沙门氏+显色培养基说明书pdf
沙门氏菌显色培养基
沙门氏菌显色培养基沙门氏菌显色培养基(ChromogenicSalmonellaAgar)用途：用于沙门氏菌的快速分离和鉴定。
（GB4789.40-2010）原理：蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素；氯化钠可维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；抑菌剂抑制革兰氏阳性菌，增强培养基的抑制杂菌的能力；混合色素分别与沙门氏菌和大肠菌群所对应的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上沙门氏菌产生品红色的菌落，大肠菌群产生蓝绿色的菌落。
配方（每升）：蛋白胨19.6g酵母膏粉3g氯化钠5g抑菌剂 1.5g琼脂12g混合色素 6.4g最终pH7.0±0.2使用方法：1、称取本品47.5g，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，混合均匀加热至100℃，并按常规不断搅拌直至完全溶解(不能持续高温加热，建议不要重复煮溶)，不需高压灭菌，冷至50℃，倾注灭菌平皿。
2、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液与增菌液。
3、建议使用二步增菌法：（1）前增菌：将处理过的样品25g置于225mL缓冲蛋白胨水中，混合均匀后37℃培养6～8h；（2）选择性增菌：取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）中，混合均匀后37℃培养18～24h；4、用接种环取增菌液一环，划线接种于沙门氏菌显色平板上，置于36±1℃培养18-24小时。
5、观察结果。
挑取显色平板上呈品红色，扁平透明，边缘光滑，直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。
6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验，对疑似沙门氏菌菌落进行生化鉴定。
质量控制：本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后于36±1℃培养18—24h生长情况如下表。
菌名菌号生长状况培养特征鼠伤寒沙门氏菌CMCC50115 良好菌落品红色大肠埃希氏菌ATCC25922 良好菌落蓝绿色奇异变形杆菌CMCC(B)49005 良好菌落无色粪肠球菌ATCC29212 受抑制-----贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。
沙门氏菌显色培养基-2011
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所有沙门氏菌都含有辛酸酯酶，反应形成紫色菌落。 其它的肠杆菌也产生辛酸酯酶，但会受到抑制或者通过与 β-葡萄糖苷酶底物作用形成蓝色菌落，非常容易与紫色的 沙门氏菌菌落区分开。
新型 InhibigenTM技术 一个Inhibigen分子是由一个酶底物和一个抑制剂分子以无毒形式
连接组成的。进入微生物细胞后，当有特定目标酶存在时，这种连接 就会被裂解，释放出抑制剂分子，破坏细胞壁的合成，导致微生物死 亡。当细胞死亡和溶解后，游离的抑制剂分子释放出来，但不能再进 入其它细胞，因此只能进行靶向抑制。
电话：020-83145188；传真：020-83486621
成都：成都临江西路1号锦江国际大厦1403-06单元
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平板分离 Brilliance沙门氏菌显色琼脂、XLD琼脂和其它沙门氏菌培养基， 既可提供干粉、也可提供一次性制成培养基
确认试验
RapID® ONE 肠杆菌鉴定系统
20测试 R8311006
快速鉴定超过70 种肠杆菌和其它氧化酶阴性细菌
MicrobactTM GNB 24E
