斑马鱼的发育历程ppt课件
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模式生物-斑马鱼PPT课件
213112036 赵秋萍
1
斑马鱼简历
中文学名：斑马鱼
中文别名：蓝条鱼、花条鱼、蓝 斑马鱼、印度鱼、印度斑马鱼
英文名：Zebrafish
界：动物界
Animalia
门：脊索动物门 Chordata
纲：辐鳍鱼纲 Actinopterygii
目：鲤形目 Cypriniformes
科：鲤科
Cyprinidae
揭开谜底，保护人类的毛细胞免受损伤、并推动毛细胞的再生。
9
二、斑马鱼在医学中的应用
3、水质的监测 斑马鱼的基因与人类基因相似度达到87％，这意味着在它身上得出的
水质监测结果，多数情况下都适用于人类。香港水务署研发生物感应预 警系统，利用斑马鱼配合计算机和互联网作24小时监测和预警，并透过 发光菌进行快速毒性检测，60分钟内可甄别逾1000种水中有害物质，每 次成本亦只需50元港币。署方估计每年可节省200万元港币的开支 。
2、突变鉴别 斑马鱼产出单倍体后代的可能性较大，在这样的个体中，许多隐性基因
决定的胚胎表现型都可以暴露出来。也可以快速育成二倍体斑马鱼的同基 因品系。因而一些隐性突变仅需一代或两三代就可得到鉴定，由于斑马鱼 繁殖一代仅需三个月左右，从而保证隐性突变的快速鉴别，大大节约了时 间。利用斑马鱼的这种遗传特点很快就鉴定出许多重要的突变
属：短担尼鱼属
Danio
种：斑马鱼
Danio rerio
分布：分布于孟加拉、 印度、巴基斯坦、 缅甸、尼泊尔 的溪流。
2
特征： 斑马鱼起源于印度，为小型热带淡水硬骨鱼，因其体
侧具有5条延伸至尾部的水平蓝色条纹而得名。大多成 鱼体长约为3~4厘米，寿命约为2~3年。
成熟的雌鱼每隔一周可产几百粒卵子。卵子体外受精， 体外发育，胚胎发育同步，且速度快，在25~31℃之间发 育正确，约3个月可达性成熟。
1
斑马鱼简历
中文学名：斑马鱼
中文别名：蓝条鱼、花条鱼、蓝 斑马鱼、印度鱼、印度斑马鱼
英文名：Zebrafish
界：动物界
Animalia
门：脊索动物门 Chordata
纲：辐鳍鱼纲 Actinopterygii
目：鲤形目 Cypriniformes
科：鲤科
Cyprinidae
揭开谜底，保护人类的毛细胞免受损伤、并推动毛细胞的再生。
9
二、斑马鱼在医学中的应用
3、水质的监测 斑马鱼的基因与人类基因相似度达到87％，这意味着在它身上得出的
水质监测结果，多数情况下都适用于人类。香港水务署研发生物感应预 警系统，利用斑马鱼配合计算机和互联网作24小时监测和预警，并透过 发光菌进行快速毒性检测，60分钟内可甄别逾1000种水中有害物质，每 次成本亦只需50元港币。署方估计每年可节省200万元港币的开支 。
2、突变鉴别 斑马鱼产出单倍体后代的可能性较大，在这样的个体中，许多隐性基因
决定的胚胎表现型都可以暴露出来。也可以快速育成二倍体斑马鱼的同基 因品系。因而一些隐性突变仅需一代或两三代就可得到鉴定，由于斑马鱼 繁殖一代仅需三个月左右，从而保证隐性突变的快速鉴别，大大节约了时 间。利用斑马鱼的这种遗传特点很快就鉴定出许多重要的突变
属：短担尼鱼属
Danio
种：斑马鱼
Danio rerio
分布：分布于孟加拉、 印度、巴基斯坦、 缅甸、尼泊尔 的溪流。
2
特征： 斑马鱼起源于印度，为小型热带淡水硬骨鱼，因其体
侧具有5条延伸至尾部的水平蓝色条纹而得名。大多成 鱼体长约为3~4厘米，寿命约为2~3年。
成熟的雌鱼每隔一周可产几百粒卵子。卵子体外受精， 体外发育，胚胎发育同步，且速度快，在25~31℃之间发 育正确，约3个月可达性成熟。
斑马鱼的发育历程
精品课件
囊胚期胚胎正面观。A：256-细胞期（2.5h）；B：高囊胚期（3.3h）；C：高 囊胚期和椭形期之间的转变（3.5h）；D：椭形期和球形期之间的转变（3.8h） ；E：穹顶期（4.3h）；F：30%-外包期（4.7h）。比例尺=250μm
精品课件
原肠期 (5.25-10h)
外 包 运 动 的 继 续 ， 以 及 形 态 发 生 细 胞 的 内 卷 （ involution ） 、 集 合 （ convergence）和延伸（extension）运动的发生，产生了原始胚层和胚轴。
极 外包期腹侧观， 观胚盾期，箭头指 ：示
胚 盾 外；
E
6h
D
；原 ：动物极观 肠期发育。 胚： 环 期
外 ：胚盾 包期（ 期 （
） ）； ，胚盾标志背 ：胚环期（ 侧 ，）
C
F 70%8h
5.25h B
A 50%-
体节期（10-24h）
