酶标仪

合集下载

酶标仪的分类

酶标仪的分类

酶标仪的分类
酶标仪是一种广泛应用于生命科学、医药、环境监测、食品安全等领域的实验设备,主要用于定量和定性分析各种生物分子的含量和活性。

根据其工作原理和应用领域的不同,酶标仪可以分为以下几种类型:
1. 显色型酶标仪:显色型酶标仪可以通过酶催化作用将底物转化为显色产物,从而定量或定性分析样品中目标分子的含量和活性。

常见的显色型酶标仪有多功能酶标仪、单波长酶标仪、双波长酶标仪等。

2. 荧光型酶标仪:荧光型酶标仪可以通过荧光染料与底物结合的方式实现对样品中目标分子的检测,具有高灵敏度、高特异性等优点。

常见的荧光型酶标仪有单荧光酶标仪、双荧光酶标仪、多通道荧光酶标仪等。

3. 化学发光型酶标仪:化学发光型酶标仪可以通过底物与酶的作用发生化学反应,释放出能量,从而产生光信号,实现对样品中目标分子的检测。

常见的化学发光型酶标仪有单光子计数酶标仪、多光子计数酶标仪等。

4. 微量型酶标仪:微量型酶标仪主要用于微量样品的检测,具有高灵敏度、高分辨率等特点。

常见的微量型酶标仪有微量双波长酶标仪、微量多功能酶标仪等。

总的来说,不同类型的酶标仪都有其特点和适用范围,研究者需要根据实际需求选择合适的酶标仪进行实验分析。

酶标仪的使用方法和注意事项

酶标仪的使用方法和注意事项

酶标仪的使用方法和注意事项酶标仪是一种用于检测生物样本中酶的活性的仪器,常用于生物化学、生物医学、生命科学等领域的研究和应用。

下面将介绍酶标仪的使用方法和注意事项。

一、使用方法1.准备工作在使用酶标仪之前,需要先进行一些准备工作。

首先,需要将检测板(通常是96孔板)放入酶标仪中,并将所需的试剂和样本准备好。

其次,需要根据实验的需要设置酶标仪的参数,如波长、温度、时间等。

2.加样和测定加样前,需要将试剂及样本搅拌均匀,然后按照实验方案将其加入到检测板的相应孔中。

加样完成后,将检测板放入酶标仪中,并启动仪器进行测定。

测定完成后,可通过酶标仪的软件进行数据处理和分析。

3.清洗和维护在使用完毕后,需要对酶标仪进行清洗和维护。

首先,需要将检测板从仪器中取出,并用适当的方法清洗和干燥。

其次,需要对酶标仪进行日常的维护和保养,如清洁、校准、更换灯管等。

二、注意事项1.样本准备在进行酶标检测之前,需要对样本进行适当的处理和准备,以确保其质量和稳定性。

例如,需要对样本进行冷冻保存、离心分离、过滤、稀释等操作。

2.试剂和标准品在进行酶标检测之前,需要对所使用的试剂和标准品进行充分的了解和掌握,以确保其质量和稳定性。

例如,需要对试剂的配制、保存和稀释等进行掌握,对标准品的选取和制备进行了解。

3.仪器校准在进行酶标检测之前,需要对酶标仪进行校准,以确保其准确性和可靠性。

例如,需要对仪器的波长、光强、温度等参数进行校准,对仪器的光路、光源等进行定期检查和维护。

4.数据处理和分析在进行酶标检测之后,需要对所得到的数据进行充分的处理和分析,以达到准确、可靠和合理的结果。

例如,需要对数据进行统计、分布、比较等分析,对结果进行解释和说明。

5.安全注意事项在进行酶标检测之前,需要注意安全问题,以保护实验人员的身体健康和生命安全。

例如,需要佩戴适当的防护用品,对实验室环境进行清洁和消毒,对化学品和生物样本进行正确的处理和处置。

酶标仪是一种重要的生物检测仪器,在生物科学和医学领域具有广泛的应用前景。

酶标仪的名词解释

酶标仪的名词解释

酶标仪的名词解释酶标仪(enzyme-linked immunosorbent assay,简称ELISA),是一种用于检测和测定抗原或抗体浓度的分析方法。

它是通过将特定抗原或抗体与飞碟形或平板形的固相材料结合,再将待测样品中的抗原或抗体与此固相材料上的分子相互作用,进而进行分析和测定的一种实验方法。

酶标仪的运作原理:酶标仪的工作原理基于对抗原与抗体结合的特异性反应。

首先,在固相材料上涂覆具有抗原性的分子,使其与待测样品中的抗体发生特异性结合。

之后,通过添加特异性的抗体,将其与原始抗体结合。

此时,如果待测样品中存在目标抗原,那么这些目标抗原会与被涂覆的抗原发生特异性结合,形成抗原-抗体复合物。

然后,在这些复合物中加入酶标志的二抗,以便引入酶的活性。

接下来,通过添加一种酶底物,使酶底物与酶标志结合。

最后,通过测量反应产物的生成量,可以确定待测样品中抗原或抗体的浓度。

酶标仪的种类和应用:酶标仪分为酶标板酶标仪和微孔板酶标仪两种。

1. 酶标板酶标仪:酶标板酶标仪是一种经典的ELISA设备,采用96孔酶标板作为反应载体。

它广泛应用于医学、生物学等领域,可以检测和测定抗体、抗原、荷尔蒙、药物等分子的浓度,以及检测病毒感染、肿瘤标志物、免疫相关疾病等。

酶标板酶标仪具有简便、高通量、高灵敏度等特点,因此受到广泛的关注和应用。

2. 微孔板酶标仪:微孔板酶标仪是一种相对较新的ELISA设备,与酶标板酶标仪相比,它具有更小的体积和更高的自动化程度。

微孔板酶标仪通常配备有自动洗涤系统、温控设备、读取系统等,可以实现更快的反应速度和更精确的数据测量。

与酶标板酶标仪一样,微孔板酶标仪也广泛应用于医学、生物学等领域,成为研究人员进行检测和测定的首选设备。

酶标仪的优势和局限性:酶标仪作为一种常用的实验方法,在许多领域有着广泛的应用。

它具有高特异性、高敏感性和高度可重复性的优点,可以进行快速、准确和大规模的检测和测定。

然而,酶标仪也存在一些局限性,例如需要涵盖多个步骤的操作流程复杂,需要对设备和试剂进行专门的配置和调试,需要使用大量的试剂和材料。

《酶标仪系列》课件

《酶标仪系列》课件
随着生物医药、食品安全等领域的发展,酶标仪市场需求将持续 增长。
技术创新推动行业发展
未来酶标仪的技术创新将进一步推动行业发展,提高检测效率和精 度。
国际化竞争加剧
随着酶标仪市场的不断扩大,国际化竞争将进一步加剧,国内品牌 需加强技术创新和品牌建设。
05
总结与展望
对酶标仪的总结
技术发展
酶标仪在技术上经历了多次突破 ,从最早的机械式到现在的数字 化和智能化,其检测精度和稳定
酶标仪的发展趋势
技术创新
随着科技的不断进步,酶 标仪在技术上不断创新, 如提高检测精度、降低检 测时间等。
智能化发展
酶标仪正朝着智能化方向 发展,如实现自动进样、 自动检测、自动数据分析 等功能。
定制化服务
针对不同行业和客户需求 ,酶标仪厂商提供定制化 服务和解决方案。
酶标仪的前景展望
市场需求持续增长
究提供有力支持。
医学诊断
用于检测各种疾病标志物,如 肿瘤标志物、心血管疾病标志 物等,为临床诊断提供依据。
食品安全检测
用于检测食品中的有害物质、 农药残留等,保障食品安全。
环境监测
用于检测水体、土壤等环境中 的有害物质,为环境保护提供
数据支持。
02
酶标仪系列介绍
酶标仪系列的产品种类
01
02
03
04

清洗反应孔
每次使用后,及时清洗 反应孔,避免残留物影
响检测结果。
检查仪器性能
定期检查仪器各项功能 是否正常,如有异常及
时处理。
存储环境
保持仪器放置在干燥、 无尘的环境中,避免阳
光直射。
酶标仪的常见问题及解决方案
01
02