80测试 MB1074A
鉴定肠杆菌科菌和其它革兰氏阴性杆菌，微孔板条形式
电话：010-80499033；传真：010-80495033
北京兰桥生化有限公司沙门氏菌生化鉴定套装使用说明书
S012沙门氏菌生化鉴定套装使用说明书产品介绍用于SN 0170-1992中沙门氏菌的生化鉴定试验。
该套装由10支安瓿瓶组成，包括8项生化试验。
接种可疑菌落悬浊液培养一定时间后，观察生化现象，并结合标准判定鉴定结果。
生化鉴定套装明细需自备材料1、10套×10支安瓿瓶1、无菌水2mL2、10支一次性塑料滴管2、安瓿瓶架（可从本公司另购）3、1支0.5麦氏浊度比浊管配套试剂：靛基质试剂、VP甲乙液试剂、无菌液体石蜡注：一份生化鉴定套装可鉴定10个可疑菌落使用说明1．实验准备：取出安瓿瓶，朝易折点（瓶颈上方蓝点）反方向用力折断瓶颈，按顺序插入安瓿瓶架中，作好标记。
2．菌悬液的制备：➢取一支盛有2mL0.85%生理盐水的试管；➢用接种针挑取可疑菌落至无菌水中；➢仔细研磨，与标准0.5麦氏浊度比浊管比较，制成0.5个麦氏浊度的均匀菌悬液。
3．接种与培养：➢用接种针挑取制备好的0.5个麦氏浊度的均匀菌悬液划线、穿刺接种于三糖铁琼脂中；➢再用接种针挑取制备好的0.5个麦氏浊度的均匀菌悬液分别划线接种于VP固体琼脂和卫矛醇半固体培养基中；➢使用一次性塑料滴管吸取0.5个麦氏浊度的菌悬液，依次滴入制备好的安瓿瓶中，每瓶3滴；➢如无特殊说明，培养温度均为36℃±1℃（无需加盖）。
结果判定结合结果判定表和SN 0170-1992进行结果判定。
保存条件和保质期2-8℃冷藏保存，保质期为一年。
结果判定表试验项目阴性结果阳性结果目标菌生化现象培养时间（h）说明三糖铁斜面K 斜面 A K18h-24h用接种针挑取同一可疑菌落先在斜面划线，再于底层穿刺。
底层K 底层 A A硫化氢不变黑硫化氢变黑阴性或阳性产气无气孔产气有气孔阴性或阳性吲哚无色玫瑰红色阴性18h-24h 滴加2-3滴靛基质试剂，即刻观察结果。
VP半固体琼脂动力不扩散生长动力扩散生长阳性18h-24h用接种针挑取同一菌落穿刺。
培养后依次滴加6滴甲液、2滴乙液，10-30min内观察结果。
沙门氏菌成套生化鉴定管使用说明书(SHBG01)
沙门氏菌成套生化鉴定管使用说明书（SHBG01）
1、实验准备：从包装盒中取出安瓿瓶，用沙轮在瓶颈上划一圈，朝易折点（瓶颈上方蓝点）,
反方向用力折开安瓿瓶，插入安瓿瓶试管架中。
如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一支。
2、接种方法：
从选择性琼脂平板（BS琼脂和XLD琼脂或HE琼脂或沙门氏菌显色培养基）上至少选取2个典型菌落或可疑菌落，接种三糖铁琼脂、赖氨酸脱羧酶培养基、靛基质（色氨酸肉汤）、尿素酶、氰化钾、氰化钾对照和氨基酸脱羧酶对照，其中氰化钾对照和氨基酸脱羧酶对照2个菌落做一个对照即可。
本成套生化鉴定管不含三糖铁琼脂。
其它的生化管是否进行接种，请参照GB4789. 4-2010标准判断结果。
直接接种：用接种针从平板上挑取已分离的同一菌落接种于需要试验的生化管中。
菌悬液法：取一内盛2ml无菌水或无菌生理盐水试管，用接种针从平板上挑取单个菌落至无菌水中仔细研磨制成0.5麦氏浊度的均一细菌悬液，滴入需要试验的试管中，每管3 滴。
其中固体和半固体生化管采用穿剌接种。
3、接种完后放37°C培养。
（用封口膜封口，封口膜应用75%酒精擦拭灭菌，成套生化管中附带有）。
一种用于检测沙门氏菌的显色培养基及其制备方法[发明专利]
![一种用于检测沙门氏菌的显色培养基及其制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/72059509f8c75fbfc67db204.png)
专利名称：一种用于检测沙门氏菌的显色培养基及其制备方法专利类型：发明专利
发明人：于瑞莉,陈臣,陈帅,陈鹏飞,茆伟伟,周锐
申请号：CN201810516950.8
申请日：20180525
公开号：CN108359707A
公开日：
20180803
