三苯甲烷染料降解脱色菌的研究
一株高效广谱染料降解细菌的分离鉴定及脱色特性研究[1]
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中国生物工程杂志 China B i otechnol ogy,2010,30(6):70Ο76一株高效广谱染料降解细菌的分离鉴定及脱色特性研究3司美茹1,233 苏 涛1 杨 革1,2(1曲阜师范大学生命科学学院 曲阜 273165)(2山东大学微生物技术国家重点实验室 济南 250000)摘要 通过梯度驯化,从印染废水长期污染土壤中分离筛选出能以4种不同结构类型的染料(刚果红、美蓝、孔雀绿和活性艳蓝K N 2R )为唯一碳源的菌株X S MR ,根据其形态学特征和生理生化鉴定及16S r DNA 序列分析,初步鉴定为无色杆菌属(A chro m obacter s p.)的菌株。
菌株X S MR 对4种染料均具有强的脱色降解能力,且对染料脱色的同时,自身能够生长繁殖,培养24h 菌体干重超过不加染料的对照。
在振荡培养条件下对该菌株的脱色反应条件进行研究,结果表明,当刚果红、美蓝、孔雀绿及活性艳蓝K N 2R 的初始浓度分别小于200mg/L 、200mg/L 、150mg/L 及150mg/L 时,在pH7.5、温度35℃、接种量4%(V /V )条件下,接种菌株X S MR 脱色14h 对4种染料的脱色率均可达到98%以上。
通过对降解产物的紫外2可见光谱分析,进一步证明了菌株X S MR 能彻底降解染料。
菌株X S MR 对染料脱色的机理包括生物降解和菌株吸附两方面。
关键词 筛选 染料 生物降解 无色杆菌属 脱色中图分类号 Q932331收稿日期:2010201205 修回日期:20102042133微生物技术国家重点实验室开放基金项目33电子信箱:si m eiru1016@ 随着染料和印染工业的迅猛发展,染料的种类和数量不断增加。
在染料生产和使用过程中,大约有10%～20%的染料随着废水排放出去,对环境造成严重的污染[1]。
染料从结构上可分为偶氮、蒽醌、杂环、三苯甲烷等,多是难以降解的芳香族化合物[2]。
孔雀石绿降解方法的研究进展
养殖与饲料2017年第8期图1孔雀石绿、无色孔雀石绿及其脱甲基衍生物的结构式摘要孔雀石绿（C 23H 25N 2Cl ，Malachite Green ，MG ）是一种三苯甲烷类化工染料，因其外观颜色呈孔雀绿而得名，在动物体内，孔雀石绿通过生物转化成无色孔雀石绿蓄积于动物组织中。
自1933年起孔雀石绿开始作为驱虫剂、杀菌剂、防腐剂等在水产养殖中出现，而后因为具有价格低廉、效果显著等优点，被广泛应用于预防与治疗各类水产动物的水霉病和对原虫的控制，但随着研究的深入，孔雀石绿潜在的具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变等毒副作用受到关注。
因此，对于如何清除水体中孔雀石绿残留以及改善水环境污染的研究显得极其重要，本文将阐述国内外对于孔雀石绿降解方法的研究进展。
关键词孔雀石绿；降解方法；研究进展孔雀石绿降解方法的研究进展赵桐桐1，2李文悦1，3李继丰1张建雄1周鑫1*1.河北省唐山市畜牧水产品质量监测中心，河北唐山063000；2.河北北方学院，河北张家口075000；3.天津师范大学生命科学学院，天津300387收稿日期：2017-05-04*通讯作者赵桐桐，女，1995年生。
1孔雀石绿的化学性质孔雀石绿（C 23H 25N 2Cl ，Malachite Green ，MG ）是一种三苯甲烷类化工染料，又称碱性绿、盐基块绿、孔雀绿，是一类具有较强杀菌能力的染料类药物[1]。
它是一分子苯甲醛与两分子二甲基苯胺在浓硫酸或氯化锌存在的条件下聚合而形成的深绿色晶体，因其外观颜色呈孔雀绿而得名。
分子式为C 23H 25N 2Cl ，相对分子质量为365，易溶于水和乙醇。
孔雀石绿多以草酸盐（malachite green oxalate ，C 23H 25N 2+HC 2O 4-）形式制备并在市面上出售，盐酸盐（malachite green chloride ，C 23H 25N 2+Cl -）比较少见。
图1列出了孔雀石绿、无色孔雀石绿及一系列脱甲基衍生物的结构式[2]。
绿脓假单胞菌对三苯甲烷染料的脱色机理初探
［ 词】 关键 绿脓假单 胞菌 ；三苯 甲烷染料 ；脱色机理
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三苯甲烷类染料的脱色研究及其应用的开题报告
三苯甲烷类染料的脱色研究及其应用的开题报告一、研究背景染料是一类广泛应用于纺织、皮革、制药等行业的重要有机化学品。
随着环保意识的增强和环境法规的加强，对染料的可持续性、降解性以及对环境影响等问题越来越受到重视。
因此，寻找一种有效的染料脱色方法已成为当前研究的热点之一。
三苯甲烷类染料是一类常用的有机染料，具有鲜艳的色泽和良好的耐光、耐水等性能，在许多领域有着广泛的应用。
但是，由于它们的分子结构比较复杂，且分子量较大，导致它们在自然环境中具有较高的生物毒性，并且难以被常规的污水处理方法有效去除。
因此，研究三苯甲烷类染料的脱色机理及其应用具有重要的实际意义和应用前景。
二、研究目的本课题旨在研究三苯甲烷类染料的脱色机理及其应用，探究有效的染料脱色方法，以实现对染料废水的治理和环境保护。
三、研究内容1. 三苯甲烷类染料的性质及相关研究进展综述三苯甲烷类染料的性质及其在纺织、皮革等行业的应用情况，分析其生物毒性和环境影响等问题，并介绍其脱色技术的研究现状和进展。
2. 三苯甲烷类染料的脱色机理研究通过实验分析三苯甲烷类染料在不同条件下的脱色效果，探究不同条件下脱色机理的差异，以及不同处理方法对染料的降解效果。
3. 有效的三苯甲烷类染料脱色方法研究借助多种技术手段，如电化学、光催化等手段，探究有效的三苯甲烷类染料脱色方法，研究不同条件下的处理效果，为实现染料废水的有效治理提供技术支持。
四、研究意义本课题的研究结果对于解决染料废水治理方面的难题，促进环境保护，推进可持续发展具有较大的意义。
此外，研究三苯甲烷类染料的脱色机理及其应用，也为其他类似物质的治理提供了有益的借鉴。
罗丹明b
摘要罗丹明B 是一种碱性染料，曾被大量用作食品添加剂，后因实验证明其致癌性，被禁用于食品行业。
但罗丹明B 仍被广泛运用于造纸业、纺织印染业、皮革制造业、有色玻璃着色、细胞荧光染色剂制造及烟花爆竹制造等行业。
这些行业产生出大量的罗丹明B 染料废水，如若没有妥善处理，会给人类健康及生态环境造成极大伤害。
因而，寻求一种高效、经济的以罗丹明B 为代表的染料废水的处理方法显得非常重要。
摘要Abstract目录第1 章前言 (1)1.1 研究背景 (1)1.1.1 三苯甲烷类染料废水危害 (1)1.1.2 罗丹明B (1)1.1.3 三苯甲烷类染料废水处理国内外研究现状 (2)1.2 半导体光催化氧化技术概述 (4)1.2.1 光催化原理 (4)1.2.2 半导体光催化研究现状 (5)材料国内外研究现状 (6)1.3.1 g-C概述 (6)的制备方法 (7)1.3.3 应用 (9)1.3.4 影响材料光催化活性的因素 (9)1.4 课题的提出及研究意义 (10)1.5 研究内容与技术路线 (11)1.5.1 研究内容 (11)1.5.2 研究技术路线.罗丹明B 是一种碱性染料，是一种较典型的三苯甲烷类染料，其总体电荷为正电荷，分子式为C23H31ClN2O3，分子量为479.029。
