大孔吸附树脂纯化黄连总生物碱工艺研究

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大孔吸附树脂分离纯化黄连、关黄柏中季铵总碱的工艺研究

大孔吸附树脂分离纯化黄连、关黄柏中季铵总碱的工艺研究大孔吸附树脂分离纯化黄连、关黄柏中季铵总碱的工艺研究【摘要】目的利用AB 8大孔吸附树脂纯化黄连、关黄柏中季铵总碱，确定树脂纯化季铵总碱的工艺参数。

方法以季铵总碱和盐酸小檗碱吸附量为指标，并通过正交实验考察确定了该树脂分离纯化季铵总碱的工艺条件。

结果AB 8型树脂对季铵总碱有良好吸附分离性能，其吸附分离季铵总碱的工艺条件为：上样浓度为50 mg/ml (生药量），上样液pH值为8,吸附流速为3BV/h ,上样体积为5BV，洗脱剂为5倍量树脂柱体积50%乙醇。

结论AB 8型大孔吸附树脂在所确定的工艺条件下，纯化季铵总碱效果良好，季铵总碱的纯度可达90%。

【关键词】季铵总碱大孔吸附树脂纯化Abstract：ObjectiveTo set up a method for purification of total quaternary ammonium hydroxide from Coptis chinensis Franch. and Phellohendron amurense Rupr. by AB-8 macroporous resin . Methods The technical process for purification of total quaternary ammonium based on AB-8 macroporous resin was selected by dynamic absorption ratio through orthogonal tests. ResultsThe A B-8 macroporous resin owned optimum absorption and elution ability. The optimum absorption conditions were that the sample concentration was 50rag ? ml-1, the PH of sample was at 8， the current velocity was 3BV ? h-1，the eluant was 50 % ethanol (5BV) .ConclusionThe A B-8 macroporous resin can be used to purify total quaternary ammonium hydroxide successfully. The purity of total quaternary ammonium hydroxide is about 90 %?Key words：Total quaternary ammonium hydroxide; Macroporous resin; Purification黄连为毛良科植物黄连Coptis chinensis Franch.三角叶黄连Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao.或云连 Coptis teeta Wall.的干燥根莲，其性寒味苦，具有清热燥湿、泻火解毒的功效。

D-101大孔树脂分离纯化两面针总生物碱

西北药学杂志
２０１３年１月第２８卷
第１期
７［１１］ＸｉｎｍｉａｏＬｉａｎｇ，ＹｕＪｉｎ，ＹａｎｐｉｎｇＷａｎｇ，ｅｔａ１．Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ
ａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｉｎｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ
ｙｓｉｓｏｆＣｈｉｎｅｓ Байду номын сангаас ｍｅｄｉｃａｌｐｌａｎｔｓａｎｄｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｍｅｄｉｃｉｎｅｓ
Ｃｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｓ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，２００９，１２１６
ＤＣ．ｗｉｔｈＤ一１０１ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓｒｅｓｉｎ
ＩｕＳｈｉｈｕｉ，ＬＯＮＧＳｈｅｎｇｊｉｎｇ（１．ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｈｏｏｌ，ＧｕａｎｇｘｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３００２１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ
Ｓｃｈｏｏｌ，ＹｏｕｊｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｆｏｒＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ５３３０００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅａｐｒｏｃｅｓｓｔｏｓｅｐａｒａｔｅａｎｄｐｕｒｉｆｙｔｏｔａｌａｌｋａｌｏｉｄｓｆｒｏｍＺａｎｔｈｏｘｙｌｕｍｎｉｔｉｄｕｍ（Ｒｏｘｂ．）ＤＣ．ｗｉｔｈ

大孔吸附树脂纯化黄连总生物碱工艺研究

2012 年 4 月第 9 卷第 12 期
· 实验研究 ·
大孔吸附树脂纯化黄连总生物碱工艺研究
吕子明 1，2 刘文娟 2 王永 2 刘晓燕 2 梁俊清 2 屠鹏飞 1▲ 1.北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室，北京 100191；2.北京以岭药业有限公司，北京 100027
[摘要] 目的研究大孔吸附树脂分离和纯化黄连总生物碱的工艺条件。方法以总生物碱和小檗碱的吸附量和解吸
Studies on purification process of total alkaloids from Coptis chinensis by macroporous adsorption resin
LU Ziming1,2 LIU Wenjuan2 WANG Yong2 LIU Xiaoyan2 LIANG Junqing2 TU Pengfei1▲ 1.State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, School of Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing 100191, China; 2.Beijing Yiling Pharmaceutical Co., Ltd., Beijing 100027, China [Abstract] Objective To investigate the process of isolation and purification of total alkaloids from Coptis chinensis by macroporous adsorption resin. Methods The absorption amount and desorption ratio were taken as the investigation index to evaluated 9 kinds of resins. And the process and parameters of purification of total alkaloids from Coptis chinensis by optimized macroporous adsorption resin were studied. Results The dynamic adsorption and isolation effect of D141 type macroporous adsorption resin was the best, with the drug solution concentration as 30 mg of medicinal material/mL, ratio of diam velocity of absorption as 2 BV/h, solvent of removing impurities as water, volume of removing impurities as 2 BV, velocity of removing impurities as 1 BV/h, solvent of elution as 50% of ethanol, volume of elution as 4 BV, velocity of elution as 3 BV/h. The purity of total alkaloids in the final product was 67.71% after isolation and purifi cation by macroporous adsorption resin. Conclusion The process is rational, feasible and suitable for industrial production. [Key words] Coptis chinensis; Total alkaloids; Berberine; Macroporous adsorption resin; Purification