酶标仪操作规程

酶标仪操作规程

酶标仪操作规程一、引言酶标仪是一种用于测定物质浓度的仪器,其中包括酶标板、酶标板阅读器和相关试剂。

在实验室中,酶标仪广泛应用于分析生物学、生化学以及医学研究领域。

本操作规程将详细介绍如何正确操作酶标仪,以确保实验结果的准确性和重复性。

二、仪器设备准备1. 检查酶标仪是否连接电源并打开电源开关。

2. 保持仪器表面干燥并清洁。

3. 检查仪器槽是否清洁,在需要的情况下清洗槽。

三、试剂及标准品准备1. 按照实验要求准备所需的试剂和标准品。

2. 严格按照试剂说明书进行试剂的稀释,遵循试剂保存要求,并在使用前检查试剂的过期日期。

3. 标准品的浓度应经过准确测量和计算。

四、样品处理1. 准备样品,并确保样品的质量满足实验要求。

2. 根据实验方案选择合适的处理方法,如稀释、加样、取平均等。

3. 严格按照处理方法进行样品处理,确保每个处理步骤的时间和温度控制。

五、酶标板操作1. 将标准品和样品按照实验方案分别加入酶标板的孔中。

2. 确保每个孔中的体积相同,使用多道滴管或自动吸液器来完成这一步骤。

3. 轻轻拍击酶标板以使液体充分混合。

六、试剂添加1. 根据试剂说明书向每个孔中添加相应的试剂。

2. 严格按照试剂的用量添加,确保试剂的均匀分布。

七、测量1. 将酶标板放入酶标仪中并关闭仪器盖子。

2. 打开酶标仪软件,选择相应的实验方案和测量条件。

3. 开始测量并记录每个孔的吸光度值。

4. 重复测量以确保结果的准确性和重复性。

八、数据处理与分析1. 根据实验要求,对测得的吸光度值进行数据处理和分析。

2. 使用合适的软件进行数据处理,如计算平均值、标准差等。

3. 生成所需的报告和图表,以便展示实验结果。

九、清洁与维护1. 在使用完毕后,及时关闭酶标仪,并拔掉电源插头。

2. 清理仪器表面的污垢,可以使用干净的纸巾或软布进行擦拭。

3. 定期进行仪器的维护保养,如更换灯泡、校准仪器等。

十、安全注意事项1. 在操作过程中严格按照试剂的使用说明和安全操作规程进行操作。

酶标仪的操作规程

酶标仪的操作规程

酶标仪的操作规程
《酶标仪操作规程》
一、仪器准备
1. 将酶标仪放置在水平台面上,并连接电源线。

2. 打开酶标仪,待仪器启动完成后进行下一步操作。

3. 检查酶标仪是否连接正确,仪器灯光是否正常。

二、试剂准备
1. 准备好所需的酶标板、酶标板孔板、洗涤缓冲液、标准溶液和样品。

2. 将试剂按照操作手册中的说明配制好,并标注好试剂名称和浓度。

三、操作步骤
1. 将酶标板放置到酶标板孔板上,并标注好每个板孔对应的试剂。

2. 使用移液器向每个板孔中加入标准溶液和样品。

3. 加入洗涤缓冲液,并按照操作手册中的指示进行洗涤步骤。

4. 加入底物液,待反应一定时间后停止反应。

5. 使用酶标仪读取各孔的吸光度值,并记录下来。

四、数据处理
1. 使用酶标仪附带的软件进行数据处理,计算出样品中所含酶的活性。

2. 将数据保存并打印出来,作为实验结果。

五、清洁和关闭
1. 将酶标板和孔板清洗干净,并存放在干燥的地方。

2. 关闭酶标仪,并拔掉电源线,清洁仪器表面。

六、实验记录
1. 实验过程中的详细操作步骤和观察结果都要记录在实验记录表中。

2. 实验完毕后,对实验结果进行分析和总结,并写出实验报告。

以上就是关于酶标仪的操作规程,希望对您有所帮助。

酶标仪 化学发光 荧光

酶标仪 化学发光 荧光

酶标仪化学发光荧光
酶标仪是一种用于检测生物分子的分析仪器,主要应用于生物化学、免疫学、分子生物学等领域。

它可以通过检测光吸收、荧光或化学发光等信号,对样本中的生物分子进行定量或定性分析。

在酶标仪的检测方法中,光吸收、荧光和化学发光是三种常见的检测模式。

光吸收检测是基于物质对光的吸收特性来进行分析的。

在酶标仪中,通过使用特定波长的光照射样本,并检测透过或反射的光强度,可以测量样本中生物分子的浓度或活性。

荧光检测则是利用物质在受到激发光照射后发出的荧光信号来进行分析。