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种用于检测沙门氏菌的显色培养基及其制备方法，其包括，基础培养基、添加剂，所述添加剂包括酯酶显色底物，所述酯酶显色底物包括5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑辛酯及
5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑壬酯，所述5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑辛酯含量为0.1～0.4g/L、所述5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑壬酯含量为0.1～0.4g/L。
本发明的显色培养基各添加剂组分相互协同作用，5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑壬酯和5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑辛酯共同作为显色底物，协同促进更多酯酶反应的产生，释放出更多显色基团。
本发明的显色培养基用于检测沙门氏菌具有灵敏度高，特异性强，辨识度更高、检测周期更短、适应性更强，易于产业化生产等优点。
申请人：无锡市赛微生物技术有限公司
地址：214000 江苏省无锡市北塘区光电新材料科技园会北路28-95
国籍：CN
代理机构：南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：王晓东
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沙门氏菌显色培养基
培养基名称：沙门氏菌显色培养基英文名称：Chromogenic Salmonella Agar沙门氏菌显色培养基用途：用于沙门氏菌的快速分离和鉴定。
沙门氏菌显色培养基使用原理：蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;胆盐抑制革兰氏阳性菌;选择性添加剂增强培养基的抑制杂菌的能力;混合色素分别与沙门氏菌和大肠菌群所对应的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上沙门氏菌产生品红色的菌落，大肠菌群产生蓝绿色的菌落。
沙门氏菌显色培养基配方(每升)：蛋白胨19.6g酵母膏粉3g氯化钠5g胆盐 1.5g琼脂12g混合色素 6.4g最终pH7.0±0.2沙门氏菌显色培养基使用方法：1、称取沙门氏菌显色培养基47.5g，混合均匀加热至100℃，并按常规不断搅拌直至完全溶解(不能持续高温加热，建议不要重复煮溶)，不需高压灭菌，冷至50℃，加入10支沙门氏菌选择性添加剂(冻干粉每支需先用1ml无菌水溶解)，混匀，倾注灭菌平皿。
2、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液与增菌液。
3、建议使用二步增菌法：(1)前增菌：将处理过的样品25g置于225mL缓冲蛋白胨水中，混合均匀后37℃培养6～8h;(2)选择性增菌：取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)中，混合均匀后37℃培养18～24h;4、用接种环取增菌液一环，划线接种于沙门氏菌显色平板上，置于36±1℃培养18-24小时。
5、观察结果。
挑取显色平板上呈品红色，扁平透明，边缘光滑，直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。
6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验，对疑似沙门氏菌菌落进行生化鉴定。
质量控制：沙门氏菌显色培养基倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后于36±1℃培养18—24h生长情况如下表。