大孔吸附树脂分离纯化黄连小檗碱研究

大孔吸附树脂分离纯化黄连小檗碱研究席国萍;宋国斌【摘要】目的:筛选适用于分离纯化黄连小檗碱的大孔吸附树脂.方法:本文考察了10种大孔吸附树脂,筛选出了适用于分离纯化黄连小檗碱的D101大孔吸附树脂,其静态吸附量为18.08 mg/g,静态和动态解吸率均为95%以上.结果:选用D101大孔吸附树脂,先水洗除杂,再用4-5倍树脂体积的60%乙醇洗脱,浓缩干燥,产品中小檗碱的含量为30.02%,产品收率为9.12%.结论:本法简单、易行,适合黄连小檗碱的提取.%Objective: To study on separation and purification of berberine in Coptis chinensis by macroporous adsorption resin.Methods: From the 10 kinds of different macroporous adsorption resins, the D101 resin which the adsorption performance was 18.08 mg/g and the desorption ratio was over 95％ was selected to separate the berberine in Coptischinensis.Results: The desorption ratio of over 95％ could be gotten by using 60％ ethanol as eluting solvent and 4-5 BV.Under these experiment conditions, the content of berberine in products was 30.02％ and the yield was 9.12％.Conclusion: The method is easy, possessed of popularization and application value.It can be used for separation berberine from Coptis chinensis.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2011(008)005【总页数】3页(P44-46)【关键词】黄连;小檗碱;分离;纯化【作者】席国萍;宋国斌【作者单位】山西大同大学医学院,山西大同,037009;山西大同大学医学院,山西大同,037009【正文语种】中文【中图分类】R284.2黄连为毛茛科多年生草本植物，主要分布于川、黔、滇、鄂等省高寒阴暗潮湿的局部山区，为我国西南部著名的中药材[1]。

大孔吸附树脂对生物碱分离研究概述

16化工装备技术第40卷第1期2019年2月过滤与分离大孔吸附树脂对生物碱分离研究概述孙涛*杨晋（北方民族大学）摘要大孔吸附树脂具有吸附效果好、选择性好、比表面积大、易于再生、价格低廉且性质稳定等优点，已广泛应用于中药生物碱的分离纯化过程。

对近5年来大孔吸附树脂在分离纯化中药生物碱类化合物方面的文献进行归纳整理，并对影响大孔树脂吸附效果的因素进行了分析。

概述了大孔树脂在中药生物碱分离纯化中的研究现状，并针对大孔树脂技术在纯化生物碱中的发展前景及存在的问题进行了分析讨论。

关键词大孔吸附树脂生物碱分离中图分类号TQ033DOI：10.16759/ki.issn.1007-7251.2019.02.004Overview of Research on Separation of Alkaloids by MacroporousAdsorption ResinSUN Tao YANG JinAbstract:The macroporous adsorption resin had the advantages of good adsorption effect,good selectivity, large specific surface area,easy regeneration,low price and stable property,and had been widely used in the separation and purification process of traditional Chinese medicine alkaloids.In the past five years,the literature on the separation and purification of traditional Chinese medicine alkaloids by macroporous adsorption resin was summarized and analyzed,and the factors affecting the adsorption of macroporous resin were analyzed.The research status of macroporous resin in the separation and purification of traditional Chinese medicine alkaloids was summarized.The development prospects and existing problems of macroporous resin technology in purified alkaloids were analyzed and discussed.Key words:Macroporous adsorption resin;Alkaloid;Separation生物碱是普遍存在于自然界中的含氮有机化合物，大多数呈碱性且具有复杂的氮杂环结构，也是目前自然界中分布较广的天然产物之一。

大孔树脂分离纯化黄连总生物碱型号的筛选

2010年1月第27卷第1期January 2010,Vol .27,No .1・中药标准与工艺・收稿日期:2009-04-15作者简介:张英(1976-),女,讲师,硕士研究生大孔树脂分离纯化黄连总生物碱型号的筛选张　英,　李卫民,　高　英(广州中医药大学,广东广州　510405)摘要:【目的】从众多的树脂型号中筛选出分离纯化黄连总生物碱效果较好的一种。

【方法】选用AB 28、HP20、LD605、ADS 23、ADS 25、D151、DA 2201、XAD7、NK A 299种树脂,以黄连总生物碱的吸附率和解吸率为指标进行初筛,并以盐酸小檗碱的解吸率为指标进行进一步的筛选。

【结果】9种树脂中,ADS 23树脂的吸附和解吸能力均较强,总生物碱的吸附率达到97126%,解吸率达到84182%。

盐酸小檗碱的解吸量达到91311mg 。

【结论】ADS 23树脂对总生物碱及盐酸小檗碱的吸附和解吸性能都较好,可用于黄连总生物碱的分离纯化。

关键词:黄连/分离和提纯;　总生物碱/分析;　盐酸小檗碱/分析;　大孔树脂中图分类号:R28412 文献标志码:A 文章编号:1007-3213(2009)01-0049-04 黄连是毛莨科植物黄连的根茎,有效成分主要是生物碱,其中小檗碱的含量最高,可达10%左右,而且以盐酸盐的状态存在于黄连中[1]。

黄连中的生物碱大多是季铵型生物碱,在水中溶解度大,有一定的极性[1]。

在运用大孔树脂分离纯化中药有效成分时,树脂的极性和所含的官能团对化合物的吸附能力有很大的影响。

因此,对于中药有效成分或有效部位的纯化,树脂型号的选择非常重要。

根据已有的报道,目前常用于生物碱分离纯化的树脂型号有DA 2201、NK A 29、D101、LD605、AB 28、D151、X AD4、X AD7、ADS 23、ADS 25、HP20[227]。

