济宁市土壤放线菌资源调查研究

　山东农业科学　2008,4:68～71,90Shandong Agricultural Sciences

收稿日期:2007-10-12;修回日期:2007-12-14基金项目:曲阜师范大学科研启动基金

作者简介:司美茹(1977-),女,汉,硕士,讲师,主要从事土壤微生物研究。E -mail:si m eiru1016@1631com

济宁市土壤放线菌资源调查研究

司美茹,苏　涛,李桂芝

(曲阜师范大学生命科学学院,山东曲阜　273165)

摘　要:从济宁市采集土样,采用高氏1号琼脂和淀粉铵琼脂两种培养基分离放线菌,按国内外通用方法进行鉴定,并对土壤放线菌主要属———链霉菌属的类群进行分析与鉴定。结果表明:同一样品在高氏1号琼脂培养基上分离得到的放线菌要高于淀粉铵培养基上的。放线菌组成中,链霉菌占绝大多数,达放线菌总数的70%以上,其次是小单孢菌属,马杜拉放线菌属和诺卡氏菌属;链霉菌类群的组成较复杂,主要为白孢类群和粉红孢类群。

关键词:放线菌;链霉菌属;土壤;济宁

中图分类号:S154138+3 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2008)04-0068-05

I nvesti gati on on Soil Acti n o mycetes i n Ji n i n g C ity

SIMei -ru,S U Tao,L I Gui -zhi

(College of L ife Science,Q ufu N or m al U niversity,Q ufu 273165,China )

Abstract Soil sa mp les were collected fr om J ining city 1The actinomycetes were is olated and identified by s p reading the sa mp les on Gao 1agar mediu m and starch tartar agar mediu m 1A t the sa me ti m e,the gr oup s of Strep t omyces were als o identified and analyzed 1The results showed that the is olated nu mber of actinomycetes on Gao 1agar mediu m was larger than that on starch tartar agarmedium 1I n the genus of actinomycetes,Strep 2t o myces accounted f or more than 70%of the t otal ,and the next oneswere M icr omonos pora,Actinos porangir m and Nocardia 1The main gr oup s of strep t omyces were A lbos porus and Roseos porus 1

Key words Actinomycetes;Strep t omyces;Soil;J ining

放线菌能产生抗生素等多种有益代谢产物,

具有很高的经济价值[1,2]

。据知,目前世界上报道的上万种抗生素中,70%以上是放线菌产生的[3]

,且临床上使用的抗生素有三分之一来自放

线菌[4]

。放线菌还可以合成淀粉酶、纤维素酶等代谢产物。此外,放线菌的数量、种类与土壤肥力有着极密切的关系,是土壤肥力高低的标志之一[5～7]。因此,放线菌的研究具有十分重要的科学价值和实用价值。但是,目前国内放线菌区系调查及其资源开发研究的较少。近年来,姜成林

等对云南[8,9]、薛泉宏等对西藏[10～13]和蔡艳等[14]

对青海高原有过详细报道,山东省报道较少。

山东省济宁市,北依泰山,南傍微山湖,暖温带季风性大陆气候,四季明显,降水较为充沛,常年降水量为89412mm ,境内平均太阳辐射量为

503164kJ /k m 2

,这些自然条件决定了济宁地区独

特的土壤生态环境和该地区土壤放线菌资源的独特性。因此,研究该地区土壤放线菌类群组成及生态分布规律,初步摸清土壤放线菌资源状况,以期为该地区放线菌资源的开发提供依据。

1　材料与方法

111　土壤样品

2005年4月从济宁地区采集土样,取2～20c m 深度的土壤,按覆盖植被类别采5个样品,每

样品采集土样10份,带回实验室风干研磨备用。112　方法11211　放线菌的分离与纯化　采用稀释平板涂抹法纯化[15]

,用高氏1号琼脂培养基培养。分离时,为抑制真菌的生长添加少量重铬酸钾。

11212　鉴定培养基　高氏1号琼脂培养基,淀粉铵琼脂培养基,培养时间为7天。

11213　鉴定方法　用放线菌常规鉴定方法鉴定16]。按1992年阎逊初放线菌分类系统进行归类[17]。采用插片法培养,适时取片用光学显微镜观察形态特征[18]。