菌名菌号生长状况培养特征鼠伤寒沙门氏菌CMCC50115良好菌落品红色大肠埃希氏菌ATCC25922良好菌落蓝绿色奇异变形杆菌CMCC(B)49005良好菌落无色粪肠球菌ATCC29212受抑制-----贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。
沙门氏菌检验 (2)
沙门氏菌检验1.范围本法适用于食品中沙门氏菌的检验。
2.设备和材料处微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：2.1 冰箱：2℃～5℃。
2.2 恒温培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃。
2.3 均质器。
2.4 振荡器。
2.5 电子天平：感量0.1g。
2.6 无菌锥形瓶：容量500mL，250mL。
2.7 无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。
2.8无菌培养皿：直径90mm。
2.9 无菌试管：3mm×50mm、10mm×75mm。
2.10 无菌毛细管。
2.11 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
2.12 全自动微生物生化鉴定系统。
3.培养基和试剂3.1 缓冲蛋白胨水（BPW）。
3.2 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液。
3.3 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液。
3.4 亚硫酸铋（BS）琼脂。
3.5 HE琼脂。
3.6 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂。
3.7沙门氏菌属显色培养基。
3.8 三糖铁（TSI）琼脂。
3.9 蛋白胨水、靛基质试剂。
3.10 尿素琼脂（pH7.2）。
3.11 氰化钾（KCN）培养基。
3.12 赖氨酸脱羧酶试验培养基。
3.13 糖发酵管。
3.14 邻硝基苯β-D-半乳糖苷（ONPG）培养基。
3.15 半固体琼脂。
3.16 丙二酸钠培养基。
3.17 沙门氏菌O和H诊断血清。
3.18 生化鉴定试剂盒。
4.检验程序沙门氏菌检验程序见图1。
42℃±118h～24h 36℃±1℃，18h～24h5.操作步骤5.1 前增菌称取25g（mL）样品放入盛有225mL BPW 的无菌均质杯中，以8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或置于盛有225mL BPW的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min。
若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。
如需测定pH值，用1mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2.无菌操作将样品转至500mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培养8h～18h。
Handyplate沙门氏菌测试片使用说明书
1沙门氏菌测试片使用说明书【产品名称】通用名称：沙门氏菌测试片英文名称：Handy plate ®Salmonella Count Plate 【产品编号】HP 005【包装规格】20片/包【产品简介】Handy plate ®沙门氏菌测试片为预制备的即用型培养基产品，含有标准的培养基，冷水凝胶和显色指示剂。
本产品可用于食品和饮料中沙门氏菌的测定。
【使用说明】1.样品制备预增菌无菌操作称取25g(mL)样品，置于盛有225mL BPW 的无菌均质袋内，用均质器均质1-2min 。
若样品为液态，振荡混匀。
必要时用1mol/L NaOH 或1mol/L HCl 溶液调节样品匀液pH 至6.8±0.2。
于36℃±1℃培养8h ～18h 。
