最新茎尖分生组织培养
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采顶芽与侧芽消毒接种。
消毒方法是：剪取顶芽梢段3、5厘米，剥去 大叶片，用自来水冲洗干净，在75%酒精 中浸泡30秒左右，用1%-3次氯酸钠或5%7%的漂白粉溶液消毒10-20分，最后用无 菌水冲洗材料4-5次。
（2）Biblioteka Baidu种
材料置10～40倍的双筒解剖镜下，解 剖刀切取0.1～0.3mm带有1～2个叶 原基的茎尖，接种到培养基上。
植物离体快速繁殖
植物离体快速繁殖又称微体快繁（微繁）： 是指利用植物组织培养技术进行的一种营 养繁殖方法；是在无菌条件下，把离体的 植物器官、组织，放在人工控制的环境中， 使其分化、繁殖，在短时间内产生大量遗 传性一致的完整新植株的技术。
植物离体快速繁殖的优点：
1.繁殖系数高，繁殖周期短，繁殖速度快 2.应用广泛，是推广良种的重要手段 3.繁殖材料用量少，不受季节限制，可实现
（3）培养
接种后材料置25+2℃ ，光照度1500-5000LX，每 日光照10-16h条件下培养。但一般光照培养比暗 培养效果好。其间应更换新鲜培养基。提高培养 基中BA的浓度可形成大量从生芽。
3.培养基与培养方式 ：
（1）培养基：常用MS， White等培养基。
（2）培养方式：茎尖培养一般采用半固体培 养基
工厂化生产 4.能获得无菌苗木无性系 5.木本植物应用潜力大
植物离体快速繁殖的基本程序：
1.稳定无菌培养体系的建立时期
是指从外植体选择、采取、清洗、灭菌、接 种和茎芽发生，一直到获得茎芽稳定生长 和增殖，茎芽扩繁数量可以随意控制的整 个时期。
本时期主要包括外植体选择、外植体灭菌、 培养基选定和稳定化培养等环节。
3.抗病毒药剂脱毒
二、病毒检测
主要是对脱毒苗的鉴定。方法有
1.直接测定法：直接观察待侧植株生长状态是否异 常，茎叶上有无特定病毒引起的可见症状，从而 可判断病毒是否存在。
2.指示植物法： 将一些对病毒反映敏感，症状特征显著的植物作为
指示植物（鉴定别寄生），用以检验待测植物体 内特定病毒的存在。即指示植物法。常用鉴定指 示植物有苋科植物千日红和藜属笕色藜。 特点：条件简单，操作方便，故一直沿用至今，仍 为一种经济而有效的鉴定方法，只能测出病毒的 相对感染力。
3.诱导茎芽生根形成小苗时期
本时期是使上一期培养出的微枝发出不定根， 形成完整的小苗，以便经过驯化，培养成 商品苗。
4.生根小苗移栽和驯化时期
这个阶段是将已生根的完整植株从培养室移 植到室外土壤中，使小苗继续长大。
即是所说的试管苗驯化。
试管苗驯化
试管苗驯化过程也叫炼苗，这是组织培养技 术应用于生产实践面临的一个重大问题。 要使试管苗移栽成功要做好以下工作：
3.抗血清鉴定法 植物病毒是由核酸和蛋白质组成的核蛋白复
合体，因而也是一种抗原，注射到动物体 内即产生抗体，抗体存在于血清之中，称 为抗血清。由于不同病毒产生的抗血清都 有特异性，用特定病毒的抗血清来鉴定该 种病毒，具有高度的专一性和特异性，几 分钟至几小时即可完成，方便简易，为常 用方法之一。
2.稳定培养系的增殖、生长和增壮时期
是指使已经达到稳定状态的培养物，通过不 断的继代培养进行增殖，从而达到所要求 的数量；培养增殖后的培养物生长和壮大 到生根所需要的大小和壮实程度的时期， 是商品化组织培养的主要时期。
此阶段是整个商品化培养过程的关键。快繁 的目的就是在最短的时间内生产最多的优 质苗木。
