大孔吸附树脂纯化黄连总生物碱工艺研究

２２ ４ 第 卷 １ ０年 月 ９第２ １ 期
・实验 研 究 ・
大孔吸附树脂 纯化黄连总 生物碱 工艺研 究
吕子 明 ２ ・ 刘文娟 ２ 王 永 ｚ 刘 晓燕 梁俊 清 屠 鹏 飞 １北京 大学 药 学 院 天然 药物 及仿 生 药物 国家重 点实 验室 ， ． 北京 １０ ９ ；． 京 以岭 药业 有 限公 司 ， ０ １ １ ２北 北京 １０ ２ ００７ ［ 要】目的 研究 大 孔吸 附树 脂分 离 和纯化 黄 连 总生物 碱 的工 艺条 件 。 方法 以总生 物碱 和 小檗 碱 的 吸 附量 和解 吸 摘
２２含 量 测 定 ．
２２１总生 物碱 的含 量测 定 依 据 文 献『］采 用 紫外 分光 光 度 ．． ２， 法 进行 。 ２２２小 檗碱 的含 量 测定【 依 据 文 献 ［】采 用 高效 液 相 法 进 ．． ２， 行。 色谱 条件 ：ｈ ｎ ｍｅ ｅ ｌ柱 （５ ． Ｐ ｅ ｏ ｎ ｘＣ８ ２ ０ｍｍ ｘ４６ｍｍ，． Ｉ ； ０５ ｘ ｍ） 流 动相 ： 乙腈一 酸水溶 液 缓 冲盐『 酸一 乙胺 一 （ ：：０ １ 磷 磷 三 水 １ １０） ２ （４７ ） 柱 温 ： 温 ； ２ ：６ ； 室 流速 ：． ｍ ／ ｎ 检测 波长 ：４ ｍ； １ Ｌｍｉ ； ０ ３ ５ａ 进
附流 速 为 ２ Ｂ ／ 。 杂溶 剂 为 水 ， Ｖｈ 除 除杂 体 积 为 ２Ｂ 除杂 流 速 为 １Ｂ ／ 洗 脱 溶 剂为 ５ ％乙 醇 ， 脱 体 积 为 ４Ｂ Ｖ， Ｖ ｈ， ０ 洗 Ｖ，
洗脱 流速 为 ３Ｂ ／ 。 Ｖ ｈ 通过 大孔 吸 附树 脂分 离纯 化后 ， 终产 品 中总 生物 碱 的纯 度为 ６ ．１ ７７ ％。 结论 该 工艺 合理 、 可行 ， 适合 工业 生产 。
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黄 连 为毛茛 科 植 物黄 连 Ｃｐ ｉ ｃ ｉｅ ｓ Ｆａ ｃ ．三 角 叶 ｏ ｔ ｈｎ ｎ￣ ｒｎ ｈ、 ｓ
１仪器与 材料
按 文献 【】 ２中优 化好 的 提取 工艺 进行 提取 。 黄连饮 片 适 取 量 ， ５ ％乙醇 ， 剂用 量 ８倍 ， 取 ３次 ， 次 １ 。合 并 加 ０ 溶 提 每 ．ｈ ５
提 取 液 ， 压 浓 缩 至无 醇 味 ， 水 定 容至 ２５ ０ ｍＬ 抽 滤 ， 减 加 ０ ， 备 用， 即每 毫升 药液 相 当于含 ３ ０ｍｇ生 药材 。
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黄 连 Ｃｐ ｉ ｄｈ ｉｅ ． Ｃ ｅ ｇｅ Ｈｓ ｏ 云 连 Ｃ ｐｉ ｔｅ ｏ ｔ ｅ ｏ ａＣＹ． ｈ ｎ ｔ ｉ 、 ｓ ｄ ａ ｏ ｔ ｅ ｔ ｓ ａ
２ 方 法 与 结 果
２１上 柱 药 液 的 制 备 ．
Ｗａ１ 的干燥 块 茎 ， ｌ等 ． 具有 清 热燥 湿 、 泻火 解 毒 之功 效＿ １ １ 连 。黄 中的小 檗碱 、 巴马 亭 、 黄连 碱 、 檗 碱等 生 物碱 是 其 发挥 药效 小 的 主要 物质 基础 。 实验 旨在 优选 出一 种适 合 分离 黄连 总 生 本 物碱 的大孔 树脂 ， 对 优选 出的大 孔树 脂 分离 黄 连 总生 物碱 并 时 的工 艺条 件及 参数 进行 研 究 。
