有机酸分子量的测定实验
有机酸分子量测定
实验目的 实验原理 实验试剂 实验步骤 结果计算 实验讨论
实验目的
1. 进一步熟悉分析天平减量称量法的 操作。 2．进一步熟悉滴定酸碱物质以计算摩 尔质量的基本方法。 3. 进一步掌握酸碱指示剂的使用。
实验原理
大多数有机酸是固体弱酸，易溶于水，且有 Ka≥10-7，即可在水溶液中用NaOH标准溶液进行 滴定。反应产物为强碱弱酸盐。由于滴定突跃发 生在弱碱性范围内，故常选用酚酞为指示剂，滴 定至溶液呈微红色即为终点。根据NaOH标准溶 液的浓度和滴定时用的体积，计算该有机酸的摩 尔质量。
④参加反应时，按反应式定量地进行，不发 生副反应。 ⑤最好有较大的式量，在配制标准溶液时可 以称取较多的量，以减少称量误差。
故氢氧化钠不能作为滴定的基准物质 不符合以上所说的③和⑤
实验原理
有机酸与氢氧化钠反应方程式：
nNaOH H n A Nan A nH 2O
摩尔质量计算公式：
mA mA nmA MA 1 nA cNaOH VNaOH nNaOH n
实验原理
邻苯二甲酸在水中的解离常数为
pKa1 2.95, pKa2 4.37
pH pKw pOH
的试剂瓶中，稀至500mL，摇匀。
2、 0.10mol/L NaOH溶液的标定
减量称量法称 取0.4～0.6g无 水邻苯二甲酸 氢钾
倒入250mL锥 形瓶中，加 40～50mL蒸 馏水，溶解
加入2～3滴 酚酞指示剂
各次标定结果 的相对平均偏 差应控制在 ﹤0.2%。
溶液呈为红色 并保持半分钟 不褪色
首先将一组数据由小到大按顺序排列为： x1，x2 ，…，xn-1， xn ，若xn可疑值，则 统计量Q为 X X
有机化合物系统鉴定法
Cu [O] CuO X2 CuX2（绿色火焰）
（3）溴和碘的实验
2NaI + Cl2（H2O） 2 NaCl + I2（CCl4）
继续滴加氯水，不断振荡，静置后若四氯化碳层 显红棕色，表示有溴。
I2（CCl4） + Cl2（H2O） 2ICl
2NaBr + Cl2（H2O）
（三）烃类的检验 1.烷烃 烷烃一般没有合适的定性检验方法，主要区别烷 烃与其它烃及含氧化合物可采用实验1的方法。 实验1. 碘—电荷转移实验 碘可溶解在具有π电子或孤电子对的化合物中， 形成棕色电荷转移复合物。碘不可能与烷烃形成 电荷复合物，溶液仍显紫色。
I2 , R2O
I2
2.烯烃与炔烃 实验2 溴的四氯化碳实验 溴的四氯化碳溶液与含有碳碳双键或三键的 化合物发生加成反应使溴褪色。无溴化氢防 出为正结果
（一）物态：样品是固态还是液态，固态样 品可观察其晶形，初步判断纯度。液体样 品应注意有无悬浮物及其它液相存在。 （二）颜色：大多数有机化合物是无色的， 若有颜色，主要包括下列三种情况： （1）含有色的杂质 （2）易被氧化的物质 （3）样品本身有颜色
有机化合物的颜色
颜色
无色 淡黄色 黄色
可能的化合物
（四）灼烧实验：观察样品在灼烧时的情况 （1）是否燃烧？火焰有无黑烟？是否爆炸？ （2）如样品是固体，是否熔化，是否升华？ （3）有没有气体放出，有无特殊气味？ （4）灼烧后有无残渣？ 通过灼烧实验可以判断化合物的大致类型 多硝基化合物易爆炸；含碳氢的百分数小的化合物 如多卤物、甲酸、脲等不易燃烧，淀粉无熔点；盐类 难熔化；樟脑和萜类易升华；
没有多个共轭双键或芳香烃 芳香硝基物、氧化偶氮物、亚硝基物等 并苯、邻二酮醌、硝基酚、硝基芳香胺、脎、N—亚硝基 物、偶氮物等
有机酸的分析
A = h×半宽度（峰高一半处色谱峰宽度）
A=（底×高）／2
A值=积分仪求得总面积的94％。
计算：
①某一组分的比例=(一组分峰面积／94%）/（总峰面积／94％）
②以标准曲线来计算含量，以含量为横坐标，峰面积为纵坐标。
一般用高压气瓶供给（N2、He )
固定相固体——固体吸附剂
液体——担体+固定液
1906年，俄国植物学家茨威特分离植物叶绿体中色素而得名，玻璃管中装CaCO3,石油醚溶解植物叶绿体倒入管内，再用石油醚做淋洗剂，结果，柱子中被分成几个不同颜色的谱带。
气相色谱流程示意图：
从记录仪得到的色谱图
保留时间——从进样到出现组分浓度极大点（色谱峰最高点）的时间tR，
最小检测量10-11g／ml。
2.2.2、高效液相色谱的类型
流动相——液相
固定相——①固体吸附剂
②液相+支持剂
③离子交换树脂
④凝胶
按分离原理分：
1.液—固吸附色谱2.液—液分配色谱
3.离子交换色谱4.空间排阻色谱
2.2.3高效液相色谱仪的基本组成
1.输液系统——高压泵、贮液器、过滤器、梯度洗脱装置
2.进样系统——进样器
21气相色谱法gcgaschromatography流动相气体由载气带着物料气体一般用高压气瓶供给n2he固定相固体固体吸附剂液体担体固定液1906年俄国植物学家茨威特分离植物叶绿体中色素而得名玻璃管中装caco3石油醚溶解植物叶绿体倒入管内再用石油醚做淋洗剂结果柱子中被分成几个不同颜色的谱转子流量计汽化室检测器微电流放大器记录仪电脑转子流量计汽化室检测器微电流放大器记录仪电脑净化器流量计色谱柱汽化室检测器记录器净化器流量计色谱柱汽化室检测器记录器净化器流量计色谱柱汽化室检测器记录器放空载气入口接色谱柱散热片加热块汽化室示意图载气入口接色谱柱散热片加热块汽化室示意图从记录仪得到的色谱图保留时间从进样到出现组分浓度极大点色谱峰最高点的时间tr在一定固定相一定操作条件下各组分的值可用来作定性分析
低分子量有机酸对大豆根系形态和磷素吸收积累的影响
低分子量有机酸对大豆根系形态和磷素吸收积累的影响王树起;韩晓增;乔云发;王守宇;严君;李晓慧【期刊名称】《大豆科学》【年(卷),期】2009(28)2【摘要】采用砂培试验研究了几种低分子量有机酸(柠檬酸、草酸、苹果酸和三种酸的混合)对根系形态和磷素吸收积累的影响。