其中,D101、HP20、X AD4实为同一种树脂。

大孔吸附树脂分离纯化黄连、关黄柏中季铵总碱的工艺研究

（ｈｏｏｏｄａｄＢｏｏｉｌｎｉｅｉｇＪｎｓｎｖｒｔ，ｈｎｉｇＪａｇｕ２２１，ｈｎ）ＳｏｌｆＦｏｎｉｌｃｇｎｒ，ｉｇｕＵｉｓｙＺｅａｉｎｓ１０３ＣｉａｇａＥｅｎａｅｉｊｎ
ＡｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｔｐａｍｅｏｒｕｆａｉｆｏｌｕｔｒａｙａｍｎｍｈｄｏｉｅｆｍＣｐ￣ｃｉｎｉＦａｃ．ｓｒｃ：ｊｃｉｏｓｔｄｆｒｃｔｎｏｔｔａｅｒｍｏｉｙｒｘｏｏｔｈｎｓｒｈｖｅｕｈｏｐｉｉｏａｑｎｕｄｒｅｓｎ
总碱和盐酸小檗碱吸附量为指标，并通过正交实验考察确定了该树脂分离纯化季铵总碱的工艺条件。结果Ａ一Ｂ８型树脂对季铵总碱有良好吸附分离性能，其吸附分离季铵总碱的工艺条件为：样浓度为５ｇｍ（药量）上样液ｐ上０ｍ／ｌ生，Ｈ值为８吸附流速为３Ｖｈ，，Ｂ／上样体积为５Ｖ，Ｂ洗脱剂为５倍量树脂柱体积５％乙醇。结论Ａ一大孔吸附树脂在所确定的０Ｂ８型工艺条件下，纯化季铵总碱效果良好，季铵总碱的纯度可达９％。０
ａｄＰｈｌｈｎｒｎａｒｎｅＲｐ．ｙＡＢ一８ｍａｒｐｒｕｅｉ．ＭｅｈｄＴｅｔｃｎｃｌｐｏｅｓｆｒｕｆｃｔｎｏｔｕｔｒｎｅｌｅｄｏｍｕｅｓｕｒｂｏｃｏｏｏｓｒｓｎｔｏｓｈｅｈｉａｒｃｓｒｉａｉｆｔａｑａｅ－ｏｐｉｏｏｌｎｒｍｍｏｉｍｂｓｄｎａｙａｎｕａｅｏＡＢ一８ｍａｒｐｒｕｒｓｎａｓｌｃｅｙｙａｉａｓｒｔｎａｉｔｒｕｈｒｏｏａｅｔ．ｃｏｏｓｅｉｗｓｅｅｔｄｂｄｎｏｍｃｂｏｐｉｒｔｏｈｇｏｔｇｎｔｓｓｏｏｈｌＲｅｕｔＴｅＡＢ一８ｍａｒｐｒｕｅｉｗｎｄｏｔｍｕａｓｒｔｎａｄｅｕｉｎａｉｔ．ｈｐｉｍｓｒｔｏｏｄｔｎｒｓｌｓｈｃｏｏｏｓｒｓｎｏｅｐｉｍｏｉｎｌｔｂｌｙＴｅｏｔｂｐｏｏｉｍｕａｏｉｎｃｎｉｏｓｗｅｅｂｐｉ

黄连生物碱提取及纯化工艺研究

黄连生物碱提取及纯化工艺研究目的探究黄连生物碱的提取及纯化的方法，以提高黄连生物碱的纯度。

方法对黄连生物碱的提取采用单因素试验及正交试验进行，其纯化工艺采取单因素试验进行。

结果最佳的黄连生物碱的提取工艺为黄连饮片加5倍量1.5%的硫酸溶液进行3次煎煮；最佳的纯化工艺为黄连提取液用Ca（OH）2调节pH5-6，抽滤，滤液加热浓缩至浓度为每ml含0.24g生药，抽滤，滤液加盐酸调节pH1.5-2，加5%氯化钠溶液使溶解，冰箱中静置过夜，抽滤，滤渣真空干燥，收集纯化物。

结论研究中对黄连生物碱的提取与纯化工艺方法简单、结果可靠，值得推广应用。

标签：黄连生物碱；提取；纯化；工艺研究黄连在临床中应用较为广泛，其主要的成分有盐酸小檗碱、巴马汀、黄连碱和表小檗碱等生物碱，主要的功效为清热解毒、泻火、燥湿，对于心律失常、充血性心力衰竭等疾病有显著的疗效，同时具有降血糖、血脂，抗血小板凝集，抗肿瘤等药理作用。

但该药的纯度越高其药效越为显著，因此，研究黄连生物碱的提取及纯化工艺是必要的，对临床研究具有重要的意义。

1使用仪器及药物1.1仪器选用美国生产的Agilent高效液相色谱仪，德国生产的BP211D电子分析天平，上海生产的DH-9070A型电热恒温鼓风干燥箱。

1.2试验药物盐酸小檗碱对照品，中国药品生物制品检定所，水为超纯水，乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

黄连饮片选用经药师鉴定后的干燥根茎。

2方法与结果2.1色谱条件固定相：Eclipse XDB-C18色谱柱；流动相：乙腈-0.05mol/L，再以磷酸调节pH4.0；柱温：30度；流速：1.0ml/min；检测波长：345nm。

2.2制取对照品溶液取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含盐酸小檗碱95.6μg的溶液，即得。

2.3制取供试品溶液取黄连提取液1ml，置25ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

大孔吸附树脂分离纯化莲心生物碱

大孔吸附树脂分离纯化莲心生物碱
刘韶;雷鹏;李新中;陈英华
【期刊名称】《中国中药杂志》
【年(卷),期】2007(32)10
【摘要】目的:用大孔吸附树脂对莲心生物碱进行分离纯化研究。

方法:以吸附量、洗脱率及甲基莲心碱的含量为考察指标,选择纯化工艺。

结果:LSA-5B型大孔吸附树脂对莲心生物碱具有较大吸附量。

最佳吸附条件是:上样液质量浓度在0.125 g.mL-1(相当于原生药),洗脱方法为先以纯化水除去杂质,再以50%乙醇洗脱,收集50%乙醇洗脱部分。

结论:该法简单可行,适合工业生产。

【总页数】4页(P912-915)
【关键词】大孔吸附树脂;莲心;生物碱
【作者】刘韶;雷鹏;李新中;陈英华
【作者单位】中南大学湘雅医院药剂科
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.大孔吸附树脂分离纯化玛咖生物碱的分析 [J], 叶承虎;倪红标;蒋绍莉
2.大孔吸附树脂分离纯化白屈菜总生物碱的研究 [J], 昝立峰;李丹花;葛水莲;叶嘉
3.大孔吸附树脂分离纯化苦豆草总生物碱的工艺研究 [J], 王秀芬;冷晓红;郭鸿雁
4.大孔吸附树脂分离纯化生物碱类化合物研究进展 [J], 季慧;陈斌斌;黄越燕
5.大孔吸附树脂分离纯化莲心中莲心总碱的研究 [J], 陈昌国
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黄连总生物碱纯化工艺研究

