最新基础医学-缺血预处理大鼠心肌细胞中的Bcl-2蛋白对线粒体通透性转换孔的影响-药学医学精品资料

• 第三、往往我们一个项目当即将竣工，项目上的后期决算 编制全部由一个预算员来完成，实际上竣工决算的最终编 制和资料装订涉及到很多细节方面，而项目经理恰把所有 的希望都由预算员来完成，同时也希望能够编制一个理想 的数字，但实际这个数字能否满足项目的经营成本，这个 数字是否真实有效，能否经得起审计部门的反复审核？施 工班组和材料商的最终结算数据是否与项目结算数据相吻 合，现在项目上在结算时往往施工班组和材料供应商的结 算数据大于项目部与业主的结算审计数据，在预算员编制 过程中对现场了解不够，在编制过程中也会出现漏编漏算 的现象，我们如何去控制这方面的量和价的问题？
• 这个时候我们的项目经理、施工员和质量员同时 可以来协助预算员编制决算，控制施工班组和供 货商的量和价的二次控制，特别是班组的施工质 量和供货商的材料质量多数在结算送审前被业主 或相关方的投诉造成竣工决算送审的影响，同时 施工签证单、增加工程的确认、主要材料单价确 认和合同专用条款等等受到决算编制的影响。为 了更好的提高决算编制的质量，项目部更应重视 审计前的策划。首先要实事求事的编制一份真实 有效的数据，项目部全员参与决算编制，俗话说， 千做不如一算，只有团队的力量才会使决算编制 质量得到有效的提高。
2.将实验动物分为三组：
正常对照组：穿线但不做结扎处理，持续灌流。 缺血再灌组：结扎30min，再灌注20min。 缺血预处理组：连续3次停灌3min+复灌 5min，然后
缺血30min，再灌注20min。
3.Bcl-2蛋白含量的测定
取心尖以上缺血梗死区横切2mm厚心肌，用免 疫组化sp法测定心肌Bcl-2的含量
4.心肌线粒体的制备
取左前壁心肌组织，转移至分离缓冲液A中冲洗、 剪碎、匀浆。用低温高速离定：线粒体悬液用考马斯 亮蓝法进行蛋白含量测定，以1mg/ml的BSA作为标 准品。线粒体悬液的吸光度：根据蛋白定量的结果 用肿胀液将线粒体混悬液稀释为0.25mg/ml。在线 粒体悬液中加200µmol/ml的 CaCl2，测定加入 CaCl2前后A520吸光度的变化，每隔30s进行一次， 连续观察15min。以到达平衡后的吸光度变化ΔS作 为MPTP开放程度的指标。
最新基础医学-缺血预处理 大鼠心肌细胞中的Bcl-2蛋 白对线粒体通透性转换孔的
影响-药学医学精品资料
背
景
缺血预处理（IPC）是迄今保护缺血/ 再灌注（I/R）心肌的最强效方式之一。缺 血/再灌注损伤致心肌细胞死亡有凋亡和坏 死两种形式。IPC心肌保护作用主要表现在 缩小心肌梗死面积。线粒体是细胞关键的 细胞器之一，它在供能、调节渗透压、钙 稳态，PH值以及细胞信号传导中起了重要 作用。
材
料
实验动物：SD大鼠 实验药品：戊巴比妥钠，抗鼠Bcl-2抗体及SP免疫组化
试剂盒,分离缓冲液A
实验仪器：呼吸机，分光光度计，低温高速离心机
方
法
1.建立动物缺血模型
大鼠用戊巴比妥钠麻醉后，用止血钳游离大鼠左侧的胸 大肌，暴露左第2，3，4肋，分别在左第2，3，4肋间隙距离 胸骨左缘约0.5cm处进针穿线，每个肋间隙同一进针点穿两 根长约40cm的0号手术线，再将两根线用力拉向两侧，分开 肋间肌和软组织并结扎肋间动脉，留取结扎线的剩余部分， 将两根结扎线剩余部分用力拉向两侧拉开胸腔，并固定之。 充分暴露心脏及其表面的血管，剪开心包膜，结扎冠状动脉 前降支，结扎之前在预结扎的冠状动脉前降支处放置一根约 0.5cm长直径1.5mm的乳胶管，打一个活结结扎，以备进行反 复多次缺血再灌实验。
• 其二：谈谈二算对比表。在工程项目初期我们就 针对该工程的投标报价结合实际施工内容进行了 详细的分析，把涉及到钱的主体反应在二算对比 表中，通过二算对比找出盈亏点，经营点，为此 我们又做出了一份二算对比分析报告。而这份二 算对比分析报告自始自终贯穿着整个工程，也就 是我们现实工程的一面镜子。放在我们面前的问 题是如何利用好这面镜子，在不同的阶段随时随 地的对工程项目造价进行修正，从各个角度对其 进行动态观测，分析其变化对项目经济效果产生 的影响。
• 今天就第二个目标为了盈利我们应该做些什么？ 大家都知道一个项目合同条款的好坏，直接关系 到项目的盈利，所以合同的重要性方面，金螳螂 公司在这方面动足了脑筋，推行合同压缩版，目 的是摆脱繁琐的通用条款，经过梳理提炼出针对 在建项目的重要条款包括有很多我们所说的“霸 王条款”，由于合同贯穿于整个项目工程过程中， 只有全面了解合同，谨记合同中的关键条款、 “霸王条款”，在合同中只要和钱有关的条款都 要深入研究，如何利用有利条款，规避不利条款 的风险，也就是说要做到知己知彼，我想在座的 项目经理在这方面的经验比我更丰富。
线粒体通透性转换孔（MPTP）是位于线粒体 内外膜间由多个蛋白质组成的复合孔道，又称线 粒体大通道，是线粒体内外信息交流的中心枢纽， 功能的发挥依赖于其开放状态。根据细胞环境的 不同，MPTP可有3种开放状态，一种是完全关闭 状态，一种是可逆性的低水平开放状态，另一种 是不可逆的高水平开放状态。MPTP高水平开放 的直接效应是导致线粒体质子－电化学梯度耗散、 离子稳态打破、线粒体肿胀和ATP水解，这些效 应最终激发细胞死亡。细胞色素C等凋亡效应因 子从线粒体释放是MPTP调控细胞凋亡的关键。
预期实验结果
Bcl-2蛋白含量：
正常对照组＞ 缺血预处理组＞ 缺血再灌组
MPTP开放程度：
正常对照组＜ 缺血预处理组＜ 缺血再灌组
说明Bcl-2蛋白对MPTP的开放有抑制作用
Thank you !
工程项目审计
徐秋生
工程管理---过程控制---决算编制--审计通病
• 我们做工程最直接地来说就是两个目标： 第一是做一个满足人们视觉效果的作品； 第二就是为了盈利。那么为了同时能达到 这两个目标指标，项目经理、施工员及管 理班组人员肩上都担负了重大的责任，尤 其是项目经理的全面管理。
• 第四、A、送审前:1、竣工资料不全；2、竣工图编制及确 认；3、竣工验收报告不及时；4、施工签证单等手续不全； 5、主要材料单价没有确认；6、施工缺陷整改；7、过程 中的索赔和合同约束；8、甲供材料确认单；9、现场使用 的水电费确认等；