血型抗体 效价测定
血型不完全抗体检测卡—母体IgG抗体效价检测
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5)37°C孵育15分钟;
6 )离心5分钟(9rpm2分钟,15rpm3分钟);
7)肉眼观察结果。
结果判定:
阳性结果:红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中,为阳性反应。
5、试剂卡应放在18-25C储存,如若长期放在4C冰箱,建议每1-2个月取出,用专用离心机离心一次,以防止干胶或产生气泡。
6、每日试验前,先取出微柱凝胶卡放置至室温。
7、红细胞悬液的浓度控制在0.5% - 0.8%之间。
**医院文件编号:
**
输全抗体检测卡一母体IgG抗体效价检测=r八 =n =—
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反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验,也可称之微柱凝胶血凝试验(MicrocolumnGel Heamagglutination As,aMGHA )。
试剂材料:
1、DTT (或2-Me)应用液2、妻子血清3、效价检测卡4、丈夫0.5-0.8%工细胞悬液
阴性结果:红细胞抗原无相应的抗体结合,不出现特异性抗原抗体复合物,红细胞沉于微柱凝胶的尖底部,为阴性反应。
反应强度:特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面,为强阳性反应;复合物在胶中,为弱阳性反映;愈靠近胶底部颗粒愈小,反应愈弱。
完全溶血凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞,液体出现透明清澈红色
不完全溶血残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部,液体出现透明清澈红色
混合凝集红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
注意事项
1、血清标本:血清标本必须充分去除纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,阻碍红细胞沉淀,呈假阳性反应。
微注法血型抗体效价测定
![微注法血型抗体效价测定](https://img.taocdn.com/s3/m/21e56b45bfd5b9f3f90f76c66137ee06eef94e15.png)
微注法血型抗体效价测定摘要:一、微注法血型抗体效价测定的背景和意义1.血型抗体效价测定的重要性2.微注法在血型抗体效价测定中的应用二、微注法血型抗体效价测定的原理1.微注法的定义2.微注法的实验流程三、微注法血型抗体效价测定的方法1.微注法的操作步骤2.微注法的注意事项四、微注法血型抗体效价测定的应用1.输血前的抗体效价测定2.疾病诊断和治疗中的抗体效价测定五、微注法血型抗体效价测定的优缺点1.优点a.灵敏度高b.操作简便c.结果准确2.缺点a.成本较高b.需要专业设备正文:一、微注法血型抗体效价测定的背景和意义血型抗体效价测定是临床实验室中常见的一种实验方法,主要用于评估患者体内某种特定抗体的浓度。
抗体效价测定在输血、新生儿筛查、疾病诊断和治疗等领域具有重要的应用价值。
近年来,随着微注技术的发展,微注法在血型抗体效价测定中的应用逐渐得到普及。
二、微注法血型抗体效价测定的原理微注法是一种基于微孔板原理的免疫学检测方法,通过测定抗原与抗体结合后产生的免疫复合物在微孔板上的沉积量,从而间接地反映出抗体效价。
具体实验流程包括:抗原包被微孔板、样本处理、抗体与抗原结合、检测免疫复合物等步骤。
三、微注法血型抗体效价测定的方法微注法的操作步骤主要包括:抗原包被微孔板、样本处理、抗体与抗原结合、检测免疫复合物和计算抗体效价。
在实验过程中,需要注意以下事项:抗原与抗体的比例要合适,实验环境的湿度要适宜,实验操作要严格按照规程进行。
四、微注法血型抗体效价测定的应用微注法血型抗体效价测定的应用广泛,包括输血前的抗体效价测定、疾病诊断和治疗中的抗体效价测定等。
通过微注法测定抗体效价,可以有效地预防输血反应,为新生儿筛查提供依据,辅助诊断和治疗某些疾病。
五、微注法血型抗体效价测定的优缺点微注法血型抗体效价测定的优点包括:灵敏度高,可以检测出较低浓度的抗体;操作简便,实验流程相对简单;结果准确,重复性好。
缺点主要是成本较高,需要专业设备,对实验人员的技术水平要求较高。
抗a抗b抗体效价的检测原理
![抗a抗b抗体效价的检测原理](https://img.taocdn.com/s3/m/a8dfa12bce84b9d528ea81c758f5f61fb6362876.png)
抗a抗b抗体效价的检测原理宝子们,今天咱们来唠唠抗A抗B抗体效价的检测原理,这听起来是不是有点高大上呢?其实呀,没那么神秘啦。
咱先得知道啥是抗A抗B抗体。
这就好比啊,咱们的身体是一个小王国,红细胞就是这个王国里的小居民。
A抗原和B抗原呢,就像是红细胞居民身上不同的小标志。
有些人的身体里呀,看到不属于自己这个小王国的标志,就会产生一种“小卫士”,这就是抗A或者抗B抗体啦。
比如说,A型血的人身体里就可能会有抗B抗体,B型血的人可能就有抗A抗体,而O型血的人呢,这两种抗体可能都有,就像这个小王国的防御机制特别警惕一样呢。
那这个抗A抗B抗体效价检测是怎么回事呢?这就像是给这些“小卫士”的力量做个评估。
检测的原理呀,就像是一场小小的“拔河比赛”。
咱们把含有抗A或者抗B抗体的血清(这就是咱们的“小卫士”大军啦)和已知含有A抗原或者B抗原的红细胞放在一起。