罗丹明B 在水中能溶解0.78%，在乙醇中能溶解1.47%，最大吸收波长为552 nm。
曾被大量用作食品添加剂，后因实验证明其致癌性，被禁用于食品行业。
罗丹明B 被广泛运用于许多行业，如：造纸工业印染有光纸、打字纸、蜡光纸等，纺织印染业印染丝绸、麻、腈纶等织物，还有制造业的羽毛制品、麦秆、皮革等的染色。
因为罗丹明 B溶解后会发出强烈荧光，有色玻璃着色、实验室中细胞荧光染色剂制造和烟花爆竹制造行业也会大量用到它。
另外，罗丹明B 还可用作某些金属及食品的分析试剂。
其结构式如图所示：图1-1 罗丹明B 结构式由于其结构相对简单，具有典型的三苯甲烷类染料的结构和特点，以罗丹明B 为目标物进行降解研究，能够给三苯甲烷染料废水处理领域今后的研究提供很强的参考价值。
孔雀石绿脱色研究
孔雀石绿脱色研究1 引言合成染料广泛应用于印染、制皮、化妆品、印刷、医药和食品加工等行业，然而，这些染料大多数都具有生物毒性和致畸致癌性，而且在自然环境中极难生物降解，对光、生物酶和其他环境条件的抵抗力极强.孔雀石绿作为一种三苯甲烷类染料，广泛应用于水产养殖业、食品加工业、医药行业等各个领域中.随其广泛使用，该染料对哺乳动物细胞、水生生物和其他有机生命体的致癌致畸效应也凸现出来，引起了科学界的广泛关注.因此，在许多国家和地区，该染料已被立法严禁使用，且被美国食品和药物管理局列为致癌性测试的优先化学物质之一.然而，由于孔雀石绿的生产成本较低、稳定性强且使用效果较好，难以找到合适的替代物，导致很多地区仍在广泛使用该染料，严重破坏了使用地区的生态平衡尽管许多科学工作者已致力于解决由孔雀石绿造成的环境污染问题，例如应用吸附、化学沉淀、光降解、渗透和膜过滤等理化处理技术处理污染水源;然而，由于这些处理方法不仅处理费用高、效率不高，而且在治污的同时容易产生二次污染和难以处置的底泥，因此，极大地限制了其广泛推广使用.生物处理技术作为一种环境友好型且高效低耗的处理手段受到越来越广泛的关注.其中，细菌由于生长速度快，容易获得大量生物量，且易产生大量降解相关酶，对染料的降解效率也较高等优势而受到环境工作者的青睐.本研究的目的在于：①广泛筛选浙南地区的MG高效脱色菌株;②初步鉴定MG高效脱色菌株为DH-9;③采用单因素实验研究菌株DH-9对MG的脱色特性，并采用响应面设计优化脱色条件.2 材料与方法2.1 实验材料 2.1.1 菌种来源供试土样取自浙江温州双屿皮革城和温州大罗山果园，菌株DH-9来源于常年被皮革废水污染的污泥中.2.1.2 试剂孔雀石绿属于三苯甲烷类染料，购自国药集团化学试剂有限公司;革兰氏染色液;TE缓冲液;Tris饱和酚(pH 8.0);氯仿;10×PCR缓冲液、DNA 连接酶、dNTPs和Taq DNA 聚合酶(TaKaRa 公司);DNA 纯化试剂盒(上海生工生物工程有限公司)等.其它生化试剂均为国产分析纯.2.1.3 培养基无机盐培养基(MSM)组成(g · L-1)：Na2HPO4，15.13;KH2PO4，3.0;NaCl，0.5;NH4Cl，1.0;MgSO4 · 7H2O，0.491;CaCl2 · 2H2O，0.026;pH 7.0.LB培养基组成(g · L-1)：蛋白胨，10;酵母膏，5;NaCl，10;pH 7.0~7.2.纯化培养基组成(g · L-1)：在MSM培养基中添加终浓度为200 mg · L-1的MG染料.2.2 实验仪器超净工作台;电热恒温鼓风干燥箱;高压蒸汽灭菌锅;全温恒温摇床;电子天平;pH计;高速冷冻离心机;Evolution 260紫外可见光分光光度计;Bio-rad PCR仪、自动凝胶图像分析仪及水平电泳仪等.2.3 实验方法 2.3.1 MG高效脱色菌株的富集、分离和纯化方法将1.0 g土样接入已灭菌的含100 mL MSM培养基的三角瓶中，同时在MSM培养基中添加已过滤除菌的MG母液作为唯一碳源，使其终浓度为20 mg · L-1.将三角瓶置于30 ℃、180r · min-1摇床中振荡培养1周后，吸取1 mL培养液转接至新鲜培养基(含40 mg · L-1的染料)中，连续驯化、富集.转接多次后，培养物可耐受的染料终浓度为200 mg · L-1.用接种环蘸取少许富集培养液，在纯化培养基平板上直接划线分离.在平板上选择不同形态特征的单菌落，重新转接至含200 mg · L-1 MG的纯化培养基平板上，转接多次直至获得单一形态的MG脱色菌纯培养物.2.3.2 菌株16S rRNA基因的PCR扩增与序列分析(1)提取基因组DNA：采用酚-氯仿法抽提基因组DNA，具体步骤参考《分子克隆实验指南》.(2)16S rRNA基因PCR反应：用于菌株DH-9 16S rRNA基因PCR反应的引物为一对通用引物，正向引物BSF8/20：5′-AGAGT TTGAT CCTGG CTCAG-3′;反向引物BSR1541/20：5′-AAGGA GGTGA TCCAG CCGCA-3，PCR产物的纯化和测序由上海生工生物工程有限责任公司完成.所得序列用BLAST 程序与GenBank数据库(/blast)中的菌株进行比对，选取一些具有代表性的菌株用于系统发生树的构建.采用软件CLUSTAL X 1.8.3进行DNA序列同源性比较.比对结果用MEGA 4.1软件中的Neighbor-Joining的距离模进行UPGA分析后生成系统发育树.2.3.3 菌株DH-9对MG的脱色特性研究(1)培养基起始pH值对MG脱色的影响：用1.0 mol · L-1的HCl或NaOH将2.0 g · L-1酵母粉溶液的初始pH值分别调整到2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0和10.0.灭菌后添加过滤除菌的MG，使MG终浓度为100 mg · L-1，接种等量菌株DH-9过夜培养物(2%，V：V)，并于30 ℃、180 r · min-1条件下振荡培养.(2)培养温度对MG脱色的影响：分别设定培养温度为15、20、25、30、35和40 ℃.在2.0g · L-1的酵母粉溶液(pH 7.0)中添加过滤除菌的终浓度为100 mg · L-1的MG，接种等量菌株DH-9过夜培养物(2%，V∶V)，并于180 r · min-1条件下振荡培养.(3)接种量对MG脱色的影响：在2.0 g · L-1的酵母粉溶液(pH 7.0)中添加过滤除菌的终浓度为100 mg · L-1的MG，分别接种1%、3%、5%、7%、9%、11%、13%和15%(V：V)的菌株DH-9过夜培养物，并于30 ℃、180 r · min-1条件下振荡培养.(4)碳氮源对染料脱色的影响实验：将所选碳源(葡萄糖、麦芽糖、乳糖、D-半乳糖、D-果糖、D-木糖和蔗糖)分别添加至MSM培养基中，使其终浓度为2.0 g · L-1.将所选氮源(NH4Cl、NaNO3、牛肉膏、蛋白胨、酵母粉、甘氨酸和L-谷氨酸)分别添加至无NH4Cl的MSM培养基中，使其终浓度为2.0 g · L-1.灭菌后添加过滤除菌的终浓度为100 mg · L-1的MG，接种等量菌株DH-9过夜培养物(2%，V∶V)，并于30 ℃、180 r · min-1条件下振荡培养(Parshetti et al., 2006; Kalme et al., 2009).