此期发生了一些有趣的形态学变化：体节发生、器官原基可见、尾芽 更为显著、胚体延长（图15）、AP和DV轴变得明确、第一次出现细胞 发生形态分化以及胚体开始运动。此期可称“尾芽期”，因为在此整 个时期，尾芽一直存在于不断伸长的胚轴末端。
此期用“实囊胚”（ “stereoblastula”）称之可能更准确，因为
这一术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是 如此（图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。卵裂取向不 确定，比卵裂期亦更不规则。此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面 伸出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞 大小判断比用细胞位置判断更为有效。从动物极观，胚盘呈轻度椭球 形（尤在早期）。
侧 ； ：
外 包 期 （ ） ， 在 一 些 胚 胎 中 可 见 尾 芽 （ 箭 头 所
囊胚期胚胎正面观。A：256-细胞期（2.5h）；B：高囊胚期（3.3h）；C：高 囊胚期和椭形期之间的转变（3.5h）；D：椭形期和球形期之间的转变（3.8h） ；E：穹顶期（4.3h）；F：30%-外包期（4.7h）。比例尺=250μm
精品课件
原肠期 (5.25-10h)
外 包 运 动 的 继 续 ， 以 及 形 态 发 生 细 胞 的 内 卷 （ involution ） 、 集 合 （ convergence）和延伸（extension）运动的发生，产生了原始胚层和胚轴。
极 外包期腹侧观， 观胚盾期，箭头指 ：示
胚 盾 外；
E
6h
D
；原 ：动物极观 肠期发育。 胚： 环 期
外 ：胚盾 包期（ 期 （
） ）； ，胚盾标志背 ：胚环期（ 侧 ，）
C
F 70%8h
5.25h B
A 50%-
体节期（10-24h）
此期发生了一些有趣的形态学变化：体节发生、器官原基可见、尾芽 更为显著、胚体延长（图15）、AP和DV轴变得明确、第一次出现细胞 发生形态分化以及胚体开始运动。此期可称“尾芽期”，因为在此整 个时期，尾芽一直存在于不断伸长的胚轴末端。
此期用“实囊胚”（ “stereoblastula”）称之可能更准确，因为
这一术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是 如此（图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。卵裂取向不 确定，比卵裂期亦更不规则。此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面 伸出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞 大小判断比用细胞位置判断更为有效。从动物极观，胚盘呈轻度椭球 形（尤在早期）。
侧 ； ：
外 包 期 （ ） ， 在 一 些 胚 胎 中 可 见 尾 芽 （ 箭 头 所
斑马鱼血管发育ppt课件
B、受精6.5天后，血管造影
C、受精7.5天后，血管造影
（所有面板是面向. 与延髓左侧）
30
受精6~6.5天后：
斑马鱼头部和颅主干约受精6.5天的多层复合图
图纸准备详细五个重建血管的模式。这些图纸不完整的。对
于清晰度，只有主要的动脉和静脉血管和相当部分的连接到他们
的小口径血管在每个图所示。一些比较重大的血管都被省略了一
分支
.
19
2.5~3dpf
• 除头4组Se，其余的不在SeA和SeV间交替 • DLAV在尾端形成网状，并向喙端移动 • DLAVs与头部PHBC,BA相连 • CA→一条新血管→分支→尾端形成循环 • D-V(DA,PCV)开始分离 • CV丛向腹侧浓缩
.
20
• 左PCV→SeV
• AMA →SBA,SIA • SIV，肝血窦，肝门静脉 • PA,PV形成一条线,PA离开DA，
斑马鱼
.
1
• 斑马鱼，人类疾病研究的理想模式动物 • The Vascular Anatomy of the Developing Zebrafish
• 旋转培养
.
2
斑马鱼作模式生物的特点：
1、斑马鱼的基因与人类基因高度的相似性 2、发育周期短，体型小，发育条件易控制 3、繁殖能力强，易于饲养，胚胎透明，易于观察 4、有数以千计的胚胎突变体，是研究胚胎发育分子 机制的优良资源
.
9
1~1.2dpf
第一次发育：VA →AA1 →LDA →DA →CA →CV →PVA →CCV/DC
.