荧光检测具有较高的灵敏度和选择性,常用于检测标记有荧光染料的生物分子。

化学发光检测是基于某些化学反应产生的光发射现象来进行分析的。

在酶标仪中,通过引发化学反应并检测产生的光信号,可以测量样本中特定生物分子的浓度或活性。

这些检测模式各有特点和应用范围,根据不同的实验需求和生物分子的特性,可以选择合适的检测模式进行分析。

酶标仪的应用非常广泛,包括蛋白质定量、DNA/RNA 定量、酶活性检测、药物筛选、免疫学分析等。

它为生物研究、药物开发和临床诊断提供了重要的分析工具。

总的来说,酶标仪结合不同的检测模式,为生物分子的检测和分析提供了高灵敏度、高准确性和高效率的方法,对于生物科学和医学领域的研究和应用具有重要意义。

酶标仪测量原理

酶标仪测量原理

酶标仪测量原理
酶标仪测量原理是通过酶法测定样品中特定物质的浓度。

酶标仪测量原理通常包括以下步骤:
1. 样品制备:将待测样品经过样品前处理步骤,如离心、稀释等,得到适合酶法测定的样品。

2. 反应体系:将样品与特定底物和酶催化剂反应,产生特定的反应产物。

3. 光学测量:酶标仪利用光学技术,如吸光度、荧光、发光等,测量反应体系中形成的反应产物的浓度。

这些测量技术通常通过测量反应体系中可见光或荧光信号的强度来确定浓度。

4. 数据处理:酶标仪将测量得到的信号转化为数字数据,并通过内置的计算机或连接到外部计算机进行数据处理。

测量结果通常是以浓度值或单位活性表示的。

总的来说,酶标仪测量原理是通过测量反应体系中特定产物的浓度来确定样品中特定物质的含量。

该技术具有高灵敏度、高选择性、自动化程度高等优点,广泛应用于生物医学研究、生物化学分析和临床诊断等领域。

680酶标仪使用培训指南

680酶标仪使用培训指南

680酶标仪使用培训指南一、680 酶标仪简介680 酶标仪是一种常用于生物化学、医学、免疫学等领域的实验室仪器,它能够快速、准确地测量样本在特定波长下的吸光度值,从而实现对样本中各种物质的定量分析。

二、仪器的主要部件及功能1、显示屏:用于显示操作界面、测量结果等信息。

2、操作按钮:包括电源开关、菜单选择、确认等按钮,方便用户进行操作。

3、样本架:用于放置待测样本的微孔板。

4、光源:提供稳定的特定波长的光线。

5、检测器:检测透过样本后的光强度,并将其转化为电信号。

三、使用前的准备工作1、环境要求仪器应放置在平稳、无震动、无强电磁场干扰的实验台上。

环境温度应保持在15℃30℃之间,相对湿度应在45% 85%之间。

2、电源连接确保仪器连接到稳定的电源插座,并检查电源线是否完好无损。

3、仪器预热打开仪器电源后,让仪器预热 15 30 分钟,以保证测量的准确性和稳定性。

四、样本准备1、选择合适的微孔板根据实验需求选择 96 孔或 384 孔的微孔板。

2、样本处理对样本进行适当的稀释、提取等处理,确保样本的浓度在仪器的检测范围内。

3、加样使用移液器准确地将处理后的样本加入到微孔板的相应孔中。

五、软件操作1、打开软件在电脑上双击酶标仪对应的软件图标,进入操作界面。

2、新建实验在软件中选择“新建实验”,输入实验名称、样本数量、测量波长等相关信息。

3、微孔板布局设置根据样本的实际布局,在软件中设置微孔板的孔位信息,如空白对照、标准品、样本等。

4、测量参数设置设置测量模式(如单波长、双波长)、测量时间、读数次数等参数。

六、仪器操作步骤1、放入微孔板小心地将加好样并设置好布局的微孔板放入仪器的样本架中。

2、启动测量在软件中点击“开始测量”按钮,仪器将按照设定的参数进行测量。

3、测量过程中的注意事项测量过程中避免震动仪器和打开仪器门。

七、数据读取与分析1、数据读取测量完成后,软件将显示测量结果,包括每个孔的吸光度值。

酶标仪功能

酶标仪功能

酶标仪功能酶标仪(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,简称ELISA)是一种常用的实验技术,用于检测和测量生物样品中特定分子的存在和量。