ｔｔａｆｃｈｅｕｌｏｕｆｃｔｎｔｔｔａｋｏｄｓｈａｆｅｔｔｅｒｓｔｆｐｒｉａｉｏｏａｌａｉｗｅｅｅｅｍｉｅｉｏｌｌｒｄｔｒｎｄ．ＲｅｕｌｓｓｔＴｈｐｉｕｅｏｔｍｍｉｏａｉｎｒｃｓｓａｆｌｏｓｌｔｐｏｅｓｗａｓｏｌｗｓ，ｏ
ＫｅｒＲｈｚｍａＣｐｉｉ；ｙｗｏｄｓｉｏｏｔｓｄ
Ｂｅｂｒｅｈｄｏｈｏｉｅｒｅｉｙｒｃｌｒｄ；ｎ
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黄连为毛莨科植物黄连ＣｐｉｃｉｎｉＦａｃ．角叶黄连锥形瓶中，密加入５ｌ％的盐酸甲醇液，ｏｔｈｎｓｒｎｈ三ｓｅｓ精０ｍ１称定重量，超声处
ｘｕＰｉｈｅ— ｕ，ＧＡＯＹｕｎ，ＺａＨＡＮＸｕｅｑｏｇ，ＺＧ — ｉｎＨＡＮＧＬａｇ，ＸＵＫｅｉｎ
（ｅａｔｎｏｈｍｃｌｎｉｅｒｇｕａｎｖｒｔｏｃｎｌｙＣｉａＤｐｒｔｆＣｅｉｇｎｅｎ，ＷｈｎＵｉｓｙｆＴｈｏｏ，ｈｎ）ｍｅａＥｉｅｉｅｇ
关键词：黄连；盐酸小Ｃｇ；总生物碱；纯化中图分类号：２４２Ｒ８．文献标识码：文章编号：０８８５２０）２３７－２Ａ１０－０（０７１－９０００
ＰｕｉｃｔｏｃｎｏｏｙｏｔｌＡｌｌｉｓｆｏＲｈｉｏａＣｏｉｓｒｆａｉｎＴｅｈｌｇｆＴｏａｋａｏｄｒｍｉｚｍｐｔｄｉ

大孔吸附树脂分离纯化莲心中莲心总碱的研究

２０３３４２８５９７７３５８３４９２５
相对湿度（％）
［３］李奉勤，韩月芝，范文成，正交试验研究仙方活命胶等．囊的最佳生产工艺［］中国实验方剂学杂志，０７１Ｊ．２０，３
２０
辞
一
４０。。２ｏ
１０
誉
［１黄夏敏，中芳．］彭白芍在中成药生产过程中芍药苷含量变化的研究［．中药新药与临床药理，９８，Ｊ］１９９
（４）：３．２６
［李淑芝，２］郭亚键．不同煎煮条件对芍药苷煎出量的影响［］中成药，９９２（）１５Ｊ．１９，１３：１．
粉重量 ×１００％
一
进风温度、浸膏比重、口温度；水分均有显著影响。出对
进风温度对喷雾干燥效果影响最大，方活命胶仙囊喷雾时进风以１０Ｃ为宜，９￣如果太高粉末易焦化、颜色变深；低容易粘壁，时效率低成本高，过验证太同经。本工艺能满足大生产需要，而且产品质量稳定。喷雾干燥时浸膏的相对密度以１１选择为宜，．０的０中药浸膏由于成分复杂，并且大多含有粘液质、、糖淀粉，密度高、粘稠度就大，易造成雾化器阻塞，化时形雾图１吸湿率曲线图成的粒径也大，干燥速度慢，且形成的粉末含水量而易粘壁，如果相对密度太低，蒸发水分量增加，消耗３３临界相对湿度测定取最佳工艺验证的２号样品喷雾粉，干至恒高，．烘较多能源，增加生产成本，效率也低。重，分成６份，每份约５ｇ置称量瓶中，，精密称定，开瓶盖，打放人相对湿度通过对临界相对湿度的测定，大生产提供参考为分别为２％，３，２８，９７，５３，４３，２５的环境中于０３％４．％５．％７．％８．％９．％依据，同时也对选择包材和贮存条件提供依据。２￣５Ｃ条件下放置１０ｈ计算吸湿率，后以吸湿率为纵坐标，２，然以相对湿度为横坐标作曲线；出喷雾粉吸湿的临界相对湿度为５％。结果见图２参考文献：找６。

基于大孔树脂技术富集纯化中药生物碱的应用进展

基于大孔树脂技术富集纯化中药生物碱的应用进展大孔树脂技术具有吸附效果好、性质稳定、成本低廉等优点，已被广泛用于中药生物碱类成分的富集纯化中。

本文按生物碱的结构类型分类，综述了大孔树脂在各类天然生物碱分离纯化中的应用研究现状，针对大孔树脂技术在纯化生物碱中的发展前景及存在的问题进行分析讨论。

标签：大孔树脂技术；中药；生物碱生物碱是自然界广泛存在的一类含氮碱性有机化合物，多数具有复杂的环状结构和显著生理活性，是许多中药的有效成分，在临床应用中具有抗癌、降压、抗菌、抗病毒、抗心律失常等作用[1]，在医药卫生方面具有巨大的应用潜力。

采用现代提取分离技术，科学高效地从中药植物中提取、纯化生物碱类成分，并开发成为具有自主知识产权的新药，已成为中医药领域的研究热点之一。

生物碱有效成分的分离纯化是中药开发的难点和关键，新型纯化技术的研究和应用能大大提高中药生物碱的得率和质量，节约能源和时间。

大孔吸附树脂是20世纪70年代发展起来的一类具有大孔结构的高聚物吸附剂，不含交换基团，最早用于废水处理、医药工业、分析化学、临床检定等领域[2]，近年来在中药有效成分的分离纯化、质量分析等方面有了较广泛的应用。

本文主要对大孔吸附树脂技术在分离纯化中药生物碱的应用研究进展进行综述。

1 大孔吸附树脂的分离原理和特性大孔树脂是吸附性和筛选性原理相结合的分离材料，分子间的范德华力及形成氢键的作用力使其具备良好的吸附性，树脂表面的多孔结构使其具有筛选性能。

