均为 16%。 2、各种蛋白质与化学试剂的反应性一致。
蛋白质测定利用其 特有的结构和特性
①重复的肽链结构； ②酪氨酸和色氨酸残基对酚试剂反 应或紫外光吸收； ③与色素结合的能力； ④沉淀后借浊度或光折射测定
(二)血浆蛋白质的分类
1．电泳分 类法
2．功能分
类法
3．各电泳 区带的主 要蛋白质
2．类固醇激素
二、血浆蛋白质及其异常
(一)前清蛋白(prealbumin，PA)
性质 ●半衰期很短，仅约12小时
●是运载甲状腺素和维生素A的结合蛋白
临床 意义 ①作为营养不良的指标
②作为肝功能不全的灵敏指标
③是负性急性时相反应蛋白
二、继发性氨基酸代谢紊乱
1．肝功能衰竭和氨基酸代谢失衡 肝功能衰竭时有明显的氨基酸代谢紊乱， AAA在肝脏中的降解减少，引起血浆AAA浓 度增高。而BCAA在肌肉等组织中的分解并 未减少，相反因肝脏降解胰岛素减少致血 浆胰岛素含量增高，促进BCAA进入肌肉而 分解增加，导致血浆 BCAA浓度降低。 2．肾脏疾病 继发性肾性氨基酸尿是由于肾小管损害和 肾近曲小管的功能障碍引起。
第二节
一、原发性氨 基酸代谢紊乱
氨基酸代谢紊乱
（一）苯丙酮酸尿症
BH2
二氢喋呤还原酶 生化 缺陷
BH4
苯丙氨酸
苯丙氨酸羟化酶
酪氨酸
（二）酪氨酸血症
酪氨酸 酪氨酸转氨酶 对-羟苯丙酮酸 对-羟苯丙酮酸氧化酶 尿黑酸 尿黑酸氧化酶 苹果酰乙酰乙酸 延胡索酰乙酰乙酸 延胡索酰乙酰乙酸酶 Ⅰ型 Ⅱ型 生化 缺陷
临床意义
(1)用于贫血的鉴别诊断
低血红素贫血 (缺铁性贫血) 再生障碍性贫血（红 细胞对铁利用障碍） TRF↑、TIBC↑、铁饱和度↓ TRF↓、TIBC↓、铁饱和度↑
(2)在急性时相反应中含量降低
(3)作为营养状态的一项指标
(九)C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)
性质
5)无清蛋白血症
(2)血浆清蛋白增高
(3)由清蛋白含量估计其配体的存在形式和作用
(4)作为个体营养状态的评价指标
(5)清蛋白的遗传性变异
无清蛋白血症 双清蛋白血症
(三) α 1-抗胰蛋白酶
(α 1-antitrypsin，α 1-AT或AAT)
性质
● 含糖10％-12％；是α1-区带的主要组分 ● 具有多种遗传表型 Proteinase inhibitor ● 正常 ● 异常 PiMM PiZZ、 PiSS、PiSZ、PiMZ、PiMS
1、临床意义和方法
发现氨基酸代谢异常疾病；非口服提供营养时调整 各种氨基酸用量。
生化 缺陷
胱硫醚β合成酶（CBS） 胱硫醚 半胱氨酸
同型半胱氨酸与心血管疾病
近年来的研究表明同型半胱氨酸（homocysteine，HCY）可以 作为判断心血管疾病危险性的独立指标，并认为与传统的指标相 比，HCY具有更高的应用价值。 高同型半胱氨酸引起心血管疾病的机制： (1)同型半胱氨酸内酯化合物形成：因为血液同型半胱氨酸浓度 增加可以自发形成巯基内酯化合物：①可与反式视黄酸共同引起 血小板的凝集；②引起血栓素(TXB2)以及PGFlα （前列腺素Flα ） 的形成，从而促进血凝块的形成，引起临床上常见的梗塞性疾病； ③可与低密度脂蛋白形成复合体，随后被巨噬细胞吞噬，转变为 泡沫细胞，堆积在动脉内参与形成粥样硬化斑块。 (2)同型半胱氨酸氧化：同型半胱氨酸会发生自发氧化，形成超氧 化物和过氧化氢，因而导致内皮细胞的损伤和低密度脂蛋白的氧化， 并可造成血管平滑肌持续性地收缩，引起缺氧，加速动脉粥样硬化。
二、血清清蛋白测定
血清中清蛋白测定常用溴甲 酚绿和溴甲酚紫染料结合法测定。
三、特定蛋白质的测定