结果表明:不同有机酸处理均显著降低了大豆根系生物量和根冠比,同时使根长、根表面积和根体积均显著降低,而且随着有机酸浓度的增加抑制作用加强,几种有机酸混合后,抑制作用也相对增强,表明不同有机酸处理均抑制了大豆根系的生长,同时使大豆根系的竞争能力降低。
几种有机酸处理均降低了大豆对磷素的吸收积累,从而降低了大豆对磷素的吸收效率,但磷利用效率增加。
【总页数】7页(P210-216)【关键词】有机酸;根系形态;磷积累;磷效率;大豆【作者】王树起;韩晓增;乔云发;王守宇;严君;李晓慧【作者单位】中国科学院东北地理与农业生态研究所,黑龙江哈尔滨150081;中国科学院沈阳应用生态研究所,辽宁沈阳110016【正文语种】中文【中图分类】S565.1【相关文献】1.水磷耦合对高淀粉玉米自交系根系形态和磷素吸收分配的影响 [J], 张慧;穆春华;孙验玲;徐立华;陈宇;翟学旭;李宗新;王庆成;刘霞2.施氮对大豆根系形态和氮素吸收积累的影响 [J], 王树起;韩晓增;乔云发;严君;李晓慧3.野生大豆根系形态对局部磷供应的响应及其对磷吸收的贡献 [J], 林雅茹;唐宏亮;申建波4.低磷胁迫对大豆根系生长特性及分泌H+和有机酸的影响 [J], 张振海;陈琰;韩胜芳;张孟臣;王冬梅5.低磷胁迫对不同水稻品种根系形态和养分吸收的影响 [J], 李锋;潘晓华;刘水英;李木英;杨福孙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
无机及分析化学实验指导
实验一、安全、大体知识，认领洗涤仪器和分析天平的利用一、实验目的要求学生充分熟悉实验室安全的重要性，了解相关规定和办法（水、火、电爆等）。
对重要的大体操作技术有必然了解。
认知常常利用玻璃仪器并正确洗涤。
熟悉分析天平的构造并能正确利用。
掌握减量法的称量方式及数据记录方式。
二、实验原理1.安全、大体知识着重强调实验室安全、实验室卫生和实验态度问题：包括实验预习，实验记录和实验报告三部份。
2.仪器的认领和洗涤仪器的认领祥见讲义。
仪器的洗涤：（1）非精密玻璃仪器的洗涤方式，例如烧杯、量筒等。
可直接用毛刷刷洗（从外到里），若不能直接清洗，可用毛刷蘸取去污粉，香皂粉或洗涤剂洗涤，再用自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗三次。
洗净的标准是仪器内壁附有一层水膜，水不会滴附在内壁上。
（2）对精密玻璃仪器或长颈玻璃仪器的洗涤方式，例如：移液管、容量瓶、普通玻璃漏斗等，用毛刷蘸取去污粉，香皂粉或洗涤剂洗涤，会使仪器的精密度受到影响，能够进行淌洗，如利用铬酸洗液倒入其中振荡或浸泡一段时刻，铬酸洗液回收后，用自来水冲洗仪器，再用蒸馏水冲洗三遍，洗净的标准同上。
3.分析天平的认知和利用介绍分析天平的构造：着重指出玛瑙刀口的保护（不要在开启天平的状态下加物加码），让学生熟悉各个部件及其功能，指导正确的读数分析天平的利用：检查零点及如何调零，演示正确的称量方式，提示学生注意称量瓶的拿取。
分析天平的读数：学习减量法称沙子：要学生注意称量时敲击称量瓶的手法。
分析天平利用守则：祥见书本p30三、 实验内容玻璃仪器的洗涤和分析天平的称量练习：（1）称量前检查零点及调零。
（2）称量练习：如讲义p66，注意正确的操作（3）称量后数据的记录。
四、试探题1.为何不能在天平上称量热的和过冷的物品？2.分析天平的最小刻度为多少？实验中记录数据要记录到几位有效数字？3.称量练习中，由称量瓶向瓷坩埚中转移粉样可否用药匙？为何？若是在转移进程中有少量粉样洒落外面，数据是不是准确？为何？实验三 化学反映速度、反映级数及活化能的测定一、实验目的（1）了解浓度、温度和催化剂对反映速度的影响（2）测定过二硫酸铵与KI 反映的平均速度、反映级数、速度常数和活化能。
《有机酸分析》课件
总结词
色谱分析法是一种分离和检测复杂混合物中组分的方法，通过不同组分在固定相 和流动相之间的分配系数差异实现分离。
详细描述
色谱分析法具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点，适用于多种有机酸的 分离和检测。该方法需要选择合适的固定相和流动相，以获得最佳的分离效果。
紫外可见光谱法
总结词
紫外可见光谱法是一种基于物质吸收 紫外或可见光进行定量和定性分析的 方法。
核磁共振技术（NMR）
通过测定有机酸分子中氢原子核的位置和自旋状态，提供分子结构和组成信息。
有机酸与其他化合物的联合分析
有机酸与氨基酸、糖类等化合物的联合分析
有助于研究有机酸在生物体内的代谢过程和相互转化。
有机酸与药物、污染物等化合物的联合分析
有助于评估有机酸在环境中的行为和潜在的健康影响。
01
食品防腐
01
有机酸具有抗菌和防腐作用，可用于延长食品的保质期，如酸
奶、果酱等。
食品酸化
02
有机酸可用于调节食品的pH值，如饮料、糖果等。
食品添加剂
03
有机酸可作为食品添加剂，改善食品口感和风味，如柠檬酸、
苹果酸等。
在医药工业中的应用
药物合成
有机酸可作为药物合成的中间体或原料，用于 生产各类药物。
药物质量控制
有机酸分析
THE FIRST LESSON OF THE SCHOOL YEAR
目录CONTENTS
• 有机酸概述 • 有机酸分析方法 • 有机酸的应用 • 有机酸分析的发展趋势 • 有机酸分析的挑战与展望
01
有机酸概述
有机酸的定义
有机酸是指含有羧基(-COOH) 的一类有机化合物，是构成生 物体的重要物质之一。
植物根系分泌有机酸的收集、分离及检测方法探析
植物根系分泌有机酸的收集、分离及检测方法探析摘要：根分泌物主要是以碳为基础的低分子化合物和高分子化合物。