10
第二次发育：动脉：LDA←VA →AA1 →PICA
→CaDI
→CrDI →PMBC →PHBC
斑马鱼 PPT课件
Page 6
1、用于细胞谱系分析 2、用于研究突变对胚胎的影响 3、用于饱和诱变，克隆和分析造成突变的原因 4、基因转移
Page 7
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1、细胞谱系分析
含义：通过记录特定细胞在胚胎发育中的分裂历史，来揭 示其特定的细胞发育命运，观察发育潜能。
方法：直接观察法、遗传嵌合克隆分析法、颜料示踪分析 法
来，扩大了
Page 12
4、基因转移
实验： ①材料：拟形还原病毒载体、 斑马鱼囊胚期胚胎 ②拟形还原病毒：含有鼠类基因组
外壳中的env糖蛋白 被取代 VSV（水泡性口
膜炎病毒)中的糖蛋白
一进入细胞，可将还原病毒序列 整合到寄主基因组中
Page 13
病毒载体能有效感染鱼类细胞 ③操作：
病毒
51个斑马鱼的 囊胚期胚胎
Page 8
2、突变
原理：斑马鱼单倍体和二倍体雌核发育 方法：①单倍体胚胎培育：
精子（经紫外照射）＋卵子 ②二倍体胚胎培育
精子（经紫外照射）＋卵子
静水压休 克或热休 克
杂合或純合 的雌核发育 二倍体
Page 9
作用及特点： 单倍体胚胎：胚胎可发育成基本体型 表现多种畸形 受精4天左右死亡 可用来甄别影响基本体型的突变 二倍体胚胎：可存活且可育 隐形突变通过一至三代繁育 可鉴定出来
斑马鱼的个“鱼”简历
• 斑马鱼（zebra fish）(拉丁名：Danio rerio)
中文学名： 别称： 二名法： 界：
斑马鱼
纲：
蓝条鱼、花条鱼、 蓝斑马鱼、印度 鱼、印度斑马鱼
目：
Danio rerio 动物界
科：
辐鳍鱼纲 Actinoptery gii
斑马鱼的发育历程PPT课件
正因为囊胚期没有囊胚腔，原肠期既没有消化道（archenteron），也没有胚 孔（blastopore）。DEL细胞在胚层边缘进行内卷，因而发挥了胚孔的作用。 内卷通过将胚层向后折叠形成胚环。因此，胚环内由两个胚层：位于上方的 称上胚层（epiblast），在整个原肠期继续给位于下方的下胚层（hypoblast ）提供细胞。注意到上、下胚层这些术语可同样描述鸟类胚层结构，但所命 名的胚层在这两种脊椎动物中似乎完全不同。
SUCCESS
THANK YOU
2019/7/22
=250μ m
束 时 卵黄 消 失 处 。 比 例 尺
头 示 尾 芽 ， 尾 芽 腹 侧 （ 即 此 图 左 侧 ） 的 显 著 区 域 显 示 外 包 结
9h 10h
J 90%K 90%L
C
F 70%75%-
8.4h
G
） 增 大 为 小 膨 出 （箭头所示）； ；： ： 尾 芽 期 （ 外包期腹
SUCCESS
THANK YOU
2019/7/22
斑马鱼的发 育历程
刘婷婷
合子期 卵裂期 囊胚期 原肠期 早幼期 孵化期 咽囊期 体节期
合子期（0-0.75h）
新受精的卵子直至其第一次卵裂发生，称合子期（图3），约受精后 40分钟。受精时形成的合子直径约0.7mm。合子期只含有一个分期， 但其间也发生很多变化，可以很容易划分这一时期（见 Hisaoka and Battle,1958）。
囊胚期（2.25-5.25h）
囊胚期指从128-细胞期或第8次合子细胞分裂开始形成球 形胚盘直到第14次卵裂开始原肠期为止这一段时期。此期
有很多重要事件发生：胚胎进入囊胚中期转变（midblastula transition, MBT）、卵黄合胞体层（the yolk syncytial layer, YSL）形 成、外包（epiboly）开始。外包将一直持续到原肠期。
SUCCESS
THANK YOU
2019/7/22
=250μ m
束 时 卵黄 消 失 处 。 比 例 尺
头 示 尾 芽 ， 尾 芽 腹 侧 （ 即 此 图 左 侧 ） 的 显 著 区 域 显 示 外 包 结
9h 10h
J 90%K 90%L
C
F 70%75%-
8.4h
G
） 增 大 为 小 膨 出 （箭头所示）； ；： ： 尾 芽 期 （ 外包期腹
SUCCESS
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2019/7/22
斑马鱼的发 育历程
刘婷婷
合子期 卵裂期 囊胚期 原肠期 早幼期 孵化期 咽囊期 体节期
合子期（0-0.75h）
新受精的卵子直至其第一次卵裂发生，称合子期（图3），约受精后 40分钟。受精时形成的合子直径约0.7mm。合子期只含有一个分期， 但其间也发生很多变化，可以很容易划分这一时期（见 Hisaoka and Battle,1958）。
囊胚期（2.25-5.25h）
囊胚期指从128-细胞期或第8次合子细胞分裂开始形成球 形胚盘直到第14次卵裂开始原肠期为止这一段时期。此期
有很多重要事件发生：胚胎进入囊胚中期转变（midblastula transition, MBT）、卵黄合胞体层（the yolk syncytial layer, YSL）形 成、外包（epiboly）开始。外包将一直持续到原肠期。
关于斑马鱼的发育历程课件
关于斑马鱼的发育 历程
合子期 卵裂期 囊胚期 原肠期 早幼期 孵化期 咽囊期 体节期
合子期（0-0.75h）
新受精的卵子直至其第一次卵裂发生，称合子期（图3），约受精后 40分钟。受精时形成的合子直径约0.7mm。合子期只含有一个分期， 但其间也发生很多变化，可以很容易划分这一时期（见 Hisaoka and Battle,1958）。
