恶性黑色素瘤的预后研究
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季天海 １， 姚丽青 １， 陈 曦 ２， 张哉根 ３， 邓 军４
（ １． 南京军区福州总医院 病理科， 福建 福州 ３５００２５； ２． 福建医科大学附属第一医院 耳鼻咽喉研究所， 福建 福州 ３５０００５； ３． 第三军医大学附属新桥医院 病理科， 重庆 ４０００３７； ４． 第三军医大学附属西南医院 病理研究所， 重庆 ４０００３７）
化染色法 " 操作参照试剂盒说明进行 ! 切片加一抗 之前胰酶消化 ２０ ｍｉｎ "ＰＢＳ 代替一抗作为阴性对照 !
１． ２． ３ 结果判定 两位病理医师独立观察每张切片 １０ 个具有代表性的高倍视野 ! ＧＳＴ－ $$Ｔｏｐቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ% $Ｐｇｐ 判断标准 " 见图 １￣３# 阳性 染色者在细 胞膜或& 和 ’
摘要： 目的 拟找出与各级恶性黑色素瘤预后相关的因素。 方法 选择南京军区福州总医院、 福建医科 大学第一附属医院及第三军医大学附属西南医院、 附属新桥医院、 附属大坪医院病理科 １９９５￣１９９８ 年间归档的 各级恶性黑色素瘤标本 ５５ 例。 同时选取尸检对应部位正常组织共 １０ 份作为阴性对照。 应用链霉素亲生物素 － 过氧化物酶标 Ｓ－ Ｐ 法检测石蜡标本中耐药基因胎盘型谷胱甘肽 － Ｓ－ 转移酶（ Ｇ ＳＴ － π） 、 Ｄ Ｎ Ａ 拓朴酶Ⅱ （ Ｔ ｏｐｏⅡ） 、 Ｐ－ 糖蛋白 （ Ｐｇｐ） 和 Ｋｉ － ６７、 血管内皮生长因子 （ Ｖ ＥＧ Ｆ） 的表达， 并用形态计量方法检测肿瘤内微 血管密度 （ Ｍ ＶＤ ） ， 对所得的各项指标进行统计学分析。 结果 美国癌症联合会 （ ＡＪ Ｃ） 分级与预后相关 （ Ｐ ＜０． ０５） 。耐药基因 Ｐｇｐ、 Ｇ ＳＴ － π 和 Ｔ ｏｐｏⅡ的表达率分别为 ３６． ４％ （ ２０／５５＝ ３６． ４％ ） 、 ５２． ７％ （ ２９／５５＝ ５２． ７％ ） 和 ０５） 。Ｐｇｐ、 Ｇ ＳＴ π 和 Ｔ ｏｐｏⅡ的表达和 Ｔ ｏｐｏⅡ和 Ｔ ｏｐｏⅡ ４３． ６％ （ ２４／５５＝ ４３． ６％ ） ， 相互间差异无显著性 （ Ｐ ＞０． 的表达与患者预后显著相关 （ Ｐ ＜０． ０５） 。 Ｋｉ － ６７ 在肿瘤和正常组织中呈多少不等的阳性， 不同级别及与非肿瘤 组织之间差异有显著性。 多元回归分析显示该指标是预后的独立危险因素之一， 以 ２７％ 为分界点两条生存曲线 ０１） 。 微血管密度： ＡＪ Ｃ 分级中Ⅰ级与正常黏膜组织之间的微血管密度差异无 间时序分析差异有显著性 （ Ｐ ＜０． 显著性， 而Ⅱ、 Ⅲ、 Ⅳ级的微血管密度均显著增多 （ Ｐ ＜０． ０１） ， 坏死组织中微血管平均数更为增多， Ｖ ＥＧ Ｆ 的表 达与微血管密度呈显著性相关 （ Ｐ ＜０． ０１） 。微血管计数＞３９． ５ 的恶性黑色素瘤比＜３９． ５ 的恶性黑色素瘤生存 期显著缩短。 结论 用 Ｃ Ｏ Ｘ 逐步回归模型进行多因素分析，筛选出了对恶性黑色素瘤预后有密切关系的 ７ 个指标： ＡＪ Ｃ 分级是最重要的预后因子，其次为 Ｋ ｉ － ６７ 阳性率、微血管密度、肿瘤耐药因子 Ｐｇｐ、 Ｔ ｏｐｏⅡ、 Ｇ ＳＴ π， 而组织有无坏死则为保护因素。 关键词： 恶性黑色素瘤； 预后； 因果律 中图分类号： Ｒ ７３２． ２３ 文献标识码： Ｂ
收稿日期 $２００４－ ０２－ ２５
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中国现代医学杂志
第 １５ 卷
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１． ２． ２ 免疫组织化学
全部标本均经 １０．０％ 福尔马
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第 １５ 卷第 ５ 期 ２００５ 年 ３ 月
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中国现代医学杂志 -"./+,# "0 1"23/+ 132*4*+3
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文章编号： １００５－ ８９８２ （ ２００５） ０５－ ０７１９－ ０４
恶性黑色素瘤的预后研究
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浆有棕红色颗粒沉着 ! 根据肿瘤细胞膜或浆的染色 程度以及染色细胞百分率进行分析评分 # 基本不着 色者为 ０ 分 % 着色淡者为 １ 分 % 着色适中者为 ２ 分 % 着 色 深 者 为 ３ 分 ! 着 色 细 胞 占 计 数 细 胞 百 分 率!