如果这个血清里的抗体力量很强,也就是效价很高,那它们就会紧紧地抓住那些红细胞,就像小卫士们一拥而上把敌人紧紧抱住一样。
在实际检测的时候呢,会有一系列的小操作。
会把不同稀释度的血清和红细胞混合,就像在给小卫士们调整不同的人数一样。
然后观察有没有发生凝集反应。
这个凝集反应可好玩啦,就像一群小磁铁,红细胞要是被抗体抓住了,就会聚在一起,就像抱成团一样。
如果在比较低的稀释度就出现了凝集反应,那就说明抗体的效价比较高。
打个比方吧,就像一群小蚂蚁,如果很少的蚂蚁就能把一块小糖果抬起来,那就说明这些蚂蚁力气很大,在这儿呢,就说明抗体的力量很强大,也就是效价高。
这个检测原理为啥这么重要呢?这可关系到好多事儿呢。
比如说在怀孕的时候,如果妈妈是O型血,爸爸是A型或者B型血,宝宝就有可能是A或者B型血。
妈妈身体里的抗A或者抗B抗体就可能会对宝宝的红细胞产生影响。
通过检测抗体效价,就像提前侦查一下妈妈身体里这些“小卫士”的力量,看看会不会对宝宝造成威胁。
如果效价太高,医生就可以采取一些措施,就像在小王国之间建立一个和平的缓冲区一样,保护宝宝的健康成长。
1 785例孕妇血型抗体效价检测结果分析
![1 785例孕妇血型抗体效价检测结果分析](https://img.taocdn.com/s3/m/d45020126d85ec3a87c24028915f804d2b1687d0.png)
1 785例孕妇血型抗体效价检测结果分析
李耀军;王莉
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2010(031)004
【摘要】目的了解血型抗体效价异常在孕妇中所占比例及临床意义.方法采用微柱凝胶免疫技术进行血型抗体IgG抗-A(B)效价检测.结果夫妇血型不合者占59.0%,ABO血型不合者占58.9% ,Rh(D)血型不合占0.1%.夫妇血型不合者,血型抗体IgG阳性率为9.3%,O型孕妇抗体阳性率明显高于非O型孕妇,孕次大于或等于2次者明显高于初次妊娠孕妇,差异有统计学意义(P<0.05).结论在产前保健孕妇中进行ABO血型抗体效价检测,及早发现异常,及时治疗,可减少由于母婴血型不合引起的溶血性疾病的发生,提高人口素质.
【总页数】2页(P325-326)
【作者】李耀军;王莉
【作者单位】西安医学院第二附属医院,710038;西安医学院第二附属医院,710038【正文语种】中文
【中图分类】R457.11;R446.62
【相关文献】
1.O型孕妇血清中ABO血型抗体效价检测结果分析及意义 [J], 沈淑波;刘建萍;姜华颖
2.孕妇血清中ABO血型IGg抗体效价检测结果分析 [J], 侯英楠;沈淑波;黄金英;邢
英新;王萍;王凤霞
3.母胎ABO血型不合孕妇血型IgG抗体效价与围产儿溶血病相关性分析 [J], 杨玮丽;张云怡
4.对血型为O型Rh(D)的孕妇进行产前IgG血型抗体效价检测的意义 [J], 唐炳娣
5.485例O型血孕妇ABO血型抗体效价的检测结果分析与新生儿溶血病的防治[J], 陆莉;赵丽;李娟
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血型抗体效价测定标准操作规程(sop)
![血型抗体效价测定标准操作规程(sop)](https://img.taocdn.com/s3/m/d5c2df9f998fcc22bdd10d50.png)
血型抗体效价测定标准操作规程一、目的为规范红细胞血型抗体效价测定的技术操作,保证结果的准确性从而为临床疾病的诊断和治疗做出正确的评估。
二、适用范围输血科负责红细胞血型抗体效价测定的技术人员。
三、原理:将受检血清(如检测IgG类红细胞血型抗体效价须先用巯基试剂裂解其中的IgM型抗体)经连续倍比稀释后与表达目标抗体对应的抗原红细胞试剂反应,以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价,同时根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
四、步骤和方法(1)盐水介质法测定IgM类红细胞血型抗体效价1、排试管12支,编号,以第1支试管为原倍进行生理盐水倍比稀释受检血清,第12支试管为2048倍,稀释后容积定为100微升。
2、分别往12支试管加入3%目标抗体对应的抗原红细胞试剂50微升,轻摇混匀。
3、用专用离心机120g离心1min,观察有无溶血和凝集情况。
4、结果判断:镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数为目标抗体的效价,再根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
(2)IgG类红细胞血型抗体效价测定1、取200微升受检血清加入0.2mol/L二巯基乙醇(2—Me)应用液200微升混匀,将试管口密封,37℃孵育30min。
2、排11支试管,编号,进行生理盐水倍比稀释2—Me处理过的血清。
由于第1支已经进行了稀释,所以第11支试管为2048倍,稀释后容积定为100微升。
3、凝聚胺法检测时,往11支试管加入3%目标抗体对应的抗原红细胞试剂50微升,轻摇混匀,按照凝聚胺法操作步骤进行试验。
4、抗球蛋白法测定时,往11支试管加入3%目标抗体对应的抗原红细胞试剂50微升,轻摇混匀后置37℃孵育30min后,按照抗球蛋白法操作步骤进行试验。
5、结果判断:镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数为目标抗体的效价,再根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分。