植物分泌的有机酸主要有乙酸、草酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸和琥珀酸等, 它们调节细胞代谢, 为根际和微生物提供营养。
植物根系分泌有机酸的研究对于了解植物的根际效应具有重要的学术意义。
简述了根系分泌物有机酸的收集、分离和检测方法。
关键词：根分泌物; 有机酸; 收集; 分离; 检测;Abstract：Root exudates include low molecular compounds, high molecular compounds, and primarily carbon-based compounds. The organic acids secreted by plants are mainly acetic acid, oxalic acid, citric acid, malic acid, tartaric acid and succinic acid, which regulate cell metabolism and provide nutrients for the rhizosphere and microorganisms. The study of plant root exudates of organic acids has important academic significance for understanding the rhizosphere effects of plants. This paper briefly described the methods of collection, separation and detection of organic acids in root exudates.Keyword：root exudates; organic acid; collection; separation; detection;0、引言根际作为植物、微生物和土壤之间的交互作用区域, 是根-土界面微生态系统的物质基础和核心内容。
滴定分析的基本操作和未知有机酸分子量的测定
分析化学部分的实验内容，而分析化学是确定物质组成、结构及各组分在其中的含量的一门学科。
按其任务可分为定性分析、定量分析和结构分析。
特点——量化，特别强调“量”的概念。
为得到一个好的结果，要做到如下几点：※必须正确和熟练地掌握实验的基本操作；※正确地记录实验数据，注意“有效数字”的概念；※正确地按照数据处理方法对实验结果进行运算、处理。
分析误差产生的原因。
（a）（b）（c）√√√√√√√√√√√直接称量法减量法（三）容量器皿及其基本操作1.滴定管及其使用滴定管是在滴定过程中，用于准确测量溶液体积的一类玻璃量器。
一般分成酸式和碱式两种。
酸式滴定管适于装盛酸性或氧化性的溶液；碱式滴定管用于装盛碱性溶液，不能用来放置能与橡皮起作用的溶液。
另有一种以聚四氟乙烯塑料作活塞的新型滴定管，因其耐酸耐碱又耐腐蚀，可以放置几乎所有的分析试剂。
酸式碱式酸式滴定管的处理：注意点:6）滴定操作酸管的滴定姿势烧杯内滴定锥形瓶内滴定碘量瓶内滴定碱管：滴定时手的用力点在玻璃珠中心偏上。
可调式微量移液器固定式3.容量瓶及其使用容量瓶是一种主要用来配制标准溶液或稀释溶液到一定体积的量器。
操作步骤：检漏⇒洗涤（自来水、蒸馏水）⇒定量转移⇒定容⇒摇匀拿容量瓶的方法定量转移操作三、实验步骤1. 0.1 mol·L-1 NaOH 溶液的配制100mL 称取NaOH2.0gH2O300mL500mL试剂瓶稀释至500 mL摇匀2. 0.1 mol·L-1 NaOH 溶液的标定250mL直接法KHC8H4O40.4~0.6gH2O溶解20~30mLNaOH 溶液滴定30s不褪色2%酚酞1~2d平行3次，由滴定剂体积计算氢氧化钠浓度。
实验步骤3. 样品的测定100mL 差减法称量硫酸铵 1.5gH2O30mL250mL容量瓶定容摇匀试样溶液25.00mL20%甲醛10mL放置5min2%酚酞1~2d NaOH滴定30s不褪色250mL平行3次，由滴定剂体积计算样品的含氮量。
中药中有机酸的提取分离与测定
中药中有机酸的提取分离与测定摘要：综述了中药中有机酸类成分的提取分离及测定方法研究进展。
随着天然产物的化学和药理学研究不断深入及分析手段突飞猛进的发展,中药有机酸类成分的研究引起了国内外许多学者极大的兴趣。
我国天然有机酸资源丰富,在中药中已经发现了较多种类和数量的有机酸类成分,越来越多的研究证明,中药中的有机酸类成分具有广泛的生物活性[1]。
传统的和现代的提取分离和测定方法各有优劣，采用合适的提取分离和测定方法，不仅可以提高提取及检测效率，还可以为后续有机酸的提取分离及测定带来方便。
关键词:有机酸;提取分离;测定1 中药有机酸类成分的提取分离中药中有机酸提取分离方法的选择主要是根据其结构性质的不同来确定最佳方法。
1.1 碱提酸沉法有机酸在植物中成盐或者呈游离态时,可用水或者稀碱水(如1%碳酸氢钠)直接提取,提取液酸化后滤出沉淀,提取液加无机酸酸化后,析出总游离有机酸,以过滤法或非极性有机溶剂萃取法得总有机酸。
陈琦等[2]通过比较别采用超声提取法、碱提酸沉法、酸沉后有机溶剂萃取法、有机溶剂加酸水直接提取法等多种方法提取鹅不食草总有机酸，并用分光光度法测定总有机酸含量。
结果发现碱提酸沉法为鹅不食草总有机酸最佳提取方法，总有机酸含量为67.3%。
1.2 有机溶剂提取法溶剂提取法一般指从中草药中提取有效部位的方法，根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性，选用对活性成分溶解度大、对不需要溶出成分溶解度小的溶剂，而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。