=250μm
束 时 卵 黄 消 失 处 。 比 例 尺
头 示 尾 芽 ， 尾 芽 腹 侧 （ 即 此 图 左 侧 ） 的 显 著 区 域 显 示 外 包 结
9h 10h
J 90%K 90%L
C
F 70%75%-
8.4h
G
） 增 大 为 小 膨 出 （箭头所示）； ；： ： 尾 芽 期 （ 外包期腹
侧 ）观 ，， 箭前 头侧 示脊 小索 膨前 出板 ，（ 短对 箭比
层期 在（ 其 一 侧） ；背 ： 侧观
， 外包期（ 箭头示轴中 ），在一些胚胎中可见尾芽 胚层与中线边界，近轴中胚
5.7h
H I 80%-
8h
； 外： 包 期（ 外包 ）， 期（ 箭 头示腹 ）， 侧： 薄 的 排外 泄包 区ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ；腹 ： 侧观
内卷运动的开始意味着原肠期的开始，目前可以说是发生于50%-外包时（图 11A）。结果在达到50%-外包后的数分钟内出现了一个增厚的外围区域，称作 胚环（germ ring），几乎与此同时完全包围了囊胚边缘（图11B，及C箭头所 指）。随后集合运动几乎同样快速地沿胚环产生一个局部的堆积，称胚盾（ embryonic shield , 图11D，及E箭头所指）。在发生这些事件期间，外包暂 时中止，但胚盾形成后外包又继续。胚层边缘沿卵黄细胞延伸直至将其完全 包绕（图11F-L）。其延伸近乎恒定速度进行，约每小时包绕卵黄细胞的15% ，这也提供了大部分原肠期分期的有用指标（图12）。
合子期 卵裂期 囊胚期 原肠期 早幼期 孵化期 咽囊期 体节期
合子期（0-0.75h）
新受精的卵子直至其第一次卵裂发生，称合子期（图3），约受精后 40分钟。受精时形成的合子直径约0.7mm。合子期只含有一个分期， 但其间也发生很多变化，可以很容易划分这一时期（见 Hisaoka and Battle,1958）。
=250μm
束 时 卵 黄 消 失 处 。 比 例 尺
头 示 尾 芽 ， 尾 芽 腹 侧 （ 即 此 图 左 侧 ） 的 显 著 区 域 显 示 外 包 结
9h 10h
J 90%K 90%L
C
F 70%75%-
8.4h
G
） 增 大 为 小 膨 出 （箭头所示）； ；： ： 尾 芽 期 （ 外包期腹
侧 ）观 ，， 箭前 头侧 示脊 小索 膨前 出板 ，（ 短对 箭比
层期 在（ 其 一 侧） ；背 ： 侧观
， 外包期（ 箭头示轴中 ），在一些胚胎中可见尾芽 胚层与中线边界，近轴中胚
5.7h
H I 80%-
8h
； 外： 包 期（ 外包 ）， 期（ 箭 头示腹 ）， 侧： 薄 的 排外 泄包 区ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ；腹 ： 侧观
内卷运动的开始意味着原肠期的开始，目前可以说是发生于50%-外包时（图 11A）。结果在达到50%-外包后的数分钟内出现了一个增厚的外围区域，称作 胚环（germ ring），几乎与此同时完全包围了囊胚边缘（图11B，及C箭头所 指）。随后集合运动几乎同样快速地沿胚环产生一个局部的堆积，称胚盾（ embryonic shield , 图11D，及E箭头所指）。在发生这些事件期间，外包暂 时中止，但胚盾形成后外包又继续。胚层边缘沿卵黄细胞延伸直至将其完全 包绕（图11F-L）。其延伸近乎恒定速度进行，约每小时包绕卵黄细胞的15% ，这也提供了大部分原肠期分期的有用指标（图12）。
斑马鱼的发育历程参考幻灯片
正因为囊胚期没有囊胚腔，原肠期既没有消化道（archenteron），也没有胚 孔（blastopore）。DEL细胞在胚层边缘进行内卷，因而发挥了胚孔的作用。 内卷通过将胚层向后折叠形成胚环。因此，胚环内由两个胚层：位于上方的 称上胚层（epiblast），在整个原肠期继续给位于下方的下胚层（hypoblast ）提供细胞。注意到上、下胚层这些术语可同样描述鸟类胚层结构，但所命 名的胚层在这两种脊椎动物中似乎完全不同。
7
囊胚期胚胎正面观。A：256-细胞期（2.5h）；B：高囊胚期（3.3h）；C：高 囊胚期和椭形期之间的转变（3.5h）；D：椭形期和球形期之间的转变（3.8h ）；E：穹顶期（4.3h）；F：30%-外包期（4.7h）。比例尺=250μm
8
原肠期 (5.25-10h)
外 包 运 动 的 继 续 ， 以 及 形 态 发 生 细 胞 的 内 卷 （ involution ） 、 集 合 （ convergence）和延伸（extension）运动的发生，产生了原始胚层和胚轴。
此期用“实囊胚”（ “stereoblastula”）称之可能更准确，因为这一
术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是如此 （图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。卵裂取向不确 定，比卵裂期亦更不规则。此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面伸 出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞大 小判断比用细胞位置判断更为有效。从动物极观，胚盘呈轻度椭球形 （尤在早期）。
C
F 70%8h