(1)评分标准根据稀释血清各管凝集强度进行评分,凝集强度与评分标准为:4+为12分,3+为10分,2+为8分,1+为5分,+/-或W+为2分,阴性为0分,稀释各管评分之和为积分。
427例O型血孕妇ABO血型抗体效价检测分析
![427例O型血孕妇ABO血型抗体效价检测分析](https://img.taocdn.com/s3/m/db76bc3d10a6f524ccbf85c7.png)
427例O型血孕妇ABO血型抗体效价检测分析摘要:目的:探讨血型不合妊娠产前免疫性抗体检测在新生儿溶血病预测中的意义。
方法:分别对427例O型血孕妇采集静脉血3 ml,应用直接抗人球蛋白试管凝集法进行IgG抗A或抗B的ABO血型抗体效价检测。
结果:抗体效价大于1:64者占%;IgG抗A大于1:64的孕妇显著多于IgG抗B大于1:64的孕妇(P<)。
结论:血型不合妊娠夫妇进行ABO血型鉴定,检测孕妇血清中血型特异性抗体及抗体效价对预测新生儿溶血有重要意义。
关键词:O型血孕妇;抗体效价;新生儿溶血新生儿溶血病(HDN)是新生儿期常见病之一,是孕妇与胎儿之间因血型不合而产生的同族血型免疫性疾病。
胎儿由父亲遗传而获得的血型抗原恰为母亲所缺少,此抗原通过胎盘进入母体,刺激母体产生相应的免疫抗体,抗体又通过胎盘进入胎儿体内,抗原抗体相结合而使胎儿红细胞凝集而激活补体导致胎儿红细胞发生溶血。
根据胎儿或新生儿溶血的严重程度,可致新生儿早发性黄疸,心力衰竭或核黄疸后遗症,甚至流产、死胎。
即使幸存,亦后遗智力障碍、听力障碍或运动功能不全。
对ABO母儿血型不合进行产前诊断,孕妇体内的IgG抗A(B)的滴度是目前临床上预测ABO新生儿溶血的常用方法。
当孕妇的IgG抗A(B)效价大于1:64时发病率仅为%,效价大于1:128时,发病率可达20%以上,新生儿ABO 溶血若不及时恰当的治疗,常致并发症[2-4]。
因此,检测孕妇血清特异性抗体及抗体效价对预测HDN有重要意义。
1 资料与方法一般资料:选取20XX年~20XX年来我院孕期检查的427例孕妇,女方血型为O型,男方为A、B、AB型。
试剂标准:AB血球(上海医学生物有限公司),巯基乙醇,生理盐水,抗人球蛋白。
标本采集:男女双方抽取静脉血3 ml,分离血清。
检测方法:ABO及RhD血型鉴定。
IgG抗A(B)效价测定:按《全国临床检验操作规程》进行操作。
2 结果427例O型血孕妇中,抗A 210例,抗B 217例。
红细胞血型抗体效价测定标准操作规程
![红细胞血型抗体效价测定标准操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/706817f14128915f804d2b160b4e767f5acf80d7.png)
红细胞血型抗体效价测定标准操作规程本文介绍了红细胞血型抗体效价测定标准操作规程,以规范输血科医务科护理部的技术操作,并适用于评估母婴血型不合的新生儿溶血病的风险程度及产前检查等其他临床需要。
在材料和设备方面,需要3%~5%的A、B型反定型试剂红细胞、0.2 mol/L二巯基乙醇(2-Me)应用液、抗球蛋白试剂、待检者血标本、微柱凝胶抗球蛋白卡等。
在检测环境方面,室温应控制在18-27℃,湿度应控制在30%-70%。
在检测原理方面,对于IgM类红细胞血型抗体,将受检血清经连续倍比稀释后与表达检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞反应,以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价,并根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分,完成对IgM类红细胞抗体效价的测定。
对于IgG类红细胞血型抗体,则先用巯基试剂2-Me裂解其中的IgM型抗体,经巯基试剂2-Me处理后再测定IgG类红细胞血型抗体。
在操作步骤方面,盐水介质法测定IgM类红细胞血型抗体效价。
具体操作为将受检血清加入一系列稀释盐水中,分别加入A、B型反定型试剂红细胞,静置30分钟后观察凝集情况,以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价,并根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分,完成对IgM类红细胞抗体效价的测定。
7.1.1.对12支试管进行排列编号,第2至第12管每管加入0.1ml生理盐水,第1管及第2管分别加入受检者血清0.1ml,混匀后吸出0.1ml移至第3管内,以此类推,连续倍比稀释至第12管(2048倍)。
7.1.2.在12支试管中,分别加入3%检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞50μl,轻摇试管架。
7.1.3.使用血型血清学专用离心机进行离心,离心速度为120g,离心时间为1min,观察并记录有无溶血及凝集情况。
7.1.4.结果判读:镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数即为检查目标抗体的效价,根据“红细胞凝集强度与评分标准”进行评分。
微注法血型抗体效价测定
![微注法血型抗体效价测定](https://img.taocdn.com/s3/m/983fac4bf68a6529647d27284b73f242326c3154.png)
微注法血型抗体效价测定(原创版)目录一、微注法血型抗体效价测定简介二、微注法的原理三、微注法的操作步骤四、微注法的优点与局限性五、微注法在血型抗体效价测定中的应用正文一、微注法血型抗体效价测定简介微注法血型抗体效价测定是一种常用的血型学检测方法,主要用于测定人类血液中各种血型抗体的效价。