目前临床上多采用免疫比浊法测定， 包括散射比浊法和透射比浊法 。
第五节 血清蛋白质电泳分析
一、血清蛋白电泳
二、免疫固定电泳
第六节 血清氨基酸检测
（一）血尿氨基酸定性
方法有薄层层析法、尿液颜色试验和Guthrie微生物试验。 （二）血尿氨基酸定量
2．典型异常血清蛋白电泳图谱
(1)急性时相反应
图谱 特征
PA , Alb , TRF ↓ AAG , Hp , AAT , Cp , CRP等↑
（2）慢性感染（风湿病）
图谱 特征
免疫球蛋白增高，在炎症 活动期类似APR
（3）肝硬化
图谱 特征
与肝炎相似，Alb显著降低，但有一显 著特点，即形成β－γ桥联（宽γ带）。
特点
对各种蛋白质呈色基本相同，特异性和 准确度好，显色稳定，试剂单一，方法简便， 但灵敏度较低。
方法
酚试剂法
原理
根据蛋白质中的酪氨酸和色氨酸可使磷 钨酸和磷钼酸还原为钨蓝和钼蓝，进行比色 测定。
特点
灵敏度高，可用于微量蛋白质的测定。 适合测定单一蛋白质，易受还原性化合物的 干扰。
方法
直接紫外吸收法
简便、快速、灵敏，但不同蛋白质与染 料的结合力不一致，染料有吸附作用，可造 成仪器污染。
方法
比浊法
原理
三氯乙酸、磺基水杨酸等酸类能与蛋白 质结合而产生微细沉淀，由此引起的悬浮液 浊度大小与蛋白质的浓度成正比。
特点
操作简便、灵敏度高，可用于尿液和脑 脊液蛋白质浓度低的样品测定。但各种蛋白 质形成的浊度有较大的差别，影响浊度形成 的干扰因素多。
临床意义
①是近期血管内溶血的判断指标
②烧伤和肾病综合征时Hp增加 ③严重肝病雌激素分解减少使Hp降低
(六)α 2-巨球蛋白
(α 2-macroglobulin，α 2-MG 或 AMG) 能与多种离子和分子结合，特别是能 与蛋白水解酶结合而影响这些酶的活 性，可起到有选择地保护某些蛋白酶 活性的作用。
性质 临床 意义
②糖皮质激素增加可引起AAG升高
③营养不良、蛋白严重丢失等情况下
AAG降低
④雌激素使AAG降低
(五)结合珠蛋白(haptoglobin，Hp) 性质
●分子中有α与β链形成α2β2四聚体，由于α1F、 α1S、α2三种等位基因编码形成αβ聚合体，因 此个体之间可有多种遗传表型。 ● Hp的主要功能是与红细胞中释放出的游离血红 蛋白结合，每分子Hp可结合两分子Hb，形成分子 较大的Hp-Hb 复合物，可使游离的Hb不致从肾小 球滤出而阻塞肾小管，又可将血红蛋白运至肝实 质细胞或网状内皮细胞分解。
三、急性时相反应蛋白
● 急性时相反应蛋白(acute phase proteins，APPs)— —在急性炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿 瘤等情况下，血浆中浓度显著变化的蛋白质。这种现象称 为急性时相反应。 ● 急性时相反应是对炎症的一般反应，是机体防御机制的 一个部分，其详尽机制尚未十分清楚。 ● 急性时相反应蛋白升高的速度不同，CRP和α1-抗糜蛋 白酶首先升高，在12小时内AAG也升高，然后AAT、Hp、C4 和纤维蛋白原升高，最后是C3和Cp升高。
性质
临床 意义
低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时， α2-MG含量可显著增高，是一种代偿 机制以保持血浆胶体渗透压。
(七)铜蓝蛋白(ceruloplasmin，Cp，CER) 性质
● 是一种含铜的α2-球蛋白，由1046个 氨基酸组成的单链多肽，每分子含6-8个 铜原子，含糖约8-9.5％，95％的血清铜 存在于Cp中。
