高中生物选修一-DNA粗提取与鉴定知识分享
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1.动物细胞：加蒸馏水 使细胞吸水胀破，玻璃棒搅 拌可加速细胞膜和核膜破裂， 过滤后收集滤液
2.植物细胞：切碎后加洗涤剂和食盐，然后 充分搅拌、研磨，过滤后收集滤液；（P55问题）
二、实验设计
（三）去除滤液中的杂质 方案1：控制NaCl溶液的浓度，反复地 溶解与析出DNA，去除杂质 方案2：滤液中加嫩肉粉（木瓜蛋白酶）
2. DNA的鉴定
⑴ 向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液5ml ⑵ 其中一支试管中加DNA丝状 物 ⑶ 各加入二苯胺试剂4ml ⑷ 混匀后，沸水浴中加热5min ⑸ 待冷却后，比较两只试管中 溶液的颜色变化
溶观解察丝现状象物：的溶液变为蓝色
三、操作提示（P56）
四、课题成果评价
① 观察DNA颜色，提取的是白色丝状物吗？ 若不是，说明DNA中的杂质较多；
沈丘县第一高级中学 李亚中 2018年3月17日
一、基础知识：提取DNA的方法
1、DNA的溶解性
（1） DNA和蛋白质等成分在不同浓度的NaCl 溶液中溶解度不同；
（0.14mol/L的NaCl溶液,DNA溶解度最低，析出）
选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解， 而杂质沉淀，或者相反；
（2） DNA不溶于酒精溶液，但是 细胞中的某些蛋白质则溶于酒精， 利用这一原理，可以将DNA与蛋白 质进一步分离。
（2）甲基绿：将 DNA染成绿色
二、实验设计
（一）实验材料的选取
原则上只要含DNA的生物材料都可以，但是选 取DNA含量相对较高的生物组织，成功率更大。
本实验材料：新鲜鸡血细胞液
和鸡全血相比，鸡血细胞液中DNA相wk.baidu.com含 量高，保证实验能提取到足够量的DNA。
二、实验设计
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
方案3：控制温度在60~75℃
（四）DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出（进一步提纯DNA） 前面处理后的溶液过滤，加与滤液体积相 等的、冷却的酒精溶液(体积分数95％)，静 置2－3min，溶液中会出现白色丝状物 ——粗提取DNA 用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物， 并用滤纸吸取上面的水
（四） DNA的析出与鉴定
②用二苯胺鉴定的结果如何？ 若出现蓝色,说明实验基本成功， 若不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低，
或是实验操作中出现错误。
五、课题延伸
一、基础知识：提取DNA的方法
2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
（1）蛋白酶：水解蛋白质，不能水解DNA。 （2）高温：大多数蛋白质不能忍受60－ 80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。 （3）洗涤剂：瓦解细胞膜（主要破坏膜 中的蛋白质分子）， 但对DNA没影响。
3、DNA鉴定原理
（1）二苯胺： 沸水浴条件下， DNA遇二苯胺沸水浴5min 会染成蓝色
2.植物细胞：切碎后加洗涤剂和食盐，然后 充分搅拌、研磨，过滤后收集滤液；（P55问题）
二、实验设计
（三）去除滤液中的杂质 方案1：控制NaCl溶液的浓度，反复地 溶解与析出DNA，去除杂质 方案2：滤液中加嫩肉粉（木瓜蛋白酶）
2. DNA的鉴定
⑴ 向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液5ml ⑵ 其中一支试管中加DNA丝状 物 ⑶ 各加入二苯胺试剂4ml ⑷ 混匀后，沸水浴中加热5min ⑸ 待冷却后，比较两只试管中 溶液的颜色变化
溶观解察丝现状象物：的溶液变为蓝色
三、操作提示（P56）
四、课题成果评价
① 观察DNA颜色，提取的是白色丝状物吗？ 若不是，说明DNA中的杂质较多；
沈丘县第一高级中学 李亚中 2018年3月17日
一、基础知识：提取DNA的方法
1、DNA的溶解性
（1） DNA和蛋白质等成分在不同浓度的NaCl 溶液中溶解度不同；
（0.14mol/L的NaCl溶液,DNA溶解度最低，析出）
选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解， 而杂质沉淀，或者相反；
（2） DNA不溶于酒精溶液，但是 细胞中的某些蛋白质则溶于酒精， 利用这一原理，可以将DNA与蛋白 质进一步分离。
（2）甲基绿：将 DNA染成绿色
二、实验设计
（一）实验材料的选取
原则上只要含DNA的生物材料都可以，但是选 取DNA含量相对较高的生物组织，成功率更大。
本实验材料：新鲜鸡血细胞液
和鸡全血相比，鸡血细胞液中DNA相wk.baidu.com含 量高，保证实验能提取到足够量的DNA。
二、实验设计
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
方案3：控制温度在60~75℃
（四）DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出（进一步提纯DNA） 前面处理后的溶液过滤，加与滤液体积相 等的、冷却的酒精溶液(体积分数95％)，静 置2－3min，溶液中会出现白色丝状物 ——粗提取DNA 用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物， 并用滤纸吸取上面的水
（四） DNA的析出与鉴定
②用二苯胺鉴定的结果如何？ 若出现蓝色,说明实验基本成功， 若不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低，
或是实验操作中出现错误。
五、课题延伸
一、基础知识：提取DNA的方法
2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
（1）蛋白酶：水解蛋白质，不能水解DNA。 （2）高温：大多数蛋白质不能忍受60－ 80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。 （3）洗涤剂：瓦解细胞膜（主要破坏膜 中的蛋白质分子）， 但对DNA没影响。
3、DNA鉴定原理
（1）二苯胺： 沸水浴条件下， DNA遇二苯胺沸水浴5min 会染成蓝色