杜氏利什曼原虫
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PCR方法：聚合酶链反应（PCR）及DNA探针技术
01
检测黑热病取得较好的效果，敏感性、特异性高；特 别适合于合并HIV感染的黑热病
快速试纸法：利用重组抗原rk39制备dipstick试纸条，
02
阳性率100%，简便易行，携带方便，2-3分钟可得到
结果
：
1
曾于白蛉活动季节（5~9月）到过流行区； 临床表现呈起病缓慢，反复不规则发热，中 毒症状相对较轻，肝、脾肿大；
但常出现交叉反应，且抗体短期不宜消失，不宜用于疗效考核。
单克隆抗体抗原斑点试验（McAb-AST）检测血内循环抗原诊断黑热
循环抗原检测
病，阳性率高达97.3%，假阳性率仅0.2%，敏感性、特异性、重复性
均较好，需血清量少（2μl）。也可用于定量测定，还可用于现行感染， 疗效考核。
三、分子生物学方法
2
3
免疫学检查出抗原，或其他方法检测阳性 骨髓穿刺涂片检测查见利氏曼原虫无鞭毛体， 或穿刺物培养出前鞭毛体
4
实验诊断
01
病原学检查
02
免疫学诊断法 分子生物学方法
03
04
黑热病诊断
一、病原学诊断
方法
涂片法
特点
骨髓穿刺最为常用，又以髂骨穿刺简便安全，原虫检出率为80%90%。淋巴结穿刺多选表浅、肿大的淋巴结，检出率低。
培养法
将上述穿刺物接种于NNN培养基中，置22~25℃温箱内。经一周后若 培养物中查见运动活泼的前鞭毛体，则判为阳性结果。
把穿刺物接种于易感动物（如金黄地鼠），1~2月后取肝、脾作印 片或涂片，瑞氏染液染色镜检。 在皮肤结节处用消毒针头刺破皮肤，取少许组织液，或用手术刀刮 取少许组织作涂片，染色镜检。
动物接种法
皮肤活组织检查
二、免疫诊断法
酶联免疫吸附试验（ELISA），间接血凝试验（IHA），对流免疫电泳 抗体检测 （CIE），间接荧光试验（IF）均可采用。斑点-ELISA阳性检出率高，
杜氏利什曼原虫 生活史&实验诊断
生活史
杜氏利什曼原虫需要两个宿主：白蛉和人或者哺乳动物。
犬是其重要的保虫宿主。
感染阶段：前鞭毛虫体寄生在白蛉胃里，是杜氏利什曼原虫的 感染阶段。
致病阶段：无鞭毛体寄生在人或者哺乳动物的巨噬细胞内
感染方式：白蛉钉刺吸血
生活史
一、在白蛉体内发育
24h后 无鞭毛体 白蛉胃里 早期前鞭毛体 48h后
前鞭毛体
二分裂繁殖
白蛉：一类体小多毛的吸血昆虫 一周后 聚集在口腔和喙
Baidu Nhomakorabea
生活史
二、在人体内发育
前鞭毛体 皮下组织 吞噬消灭
巨噬细胞
巨噬细胞破裂
游离的无鞭毛体
生活史
二、在人体内发育
侵入巨噬细胞的机制： 首先黏附于巨噬细胞，再进入该细胞。 黏附的途径： 1. 配体-受体途径； 2. 前鞭毛体吸附的抗体和补体与巨噬细胞表面的Fc或C3b受 体结合途径。 在调整或封闭这些受体后，可大大减少前鞭毛体与巨噬细胞的 结合。
01
检测黑热病取得较好的效果，敏感性、特异性高；特 别适合于合并HIV感染的黑热病
快速试纸法：利用重组抗原rk39制备dipstick试纸条，
02
阳性率100%，简便易行，携带方便，2-3分钟可得到
结果
：
1
曾于白蛉活动季节（5~9月）到过流行区； 临床表现呈起病缓慢，反复不规则发热，中 毒症状相对较轻，肝、脾肿大；
但常出现交叉反应，且抗体短期不宜消失，不宜用于疗效考核。
单克隆抗体抗原斑点试验（McAb-AST）检测血内循环抗原诊断黑热
循环抗原检测
病，阳性率高达97.3%，假阳性率仅0.2%，敏感性、特异性、重复性
均较好，需血清量少（2μl）。也可用于定量测定，还可用于现行感染， 疗效考核。
三、分子生物学方法
2
3
免疫学检查出抗原，或其他方法检测阳性 骨髓穿刺涂片检测查见利氏曼原虫无鞭毛体， 或穿刺物培养出前鞭毛体
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实验诊断
01
病原学检查
02
免疫学诊断法 分子生物学方法
03
04
黑热病诊断
一、病原学诊断
方法
涂片法
特点
骨髓穿刺最为常用，又以髂骨穿刺简便安全，原虫检出率为80%90%。淋巴结穿刺多选表浅、肿大的淋巴结，检出率低。
培养法
将上述穿刺物接种于NNN培养基中，置22~25℃温箱内。经一周后若 培养物中查见运动活泼的前鞭毛体，则判为阳性结果。
把穿刺物接种于易感动物（如金黄地鼠），1~2月后取肝、脾作印 片或涂片，瑞氏染液染色镜检。 在皮肤结节处用消毒针头刺破皮肤，取少许组织液，或用手术刀刮 取少许组织作涂片，染色镜检。
动物接种法
皮肤活组织检查
二、免疫诊断法
酶联免疫吸附试验（ELISA），间接血凝试验（IHA），对流免疫电泳 抗体检测 （CIE），间接荧光试验（IF）均可采用。斑点-ELISA阳性检出率高，
杜氏利什曼原虫 生活史&实验诊断
生活史
杜氏利什曼原虫需要两个宿主：白蛉和人或者哺乳动物。
犬是其重要的保虫宿主。
感染阶段：前鞭毛虫体寄生在白蛉胃里，是杜氏利什曼原虫的 感染阶段。
致病阶段：无鞭毛体寄生在人或者哺乳动物的巨噬细胞内
感染方式：白蛉钉刺吸血
生活史
一、在白蛉体内发育
24h后 无鞭毛体 白蛉胃里 早期前鞭毛体 48h后
前鞭毛体
二分裂繁殖
白蛉：一类体小多毛的吸血昆虫 一周后 聚集在口腔和喙
Baidu Nhomakorabea
生活史
二、在人体内发育
前鞭毛体 皮下组织 吞噬消灭
巨噬细胞
巨噬细胞破裂
游离的无鞭毛体
生活史
二、在人体内发育
侵入巨噬细胞的机制： 首先黏附于巨噬细胞，再进入该细胞。 黏附的途径： 1. 配体-受体途径； 2. 前鞭毛体吸附的抗体和补体与巨噬细胞表面的Fc或C3b受 体结合途径。 在调整或封闭这些受体后，可大大减少前鞭毛体与巨噬细胞的 结合。