实验一 X染色质标本制备与观察教学教案
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
钝头部刮取口腔下唇内侧面，弃去第一次刮到的细胞， 在同一部位连刮几次，将刮取物均匀涂在干净的载玻 片上晾干。
(2)固定：将带有标本的载玻片置入装有新配置的甲醇冰醋酸固定液（3：1）的染色缸中固定10min后取出， 空气干燥。
(3)水解：玻片标本置于5mol/L HCl中，室温水解20 min。用新鲜蒸馏水冲洗四次，充分洗去残留的HCl。
(4)染色：置Giemsa染液中染色10min ，蒸馏水冲洗后 晾干，酒精灯上过火脱水，以二甲苯透明(1-2min)， 树胶封片。
[观察与结果]
高倍镜下可见许多染成蓝色的细胞核， 细胞质不着色或不明显。选择核较大， 染色清晰，轮廓完整，核质呈均匀细网 状的细胞进行观察。找到核膜内侧缘有 蓝色浓染小体的细胞核后，换油镜进一 步观察。油镜下X染色质为蓝色平凸形、 三角形、扁平形的浓染小体。
[实验用品]
(1)器材：显微镜、载玻片、牙签。
(2)试剂 ：Giemsa染液、0.2％甲苯胺蓝 染液 、5mol/L HCl溶液 、95％乙醇、 pH 6.8 PBS
(3)材料：人口腔黏膜上皮细胞。
[方法与步骤]
（一） Giemsபைடு நூலகம்染色法 (1)取材制片：先让受检者用水漱口数次，然后用牙签
实验一 X染色质标本制备与观察
[目的要求]
（1）掌握X染色质标本制备方法及其原理。 （2）掌握X染色质的形态特征及其临床意义。
[实验原理]
一个个体不论其细胞中有几条X染色体，均只 有一条具有转录活性，其余的X染色体均失活 形成异固缩的X染色质。正常女性间期细胞核 中X染色质阳性率一般约为10％一30％，有的 可高达50％以上。其出现率的高低与个体不同 生理状态、染色方法、染色技术以及X染色体 在细胞核中的位置不同有关。在男性间期细胞 核中则平均低于1％。一般检查X染色质确定性 别时，观察200个细胞，X染色质出现5％以上 者为女性。现在，X染色质检查已广泛应用于 临床，作为性别测定和性染色体数目异常的一 种辅助诊断方法。
[注意事项]
(1)取材前要漱口，以免口腔中的杂质影 响观察效果。
(2)HCl水解要充分，使X染色质易于显 现。
(3)临床检查时要选择形态好的细胞观察， 计算100个细胞中X染色质出现的频率。
[作业]
书写实验报告，绘制X染色质图。
[思考题]
1．间期核内出现X染色质有何生理意义? 2．X染色质检测有何临床用途?
(2)固定：将带有标本的载玻片置入装有新配置的甲醇冰醋酸固定液（3：1）的染色缸中固定10min后取出， 空气干燥。
(3)水解：玻片标本置于5mol/L HCl中，室温水解20 min。用新鲜蒸馏水冲洗四次，充分洗去残留的HCl。
(4)染色：置Giemsa染液中染色10min ，蒸馏水冲洗后 晾干，酒精灯上过火脱水，以二甲苯透明(1-2min)， 树胶封片。
[观察与结果]
高倍镜下可见许多染成蓝色的细胞核， 细胞质不着色或不明显。选择核较大， 染色清晰，轮廓完整，核质呈均匀细网 状的细胞进行观察。找到核膜内侧缘有 蓝色浓染小体的细胞核后，换油镜进一 步观察。油镜下X染色质为蓝色平凸形、 三角形、扁平形的浓染小体。
[实验用品]
(1)器材：显微镜、载玻片、牙签。
(2)试剂 ：Giemsa染液、0.2％甲苯胺蓝 染液 、5mol/L HCl溶液 、95％乙醇、 pH 6.8 PBS
(3)材料：人口腔黏膜上皮细胞。
[方法与步骤]
（一） Giemsபைடு நூலகம்染色法 (1)取材制片：先让受检者用水漱口数次，然后用牙签
实验一 X染色质标本制备与观察
[目的要求]
（1）掌握X染色质标本制备方法及其原理。 （2）掌握X染色质的形态特征及其临床意义。
[实验原理]
一个个体不论其细胞中有几条X染色体，均只 有一条具有转录活性，其余的X染色体均失活 形成异固缩的X染色质。正常女性间期细胞核 中X染色质阳性率一般约为10％一30％，有的 可高达50％以上。其出现率的高低与个体不同 生理状态、染色方法、染色技术以及X染色体 在细胞核中的位置不同有关。在男性间期细胞 核中则平均低于1％。一般检查X染色质确定性 别时，观察200个细胞，X染色质出现5％以上 者为女性。现在，X染色质检查已广泛应用于 临床，作为性别测定和性染色体数目异常的一 种辅助诊断方法。
[注意事项]
(1)取材前要漱口，以免口腔中的杂质影 响观察效果。
(2)HCl水解要充分，使X染色质易于显 现。
(3)临床检查时要选择形态好的细胞观察， 计算100个细胞中X染色质出现的频率。
[作业]
书写实验报告，绘制X染色质图。
[思考题]
1．间期核内出现X染色质有何生理意义? 2．X染色质检测有何临床用途?