这种方法具有操作简便、结果准确等优点,广泛应用于临床输血、血型鉴定以及血液学研究等领域。
二、微注法的原理微注法血型抗体效价测定的原理是根据抗原与抗体的特异性结合反应,通过观察红细胞凝集程度来判断抗体效价。
将一定量的红细胞与含有抗体的血清混合,红细胞与抗体结合后发生凝集现象。
根据红细胞凝集的程度,可以判断出血液中抗体的效价。
三、微注法的操作步骤1.采集血清样本:从受检者体内采集血液样本,提取血清。
2.制备红细胞悬液:将红细胞与生理盐水混合,制备成适当的红细胞悬液。
3.滴定抗体效价:将血清样本与红细胞悬液混合,观察红细胞凝集程度。
根据红细胞凝集的程度,判断抗体效价。
4.结果判断:根据凝集反应的结果,判断受检者体内各种血型抗体的效价。
四、微注法的优点与局限性微注法血型抗体效价测定具有以下优点:1.操作简便:微注法操作简单,实验设备要求较低,易于推广。
2.结果准确:微注法结果较为准确,可为临床输血提供可靠依据。
3.适用范围广泛:微注法可用于检测各种血型抗体效价,适用于临床输血、血型鉴定等领域。
然而,微注法也存在一定的局限性:1.检测范围有限:微注法仅能检测抗体效价,无法检测抗原。
2.检测时间较长:微注法需要观察红细胞凝集程度,检测时间相对较长。
五、微注法在血型抗体效价测定中的应用微注法在血型抗体效价测定中具有重要应用价值。
通过微注法检测血型抗体效价,可以为临床输血提供重要依据,降低输血不良反应的发生率。
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孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程
![孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/aad38612195f312b3069a591.png)
孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程1、目的为规范输血科红细胞血型抗体效价测定的技术操作,确保检测结果准确,依据《输血实验室管理程序》4.1.9条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科测定IgG抗-A(B)抗体效价,用以评估胎母血型不合妊娠时发生胎儿及新生儿免疫溶血性疾病(HDN)的风险程度及其他临床需要。
3、职责:输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、原理将受检血清(如检测IgG类红细胞血型抗体,先用2-巯基乙醇处理)经连续倍稀释后与表达检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞反应,以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价。
5、试剂:生理盐水,0.2mol/L的2-巯基乙醇(2-Me)应用液,博迅的微柱凝胶抗人球蛋白卡,0.8%的A和B型标准试剂红细胞。
6、仪器:XTL-4.7细胞洗涤离心机,博研微术凝胶卡专用孵育器及离心机,电热恒温水浴箱。
7、操作步骤与方法:7.1准备试剂:观察微柱凝胶卡的外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,之后将卡放置室温(18-25℃)平衡,再用专用离心机离心5分钟。
吸取2-Me15μl,加生理盐水至1ml为0.2M 2-Me 应用液。
7.2血清/血浆标本的制备:取血清50ul和150ul的生理盐水作1:4的稀释后再加入0.2M 2-Me应用液200ul混匀,密封试管口,37℃水浴60分钟。
灭活母体血清中IgM时,必须将试管口密封,并经常摇晃试管,以保证灭活效果。
同时用单克隆抗A或抗B作为对照,用来确认2-Me是否有效灭活IgM抗体。
7.3取7只干净试管,做好标记;在第1管中加入处理后的血清200ul和200ul生理盐水,混匀(为1:16稀释);第2-7管中依次加200ul的生理盐水和前一管中的血清/血浆200ul,做倍比稀释。
7.4将抗人球蛋白卡标记好,从第7管开始到第2管依次将倍比稀释后的相应50ul血清分别加入标记孔中。
孕妇ABO血型抗体效价936例的检测及分析
![孕妇ABO血型抗体效价936例的检测及分析](https://img.taocdn.com/s3/m/272144d15a8102d277a22f2c.png)
孕妇ABO血型抗体效价936例的检测及分析摘要目的了解血型抗体效价异常在孕妇中所占比率及临床意义。
方法用盐水试管凝集法进行IgG抗A或抗B的ABO血型抗体效价检测。
结果936例孕妇中,血清效价>1∶64者有95例,异常检出率为10.1%。
结论在产前保健孕妇中进行ABO血型抗体效价检测,及早发现异常及时治疗,可减少由于母婴血型不合引起的溶血疾病发生,提高人口素质。
关键词ABO血型抗体母婴血型不合溶血病母婴血型不合是新生儿溶血病的重要原因之一,随着优生知识的普及及免疫学理论在产科地位的日益提高,母婴血型不合越来越受到人们的关注。
为此,笔者从2001年起对住院孕妇进行血型血清抗体效价检测,对抗体效价异常者进行妊娠期干预治疗,有效地预防了宫内发育迟缓,减少死胎、流产,亦可以减轻新生儿出生后症状,现报道如下。
1 对象与方法1.1 检测对象936例孕妇均为围生期保健孕妇,优生优育咨询门诊及外院转诊孕妇患者,女方血型为O型,男方为A型、B型或AB型。