它结合了酶学和免疫学原理,可以快速、敏感地检测蛋白质、抗体、细胞因子等分子。

酶标仪的主要功能如下:1. 定量分析:酶标仪可以精确地测量样品中特定分子的浓度。

通过与标准曲线比较,可以确定未知样品中分子的浓度。

这种定量分析可以用于医学诊断、药物监测、生物研究等领域。

2. 高灵敏度:酶标仪具有高灵敏度,可以检测到非常低浓度的分子。

这对于检测稀有蛋白质或低丰度的生物标志物非常重要,比如早期癌症标志物、病毒抗体等。

3. 特异性检测:酶标仪可以检测特定的分子,具有很高的特异性。

这是由于ELISA采用了免疫反应,通过特异性反应的抗体与目标分子结合,从而实现准确的检测。

4. 广泛应用:酶标仪可以应用于多个领域,如医学、生物学、环境检测等。

在医学上,ELISA可用于检测传染病(如HIV、肝炎等)、癌症标志物、自身免疫疾病等。

在生物学研究中,ELISA可用于检测细胞因子、蛋白质互作等。

5. 高通量检测:现代酶标仪具有高通量检测的能力,可以同时处理多个样品。

这大大加快了实验速度,提高了效率。

6. 简便易行:ELISA技术相对简单易行,不需要复杂的设备和操作。

只需将样品加入酶标板中,与特异性抗体结合,然后用荧光或酶底物反应来检测。

综上所述,酶标仪是一种功能强大的实验工具,广泛应用于科学研究和临床诊断。

它通过定量分析、高灵敏度、特异性检测等功能,可以快速、准确地测量生物样品中的特定分子。

这不仅对于疾病的早期检测和诊断具有重要意义,也在科研领域提供了有力的支持。

随着技术的不断进步,相信酶标仪的功能将会不断拓展和完善,为科学研究和医学诊断提供更多的帮助。

酶标仪的原理

酶标仪的原理

酶标仪的原理
酶标仪是一种用于测定酶活性的仪器,它利用酶与底物反应产生的产物来测定酶的活性。

酶标仪的原理主要包括底物转化、产物检测和数据分析三个方面。

首先,底物转化是酶标仪原理的第一步。

酶与底物发生特定的化学反应,产生一定的产物。

这个过程是酶活性的体现,也是酶标仪测定的基础。

底物转化的速率与酶的活性成正比,因此可以通过测定底物转化的速率来间接测定酶的活性。

其次,产物检测是酶标仪原理的第二步。

产物的检测是通过特定的化学方法来实现的,常见的方法包括比色法、荧光法和发光法等。

这些方法可以将产物与特定的试剂发生反应,产生可测量的信号。

通过测定产物的信号强度,可以间接测定酶的活性。

最后,数据分析是酶标仪原理的第三步。

通过对产物检测得到的信号进行数据处理和分析,可以得到酶的活性值。

常见的数据分析方法包括标准曲线法、双向酶标仪法和内标法等。

这些方法可以对产物的信号强度与酶活性之间建立数学模型,从而准确地测定酶的活性。

总之,酶标仪的原理主要包括底物转化、产物检测和数据分析三个方面。

通过这些步骤,可以间接测定酶的活性,为生物化学研究和临床诊断提供重要的实验数据。

酶标仪在生命科学领域具有广泛的应用前景,对于促进科学研究和医学诊断具有重要意义。

酶标仪测蛋白实验报告

酶标仪测蛋白实验报告

一、实验目的1. 掌握酶标仪的使用方法。

2. 学习蛋白质定量分析的基本原理和操作步骤。

3. 通过BCA法测定蛋白质浓度,并验证实验结果的准确性。

二、实验原理蛋白质是生物体内重要的生物大分子,其含量的测定对于生物科学研究和生物技术产业具有重要意义。

酶标仪是一种用于检测生物分子浓度的仪器,基于酶催化反应产生的颜色变化来定量分析目标分子。

本实验采用BCA法(比色法)测定蛋白质浓度,其原理是蛋白质与铜离子在碱性条件下发生络合反应,生成紫蓝色复合物,该复合物在特定波长下具有特征性吸收峰,其吸光度与蛋白质浓度成正比。

三、实验材料与仪器1. 实验材料- 蛋白质标准品(如牛血清白蛋白)- 待测蛋白质样品- BCA工作液- 96孔微孔板- 试剂:硫酸铜、硫酸钠、氢氧化钠等2. 实验仪器- 酶标仪- 电子天平- 移液器- 移液枪- 恒温水浴锅四、实验步骤1. 标准曲线制作1.1. 按照试剂盒说明书配置BCA工作液。

1.2. 将蛋白质标准品用去离子水稀释成不同浓度梯度(如0、1、2、4、8、16、32、64、128、256 μg/mL)。

1.3. 将稀释后的标准品分别加入96孔微孔板中,每孔加入100 μL。

1.4. 向每孔中加入100 μL BCA工作液,混匀。

1.5. 将微孔板放入酶标仪,在562 nm波长下测定吸光度值。

1.6. 以蛋白质浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。

2. 样品测定2.1. 将待测蛋白质样品用去离子水稀释成适当浓度。

2.2. 将稀释后的样品分别加入96孔微孔板中,每孔加入100 μL。

2.3. 向每孔中加入100 μL BCA工作液,混匀。

2.4. 将微孔板放入酶标仪,在562 nm波长下测定吸光度值。

3. 结果分析3.1. 根据样品的吸光度值,在标准曲线上查找对应的蛋白质浓度。

3.2. 计算样品的蛋白质含量。

五、实验结果与分析本实验通过BCA法成功测定了蛋白质样品的浓度,结果如下:- 标准曲线的相关系数R²为0.996,说明标准曲线具有良好的线性关系。

《酶标仪使用方法》课件

《酶标仪使用方法》课件

酶标仪的原理
酶标仪通过酶与底物反应产生的颜色变化或荧光变化来检测目标物质。
酶是一种生物催化剂,能够加速化学反应的速率,而底物则是酶作用的 物质。
在酶与底物反应过程中,会产生一种或多种产物,这些产物可以是颜色 变化或荧光变化,通过酶标仪可以检测这些变化并计算出目标物质的浓 度。
酶标仪的应用
01
02
观察测量过程
在测量过程中,应注意观察仪器的 运行状态和样本的反应情况,如有 异常应及时处理。
数据导出与处理
数据导出
测量完成后,应将数据导出到电 脑或其他存储设备中,以便后续
处理和分析。
数据处理
根据实验需求,对导出的数据进 行处理和分析,如计算浓度、绘
制图表等。
整理实验结果
将处理后的数据整理成实验报告 或图表的形式,以便于分析和汇
正确设置参数
在使用酶标仪进行测量前,应根据实验需求正确设置参数,如波 长、光程等。
校准仪器
为保证测量精度,每次使用前应进行仪器校准,确保测量结果的 准确性。
定期保养
应定期对酶标仪进行保养,如清洁表面、检查光源等,以延长仪 器使用寿命。
样品处理注意事项
样品准备
在将样品放入酶标仪测量前,应确保样品已经充分混匀,避免出 现测量误差。
加样操作
01
02
03
准备样本
根据实验需求,准备好待 测样本,并确保样本的浓 度、体积等参数符合酶标 仪的测量要求。
加样操作
按照酶标仪的说明书,使 用吸液管将样本加入到相 应的反应孔中,注意加样 的准确性和一致性。
清洗加样器
为了避免交叉污染,每次 加样操作后应及时清洗加 样器。
参数设置
选择测量模式

酶标仪的使用方法和实验操作技巧

酶标仪的使用方法和实验操作技巧

酶标仪的使用方法和实验操作技巧酶标仪(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)是一种广泛应用于生物学领域的分析方法,能够对特定抗原或抗体进行灵敏、快速的检测。

本文将介绍酶标仪的使用方法和实验操作技巧,帮助读者更好地了解和应用这一技术。

一、酶标仪的基本原理酶标仪基于酶的催化作用来检测分子的存在。

其基本原理是将待测分子与特异性抗体结合,在酶标记抗体的作用下,通过酶反应产生可视化的信号。

常见的酶标记包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP),通过其催化底物的转化,可以得到颜色或荧光信号。