(5)金属离子对MG脱色的影响：分别向2.0 g · L-1的酵母粉溶液(pH 7.0)中添加终浓度为1.0和2.0 mmol · L-1的CuCl2、FeCl3、CaCl2、ZnCl2、MgCl2和MnCl2，灭菌后添加过滤除菌的终浓度为100 mg · L-1的MG，接种等量菌株DH-9过夜培养物(2%，V：V)，并于30 ℃、180 r · min-1条件下振荡培养(Parshetti et al., 2006; Kalme et al., 2009).所有实验均重复3次以上，并同时设置对照实验.2.3.4 响应面设计优化菌株DH-9对MG的脱色条件在单因素实验的基础上，采用中心组合试验设计(Central Composite Design，CCD)对MG脱色条件进行优化，培养8 h后测定其脱色率.用标准多项式回归方法，对CCD设计实验数据进行拟合，得到一个二次多项式：式(1)中，Y为预测目标函数;β0为常数;βi为线性系数;βii为平方系数;βij为交互作用系数.本实验采用五因素三水平CCD设计来研究操作参数对MG脱色的影响，具体设计如表 1所示.2.4 数据统计分析CCD实验设计数据采用Minitab 14.0软件进行统计分析.3 结果与分析 3.1 MG高效脱色菌株的筛选与鉴定经多次富集、纯化培养后，获得了多株对MG有一定脱色能力的菌株，其中菌株DH-9对MG 的脱色效果最好，同时，全波长扫描结果显示脱色后有新的吸收峰产生(数据未给出)，加之脱色后菌体沉淀呈现无色，推测该菌株对MG的脱色可能是由生物降解引起的.因此，随后着重对菌株DH-9进行了鉴定.革兰氏染色结果显示菌株DH-9是革兰氏阴性菌，短杆状.菌落呈现圆形，乳白色，半透明，表面光滑湿润.以菌株DH-9基因组为模板，用引物BSF8/20和BSR1541/20进行PCR扩增，检测PCR产物、回收、纯化后测序，获得1475 nt的DH-9菌株的16S rRNA基因片段，在GenBank中的登录序号为KC736654.该序列经与GenBank中的数据比对后发现，其相似度与Enterobacter aerogenes strain ATCC 13048的相似度达到98%以上，并且在系统进化树中也与该菌株聚类在一起(图未给出)，表明菌株DH-9属于肠杆菌属.3.2 菌株DH-9对MG的脱色特性 3.2.1 pH值和温度对MG脱色的影响培养基初始pH值对MG脱色影响的结果如图 1a所示.培养12 h时，pH值在4.0~9.0之间的MG培养基脱色率在90%以上.培养24 h以后，pH值在3.0~9.0之间的MG培养基脱色率均在90%以上，说明该菌株对MG脱色的pH适应性较强，实际应用潜力较大.图 1图 1 pH(a)和温度(b)对MG脱色的影响温度对MG脱色的影响结果如图 1b所示.由图可知，培养12 h时，温度为30~40 ℃间的MG 脱色率在90%以上.随着脱色时间的延长，当培养时间超过24 h后，所测温度范围内(15~40 ℃)的MG脱色率均超过90%，表明该菌株对MG脱色的最适温度范围为30~40 ℃，温度适应性较好.碳氮源对MG脱色的影响如图 2a、图 2b所示.实验结果表明，培养48 h以内时，多数所测试碳源对MG脱色有抑制效应或无显著影响;而当培养时间超过72 h后，多数所测试碳源对MG脱色有促进作用，其中以乳糖、半乳糖和果糖促进效果最为显著，总体而言，所测试碳源中以半乳糖对MG脱色的促进效果最好.与碳源相比，多数所测试氮源对MG脱色的促进效果优于碳源，实验中所测试的氮源均能显著促进MG脱色.有机氮源(牛肉膏、蛋白胨、酵母粉、甘氨酸和谷氨酸)比无机氮源(NH4Cl和NaNO3)的促进效果要好，其中尤以酵母粉、谷氨酸和甘氨酸的促进效果最好.图 2图 2 碳(a)、氮(b)源和金属离子(c)对MG脱色的影响 (1.1.0 mmol · L-1氯化铜; 2.2.0 mmol · L-1氯化铜; 3.1.0 mmol · L-1氯化铁; 4.2.0 mmo · L-1氯化铁; 5.1.0 mmol · L-1氯化钙; 6.2.0 mmol · L-1氯化钙; 7.1.0 mmol · L-1氯化锌; 8.2.0 mmol · L-1氯化锌;9.1.0 mmol · L-1氯化镁; 10.2.0 mmol · L-1氯化镁; 11.1.0 mmol · L-1氯化锰; 12.1.0 mmol · L-1氯化锰) Fig. 2 The effect of carbon(a)，nitrogen(b)resources and metal ions(c)on MG decolorization(1.1.0 mmol · L-1 CuCl2; 2.2.0 mmol · L-1 CuCl2; 3.1.0 mmol · L-1 FeCl3; 4.2.0 mmol · L-1 FeCl3; 5.1.0 mmol · L-1 CaCl2; 6.2.0 mmol · L-1 CaCl2; 7.1.0 mmol · L-1 ZnCl2; 8.2.0 mmol · L-1 ZnCl2; 9.1.0 mmol · L-1 MgCl2; 10.2.0 mmol · L-1 MgCl2; 11.1.0 mmol · L-1 MnCl2; 12.1.0 mmol · L-1MnCl2) 金属离子对MG脱色的影响如图 2c所示.由图可知，大多数所测试金属离子对MG脱色没有显著效应，仅Cu2+和Fe3+对MG脱色有显著抑制效应，钙离子对脱色有微弱促进效应.3.2.3 接种量对MG脱色的影响接种量对MG脱色的影响结果如图 3所示.当接种量从1%上升至3%时，MG脱色率上升趋势显著;而当接种量继续增大时，MG脱色率变化趋势则趋于平稳，均维持在90%以上.图 3图 3 接种量对MG脱色的影响3.3 菌株DH-9对MG的最优脱色条件 3.3.1 回归方程和预测模型的构建采用CCD设计优化MG的脱色条件和研究主效应因子间的交互作用，实验结果和模型预测结果如表 1所示.实验所得培养8 h后的孔雀石绿的脱色率分布在78.0%~99.2%之间，说明主效应因子对MG脱色影响显著.MG脱色率的实验值和预测值基本保持一致，说明所获得模型精确性较高.所获得模型的回归系数和统计学分析(ANOVA)结果如表 2和表 3所示.结果显示，模型的决定系数R2和校正决定系数(adjusted R2)分别为99.7%和99.2%，这就说明该模型精确性较高，可以用于MG脱色率的预测.因此，适于预测MG脱色率的二次模型公式可表示如下：式(2)中，DP是MG的脱色率，A到D是CCD设计的5个自变量，分别为pH、温度、半乳糖、酵母粉和氯化钙浓度.回归分析的F值和p值分别为201.26和<0.001，这说明该模型的显著性较高.线性和交互作用选项的p值也<0.001，这说明线性选项和交互作用选项AC、AD、AE、BC、BD、BE、CD、CE、DE对MG脱色的影响显著.此外，“lack of Fit”选项的F值和p值分别为4.57和0.058，说明相对于纯误差“lack of Fit”不显著，进而说明该模型与响应值(MG的脱色率)的拟合效果较好.3.3.2 主效应因子间的相互作用用Minitab 14.0软件分析获得的因素间交互作用的2D图如图 4～6所示.图 4显示了pH 和半乳糖、酵母粉、氯化钙浓度之间的交互作用及其对脱色的联合影响，结果表明pH和这3种因素之间的交互作用显著.如图所示，随着pH值逐渐升高，脱色率随半乳糖和酵母粉浓度的升高而逐渐降低，但其随氯化钙浓度的升高则呈现出先升高再降低的趋势.图 4图 4 pH和半乳糖(a)、酵母粉(b)、氯化钙(c)浓度对MG脱色的影响图 5显示了温度和半乳糖、酵母粉、氯化钙浓度之间的交互作用及其对脱色的联合影响，结果表明温度和这3种因素之间的交互作用显著.