由于游离的有机酸(分子量小的除外)易溶于有机溶剂而难溶于水,有机酸盐则易溶于水而难溶于有机溶剂,所以一般可先酸化使有机酸游离,然后选用合适的有机溶剂提取。
张毅等[3]利用正交试验优选宣木瓜总有机酸，采用不同乙醇浓度对宣木瓜进行提取，最佳提取工艺为乙醇浓度80%，料液比为1:25，提取温度为90℃，提取时间为3h，宣木瓜总有机酸的得率为10.46%，表明该工艺稳定、可行，适用于工业化生产。
乌氏粘度计测量聚丙烯酸分子量
4）溶剂流出时间的测定
同3
数据记录与处理
• t1 t2 t(平均)
ŋ0为纯溶剂黏度 ŋr为相对黏度 • ηsp= ŋr-1
• η为特征黏度；反映了无限稀溶液中溶液分子与高分子间 的内摩擦效应 C
数据记录与处理
• 〔η〕=KMα
• M= ([η]/K)1/α
数据记录与处理
数据记录与处理
数据记录与处理
2）.安装粘度计
• 将干净烘干的粘度计，固定在恒温25℃的 水槽中，使其保持垂直，并尽量使球全部 浸泡在书中，最好使a,b两颗度均没入水面 以下。安装除注意垂直外，还应注意固定 牢靠，在测量过程中，不至于引起数据误 差。
3）溶液流出时间t0的测定
• 用移液管准确量取10ml的样品溶液，注入粘度计 中，恒温10-15min，开始测定。闭紧C管上的乳 胶管，用洗耳球从B管口将纯溶剂吸至G球一半， 拿下洗耳球打开C管，记录t0，重复测定，直到出 现三个数据误差小于0.2s,取平均值。 • 用移液管准确移取5ml溶剂，加入到粘度计中，混 合均匀，并把溶液吸至a线上方的一半，然后让溶 液流下，重复两次，此时年度及内溶液的浓度是 院士浓度的2/3，再分别加入5，10，15的溶剂稀 释溶液后，分别测定各浓度溶液的流出时间。
数据记录与处理
分子量测定
聚丙烯酸钠分子量的测定常数 聚丙烯酸钠盐 溶剂：NaOH水溶液（2M） T：25±0.02 ℃ K:0.0422(ml/g) a:0.64 • C＜0.01g/ml(h)
分子量测定
聚丙烯酸钠分子量的测定常 聚丙烯酸钠盐 溶剂：NaCl水溶液（1M） T：25±0.02 ℃ K:0.1547(ml/g) a:0.90 • C＜0.01g/ml(h)
?用移液管准确移取5ml溶剂加入到粘度计中混合均匀并把溶液吸至a线上方的一半然后让溶液流下重复两次此时年度及内溶液的浓度是院士浓度的23再分别加入51015的溶剂稀释溶液后分别测定各浓度溶液的培
草酸分子质量
草酸分子质量
草酸，也称乌鸦酸，是一种有机酸，其化学式为H2C2O4。
草酸在室
温下为无色结晶体，易溶于水，微溶于乙醇和乙醚。
草酸在化学反应
中常常作为还原剂和配体参与其中。
草酸的分子式为H2C2O4，因此其分子量可以通过分子式中各元素的
相对原子质量（即H的相对原子质量为1，C的相对原子质量为12，
O的相对原子质量为16）相加得到。
草酸分子的相对分子质量即为
2*1 + 2*12 + 4*16 = 90。
草酸分子质量的计算可以通过实验测量得到。
在实验室中，可以使用
电子天平等设备来测量草酸的质量。
将草酸样品称入天平中，并记录
下其所示的数字读数，然后再减去称出草酸之前天平的零点读数，即
可得到草酸的质量。
草酸分子质量对于草酸的各种物理化学性质具有重要的影响。
草酸的
分子量较小，因此其分子之间的相互作用力较弱，易于溶于水等极性
溶剂。
同时，草酸在化学反应中也表现出其特有的还原剂和配体性质，具有一定的化学活性。
除了在实验室中测量草酸的分子质量之外，我们还可以通过一些化学
计算方法来推算草酸的分子质量。
例如，通过考虑草酸分子中各元素的原子量和原子数，可以简单地计算出草酸的相对分子质量；此外，还可以应用化学符号、方程和计算规则等知识，通过给定化学反应式和各化学品的相对分子质量来计算草酸的分子质量。
总之，草酸是一种具有一定化学活性的有机酸，其分子质量为90。
通过实验测量和化学计算等方法，我们可以进行草酸分子质量的推算和测定，为草酸的研究和应用提供重要的基础数据。
(2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵分子量
(2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵分子量引言1.1 概述本文旨在探讨(2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵分子量的定义、计算方法以及其在应用领域中的意义。
(2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵是一种重要的有机化合物，具有广泛的应用前景和潜力。
通过对其分子量的测定和相关性质的分析，可以深入了解该化合物的结构与性质之间的关系，为其在各个领域内的应用提供理论依据和指导。
1.2 文章结构本文主要包括以下几个部分：引言、(2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵分子量的定义和意义、实验方法和步骤、结果与讨论以及结论和展望。
首先，引言部分将对文章进行概述，并明确文章结构。
接下来，将详细介绍(2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵的化学结构描述、分子量的计算方法以及该化合物在不同应用领域中的重要性。
随后，详述实验方法和步骤，包括实验材料准备、实验步骤说明以及分子量测定技术的介绍。