包 期 （ ） ， 箭 头 示 腹 侧 薄 的 排 泄 区 ； ：
外 包 期 （
：
外 包 期 （
） ， ：
外 包 期 腹 侧 观 ， ：
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囊胚期胚胎正面观。A：256-细胞期（2.5h）；B：高囊胚期（3.3h）；C：高 囊胚期和椭形期之间的转变（3.5h）；D：椭形期和球形期之间的转变（3.8h ）；E：穹顶期（4.3h）；F：30%-外包期（4.7h）。比例尺=250μm
8
原肠期 (5.25-10h)
外 包 运 动 的 继 续 ， 以 及 形 态 发 生 细 胞 的 内 卷 （ involution ） 、 集 合 （ convergence）和延伸（extension）运动的发生，产生了原始胚层和胚轴。
此期用“实囊胚”（ “stereoblastula”）称之可能更准确，因为这一
术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是如此 （图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。卵裂取向不确 定，比卵裂期亦更不规则。此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面伸 出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞大 小判断比用细胞位置判断更为有效。从动物极观，胚盘呈轻度椭球形 （尤在早期）。
C
F 70%8h
包 期 （ ） ， 箭 头 示 腹 侧 薄 的 排 泄 区 ； ：
外 包 期 （
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外 包 期 （
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外 包 期 腹 侧 观 ， ：
模式生物斑马鱼PPT课件
2、斑马鱼的受精及发育都在母体外进行，胚胎发育时间短，易进行观察 和操作。
小鼠属于胎盘动物，胚胎操作时不能离开母体；实验分析时就需 要大量推论。在小鼠胚胎发育期间对其进行物理性操作难度较大，要观 察胚胎必须将母体处死，胚胎也随之死亡。小鼠的胚胎从受精到出生需 要20d，早期胚胎间的发育往往是不同步的。
斑马鱼的发育分为6个阶段：卵裂期，囊胚期，原 肠胚期、分裂期、成形期和孵化期。
第2页/共12页ຫໍສະໝຸດ 能够作为模式生物的主要原因：
1、价格便宜，容易获得。 成年斑马鱼的体长仅4cm左右，而且能承受高密度饲养—每升水
中最多可容纳5尾，意味着容易饲养大量群体，管理饲养易行。相比之 下，小鼠需要的空间要大，而且花费相对要高。
第5页/共12页
一、斑马鱼在发育生物学中的应用
3、饱合诱变分析 用化学诱变剂处理成熟的雄性个体，然后用诱变了的精子与卵子受
精，产生的个体通过三代繁育来筛选发育异常的胚胎。因为发育过程是 由一系列的分子事件控制，要想解析完整的发育过程，必须要筛选到影 响一系列事件的全部基因或几乎全部基因，这就需要大量的动物个体进 行筛选。胚胎在子宫中发育，胚胎期受到影响的突变体无法呈现，因而 限制了其研究范围。斑马鱼卵子体外受精和胚胎体外发育的特征则解决 了这一难题。
是左鼻子。日本名古屋市立大学研究人员报告说，随着斑马鱼发育，大脑 中负责嗅觉的基因只在左脑中强烈发挥作用，因此左鼻就成了主要发挥作 用的鼻子。研究人员堵住斑马鱼的左鼻后，它就不再朝着散发它喜欢气味 的方向游动，从而证明是左鼻负责分辨气味。对斑马鱼的深入研究，未来 有利于人们弄清人脑中产生左右差异的机制。
可以揭开谜底，保护人类的毛细胞免受损伤、并推动毛细胞的再生。
第8页/共12页
小鼠属于胎盘动物，胚胎操作时不能离开母体；实验分析时就需 要大量推论。在小鼠胚胎发育期间对其进行物理性操作难度较大，要观 察胚胎必须将母体处死，胚胎也随之死亡。小鼠的胚胎从受精到出生需 要20d，早期胚胎间的发育往往是不同步的。
斑马鱼的发育分为6个阶段：卵裂期，囊胚期，原 肠胚期、分裂期、成形期和孵化期。
第2页/共12页ຫໍສະໝຸດ 能够作为模式生物的主要原因：
1、价格便宜，容易获得。 成年斑马鱼的体长仅4cm左右，而且能承受高密度饲养—每升水
中最多可容纳5尾，意味着容易饲养大量群体，管理饲养易行。相比之 下，小鼠需要的空间要大，而且花费相对要高。
第5页/共12页
一、斑马鱼在发育生物学中的应用
3、饱合诱变分析 用化学诱变剂处理成熟的雄性个体，然后用诱变了的精子与卵子受
精，产生的个体通过三代繁育来筛选发育异常的胚胎。因为发育过程是 由一系列的分子事件控制，要想解析完整的发育过程，必须要筛选到影 响一系列事件的全部基因或几乎全部基因，这就需要大量的动物个体进 行筛选。胚胎在子宫中发育，胚胎期受到影响的突变体无法呈现，因而 限制了其研究范围。斑马鱼卵子体外受精和胚胎体外发育的特征则解决 了这一难题。
是左鼻子。日本名古屋市立大学研究人员报告说，随着斑马鱼发育，大脑 中负责嗅觉的基因只在左脑中强烈发挥作用，因此左鼻就成了主要发挥作 用的鼻子。研究人员堵住斑马鱼的左鼻后，它就不再朝着散发它喜欢气味 的方向游动，从而证明是左鼻负责分辨气味。对斑马鱼的深入研究，未来 有利于人们弄清人脑中产生左右差异的机制。
可以揭开谜底，保护人类的毛细胞免受损伤、并推动毛细胞的再生。