由图可知，随着温度逐渐升高，脱色率随半乳糖和酵母粉浓度的升高而逐渐降低，但其随氯化钙浓度的升高则呈现出先降低再升高的趋势.图 5图 5 温度和半乳糖(a)、酵母粉(b)、氯化钙(c)浓度对MG脱色的影响图 6显示了半乳糖浓度和酵母粉、氯化钙浓度之间以及酵母粉浓度和氯化钙浓度之间的显著的交互作用及其对脱色的联合影响.图 6a和6b表明随着半乳糖浓度的逐渐升高，脱色率随酵母粉和氯化钙浓度的升高而呈现降低趋势.由图 6c可知，随着酵母粉浓度的逐渐升高，脱色率随氯化钙浓度的升高也呈现降低趋势.图 6图 6 半乳糖和酵母粉(a)、氯化钙(b)及酵母粉和氯化钙(c)浓度对MG脱色的影响3.3.3 预测模型的验证为了确定CCD实验所获得二次模型的精确性，我们进行了验证实验.由软件分析获得的最优操作参数如下：pH值为6.0，半乳糖、酵母粉和氯化钙浓度分别为1.0 g · L-1、1.0 g · L-1和3.0 mmol · L-1，培养温度为34.5 ℃.在此条件下进行的验证实验结果表明孔雀石绿的最高脱色率为99.4%，在置信范围(100%±1%)区间内，因此，该模型对响应值的拟合效应较好.具体参见污水宝商城资料或更多相关技术文档。
木质层孔菌对不同染料脱色降解的研究
目前我 国有 些地 方 的环 境 遭 到严 重 污 染 ， 各 在 种污染 物 中 ， 自染料 工 业 和 印染 行业 的染 料 废 水 来 是最难 处理 的工 业 废 水 之 一 ， 此 人 们 从 ２ 为 ０世 纪 ７ ０年代末期 以来 采 用 了 白腐 真 菌 技 术 在 好 氧 条 件 下对 Ｔ Ｔ（ Ｎ 三硝 基 甲苯 ） 水 、 纸 废水 和 偶 氮染 料 废 造 进行 生物脱 色及 降 解 的研 究 ， 得 了降 解 与矿 化 效 获
ｔ ｅ ｂ ｓ ｅ ｅ ａｕｒ ｓ３ ｃ ａ ｄ ｔ ｅ ｏｏ ｉｉ ａｅ ｗａ ｒ ｈａ ｈ ｅ ｔｔ ｍｐ ｒ ｔ ｅｗａ ５ ｏ ｎ ｈｅ ｄ ｃ ｌｒｚｎｇｒ ｔ ｓ ｍｏ ｅ ｔ ｎ７５％ ｉ ｕｒ． ｎ ３２ ｈｏ ｓ Ｋｅ ｒ ｙ ｗｏ ｄｓ：Ｆｏ ｓｌ ｏ￥ ｓ；ｄ ｅ ｍｅ ｉ ｏｕ ｇｒ ｙ ｓ；ｄｅ ｏ ｏ ｉａ ｉｎ ａ ｇ ａ ｔｏ ｃ ｌ ｒｚ ｔｏ ｎｄ ｄｅ ｒ ｄａｉｎ
的刚果红 、 醌亚胺类 中的结 晶紫和三苯 甲烷类 中的中性红 的脱 色作用进行 了研究 。结果表 明：木质层孔 菌对各种染
料均有降解作用 ， 而对 醌亚 胺类 染料 结 晶紫 的脱色 率最 高为 ５ ．７ （２ｈ ， 佳添 加时 问为第 ４ｄ 最 佳 温 度为 ５ ２ ％ １ ） 最 ，
３ ５℃ ， 色 时 间 在 ３ 脱 ２ｈ时脱 色 率 达 到 ７％ 以 上 。 ５
Ａ ｓｒｃ： ｎｏｄｒｏｓ ｄ ｈ ｅｒｔｕ ｇ ｏ ｏ ｓｉｎｓｓ ｅｏｏｒ ａｏ ｙｓ（ｎｉ ｅｉ ｎ ｒｇｎ ｔｒｅ ｅｚｎ ｅｈ ｂ ｔ ｔ Ｉ ｒｅ ｕｙｗ ｉ — ｎｉ ｆ ｍｅ ｌ ｏｕ ｃｌｕｉ ｔ ｎｔ ｄｅ ａｔｈ ｓ ｉｏｅ ， ｅ ｎｅｅｍ ｔ— ａ ｔ ｔ ｔ ｏｆ Ｆ ｇ ｄ ｚｉ ｏ ｔ ｓ ｔ ｈ ｂ
Trametes_hirsuta_漆酶的分离纯化及其对活性染料脱色研究
山东农业大学学报(自然科学版),2024,55(1):076-083Journal of Shandong Agricultural University ( Natural Science Edition )VOL.55 NO.1 2024 doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2024.01.011Trametes hirsuta漆酶的分离纯化及其对活性染料脱色研究刘飞，李治宏，张仕豪，刘璇，郑晓晴，焦若若，朱友双*济宁医学院生物科学学院，山东日照 276800摘要：漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，在生物检测、工业染料脱色、有机农药降解、纸浆漂白及食品饮料等领域具有广泛的应用价值。
本研究使用实验室自主筛选鉴定的漆酶高产菌株粗毛栓菌（Trametes hirsuta），液态发酵后，培养液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose FF 阴离子交换层析分离纯化，酶活总得率57.2%，纯化倍数6.0倍，比活力为758.5 U/mg，漆酶的分子量约为50 kDa。
利用粗毛栓菌粗酶液分别对结晶紫、溴酚蓝、孔雀石绿、詹姆斯绿B进行脱色，同时研究了染料浓度、脱色温度、pH和NaCl对溴酚蓝和孔雀石绿脱色率的影响。
结果表明，溴酚蓝和孔雀石绿浓度分别为40 mg/L 和50 mg/L时脱色率较高；在脱色温度为50 ℃时，漆酶对溴酚蓝和孔雀石绿的脱色率较高，最高脱色率分别为68.51%和83.06%；溴酚蓝在pH 3.5时脱色率最高达到72.61%，而孔雀石绿的脱色率在pH 4.5时最高达到83.49%；NaCl对Trametes hirsuta漆酶催化染料脱色有一定的抑制作用。
本研究表明Trametes hirsuta漆酶在染料脱色中具有较大的应用前景，在工业废水的处理中具有良好的应用潜力。
关键词：粗毛栓菌；漆酶；分离纯化；染料脱色中图法分类号：Q939.5文献标识码： A文章编号：1000-2324（2024）01-0076-08 Isolation and Purification of Laccase from Trametes hirsuta and Its Application in Reactive Dye DecolorizationLIU Fei, LI Zhi-hong, ZHANG Shi-hao, LIU Xuan, ZHENG Xiao-qing,JIAO Ruo-ruo, ZHU You-shuang*School of Biological Science/Jining Medical University, Rizhao 276800, ChinaAbstract: Laccase is a copper-containing polyphenol oxidase with a wide range of application, including bio-detection, industrial dye decolorization, organic pesticide degradation, pulp bleaching, and the food and beverage industries. We utilized a high-yield laccase strain of Tramete hirsuta identified in the laboratory. The laccase was separated and purified through ammonium sulfate precipitation and DEAE Sepharose FF anion exchange chromatography. The enzyme activity yield was 57.2%, with a purification fold of 6.0 and a specific activity of 758.5 U/mg. The