然后，在结果与讨论部分，将展示并分析实验结果，探究(2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵分子量与其性质之间的关系，并对相关数据进行对比和解释。
最后，在结论和展望中，将总结主要研究结果，并提出未来研究方向的探讨建议。
1.3 目的本文旨在通过对(2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵分子量的定义、计算方法和意义进行详细阐述，为该有机化合物在各个应用领域中的进一步开发和利用提供理论支持。
通过实验方法和步骤的介绍以及结果与讨论部分的析取，可以更全面地了解该化合物的结构与性质之间的关系，为未来的研究方向提供指导，并推动该化合物在各个领域中的应用发展。
2. (2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵分子量的定义和意义2.1 化学结构描述(2-(甲基丙烯酰氧基)乙基)-二甲基-(3-磺丙基)氢氧化铵是一种具有复杂化学结构的离子化合物。
实验八-5酸性磷酸酯酶分子量的测定--SDS-PAGE电泳法
（6）凝胶孔径可调节，根据被分离物的相对分子质量选择合适的浓度，通过改变单体及交联剂的浓度调节凝胶的孔径；
（7）分辨率高，尤其在不连续凝胶电泳中，集浓缩、分子筛和电荷效应为一体。因而较醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳等有更高的分辨率。
凝胶浓度的选择与被分离物质的相对分子质量密切相关，本实验采用垂直平板形式以不连续系统的SDS-聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，凝胶浓度为10%。
用100μL微量注射器取15μL处理过的蛋白质溶液，点到点样孔中。marker标准蛋白质溶液点在正中央的点样孔中，待测蛋白质溶液分别点到左、右两边的点样孔中，注意要有间隔，每人记住自己的点样位置，
5.电泳
向电泳槽的内槽加入电极缓冲液使其溢出而流到外槽，使外槽中的电极缓冲液液面高度约为5厘米左右。
聚丙烯酰胺凝胶电泳分为连续系统与不连续系统两大类。
不连续体系由电极缓冲液、浓缩胶及分离胶所组成，浓缩胶是由AP催化聚合而成的大孔胶，凝胶缓冲液为pH6.8的Tris-HC1。分离胶是由AP催化聚合而成的小孔胶，凝胶缓冲液为pH8.8 Tris-HC1。电极缓冲液是pH8.3 Tris-甘氨酸。2种孔径的凝胶、2种缓冲体系、3种pH值使不连续体系形成了凝胶孔径、pH值、缓冲液离子成分的不连续性，这是样品浓缩的主要因素。
实验结果
用数码相机拍摄电泳图谱，并打印出来贴在实验报告上，参见图8-5-15。再由图8-5-16给出的标准marker蛋白的电泳图谱及其对应相对分子质量，参照酸性磷酸酯酶的相对分子质量55000±5000，在样品电泳图谱中判断样品中是否含有酸性磷酸酯酶，是否含有杂蛋白，并由区带色泽深浅推测酸性磷酸酯酶和杂蛋白的相对量。请直接在电泳图谱上标明上述结论，包括组分名称（如酸性磷酸酯酶和杂蛋白）和相对分子质量范围。注意，样品实际电泳图谱中标准marker蛋白最上面的区带是相对分子质量为116.0KDa的β-半乳糖苷酶。
酸度测定
pH试纸
精确到1或0.1
电位法 ( pH计法 )
原理
以玻璃电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比 电极，插入待测样液中组成原电池，该电池电 动势大小与溶液pH值有直线关系： E=E0-0.0591pH(250C)
即在250C时，每相差一个pH值单位就产生59.1mV 的电池电动势，利用酸度计测量电池电动势动 势并直接以 pH 表示，故可从酸度计上读出出样 品溶液的pH值。
一些食品的pH 值
牛肉 5.1～6.2 羊肉 5.4～6.7 猪肉 5.3～6.9 鲜蛋黄 6.0～6.3 小虾肉 6.0～7.0 鱼肉 6.6～6.8 米饭 6.7 哈肉 6.5 蟹肉 7.0 鲜蛋 8.2～8.4 鲜蛋白 7.8～8.8 牡蛎肉 4.8～6.3 鸡肉 6.2～6.4 面粉 6.0～6.5 牛乳 6.5～7.0
食品中酸的来源
原料带入 加工过程中人为加入
生产中有意让原料产酸
各种添加剂带入 生产加工不当，贮藏、运输中污染
总酸度的测定（滴定法）
原理
用标准碱液滴定食品中的酸，中和生成盐， 用酚酞做指示剂。当滴定终点 (溶液显浅红色， 30s不退色)时，根据耗用的标准碱液的体积， 计算出总酸的含量。 RCOOH+NaOH→RCOONa+H2O
变色pH范围 酚酞 8.2～10.0 颜色变化 无～红
样品的处理与制备
固体样品
粉碎 → 加蒸馏水,加热 → 定容 → 过滤
含CO2的 饮料、酒类
加热 → 冷却备用
调味品、不含 CO2饮料、酒类
固体饮料
直接取样（稀释；过滤）
研磨 → 定容 → 过滤 → 滤液备用
样品滴定
准确吸取制备的滤液50ml，加入酚酞指示剂 3-4滴，用0.1mol/L标准碱液滴定至微红色30秒不 褪色，记录用量消耗NaOH的体积ml。
如何确定分子量
