高效液相色谱法测定D_泛酸钙的含量
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表 2 峰面积和相应浓度
x 峰面积 1560268 1714330 1906416 2019140 2156145 y1浓度 0. 0008 0. 000902 0. 001012 0. 001116 0. 0012
图 1 标准曲线
2 . 3 标准图谱和样品图谱 标准图谱、 样品图谱分别见图 2、 图 3 。
参考文献
5# 6. 789 1. 887 3834 . 373 1892888
# 6
平均值 6 . 570 1 . 886 3975. 967 1896694
7 . 014 1 . 881 4013 . 386 1889108
6 . 789 1 . 892 3892 . 689 1901191
注 : 面积相对标准偏差 : 0. 33 %。
第 5期
周正华 : 高效液相色谱法测定 D - 泛酸钙的含量
37
图 2 标准图谱
图 3 样品图谱
由两图可以看出, 标准品保留时间为 5 . 823m in ,样 品保留时间为 5 . 832 m in , 可以确定产品为泛酸钙。 3 讨论 由以上数据可以看出通过此方法 , 能够准确测 出 D- 泛酸钙含量, 分离度和线性符合要求 , 能够用 于测定维生素类药品 D- 泛酸钙含量。
国家标准规定了饲料添加剂 D- 泛酸钙含量测 定方法是测定氮含量和钙含量 , 没有直接的含量测 定方法 ; 中国药典、 中国兽药典、 美国 USP28 都是如 此。在英国药典 BP 2003 中规定了泛酸钙总含量的
收稿日期 : 2007- 02- 06 作者简介 : 周正华 ( 1976- ), 男 , 研究生在读 , 工程师。
[ 1] British Phar m acopoe ia Comm ission. Br itish Phar m acopoe ia 2003[M ]. L ondon: T he Statione ry O ffice L i m ited, 2003. [ 2] 全国饲料工业标准化技术 委员会 . GB /T 7299- 87 饲料 添加剂 D - 泛酸钙 [ S]. 北京 : 中国标准出版社 , 1987 . [ 3] T he U n ited Sta tes P ha r macopoe ia Comm ission. U SP29 N F24 [ M ]. R ockv ille : The U nited S tates Phar m acope ia l Convention , Inc .
Abstract : A m ethod to analyse the con tent of D - ca lciu m pan tothenate by h igh perfor m ance liqu id chrom atography w as in troduced . The ana lytical co lu m n w as ODS , the m ob ile phase w as acetonitrile and potassium dihydrogen phosphate aqueous so lu tion ( 0 . 02m ol /L ) , and V ( aceton itrile ) : V ( potassium dih ydrogen phosphate aqueous so lu tio n) = 10 : 90. T he m ethod w as si m ple and qu ick ly, and had an good effect of separatio n and reappearance, high rate o f recovery . K ey w ord s : D - calc ium pantothenate ; conten; t deter m in ation ; HPLC 泛酸又称遍多酸、 维生素 B5, 是辅酶 A 的组成 部分, 参与糖、 脂肪、 蛋白质代谢。辅酶 A 是泛酸与 3- 磷酸腺苷、 焦磷酸和巯基乙胺结合的复合分子 , 因此, 泛酸的作用即是辅酶 A 的生理功能: 参与体 内脂肪酸降解、 脂肪酸合成、 柠檬酸循环、 胆碱乙酰 化 ( 一种神经冲动传导物质 ) 、 抗体的合成等代谢 , 泛酸的存在有利于各种营养成分的吸收和利用。由 于泛酸对热、 碱、 酸均不稳定, 其商品形式主要为 D - 泛酸钙。泛酸钙 ( D - C alc ium pantothenate , CAS : 137- O8- 6) 是泛酸的右旋体钙盐, D- 泛酸钙为白 色吸湿性粉末 , 无臭, 味微 苦, 易溶于水 , 微溶于乙 醇。其水溶液为中性或弱碱性。在阴冷、 干燥条件 下较稳定 , 吸湿后或水溶液中会水解, 效价降低, 在 酸性、 中性条件下更易破坏 , 特别对酸敏感, 对热中 等敏感, 但对氧化、 还原作用和光稳定。泛酸钙结构 式如下:
2007 年第 36 卷
, 目前市场上出现了
样量 20 L, 柱温 25! 。 1 . 3 标准溶液及样品制备 1 . 3 . 1 流动相的配制 称取 2 . 73g 分 析 纯磷 酸 二 氢 钾 置 于 洁 净 的 1000mL 容量瓶中, 用去离子水溶解并定容到刻度。 量取此溶液 900mL 置烧杯中, 加入 100mL 色谱纯乙 腈, 用盐酸调 pH 值 = 3 ,用 0 . 45 m 滤膜过滤, 超声 脱气 30m in 备用。 1 . 3 . 2 泛酸钙标准溶液的配制 准确称取已知纯度的 D- 泛酸 (或 D- 泛酸钙 ) 标准品 0 . 0500g, 置于 50mL 容量瓶中, 用流动相溶 解, 并稀释至刻度, 摇匀。 1 . 3 . 3 泛酸钙样品溶液的制备 准确称取 D- 泛酸钙 0. 0500g , 置于 50mL 容量 瓶中 , 用流动相溶解 , 并稀释至刻度, 摇匀。 2 结果与讨论 2 . 1 系统适用性实验 连续进样 6 次测得结果见表 1 。
测定方法 , 这是唯一一个涉及测定泛酸钙本身含量 的药典, 不过是通 过电位滴定的 方法, 不但 过程复 杂, 而且难于平行, 不适合企业快速测定 , 同时无法 测出杂质含量的情况
[ 1]
。只测定氮含量和钙含量,
36 很难准确评价药品的质量
[2 , 3]
山 东 化 工 SHANDONG CH EM ICAL I N DU STRY
第 5期
周正华 : 高效液相色谱法测定 D - 泛酸钙的含量
35
高效液相色谱法测定 D- 泛酸钙的含量
周正华
( 山东大学化学化工学院 , 山东 济南 250100)
摘要 : 介绍了利用高效液相色谱法测定 D - 泛酸钙含量 , 采用 OD S柱为分 离柱 , 乙腈和 0 . 02m ol /L 磷酸 二氢钾水溶液 比例为 10 : 90( 体积比 )。方法简便、 快速、 分离条件好 , 回收率高、 重现性良好。 关键词 : D - 泛酸钙 ; 含量 ; 测定 ; 高效液相色谱法 中图分类号 : O 657 . 7+ 2 文献标识码 : A 文章编号 : 1008- 021X ( 2007) 05 - 0035- 03
2 . 2 标准曲线 将 样 品 配 制 5个 浓 度 的 溶 液 , 浓 度 范 围 从 0 . 0008~ 0 . 0012g /mL, 每个样品溶液进样两次。记 录峰面积, 求出平均值 , 由峰面积和浓度拟和直线 , 求出标准曲线, 相关系 数 r : 0 . 9957 , 斜率 b = 7E 10, 截距 a= - 0 . 0003 , 呈良好的线性关系。相关数据 见表 2 和图 1 :
表 1 Hale Waihona Puke Baidu统适用性实验记录
项目 分离度 R ∀ 1. 5 拖尾因子 T# 2 . 5 柱效 H ∀ 1000 峰面积 1# 4 . 788 1 . 897 4075. 850 1900630 2# 7. 163 1. 872 3963 . 651 1904703
# 3
4# 6 . 875 1 . 887 4075. 850 1891641
Analysis of D - Calcium Pantothenate by H igh Performance Liquid Chromatography ZH OU Zheng - hua
( Schoo l o f Chem istry and Chem ical Eng in eering , Shandong University , Jinan 250100 , China)
通过添加氯化钙、 尿素和葡萄糖的方式使钙、 氮和比 旋度符合规定, 这样就必须有一种方法能够识别假 货。本文通过实验探索建立一个用高效液相色谱法 测定 D - 泛酸钙含量 , 能够快速准确地进行分析 , 通 过外标法准确测出泛酸钙的含量, 可用于识别假货。 1 实验部分 1 . 1 仪器和试剂 Shi m azu- LC - 10A tvp 高 压泵、7725 i 进样阀、 SPD - 10AVP 紫外检测器。 A lltech C 。色谱柱 ( 150 mm 4 . 6 mm .i d . , 5 m ) 。 AUY220型电子天平 , pH - 25 型酸度计。磷酸二氢钾 ( 天津科密欧化学有限 公司, 中国天津 ) , 乙腈为色谱纯, 实验用水为高纯 水。泛酸钙标准品购自 S igm a- A ldrich 。 1 . 2 色谱条件 色谱柱为 ODS- 2 C18 , 柱长 150mm; 流动相: 乙 腈和 0 . 02m o l/L 磷酸 二氢钾水 溶液比 例为 10 : 90 ( 体积比 ), 检测波长 : 215nm, 流速: 1 . 0mL /m in ,进