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斑马鱼的发育历程
原肠期发育。A：50%-外包期（5.25h）；B：胚环期（5.7h ）；C：动物极观胚环期 D：胚盾期（6h），胚盾标志背侧 ，是胚环左侧增厚区域；E：动物极观胚盾期，箭头指示胚 盾；F：70%-外包期（7.7h），G：70%-外包期腹侧观，H： 75%-外包期（8h），箭头示腹侧薄的排泄区；I：80%-外包 期（8.4h）背侧观，箭头示轴中胚层与中线边界，近轴中胚 层在其一侧；J：90%-外包期（9h），在一些胚胎中可见尾 芽（箭头所示）；K：90%-外包期腹侧观，前侧脊索前板（ 对比G）增大为小膨出；L：尾芽期（10h），箭头示小膨出 ，短箭头示尾芽，尾芽腹侧（即此图左侧）的显著区域显示 外包结束时卵黄消失处。比例尺=250μm
此期用“实囊胚”（ “stereoblastula”）称之可能更准确，因为这
一术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是如 此（图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。卵裂取向不 确定，比卵裂期亦更不规则。此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面 伸出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞 大小判断比用细胞位置判断更为有效。从动物极观，胚盘呈轻度椭球 形（尤在早期）。
此期的命名注意到了咽弓原基，其早期存在但不易分辨出。咽弓在此第二天从耳囊腹侧可见约耳囊 两倍长的原基区域迅速发育。七个咽弓均由此原基发育，其间一个显著的边界（图31箭头）出现于 咽弓2和3之间。此边界甚为重要，因为随后其前面的咽弓（颚（mandibular）、舌（hyoid）弓）将 形成下颌（jaws）和腮盖（operculum），而其后面的咽弓（腮（branchial）弓）将形成腮（gills ）。
内卷运动的开始意味着原肠期的开始，目前可以说是发生于50%-外包时（图 11A）。结果在达到50%-外包后的数分钟内出现了一个增厚的外围区域，称作 胚环（germ ring），几乎与此同时完全包围了囊胚边缘（图11B，及C箭头所 指）。随后集合运动几乎同样快速地沿胚环产生一个局部的堆积，称胚盾（ embryonic shield , 图11D，及E箭头所指）。在发生这些事件期间，外包暂 时中止，但胚盾形成后外包又继续。胚层边缘沿卵黄细胞延伸直至将其完全 包绕（图11F-L）。其延伸近乎恒定速度进行，约每小时包绕卵黄细胞的15% ，这也提供了大部分原肠期分期的有用指标（图12）。
模式生物斑马鱼改ppt正式完整版
模式生物斑马鱼改
斑马鱼的个“鱼”简历
• 斑马鱼（zebra fish）(拉丁名：Danio rerio)
中文学名： 别称：
二名法： 界： 门：
斑马鱼
纲：
蓝条鱼、花条鱼、 蓝斑马鱼、印度 鱼、印度斑马鱼
目：
Danio rerio
动物界
脊索动物门 Chordata
科： 属：
辐鳍鱼纲 Actinoptery gii
培育单倍体，基因组倍增；
始退化，并逐渐转 一般在黎明到第二天上午10时左右产卵结束，将亲鱼捞出。
斑马鱼的基因与人类相似度高达87%，可以很好地为生物学家和医生研究各种疾病提供帮助。
发育快、繁殖能力强化、性成成熟睾期短丸。 。在孵化 后40d性别逆转过 斑马鱼的基因与人类相似度高达87%，可以很好地为生物学家和医生研究各种疾病提供帮助。
可以很方便地进行细胞标记和细胞谱系跟踪、 胚胎的细胞移植；培育单倍体，基因组倍增；在 基因功能研究方面，已发展了转基因技术、基因 过量表达，体细胞克隆等技术。
➢ 品系资源丰富 目前研究中常用的是斑马鱼野生型品系主要为
Tuebingen品系。此外，还有3000多个突变品系和 转基因品系。
斑马鱼的利用价值
雌鱼每周产300枚卵，可保证每天获得成千上万的胚胎。 另外，斑马鱼成为肿瘤研究的动物模型，而且还是唯一的脊椎动物高通量药物筛选模型。
盖后直伸到尾末有数条银蓝色纵纹，臀鳍部也有 拥有较完善的胚胎和遗传学操作技术
一般在黎明到第二天上午10时左右产卵结束，将亲鱼捞出。
与体色相似的纵纹。 胚胎在母体外发育并且透明，因此易于观察。
体侧有像斑马一样蓝银相间的条纹，生活空间为小溪、稻田及恒河中游地区。 斑马鱼胚胎早期发育图谱 一半的鱼将继续其卵巢发育，另一半鱼的卵巢开始退化，并逐渐转化成睾丸。 斑马鱼（zebra fish）(拉丁名：Danio rerio) 脊索动物门 Chordata
斑马鱼的个“鱼”简历
• 斑马鱼（zebra fish）(拉丁名：Danio rerio)
中文学名： 别称：
二名法： 界： 门：
斑马鱼
纲：
蓝条鱼、花条鱼、 蓝斑马鱼、印度 鱼、印度斑马鱼
目：
Danio rerio
动物界
脊索动物门 Chordata
科： 属：
辐鳍鱼纲 Actinoptery gii
培育单倍体，基因组倍增；
始退化，并逐渐转 一般在黎明到第二天上午10时左右产卵结束，将亲鱼捞出。
斑马鱼的基因与人类相似度高达87%，可以很好地为生物学家和医生研究各种疾病提供帮助。
发育快、繁殖能力强化、性成成熟睾期短丸。 。在孵化 后40d性别逆转过 斑马鱼的基因与人类相似度高达87%，可以很好地为生物学家和医生研究各种疾病提供帮助。
