环境及人体表面微生物

（ 4 ）牙垢 用灭菌牙签取牙垢按种在琼脂平板表面，然后盖上皿盖。 （ 5 ）皮肤参照 (2) 的步骤操作。 4 ．将所有的琼脂平板翻转，使皿底在上，放 37 ℃ 培养箱，培养 1 — 2 天。 5 ．结果记录方法 （ 1 ）菌 落 计 数 在 划 线 的 平 板 上 ，如 果 菌 落 很 多 而 重 叠 ，则 数 平 板 最 后 1/4 面 积 内 的 菌 落数。不是划线的平板，也一分为四，数 1/4 面积的菌落数。 （ 2 ）根据菌落大小、形状、高度、干湿等特征观察不同的菌落类型。但要注意，如果细 菌 数 量 太 多 ，会 使 很 多 菌 落 生 长 在 一 起 ，或 者 限 制 了 菌 落 生 长 而 变 得 很 小 ，因 而 外 观 不 典 型 ， 故观察菌落的特点时，要选择分离得很开的单个菌落。 菌落特征描写方法如下： (a) 大小 大、中、小、针尖状。可先将整个平板上的菌落粗略观察一下，再决定大、中、 小的标准，或由教师指出一个大小范围。 (b) 颜色 黄色、金黄色、灰色、乳白色、红色 、粉红色等。 (c) 干湿情况 干燥、湿润、粘稠。 (d) 形态 圆形、不规则等。 (e) 高度 扁平、隆起、凹下。 (f) 透明程度 透明、半透明、不透明。 (g) 边缘 整齐、不整齐。
环境和人体表面微生物的检测
一、目的要求 1 ．证明实验室环境与人体表面存在微生物。 2 ．比较来自不同场所与不同环境条件下微生物的数量和类型。 3 ．体会无菌操作的重要性 二、基本原理 平 板 培 养 基 含 有 微 生 物 生 长 所 需 要 的 营 养 成 分 ，当 取 自 不 同 来 源 的 样 品 接 种 于 培 养 基 上 ，在 28 — 37 ℃ 温度下培养， 2 — 4 天内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形 成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。每一种微生物所形成的菌落都有它自己的特点， 例 如 菌 落 的 大 小 ，表 面 干 燥 或 湿 润 、隆 起 或 扁 平 、粗 糙 或 光 滑 ，边 缘 整 齐 或 不 整 齐 ，菌 落 透 明 或 半 透 明 或 不 透 明 ，颜 色 以 及 质 地 疏 松 或 紧 密 等 。因 此 ，可 通 过 平 板 培 养 基 来 检 查 环 境 中 微生物的数量和类型。 三、器材 培 养 基 平 板 ， 无 菌 水 ， 灭 菌 棉 签 （ 装 在 试 管 内 ）， 接 种 环 ， 试 管 架 ， 酒 精 灯 ， 酒 精 瓶 ， 记 号 笔，废物缸，牙签等。 四、操作步骤 每 组 在 “实 验 室 ”和 “人 体 ” 两 大 部 分 中 各 选 择 一 个 内 容 做 实 验 ，或 由 教 师 指 定 分 配 ，最 后 结 果供全班讨论。 1 ．做记号 任 何 一 个 实 验 ，在 动 手 操 作 前 均 需 首 先 将 器 皿 用 记 号 笔 做 上 记 号 ，培 养 皿 的 记 号 一 般 在 皿 底 上 。如 果 写 在 皿 盖 上 ，同 时 观 察 两 个 以 上 培 养 皿 的 结 果 ，打 开 皿 盖 时 ，容 易 混 淆 。用 记 号 笔 写 上 班 级 、姓 名 、日 期 ，本 次 实 验 还 要 写 上 样 品 来 源 ，字 尽 量 小 些 ，写 在 皿 底 的 一 边 ，不 要 写在当中，以免影响观察结果。 2 ．实验室微生物检查 （ 1 ）空气将一个肉膏蛋白胨琼脂平板放在当时做实验的实验室，移去皿盖，使琼脂培养 基 表 面 暴 露 在 空 气 中 ；将 另 一 肉 膏 蛋 白 胨 琼 脂 平 板 放 在 无 菌 室 或 无 人 走 动 的 其 他 实 验 室 ，移 去皿盖。一小时后盖上两个皿盖。 （ 2 ）实验台和门的旋钮 （ a ）用记号笔在皿底外面中央画一直线，再在此线中间外画一垂直线。
资源环境学院生物实验室 开放性实验报告
