液相色谱仪常用检测器的种类
高效液相色谱法所用的检测器
高效液相色谱法所用的检测器
高效液相色谱法通常使用以下检测器：
1. 紫外光吸收检测器（UV检测器）: 这是最常用的检测器之一。
它利用样品分子在特定波长下吸收的紫外光的数量来检测分离出来的化合物。
2. 荧光检测器:此检测器利用分离出来的化合物的荧光强度来检测分离出来的化合物。
这可以使它有效地检测探测极小浓度的化合物。
3. 电导检测器: 此检测器通过检测样品中离子的电导率来检测分离出来的化合物。
这种检测器通常用于离子交换色谱。
4. 质谱检测器（MS检测器）：在某些情况下，需要识别和定量化合物。
在这种情况下，使用质谱检测器非常有用。
它将化合物的分子质量与一个反应谱库进行比较，以进行准确的定量和鉴定。
5. 折射率检测器（RI检测器）: 检测样品分子与溶剂的差异折射率。
该检测器对于不具有紫外吸收或荧光的化合物是很有用的。
不同液相检测器的区别
不同液相检测器的区别公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种，有什么区别高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达1ng，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似，实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池，一个作参比，一个作测量用，光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，无信号输出。
当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，这时有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。
局限：流动相的选择受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相，每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector，PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器，是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件，构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号，然后对二极管阵列快速扫描采集数据，得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
液相色谱仪各种检测器的应用范围
液相色谱仪各种检测器的应用范围HPLC中常用的检测器分有如下几种，紫外吸收检测器（UVD)、二极管阵列检测器(PDAD）、荧光检测器（FLD）、示差折光检测器（RID）、蒸发光散射检测器（ELSD）、质谱检测器(MSD）等.下面就分别介绍简单介绍一下。
光学类检测器1、紫外吸收检测器（UVD）是目前HPLC中应用最广泛的检测器.它的主要特点是灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度变化不敏感，可用于梯度洗脱。
它要求被检测样品组分有紫外吸收,属于选择性检测器。
2、二极管阵列检测器（PDAD)是20世纪80年代才出现的一种光学多通道检测器，它可以看作是UVD的一个分支。
在对每个洗脱组分进行光谱扫描,经计算机处理后，得到光谱和色谱结合的三维图谱。
其中吸收光谱用于定性（确证是否是单一纯物质)，色谱用于定量，常用于复杂样品(如生物样品、中草药）的定性定量分析.3、荧光检测器（FLD）同样属于选择性检测器，其灵敏度在目前常用的HPLC检测器中是最高的，应用也较多,仅次于UVD。
它适用于能激发荧光的化合物.很多与生命科学有关的物质，如氨基酸、胺类、维生素、甾族化合物及某些代谢药物都可以用荧光法检测。
荧光检测器在生物样品痕量分析中很有用，尤其在用荧光衍生后，可以检测很微量的氨基酸和肽.通用型检测器1、示差折光检测器(RID）是一种通用型检测器，只要被测组分与洗脱液的折光指数有差别就可使用。
生命科学中常遇到各类糖类化合物,没有紫外吸收，一般常用示差折光检测器。
它的通用性比UVD广，但灵敏度要低,对温度变化敏感，并与梯度洗脱不相容,因而限制了它的使用.2、蒸发光散射检测器(ELSD）也是一种通用型的检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品,而不需要样品含有发色基团。
ELSD的响应值与样品的质量成正比,因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物.ELSD灵敏度比RID高，对温度变化不敏感，基线稳定,可用于梯度洗脱。
现在ELSD已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测.3、质谱检测器（MSD）是另一种通用型检测器，在灵敏度、选择性、通用性及化合物的分子量和结构信息的提供等方面都有突出的优点。
检测器的种类及选择方法
荧光检测 fluorescence and (b) chemiluminescence profiles of HRP-immunolabeled GFP.