增菌轻摇培养过的样品混合物，取1mL 转种于10mL TTB 内，于42℃±1℃培养18h ～24h 。
同时另取1mL 转种于10mL SC 内，于42℃±1℃培养18h ～24h 。
稀释用1mL 无菌吸管或移液器吸取增菌液1mL ，注入含有9mL 稀释液的试管内，振摇后成为1:10的样品匀液，以此类推，制备10倍系列稀释的样品匀液，每次换一支吸管。
2.接种根据对样品污染状况的估计，选择2～3个稀释度进行检测。
将沙门氏菌测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL 样品匀液滴加到测试片中央，缓缓盖上上层膜避免产生气泡。
静置使样液扩散并重新形成凝胶。
3.培养将测试片正面向上水平放置36℃±1℃，培养24h±2h 。
4.判读疑似沙门氏菌为品红色菌落，其它菌为蓝绿色或无色菌落。
合适的计数范围在30CFU ～200CFU 。
若整个培养区域呈品红-紫红色，可能是菌落浓度很高，需对样品进一步稀释以获得确切的计数。
如需分离菌落进行进一步鉴定，揭开上层膜用接种针将菌落挑出。
【储存条件与保质期】2~8℃密封储存，有效期为18个月。
沙门氏菌 LAMP 检测试剂盒说明书
沙门氏菌 LAMP检测试剂盒使用说明书Loop-mediated Isothermal Amplification Method（使用前请详细阅读本说明书）前言本试剂盒采用LAMP方法结合荧光染料显色的体外扩增和检测技术，适用于食品或环境中沙门氏菌快速检测。
试剂盒组成组成成份（20 test/kit）规格DNA提取液 1.6mL×1管反应液Sal440μL×1管稳定液600μL×1管Bst酶10μL×1管阳性对照DNA Sal50μL×1管阴性对照50μL×1管显色液40μL×1管储存方法及有效期本试剂盒储存于-20℃下有效期为一年（请在有效期内使用）。
实验前准备培养基（前增菌用）移液器吸嘴移液器（0.5-10μL,10-100μL,100-1000μL） 1.5ml无菌离心管金属浴或者水浴锅0.2mL PCR反应管高速离心机工作服及一次性手套碎冰样品采集及存放1.采集本试剂盒适用于增菌液或可疑菌落样本。
样品制备、增菌培养和分离按照GB/T 4789.4标准方法进行。
2.存放待测样品在2-8℃保存不应超过24小时；-20℃长期保存，应避免反复冻融。
使用方法1.样品处理增菌液模板DNA的制备，对于标准方法培养的增菌液：a) 直接取该增菌液1mL加到1.5mL无菌离心管中，10000r/min离心2min，尽量吸弃上清；b) 加入80μL DNA提取液，混匀后沸水浴10min，置冰上10min；r/min离心2min，上清即为核酸模板；取上清置-20℃可长期保存备用。
c) 10000可疑菌落模板DNA的制备：对于标准方法分离到的可疑菌落，可直接挑取可疑菌落，加入80μL样品预处理液，再按照上述步骤b)制备模板DNA 以待检测。
2.核酸扩增a) 试剂盒内反应液Sal使用前建议室温融化振荡混匀后，2000r/min离心10sec；其余室温融化后，2000r/min离心10sec即可。
沙门培养基说明书
沙门培养基说明书
一、产品名称与规格
沙门培养基，型号：XX-XX，规格：XX毫升
二、成分与特点
本产品主要成分包括XX、XX、XX、XX等，为沙门菌的生长提供必要的营养物质。
本产品具有以下特点：
1. 高度选择性：可抑制其他杂菌的生长，有利于沙门菌的繁殖；
2. 独特的配方：含有沙门菌生长所需的特殊营养成分，促进沙门菌的生长发育；
3. 稳定性好：在规定储存条件下，产品质量稳定，有效保质期长。
三、适用范围与用途
本产品适用于对食品、饮料、水等样品中沙门菌的检测。
使用本产品可以有效地提高沙门菌的检出率，同时抑制其他杂菌的生长，保障食品安全。
四、操作步骤与使用方法
1. 样品处理：按照国家或行业标准对食品、饮料、水等样品进行处理，制备成适合细菌培养的稀释液；
2. 培养基制备：将本产品与稀释液按照规定比例混合，摇匀；
3. 培养：将制备好的培养基放入培养箱中，在规定温度下培养XX小时至XX天；
4. 观察与计数：观察培养结果，对菌落进行计数，记录数据。