molecular weight of laccase was about 50 kDa. The crude enzyme solution from Tramete hirsuta was used to decolorize crystal violet, bromophenol blue, malachite green, and Janus green B. The effects of dye concentration, temperature, pH and NaCl on the decolorization rate of bromophenol blue and malachite green were also investigated. The decolorization rates were higher when the dye concentration was 40 mg/L for bromophenol blue and 50 mg/L for malachite green. The decolorization rates of laccase on bromophenol blue and malachite green were 68.51% and 83.06%, respectively, at the temperature of 50℃. Bromophenol blue exhibited the highest decolorization rate of 72.61% at pH 3.5, while malachite green showed the highest decolorization rate of 83.49% at pH 4.5. NaCl had an inhibitory effect on the dye decolorization catalyzed by Trametes hirsuta laccase. Our study showed Trametes hirsuta laccase has a great application potential in dye decolorization and industrial wastewater treatment.Keywords: Trametes hirsuta; laccase; isolation and purification; dye decolorization漆酶是一种古老的含铜多酚氧化还原酶，最早发现于日本漆树中(Rhusvernicifera)[1]，属于铜蓝氧化酶。
卜公茶皂素在亚麻及混纺织物前处理中的应用研究
传 统 的亚麻 ／ 亚麻和棉／ 黏／ 亚麻 的前处理 ，一般
采 用 ：烧毛 一 退浆 一碱 苛化 一碱 煮练 一酸 处理 一氯
漂 一氧 漂 ，采用 氯氧 双漂 ，利 用 次氯酸 钠对 木质 素
的氯化 性 能 ，把 亚麻 的麻 皮较 好地 去 除 ，但 工艺 比 较 复 杂且不 稳 定 。次氯 酸钠漂 液 的浓度 掌握 是 比较
比较 稳 定 安 全 ，操 作 也 较 简 单 ，针 对 不 同质 量 的 织 物处 方 的变化 不大 ，除 ｂ 茶皂素 用量 进行 增减 公
外 ，其它 的工艺 不须变 动即可。
在消耗方面碱降低了５９ ０ 能耗 ，工序减少 了两道 ， ６
相关助剂也有所减少 ，水和电的消耗也 明显减少。
本 ），具体见表２ ；
表 ２ 两种 工 艺 能耗 指 标 对 比 ：
项目
用碱 量 用 氯 量 用 水 量 产 品 环 染 工序 ／ （ ｇ Ｌ ／ ｇ Ｌ （／ ） 质 量 现 象 ／ ） （／ ） ｔ ｈ
由上 表 得知 ， 卜 公茶 皂素 工 艺 比原工 艺少 了一
组 氯漂 工序 ，少 了一道 除氯 工序 ，生 产 的产 品质量
（ ０ ８ ℃ ）一 热 水 洗 （ ０ ９ ℃ ）一 浸 轧 煮 练 液 ７￣ ０ ９￣ ５ （ ａ Ｈ ０ ／ ，亚 硫 酸 钠 ６ ／ ，络 合 ￣ ／ ， 渗 透 Ｎ ０ ５ ｇ Ｌ ｇＬ Ｊ ｌＬ
由上 表 得知 ， 卜 公茶 皂 素工 艺产 品质量 有 明显 提 高 ，染色 的透 芯度 、织物 的 强力 、 白度 、表 面麻
一
５ 结论分析
（）卜 １ 公茶 皂素可替 代烧碱 、双氧水及 其它化 学 药 品，织 物经 ｂ 茶皂素 处 理 ，白度和 毛效 均较 公
白腐菌在环境污染治理方面的应用研究概述
白腐菌在环境污染治理方面的应用研究概述作者：方金涛指导老师：夏敏摘要：白腐菌是一种特殊的真菌，通过分泌特殊酶系统能降解多种污染物质、多种人工合成的染料，具有彻底、高效、无专一性的特点，是一种新兴的废水处理技术。
文章就近几年来国内对白腐菌处理环境中存在废水的研究现状进行了综述。
展望了白腐菌在废水处理方面的应用前景。
关键词：白腐菌；污染物质；染料废水0 引言：近年来，环境污染日益严重，其中水污染是重要因素之一，它严重地影响了人们的身体健康和生活质量。
印染行业、造纸行业都是用水大户，随着工业的迅速发展，染料品种和数量不断增加，目前我国产量已达到150000t，位居世界前列，其中约有10%-15%的染料随废水排入环境，对环境造成严重的污染，这也意味着对染料的生产及使用中产生的废水的处理难度加大。
随着人们环境保护意识的增强和国家对环境保护力度的加强，染料污染物排放标准的制定，这使染料废水的排放更加规范化，并对该类废水的处理要求更加严格。
因此有关废水的有效处理及对环境"人体影响研究也得到很多研究者的关注。
1、白腐菌的生物学特征白腐菌属于担子菌纲，腐生在木材或死树桩上，引起木质腐烂，故此得名[1]其菌丝体为多核，少有隔膜，无锁状联合!多核的分生孢子常为异核，但孢子是同核体，存在同宗配合和异宗配合两种交配系统。
它是整个碳素循环的中心，是已知的唯一能在纯系培养中将木质素降解成CO2和H2O的一类微生物[2]白腐菌种类很多，其中典型的有:黄孢原毛平革菌、特罗格粗毛盖菌、变色栓菌等。
目前研究比较深入的是黄孢原毛平革菌。
2、白腐菌对废水的降解机理2.1 白腐菌对染料废水的降解机理白腐菌的降解活动发生在次级代谢过程.在培养基中营养物限制情况下，菌体细胞内会形成一系列酶系。
首先产生H2O2的氧化酶，如胞内的葡萄糖氧化酶和胞外的乙二醛氧化酶。
这些氧化酶在分子氧的参与下，氧化相应底物，而形成H2O2，H2O2激活相应的过氧化物酶，过氧化物酶是反应启动者，先形成高度活性的自由基中间体，然后以链反应方式产生许多不同自由基，促使底物氧化。
细菌染料脱色机理研究进展
１ 染料脱色细菌
自１ ９ ７ ７ 年Ｈ ｏ ｒ ｉ ｔ ｓ ｕ首次分离 出可以降解偶氮染 料的枯草 杆
菌Ｉ Ｆ ０ ３ ０ ０ ２以来 ，不 断有 细菌被发 现可 以有 效 的对染 料进行脱 色（ 见表 １ ） 。
表 １ 可 用 于 降解 染 料 的细 菌
Ｔ ａ ｂ ｌ ｅ １ Ｔ ｈ ｅ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｉ ｒ ａ ｆ ｏ ｒ ｄ ｙ ｅ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