电化学检测器(ECD)
电化学检测器是测量物质的电信号变化，对具有氧化还原 性质的化合物，如含硝基、氨基等有机化合物及无机阴、阳 离子等物质可采用电化学检测器。包括极谱、库仑、安培和 电导检测器等。前三种统称为伏安检测器，用于具有氧化还 原性质的化合物的检测，电导检测器主要用于离子检测。其 中安培检测器(AD)应用较广泛，更以脉冲式安培检测器最为 常用。 原理：在两电极之间施加一恒定电位，当电活性组分经过 电极表面时发生氧化还原反应(电极反应)，电量(Q)的大小符 合法拉第定律Q＝nFN。因此，反应的电流(I)为：I＝nFdN／ dt，式中n为每摩尔物质在氧化还原过程中转移的电子数，F 为法拉第常数，N为物质的摩尔数，t为时间。当流动相的流 速一定时，dN／dt与组分在流动相中的浓度有关。
紫外检测器(UV)
The data showed that glucuronidation of the 3- and 40-hydroxyls resulted in band I λmax hypsochromic shifts (or blue shift) of 13-30 and 5-10 nm, respectively. Glucuronidation of the 5-hydroxyl group caused a band II λmax hypsochromic shift of 5-10 nm. In contrast, glucuronidation of the 7-hydroxyl group did not cause any λmax change in band I or II λmax, whereas glucuronidation of the 6hydroxyl group did not cause predictable changes in λmax values. The paper demonstrated for the first time that a rapid and robust analysis method using λmax changes in online UV spectra can be used to pinpoint region-specific glucuronidation of flavones and flavonols with hydroxyl groups at the 40-, 3-, 5-, and/or 7-position(s).
液相色谱仪结构
液相色谱仪结构
液相色谱仪的结构通常包括以下几个主要部分：
1. 液相色谱柱（对流相）：液相色谱柱是液相色谱仪的核心部件，用于分离样品中的化合物。
液相色谱柱通常由不同的材料制成，如不锈钢、玻璃、陶瓷或石英等，并涂覆有吸附剂或多孔填料。
2. 泵：液相色谱仪常用的泵是高压恒流泵，用于将溶液以预定的流速送入色谱柱中。
泵的高压稳定性和流速范围都是液相色谱分离的关键因素。
3. 注射器：注射器用于将待测样品溶液固定容量地输入液相色谱柱。
常见的注射器有手动注射器和自动进样器。
4. 柱温箱：柱温箱用于控制液相色谱柱的温度，保持柱温稳定，以提高色谱分离的准确性和重复性。
5. 检测器：液相色谱仪常用的检测器有紫外可见光检测器、荧光检测器、电化学检测器等。
检测器用于监测和记录色谱柱出口的化合物信号强度，并进一步进行定量和定性分析。
6. 数据处理系统：液相色谱仪常配备有数据处理系统，用于采集和处理检测器输出的信号，并进行色谱峰的峰面积和峰高计算、峰识别和峰定量等操作。
此外，液相色谱仪还可能包括其他辅助装置，如脱气器、洗脱剂泵、排气装置等，以提高柱的使用寿命和分离效果。
液相色谱仪内部结构
液相色谱仪内部结构
液相色谱仪是一种常用的分析仪器，其内部结构包括以下几个主要部分：
1. 进样系统：进样系统是液相色谱仪的入口，它负责将待测样品引入到色谱柱中。
进样系统通常包括进样针、进样口和进样泵等部件。
2. 色谱柱：色谱柱是液相色谱仪的核心部件，它是由一根装填有固定相的管子组成。
固定相是色谱柱中的主要组成部分，它能够根据不同物质的分子结构和性质进行分离。
3. 检测器：检测器是液相色谱仪的出口，它负责检测色谱柱中流出的组分。
检测器通常包括紫外-可见光检测器、荧光检测器、电导检测器等。
4. 流动相：流动相是液相色谱仪中流动的液体，它负责将待测样品带入色谱柱中进行分离。
流动相通常是由水和有机溶剂组成的混合物。
5. 控制系统：控制系统是液相色谱仪的指挥中心，它负责控制整个实验过程，包括进样、分离、检测等环节。
控制系统通常包括电脑、软件和硬件等部件。
以上是液相色谱仪内部结构的主要部分，当然还包括其他一些辅助部件，例如真空泵、空气泵、输液泵等。
在使用液相色谱仪时，需要正确地操作和维护这些部件，以确保仪器的稳定性和准确性。
高效液相色谱仪组成及检测器种类优秀PPT
㈠紫外光度检测器
HPLC仪器结构示意图
⒈作用原理 缺点是对温度变化敏感，不能用于梯度淋洗。