１０电 子 天 平 ； 连 （ 于 河 北 省 安 国 以 岭 饮 片 有 限 公 司 ． １ 黄 购 经
鉴 定 ， 合 《 国药 典 ） ０ ０年 版 一 部 标 准 ， 地 ： Ｉ， 符 中 ） １ ２ 产 四川 批
号 ：７ ４ １ ；小 檗碱 对 照 品 （ 国药 品生 物制 品检 定 所 ， ００ ０ ） 中 批
率为 考察 指标 。 ９种 不 同类 型 的树脂 进行 评 价 。 对优 选 出 的大孔 树 脂纯 化黄 连 总黄 生物 碱 时的 工艺 条件 及参 数 对 并
进 行 研究 。 结 果 Ｄ１ １大孑 吸 附树 脂 的 动态 吸 附分 离效 果 最好 ， 样药 液 浓 度 为 ３ 药 材／ 径 高 比为 １８ 吸 ４ Ｌ 上 ０ｍｇ ｍＬ， ：，
【 基金项 目】国家科 技重大专项课题（ 目编号：０ １Ｘ０４ １ ０ ０ 。 项 ２ １Ｚ ９ ０— ２ ）
‘ 讯 作 者 通
取 各 型号 树脂 于 ９ ％乙醇 漂洗 干 净 ． ５ 浸泡 ２ ４ｈ后 法 湿
装 柱 ， 用 ９ ％乙醇 动态 洗脱 ５倍 树 脂体 积 ， 并 ５ 水洗 至 无醇 味 ， 依次用 ５ ％盐 酸 （ 泡 ６ｈ后 ， 洗 至 中 性 ） ５ 浸 水 和 ％氢 氧 化 钠 （ 泡 ６ｈ后 ， 浸 水洗 至 中性 ） 理 ， 后 用 ９ ％乙醇 动 态 洗 脱 处 最 ５ 至 流 出液 加 水 （ 积 比 １ ） 变混 浊 为 止 ， 水 置换 出 乙醇 体 ：不 ５ 用
【 键 词 】 连 ； 生 物 碱 ； 檗碱 ； 孔 吸 附 树 脂 ； 化 关 黄 总 小 大 纯
【 中图分 类 号】 ２ ２７ Ｒ ８ ．１
【 标识 码】 文献 Ａ
［ 编 号】 ６ ３ ７ １ （０ ２ ０ （ ）０ ４ — ３ 文章 １ ７ — ２ ０ ２ １ ）４ ｃ 一 ０ １ ０
样 量 ： Ｌ ５ 。
２３大 孔 吸 附 树 脂 的 预 处 理 ．
Ｕ ２５ Ｖ一 ５ ０紫 外 分 光 光 度 计 （ 日本 岛 津 公 司 ） Ａ ｉ ｎ ； ｇｌ ｔ ｅ １０ ｅ ｅ 高 效 液相 色谱 仪 （ 国 安捷 伦 公 司 ）Ｓ ｒ ｒ ｓＢ １ ０Ｓ ｒ ｓ ｉ 美 ：ａｔ ｉ Ｓ ｏｕ
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号 ： １７ ３ ２ ０ ０ ） 大 孔 吸 附 树脂 Ｓ ８ Ｄ ３ 三 星树 脂 １０ １— ０ ２８ ； 一 、 Ｍ１ ０（ 科 技 有 限 责 任 公 司 ）ＨＰ ６ ０、 Ｄ一 ０ Ａ、 Ｐ ７ ０、 Ｂ一 ， Ｄ一 ０ ＨＰ ４ ０ Ｈ Ｄ一 ０ Ａ
８ Ｄ１ １ 沧 州宝 恩 吸附 材料 科 技有 限 公 司 ） Ｄ１ １ Ｄ ０ ０ 天 、 ０（ ， ４ 、４ ２ （ 津市 波 鸿建 材化 工树 脂有 限公 司 ） 其他 试 剂 均为 分析 纯 ， ， 水 为纯 化水 。