1.2 检测方法采用盐水试管凝集法,进行IgG抗A或抗B的血型抗体效价检测。
A型、B 型红细胞由上海输血技术公司生产,抗人球蛋白试剂由上海血液生物医药有限责任公司生产。
血清抗体效价1∶64以下为正常,>1∶64为异常。
1.3 标本采集男女双方抽取不抗凝静脉血3 mL。
2 结果与讨论ABO血型抗体有“天然抗体”与“免疫性抗体”之分。
所谓“天然抗体”是指没有可察觉的免疫刺激,而“天然”存在于人体内血型血清抗体,如细菌广泛分布于自然环境,它可以存在于灰尘、食物及各种物体。
由于很多细菌有类似于人类HAB 抗原的抗原性,因此对人体是一种强有力且持续不断可免疫的刺激。
在这种外来刺激情况下,人体将产生对这些异己的HAB抗原的同种抗体。
而“免疫性抗体”则是指经A或B抗原特异性免疫刺激产生的抗A或抗B抗体,这种抗体来自母胎ABO血型不合的妊娠,输入了ABO血型不合的红细胞或注射了纯化的血型物质及含有血型活性物质的病毒或细菌产物等。
血型抗体 效价测定
![血型抗体 效价测定](https://img.taocdn.com/s3/m/d3655db8ad51f01dc281f160.png)
血型抗体效价测定目的了解血型抗体效价测定的操作方法。
原理将被检抗血清作倍比稀释后,加入一定量的抗原红细胞,观察凝集强度。
以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个(+)凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。
器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。
试剂1. 标准2%A型红细胞生理盐水悬液。
2.生理盐水。
标本被检者血清。
操作以抗A效价测定为例。
1.血清倍比稀释取10支小试管,每管加入生理盐水0.1ml。
在第1管中加入0.1ml 被检者血清,混匀后吸取0.1ml加入第2管,依此类推,至第10管,最后弃去0.1ml。
2.加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml,混匀。
3.温育置15~20°C室温中温育15min。
4.离心和观察结果以1000r/min离心1min,以出现1个(+)凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。
注意事项1.倍比稀释要准确,避免稀释不匀出现跳管现象。
2.离心后试管内上清液出现溶血,表明不仅有抗原抗体反应,而且有补体激活,具有重要临床意义。
血型抗体效价测定目的了解血型抗体效价测定的操作方法。
原理将被检抗血清作倍比稀释后,加入一定量的抗原红细胞,观察凝集强度。
以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个(+)凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。
器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。
试剂1. 标准2%A型红细胞生理盐水悬液。
2.生理盐水。
标本被检者血清。
操作以抗A效价测定为例。
1.血清倍比稀释取10支小试管,每管加入生理盐水0.1ml。
在第1管中加入0.1ml 被检者血清,混匀后吸取0.1ml加入第2管,依此类推,至第10管,最后弃去0.1ml。
2.加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml,混匀。
3.温育置15~20°C室温中温育15min。
4.离心和观察结果以1000r/min离心1min,以出现1个(+)凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。
抗体效价检测步骤
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抗体效价检测步骤抗体效价检测是一种常见的免疫学实验技术,用于评估生物体中抗体的含量和活性水平。
抗体效价检测的步骤如下:1. 样品收集和制备:样品可以是血清、血浆、细胞培养上清等,其中血清样品是最常用的。
在收集血样前需要让被检测者禁食,避免食物中干扰本次实验的物质的干扰,血样采集后需要离心分离血清并进行储存处理。
2. 特异性反应物的制备:特异性反应物可以是抗原、蛋白质或者多肽,也可以是已知抗体或者纯化的Fc片段。
在制备时需要对特异性反应物进行纯化和定量化,并在实验中进行稀释。
3. 准备不同稀释度的样品:可以通过稀释血清进行准备,选用不同的稀释液,逐级进行稀释,直至达到所需的浓度。
4. 确定试验平台:抗体效价检测的平台有ELISA、Western blotting、Flow cytometry、Luminex bead-based multiplexing等,不同平台选择的特异性反应物和检测方法也不同。
5. 设定对照组及实验组:通过添加正对照组和空白对照组样品,可以保证实验结果的准确性和可靠性。
6. 进行免疫反应:将不同稀释度样品和特异性反应物共同作用于试验平台上,进行免疫反应。
7. 检测信号:根据试验平台的不同,可以使用荧光显微镜、生物发光、计数器或者吸光度计等手段检测信号。
8. 数据分析:通过计算各组试验的OD值,构建标准曲线,确定每个样品对应的抗体浓度,计算抗体效价值。
效价值表示一定体积内含有的抗体的数量。
抗体效价检测可以用于诊断疾病、研究疾病的发病机制、疫苗研发等领域,具有重要的应用价值。
但是在进行实验时需要注意反应物的纯度、样品的储存条件、平台的选择和质控等方面,以保证实验结果的准确性和可靠性。