一类是外梯度装置（又称低压梯度），流动相在常温常压下混合，用高压泵压至柱系统，仅需一台泵即可。 一类是内梯度装置（又称高压梯度），将两种溶剂分别用泵增压后，按电器部件设置的程序，注入梯度混合室混合，再输至柱系统。
• 恒压泵是保持输出压力恒定，而流量随外 界阻力变化而变化，如果系统阻力不发生 变化，恒压泵就能提供恒定的流量。
3. 梯度洗脱装置
梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两 种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改 变它们之间的比例，从而使流动相的强度、 极性、pH值或离子强度相应地变化，达到 提高分离效果，缩短分析时间的目的。
通常使用耐高压的六通阀进样装置,其结构如图所示：
三、分离系统
色谱柱是液相色谱的心脏部件，它包 括柱管与固定相两部分。柱管材料有玻璃、 不锈钢、铝、铜及内衬光滑的聚合材料的 其他金属。
柱管材料：耐腐蚀耐压 内径：2.0、3.0、4.1、4.6mm 长度：5、10、15、25cm等 固定相：颗粒细、圆、均一、刚性强
仅用弱溶剂
仅用强溶剂
梯度洗提
梯度洗脱装置分类
一类是外梯度装置（又称低压梯度）， 流动相在常温常压下混合，用高压泵压至柱 系统，仅需一台泵即可。
一类是内梯度装置（又称高压梯度）， 将两种溶剂分别用泵增压后，按电器部件设 置的程序，注入梯度混合室混合，再输至柱 系统。
二、进样系统
进样系统包括进样口、注射器和进样阀 等，它的作用是把分析试样有效地送入色谱 柱内填充物和分离柱完全一样，这样可使 淋洗溶剂由于经过前置柱为其中的固定相 饱和，使它在流过分离柱时不再洗脱其中 固定相，保证分离技的性能不受影响。
液相色谱仪氘灯参比和检测能量
液相色谱仪氘灯参比和检测能量液相色谱仪（Liquid Chromatography，简称LC）是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
在液相色谱仪的使用过程中，氘灯参比和检测能量是两个重要的概念和参数。
本文将对液相色谱仪氘灯参比和检测能量进行详细介绍。
一、氘灯参比氘灯参比是液相色谱仪中常用的参比方法之一。
氘灯是一种特殊的光源，其发出的光具有特定的波长和能量。
在液相色谱仪中，通过将氘灯的光引入色谱仪系统，可以用来校准检测器的波长和能量。
氘灯参比的原理是利用氘灯发出的特定波长的光与样品溶液中的化合物发生相互作用，从而确定检测器的波长和能量。
在进行氘灯参比时，需要将氘灯的光引入色谱仪系统，并通过调节仪器参数，使得氘灯发出的光与样品溶液中的化合物发生相互作用。
通过比较氘灯参比和样品检测的结果，可以确定检测器的波长和能量是否准确。
氘灯参比的优点是简单易行，可以快速校准检测器的波长和能量。
然而，氘灯参比也存在一些限制，比如氘灯的光强度会随着时间的推移而逐渐减弱，需要定期更换氘灯。
此外，氘灯参比只能校准检测器的波长和能量，对于其他仪器参数的校准并不适用。
二、检测能量在液相色谱仪中，检测能量是指检测器对样品溶液中化合物的吸收或发射能力。
检测能量的选择对于液相色谱分析的准确性和灵敏度具有重要影响。
液相色谱仪中常用的检测器包括紫外检测器（UV Detector）、荧光检测器（Fluorescence Detector）、质谱检测器（Mass Spectrometer）等。
不同的检测器对于不同的化合物具有不同的检测能量要求。
在选择检测能量时，需要考虑样品溶液中化合物的吸收或发射特性。
比如，紫外检测器适用于吸收紫外光的化合物，荧光检测器适用于发射荧光的化合物，质谱检测器适用于分析化合物的质量和结构等。
此外，检测能量的选择还需要考虑分析的目的和要求。
比如，如果需要分析低浓度的化合物，需要选择较高的检测能量以提高灵敏度；如果需要分析多种化合物，需要选择适当的检测能量以避免干扰。
各种液相色谱检测器介绍
各种液相色谱检测器介绍各种液相色谱检测器介绍液色迷人/紫外吸收检测器ultraviolet absorption detector紫外吸收检测器ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器（UV），是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。
因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质，所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器，几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。
它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。
其检测灵敏度在mg/L至mg/L范围。
可见光检测器visible light detector可见光检测器visible light detector 又称分光光度检测器，是基于溶质分子吸收可见光的原理设计的检测器。