有机化合物根据吸附力的强弱和分子量大小不同，在树脂的吸附和筛选作用下实现富集、分离、纯化、除杂、浓缩等目的。

树脂的孔径大小、比表面积、极性等性质均可影响吸附性能，主要有苯乙烯型、丙烯腈型等类型[3]。

大孔吸附树脂与其他纯化技术相比具有以下特点：①比表面积大，吸附容量大、效率高，选择性好，吸附效果不受无机盐、强离子、低分子化合物的影响，产品质量高。

②理化性质稳定，不溶于酸碱及有机溶剂，对热稳定、机械强度好。

大孔吸附树脂分离纯化麻黄及洋金花总生物碱的研究

维普资讯
食品与药品
ＦｏｎｕｏｄａｄＤｒｇ
２００６年第８第０Ａ卷５期
４７
大孔吸附树脂分离纯化麻黄及洋金花总生物碱的研究
郭丽冰，周洁珍，朱盛山
（东药学院中药系，广东广州５０２）广ｌ２４
Ｔｅｔｒｅｔｐｓｏｃｏｏｏｓｒｓｎｈｗｅｏａｌｉｆｒｎｆｅｔ．ｎｌｓｏ１ｍａｒｐｒｕｅｉｈｅｅｆｈｙｍａｒｐｒｕｅｉｓｓｏｄｎｔｂｙｄｆｅｅｔｆｃｓＣｏｃｕｉｎＤ１ｅｃｏｏｏｓｓｎｉ５ｒｓ
ｍｏｔｅｆｃｉｅｔｅａａｅｔｔｌａｋａｏｄｓｆｏｅｂｐｈｅａｅａｄＦｌｓＤａｔｒｅｓｆｅｔｖｏｓｐｔｏａｌｌｉｍＨｒａＥｒｒｄｒｎｏｕａ．
ＫｅｏｄｙＷｒｓ：ＨｅｂｐｈｄａｅＦｌｓＤａｕｒｅｏａｌｌｉｓｍａｒｐｒｕｓａｏｔｏｅｉｒａＥｅｒ；ｏｔａ，ｔｔｌａｋａｏｄ；ｃｏｏｏｄｓｒｉｎｒｓｎｐ
喘平粉雾剂是以麻黄、洋金花为主药的复方制麻黄和洋金花的总生物碱分离纯化工艺，为制定喘
剂，主治支气管哮喘和喘息性气管炎 …。生物碱为平粉雾剂最佳提取工艺提供了依据。
该处方中止咳平喘的主要有效成分，该复方中总生１仪器与试药物碱的提取分离方法有酸水提醇沉法、阳离子交ＲＥ一２５ＣＳ旋转蒸发器（义市英峪予华仪器巩换树脂法等】。但都有总生物碱含量偏低，固体物厂）ＡＲＴＯＲＩ一分分析天平（国）；ＳｕＳ水德；ＢＬ一

大孔树脂提取生物碱和黄酮实验方案

大孔树脂吸附原理：树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子之间的范德华引力，通过它巨大的比表面积进行物理吸附而工作，使有机化合物根据其吸附力不同及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。

大孔树脂吸附分类：根据树脂表面性质，大孔吸附树脂按其极性强弱分为非极性、中极性和极性三种类型。

非极性树脂：适合于由极性溶剂中吸附非极性物质。

中性树脂：既可由极性溶剂中吸附非极性物质，又可由非极性溶液中吸极性物质。

极性树脂：适用于从非极性溶液中吸附极性有机物。

大孔树脂在分离生物碱类化合物中的应用：莲心碱是一种双苄基异喹啉类生物碱，刘韶等对比8种大孔树脂对莲心生物碱吸附量与比吸附量，结果表明LSA-5B大孔吸附树脂的吸附量和比吸附量比其他类型的大孔吸附树脂大几倍，故选择该型大孔树脂对莲心生物碱进行纯化。

延胡索其含有的是异喹啉类生物碱。

周文威等在分离纯化延胡索总生物碱的过程中比较了5 种大孔树脂的比吸附量，最终选择了D101 大孔树脂作为分离纯化的填料。

长春花其含有130 种以上的萜类吲哚生物碱，张琳等用大孔树脂对长春花中的文多灵、长春质碱和长春碱进行分离，在比较了11 种树脂的静态吸附容量，解析率和动态吸附容量后选择了AB-8型大孔树脂作为分离材料。

由此可见，应用大孔树脂分离纯化不同类型的生物碱需对大孔树脂进行选择，以得到最佳效果。

实验目的：本实验采用D101大孔树脂，对牛耳菜提取液中的生物碱进行提纯和分离。

实验原理：根据提取液中各物质对树脂相互作用力的不同，所致各物质在层析住中的停留时间不同进行分离提纯。

实验材料：层析柱、D101大孔吸附树脂、蒸馏水、5%稀盐酸（质量分数）、95%乙醇、3%氢氧化钠、超声清洗器、牛耳菜实验步骤：1.牛耳菜提取液制备：将已晒干粉碎好的牛耳菜放入40%乙醇水溶液中超声2h，然后用纱布过滤，得到的滤液在电驴上加热蒸发，完后放入冰柜中封存。

2.树脂前处理：以0.5BV的95%乙醇浸泡树脂24h（1BV为1个树脂床体积），用2BV的乙醇以2BV/h流速通过树脂柱洗涤树脂至流出液的加水不呈白色混浊为止。

大孔吸附树脂分离纯化黄连小檗碱研究

大孔吸附树脂分离纯化黄连小檗碱研究作者：席国萍宋国斌来源：《中国医药导报》2011年第05期[摘要] 目的：筛选适用于分离纯化黄连小檗碱的大孔吸附树脂。

方法：本文考察了10种大孔吸附树脂，筛选出了适用于分离纯化黄连小檗碱的D101大孔吸附树脂，其静态吸附量为18.08 mg/g，静态和动态解吸率均为95%以上。

结果：选用D101大孔吸附树脂，先水洗除杂，再用4～5倍树脂体积的60%乙醇洗脱，浓缩干燥，产品中小檗碱的含量为30.02%，产品收率为9.12%。

结论：本法简单、易行，适合黄连小檗碱的提取。

[关键词] 黄连小檗碱分离纯化[中图分类号] R284.2[文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2011）02（b）-044-03Study on separation and purification of berberine in Coptis chinensis by macroporous adsorption resinXI Guoping, SONG Guobin(The Medical College of Datong University, Shanxi Province, Datong 037009, China)[Abstract] Objective: To study on separation and purification of berberine in Coptis chinensis by macroporous adsorption resin. Methods: From the 10 kinds of different macroporous adsorption resins, the D101 resin which the adsorption performance was 18.08 mg/g and the desorption ratio was over 95% was selected to separate the berberine in Coptis chinensis. Results: The desorption ratio of over 95% could be gotten by using 60% ethanol as eluting solvent and 4-5 BV. Under these experiment conditions, the content of berberine in products was 30.02% and the yield was 9.12%. Conclusion: The method is easy, possessed of popularization and application value. It can be used for separation berberine from Coptis chinensis.[Key words] Coptis chinensis; Berberine; Separation; Purification黄连为毛茛科多年生草本植物，主要分布于川、黔、滇、鄂等省高寒阴暗潮湿的局部山区，为我国西南部著名的中药材[1]。