二、酶标仪的使用步骤1. 酶标仪的预热和设置在开始实验前,酶标仪需要预热至合适的温度,并设置所需的波长和光强。

一般情况下,450 nm的波长被广泛应用于酶标仪实验。

2. 样品制备和反应板处理样品的制备包括对待测物体的收集、处理和提取。

蛋白质的浓度测定、稀释和标准曲线的制作也属于这一步骤。

反应板则需根据实验设计选择合适的板型并进行预处理,如洗涤、孵育等。

3. 样品的加样和反应将待测样品、标准品和对照加入准备好的反应孔中,控制好反应时间并按照实验要求进行孵育。

注意避免交叉污染和误操作。

4. 反应终止和底物加入根据实验需要,在合适的时间点将反应终止剂加入反应孔中,阻断酶反应的进行。

接着,加入合适的底物,使颜色或荧光信号表现出来。

5. 数据采集和分析使用酶标仪读取反应孔中的信号,记录吸光度或荧光强度数值。

根据实验设计,采集所需的数据并进行统计和分析,包括标准曲线的拟合、样品浓度的计算等。

三、实验操作技巧1. 严格遵循操作规程在操作酶标仪时,必须遵循严格的操作规程,包括个人防护、培训和实验室安全等。

遵循实验设计、正确操作仪器设备,确保实验的准确性和重复性。

2. 反应条件的优化反应时间、反应温度和底物浓度等条件的优化对于获得准确、灵敏的结果至关重要。

通过试验调整这些条件,找到最佳工作范围,提高实验结果的可靠性。

酶标仪的分类

酶标仪的分类

酶标仪的分类酶标仪是一种常见的生物化学检测仪器,用来检测样品中的特定蛋白质分子含量或酶反应活性。

根据其检测原理和应用领域的不同,酶标仪可以被分为多种不同类型。

在本文中,我们将讨论酶标仪的分类及其主要特点和应用。

1. 吸光度酶标仪吸光度酶标仪是一种基于分子吸收现象的检测仪器。

该仪器通过测量样品在特定波长下的吸光度来确定其中特定蛋白质或酶反应产物的浓度。

吸光度酶标仪通常使用紫外线或可见光谱的波长范围进行测量,有时也会同时使用不同的波长范围以得到更加精确的测量结果。

吸光度酶标仪广泛应用于生物化学和分子生物学领域中的酶活性检测、蛋白质定量、酸碱度测量等范畴。

2. 荧光酶标仪荧光酶标仪是一种基于分子荧光现象的检测仪器。

该仪器通过激发样品中的特定荧光染料,测量其在不同波长下的荧光强度来确定相应的蛋白质或酶反应产物的浓度或活性。

荧光酶标仪通常使用多个不同波长的激发光源和荧光探测器,以提高测量灵敏度和特异性。

荧光酶标仪广泛用于生物学、临床医学、环境科学和食品安全监测中的DNA、RNA、蛋白质等分子的检测和定量。

3. 酶联免疫吸附测定仪(ELISA)酶联免疫吸附测定仪是一种根据抗原抗体反应的原理,测定样品中特定抗原或抗体浓度的仪器。

该仪器通过将样品加入特定的抗原或抗体固相载体(如微孔板),与标记了特定酶的抗体或抗原反应,并通过酶标记化学物质反应产生颜色变化来检测。

酶联免疫吸附测定仪广泛应用于生物医学、兽医学、环境监测和食品安全监测等领域中。

4. 电化学酶标仪电化学酶标仪是一种基于电化学信号的检测仪器。

该仪器将样品中的酶产物或底物转化为电化学信号,并测定其电化学响应的强度和方向来确定其浓度或反应活性。

电化学酶标仪通常适用于测量电子游离的小分子,如氧气、硫化氢和甲烷等气体,以及电子转移的酶反应,如葡萄糖氧化酶、乳酸脱氢酶等。

电化学酶标仪在环境检测、生物燃料电池和生产化学品等领域具有潜在应用前景。

总之,不同类型的酶标仪在不同的生物化学检测领域中发挥着不同的作用。

酶标仪的原理及应用

酶标仪的原理及应用

酶标仪的原理及应用引言酶标仪是一种常用的实验仪器,用于测定化学反应中酶的活性和浓度。

它主要通过测量酶与底物反应产生的颜色变化来进行分析,具有灵敏、准确和高通量的特点,被广泛应用于生物医药、食品安全和环境监测等领域。

本文将介绍酶标仪的基本原理和应用。

一、酶标仪的基本原理酶标仪的基本原理可以分为三个步骤:底物反应、产物检测和数据分析。

1. 底物反应在底物反应阶段,酶和底物发生特定的化学反应,并产生反应产物。

这个化学反应的速率与酶的活性和浓度成正比。

2. 产物检测产物检测是酶标仪的核心步骤,它可以通过光学或电化学方法来量化产物的信号。

常用的光学方法包括吸光度法、荧光法和发光法。

其中,吸光度法是酶标法最常用的方法,通过测量反应溶液的吸光度来确定产物的浓度。

荧光法和发光法则利用反应产物的荧光或发光信号进行定量测定。

3. 数据分析数据分析是酶标仪实验的最后一步,它包括对产物信号的定量测定和数据处理。

常见的数据处理方法包括计算标准曲线、计算酶活性和浓度、绘制图表等。

二、酶标仪的应用酶标仪作为一种常用的实验仪器,在生物医药、食品安全和环境监测等领域有着广泛的应用。

1. 生物医药酶标仪在生物医药领域广泛应用于生物标志物的检测和药物研发。

例如,它可以用于测定血中肿瘤标志物、酶活性和蛋白质浓度,从而实现早期癌症诊断和药物疗效评估。

2. 食品安全酶标仪在食品安全领域用于检测食品中的有害物质和微生物污染。

例如,它可以用于测定食品中的农药残留、重金属含量和细菌水平,以确保食品的安全性。

3. 环境监测酶标仪在环境监测领域用于检测水质和大气污染物。

例如,它可以用于测定水中的重金属、有机物和微生物,以及大气中的颗粒物和气体成分。

4. 其他领域除了上述应用领域,酶标仪还可以应用于植物病害诊断、生物燃料生产和药物筛选等领域。

结论酶标仪是一种重要的实验仪器,它通过测量酶与底物反应产生的信号来分析酶的活性和浓度。

酶标仪的应用范围广泛,可以在生物医药、食品安全和环境监测等领域发挥重要作用。

酶标仪的常见功能

酶标仪的常见功能

酶标仪的常见功能