产前血型抗体效价测定的方法评估
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产前血型抗体效价测定的方法评估摘要】目的:评估产前血型效价测定方法在临床应用中的实用性,向临床提供准确和可靠的检验结果,指导妊期期治疗,降低新生儿溶血病的发生率。
方法:产前血型抗体效价测定过程中的质量控制及方法建立后,检测53例妊期期孕妇并对结果进行统计分析,结合临床资料进行方法实用性评估。
结果:53例受检孕妇有11例血型抗体效价≥1:64,阳性率为20.75%,对11例血型抗体效价≥1:64的受检者进行妊期治疗及追踪,有1例发生新生儿溶血(效价为≥1:512)发病率9.1%,且溶血症状不明显。
结论:实验过程关键点的质量控制前提下,临床反馈及检测结果分析,可以判断该方法适用于本院妊期期孕妇产前血型抗体效价的测定,指导临床产前诊断和妊期治疗。
【关键词】血型抗体效价;方法评估;新生儿溶血病【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)28-0148-02新生儿溶血病(hemolytic disease of the newborn,HDN)一般指母婴血型不合而引起的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病[1,2]。
发病机制起源于胎儿遗传了父亲的红细胞血型抗原,而母亲红细胞膜上正好缺失这种抗原,这些抗原刺激母体产生免疫抗体,主要是IgG抗体,这种抗体破坏胎儿的红细胞,因而发生溶血症状[3,4]。
对孕妇进行产前血型抗体效价测定,如血型抗体效价测定结果为阳性者可在妊娠期进行干预治疗,从而降低HDN发生,提高新生儿的生存率,本研究针对2012年1月~2012年7月来我院进行血型抗体效价测定的53例孕妇建立产前血型抗体效价测定的方法并对该方法进行评估,现就结果汇报如下:1.资料与方法1.1 一般资料本研究选取2012年1月~2012年7月来我院进行血型抗体效价测定的53例孕妇的临床资料进行分析,所有孕妇均为单胎,无高血压、糖尿病及其他心血管疾病;受试者知情同意。
试剂来源于长春博讯公司,所有试剂均在有效期内使用。
孕妇ABO血型抗体效价测定对新生儿溶血病的意义
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孕妇ABO血型抗体效价测定对新生儿溶血病的意义
王秀梅
【期刊名称】《西南军医》
【年(卷),期】2009(011)005
【摘要】母儿血型不合是高危妊娠的一种,多见于ABO血型不合,ABO血型不合所致新生儿溶血病已被理论证实为与血型有关的一种重要病症。
可弓l起流产、死胎、死产、严重贫血、新生儿胆红素脑病、智力低下等病症,已被列入孕妇围产期保健的重要内容。
对血型不合的妊娠夫妇进行ABO血型测定并检测孕妇血清抗体效价,了解效价与新生儿溶血病发病率之间的关系,对于预防新生儿溶血病极为有效。
为提高人口素质,我院自2007年3月开始,开展ABO血型抗体效价测定(主要针对0型孕妇,丈夫血型为A、B、AB型),现报告如下。
【总页数】1页(P863)
【作者】王秀梅
【作者单位】解放军第82医院
【正文语种】中文
【中图分类】R714.7
【相关文献】
1.O 型血孕妇 IgG 血型抗体效价与 ABO 新生儿溶血病的关系 [J], 杨伯家;邹志强;鲍海娥;李芙蓉;鲍春妹;张红梅
2.O型血孕妇ABO血型抗体效价检测与新生儿溶血病的防治 [J], 陈蓉;程明宇;吴
玉霞
3.血型抗体效价测定对预测O型孕妇发生新生儿溶血病的临床意义 [J], 张青玲
4.孕妇血型抗体IgG效价与ABO血型不合致新生儿溶血病的相关性分析 [J], 蔡振华;方伟祯;肖木洲
5.ABO新生儿溶血病与孕妇血型抗体效价的关系分析 [J], 叶益锋
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孕妇血型抗体效价检测的重要意义
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孕妇血型抗体效价检测的重要意义血型,是指各种血液成分的遗传多态性。
至今已发现的人类血型系统有29种,其中最为人熟知的就是ABO血型系统和Rh血型系统。
ABO血型系统有四种表型,即通常所说的血型:A型、B型、AB型和O型;Rh血型系统中的RhD 抗原是除ABO血型系统之外最具免疫原性的红细胞抗原分子,在Rh血型系统中占主导地位,对临床具有重要意义。
RhD血型分为两种:阳性和阴性,汉族人绝大多数为RhD阳性,阳性率99.66%,所以RhD阴性的孕妇极易因母婴血型不合而引起新生儿溶血病(HDN)。
新生儿溶血病一般特指母婴血型不合引起胎儿期或新生儿的免疫性溶血性疾病。
由于母体存在与胎儿血型不相容的血型抗体(IgG),此抗体经胎盘进入胎儿血循环,发生抗原抗体免疫复合反应,引起胎儿溶血,严重的可引起早产、流产、死胎或者新生儿溶血性贫血、水肿或核黄疸后遗症,造成智能低下或新生儿死亡。
ABO血型系统的新生儿溶血病最常见于O型母亲和A型胎儿。
产前血型血清学检查包括夫妇ABO、RhD定型,母亲的IgG抗体效价(ABO 和Rh)测定。
血型抗体效价检查是通过检测夫妇ABO血型不相合的母亲体内是否存在相应的IgG类抗体,当IgG抗A(B)抗体效价≥256或者持续升高达4倍以上时,可认为胎儿ABO溶血的可能性大。
所以血型不合的孕妇产前行免疫血清学检查IgG抗体效价,对预防和治疗新生儿母婴血型不合溶血病有积极作用。
特别是抗体效价较高时应该重点监测,可预报HDN发生,减轻胎儿受害的程度。