2　结果与分析

211　土壤放线菌的数量

从表1可看出,同一土样在两种培养基上的放线菌数量不同,高氏1号培养基分离到的放线菌数量(G)大多高于淀粉铵琼脂培养基的数量(N),G/N>1的土样占总数的80%。不同土样之间放线菌数也存在很大差异,如2号冬青树下土壤放线菌的数量(×104)在高氏1号琼脂和淀粉铵琼脂培养基上分别为9514和10010,与5号小麦土壤的数量分别相差11倍和7倍。大量研究结果表明,土壤中的微生物数量是水、热、植被等环境条件和土壤本身化学性质的综合反映,并且受上述条件影响[14]。

表1　济宁地区不同植被条件下土壤放线菌数量

(×104个/g土)

采样点植被土样号

高氏1号

琼脂培养基(G)

淀粉铵

琼脂培养基(N)

G/N

花园11311053102147

冬青29514100100195

苹果树367010*********

蔬菜4122010520102153

小麦5115010800101144

212　土壤放线菌菌群

21211　花园中土壤放线菌　从表2知,花园土壤放线菌在两种培养基上的分离数和总属数,高氏1号琼脂培养基皆高于淀粉铵琼脂培养基,这由表中的总属数和总数的G/N(1133和2147)可看出。其中,链霉菌属、小单孢菌属、诺卡氏菌属在高氏1号琼脂培养基上分离数皆高于淀粉铵琼脂培养基上的,而马杜拉放线菌属则相反。链霉菌属在两种培养基上的分离菌数皆最高。在高氏1号琼脂培养基上,小单孢菌属和马杜拉放线菌属分离菌数大于淀粉铵琼脂培养基上的,在淀粉铵琼脂培养基上未分离到诺卡氏菌属。

从表2还可知,高氏1号培养基分离到的放线菌每个属的数量(G)大多数高于淀粉铵琼脂培养基上的数量(N),G/N>1的土样约占总数的84%,说明仅用高氏1号培养基就能较真实地反映土壤各属的状况。

表2 花园土壤的放线菌群(×104个/g土)属名

分离菌数

高氏1号琼脂(G)淀粉铵琼脂(N)G/N 链霉菌属Streptomyces1051034103109

小单孢菌属M icromonospora10106101167马杜拉菌属Actinomadura14101310111

诺卡氏菌属Nocardia2100∞总属数431133

总数1311053102147

由表3知,在高氏1号琼脂培养基上的链霉菌类群总数和分离总数皆高于在淀粉铵琼脂培养基上的(G/N分别为1175和1198)。其中,高氏1号琼脂培养基上的粉红孢类群、烬灰类群、金色类群的分离菌数皆高于淀粉铵琼脂培养基上的,而淡紫灰类群、蓝色类群、黄色类群在淀粉铵琼脂培养基上则没有。在高氏1号琼脂培养基上粉红孢类群的分离菌数最高(4010),在淀粉铵琼脂培养基上白孢类群的分离菌数最高。

表3 花园土壤链霉菌各类群(×104个/g土)链霉菌属类群

分离菌数

高氏1号琼脂(G)淀粉铵琼脂(N)G/N

粉红孢类群Roseos porus40103101313

淡紫灰类群Lavendulae8100∞

白孢类群A lbos porus151028100154

蓝色类群Cyaneus3100∞

烬灰类群Cinereus1610210810

金色类群Aureus210110210黄色类群Mazis porus5100∞总类群数741175

总数1051034101198 21212　冬青土壤放线菌　由表4可知,在高氏1号琼脂培养基上放线菌的分离菌总属数和总数高于淀粉铵琼脂培养基上的,其中,链霉菌属、小单孢菌属的分离菌数高于淀粉铵琼脂培养基上的,马杜拉放线菌属、诺卡氏菌属则相反。放线单孢菌属和小多孢菌属在淀粉铵琼脂培养基上没有。这由表中G/N值除马杜拉菌属和诺卡氏菌属小于1外,其余均大于1可看出。

由表5可知,在高氏1号琼脂培养基上的链霉菌类群总数和分离菌总数皆高于在淀粉铵琼脂培养基上的。其中,在高氏1号琼脂培养基上的

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　第4期 司美茹等:济宁市土壤放线菌资源调查研究