酶标仪是一种常用的实验仪器,主要用于酶标的相关实验和分析。

以下是酶标仪的一些常见功能:
1. 光吸收测定:酶标仪能够测定不同物质在不同波长的光吸收情况。

这对于测定酶促反应产生的色素变化等非荧光信号很有帮助。

2. 荧光测定:酶标仪可用于测定与荧光染料反应产生的荧光信号。

这对于测量荧光染料标记的分子数量、监测细胞内活性小分子的浓度等非荧光信号很有帮助。

3. 发光测定:酶标仪能测定与化学荧光染料或发光底物反应产生的发光信号。

这适用于较低浓度的目标分子检测福利使用,以及对活性分子的连续监测和定量分析。

4. 温度控制:酶标仪可以通过内置或外接的温度控制系统对样品进行恒温控制。

这对于温度敏感性酶的活性保持很重要。

5. 吸光度校正:酶标仪可以进行吸光度校正,确保测量的准确性和精确性。

6. 数据处理和分析:酶标仪通常配备有自动数据处理和分析功能,包括曲线拟合、数据萃取、浓度计算等,简化实验操作,并提供实验结果的可视化和统计分析。

7. 多通道检测:一些酶标仪具有多个独立的检测通道,可以同
时测量多个样品,提高实验效率。

8. 自动化操作:高级酶标仪还具有自动操作功能,如自动吸孔板加载、液体的自动加样等,使实验操作更加方便和高效。

总之,酶标仪具有多种功能,可以广泛应用于酶标实验、分析和检测等领域,帮助研究人员获得准确、可重复的实验结果。

酶标仪的工作原理

酶标仪的工作原理

酶标仪的工作原理什么是酶标仪?在生物医学领域中,我们经常会使用到酶标仪。

酶标仪可以检测样本中含有多少浓度的物质,通常用于检测蛋白质、DNA或RNA等分子。

酶标仪的工作原理是利用标记在试剂盒中的酶或抗体与检测物质之间的反应生成光学信号。

酶标仪的组成部分通常一个酶标仪由四个主要组成部分构成:1.光源系统2.调制器3.检测器4.读取、分析和处理系统下面我们将详细介绍各个组成部分。

光源系统光源系统是酶标仪的核心部分之一,它提供所需的光源来激发试剂盒中的标记物。

光源常常是氙气短弧灯或卤素灯,能够提供足够的亮度和稳定性来激发试剂盒中的标记物。

调制器调制器用于分离所测量的信号和背景噪声,以确保所读取的信号的准确性和精确性。

一般使用的调制器包括光栅和滤光片等。

检测器常用的检测器是光电二极管(photodiode)或光电倍增管(photomultiplier tube)。

这些检测器接收来自试剂盒中的标记物和光源的反应,并将其转化为电信号。

读取、分析和处理系统酶标仪还包括一个最终的读取、分析和处理系统,以解码和处理从检测器中获得的数据。

这些系统通常包括计算机界面和软件,以帮助分析家和科学家处理和解读数据。

酶标测定法酶标仪的工作原理是通过酶标测定法实现的。

1.抗体或酶标记反应物被喷涂在试管板的表面上2.加入待测物和稀释剂,进行孵育3.洗涤试管板,以去除非特异性背景物4.加入底物,观察并记录反应过程中信号的变化5.工具读取测量数据,并使用计算机软件进行数据分析和解释通过以上的步骤,我们可以得出待测物质的含量,实现一系列检测和诊断任务。

酶标检测与其它检测方法的比较酶标检测法是一种灵敏度高、特异性高、重复性好的检测方法。

和其它分子生物学检测方法相比,酶标检测法有以下几个优点:1.灵敏度高:由于双抗体夹心法和间接法的特殊结构,使得酶标检测法的灵敏度高,可以达到定量检测的水平。

2.易操作:在样品前处理、孵育等方面与放射性测定法相比,酶标检测法操作简单易行。

酶标仪工作原理

酶标仪工作原理

酶标仪工作原理一、引言酶标仪(ELISA)是一种常用的实验技术,用于检测和测定样品中特定分子的存在和浓度。

它的工作原理基于酶的催化作用和免疫学原理,具有高灵敏度和高特异性的特点。

本文将介绍酶标仪的工作原理,包括直接法、间接法、竞争法和间接酶标法。

二、酶标仪的基本原理酶标仪的基本原理是利用酶作为信号放大器,将检测目标物与酶标记的抗体或抗原结合,通过酶的催化作用产生可定量测量的信号。

通常,酶标仪使用底物和显色剂来测量酶的活性或产生的产物,并将其与目标物的浓度相关联。

三、直接法直接法是酶标仪中最简单的方法之一。

它利用酶标记的抗体直接与目标物结合。

首先,在酶标板的孔中涂覆待测物质,然后加入酶标记的抗体。

如果目标物存在,酶标记的抗体将与其结合。

接下来,通过加入底物和显色剂,测量酶的催化反应产生的颜色强度。

颜色的强度与目标物的浓度成正比。

四、间接法间接法是酶标仪中最常用的方法之一。

它利用酶标记的二抗与目标物结合。

首先,在酶标板的孔中涂覆待测物质,然后加入一抗。

一抗与目标物结合后,再加入酶标记的二抗。

二抗与一抗结合形成免疫复合物。

最后,通过加入底物和显色剂,测量酶的催化反应产生的颜色强度。

颜色的强度与目标物的浓度成正比。

五、竞争法竞争法是酶标仪中用于测定抗原或抗体浓度的常用方法。

首先,在酶标板的孔中涂覆固定浓度的抗原或抗体,然后加入酶标记的抗原或抗体样品。

如果样品中含有目标物,它将竞争性地与固定在酶标板上的抗原或抗体结合。

接下来,通过加入底物和显色剂,测量酶的催化反应产生的颜色强度。

颜色的强度与目标物的浓度成反比。

六、间接酶标法间接酶标法是酶标仪中用于检测抗体的常用方法。

首先,在酶标板的孔中涂覆待测物质,然后加入抗原。

抗原与待测物质结合后,再加入酶标记的抗体。

酶标记的抗体与抗原结合形成免疫复合物。

最后,通过加入底物和显色剂,测量酶的催化反应产生的颜色强度。

颜色的强度与待测物质的浓度成正比。

七、总结酶标仪是一种常用的实验技术,通过利用酶的催化作用和免疫学原理,可以检测和测定样品中特定分子的存在和浓度。

PHOMO酶标仪的标准操作程序(SOP)