对于Rh阴性的孕妇,更应定期进行抗体检测,根据检测结果遵医嘱积极给予处理;有不良妊娠史尤其晚期妊娠不良史(如胎死宫内,生后严重黄疸或死亡等)要高度警惕Rh阴性血型;分娩时尽量转至有换血条件的医院,以保母婴平安。
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孕妇血型抗体效价检测的方法学探讨
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21 ,( )4 — 1 0 0 9 :9 5
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J u n l fKu mi g M e ia ie st o r a n n dc lUnv ri o y
孕 妇血 型 抗体 效 价检 测 的 方 法学 探讨
吴 穗 ,董伟群 ,佟 力 ,李 毅
( 昆明 医学 院第一 附属 医院输 血2
[ 要 ] 目的 比较 分 析 抗 人 球 蛋 白微 柱 凝 胶 法 与传 统 试 管 法 测 定 0型 孕 妇 血 清 中 I 摘 g G抗 A () 效 价 的 B
方法学差异. 方法
采用微柱凝胶抗人球 方法和经典抗人球蛋 白试 验平 行检测 17例 与丈 夫 A O血 型不 合的 3 B 凝胶 微柱法比传统试管法具 有更 高的
Ku mig Y n a 5 0 2,C ia n n u n n6 0 3 hn )
[ btat Obet e T m aeh emi oo m sa dh ovninlueeto Gat A A s c] jci o o pr e l e cl nasya e net atb sf I ni r v c t g r u nt c o t rg -
x etn i t a tee a s nf at iee c e ente w e os ( tsidc e t th r w s g icn f rn e t e om t d P<00 ) a dh ai i df bw ht h .1 .Co cu in T e n lso s h
O型孕妇血清 IG抗 A ()水平 ,并作方法学评价.结果 17例分析样本中 ,微 柱凝 胶法检测结果阳性 率高 g B 3 于经典抗人球蛋 白法 ,两种方法的差异有统计学意义 ( 0O ) P< .1 .结论
血小板血型抗体效价测定标准操作规程
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血小板血型抗体效价测定标准操作规程
一、前言
本标准操作规程适用于血小板血型抗体效价测定,涉及试剂、设备和实验室环境,操作前请认真阅读本规程。
二、试剂和设备
2.1 试剂
- 血型抗体
- 洗涤缓冲液
- 血小板悬液
- 补体
2.2 设备
- 微孔板
- 分光光度计
- 震荡器
- 离心机
三、实验过程
3.1 血型抗体的制备
将所选血型抗体加入洗涤缓冲液中制备所需浓度的血型抗体液。
3.2 血小板的制备
- 将新鲜血样静置30分钟并分离血浆。
- 用等体积生理盐水和血浆混合,离心沉淀。
- 将沉淀洗涤后悬于与洗涤缓冲液等体积的悬液中。
3.3 试板的制备
- 将血小板悬液加入微孔板中。
- 加入血型抗体液,震荡孵育。
- 加入补体,震荡孵育。
3.4 分光光度测定
将微孔板中样品吸到分光光度计中,读取相应吸光度值。
四、质量控制
- 实验过程中需要进行质量控制,确保实验结果的可靠性和准
确性。
- 不同血型抗体的效价应随同测定,作为正质量控制。
- 反应前,正、负血小板悬液应与已知效价的血型抗体进行配对,作为负质量控制。
五、结果解释
- 样品吸光度值×换算系数 = 抗体效价换算系数 = 抗体效价
- 换算系数可以查看单位决策。
六、结论
按照本规程的操作方法进行,可得到可靠、准确、稳定的血小板血型抗体效价测定结果。
抗体效价测定操作规程
![抗体效价测定操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/692447d4cc175527062208a9.png)
抗体效价测定操作规程 Hessen was revised in January 2021抗体效价测定操作规程操作步骤:一.IgG类1.IgG类抗体效价滴定,须取适量血清200μL加等体积2—Me溶液混合,封口,置37℃水浴箱作用60分钟,先稀释血清:200L病人血清600L生理盐水备用,排列6支试管按顺序编号。
第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L,在第一管和第二管中各加入稀释血清200L,第二管混匀后移出200L转至第三管,以同样操作第六管,从第六管吸出200L暂时保留在另一试管中(可做为第七管),以备必要时作进一步稀释。
这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256。
2.加红细胞悬液(自配红细胞悬液同反定型试剂)每管各加2%相应红细胞悬液200L,混匀。
(如待检血清抗体为抗A,则加入A型标准红细胞悬液;如待检血清抗体为抗B,则加入B型标准红细胞悬液;如待检血清中既有抗A又有抗B,则倍量稀释两份血清,一份加入A型标准红细胞悬液,另一份加入B型标准红细胞悬液;)3.先直接观察离心结果,之后在每管分别加入凝聚胺试剂盒中的R1液3d,混合30S均匀后,在各加R2液2滴,操作方法同凝聚胺交叉配血法,然后判读结果。
通常以肉眼观察到的第一个“±”的凝集管作为判断的终点,终点血清稀释度的倒数为效价(Titer),或称滴度。
二.IgM1.血清连续倍量稀释法先稀释血清:100L病人血清+700L生理盐水备用,排列6支试管按顺序编号。