如何确定ESBR中有机酸分子量查找GB/T 8657-2000 苯乙烯-丁二烯生胶皂和有机酸含量的测定，标准中指出“由于干橡胶中的皂和有机酸不是单一的化学物质，所以本方法仅给出皂和有机酸含量的近似值”，该标准指出当为硬脂酸时，有机酸分子量为284，与硬脂酸(C18H36O2)分子量一致，当为松香酸时，有机酸分子量为346，松香的主要成分是枞酸(C20H30O2)，含量90%略多，枞酸经歧化后，得到50%左右的去氢枞酸(C20H28O2)以及总量40%左右的二氢枞酸(C20H32O2)和四氢枞酸(C20H34O2)，还有0.5%以下的未歧化的枞酸，有机酸的平均分子量显然为枞酸的分子量，为302.4，为什么有差别呢？那是因为硬脂酸纯度高且胶乳凝聚时硬脂酸皂几乎100%转化为硬脂酸，为什么计算歧化松香酸皂作为乳化剂时产品中有机酸酸分子量按照346计，而不以实际值302.4计，那是因为歧化松香中有略小于10%的不皂化物(非酸性物质)，而这些不皂化物最终残留在生胶中，通常把这类物质也算作有机酸，故有机酸平均分子量最大时(不皂化物含量10%时)应为302.4*100%/90%=336，为什么还有10的差别呢？其实是因为酸凝聚后得到的各类枞酸在室温下并非都能和氢氧化钠溶液反应(成品检验时使用氢氧化钠)，这就是通常松香皂化价高于酸价的原因，皂化价测定使用过量的氢氧化钾在甲苯-酒精共沸点的温度下反应1小时得到的结果，故需要根据脂肪酸和松香酸中各种有机酸的实际组成和不皂化物含量来确定其有机酸平均分子量，显然由于脂肪酸和松香酸的来料频率高、分析成份复杂还需昂贵的仪器，很难实现每批或每槽车分析，另外松香酸行业标准也不能给出全部四种枞酸准确含量，要分析其组成目前还没有非常权威的分析方法。
脂肪酸的酸价指标是：（205±4）mg KOH/g，可以依此数据计算出包含各种有机酸和不皂化物在内的所有物质折算成一元有机酸分子量(规定为平均分子量)，即1g脂肪酸在测试条件下可以和205mg KOH反应，205mg KOH等于0.003654mol，平均有机酸摩尔质量为：1/0.003654=273.7 (g/mol)，即平均分子量273.7(一些公司定为273)，由于酸价在（205±4）mg KOH/g的范围波动，取273或274均可以。
仪器分析实验报告
实验一气相色谱仪一、技术参数：1、温度范围：室温+4℃~450℃2、检测器：FID、TCD、ECD3、载气流量控制部最小检测量P：0.2pgP/s二、主要特点：1、采用新一代AFC(先进的流量控制器)设计,使载气控制方面有更高精度，实现了保留时间、峰面积、峰高的优良重现性。
2、为满足复杂样品分析，主机可安装3个进样口和4个检测器，从而省去了拆换检测器的麻烦。
使用GCsolution 可进行4种检测器同时检测。
3、柱温箱可达到最快的升温速率250℃/min,加快分析物流出，满足了快速分析所需要的升温要求，并方便用户对色谱柱进行老化。
4、岛津专利的“载气恒线速度控制方式”，可以在最短时间内得到最优化分离条件。
5、工作站GCsolution的检测器数据采集速率高达250Hz（4msec），保证快速分析时数据的准确性和完整性。
三、主要用途：除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。
在石油化学工业中大部分的原料和产品都可采用气相色谱法来分析；在电力部门中可用来检查变压器的潜伏性故障；在环境保护工作中可用来监测城市大气和水的质量；在农业上可用来监测农作物中残留的农药；在商业部门可和来检验及鉴定食品质量的好坏；在医学上可用来研究人体新陈代谢、生理机能；在临床上用于鉴别药物中毒或疾病类型；在宇宙飞船中可用来自动监测飞船密封仓内的气体等等。
四．仪器构造载气系统气相色谱仪中的气路是一个载气连续运行的密闭管路系统。
整个载气系统要求载气纯净、密闭性好、流速稳定及流速测量准确。
进样系统进样就是把气体或液体样品匀速而定量地加到色谱柱上端。
（3）分离系统分离系统的核心是色谱柱，它的作用是将多组分样品分离为单个组分。
色谱柱分为填充柱和毛细管柱两类。
（4）检测系统检测器的作用是把被色谱柱分离的样品组分根据其特性和含量转化成电信号，经放大后，由记录仪记录成色谱图。
（5）信号记录或微机数据处理系统近年来气相色谱仪主要采用色谱数据处理机。
酸度的测定解答
食品分析与检验
2、试剂
⑴ 0.1000 mol∕L NaOH标准溶液，(可按GB 601配制) 见书121页 注意：正确配制、准确标定、妥善保存。 ⑵ 1%酚酞指示剂
称取酚酞1g溶解于100 ml 95%乙醇中。变色范围pH（8.2~10.0）。
溶液 (4) 洗电极，进入缓冲溶液 (5) “范围”开关 (6)“定位” (7) 电极退出，指针应回到pH=7.0处
食品分析与检验
2、比色法
pH试纸 标准管比色法
食品分析与检验
三、挥发性酸的测定
食品中的挥发酸主要是低分子量的脂肪酸，如游离态或结合态的乙酸 和丙酸等，不包括乳酸、琥珀酸、山梨酸及CO2 、SO2等。检验方法有：
食品分析与检验
5、讨论
上述方法适用于各种浅色食品的总酸的测定。如果是深色 样品可采取以下措施：
① 滴定前把（50 ml 样液已放入三角瓶内的）再用无 CO2 水稀释一倍。 ② 若还不行，在上述快到终点时，用小烧杯取出 2 ~ 3 ml 液体，再加入 20 ml 水稀释，观察。
③ 如果样液颜色过深或浑浊，则宜用电位滴定法，经 测pH值来定终点，一边滴定，一边电磁搅拌，到规定 的pH值时为终点。
分析时的温度，除气相色谱法或另有规定外，系指在室温操作。
分离后各成分的检出，应采用规定的方法。
采用纸色谱法、薄层色谱法或柱色谱法分离有色物质时，可 根据其色带进行区分；
分离无色物质时，可在短波(254nm)或长波(365nm)紫外光灯 下检视，其中纸色谱或薄层色谱也可喷以显色剂使之显色， 或在薄层色谱中用加有荧光物质的薄层硅胶，采用荧光猝灭 法检视。
植物生理学实验
实验七
果蔬有机酸含量的测定
一、实验目的：了解有机酸在果蔬中的存在情况， 掌握果蔬有机酸含量的测定方法。
二、实验原理：
有机酸易溶于水，醇、醚，用这些溶剂可将有机酸提
取出来，再用碱滴定，据此可测出有机酸含量。
三、仪器：试剂、材料：水浴锅、碱式滴定管、滴定 架、三角瓶、研钵、移液管、100ml容量瓶、 0.05mol/L NaOH溶液、酚酞指示剂、水果或蔬菜（番 茄、橘子等）