姓
名：
专 业 班 级：
指 导 老 师：
实验项目名称： 环 境 和 人 体 表 面 微 生 物 的 检 测 开放学时数：4 一、 实验目的 二、 实验原理
三、 实验材料和仪器 四、 实验过程及方法
五 、 实验报告
1 ．将实验结果记录于下表中。
样品 来源
菌落数 （近似 值）
（ b ）取棉签 左手拿含有棉签的试管，在火焰旁用右手的手掌边缘和小指、无名指夹持 棉 塞 （ 或 试 管 帽 ）， 将 其 取 出 ， 将 管 口 很 快 地 通 过 酒 精 灯 的 火 焰 ， 烧 灼 管 口 ； 轻 轻 地 倾 斜 试 管 ， 用 右 手 的 拇 指 和 食 指 将 棉 签 小 心 地 取 出 放 回 棉 塞 （ 或 试 管 帽 ）， 并 将 空 试 管 放 在 试 管 架 上。 （ c ）弄湿棉签 左手取灭菌水试管，如上法拨出棉塞并烧灼管口，将棉签插入水中，再 提 出 水 面 ，在 管 壁 上 挤 压 一 下 以 除 去 过 多 的 水 分 ，小 心 将 棉 签 取 出 ，烧 灼 管 口 ，放 回 棉 塞（ 或 试 管 帽 ）， 并 将 灭 菌 水 试 管 放 在 试 管 架 上 。 （ d ）取样 将湿棉签在实验台面或门旋钮上擦拭约 2 平方厘米的范围。 （ e ）接种 在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿开启成一缝。再将棉签伸入，在琼 脂 表 面 顶 端 接 种 （ 滚 动 一 下 ）， 立 即 闭 合 皿 盖 。 将 棉 签 放 入 废 物 缸 。 （ f ）划线 另取接种环在火焰上灭菌， 先将环端烧热 ，然后将接种环提起垂直放在火 焰 上 ，以 使 火 焰 接 触 金 属 丝 的 范 围 广 一 些 ，待 接 种 环 烧 红 ，再 将 接 种 环 斜 放 ，沿 环 向 上 ，烧 至可能碰到培养皿的部分，再移向环端，如此很快地来回通过火焰数次。 左 手 拿 起 平 板 ，同 样 开 启 一 缝 ，将 灭 过 菌 并 冷 却 了 的 接 种 环 ，通 过 琼 脂 顶 端 的 接 种 区 ，向 下 划 线 ，直 至 平 板 的 一 半 处 。注 意 ：接 种 环 与 琼 脂 表 面 的 角 度 要 小 ，移 动 的 压 力 不 能 太 大 ，否 则会刺破琼脂。 闭 合 皿 盖 ，左 手 将 平 板 向 左 转 动 至 空 白 处 ，右 手 拿 的 接 种 环 再 在 火 焰 上 烧 灼 ，冷 却 。接 种 环 通过前面划的线条再在琼脂的另一半，从上向下来回划线到 1/2 处。 烧灼接种环，转动平板，划最后 1/4 ，立刻盖上皿盖，烧灼接种环，放回原处。 整个划线操作均要求无菌操作，即靠近火焰，而且动作要快。 3 ．人体微生物的检查 （ 1 ）手指（洗手前与洗手后） （ a ）分别在两个琼脂平板上标明洗手前与洗手后，姓名、日期。 （ b ）移去皿盖将未洗过的手指在琼脂平板的表面，轻轻地来回划线，盖上皿盖。 （ c ）用肥皂和刷子，用力刷手，在流水中冲洗干净，干燥后，在另一琼脂平板表面来回 移动，盖上皿盖。 （ 2 ）头发 在揭开皿盖的琼脂平板的上方，用手将头发用力摇动数次，使细菌菌降落到 琼脂平板表面，然后盖上皿盖。 （ 3 ）咳 嗽 将 去 盖 的 琼 脂 平 板 放 在 离 口 约 6 — 8 ㎝ 处 ，对 着 琼 脂 表 面 用 力 咳 嗽 ，然 后 盖 上皿盖。
菌落 类型
特征描写
透 大形干高
明 小态湿度
度
颜 边缘
色
1
2
空气
3
4
5
1
2 人体
3 表面
4
5
2 ．与其他同学所做的实验结果进行比较。
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样品 来源
菌落数（ 1/4 平板） 菌落类型数（近似值）
3． 通 过 本 次 实 验 ， 在 你 防 止 培 养 物 的 污 染 与 防 止 微 生 物 的 扩 散 方 面 ， 你 学 到 些 什 么 ？ 有 什 么体会？