能够直接采用可见光检测的溶质不是很多，而且多数灵敏度也不高，但采用具有高摩尔吸光系数的有机试剂（配位体和螯合剂）作为衍生化试剂进行柱前或柱后衍生操作的衍生化光度检测法是相当有用的，特别是在金属离子配合物液相色谱中的应用是相当成功的。
低压梯度low-pressure gradient低压梯度low-pressure gradient 又称外梯度，是在低压状态下完成流动相强度调整的梯度装置。
只需一个高压泵，与等度洗脱输液系统相比，就是在泵前安装了一个比例阀，混合就在比例阀中完成。
因为比例阀是在泵之前，所以是在常压（低压）下混合之后再增压输送到色谱柱的。
蒸发光散射检测器克服常见的HPLC检测难题虽然阵法光散射检测器(Evaportive light Scattering,ELSD)已经开发生产15年，但是对于许多色谱工作者来说，它仍是一个新产品。
第一台ELSD是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的，并在八十年代初转化为商品，八十年代以激光为光源的第二代ELSD面世。
高效液相色谱法考试答案
高效液相色谱仪试卷满分100分一、填空题共52分,每空2分1、高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统等五大部分组成.2、拖尾因子T用于评价色谱峰的对称性,除另有规定外,T应在0.95-1.05之间.3、梯度洗脱装置分为两类：一类是外梯度装置又称低压梯度流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台泵即可.安捷伦液相,另一类是内梯度装置高压梯度.将两种溶剂分别用泵增压后,按电器部件设置的程序,注入梯度岛津液相.4、如色谱柱需长期保存,反相柱可以贮存于甲醇或乙腈中,正相柱可以贮存于经脱水处理后的正己烷中.保存时要旋紧柱堵头防止有机溶剂挥发导致色谱柱填料干裂、脱落.5、气泡空气会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡.6、高效液相色谱进样针：应选用液相专用的平头针.流动相pH值应控制在2-8之间.7、将吸滤头分别放入脱气后的流动相中,旋转排液阀,排液5min；排液结束后应先更改低流速再旋紧排液阀,避免压力过大冲坏色谱柱.8、以硅胶为载体的键合固定相的使用温度通常不超过40°C,为改善分离效果可适当提高色谱柱的使用温度,但不宜超过60°C.9、亲水性固定液常采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定相的极性,称为正相液液色谱法,极性柱也称正相柱.若流动相的极性大于固定液的极性,则称为反相液液色谱,非极性柱也称为反相柱.组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反.10、高效液相色谱法常用的检测器类型有紫外检测器、示差折光检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器、光电二极管阵列检测器等.任意写4种二、名词解析共16分,每空4分1、基线：是在操作条件下,没有组分流出时的流出曲线.2、保留时间：是从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间间隔,即从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔.3、色谱流出曲线：是由检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线,又称为色谱图4、梯度洗脱：就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例,从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化,达到提高分离效果,缩短分析时间的目的.三、选择题共16分,每空2分1、当流动相使用含有缓冲盐时,关机之前应对流路如何进行的清洗BA、不需要清洗,直接关机B、先用10%甲醇水冲60min,再用100%甲醇冲洗30min以上,最后进行关机C、先用100%甲醇冲洗60min以上,再用10%甲醇水冲30min后关机D、使用90%甲醇冲洗60min后关机2、在液相色谱法中,提高柱效最有效的途径是DA、提高柱温B、降低板高C、降低流动相流速D、减小填料粒度3、在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是BA、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置4、在液相色谱中,某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力CA、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D、组分与组分5、下列用于高效液相色谱的检测器,D检测器不能使用梯度洗脱.A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器6、液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜BA、0.5μmB、0.45μmC、0.6μmD、0.55μm7、在液相色谱中,不会显着影响分离效果的是BA、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类8、在高效液相色谱流程中,试样混合物在C中被分离.A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器四、简答题共16分,每空8分1、反相色谱柱的冲洗方法.