（四）、其他脱毒方法
1.热处理结合茎尖培养脱毒 2.微体嫁接脱毒
微尖嫁接技术（micrografting shoot-tip），指在人 工培养基上培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖（0.14-
1.0mm,带3-4个叶愿基）以培养脱毒苗的技术。
主要脱毒程序是：无菌砧木培养 茎尖准备 嫁 接 嫁接苗培养 移植。
1.培育壮苗（内因） 2.选择合适的移栽介质 3.注意移栽方式 4.加强载后的环境调控
茎尖分生组织培养
一、概念和意义
1.概念 茎尖分生组织培养：指对不超过0.1mm的茎
尖或几十微米的茎尖进行的培养。
特点：可获无病毒苗，操作困难，成苗时间 长。
普通茎尖培养：对几毫米至几十毫米长的茎 尖、芽尖及侧芽的培养。操作技术简单、 易成活、成苗时间短、繁殖速度快。
2.茎尖培养脱毒的方法 （1）取样与消毒 可直接选定的植株上取顶芽进行消毒接种。
三、无病毒苗的保存和繁殖
（一）无病毒苗的保存 无病毒植株并不是有额外的抗病性，它们有
可能很快又被重新感染。所以一旦培育得 到无病毒苗，就应很好保存，这些原原种 或原种材料保管得好可以保存利用5～10年。 1.隔离保存
• 通常无病毒苗应种植在隔虫网内，使用300目， 即网眼为0.4～0.5mm大小的网纱，也可用盆栽 钵，可以防止蚜虫、叶蝉、土壤线虫进入。栽培 用的土壤也应进行消毒，周围环境也要整洁，并 及时喷施农药防治虫害，以保证植物材料在与病 毒严密隔离的条件下栽培。 有条件的地方可以到 海岛或高冷山地种植保存，那里气候凉爽，虫害 少，有利于无病毒材料的生长，繁殖。另一种更 便宜的方法，是把由茎尖得到的并已经过脱毒检 验的植物通过离体培养进行繁殖和保存。
消毒方法是：剪取顶芽梢段3、5厘米，剥去 大叶片，用自来水冲洗干净，在75%酒精 中浸泡30秒左右，用1%-3次氯酸钠或5%7%的漂白粉溶液消毒10-20分，最后用无 菌水冲洗材料4-5次。
（2）Biblioteka Baidu种
材料置10～40倍的双筒解剖镜下，解 剖刀切取0.1～0.3mm带有1～2个叶 原基的茎尖，接种到培养基上。
植物离体快速繁殖
植物离体快速繁殖又称微体快繁（微繁）： 是指利用植物组织培养技术进行的一种营 养繁殖方法；是在无菌条件下，把离体的 植物器官、组织，放在人工控制的环境中， 使其分化、繁殖，在短时间内产生大量遗 传性一致的完整新植株的技术。
植物离体快速繁殖的优点：
1.繁殖系数高，繁殖周期短，繁殖速度快 2.应用广泛，是推广良种的重要手段 3.繁殖材料用量少，不受季节限制，可实现
（3）培养
接种后材料置25+2℃ ，光照度1500-5000LX，每 日光照10-16h条件下培养。但一般光照培养比暗 培养效果好。其间应更换新鲜培养基。提高培养 基中BA的浓度可形成大量从生芽。
3.培养基与培养方式 ：
（1）培养基：常用MS， White等培养基。
（2）培养方式：茎尖培养一般采用半固体培 养基
工厂化生产 4.能获得无菌苗木无性系 5.木本植物应用潜力大
植物离体快速繁殖的基本程序：
1.稳定无菌培养体系的建立时期
是指从外植体选择、采取、清洗、灭菌、接 种和茎芽发生，一直到获得茎芽稳定生长 和增殖，茎芽扩繁数量可以随意控制的整 个时期。
本时期主要包括外植体选择、外植体灭菌、 培养基选定和稳定化培养等环节。
3.抗病毒药剂脱毒