五、质量标准与检验方法
本产品质量符合国家或行业标准，如需检验，可采用以下方法：
1. 外观检查：观察培养基的色泽、质地是否符合规定；
2. 水分含量：按照规定方法测定水分含量是否符合标准；
3. 微生物限度：按照规定方法进行微生物限度检查，应符合质量标准要求。
六、储存条件与注意事项
1. 本产品应储存在干燥、阴凉、通风的地方，避免阳光直射和高温；
2. 本产品为非危险品，但要避免误食或接触到眼睛；
3. 使用过程中要避免污染，用过的培养基要及时处理。
沙门氏菌特征显色液体培养基、其制备方法及沙门氏菌快速检测方法
(10)申请公布号 CN 102433373 A(43)申请公布日 2012.05.02C N 102433373 A*CN102433373A*(21)申请号 201110417455.X(22)申请日 2011.12.14C12Q 1/44(2006.01)C12Q 1/04(2006.01)C12R 1/42(2006.01)(71)申请人浙江省农业科学院地址310021 浙江省杭州市江干区石桥路198号(72)发明人张巧艳 周育 徐俊锋(74)专利代理机构浙江永鼎律师事务所 33233代理人王梨华 陈丽霞(54)发明名称沙门氏菌特征显色液体培养基、其制备方法及沙门氏菌快速检测方法(57)摘要本发明涉及食品微生物安全监测领域，公开了沙门氏菌特征显色液体培养基、其制备方法及沙门氏菌快速检测方法。
沙门氏菌特征显色液体培养基的主要成分是：胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠、氯化锂、去氧胆酸钠、磷酸氢二钾、组合抑制剂、组合促进剂、特征性酶解底物、助溶剂。
本发明涉及的快速检测方法包含前增菌培养和显色鉴定两步，特点是：沙门氏菌特征酶水解对应底物使培养基呈紫色，以此快速判断沙门氏菌的存在；加入促进剂，有利于沙门氏菌受损细胞的恢复和促进生长；加入抑制剂，选择性抑制其它杂菌的生长，以减少它们对检测的干扰。
本发明具有以下优点：操作简便，检测周期短，特异性强，准确度高，适合于食品中沙门氏菌的大通量检测。
(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 8 页1.沙门氏菌特征显色液体培养基，其特征在于，组分包括蒸馏水、胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠、氯化锂、去氧胆酸钠、磷酸氢二钾、组合促进剂、组合抑制剂、特征性酶解底物、助溶剂、蒸馏水；每100 mL蒸馏水需其他组分的含量为：胰蛋白胨0.8 ~ 1.2 g、酵母粉0.4 ~ 0.8 g、氯化钠0.4 ~ 0.8 g、氯化锂0.3 ~ 0.5 g、去氧胆酸钠0.1 ~ 0.3 g、磷酸氢二钾0.1 ~ 0.2 g、组合促进剂0.02 ~ 0.04 g、组合抑制剂0.1 ~ 0.2 g、特征性酶解底物0.02 ~ 0.04 g、助溶剂4 ~ 6 mL，pH 7.2±0.2。
2024版沙门氏菌检验实验解析PPT
增加“无菌量筒：容量50mL、无菌均质杯、无菌均质袋、无菌广口瓶：容量500mL、无菌试管15mm×150mm、18mm×180mm、无菌接种环：10μL（直径约3mm）、1μL以及接种针”
对检验用器具规格明确，方便实验室选用
增加“生物安全柜”
对于实验室开展活菌操作、样本检测实验室生物安全等级需“BSL-2”，因此，增加此设备是生物安全必须。
明确接种菌液浓度为“0.5麦氏浊度”，接种量“2滴~3滴”，避免接种量过大导致假阳性；还有增加"接种混匀后滴加一层无菌液体石蜡进行密封"由于氰化钾不稳定容易分解失效，因此，加石蜡密封避免造成假阳性反应。
“符合表3中A1者，为沙门氏菌典型的生化反应”后面补充“进行血清学鉴定后报告结果”
明确的指出符合沙门氏菌典型的生化反应需要进行血清学鉴定后报告结果
调整可疑菌落初筛流程
流程图更清晰易懂