对于反相色谱柱,如使用缓冲液或含盐溶液作为流动性,在试验结束后,应用10倍柱体积如150mm柱长,约15ml的低浓度甲醇/乙腈-水溶液10%-20%冲洗,使色谱柱内的盐完全溶解洗脱出,再用较高浓度的甲醇/乙腈-水溶液50%冲洗,最后用高浓度的甲醇/乙腈-水溶液80%-100%冲洗,使色谱柱中的强吸附物质冲洗出来.如流动相中没有盐溶液,只是甲醇/乙腈-水溶液小于80%,可直接用高浓度的甲醇/乙腈-水溶液80%-100%冲洗.2、为什么作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤、脱气若流动相中所含有的空气不除去,则流动相通过柱子时其中的气泡受到压力而压缩,流出柱子进入检测器时因常压而将气泡释放出来,造成检测器噪声增大,使基线不稳,仪器不能正常工作,这在梯度洗脱时尤其突出.。
仪器分析技术w6202-2高效液相谱仪常用检测器的分类及工作原理和应用
高效液相色谱仪常见检测器分类及工作原理和应用
主讲教师：长春职业技术学院 王磊
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检测器的分类 常用检测器的工作原理及应用
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1
检测器的分类
高效液相色谱仪常用检测器分类及工作原理和应用
— 4—
高效液相色谱仪常用的检测器
主要特点
池体积可制作的很小，检测后不破坏杨品， 可用于制备
灵敏度比紫外检测器高，噪音低，线性范围 宽，适用梯度洗脱及制备色谱；紫外吸收大 的溶剂不能做流动相
易受背景荧光、pH和溶剂的影响，适用于痕 量分析
可检测所有物质，不适合微量分析
蒸发光散射检测器 ELSD 纳克级激光计数检测器NQAQ
任何挥发型低于流动想的样品均能 被检测
高效液相色谱仪常见检测器分类及工作原理和应用
— 14 —
常见检测器的工作原理及应用
荧光检测器的应用
环境中的污染物
– 多环芳烃(PAH)，多酚， 氨基甲酸酯等
食品、饮料 – 食品中的毒素；例如：黄 曲霉毒素
– 染料 – 维生素及衍生氨基酸 生物技术及制药
多环芳烃（PAH）
H3C CH3
CH3
— 13 —
常见检测器的工作原理及应用
荧光检测原理
原理：发荧光的化合物吸收光使其分子达 到激发态，当其返回到基态时发射光的现象即 荧光。
检测过程：由光源发出的光，经激发光单 色器后，得到所需波长的激发光。经过样品池 被样品吸收，并使其被激发后发射出荧光。再 经选择发射波长的单色器分光后，单一波长的 发射光波被送至检测器进行检测，吸光强度与 激发光强度成正比。
紫外可见吸收检测器
简述高效液相色谱仪的组成及hplc
简述高效液相色谱仪的组成及hplc
高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）由以下几个部分组成：
1. 柱：用于分离样品中的化合物，并且根据化合物的特性选择不同种类的柱。
常见的柱有反相柱、离子交换柱、凝胶柱等。
2. 注射器：用于将样品注入到柱中进行分离。
注射器通常由不锈钢或者特殊合金制成，具有高耐腐蚀性和高精度。
3. 洗脱剂泵：用于将洗脱剂（溶剂）从储存瓶中输送到柱中，以实现样品的分离。
洗脱剂泵具有精确的流量控制和稳定的压力输出。
4. 检测器：用于检测样品在柱中流过时的信号变化，生成色谱图。
常用的检测器有紫外-可见光检测器、荧光检测器、电导
检测器等。
5. 样品进样系统：负责将待测试的样品进入注射器，并进行快速、精确的进样操作。
6. 数据采集和处理系统：用于采集和处理检测器所获得的信号数据，并将其转化为色谱图进行分析和解释。
在HPLC的运作过程中，样品经过进样系统进入注射器后，
通过洗脱剂泵送入柱中进行分离。
样品在柱中经过相互作用以及不同程度的吸附、分配等过程，不同成分以不同速度通过柱，
从而实现分离。
在柱流出时，通过检测器进行信号检测，生成相应的色谱图，通过数据采集和处理系统进行分析和解释。
HPLC是一种高效、精确的色谱分离技术，广泛应用于各种样品的分离与测定。
高效液相色谱-检测器
D
氘灯
光门
波
暗盒
长
调
节
杆
凹面光栅
半透镜
光电池（测量） 流通池
光电池（参比）
《紫外/可见光检测器系统原理图》
单
光源
色
器 步进电机
半透反光镜