第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L,第一管和第二管中各加入稀释血清200L,第二管混匀后移出200L转至第三管,以同样操作第六管,从第六管吸出200L暂时保留在另一试管中(可做为第七管),以备必要时作进一步稀释。
这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256。
抗体效价测定原理(一)
![抗体效价测定原理(一)](https://img.taocdn.com/s3/m/801f801ae3bd960590c69ec3d5bbfd0a7856d57a.png)
抗体效价测定原理(一)什么是抗体效价测定抗体效价测定是一种通过测定特定抗体样品的活性程度来确定其浓度的技术手段。
抗体的原理抗体是由机体产生的能够识别和结合抗原的特异性蛋白质。
它们是机体应对外来病原微生物的主要防御机制之一,也是免疫系统的重要组成部分。
抗体效价的定义抗体效价是指一份抗体样品中,可以中和单位量病毒或者凝集单位量目标细胞所需的最低抗体浓度。
抗体浓度越高,其效价就越高。
抗体效价测定的方法抗体效价测定有多种方法,包括:•中和试验•凝集试验•引物放免试验•间接酶联试验中和试验中和试验是指将已知量的病毒与抗体混合,在不同浓度条件下观察能否将病毒中和。
通过测定能够中和病毒的最低抗体浓度,来确定抗体效价。
凝集试验凝集试验是指将抗体和抗原混合后,通过凝集现象来判断抗体的效价。
引物放免试验引物放免试验是指利用引物标记抗体的技术,通过标记物质(如酶、融合蛋白等)的信号检测方法,来确定抗体效价。
间接酶联试验间接酶联试验是指将抗体固定于酶标板上,加入抗原样品后,通过检测酶标记物质(如辣根过氧化物酶)的信号来测定抗体效价。
结论抗体效价测定是一项重要的技术手段,在医学、生物学等领域都有广阔的应用前景。
通过了解不同的抗体效价测定方法,可以更好地选择合适的实验方案,提高实验效率和准确性。
应用领域抗体效价测定在医学、生物学、兽医学、药物研发等领域都有广泛的应用。
例如:•检测疫苗的有效性•诊断感染性疾病•确认血型和配血•检测变态反应•检测癌症抗体抗体效价测定的优势抗体效价测定是一项既灵敏又特异的技术,因此拥有许多优势:•可以检测不同类型的抗体•需要的样本量小•速度快•结果准确•被广泛应用于临床和实验研究常见问题抗体效价测定中的单位是什么?通常使用常用的浓度单位(例如μg/mL)来表示抗体样品浓度。
抗体效价测定是否只适用于血清样品?不是。
抗体效价测定可适用于许多样本类型,如血清、唾液、体液、细胞提取物等。
什么是抗原?抗原是可以诱导免疫响应并被相应抗体或细胞识别和结合的物质。
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血型抗体效价测定
目的了解血型抗体效价测定的操作方法。
原理将被检抗血清作倍比稀释后,加入一定量的抗原红细胞,观察凝集强度。
以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个(+)凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。
器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。
试剂1. 标准2%A型红细胞生理盐水悬液。
2.生理盐水。
标本被检者血清。
操作以抗A效价测定为例。
1.血清倍比稀释取10支小试管,每管加入生理盐水0.1ml。
在第1管中加入0.1ml 被检者血清,混匀后吸取0.1ml加入第2管,依此类推,至第10管,最后弃去0.1ml。
2.加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml,混匀。
3.温育置15~20°C室温中温育15min。
4.离心和观察结果以1000r/min离心1min,以出现1个(+)凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。
注意事项
1.倍比稀释要准确,避免稀释不匀出现跳管现象。
2.离心后试管内上清液出现溶血,表明不仅有抗原抗体反应,而且有补体激活,具有重要临床意义。
血型抗体效价测定
目的了解血型抗体效价测定的操作方法。
原理将被检抗血清作倍比稀释后,加入一定量的抗原红细胞,观察凝集强度。
以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个(+)凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。
器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。
试剂1. 标准2%A型红细胞生理盐水悬液。
2.生理盐水。
标本被检者血清。
操作以抗A效价测定为例。
1.血清倍比稀释取10支小试管,每管加入生理盐水0.1ml。
在第1管中加入0.1ml 被检者血清,混匀后吸取0.1ml加入第2管,依此类推,至第10管,最后弃去0.1ml。
2.加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml,混匀。
3.温育置15~20°C室温中温育15min。
4.离心和观察结果以1000r/min离心1min,以出现1个(+)凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。
注意事项
1.倍比稀释要准确,避免稀释不匀出现跳管现象。
2.离心后试管内上清液出现溶血,表明不仅有抗原抗体反应,而且有补体激活,具有重要临床意义。