可以很方便地进行细胞标记和细胞谱系跟踪、 胚胎的细胞移植；培育单倍体，基因组倍增；在 基因功能研究方面，已发展了转基因技术、基因 过量表达，体细胞克隆等技术。
➢ 品系资源丰富 目前研究中常用的是斑马鱼野生型品系主要为
Tuebingen品系。此外，还有3000多个突变品系和 转基因品系。
斑马鱼的利用价值
雌鱼每周产300枚卵，可保证每天获得成千上万的胚胎。 另外，斑马鱼成为肿瘤研究的动物模型，而且还是唯一的脊椎动物高通量药物筛选模型。
盖后直伸到尾末有数条银蓝色纵纹，臀鳍部也有 拥有较完善的胚胎和遗传学操作技术
一般在黎明到第二天上午10时左右产卵结束，将亲鱼捞出。
与体色相似的纵纹。 胚胎在母体外发育并且透明，因此易于观察。
体侧有像斑马一样蓝银相间的条纹，生活空间为小溪、稻田及恒河中游地区。 斑马鱼胚胎早期发育图谱 一半的鱼将继续其卵巢发育，另一半鱼的卵巢开始退化，并逐渐转化成睾丸。 斑马鱼（zebra fish）(拉丁名：Danio rerio) 脊索动物门 Chordata
斑马鱼学习小结PPT课件
静态法 试验期间不更换试验药液。
半静态法
试验期间每隔一定时间更换一次药液，以保持试验药液的 浓度不低于初始浓度的80%。
流水式 试验期间药液连续更新。
第16页/共19页
试验步骤
➢ 斑马鱼急性毒性试验的实验设计 ➢ 斑马鱼急性毒性试验结果的记录 ➢ 急性毒性试验结果的分析 ➢ 农药生态安全性评估
17
体色：银或金色，覆有蓝或紫色的横纹，背部呈浅橄榄黄色。 食性：杂食性，可摄食人工饲料和各种天然活饵料如水蚤。
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斑马鱼的发展历程
斑马鱼是重要的模式生物。广泛应用于生命科学、毒理学、环 境和农业科学等领域。 1972年，美国俄勒冈大学George Streisinger首先利用斑马鱼 研究了脊椎动物发育生物学和建立模式动物。
第17页/共19页
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谢谢观看
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感谢您的观看。
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斑马鱼的挑选：
鱼龄6-12月，体长>3cm，健康、活力强，性腺发育IV期以上；
斑马鱼繁殖用水要求：
pH6.5-7.5，硬度6-8，水温25-26℃。
配对：
按雌雄比例1:1或1:2鱼置于交配缸内，保持环境安静； 使其自然产卵和受精。放养密度为1对/1.5L。
受精卵收集：
一般头天晚上放入，第二天上午可收集受精卵，种鱼捞出另养。 斑马鱼的繁殖周期约7天，一年可连续繁殖6-7次。
➢斑马鱼简介。 ➢斑马鱼品系及鉴定。 ➢斑马鱼的养殖。 ➢斑马鱼的繁殖。 ➢斑马鱼在生态毒理学中的应用。
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➢斑马鱼简介。 ➢斑马鱼品系及鉴定。 ➢斑马鱼的养殖。 ➢斑马鱼的繁殖。 ➢斑马鱼在生态毒理学中的应用。
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内卷运动的开始意味着原肠期的开始，目前可以说是发生于50%-外包时（图 11A）。结果在达到50%-外包后的数分钟内出现了一个增厚的外围区域，称作 胚环（germ ring），几乎与此同时完全包围了囊胚边缘（图11B，及C箭头所 指）。随后集合运动几乎同样快速地沿胚环产生一个局部的堆积，称胚盾（ embryonic shield , 图11D，及E箭头所指）。在发生这些事件期间，外包暂 时中止，但胚盾形成后外包又继续。胚层边缘沿卵黄细胞延伸直至将其完全 包绕（图11F-L）。其延伸近乎恒定速度进行，约每小时包绕卵黄细胞的15% ，这也提供了大部分原肠期分期的有用指标（图12）。
1.25 h）；D：16-细胞期(1.5 h)；E：32-细胞期（1.75 h）；F：64-细胞期（
2 h）。比例尺=250μm
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6
囊胚期（2.25-5.25h）
囊胚期指从128-细胞期或第8次止这一段时期。此期
有 很 多 重 要 事 件 发 生 ： 胚 胎 进 入 囊 胚 中 期 转 变 （ midblastula transition, MBT）、卵黄合胞体层（the yolk syncytial layer, YSL）形 成、外包（epiboly）开始。外包将一直持续到原肠期。
）
C
F 70%8h
5.25h B
A 50%-
体节期（10-24h）
此期发生了一些有趣的形态学变化：体节发生、器官原基可见、尾芽 更为显著、胚体延长（图15）、AP和DV轴变得明确、第一次出现细 胞发生形态分化以及胚体开始运动。此期可称“尾芽期”，因为在此 整个时期，尾芽一直存在于不断伸长的胚轴末端。
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7
囊胚期胚胎正面观。A：256-细胞期（2.5h）；B：高囊胚期（3.3h）；C：高
囊胚期和椭形期之间的转变（3.5h）；D：椭形期和球形期之间的转变（3.8h
）；E：穹顶期（4.3h）；F：30%-外包期（4.7h）。比例尺=250μm