TTB选择性增菌改为：低背景菌36 ℃±1 ℃，高背景菌42 ℃±1 ℃原因：验证试验发现，对于生鲜样品，TTB 42℃比 TTB 36℃的选择性好，所以继续沿用；对于深加工样品，TTB 36℃比 TTB 42℃生长好，所以低背景菌采用36℃±1℃培养。如有需要，可将预增菌的培养物在2 ℃~8 ℃冰箱保存不超过72h，再进行选择性增菌。
2016版“必要时按表5进行沙门氏菌生化群的鉴定”修改为2024版中“必要时,按表5进行沙门氏菌种和亚种的生化鉴定”
“生化群”用“种和亚种”替代，更易懂;
在表5沙门氏菌种和亚种的生化鉴定中增加“肠炎沙门氏菌、邦戈尔沙门菌种名”以及肠炎沙门氏菌种内对应的6个亚种和生化群分型”;生化反应项增加“明胶酶、L(+)-酒石酸盐、半乳糖醛等8项”
主要变化
章节
新标准变更内容
应用显色培养基检测沙门氏菌的初步研究
应用显色培养基检测沙门氏菌的初步研究【摘要】目的：利用特异性酶法鉴定致病的特点，建立一种用来检测食物中毒和肠道腹泻中沙门氏菌的显色快速检测方法。
方法：将带菌标本增菌后接种沙门氏菌显色培养基（简称“CAS”）。
结果：沙门氏菌在CAS平板上呈现特定型的红色菌落，非沙门氏菌呈现无色菌落或蓝色菌落。
结论：用CAS选择性平板分离沙门氏菌较易鉴别，不需通过任何仪器，仅通过观察菌落颜色既在24h用肉眼对沙门氏菌进行鉴定，缩短了检验周期，使用方便，提高了检出率。
【关键词】沙门氏菌；沙门氏菌显色培养基；快速检测沙门氏菌是引起食物中毒和肠道腹泻的病原菌之中一种，是重要的肠道病原菌。
目前传统的沙门氏菌检验主要采用传统的生化方法，包括亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液增菌，分离培养，生化鉴定，血清型鉴定等多个步骤，一般过程需要一周时间，操作复杂，已不能满足微生物快速检测的需要，因此使用快速检测准确的沙门氏菌显色培养基来鉴定非常重要。
沙门氏菌显色培养基（CAS）是一种新型培养基，它添加了特异的显色底物组合能更加准确检测出样品中含有的沙门氏菌，大大提高了检出率。
1材料与方法1.1材料1.1.1菌株、沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌等。
标准株和分离株由通化市疾病预防控制中心微生物室提供。
1.1.2培养基及试剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）、GN增菌液、沙门氏、志贺氏琼脂（SS、HE）、肠道增菌液。
肠道综合双糖管及肠杆菌科鉴定编码等培养基试剂购自北京陆桥生物技术有限责任公司。
沙门氏菌显色培养基（CAS）产自法国科马嘉公司，郑州博骞生物技术研究所分装。
沙门氏菌、志贺氏菌、大肠埃希氏菌诊断血清购自兰州生物制品研究所。
以上试剂均在有效期内。
1.2主要仪器设备生物安全柜、电热恒温培养箱、全自动高压灭菌锅、电子天平、显微镜。
1.3方法除培养基配制和显微镜观察外，其余操作过程均在100—1000级生物洁净室内。
1.3.1菌株检测方法按照GB/T4789—2008中相应操作规程进行。
沙门氏志贺氏肉汤培养基的产品技术要求
沙门氏志贺氏肉汤培养基的产品技术要求沙门氏志贺氏肉汤培养基的产品技术要求1. 概述沙门氏志贺氏肉汤培养基是一种常用的细菌培养基，广泛应用于临床、科研和工业生产等领域。
以下是该培养基的产品技术要求。
2. 成分要求•沙门氏志贺氏肉汤培养基的主要成分包括：–水解肉蛋白酵解物：提供氮源和能量供细菌生长。
–葡萄糖：提供碳源供细菌进行代谢活动。
–酵母提取物：提供维生素和其他生长因子。
–烟酸酵母提取物：提供烟酸等重要生长因子。
3. 技术要求•外观和颜色：–沙门氏志贺氏肉汤培养基应呈现为深红色至橙色，均匀透明的液体。
•pH值：–pH值应在之间，以适应细菌的生长需求。
•灭菌：–培养基应通过有效的灭菌处理，确保无菌。
•保存条件：–储存于2-8摄氏度的冰箱中，避免光照和冻结。
•有效期：–培养基的有效期通常为24个月，具体标注在产品包装上。
4. 应用举例沙门氏志贺氏肉汤培养基广泛应用于以下方面：临床诊断医院实验室使用沙门氏志贺氏肉汤培养基来培养和分离沙门氏菌和志贺菌，用于临床诊断和疾病治疗。
食品安全监测食品安全监测部门使用沙门氏志贺氏肉汤培养基进行食品样品的检测，以便及早发现和防止食源性疾病的发生。