ｔ ｈ ｅ ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ｔ ｒ ｅ ａ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ，ｔ ｈ ｅ ｕ ｓ ｅ ｏ ｆ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｉ ｒ ａ ｆ ｏ ｒ ｄ ｙ ｅ ｄ ｅ ｃ ｏ ｌ ｏ ｒ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｓ ｏ ｎ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｅ ｍｐ ｈ ａ ｓ ｉ ｓ ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｒ ｅ ｍｏ ｖ ｅ ｓ ｃ ｏ ｌ ｏ ｒ ｓ ｂ ｖ
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关 键词 ：细菌；染料；脱色机理
中图分 类号 ：Ｔ Ｑ ６ １ ０ ． ９
文献标 志码 ：Ａ
文章 编号 ：１ ０ ０ １ — ９ ６ ７ ７ （ ２ ０ １ ５ ） ０ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ１ ７ — ０ ０ ０ ４ — ０ ３
Ｄｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐｍ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｄｙ ｅ ｓ Ｄｅ ｃ ｏ ｌ ｏ ｒ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｍｅ ｃ ｈａ ｎｉ ｓ ｍ ｏ ｆ Ｂａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ
三苯甲烷类染料的氧化降解反应研究及其应用
作者签名： 导师签名： 2014 年 月 日
67
万方数据
目 录
中 文 摘 要 .....................................................................................................................I Abstract ......................................................................................................................... III 第一章 绪论 .................................................................................................................... 1 1.1 三苯甲烷染料概述 ............................................................................................ 1 1.1.1 三苯甲烷染料结构分类及其性质 ............................................................ 1 1.1.2 三苯甲烷类染料的应用 ........................................................................... 2 1.2 三苯甲烷类染料废水处理方法研究进展 ......................................................... 4 1.2.1 物理方法................................................................................................... 4 1.2.2 化学方法................................................................................................... 5 1.2.3 生物方法................................................................................................... 7 1.3 三苯甲烷类染料的降解机理研究进展 .............................................................. 7 1.3.1 化学氧化法的降解机理 ............................................................................ 7 1.3.2 生物降解法的降解机理 ......................................................................... 10 1.4 本论文研究意义及内容 .................................................................................. 11 1.4.1 研究意义................................................................................................. 11 1.4.2 研究内容................................................................................................. 12 参考文献........................................................................................................................ 12 第二章 过碳酸钠对四种三苯甲烷染料的降解研究 .................................................... 19 2.1 引言 ................................................................................................................. 19 2.2 实验部分 ......................................................................................................... 20 2.2.1 仪器 ........................................................................................................ 20 2.2.2 试剂 ........................................................................................................ 