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8
原肠期 (5.25-10h)
外 包 运 动 的 继 续 ， 以 及 形 态 发 生 细 胞 的 内 卷 （ involution ） 、 集 合 （ convergence）和延伸（extension）运动的发生，产生了原始胚层和胚轴。
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12
咽囊期（24-28h）
对斑马鱼，大约此期位于胚胎发育的第二天。胚胎此时是最明显的双侧结构生物，进入咽囊期时的 脊索已发育良好，新完成的一组体节已伸入长尾末端。神经系统凹陷并向前延伸。随着咽囊期期间 后脑（metencephalon）中的小脑快速形态发生，脑分为五叶。
此期用“实囊胚”（ “stereoblastula”）称之可能更准确，因为这一
术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是如此 （图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。卵裂取向不确 定，比卵裂期亦更不规则。此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面伸 出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞大 小判断比用细胞位置判断更为有效。从动物极观，胚盘呈轻度椭球形 （尤在早期）。
斑马鱼的发 育历程
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1
合子期 卵裂期 囊胚期 原肠期
早幼期 孵化期 咽囊期 体节期
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2
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3
合子期（0-0.75h）
新受精的卵子直至其第一次卵裂发生，称合子期（图3），约受精后 40分钟。受精时形成的合子直径约0.7mm。合子期只含有一个分期， 但其间也发生很多变化，可以很容易划分这一时期（见 Hisaoka and Battle,1958）。
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4
卵裂期（0.75-2.25h）
2-细胞期（3/4 h） 4-细胞期（1 h） 8-细胞期（1.25 h） 16-细胞期（1.5 h） 32-细胞期（1.75 h） 64-细胞期（2 h）
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5
卵裂期胚胎。除B外均为正面观，B显示的是胚胎在动-植物极的扭曲，约偏离
正面45°。 A :2-细胞期（0.75 h）；B：4-细胞期（1 h）；C：8-细胞期（
正因为囊胚期没有囊胚腔，原肠期既没有消化道（archenteron），也没有胚 孔（blastopore）。DEL细胞在胚层边缘进行内卷，因而发挥了胚孔的作用。 内卷通过将胚层向后折叠形成胚环。因此，胚环内由两个胚层：位于上方的 称上胚层（epiblast），在整个原肠期继续给位于下方的下胚层（hypoblast ）提供细胞。注意到上、下胚层这些术语可同样描述鸟类胚层结构，但所命 名的胚层在这两种脊椎动物中似乎完全不同。
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9
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=250μ m
5.7h
H 75%8.4h
G
黄 消 失 处 。 比 例 尺
芽 ， 尾 芽 腹 侧 （ 即 此 图 左 侧 ） 的 显 著 区 域 显 示 外 包 结 束 时 卵
9h 10h
J 90%K 90%L
为 小 膨 出 ； ： 尾 芽 期 （
） ， 箭 头 示 小 膨 出 ， 短 箭 头 示 尾
示 ） ； ：
外 包 期 腹 侧 观 ， 前 侧 脊 索 前 板 （ 对 比 ） 增 大
侧 ； ：
外 包 期 （ ） ， 在 一 些 胚 胎 中 可 见 尾 芽 （ 箭 头 所
） 背 侧 观 ， 箭 头 示 轴 中 胚 层 与 中 线 边 界 ， 近 轴 中 胚 层 在 其 一
I 80%-
包 期 （ ） ， 箭 头 示 腹 侧 薄 的 排 泄 区 ； ：
外 包 期 （
7.7h G 70%-
：
外 包 期 （
） ， ：
外 包 期 腹 侧 观 ， ：
外
是；
胚 环 左 侧 增 厚 区 域 ；
： 动 物 极 观 胚 环 期
E
： 动 物 极 观 胚
： 胚 盾 期 （
盾期，箭头指示胚盾；10），胚盾标志背侧，
6h
D
原 肠 期 发 育 。 ：
外 包 期 （
） ； ： 胚 环 期 （
此期的命名注意到了咽弓原基，其早期存在但不易分辨出。咽弓在此第二天从耳囊腹侧可见约耳囊 两倍长的原基区域迅速发育。七个咽弓均由此原基发育，其间一个显著的边界（图31箭头）出现于 咽弓2和3之间。此边界甚为重要，因为随后其前面的咽弓（颚（mandibular）、舌（hyoid）弓）将 形成下颌（jaws）和腮盖（operculum），而其后面的咽弓（腮（branchial）弓）将形成腮（gills ）。