变压器
交流电源
键盘
直流 电源
冷却风机
显示屏
检测池
参比池
光 /电转换
CPU
前置放大器
A/D
时钟
并行口
讯号输出 (积分/记录)
局限：对紫外吸收差的化合物如不含不饱和键 的烃类等灵敏度很低。
➢1、特点： 灵敏度比紫外检测器高 ，噪音 低 ，线性范围宽 ，对流速和温度的波动不 灵敏，适用于梯度洗脱及制备色谱。
原理与结构：检测器的接收是由一组光电二极管（数量由 35～1024个不等）接收，并转换为电信号。光电二极管的 排列（数字分辨）和狭缝宽度（光学分析）决定了检测器的 全波长分析能力。还能获得色谱分离组分的三维光谱色谱图。
原理与结构：由光源发出的光，经激发光单色 器后，得到所需波长的激发光。通过检测池的 激发光部分被样品吸收，并使其被激发后发射 出荧光。在经选择发射波长的单色器分光后， 单一波长的发射光被送至光电检测器进行检测。 由于吸光强度与激发光强度成正比，光源应具 有高强度、连续、平滑、稳定的辐射输出功能。
结构图
流动相的选择受到一定限制，紫外吸收大的溶 剂不能做流动相。每种溶剂都有截止波长，当 小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的 透光率降至10%以下，因此，流动相的截止波 长不能大于紫外吸收检测器的工作波长。
光电二极管阵列检测器
(photodiode array detector， PDA )
高效液相色谱检测器的种类及特点
一、概述高效液相色谱（HPLC）是一种常用的分析化学技术，广泛应用于化学、生物、医药和食品等领域。
在HPLC技术中，检测器是至关重要的一部分，它负责检测样品中化合物的浓度，并将其转化为可读的信号输出。
本文将对HPLC检测器的种类及特点进行详细介绍。
二、紫外-可见光（UV-Vis）检测器1. 原理：UV-Vis检测器利用化合物中的紫外或可见光吸收特性来检测化合物。
2. 特点：1）广泛适用：UV-Vis检测器适用于大多数有机化合物和许多无机化合物的分析。
2）灵敏度高：对于绝大多数有机化合物，UV-Vis检测器的灵敏度较高。
3）简单易用：UV-Vis检测器的操作相对简单，适合实验室常规分析。
三、荧光检测器1. 原理：荧光检测器利用化合物在受激光照射下产生荧光的特性来检测化合物。
2. 特点：1）高灵敏度：荧光检测器对于有荧光活性的化合物具有极高的灵敏度。
2）特异性强：由于荧光本身具有较高的特异性，荧光检测器可以用于分析中对混杂物的忽略。
3）应用广泛：在生物学、医学和环境领域，荧光检测器得到了广泛的应用。
四、蒸发光散射检测器1. 原理：蒸发光散射检测器通过样品与蒸发后的溶剂之间的差异来检测化合物。
2. 特点：1）通用性强：蒸发光散射检测器对于大多数非吸收性化合物都具有较好的检测能力。
2）无需色谱柱：相比于其他检测器，蒸发光散射检测器可以不需要色谱柱，适用于高分子化合物的检测。
3）灵敏度较低：蒸发光散射检测器的灵敏度通常较低，需要较高浓度的样品才能进行检测。
五、质谱检测器1. 原理：质谱检测器通过将化合物转化为离子，并对离子进行质量分析来检测化合物。
2. 特点：1）高分辨率：质谱检测器具有极高的分辨率，可以准确确定化合物的质荷比。
2）特异性强：质谱检测器对于复杂混合物的成分分析具有很强的特异性。
3）操作复杂：相比于其他检测器，质谱检测器的操作和维护较为复杂，需要专业的操作人员。
六、综述HPLC检测器种类繁多，每种检测器都有其特定的适用场景和优势。
液相色谱仪的基本构造和各部分作用
液相色谱仪的基本构造和各部分作用液相色谱仪是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
它通过将待测样品溶解在流动相中，利用固定相对溶质进行分离和分析。
液相色谱仪的基本构造和各部分作用对于了解其工作原理和性能非常重要。
本文将围绕液相色谱仪的基本构造和各部分作用展开阐述。
一、基本构造1.1 主体部分液相色谱仪的主体部分包括进样器、柱温箱、检测器和数据处理系统。
进样器用于将待测样品引入色谱柱系统，柱温箱用于控制色谱柱的温度，检测器用于检测溶质的浓度和组成，数据处理系统用于数据的采集与分析。
1.2 流动相传递系统流动相传递系统由溶剂瓶、输液泵、进样阀和色谱柱等组成。
溶剂瓶用于存储流动相溶剂，输液泵用于将溶剂从溶剂瓶中输送至色谱柱，进样阀用于控制待测样品的输入，色谱柱用于溶质的分离。
1.3 控制系统控制系统包括温度控制、流量控制、压力控制和信号采集等功能。
通过对这些参数的精确控制，可以实现对色谱分离过程的精确控制和数据采集。
二、各部分作用2.1 进样器进样器的作用是将待测样品引入色谱系统，并确保样品的准确、快速输入。
进样器通常分为自动进样器和手动进样器两种类型，能够满足不同实验需求。
2.2 柱温箱柱温箱的作用是控制色谱柱的温度。
适当的温度可以提高分离效率和减少分离时间，对于一些高温或低温敏感的样品分析也有重要作用。
2.3 检测器检测器是液相色谱仪的核心部件，主要用于检测溶质的浓度和组成。
常见的检测器有紫外-可见检测器、荧光检测器、电化学检测器等，不同的检测器适用于不同类型的溶质。