Ｋｉ－ ６７ 阳性率 $ 微血管密度 $ 肿瘤耐药性和肿瘤有无 坏死进行统计学分析 ， 旨在为临床判断预后提供有
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恶性黑色素瘤因其生长方式的侵袭性以及预后 的不良性已越来越受到重视 ! 长期以来该肿瘤的组 织学评估是判断预后的标准手段 " 但因受到病理医 师的诊断水平和其他一些主观因素的影响对判断级 别存在分歧 " 而且组织学分级在某些情况下并不能 完全反映该肿瘤的生物学行为 ! 为此 " 研究恶性黑 色素瘤临床与病理因素 " 寻求能准确反映预后的客 观指标以辅助诊断则成为恶性黑色素瘤研究工作的 重点 ! 前期我们已就咽喉部恶性黑色素瘤与肿瘤预 后进行了研究 ［１"２］" 本文应用 ＣＯＸ－ 逐步回归模型方 法 对 与 恶 性 黑 色 素 瘤 预 后 相 关 的 指 标 #ＡＪＣ 分 级 $
（ １． 南京军区福州总医院 病理科， 福建 福州 ３５００２５； ２． 福建医科大学附属第一医院 耳鼻咽喉研究所， 福建 福州 ３５０００５； ３． 第三军医大学附属新桥医院 病理科， 重庆 ４０００３７； ４． 第三军医大学附属西南医院 病理研究所， 重庆 ４０００３７）
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１． ２． ３ 结果判定 两位病理医师独立观察每张切片 １０ 个具有代表性的高倍视野 ! ＧＳＴ－ $$Ｔｏｐቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ% $Ｐｇｐ 判断标准 " 见图 １￣３# 阳性 染色者在细 胞膜或& 和 ’
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１． ２． ２ 免疫组织化学
全部标本均经 １０．０％ 福尔马
林液固定 " 石蜡包埋切片 ! 所用抗体胎盘型谷胱甘 肽 － Ｓ－ 转 移 酶 & ＧＳＴ－ ! ’ $ＤＮＡ 拓 朴 酶 "& Ｔｏｐｏ
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恶性黑色素瘤的预后研究
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浆有棕红色颗粒沉着 ! 根据肿瘤细胞膜或浆的染色 程度以及染色细胞百分率进行分析评分 # 基本不着 色者为 ０ 分 % 着色淡者为 １ 分 % 着色适中者为 ２ 分 % 着 色 深 者 为 ３ 分 ! 着 色 细 胞 占 计 数 细 胞 百 分 率!
Ｋｉ－ ６７ 阳性率 $ 微血管密度 $ 肿瘤耐药性和肿瘤有无 坏死进行统计学分析 ， 旨在为临床判断预后提供有
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恶性黑色素瘤因其生长方式的侵袭性以及预后 的不良性已越来越受到重视 ! 长期以来该肿瘤的组 织学评估是判断预后的标准手段 " 但因受到病理医 师的诊断水平和其他一些主观因素的影响对判断级 别存在分歧 " 而且组织学分级在某些情况下并不能 完全反映该肿瘤的生物学行为 ! 为此 " 研究恶性黑 色素瘤临床与病理因素 " 寻求能准确反映预后的客 观指标以辅助诊断则成为恶性黑色素瘤研究工作的 重点 ! 前期我们已就咽喉部恶性黑色素瘤与肿瘤预 后进行了研究 ［１"２］" 本文应用 ＣＯＸ－ 逐步回归模型方 法 对 与 恶 性 黑 色 素 瘤 预 后 相 关 的 指 标 #ＡＪＣ 分 级 $