伤寒与副伤寒实验
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3.鉴定: 3.1 菌落形态:血平板、SS培养基上形成中等 大小、无色半透明、表面光滑的菌落,菌落边 缘整齐。产H2S菌株在SS平板可形成中心黑褐色 的菌落。 3.2 革兰氏染色为阴性。 3.3 初步生化鉴定:从分离培养平板上挑取3个 ~5 个可疑菌落,分别转种到以下培养基:双糖 铁斜面(KI)或三糖铁斜面(TSI)和动力-靛基 质-尿素半固体(MIU)各一支. 36℃±1℃培养 18~24h观察生化反应,并参考鉴定表.
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流行病学史 1 .病前30d 内曾到过或生活在伤寒、副伤 寒流行区. 2 .有伤寒、副伤寒患者、带菌者密切接触 史. 3 .有喝生水等不良卫生习惯, 临床表现 1 .不明原因持续监热. 2 .特殊中毒面容(表情淡漠、呆滞),相 对缓脉. 皮肤玫瑰疹、肝脾肿大.
实验室检测 1 .嗜酸性粒细胞减少或消失、自细胞且数正常 或低下. 2 .肥达反应“0”抗体凝集效价≥1:80, “ H ”抗 体凝集效价≥1:160者;但在高发地区,正常人 ≥1:160 因既往感染亦可有较高滴度,此时最好首先检 查当地人群免疫水平.确定正常值. 3 .恢复期血清中特异性抗体效价较急性期血清 特异性抗体效价增高4倍以上. 4. 从血、骨髓、粪便、胆汁中任一种标本分离 到伤寒沙门菌或副伤寒沙门菌.
萧山CDC卫生实验中心 孙永祥 2010.3
由伤寒沙门菌和甲、乙、丙型副伤寒沙门菌引 起的急性肠道传染病. 临床表现以持续发热、 神经系统中毒症状和消化道症状、相对缓脉、 玫瑰疹、肝脾肿大、白细胞减少、嗜酸性粒细 胞减少或消失为特征。 伤寒杆菌只感染人类,在 自然条件下不感染动物。 副伤寒杆菌在自然条件下, 一般只能感染人类,仅偶 尔感染动物。
3.4 血清玻片凝集:符合伤寒、副伤寒沙门菌 生化反应的,取KI或TSI斜面上的菌苔做破片凝 集试验.并设盐水对照.先用O多价血清玻片凝结, O抗原确定后,再用H因于血清凝集. 3.5 系统生化鉴定:肠杆菌科细菌存在抗原交 叉反应,有可能出现非典型菌株,要进一步做 系统的生化鉴定,见表。
肥达反应 1.原理:用标准伤寒及甲、乙、丙型副伤寒沙 门菌0、H抗原菌液(诊断菌液)与稀释的待检血 清反应. 根据凝集效价判断血清中有无相应抗 体. 常用于辅助诊断。 2.标本采集:宜在急性期和恢复期各采集一次。 3.方法:试管或凹塑板管外稀释法。 4. 结果观察:阳性菌体集中一点,沉积于孔底, 与空白对照相同。阴性结果表现为液体澄清, 颗粒均匀。
细菌培养 1.标本采集:血液、粪便、骨髓 2.分离培养:血液标本按1:10加入血液增菌培 养基或葡萄糖胆盐肉汤培养基,36℃±1℃孵 育,分别与1d、2d、7d转种血琼脂平板或营养 1d 2d 7d 琼脂平板, 36℃±1℃培养24~48h。粪便标本 可先经SF培养基,36℃±1℃增菌培养24~48h, 再接种于SS琼脂平板,36℃±1℃分离培养 24~48h。也可直接接种于SS琼脂平板。骨髓标 本做直接分离或增菌分离培养。
病原学结果报告 根据生化试验和血清学鉴定结果符合伤寒或副 伤寒沙门菌的. 报告“检出伤寒沙门菌”或“检 出×型副伤寒沙门菌”。粪便标本经分离培养 后,如无可疑菌. 报告“未分离出伤寒、副伤寒 沙门菌”。血和骨髓标本培养至7d如无细菌生 长,报告“经7d培葬无菌生长” 。 血清学结果报告 报告被检血清对伤寒沙门菌H抗原、伤寒沙门 菌O 抗原、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌的凝集 度.