2.4 数据处理系统数据处理系统用于数据的采集与分析。
它能够实现对色谱分离过程中产生的数据进行实时采集和处理，提高数据的准确性和可靠性。
2.5 流动相传递系统流动相传递系统起着输送溶剂和样品的作用，是保证液相色谱分离正常进行的重要组成部分。
其中输液泵的性能直接影响分离的准确性和稳定性。
2.6 控制系统控制系统通过对温度、流量、压力等参数的控制，实现对色谱分离过程的精确控制和数据采集。
色谱检测器的分类介绍
色谱检测器的分类介绍色谱技术是一种常用于化学分析的手段，它主要基于样品分子不同的亲和性和不同的性质，通过分离来满足分析需求。
而色谱检测器的作用则是将色谱分离后的化学物质的特征信息转换为检测信号，在分析过程中起到至关重要的作用。
在实际应用中，不同种类的色谱检测器根据其原理、使用范围以及性能特点等方面进行了分类，本文就对其进行简单介绍。
1.气体色谱检测器气体色谱检测器是一种常用的检测单元，其适用于气相色谱仪中检测许多不同类型的化合物。
常见的气体色谱检测器包括热导检测器、电化学检测器、火焰离子化检测器、热解吸质谱检测器和金属离子检测器等。
①热导检测器：指使用导热率随化合物浓度变化而变化来检测气相色谱中的化合物。
这种检测器可以对大多数非极性有机物具有良好的灵敏度，非常适合于测定有机化合物的含量。
但是，它并不适用于所用化合物具有相似导热率的样品分析。
②电化学检测器：可以检测固体、液体和气体样品中各种有机和无机物质。
在检测器中，分子被氧化或还原成电子，实现了转化。
这样就产生了电流，说明化合物的浓度。
③火焰离子化检测器（FID）：是一种常见的检测器，基于金属离子检测器，用于检测有机分子的氢、氧原子含量。
FID在检测硝基芳香化合物、有机酸、醇、酮、醛、烯酮、醚等方面均表现出色。
2.液相色谱检测器液相色谱检测器主要用于测定水相中的有机化学物质，包括药物、农药、天然产物和生物大分子等。
常见的液相色谱检测器包括光学检测器、荧光检测器和电化学检测器等。
①光学检测器：常用的有紫外-可见光谱（UV-Vis）检测器。
光学检测器基于化合物的吸收光谱进行检测。
化合物与特定范围内的光波长吸收。
光学检测器适用于可溶于水或有机溶液的化合物。
②荧光检测器：适用于样品中存在紫外线吸收的化合物，如花生四烯酸(PGA)、苯氧基酸（BOA）、半胱氨酸等，亦适用于对多种细胞色素中荧光团进行判定。
荧光检测器基于一种电离激发分子从基态到激发态上移动，激发态分子有自旋和次态之分，分子在自旋和次态间的跃迁导致荧光发射。
液相色谱仪检测器类型及原理
液相色谱仪检测器类型及原理
液相色谱仪检测器类型及原理如下：
1. 紫外检测器：该检测器适用于吸收波长在200-400nm的物质。
样品溶液通过进样管进入流动相，进入紫外检测器前经过一条石英衬里的检测池。
紫外辐射通过溶液时，被样品分子吸收，吸收的光强度被检测器测量。
2. 荧光检测器：该检测器适用于荧光性物质。
样品溶液通过进样管进入流动相，经过紫外激发后，样品分子发生激发态，脱离激发态时会放出发射波长固定的荧光。
该荧光被荧光检测器检测并转换为电信号。
3. 漂移时间检测器：该检测器适用于分子量小的有机物。
样
品溶液经过进样管进入流动相，在漂移时间管中流动，被高电压加速后通过泄漏孔，被带电终点接收器捕获。
根据分子质量的不同，分子的漂移时间也不同，漂移时间越短，质量越大。
4. 折射率检测器：该检测器适用于非紫外吸收物质，如糖类，蛋白质等。
样品溶液经过进样管进入流动相，经过一条单色光源后，进入折射率检测器。
折射率的变化导致被检测到的偏折角度发生变化，进而被检测器检测和记录。
5. 电化学检测器：该检测器适用于可被氧化还原的物质。
样品通过进样管进入流动相，经过电化学池后，从阳极溶出的电子被电流计测量。
随着溶出的电子数增加，电流也随之增加。
根据电流的变化反映出样品组分的浓度。
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2．荧光检测器（fluorescence detector， FD）
电化学检测器的优点是：
①灵敏度高，最小检测量～般为ng级，有目可达pg级；
②选择性好，可测定大量非电活性物质中极痕量的电活性物质；
③线性范围宽，一般为4～5个数量级；
④设备简单，成本较低；
⑤易于自动操作。
5. 化学发光检测器（Chemiluminescence detector， CD）
4. 电化学检测器（electrochemical detector， ED）
电化学检测器主要有安培、极谱、库仑、电位、电导等检测器，属选择性检测器，可检测具有电活性的化合物。目前它已在各种无机和有机阴阳离子、生物组织和体液的代谢物、食品添加剂、环境污染物、生化制品、农药及医药等的测定中获得了广泛的应用。其中ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ电导检测器在离子色谱中应用最多。