黄连总生物碱提取工艺的优化研究

南阳理工学院本科生毕业论文学院（系）：生物与化学工程学院专业：生物工程学生：贾建军指导老师：李杰（讲师）完成日期 2014 年 5 月南阳理工学院本科生毕业论文黄连总生物碱提取工艺的优化研究Study on the Extraction Technology of Total Alkaloidfrom Coptis Chinensis总计:毕业论文24页表格: 9个插图： 11幅南阳理工学院本科毕业论文黄连总生物碱提取工艺的优化研究Study on the Extraction Technology of Total Alkaloidfrom Coptis Chinensis学院：生物与化学工程学院专业：生物工程学生姓名：贾建军学号：105010540075指导教师（职称）：李杰（讲师）评阅教师：完成日期：2014年5月南阳理工学院Nanyang Institute of Technology黄连总生物碱提取工艺的优化研究生物工程专业贾建军[摘要]本论文主要对黄连总生物碱的提取工艺条件进行优化研究。

首先，通过单因素试验研究提取时间、乙醇浓度、提取温度、料液比等因素对黄连总生物碱得率的影响，然后进行析因试验筛选出对黄连总生物碱得率影响显著的因子，再通过Box-Behnken 试验对提取条件进行优化。

结果显示黄连总生物碱的最佳提取条件为：提取时间120 min，乙醇浓度60%，提取温度81℃，料液比1：41。

在最佳提取条件下黄连总生物碱得率可达73.21mg/g，与预测值73.44mg/g一致，证明试验结果准确可靠，可为黄连总生物碱的提取工艺研究提供参考。

[关键词]黄连总生物碱；提取工艺；响应面分析Study on the Extraction Technology of Total Alkaloidfrom Coptis ChinensisBiological engineering Major Jia JianjunAbstract:This paper is to optimize the extraction conditions of total alkaloids from Coptis chinensis. First, single factor experiments were done to examine the impact of ethanol concentration, extrating time, extracting temperature, ratio of solid to liquid and other effect on the extraction of Coptis chinensis alkaloids. Then factorial experiments were done to filter out the significant factors. Finally, Box-Behnken experiments were done to optimize the extraction conditions. The optimal extraction conditions of total alkaloids from Coptis chinensis are obtained as follows: ethanol concentration 60%,extraction time 120 min,extraction temperature 81℃and the material liquid ratio of 1:41. The total coptis alkaloids yield could reach 73.21mg/g under the optimum technological conditions, which is similar with the predicted 73.44 mg/g. It proved that the test results are accurate, reliable and could provide the reference for the extraction of total alkaloids from Coptis chinensis.Key words:total alkaloid of Coptis Chinensis ;extraction condition; response surface methodology目录1绪论 (1)1.1黄连生物碱的研究现状 (1)1.1.1黄连的自然分布和特性 (1)1.1.2黄连的主要化学成分 (1)1.2黄连生物碱的药理活性 (1)1.3黄连生物碱的应用现状 (2)1.4黄连生物碱的提取技术的研究现状及进展 (3)1.5总生物碱含量的分析测定方法 (4)1.6响应面分析法简述 (5)1.7本论文的选题依据及研究内容 (5)1.7.1本论文的选题依据 (5)1.7.2本论文研究的主要内容 (6)2黄连总生物碱的提取工艺优化研究 (7)2.1 材料 (7)2.1.1原料 (7)2.1.2试剂 (7)2.1.3仪器设备 (7)2.2 方法 (8)2.2.1黄连总生物碱的提取 (8)2.2.2黄连总生物碱的检测 (8)2.2.3盐酸小檗碱标准曲线的绘制 (8)2.2.4黄连总生物碱得率的计算 (8)2.2.5单因素试验 (9)2.2.6析因试验设计 (9)2.2.7响应面分析试验设计 (10)2.2.8最佳工艺条件的验证实验 (10)2.3 结果及分析 (10)2.3.1盐酸小檗碱标准曲线的绘制及结果 (10)2.3.2单因素试验结果分析 (11)2.3.3析因试验及结果 (13)2.3.4响应面结果及分析 (14)2.3.5响应曲面图分析 (16)2.3.6黄连总生物碱提取工艺最优值的预测 (18)2.3.7最佳工艺条件的验证实验 (19)3 结论与展望 (20)3.1主要结论 (20)3.2展望 (20)参考文献 (22)致谢 (24)1 绪论生物碱是一类碱性含氮有机化合物并广泛存在于自然界中，普遍含有复杂的环状结构，通常以盐或游离态两种形式存在，有显著的抗肿瘤、抗菌、抗过敏、抗炎症等药理活性，是一种重要的中草药有效成分，具有极为重要的药用价值和保健功能[1]。

黄连总生物碱纯化工艺研究

黄连总生物碱纯化工艺研究许沛虎，高媛，张雪琼，张良，许可【摘要】目的优选黄连最正确纯化工艺。

方式对阻碍总生物碱纯化成效的因素进行了系统考察。

结果黄连总生物碱的最正确纯化工艺为10倍量%稀硫酸，用石灰乳调pH 9，静置2h，滤过，滤液用盐酸调pH1，加氯化钠使含盐量达10%，静置24h，滤过，沉淀水洗至pH 5。

结论优选的黄连总生物碱纯化工艺稳固可行。

【关键词】黄连盐酸小檗碱总生物碱纯化Abstract:ObjectiveTo optimize the best purification process of total alkaloids from Rhizoma factors that affect the result of purification to total alkaloids were optimum isolation process was as follows, adding 10 time of % sulphuric acid into Rhizoma Coptidis extract, adjusting to pH 9 by lime cream, standing for 2 hours, filtering, adjusting to pH 1 by hydrochloric acid, adjusting the salinity of solution up to 10% by sodium chloride, standing for 2 hours, washing the precipitation by distilled water to pH 5. ConclusionThe optimum purification technology of total alkaloids from Rhizoma Coptidis is simple, stable and feasible.Key wordsRhizoma Coptidis; Berberine hydrochloride; Total alkaloids; Purification黄连为毛莨科植物黄连Coptis chinensis Franch.三角叶黄连Coptis deltoidea . Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎。