x 峰面积 1560268 1714330 1906416 2019140 2156145 y1浓度 0. 0008 0. 000902 0. 001012 0. 001116 0. 0012
图 1 标准曲线
2 . 3 标准图谱和样品图谱 标准图谱、 样品图谱分别见图 2、 图 3 。
参考文献
5# 6. 789 1. 887 3834 . 373 1892888
# 6
平均值 6 . 570 1 . 886 3975. 967 1896694
7 . 014 1 . 881 4013 . 386 1889108
6 . 789 1 . 892 3892 . 689 1901191
注 : 面积相对标准偏差 : 0. 33 %。
第 5期
周正华 : 高效液相色谱法测定 D - 泛酸钙的含量
37
图 2 标准图谱
图 3 样品图谱
由两图可以看出, 标准品保留时间为 5 . 823m in ,样 品保留时间为 5 . 832 m in , 可以确定产品为泛酸钙。 3 讨论 由以上数据可以看出通过此方法 , 能够准确测 出 D- 泛酸钙含量, 分离度和线性符合要求 , 能够用 于测定维生素类药品 D- 泛酸钙含量。
国家标准规定了饲料添加剂 D- 泛酸钙含量测 定方法是测定氮含量和钙含量 , 没有直接的含量测 定方法 ; 中国药典、 中国兽药典、 美国 USP28 都是如 此。在英国药典 BP 2003 中规定了泛酸钙总含量的
收稿日期 : 2007- 02- 06 作者简介 : 周正华 ( 1976- ), 男 , 研究生在读 , 工程师。
[ 1] British Phar m acopoe ia Comm ission. Br itish Phar m acopoe ia 2003[M ]. L ondon: T he Statione ry O ffice L i m ited, 2003. [ 2] 全国饲料工业标准化技术 委员会 . GB /T 7299- 87 饲料 添加剂 D - 泛酸钙 [ S]. 北京 : 中国标准出版社 , 1987 . [ 3] T he U n ited Sta tes P ha r macopoe ia Comm ission. U SP29 N F24 [ M ]. R ockv ille : The U nited S tates Phar m acope ia l Convention , Inc .
Abstract : A m ethod to analyse the con tent of D - ca lciu m pan tothenate by h igh perfor m ance liqu id chrom atography w as in troduced . The ana lytical co lu m n w as ODS , the m ob ile phase w as acetonitrile and potassium dihydrogen phosphate aqueous so lu tion ( 0 . 02m ol /L ) , and V ( aceton itrile ) : V ( potassium dih ydrogen phosphate aqueous so lu tio n) = 10 : 90. T he m ethod w as si m ple and qu ick ly, and had an good effect of separatio n and reappearance, high rate o f recovery . K ey w ord s : D - calc ium pantothenate ; conten; t deter m in ation ; HPLC 泛酸又称遍多酸、 维生素 B5, 是辅酶 A 的组成 部分, 参与糖、 脂肪、 蛋白质代谢。辅酶 A 是泛酸与 3- 磷酸腺苷、 焦磷酸和巯基乙胺结合的复合分子 , 因此, 泛酸的作用即是辅酶 A 的生理功能: 参与体 内脂肪酸降解、 脂肪酸合成、 柠檬酸循环、 胆碱乙酰 化 ( 一种神经冲动传导物质 ) 、 抗体的合成等代谢 , 泛酸的存在有利于各种营养成分的吸收和利用。由 于泛酸对热、 碱、 酸均不稳定, 其商品形式主要为 D - 泛酸钙。泛酸钙 ( D - C alc ium pantothenate , CAS : 137- O8- 6) 是泛酸的右旋体钙盐, D- 泛酸钙为白 色吸湿性粉末 , 无臭, 味微 苦, 易溶于水 , 微溶于乙 醇。其水溶液为中性或弱碱性。在阴冷、 干燥条件 下较稳定 , 吸湿后或水溶液中会水解, 效价降低, 在 酸性、 中性条件下更易破坏 , 特别对酸敏感, 对热中 等敏感, 但对氧化、 还原作用和光稳定。泛酸钙结构 式如下:
2007 年第 36 卷
, 目前市场上出现了
样量 20 L, 柱温 25! 。 1 . 3 标准溶液及样品制备 1 . 3 . 1 流动相的配制 称取 2 . 73g 分 析 纯磷 酸 二 氢 钾 置 于 洁 净 的 1000mL 容量瓶中, 用去离子水溶解并定容到刻度。 量取此溶液 900mL 置烧杯中, 加入 100mL 色谱纯乙 腈, 用盐酸调 pH 值 = 3 ,用 0 . 45 m 滤膜过滤, 超声 脱气 30m in 备用。 1 . 3 . 2 泛酸钙标准溶液的配制 准确称取已知纯度的 D- 泛酸 (或 D- 泛酸钙 ) 标准品 0 . 0500g, 置于 50mL 容量瓶中, 用流动相溶 解, 并稀释至刻度, 摇匀。 1 . 3 . 3 泛酸钙样品溶液的制备 准确称取 D- 泛酸钙 0. 0500g , 置于 50mL 容量 瓶中 , 用流动相溶解 , 并稀释至刻度, 摇匀。 2 结果与讨论 2 . 1 系统适用性实验 连续进样 6 次测得结果见表 1 。
测定方法 , 这是唯一一个涉及测定泛酸钙本身含量 的药典, 不过是通 过电位滴定的 方法, 不但 过程复 杂, 而且难于平行, 不适合企业快速测定 , 同时无法 测出杂质含量的情况
[ 1]
。只测定氮含量和钙含量,
36 很难准确评价药品的质量
[2 , 3]
山 东 化 工 SHANDONG CH EM ICAL I N DU STRY
第 5期
周正华 : 高效液相色谱法测定 D - 泛酸钙的含量
35
高效液相色谱法测定 D- 泛酸钙的含量
周正华
( 山东大学化学化工学院 , 山东 济南 250100)
摘要 : 介绍了利用高效液相色谱法测定 D - 泛酸钙含量 , 采用 OD S柱为分 离柱 , 乙腈和 0 . 02m ol /L 磷酸 二氢钾水溶液 比例为 10 : 90( 体积比 )。方法简便、 快速、 分离条件好 , 回收率高、 重现性良好。 关键词 : D - 泛酸钙 ; 含量 ; 测定 ; 高效液相色谱法 中图分类号 : O 657 . 7+ 2 文献标识码 : A 文章编号 : 1008- 021X ( 2007) 05 - 0035- 03
2 . 2 标准曲线 将 样 品 配 制 5个 浓 度 的 溶 液 , 浓 度 范 围 从 0 . 0008~ 0 . 0012g /mL, 每个样品溶液进样两次。记 录峰面积, 求出平均值 , 由峰面积和浓度拟和直线 , 求出标准曲线, 相关系 数 r : 0 . 9957 , 斜率 b = 7E 10, 截距 a= - 0 . 0003 , 呈良好的线性关系。相关数据 见表 2 和图 1 :
表 1 Hale Waihona Puke Baidu统适用性实验记录
项目 分离度 R ∀ 1. 5 拖尾因子 T# 2 . 5 柱效 H ∀ 1000 峰面积 1# 4 . 788 1 . 897 4075. 850 1900630 2# 7. 163 1. 872 3963 . 651 1904703
# 3
4# 6 . 875 1 . 887 4075. 850 1891641
Analysis of D - Calcium Pantothenate by H igh Performance Liquid Chromatography ZH OU Zheng - hua
( Schoo l o f Chem istry and Chem ical Eng in eering , Shandong University , Jinan 250100 , China)
通过添加氯化钙、 尿素和葡萄糖的方式使钙、 氮和比 旋度符合规定, 这样就必须有一种方法能够识别假 货。本文通过实验探索建立一个用高效液相色谱法 测定 D - 泛酸钙含量 , 能够快速准确地进行分析 , 通 过外标法准确测出泛酸钙的含量, 可用于识别假货。 1 实验部分 1 . 1 仪器和试剂 Shi m azu- LC - 10A tvp 高 压泵、7725 i 进样阀、 SPD - 10AVP 紫外检测器。 A lltech C 。色谱柱 ( 150 mm 4 . 6 mm .i d . , 5 m ) 。 AUY220型电子天平 , pH - 25 型酸度计。磷酸二氢钾 ( 天津科密欧化学有限 公司, 中国天津 ) , 乙腈为色谱纯, 实验用水为高纯 水。泛酸钙标准品购自 S igm a- A ldrich 。 1 . 2 色谱条件 色谱柱为 ODS- 2 C18 , 柱长 150mm; 流动相: 乙 腈和 0 . 02m o l/L 磷酸 二氢钾水 溶液比 例为 10 : 90 ( 体积比 ), 检测波长 : 215nm, 流速: 1 . 0mL /m in ,进