PHOMO酶标仪的标准操作程序(SOP)

PHOMO酶标仪的标准操作程序(SOP)【目的】规范仪器设备的操作程序,保证酶标仪的正常使用。

【适用范围】本实验室酶联免疫试验的操作。

【操作人员】:本实验室实验人员。

【操作步骤】:1.插上电源,打开酶标仪电源开关(按仪器后面的开关键),打开连接计算机的开关;2.双击计算机上“安图仪器2.6”的图标,此时软件打开,先注册相应的软件信息,然后选择相应的操作人员输入通行密码,进入软件的主操作界面;3.单击“单项设置”,根据试剂说明编写对应的计算公式;4.单击“布局”,根据试剂盒说明设置相应项目的板子布局;5.单击“程序测量”,选择开始测量并选择相应的测量项目和使用的板子布局;6.单击“设定本次测量样品编号”输入起始号码和样品数量。

7.单击“自动生成结果”然后点击确定。

再点击开始按钮。

8.此时仪器处于测量状态,操作人员不能进行其它操作。

9.测量结束,测试结构显示在显示器上。

此时点击“测量”按钮,选择保存测量数据项并输入板子编号(如果有多块酶标板进行测量应加以区别如“-1”)试剂名称、生产日期以及试剂批号并点击确认按钮。

10.单击“测量”选择送检样品录入项,录入相应的标本信息并保存录入内容。

11.单击“查询及打印”按钮,选择样本管理或微板查询,选择需要打印的标本结果并打印。

12.关闭酶标仪电源。

【酶标仪的维护保养】1.平常不用时,拔掉电源插头,盖好防尘罩。

2.使用完毕,一定要拿下测试完的反应板,千万不要将控制板留在载物台上。

3.若有液体溅到载物台或酶标仪外壁,应用湿抹布及时擦去。

4.每次使用完毕用湿抹布擦拭酶标仪,以保持其洁净。

【编制测试程序】具体的程序编制方法请参阅autosoft PHOMO酶标仪操作手册。

(下附操作流程表)此文件只供参考,用户可根据自己的情况进行修改。

酶标仪测量、保存及打印步骤。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

近年来,随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来,多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来,乱花渐欲迷人眼。

除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN,还出现了众多后来者插足此市场,如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。

各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线,特性各不相同,选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱。

本文尝试从用户实际使用的角度,探讨应该如何看待花样繁多的参数特性,希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。

1.滤片Vs光栅多功能酶标仪的分类方法众多,但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。

一般来说,酶标仪可以分为滤光片型和光栅型两大类。

当然也有一些型号,例如Synergy4和EnVision等在一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。

但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,还是想用光栅的时候用光栅,该用滤片的时候用滤片;还有一些实验非用其中一个不可,另一模块实现不了的。

所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起,并没有使两者糅合而产生新的技术突破。

总体来说,滤片技术由于发展已久,配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统,可以实现大部分实验的需要。

目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的,例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔(荧光素,384孔/80ul)。

但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制,不可能满足日益增加的实验类型的检测需要,而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究,所以后来就诞生了光栅型的仪器。

最先推出光栅的是MD公司,其光栅习惯上称为单光栅。

由于光纯度的不足,在光栅的后面又加入了一组带阻滤片,对杂光进行二次过滤,达到了5×10-4的杂光率,基本与纯粹的滤光片系统一致。

后来TECAN又发展出了双光栅技术,通过两次光栅滤光,杂光率降到了10-6。

后来,Thermo、BioTek和PE的部分新款仪器等都使用了类似双光栅技术。

由于激发和发射各用了一组双光栅,此类机器又被称为四光栅型多功能酶标仪。

光栅型酶标仪的推陈出新,使得用户在波长选择上不再受限,而且在杂光率、带宽控制等性能上还超越了滤光片系统。

例如,TECAN公司在2008年底推出使用了第三代四光栅系统的M1000酶标仪,杂光率降到了2×10-7的新低,还实现了带宽2.5~20nm连续可调。

这些都是目前滤光片型酶标仪所不能或者较难实现的。

2.杂光率&波长准确性光栅型滤光系统俨然已经成为了目前通用性多功能酶标仪的主流,多家厂家共同努力,已经把光栅技术推到了历史新高。

在光栅的众多技术参数之中,最关键的无疑就是光栅的杂光率和波长选择的准确性了。

杂光率指得就是光源通过光栅后,得到的光线中,“不需要”的波长的光占所标称波长的光的比例,表征了滤光的纯度。

由于光线干涉、衍射等的复杂性,无论使用滤光片还是光栅,杂光都是不可避免的。

各种滤光技术的本质就是要想办法把杂光尽可能地去掉。

一般来说,滤光片型的杂光率在10-4~10-5之间,光栅型的可以做到10-6~10-7。

由于此类杂光是非特异的,而且会直接进入最后的检测器,所以有多少的杂光就会引入多少的随机误差。

在荧光等检测过程中,由于检测器存在放大效应,杂光率的干扰也会被指数级放大。

因此,杂光率就是一个滤光系统的首要性能指标。

光栅的另一个重要指标就是波长选择的准确性。

因为很多检测是依赖于物质在某个波长的特征图谱。

就像DNA/RNA的OD260浓度测定,实际检测波长偏离260nm几个nm以上的话,OD值与最终浓度之间的数学关系就会发生改变。

因此,一组性能优良的光栅系统,他的波长选择准确性应该是在±0.5~1nm之间。

波长偏离过大有时就会影响到最终结果的准确性。

这两个可谓是光栅甚至滤光片滤光系统最关键的技术参数,直接影响到的是得到数据是否是真正所要测量的结果,是实验结果可靠性的最基本要求。

3.认证>参数在保证检测可靠的基础上,不同仪器的下一个差异就体现在检测的灵敏度上面,这时人们关心的就是仪器能够检测到多弱的信号。

灵敏度涉及了整个光路系统的设计和选料,很难说某一个部件会起决定性作用。

但是有一点,在各种单功能检测项目中,光吸收检测用非放大型的光电二极管、荧光检测用光电倍增管、发光检测用专门设计的单光子计数光电倍增管,这三种不同的检测器是各自检测领域的优先选择。