化学发光检测器是近年来发展起来的一种快速、灵敏的新型检测器，因其设备简单、价廉、线性范围宽等优点。其原理是基于某些物质在常温下进行化学反应，生成处于激发态势反应中间体或反应产物，当它们从激发态返回基态时，就发射出光子。由于物质激发态的能量是来自化学反应，故叫作化学发光。当分离组分从色谱柱中洗脱出来后，立即与适当的化学发光试剂混合，引起化学反应，导致发光物质产生辐射，其光强度与该物质的浓度成正比。
检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器（ultraviolet－visible detector，UVD）
紫外可见吸收检测器（UVD）是HPLC中应用最广泛的检测器之一，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。其特点是灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达1ng，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与任何检测器串联使用。紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似，实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
（1）紫外吸收检测器
紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽（190nm～800nm）。它有两个流通池，一个作参比，一个作测量用，光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，无信号输出。当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，这时有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。
局限：流动相的选择受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相，每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
（2）光电二极管阵列检测器（photodiode array detector， PDAD）
也称快速扫描紫外可见分光检测器，是一种新型的光吸收式检测器。它采用光电二极管阵列作为检测元件，构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号，然后对二极管阵列快速扫描采集数据，得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。由此可及时观察与每一组分的色谱图相应的光谱数据，从而迅速决定具有最佳选择性和灵敏度的波长。
荧光检测器是一种高灵敏度、有选择性的检测器，可检测能产生荧光的化合物。某些不发荧光的物质可通过化学衍生化生成荧光衍生物，再进行荧光检测。其最小检测浓度可达0.1ng／ml，适用于痕量分析；一般情况下荧光检测器的灵敏度比紫外检测器约高2个数量级，但其线性范围不如紫外检测器宽。 近年来，采用激光作为荧光检测器的光源而产生的激光诱导荧光检测器极大地增强了荧光检测的信噪比，因而具有很高的灵敏度，在痕量和超痕量分析中得到广泛应用。
这种检测器不需要光源，也不需要复杂的光学系统，只要有恒流泵，将化学发光试剂以一定的流速泵入混合器中，使之与柱流出物迅速而又均匀地混合产生化学发光，通过光电倍增管将光信号变成电信号，就可进行检测。这种检测器的最小检出量可达10-12g。
6.蒸发光散射检测器（EvaporativeLight-scatteringDetector , ELSD）
通用型检测器，能检测不含发色团的化合物，如：碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物(人参皂苷、黄芪甲苷)，并在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物 。
不同于紫外和荧光检测器，ELSD的响应不依赖与样品的光学特性，任何挥发性低于流动相的样品均能被检测，不受其官能团的影响。敏度比示差折光检测器高，对温度变化不敏感，基线稳定，适合与梯度洗脱液相色谱联用。
3. 示差折光检测器（differential refractive Index detector， RID）
示差折光检测器是一种浓度型通用检测器，对所有溶质都有响应，某些不能用选择性检测器检测的组分，如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等，可用示差检测器检测。示差检测器是基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品含量的。光从一种介质进入另一种介质时，由于两种物质的折射率不同就会产生折射。只要样品组分与流动相的折光指数不同，就可被检测，二者相差愈大，灵敏度愈高，在一定浓度范围内检测器的输出与溶质浓度成正比。