黄连中生物碱提取工艺的研究进展

Ｃｅｉｎｑａ，ＷａｇＲｕ— ｕ，ＳｎＡ－ｕ，ＬｕＪｎｈｉｈｎｑａ — ｉｎｎｉｒｉｕｈｉｉｕ — ａ
（ｏｌｅｏｈｍｃｌ＆ＥｖｏｍｎＳｉｎｅｈａｘＵｉｒｔｏＣｌｇｆＣｅｉａｅｎｉｎｅｔｃｅｃ，ＳａｎｉｎｖｓｙｆｒｅｉＴｃｎｌｙａｚｏｇｈｎ，２０１ｅｈｏｏ，Ｈｎｈｎ，Ｃｉａ７３０）ｇ
根为原料，用溶剂提取、脂分步分离、淀和重结晶到的工艺使生物碱的提取效率高，采树沉稳定性好，总生物碱平等方法，到了小檗碱和药根碱单体，度即可达到９％均含量为１．６得纯５５Ｏ％。
关键词：连；黄生物碱；取提 ’
‘
Ｒｅｅｒｈｐｏｒｓｎｅｔａｔｏｅｈｏｏｙ０ｓａｃｒｇｅｓｏｘｒｃｉｎｔｃｎｌｇｆ
ＡｌｌｉｒｍＲｈｉｏａｋａｏｄｓｆｏｚｍＣｏｔｄｓｐｉｉ
助提取法、波辅助提取及酶解提取法等。文综述了黄马汀。微本
连生物碱提取工艺的研究进展，旨在为生物碱资源的研１回流提取法．２
究与开发利用提供参考。
１生物碱的提取工艺
回流提取法常用水、乙醇等为提取剂，出液加热蒸浸
ｄｉｃｓｄａｓ．ｓｕｓｅｌｏ ‘
Ｋｅｒｓｙｗｏｄ：ＲｈｚｍａＣｐｉｉ；Ａｌａｏｄ；Ｅｔａｔｎｉｏｏｔｓｄｋｌｉｓｘｒｃｉｏ