各单项检测的最优结果都是用相应检测器完成的。

当然也有的仪器出于成本等考虑,用一个检测器兼容多种检测模式,这在一定程度上也能完成实验需求,但是在性能上也会有所牺牲折中,无法实现各项检测都达到最优化。

关于灵敏度的定义和检测标准,每个厂家都有各自的描述,都会说自己是怎样怎样好,很难有一个直观的客观比较。

因此,某些试剂厂家就站了出来,对某些仪器的检测性能提供一个第三方的认证。

比较常见的是发光检测领域里面的Promega公司DLReady认证,荧光检测领域的Invitrogen公司的LanthaScreen系列认证、Cisbio公司的HTRF认证、BellBrook实验室的Transcreener认证等等。

这些认证主要是针对公司提供的某一类型的要求较高的试剂盒,涵盖了对检测仪器的各种性能要求,包括:检测方法是否能用,灵敏度、线性范围、孔间干扰等是否满足要求等等。

如果需要做相关的实验,例如做Luciferase发光检测的就看看仪器是否有DLReady认证、做TR-FRET的就看看HTRF认证、做FP就看看Transcreener认证,如果机器拥有相关的认证,就可以说明该机器在一定程度上能够较好地满足类似检测的各种需求,远比单单比较一个灵敏度参数更能说明问题。

因为一个实验能否做好并不是单单一个灵敏度就能表征的。

需要特别注意的是,LanthaScreen是一个系列的认证,涵盖了FI、FRET、TRF、FP 等多个子项目,不同仪器所通过的子项目是不一样的,需要上Invitrogen网站仔细查询核对。

光栅型的仪器由于新技术近几年才逐渐兴起,受限于技术研发和仪器成本,同一个价格范围内的灵敏度等指标会略差于发展成熟的滤光片机器。

所以,在中档多功能酶标仪领域,拿到了各种认证的光栅型仪器并不多见。

而作为新一代光栅型酶标仪的代表作,TECANM1000已经拿到了全部上述四种认证,而且在灵敏度等单项性能上也已经超越了不少的中高端滤片型酶标仪。

这说明了光栅型酶标仪的研发又进入了一个新的高度,除了在灵活性上取得了无可替代的作用外,还在检测灵敏度等方面也逐渐替代传统的滤光片型酶标仪。

光栅型是科研领域多功能酶标仪的未来主要发展趋势;而滤光片型仪器也正在往单项性能更优的方面改进。

4.比色杯+微量检测除了常规的6~384/1536孔酶标板检测之外,有些仪器还附带了比色杯、微量检测板等的兼容功能。

无论是使用立式比色杯、卧式比色杯还是各种微量检测板,其目的都是给光程不固定的酶标板检测引入一个标准光程的概念。

虽然酶标板检测也能通过光程校正等方式实现10mm光程OD值的换算,但这只是一个数学转换过程,检测误差累积较多,实际使用效果不佳。

引入比色杯和微量检测板后,光吸收的检测光程就被固定在10mm或者0.5mm等的标准长度,OD值换算更加简单和准确。

附带了此类检测功能的酶标仪,相当于除了本身的多功能酶标检测之外,还能替代部分分光光度计的功能,使其功能更加全面,仪器的性价比更高。

5.品牌与售后不同品牌的仪器往往性能侧重点有所不用。

例如,PE公司由于在试剂领域有较深底蕴,他们的酶标仪在配合使用他们的TRF系列检测试剂盒上作了多项优化,因此PE的酶标仪普遍来说在TRF领域会有较多的特色功能和相对较高的性能指标。

而像TECAN,就把研发的重点放在了四光栅的研究方面,近年来相继推出了第二和第三代光栅型多功能酶标仪(M200、M1000),成为四光栅酶标仪领域的领头羊。

而像多功能酶标仪上加入比色杯、微量检测板等功能也是TECAN从用户角度考虑作出的技术创新,后来此类技术都成为了Thermo、BioTek等品牌纷纷仿效的对象。

最后,无论是一台多好的酶标仪,脱离了良好的售后服务体系也是难以正常运作的。

今年,各家厂商都在中国国内设立了办事处甚至亚太区总部,有些产品还专门研发了中文版的软件和说明书。

这都说明了厂家对中国市场的重视。

而正因为这种重视,无论是厂家直销还是选择代理分销,都会对国内的售后服务提出各自的要求和期望,最基本的就是普及仪器的应用工程师和维修工程师网络体系。

可以说,国内的各大城市里面,基本已经做到了部分品牌总有一个工程师在你身边。

选购之前多与工程师交流,充分了解各家的性能特长和售后情况,反复对比,总能找到最适合自己需要的一款多功能酶标仪。

荧光分析技术是一种强大的分析手段,广泛地应用在生物学研究、农业科学、食品和环境科学以及临床检验工作中,目前市场市场上有多种支持荧光检测功能的多功能酶标仪,如TECAN(M1000,M200等)、Thmeral(Varioskan Flash)、Bio-tek(Synergy 2,Synergy 4等、MD(M2, M5)等多个厂商出品的多功能酶标仪都可以应用于荧光检测。

1.概述常温下,荧光生色团分子处于基态最低振动能级,处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态,激发态不稳定,将很快重新衰变回到基态,衰变过程中释放的能量以光的形式释放出来,产生发光现象。

分子发光包括荧光,磷光,化学发光,生物发光等。

由于发光物质不同,荧光有分子荧光和原子荧光之分,分子荧光为带光谱,原子荧光为线光谱,通常所说的荧光为分子荧光。

通过测定所发射荧光的特性和强度,可以对物质进行定性、定量分析。

2.荧光检测技术2.1荧光强度(FI)荧光强度与荧光物质的浓度成正比,这是荧光分析法是量分析的依据。

在生物学上的应用非常广泛,可以进行生物大分子定量,酶活性分析,荧光免疫分析,细胞学分析(细胞增殖,细胞毒理,细胞吸附等)和分子间相互作用。

FI检测在细胞凋亡检测中的应用Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。

Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。

但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。

活化的Caspase-3能够特异切割D1E2V3D4-X底物,水解D4-X肽键。

相关文档
最新文档