实验一 X染色质标本制备与观察教学教案
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钝头部刮取口腔下唇内侧面,弃去第一次刮到的细胞, 在同一部位连刮几次,将刮取物均匀涂在干净的载玻 片上晾干。
(2)固定:将带有标本的载玻片置入装有新配置的甲醇冰醋酸固定液(3:1)的染色缸中固定10min后取出, 空气干燥。
(3)水解:玻片标本置于5mol/L HCl中,室温水解20 min。用新鲜蒸馏水冲洗四次,充分洗去残留的HCl。
(4)染色:置Giemsa染液中染色10min ,蒸馏水冲洗后 晾干,酒精灯上过火脱水,以二甲苯透明(1-2min), 树胶封片。
[观察与结果]
高倍镜下可见许多染成蓝色的细胞核, 细胞质不着色或不明显。选择核较大, 染色清晰,轮廓完整,核质呈均匀细网 状的细胞进行观察。找到核膜内侧缘有 蓝色浓染小体的细胞核后,换油镜进一 步观察。油镜下X染色质为蓝色平凸形、 三角形、扁平形的浓染小体。
[实验用品]
(1)器材:显微镜、载玻片、牙签。
(2)试剂 :Giemsa染液、0.2%甲苯胺蓝 染液 、5mol/L HCl溶液 、95%乙醇、 pH 6.8 PBS
(3)材料:人口腔黏膜上皮细胞。
[方法与步骤]
(一) Giemsபைடு நூலகம்染色法 (1)取材制片:先让受检者用水漱口数次,然后用牙签
实验一 X染色质标本制备与观察
[目的要求]
(1)掌握X染色质标本制备方法及其原理。 (2)掌握X染色质的形态特征及其临床意义。
[实验原理]
一个个体不论其细胞中有几条X染色体,均只 有一条具有转录活性,其余的X染色体均失活 形成异固缩的X染色质。正常女性间期细胞核 中X染色质阳性率一般约为10%一30%,有的 可高达50%以上。其出现率的高低与个体不同 生理状态、染色方法、染色技术以及X染色体 在细胞核中的位置不同有关。在男性间期细胞 核中则平均低于1%。一般检查X染色质确定性 别时,观察200个细胞,X染色质出现5%以上 者为女性。现在,X染色质检查已广泛应用于 临床,作为性别测定和性染色体数目异常的一 种辅助诊断方法。
[注意事项]
(1)取材前要漱口,以免口腔中的杂质影 响观察效果。
(2)HCl水解要充分,使X染色质易于显 现。
(3)临床检查时要选择形态好的细胞观察, 计算100个细胞中X染色质出现的频率。
[作业]
书写实验报告,绘制X染色质图。
[思考题]
1.间期核内出现X染色质有何生理意义? 2.X染色质检测有何临床用途?
(2)固定:将带有标本的载玻片置入装有新配置的甲醇冰醋酸固定液(3:1)的染色缸中固定10min后取出, 空气干燥。
(3)水解:玻片标本置于5mol/L HCl中,室温水解20 min。用新鲜蒸馏水冲洗四次,充分洗去残留的HCl。
(4)染色:置Giemsa染液中染色10min ,蒸馏水冲洗后 晾干,酒精灯上过火脱水,以二甲苯透明(1-2min), 树胶封片。
[观察与结果]
高倍镜下可见许多染成蓝色的细胞核, 细胞质不着色或不明显。选择核较大, 染色清晰,轮廓完整,核质呈均匀细网 状的细胞进行观察。找到核膜内侧缘有 蓝色浓染小体的细胞核后,换油镜进一 步观察。油镜下X染色质为蓝色平凸形、 三角形、扁平形的浓染小体。
[实验用品]
(1)器材:显微镜、载玻片、牙签。
(2)试剂 :Giemsa染液、0.2%甲苯胺蓝 染液 、5mol/L HCl溶液 、95%乙醇、 pH 6.8 PBS
(3)材料:人口腔黏膜上皮细胞。
[方法与步骤]
(一) Giemsபைடு நூலகம்染色法 (1)取材制片:先让受检者用水漱口数次,然后用牙签
实验一 X染色质标本制备与观察
[目的要求]
(1)掌握X染色质标本制备方法及其原理。 (2)掌握X染色质的形态特征及其临床意义。
[实验原理]
一个个体不论其细胞中有几条X染色体,均只 有一条具有转录活性,其余的X染色体均失活 形成异固缩的X染色质。正常女性间期细胞核 中X染色质阳性率一般约为10%一30%,有的 可高达50%以上。其出现率的高低与个体不同 生理状态、染色方法、染色技术以及X染色体 在细胞核中的位置不同有关。在男性间期细胞 核中则平均低于1%。一般检查X染色质确定性 别时,观察200个细胞,X染色质出现5%以上 者为女性。现在,X染色质检查已广泛应用于 临床,作为性别测定和性染色体数目异常的一 种辅助诊断方法。
[注意事项]
(1)取材前要漱口,以免口腔中的杂质影 响观察效果。
(2)HCl水解要充分,使X染色质易于显 现。
(3)临床检查时要选择形态好的细胞观察, 计算100个细胞中X染色质出现的频率。
[作业]
书写实验报告,绘制X染色质图。
[思考题]
1.间期核内出现X染色质有何生理意义? 2.X染色质检测有何临床用途?