三、仪器、试剂、材料：分光光度计、水溶锅、
天平、研钵、三角瓶、培养皿、试管、漏斗、滤纸、 丙酮、汽油、盐酸、醋酸铜、植物叶片 四、实验步骤： 1、色素提取：取新鲜叶片5克于研钵中，加丙酮 20ml及少许CaCO3制成匀浆，搅匀过滤于三角瓶中， 滤液备用。
2、色素分离：按现场示范进行，以层析液为驱动
实验二 叶绿体色素的提取、分离和性质的观察 一、实验目的：掌握叶绿体色素的提取和分离方 法，加深对其性质的理解。 二、实验原理：叶绿体色素包括叶绿素a、叶绿素 b、胡萝卜素和叶黄素，这四种色素可用丙酮或乙醇等 提取。叶绿体色素可采用纸层析法进行分离。叶绿素 和类胡萝卜素可表现出一定的吸收光谱，可用分光光 度计精确测定。吸收光量子变成激发态的叶绿素分子 很不稳定，在它变回基态时，可发射出红光量子，因 而产生荧光。叶绿素中的Mg2+可被H+所取代，成为褐 色的去镁叶绿素，后者遇Cu2+则变成深绿色的铜代叶 绿素。
心机、秒表、移液管、吸气球、水浴锅、pH5.0醋酸缓 冲液、0.08%H2O2、0.1%邻甲氧基苯酚、植物叶片
四、实验步骤： 1、酶液提取：准确称取植物叶片0.01~0.02（玉米 叶片0.02~0.03；小麦叶片0.01~0.015）克，放入匀浆器， 加10ml蒸馏水，研成匀浆。倒入2支离心管内， 离心15 分钟（4000转/分），上清液即酶液。 2、酶活性测定：取干净试管2支，分别加入pH5.0 醋酸缓冲液1ml、0.1%邻甲氧基苯酚1ml及酶液1ml， 摇匀后，置于30℃水浴中平衡5分钟。其中一支加1ml 蒸馏水调零，另一支加入0.08%H2O21ml并摇匀，立即 用秒表开始计时，1分钟后生成红棕色的4-邻甲氧基苯 酚溶液，将此溶液倒入比色杯中，到2分钟时于470nm 处读取OD值。
常用有机酸结构、化学式、分子量、别名
名称含量分子式分子量化学名结构1 甲酸≥98.0% HCOOH 46.03 蚁酸2 乙酸≥99.5% CH3COOH 60.05 醋酸3 丙酸≥99.0% CH3CH2COOH 74.084 丁酸≥99.0% CH3CH2CH2COOH 88.11 酪酸5 苯甲酸≥99.5% C6H5COOH 122.1214 安息香酸6 乳酸85-90% CH3CH(OH)COOH 90 α羟基丙酸7 富马酸≥99.0% HOOCCH=CHCOOH 116.07 反丁烯二酸8 对羟基苯甲酸≥99.0% C7H6O3 138.13 尼泊金酸9 马来酸≥99.5% HOOCCH=CHCOOH 116.07 顺丁烯二酸10 肉桂酸≥99.5% C6H5-CH=CH-COOH 148.17 β-苯丙烯酸、3-苯基-2-丙烯酸11 没食子酸≥99% C7H6O5 170.12 3，4，5-三羟基苯甲酸12 烟酸≥99.5%-100.5% C6H5NO2 123.11 维生素B3、维生素PP、尼克酸13 山梨酸钾≥98% CH3CH=CHCH=CHCOOK 150.22 2,4-己二烯酸钾14 丁香酸98% C9H10O5 198.18 3，5-二甲氧基-4-羟基苯甲酸15 丙二酸≥98% HOOCCH2COOH 104.06 缩苹果酸16 一水合柠檬酸≥99.5% C6H8O7 192.14 2-羟基-1,2,3-三羧基丙烷17 香草酸98% C8H8O4 168.15 4-羟基-3-甲氧基苯甲酸18 2,4-二羟基苯甲酸≥99% C7H6O4 154.1219 水杨酸≥99.5% C7H6O3138 邻羟基苯甲酸20 丁二酸≥99.5% HOOCCH2CH2COOH 118.09 琥珀酸21 DL-苹果酸≥99% C4H6O5 134.09 2－羟基丁二酸22 齐墩果酸97% C30H48O3 456.71 3β-羟基齐墩果-12-烯-28-酸23 β-甘草次酸97% C30H46O4470.643-羟基-11-氧化-18,20-齐墩果烷-12-烯酸24 咖啡酸98% C9H8O4 180.15 3,4-二羟基苯基烯丙酸25 蛇床子素99% C15H16O3 244.29 7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素26 熊果酸93% C30H48O3 456.68。
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减量法
减量法：如果试样是粉末或易吸湿的物质，则需把试样装在称量瓶 内称量。倒出一份试样前后两次质量之差，即为该份试样的质量。 称量时，用纸条叠成宽度适中的两三层纸带，毛边朝下套在称量瓶 上。右手拇指与食指拿住纸条，由天平的右门放在天平右盘的正中， 取下纸带，称出瓶和试样的质量。然后右手仍用纸带把称量瓶从盘 上取下，交予左手仍用纸带拿住，放在容器上方。右手用另外一小 纸片衬垫打开瓶盖，但勿使瓶盖离开容器上方。慢慢倾斜瓶身至接 近水平，瓶底略低于瓶口。在称量瓶口离容器上方约1cm处，用盖 轻轻敲瓶口上部使试样落入接受的容器内。倒出试样后，把称量瓶 轻轻竖起，同时用盖敲打瓶口上部，使粘在瓶口的试样落下(或落入 称量瓶或落入容器，所以倒出试样的手续必须在容器口正上方进行)。 盖好瓶盖，放回天平盘上，称出其质量。两次质量之差，即为倒出 的试样质量。若不慎倒出的试样超过了所需的量，则应弃之重称。 如果接受的容器口较小(如锥形瓶等)，也可以在瓶口上放一只洗净的 小漏斗，将试样倒入漏斗内，待称好试样后，用小量蒸馏水将试样 洗入容器内。
实验原理