20 2.2.3 实验步骤................................................................................................. 21 2.3 结果与讨论 ..................................................................................................... 23 2.3.1 过碳酸钠对不同染料的褪色作用 .......................................................... 23 2.3.2 四种模型染料的紫外可见光谱 .............................................................. 25 2.3.3 pH 对降解率的影响 ................................................................................ 25 2.3.4 过碳酸钠用量和反应时间对降解率的影响 ........................................... 26 2.3.5 反应温度对降解率的影响...................................................................... 27
广谱染料脱色细菌的分离鉴定及脱色特性初探
快速拉动了国内染料消费 的增长． 染料工业生产的
各 类染 料 、 光增 白剂 及有 机 颜 料 等 广 泛应 用 于 纺 荧
料的有氧降解有重要的理论价值和实际应用价值．
本试 验 以偶 氮 、 醌 、 环 、 苯 甲烷 不 同结 构 蒽 杂 三 类 型 的 ４种合 成染 料 为筛 选 底 物 ， 印染 厂 排 出 的 从 废 水 中分 离 出多株 对不 同结 构类 型 的染 料具 有脱 色 作 用 的细菌 ． 进一 步对 这些菌 株进 行生 理生化 鉴 定 ，
染 料从 结构 上 可分 为 偶 氮 、 醌 、 环 、 苯 甲 蒽 杂 三 烷等 ， 多是 难 以降 解 的芳 香 族 化合 物 Ｊ 目前 印 染 ． 废 水 的处理 方 法 主 要 有 化 学 混 凝 法 、 化 法 、 附 氧 吸
法、 内电解法、 物絮凝 、 生 生物 吸附等 ， Ｊ 而生 物降
中 图分类 号 ：５８ Ｑ Ｑ３； ７
文献标 识码 ： Ａ
文章编 号 ： ０ — ３ （０２ ０－ ８－ １ １ ３７ ２１ ）２ ０９ ７ ０ ５ ０ － ０
进 入新 世纪后 ， 中国纺织 和 印染等 行业 的发展 ，
生 长 、 以不 同结 构 的染 料 为 唯 一 碳 源 的细 菌 涂料、 油墨等各个领域． 在
发 展经 济便 利生 活 的 同时 也 造成 了环 境 污染 ， 大 其 量 排放 的废水 ， 不仅 Ｃ Ｄ、 Ｏ 盐度 和 酸 度 高 ， 而且 色 度
产电微生物在染料废水生物降解中的应用综述
［3 ］
境， 直接与胞外电子受体接触， 或者通过电子递质（ 人工添加 或微生物自身代谢产生） 的间接作用将电子转移给电子受 进行异化厌氧呼吸的微生物。 目前针对产电微生物的研 体， 究大多集中于微生物燃料电池（ MFC ） 。 研究证实， 染料是可 以通过 MFC 进行电化学还原。 位于阳极室的产电微生物将 然后电子通过外电路转移到阴极， 并在阴极 电子传递到阳极， 。 我们前期研究发现， 室以染料作为电子受体将其还原 MFC 中所富集的产电微生物具有 三苯甲烷、 蒽醌、 金属复合染料等多 种类型的染料都能被产电微生物直接还原降解。 产电微生物对染料的非特异性降解是一种新型的染料降 解机制。目前相关机理研究正在逐步深入。以典型产电微生 阐述产电微生物对染料的非特异性 物 Shewanella 菌为代表， 降解过程， 介绍电子递质以及不同环境因素对染料降解效率 的影响， 为深入开展产电微生物在实际染料废水生物处理中 的应用研究提供理论参考。 1 产电微生物的染料降解机理
桔青霉降解三苯甲烷染料孔雀绿的研究
２ ０１ ３ 年 ４ 月
辽 宁工业 大学学报 （ 自然科 学版）
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｌ ｉ ａ ｏ ｎ ｉ ｎ ｇ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ （ Ｎａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｅ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ）
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２ Ｇｒ ｏ ｕ ｐ Ｃｏ ． Ｊ ｉ ｎ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｅｃ ｏ ｎ ｃ ｍｉ ｃ ｓ ＆Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ Ｄｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｍｅ ｎ ｔ ， Ｊ ｉ ｎ ｚ ｈ ｏ ｕ １ ２１ ０ ０ ０ ， Ｃｈ ｉ ｎ ａ）
染料微生物降解的方法研究进展
染料微生物降解的方法研究进展
卢婧;余志晟;张洪勋
【期刊名称】《工业水处理》
【年(卷),期】2014(034)001
【摘要】染料广泛应用于纺织印染、造纸印刷等行业,其产生的废水严重污染了环境.近年来,利用微生物对染料进行脱色降解的研究报道很多,包括细菌、真菌、藻类等.主要论述了染料微生物降解研究的一系列方法,包括染料降解微生物的获取方法、染料微生物降解机理和代谢途径研究方法和酶学研究方法,为以后运用微生物对染
料废水进行脱色处理和降解研究提供参考和依据.
【总页数】4页(P1-4)
【作者】卢婧;余志晟;张洪勋
【作者单位】中国科学院研究生院资源与环境学院,北京100049;中国科学院研究
生院资源与环境学院,北京100049;中国科学院研究生院资源与环境学院,北京100049
【正文语种】中文
【中图分类】X703.1
【相关文献】
1.微生物降解偶氮染料的研究进展 [J], 卢婧;余志晟;张洪勋
2.偶氮染料微生物降解的研究进展 [J], 刘金齐;刘厚田
3.微生物降解纺织染料研究进展 [J], 吕鹏
4.微生物降解三苯甲烷类染料的研究进展 [J], 宋金龙;穆迎春;阮志勇;李乐;王亚妮;韩刚
5.激活剂促进微生物降解偶氮、蒽醌和三苯甲烷类染料研究进展 [J], 王怡琴;谢学辉;郑秀林;张庆云;许可欣;柳建设
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化工园区综合废水处理技术方法