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２２４第卷１０年月９第２１期
・实验研究・
大孔吸附树脂纯化黄连总生物碱工艺研究
吕子明２・刘文娟２王永ｚ刘晓燕梁俊清屠鹏飞１北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室，．北京１０９；．京以岭药业有限公司，０１１２北北京１０２００７［要】目的研究大孔吸附树脂分离和纯化黄连总生物碱的工艺条件。方法以总生物碱和小檗碱的吸附量和解吸摘
２２含量测定．
２２１总生物碱的含量测定依据文献『］采用紫外分光光度．．２，法进行。２２２小檗碱的含量测定【依据文献［】采用高效液相法进．．２，行。色谱条件：ｈｎｍｅｅｌ柱（５．ＰｅｏｎｘＣ８２０ｍｍｘ４６ｍｍ，．Ｉ；０５ｘｍ）流动相：乙腈一酸水溶液缓冲盐『酸一乙胺一（：：０１磷磷三水１１０）２（４７）柱温：温；２：６；室流速：．ｍ／ｎ检测波长：４ｍ；１Ｌｍｉ；０３５ａ进
附流速为２Ｂ／。杂溶剂为水，Ｖｈ除除杂体积为２Ｂ除杂流速为１Ｂ／洗脱溶剂为５％乙醇，脱体积为４ＢＶ，Ｖｈ，０洗Ｖ，
洗脱流速为３Ｂ／。Ｖｈ通过大孔吸附树脂分离纯化后，终产品中总生物碱的纯度为６．１７７％。结论该工艺合理、可行，适合工业生产。
【ｙｗｏｄ】ＣｐｉｃｉｅｓｓＴｔｌａｉｓＢｒｅｉｅＭａｒｐｒｕｄｏｔｎｒｓｎＰｒｃｔｎＫｅｒｓｏｔｈｎｎｉ；ｏａａｋｌｄ；ｅｂｒ；ｃｏｏｏｓａｓｒｉｉ；ｕｆａｉｓｌｏｎｐｏｅｉｉｏ
黄连为毛茛科植物黄连ＣｐｉｃｉｅｓＦａｃ．三角叶ｏｔｈｎｎ￣ｒｎｈ、ｓ
１仪器与材料
按文献【】２中优化好的提取工艺进行提取。黄连饮片适取量，５％乙醇，剂用量８倍，取３次，次１。合并加０溶提每．ｈ５
提取液，压浓缩至无醇味，水定容至２５０ｍＬ抽滤，减加０，备用，即每毫升药液相当于含３０ｍｇ生药材。
Ｌｉｉ＇Ｉｎａ２ＵＺｍｎ２ＵＷｅｕｎｆＬｊＷＡＧＹｎＬＵＸａｙｎＩＮｎｉＴｅｇｉＮｏＩｉａ２ＡＧＪｑ￣ＵＰｎ（ｌｏＬｕｎｅ
１ＳａｅａｏａｏｙｏａｕａａｄＢｏｍｅｃＤｒｇ，ＳｈｏｆＰａｍａｅｔａｃｅｃｓＰｋｎｎｖｒｉ，Ｂｉｎ．ｔｔＫｙＬｂｒｔｒｆＮｔｒｌｎｉｅｍｉｔｕｓｃｏｌｏｈｒｃｕｉｌＳｉｎｅ，ｅｉｇＵｉｅｓｙｅｊｇｉｃｔｉ１０９，ｈｎ；．ｅｊｇＹｉｎｈｒａｅｔａｏＬｄ，ｅｉｇ１０２，ｈｎ０１１Ｃｉａ２ＢｉｎｌｇＰａｃｕｉｌ．ｔ．Ｂｉｎ００７ＣｉａｉｉｍｃＣ，ｊ【ｓｒｃ】ＯｂｅｔｅＴｎｅｔａｅｔｅｐｏｅｓｏｏａｉｎｕｉｃｔｎｏｏｌａｋｌｉｓｆｍＣｐｉｃｉｎｉｂＡｂｔａｔｊｃｉｏｉｖｓｉｔｈｒｃｓｆｉｌｔｎａｄｐｒａｉｆｔｔｌａｄｒｏｔｈｎｓｙｖｇｓｏｉｆｏａｏｏｓｅｓ
黄连Ｃｐｉｄｈｉｅ．ＣｅｇｅＨｓｏ云连ＣｐｉｔｅｏｔｅｏａＣＹ．ｈｎｔｉ、ｓｄａｏｔｅｔｓａ
２方法与结果
２１上柱药液的制备．
Ｗａ１的干燥块茎，ｌ等．具有清热燥湿、泻火解毒之功效＿１１连。黄中的小檗碱、巴马亭、黄连碱、檗碱等生物碱是其发挥药效小的主要物质基础。实验旨在优选出一种适合分离黄连总生本物碱的大孔树脂，对优选出的大孔树脂分离黄连总生物碱并时的工艺条件及参数进行研究。
１０电子天平；连（于河北省安国以岭饮片有限公司．１黄购经
鉴定，合《国药典）００年版一部标准，地：Ｉ，符中）１２产四川批
号：７４１；小檗碱对照品（国药品生物制品检定所，０００）中批
率为考察指标。９种不同类型的树脂进行评价。对优选出的大孔树脂纯化黄连总黄生物碱时的工艺条件及参数对并
进行研究。结果Ｄ１１大孑吸附树脂的动态吸附分离效果最好，样药液浓度为３药材／径高比为１８吸４Ｌ上０ｍｇｍＬ，：，
【基金项目】国家科技重大专项课题（目编号：０１Ｘ０４１００。项２１Ｚ９０— ２）
‘ 讯作者通
取各型号树脂于９％乙醇漂洗干净．５浸泡２４ｈ后法湿
装柱，用９％乙醇动态洗脱５倍树脂体积，并５水洗至无醇味，依次用５％盐酸（泡６ｈ后，洗至中性）５浸水和％氢氧化钠（泡６ｈ后，浸水洗至中性）理，后用９％乙醇动态洗脱处最５至流出液加水（积比１）变混浊为止，水置换出乙醇体：不５用
【键词】连；生物碱；檗碱；孔吸附树脂；化关黄总小大纯
【中图分类号】２２７Ｒ８．１
【标识码】文献Ａ
［编号】６３７１（０２０（）０４ — ３文章１７ — ２０２１）４ｃ一０１０
样量：Ｌ５。
２３大孔吸附树脂的预处理．
Ｕ２５Ｖ一５０紫外分光光度计（日本岛津公司）Ａｉｎ；ｇｌｔｅ１０ｅｅ高效液相色谱仪（国安捷伦公司）ＳｒｒｓＢ１０Ｓｒｓｉ美：ａｔｉＳｏｕ
Ｓｕｉｓ０ｕｉｃｔｎｐｏｅｓｏｏａｌａｏｄｒｍｐｔｈｎｎｉｂｔｄｅｎｐｒｆａｉｒｃｓｆｔｔｌａｋｌｉｓｆｏｉｏＣｏｉｃｉｅｓｓｙｓ
ｍａｃＯｐＯｒｒｏｕｓａｄｓｐｔｏｎｅｌｏｒｉｒＳｎ
ｍａｒｐｒｕｄｏｐｉｎｒｓｎＭｅｈｏｓＴｅａｓｒｔｏｍｏｎｎｅｏｔｎｒｔｒａｅｓｔｅｉｖｓｉａｉｎｉｄｘｃｏｏｏｓａｓｒｔｏｅｉ．ｔｄｈｂｏｉｎａｕｔａｄｄｓｒｉａｉｗｅｅｔｋｎａｈｎｅｔｔｎｅｐｐｏｏｇｏｔｖｌａｅｉｄｆｒｓｎ．ＡｎｈｒｃｓｎａａｔｒｆｐｒｃｔｎｏｏａｌａｏｄｏＣｏ￣ｃｉｅｓｓｂｏｅａｕｔｄ９ｋｎｓｏｅｉｓｄｔｅｐｏｅｓａｄｐｒｍｅｅｓｏｕｆａｉｆｔｔｌａｋｌｉｓｆｍｐｔｈｎｎｉｙｉｉｏｒｏｔｚｄｍａｒｐｒｕｄｏｐｉｎｒｓｎｗｅｅｓｕｉｄ．ＲｅｕｔｈｙａｃａｓｒｔｎａｄｉｏａｉｎｅｆｃｆＤ１ｔｐｐｉｅｃｏｏｏｓａｓｒｔｏｅｉｒｔｄｅｍｉｓｌｓＴｅｄｎｍｉｄｏｐｉｎｓｌｔｆｅｔｏ４１ｙｅｏｏｍａｒｐｒｕｄｏｐｉｎｒｓｎｗａｈｅｔｗｉｈｒｇｓｌｔｎｃｎｅｔｔｎａ０ｍｇｏｄｃｎｔｒａ／ｃｏｏｏｓａｓｒｔｅｉｓｔｅｂｓ，ｔｔｅｄｕｏｕｉｏｃｎｒｉｓ３ｆｍｅｉｉａｍａｅｉｍＬ，ａｉｆｏｈｏａｏｌｌｒｔｏｏｄａｔｒａｄｈｉｈｓ１８ｖｌｃｔｆａｓｒｔｎａｉｍｅｅｎｅｇｔａ：，ｅｏｉｏｂｏｉｓ２ＢＶ／，ｏｖｎｆｒｍｏｉｇｉｕｔｅｓｗａｅ，ｖｌｍｅｏｅｖｎｙｐｏｈｓｌｅｔｏｅｖｎｍｐｒｉｓａｔｒｏｕｆｒｍｏｉｇｉｉｕｉｅｓ２ＢｖｌｃｔｆｒｍｏｉｇｉｕｔｓａＶ／ｓｌｅｔｏｌｔｎａ０ｏｔａｏ．ｖｌｍｅｏｌｔｎａｍｐｒｉｓａＶ，ｅｏｉｏｅｖｎｍｐｒｉｓ１Ｂｈ，ｏｖｎｆｅｕｉｓ５％ｆｅｈｎ１ｏｕｆｅｕｉｓｔｙｉｅｏｏ４ＢＶ．ｅｏｉｆｅｕｉｎａｖｌｃｔｏｌｔｏｓ３ＢＶ／．ｈｕｔｆｏａｌａｏｄｎｔｅｆｎｌｒｄｃｓ６．％ａｔｒｉｏａｉｎａｄｐｒｆｙｈＴｅｐｒｙｏｔｌａｋｌｉｓｉｈａｏｕｔｗａ７７１ｉｔｉｐｆｌｔｎｕｉ．ｅｓｏｉｃｔｏｙｍａｒｐｒｕｄｏｔｎｒｓｎＣｏｃｕｉｎＴｈｒｃｓＳｒｔｎ１ｆａｉｌｎｕｔｂｅｆｒｉｄｓｒａｒｄｃｉｎａｉｎｂｃｏｏｏｓａｓｒｉｅｉ．ｎｌｓｏｅｐｏｅｓｉａｉａ．ｅｓｂｅａｄｓｉｌｏｎｕｔｌｐｏｕｔｏ．ｐｏｏａｉ