● 由肝细胞所合成，含5个多肽链亚单位， 非共价地结合为盘形多聚体。 ● 能结合体内的多糖物质、卵磷脂和核酸。 可以引发对侵入细胞的免疫调理作用和吞噬 作用，结合后的复合体具有对补体系统的激 活作用，表现炎症反应。
临床 意义
为最敏感的急性时相反应蛋白，可用于： 1．估计炎症活动状况 2．炎症的鉴别诊断 3．感染性疾病的鉴别诊断
原理
根据蛋白质中芳香族氨基酸含有共轭双 键，在280nm处有一吸收峰进行比色测定。
特点
灵敏度高，不破坏样品，保持样品生物 活性及回收全部蛋白质，准确性受芳香族氨 基酸含量影响，不适合组成复杂的蛋白质标 本测定。
方法
染料结合法
原理
在酸性条件下，带正电荷的蛋白质可与 染料阴离子反应而产生颜色改变。
特点
延胡索酸 + 乙酰乙酸
（三）含硫氨基酸代谢紊乱
甲 硫 氨 酸 循 环
同型半胱氨酸的清除途径1
生化 缺陷
四氢叶酸
亚甲基四氢叶酸还原酶 （MTHFR）
HCY ＋
VitB VitB 12 12 ＋ 甲基四氢叶酸 甲硫氨酸合成酶（MS） 甲硫氨酸
同型半胱氨酸的清除途径2
HCY ＋ VitB6 ＋ 丝氨酸
● Cp的主要生理功能与氧化还原反应有关， 它既能起氧化作用又能起抗氧化作用。
协助Wilson病的诊断。急性时相反应时 血浆浓度增加。营养不良、严重肝病及 肾病综合征时浓度下降。
临床 意义
(八)转铁蛋白(transferrin，Tf) 性质
●为单链糖蛋白，含糖量约6％，电泳位臵 在β区带，等电点5.5-5.9。能可逆地结合 多价阳离子，每一分子Tf可结合两个三价铁 原子。 ●正常血浆Tf一般1/3被铁离子饱和，如果 血清中的Tf完全被加入的Fe3+饱和，此时Tf 所结合的Fe就是总铁结合力（TIBC铁结合容 量）。 Tf(mg／L)＝TIBC(ug／L) ×0.70 TIBC(ug／L)＝Tf(mg／L)×1.43 铁饱和度(％)＝血清铁／TIBC×％
(二)清蛋白(albumin，ALB)
性质 是血浆中含量最多的蛋白质，分子量 为66.3kD，分子中含17个二硫键，不 含糖
生理 功能
(1)血浆中主要的载体蛋白
(2)维持血浆胶体渗透压 (3)具有缓冲酸碱的能力
(4)重要的营养蛋白
临床意义
(1)低清蛋白血症 1)清蛋白合成不足 2)清蛋白丢失 3)清蛋白分解代谢增加 4)清蛋白的分布异常
● 是蛋白酶的抑制物，占血清中抑制蛋白酶 活力的90％
临床意义
1. AAT缺陷与肺气肿的关系
AAT 正常
肺部 感染 多形核白細 胞吞噬活跃 蛋白 酶↑ AAT 缺乏 毁坏肺 泡膜 肺气 肿
消化炎 症碎屑
保护 肺泡
2. AAT缺陷与肝脏病
3．急性时相反应蛋白
(四) α 1-酸性糖蛋白
(α 1-acid glycoprotein ，AAG) pI为2.Biblioteka Baidu-3.5，含糖约45％，是主 要的急性时相反应蛋白 ①为急性时相反应的指标
方法
凯氏定氮法
原理
测定样品中氮含量后，根据蛋白质平均 含氮量16%计算出蛋白质的浓度。
特点
是经典的蛋白质测定方法，结果准确性 好，精密度高，是公认的参考方法，用于标 准蛋白质的定值和校正其他方法。但操作复 杂，费时，不适合临床常规测定。
方法
双缩脲法
原理
蛋白质中的连续肽键在碱性溶液中可与 铜离子作用产生紫色的络合物，再进行比色 测定。
四、血清蛋白质电泳组分的临床分析
(一)血清蛋白电泳的正常组分 各区带蛋白质的参考值为：
清蛋白(Alb)：57％-68％ αl球蛋白：1.0％-5.7％
α2球蛋白：4.9％-11.2％ β球蛋白：7％-13％ 醋纤膜 单色光
γ球蛋白：9.8％-18.2％
(二)异常电泳图谱的临床意义
1．血清蛋白电泳异常图谱分型