化工园区综合废水处理技术方法陈萍萍【摘要】化工行业的园区化进程,使得大规模成分复杂、浓度高、毒性强、腐蚀性强、难降解化工园区综合废水处理成为亟待解决的问题.本文从废水水质分类测定、预处理、致毒因子筛选、生化处理等方面阐述了综合废水处理技术.针对目前存在的问题,展望了未来的研究方向.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2014(042)002【总页数】3页(P107-108,133)【关键词】化工园区;综合废水;预处理;致毒因子;物化处理【作者】陈萍萍【作者单位】富阳市环境保护局,浙江富阳311400【正文语种】中文【中图分类】TQ-9在我国新一轮的产业结构调整和生态化、环保型工业化模式的大背景下，我国化工企业已逐步向园区聚集发展。
这些化工园区往往形成涉及医药中间体、化工原料、纺织印染、造纸以及其他精细化工行业的产业格局。
园区内化工企业的废水首先经过自身预处理后，统一排放进入园区的污水处理厂进一步处理。
这类废水具有成分复杂、浓度高、毒性强、腐蚀性强、难降解等特点［1］。
目前，针对化工园区综合废水处理技术正在不断被探索研究和投入使用。
1 分类测定废水水质化工园区内的综合废水主要为各个生产企业的废水排放集合，而每个化工企业排放的废水特点因其生产产品类型而呈现不同的性状特征。
在化工园区中各废水汇集之前，可以进行分类测定废水水质。
根据各废水的污染情况，将相似污染源的废水集合在一起，进而达到有针对性的处理废水。
因为化工园区综合废水含有的难处理物质如有机物类和重金属类等，其因污染物的特性差别而对废水处理要求不一样。
有机类污染物的存在还妨碍废水处理过程中对重金属的去除。
一般会用氧化、吸附等方法将有机类污染物去除后，再以无机类废水处理方法对重金属进行去除。
对化工园区综合废水进行分类测定可以提高整个系统的去污效率。
2 化工园区综合废水预处理化工园区综合废水拥有组分繁杂、极难降解等问题，若直接采用传统的废水处理工艺，往往达不到最终的废水排放国家标准。
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境 中，染 料废 水具 有 高色度 、高化学 稳定 性和 较 强 的生物 毒 性 ，若不 经过 适 当地处 理， 会对环 境 产生
严重的污染 。 三 苯 基 甲烷 染料广 泛 应用 于纺 织 印染 、医 药 、 生物染色 、造纸 、皮革 、食 品及化妆 品等领域 ， 由于
式离心机Ｔ １－ ；单人单面净化 工作台Ｓ － ５ １ Ｄ Ｇ ６Ｗ ＷＣ—Ｆ ； 可见光分光光度计Ｖ Ｓ ７ ３ 。 Ｉ一２等 １２培养基 ． １２ １ ． ．富集培养基
１３ ３ ． ． 染料 耐 受 菌 的 分 离纯化
分别取 出５ Ｌ ３ ０ ｒ ｍ ｎ ， ３ ｍ ｎ ｍ 经 ８ ０ ／ ｉ 离 ￣ ０ ｉ 取上清 液 测０ ， Ｄ 值 ， 以不接菌 的培养基为对照 ，计算脱色率 。
１ ７ｐ 值对细菌脱色能力的影响 ． Ｈ
配 制 液体染 料培 养基 （ Ｈ 别 为４ 、６ 、 ｐ分 、５ 、７ ８ 、 ），经灭 菌后 ，将０ 培养液各取 ５ Ｌ 别接种 、９ ＃ ｍ分 于培养 基 中，在 ３ ５Ｃ，１ ０ ｍ ｎ 振荡培养 ，４ ｏ ２ ｒ／ ｉ 下 天 后取５ Ｌ ８ ０ ／ ｉ 离， ３ｍ ｎ 上清 液ＮＯ 值 ，并 ｍ 经３ ０ ｒ ｍ ｎ Ｃ ０ ｉ 取 ， Ｄ 以不接菌的培养基为对照 ，计算脱色率 。
第 ３ ４ ２ １ ６ ０２ 年 月
张 营等 目寸 ： ： ～ 三苯 甲烷染料降解脱色菌的研究 １ 。 。
３ ３
● ■ ■● ●■－
●— Ｉ— ｒ
苯 甲 烷 黎 料 降 解 脱 色 菌 的 研 究
张 营 张健 飞 杨 革 （ 天津工业大学纺织学院 天津 ３０８ ） ０３７
牛 肉 膏 ５ ０ ／ ， 蛋 白 胨 ｌ ． ／ ， 葡 萄 糖 ． ｇ Ｌ ０ Ｌ ０ ｇ
５ Ｏ ／ ， Ｋ ２ Ｏ １ ８ ／ ． ｇＬ ＨＰ ４ ． ｇ Ｌ，Ｎ Ｈ １ ４ １ Ｈ ０ ． ｇ Ｌ， ａ ２０ 。 ２ ２ ３ ５ ／ ９ Ｍ Ｓ ４ ７ ２ ． ｇ Ｌ ｇ Ｏ ￣ Ｈ０ ０ ２ ／ 。
别 接 种 于 培 养 基 中 ，在 温度 分别 为 ２ ℃ 、２ ℃ 、 ０ ５
３ ℃ 、３ ℃ 、 ４ ℃ 、 ４ ℃ 、 ５ ℃ 下 振 荡 培 养 ，４ 后 ０ ５ ０ ５ ０ 天
养４ 的培 养液 １ ｍ ，在 ３ ℃ 、１ ０ 天 ０Ｌ ５ ２ ｒ／ｍ ｎ 振荡 培 ｉ下
养并观察染料褪色情 况。
关键 词 ：龙胆紫；脱 色菌；三苯 甲烷 染料
中图 分类号 ：Ｘ ７ ９
文献标识码 ：Ａ
文章编号 ：ｌ０— ３０２ ｌ）６ ０３— ４ ０５ ９５（０２０— ０３ ０
目前 全世 界染 料年产 量 约为８ ０ ｔ ～９ １ ５ ，在染 Ｘ 料 的使用 过程 中大 约有 １ ％～２ ％被直接 排放 到环 ０ ０
其 特殊 的 化学 结构 ， 在环 境 中较稳 定且 难 以降解 ， 采
用 物理或 化学方法 处理 的效 果不太 明显 ， 而且 费用较
高， 以生物法显得 更经济有 效 ，环境 友好 ，因此其 所 生物脱 色 降解 的研 究可 为 印染 废水 处理 和染 料污 染 环境 的生物修复提供理论依据 。
摘 要 ：从 某纺织 印染厂 附近 的 污泥 中筛选 、分 离、纯化得 到一株三苯 甲烷类 染料脱 色菌株 ，并研 究 了该 菌株 对龙胆 紫染料 的最佳脱 色降解条件 。实验结果表 明，该茵在 ｐ值 为７ ０ Ｈ ． 、温度 为３ ℃、培养时 间为９ ｈ ５ ６ 的条
件 下 ，对浓度 为３ｍ ／ ａ龙胆 紫染料 的脱 色率达７％Ｘ ０ｇ Ｌ￣ ４ ￣ 上。
Ｍ Ｓ ４７ ２；Ｎ Ｈ Ｏ；Ｎ Ｏ ；Ｎ Ｃ ；Ｃ ３Ｏ Ｈ 。 ｇ ０￣Ｈ０ ａ ２ ４ ａＨ ａ Ｉ ＨＣ Ｏ 等 Ｐ
手提 式压 力蒸 汽 灭菌 器Ｙ － ８ Ｄ Ｘ ２ ０ ；生化 培 养箱 ＬＨ １０ Ｒ 一 ５ ；恒温培 养振 荡器Ｚ Ｗ 一 １ ２ Ｈ Ｙ ２ ０ ；微量 高速 台
１２ ２ 离纯化培 养基 ． ．分
牛 肉膏５ ０ ／ ，蛋 白胨 １ ． ｇ Ｌ ． ｇＬ ０ ０ ／ ，琼脂粉２ ． ｇ ０Ｏ ／
Ｌ ａ Ｉ ． ｇ Ｌ ，Ｎ Ｃ ５ Ｏ ／ 。
１ 实验部分
１ １材料与仪器 ． 土 样 ：天津 天 纺控股 有 限公 司 印染厂 ；龙胆 紫
染 料 ；葡 萄 糖 ； 牛 肉浸 膏 ；胰 蛋 白胨 ； 琼 脂粉 ；
上清液 测０ 值 ，并 以不接 菌 的培养 基 为对照 ，计 算 Ｄ
脱色 率 。
１６温度对脱 色率的影响 ．
配 制 液 体染 料 培养 基 ，将０ 培养 液 各 取 ５ Ｌ ＃ ｍ 分
１３２ ． ．耐受菌培养
向富集 培养 基 中分别 加入 １ ｍ 、３ ｍ 、５ ｍ 染 ０ｇ ０ｇ ０ｇ 料 ，制 作降解菌 培养基 ， 经灭菌 后 ，分别 加入 富集 培
收稿 日期 ：２ １— ２ １ ０１１－６
１２ ３ ． ．筛选培 养基
牛 肉膏５ ０ ／ ，蛋 白胨 １ ． ｇ Ｌ ａ ｌ ． ｇ ．ｇＬ ０ ０ ／ ，Ｎ Ｃ ５ Ｏ ／
Ｌ ，龙胆 紫５ ０ ｇ／ 。 ． ｍ Ｌ
１３实验方法 ．
１３ １ ． ． 富集培养
取 １ｇ ０ 土样 于５ ｍ 蒸馏水 中， ０ １０ ／ ｉ振 荡 ０Ｌ ３ ℃， ０ ｒｍ ｎ ３ｍ ｎ ０ ｉ ，然 后静置 １ｍ ｎ １ ０ ｉ ￣ 成悬浮 水样 。配制３ ］ 个平行
作者简 介 ：张 营，硕士研 究生 ，主要从 事生 态纺织染整技
术 方 面 的 研 究
染
整
技
术
Ｖ １ ４Ｎ ． ｏ． ｏ ３ ６
Ｊ ｎ２ 瓶 中 ，灭菌 后 分别 加入 ５ Ｌ 样上清液 ，在３ ℃、１ ０ ｍ ｎ ｍ土 ５ ２ ｒ／ ｉ 下振荡培养４ 天 后观 察微生物生长情况 。