二、病毒检测
主要是对脱毒苗的鉴定。方法有
1.直接测定法：直接观察待侧植株生长状态是否异 常，茎叶上有无特定病毒引起的可见症状，从而 可判断病毒是否存在。
2.指示植物法： 将一些对病毒反映敏感，症状特征显著的植物作为
指示植物（鉴定别寄生），用以检验待测植物体 内特定病毒的存在。即指示植物法。常用鉴定指 示植物有苋科植物千日红和藜属笕色藜。 特点：条件简单，操作方便，故一直沿用至今，仍 为一种经济而有效的鉴定方法，只能测出病毒的 相对感染力。
3.诱导茎芽生根形成小苗时期
本时期是使上一期培养出的微枝发出不定根， 形成完整的小苗，以便经过驯化，培养成 商品苗。
4.生根小苗移栽和驯化时期
这个阶段是将已生根的完整植株从培养室移 植到室外土壤中，使小苗继续长大。
即是所说的试管苗驯化。
试管苗驯化
试管苗驯化过程也叫炼苗，这是组织培养技 术应用于生产实践面临的一个重大问题。 要使试管苗移栽成功要做好以下工作：
3.抗血清鉴定法 植物病毒是由核酸和蛋白质组成的核蛋白复
合体，因而也是一种抗原，注射到动物体 内即产生抗体，抗体存在于血清之中，称 为抗血清。由于不同病毒产生的抗血清都 有特异性，用特定病毒的抗血清来鉴定该 种病毒，具有高度的专一性和特异性，几 分钟至几小时即可完成，方便简易，为常 用方法之一。
2.稳定培养系的增殖、生长和增壮时期
是指使已经达到稳定状态的培养物，通过不 断的继代培养进行增殖，从而达到所要求 的数量；培养增殖后的培养物生长和壮大 到生根所需要的大小和壮实程度的时期， 是商品化组织培养的主要时期。
此阶段是整个商品化培养过程的关键。快繁 的目的就是在最短的时间内生产最多的优 质苗木。
（四）、其他脱毒方法
1.热处理结合茎尖培养脱毒 2.微体嫁接脱毒
微尖嫁接技术（micrografting shoot-tip），指在人 工培养基上培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖（0.14-
1.0mm,带3-4个叶愿基）以培养脱毒苗的技术。
主要脱毒程序是：无菌砧木培养 茎尖准备 嫁 接 嫁接苗培养 移植。
1.培育壮苗（内因） 2.选择合适的移栽介质 3.注意移栽方式 4.加强载后的环境调控
茎尖分生组织培养
一、概念和意义
1.概念 茎尖分生组织培养：指对不超过0.1mm的茎
尖或几十微米的茎尖进行的培养。
特点：可获无病毒苗，操作困难，成苗时间 长。
普通茎尖培养：对几毫米至几十毫米长的茎 尖、芽尖及侧芽的培养。操作技术简单、 易成活、成苗时间短、繁殖速度快。
2.茎尖培养脱毒的方法 （1）取样与消毒 可直接选定的植株上取顶芽进行消毒接种。
三、无病毒苗的保存和繁殖
（一）无病毒苗的保存 无病毒植株并不是有额外的抗病性，它们有
可能很快又被重新感染。所以一旦培育得 到无病毒苗，就应很好保存，这些原原种 或原种材料保管得好可以保存利用5～10年。 1.隔离保存
• 通常无病毒苗应种植在隔虫网内，使用300目， 即网眼为0.4～0.5mm大小的网纱，也可用盆栽 钵，可以防止蚜虫、叶蝉、土壤线虫进入。栽培 用的土壤也应进行消毒，周围环境也要整洁，并 及时喷施农药防治虫害，以保证植物材料在与病 毒严密隔离的条件下栽培。 有条件的地方可以到 海岛或高冷山地种植保存，那里气候凉爽，虫害 少，有利于无病毒材料的生长，繁殖。另一种更 便宜的方法，是把由茎尖得到的并已经过脱毒检 验的植物通过离体培养进行繁殖和保存。