6. 指示剂：邻苯二甲酸在水中的解离常数为 pKa1 = 2.95,pKa2 = 5.41 对于邻苯二甲酸氢钾标定氢氧化钠的计量点pH为： pOH = (pKh1-㏒c)/2 Kh1 = Kw/Ka2 pKh1 = pKw-pKa2 pH = pW-pOH pH = pKw- (pKw-pKa2-㏒c)/2 = 7.00+(pKa2+㏒c)/2 若 cNaOH=0.1000mol/L, pH = 7.00+(pKa2+㏒c)/2=7.00+(5.41-1.00)/2=9.21, 应用酚酞作指示剂作指示剂。
有机酸摩尔质量的测定
酒 石 酸
柠 檬 酸 邻 苯 二 甲 酸 哪个？
成员：张燕清 刘亚伟 孙丽杰
实验目的
实验原理
实验试剂
实验步骤
结果计算
实验讨论
实验目的
1. 进一步熟悉分析天平减量法称量法的操作。 2．进一步熟悉滴定酸碱物质以计算摩尔质量 的方法。 3. 进一步掌握酸碱指示剂的使用。 4. 掌握用滴定分析法测定有机酸摩尔质量的 原理和方法 5．巩固用误差理论来处理分析结果的理论知 识
减量法
1、掌握减量法的关键？ 用减量法称量物质时量不能太多，倒药品时，右手拿 称量瓶盖轻轻敲击称量瓶， 动作应缓慢。 2、什么情况下用直接称量法？什么情况下需用减量 法称量？ 有些固体试样没有吸湿性，在空气中性质稳定，用直 接法称量；某些固体试样 易吸水，在空气中性质不稳定，用减量法称量。
实验步骤
粗配
与玻璃塞 反应
1、 0.10mol/L NaOH的配制：用直接称量法在台秤上称 取4gNaOH于小烧杯中，溶解后，置于500ml（需要 定量 移入吗？）戴橡皮塞（为什么？）的试剂瓶中 稀至500ml，摇匀。 2、 0.10mol/L NaOH的标定：在分析天平上，用减量称 量法称取0.4～0.6g无水邻苯二甲酸氢钾 （KHC8H4O4）试样6份,分别到入250ml锥形瓶中， 加入40～50ml蒸馏水，溶解后，加入2～3滴酚酞指 示剂，用待标定的0.10mol/L NaOH滴定至溶液呈为 红色并保持半分钟不褪色为终点。计算NaOH的浓度， 并给出平均值并检验有无数据舍去。各次标定结果 的相对平均偏差应控制在﹤0.2%。
c NaOH
MA
m邻苯二甲酸氢钾 1000 M 邻苯二甲酸氢钾 VNaOH
( n 2 或 3)
mA 1000 n 4 c NaOH V NaOH
实验讨论
1. 用NaOH滴定有机酸时,能否用甲基橙作指示 剂?为什么? 2. 草酸、柠檬酸、酒石酸等多元有机酸能否用 NaOH 溶液分步滴定 ?
实验原理
对于草酸((COOH)2 pK1=1.22,pK2=4.19 M=90.04)、柠檬酸(H3C6H5O7 pK1=3.13 pK2=4.76 pK3=6.40 M=192.14)和酒石酸 ((CH(OH)COOH)2 pK1=3.04 pK2=4.37 M=150.09)与此类似，一般用酚酞作指示剂。
实验原理
1.物质的酸碱摩尔质量可以根据滴定反应从 理论上进行计算。本实验要求准确测定一种有 机酸的摩尔质量，并与理论值进行比较。 2.大多数有机酸是固体弱酸，易溶于水，且有 Ka≥10-7，即可在水溶液中用NaOH标准溶液进 行滴定。反应产物为强碱弱酸盐。由于滴定突 跃发生在弱减性范围内，故常选用酚酞为指示 剂，滴定至溶液呈微红色即为终点。根据NaOH 标准溶液的浓度和滴定时用的毫升数，计算该 有机酸的摩尔质量。
Ka1 草酸 酒石酸 5.9x10-2 9.1x10-4
Ka2 6.4x10-5 4.3x10-5
Ka3
邻苯二甲酸 1.1x10-3 柠檬酸 7.4x10-4
3.9x10-5 1.7x10-5 4.0x10-7
实验试剂
电子天平 电子台秤 酸式滴定管 碱式滴定管 移液 管25mL 容量瓶 250mL 锥形瓶 250mL NaOH固体 注意 0.2％酚酞溶液 邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)基准试剂。100~125℃ 干燥备用。干燥温度不宜过高，否则脱水而成为邻苯 二甲酸酐。 有机酸试样，如酒石酸，草酸，柠檬酸，乙酰水杨酸
结果计算
减量法
称量方法 物质1（g） 物质2（g） 物质3（g） 物质4（g） 物质5（g） 物质6（g）
W1=
W2= 减量法
W2=
W3=
W3=
W4=
W4=
W5=
W5=
W6=
W6=
W7=
m1 1
初读： 终读： 体积：
m2 2
初读： 终读： 体积：
m3 3
初读： 终读: 体积：
m4 4
初读: 终读: 体积：
实验原理
3.有机酸与氢氧化43;nH2O 4. 摩尔质量计算公式：
MA=m ×n /(cNaOHVNaOH) ×1000 (VNaOH为毫升）
A
5.在标定氢氧化钠时，称量邻苯二甲酸氢钾若为m（A） 则： C（NaOH）=m（A）/ (M（A ）V（NaOH）) （M邻苯二甲酸氢钾 = 204.23 g· mol-1）
实验步骤
3、 有机酸摩尔质量的测定：在分析天平上，用减量称 量法称取1.7～1.9g有机酸（草酸、酒石酸或柠檬酸） 试样1份,到入100ml烧杯中，加入20～30ml蒸馏水， 溶解后，定量转入250.0ml容量瓶中，稀释刻度摇匀。 用25.00ml移液管定量分取于250ml锥形瓶中，加入 2～3滴酚酞指示剂，用标定好的NaOH滴定至溶液呈 为红色并保持半分钟不褪色为终点。平行测定3到5份， 计算有机酸摩尔质量，给出平均值。各次标定结果的 相对平均偏差应控制在﹤0.2%。
m5 5
初读: 终读: 体积：
m6 6
初读: 终读: 体积：
标定氢氧化钠：
被滴定液
滴定剂
结果计算
滴定有机酸： 1 CNaOH
NaOH初读: NaOH终读: NaOH体积：
2
3
4
5
6
M(A) 平均M(A)
平均偏差
相对平均差
结果计算
有机酸摩尔质量( g· -1 )，保留四位有效数字。 mol
计算公式： （用Q值检验法有无数据舍去）