科学研究科研人员使用沙门氏志贺氏肉汤培养基来研究沙门氏菌和志贺菌的生物学特性、毒力机制等，为防治相应疾病提供理论依据。
在生物制药领域，沙门氏志贺氏肉汤培养基被用作菌苗的生产和细菌发酵工艺的研发，以生产抗生素、疫苗和其他生物药物。
以上是沙门氏志贺氏肉汤培养基的相关要求和举例说明。
这种培养基的严格制备和质量控制对于细菌分离和培养的成功至关重要，对相关行业的发展也发挥着重要作用。
5. 质量控制要求•袋装：沙门氏志贺氏肉汤培养基通常以袋装形式销售，每袋净重应标明并符合规定的净重范围。
•生长特性：培养基应具备良好的生长特性，能够支持沙门氏菌和志贺菌的生长。
•控制菌株：生产过程应使用标准的菌株进行接种和验证，确保培养基的质量和准确性。
•质量检测：生产过程中应进行常规的质量检测，包括菌落形态、菌生长情况和灭菌验证等。
沙门氏菌操作记录(质控)
XXX中心
沙门氏菌鉴定原始记录
报告单号：共页第页样品名称: 样品数量：
生产厂家：样品性状及包装：
样品来源：检测地点：
采或送样单位：采或送样人：
检验依据：编号或批号：
收样日期：检验日期：
检验项目：分离鉴定致病菌
一、危险性评估：
二、样品前处理
共页第页
血清学凝集试验：
菌种处理：
终末消毒：
四、使用设备、标准菌株和主要试剂：
1、使用设备
恒温培养箱：
恒温培养箱：
显微镜：
高压蒸汽灭菌器：
生物安全柜：
2、标准菌种来源、菌号及代数
沙门氏菌标准菌株：
3、主要试剂、批号及配制记录
SC增菌液：
TTB增菌液：
BS琼脂平板：
科玛嘉沙门氏显色培养基：
三糖铁琼脂：
沙门氏菌诊断血清：
生化鉴定管：
五、检验结果
检毕时间年月日检测者：复核者：
XXX中心
沙门氏菌鉴定原始记录
报告单号：共页第页样品名称: 样品数量：
样品性状及包装：检测地点:
收样日期：检验日期：
检验依据： GB4789.4-2010
检验项目：分离鉴定沙门氏菌
一、样品前处理
用0.45um滤膜过滤500ml水样，将滤膜无菌手续剪碎，分别取适量滤膜进行如下操作。
共页第页
血清学凝集试验：
盐水对照：
沙门氏菌A-F多价O血清：
O4:
O5:
H多价2：
Hf：
三、检验结果
检毕时间年月日检测者：复核者：。
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沙门氏+显色培养基使用说明书
组分
科玛嘉沙门氏菌基础培养基和增补剂各一瓶。
基础培养基：琼脂15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉8.0 g/L 盐类8.5 g/L
色素和选择性物质：1.3 g/L
增补剂：6.0 ml/L
pH值7.6±0.2
操作
1、取瓶内干粉32.8g溶于1000 mL去离子水的洁净三角瓶中，充分搅拌
混匀。
移取6.0 ml增补剂到溶解完全的培养基中。
也可根据需要按照32.8 g/L和6.0 ml/L的比例扩大或缩小制备培养基的量。
2、加热至100℃，不停搅拌，使其完全溶解。
切勿加热超过100℃，切勿
121℃高压灭菌。
若使用微波炉加热，应将培养基加热沸腾，立即移出，轻轻摇匀，再放入微波炉加热，观察小气泡变为大气泡，直至完全溶解即可。
切勿使培养基溢出。
3、加热后的培养基冷却至45℃~50℃，轻轻地摇动均匀，倾注平皿，使其
凝固，晾干备用。
保存该成品平板在室温可保存一天或在冰箱内贮存1个月（2℃~8℃，避光）。
接种
划线或涂布接种（冰箱内保存的平板使用前应恢复至室温），在36±1℃恒温条件下需氧培养18~24h。
结果
性能及局限
该培养基对对沙门氏菌灵敏度高，但是一些都柏林沙门氏菌可能为无色菌落。
一些大肠杆菌也可能为微淡紫色菌落。
假单胞菌有时也会出现紫色菌落，可以使用氧化酶试验排除。
最终的鉴定须做生化试验和血清学试验。
贮存条件
干粉和增补剂均需保存于15℃~30℃干燥环境中，在有效期前使用。
污染处理
使用过的培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。
附：供体外诊断使用，产品须专业人员操作。