细菌药敏试验 ppt课件

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6.盖上平板的盖子,置35℃培养箱内孵育16~18小时后 阅读结果,对苯唑西林和万古霉素敏感等应孵育24小 时。
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7.用游标卡尺或直尺量取 抑菌环直径,根据CLSI标 准,报告细菌对该抗生素
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MIC与抑菌圈直径的线性关系
Log2. MIC R I
S
耐药
中介 敏感
D 1 d2
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抑菌圈直径(mm)
8
抑菌圈直径与MIC的关系
MIC (ug/ml)
>256
12
3
5
256 128
2 2 耐药
22
2
1
小误差
极重要误差
64
32
1
1
小误差
中介
小误差
16
* M100 每年更新一次
**M2, M7 每三年更细新菌一药敏次试验 ppt课件
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药物分组
判断折点
标准菌株质控范围
特殊的耐药监测
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敏感性分类(CLSI的定义)
敏感(Susceptible)
用常规用量治疗有效 常规用药时达到的平均血药浓度超过细菌的
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4.用无菌棉签浸入细 菌悬液中,将拭子在 试管上壁轻轻挤压以 挤去过多的菌液。棉 签在三个方向均匀抹 琼脂表面(每次转 60℃)使菌液均匀分 布,最后沿平板内缘 涂抹一周。
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5.平板置室温干燥3~5分钟,用无菌镊子或纸片分配器 将抗菌纸片粘贴于M-H琼脂的表面,一旦纸片贴上,不 能移动;各抗菌纸片中距离应大于24mm,纸片距平板 内缘应大于15mm。
美国临床实验室标准委员会 已经被我国卫生部指定为部颁标准 每年有新版
CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) 美国临床实验室标准化研究所 2012年
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CLSI临床微生物检验标准及操作规范
M100-S20Tables:抗菌药物敏感性试验的实施标准 M2-A10:纸片扩散法敏感性试验的实施标准 M07-A8:需氧菌稀释法敏感性试验方法 M11-A7: 厌氧菌敏感性试验方法 M47-A8: 血培养的原则和步骤 M35-A2: 细菌及酵母样真菌的鉴定方法简本
8
4
2
重要误差
12
258
1
1
12
小误差
敏感 5
1 0.5
1
25
9
0.25 6
8 10 12 细1菌4药敏1试8 验2p0pt课件22 24 26 28 30 32 349
不同国家的判定折点 -可能不同
原因:
用药剂量不同,服药的间隔不同 评价敏感时较保守 更强调检测出耐药株(即特定的耐药群) 技术因素:接种、培养基
指导抗菌药物的临床应用;
发现或提示细菌耐药机制的存在,能帮助临 床医生选择合适的药物,避免产生或加重细 菌的耐药;
监测细菌耐药性,分析耐药菌的变迁,掌握 耐药菌感染的流行病学,以控制和预防耐药 菌感染的发生和流行。
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药敏试验
MIC:在与微生物生长速率有关的特定 时间间隔内,通常是18~24小时,能够 抑制被测菌生长的最低药物浓度。
缓冲区:防止操作的系统误差造成重 大结果的判定错误
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药敏试验的方法学
半定量…纸片扩散法 (抑菌圈直径) MIC法:
稀释法(肉汤、琼脂) 自动化仪法 抗生素连续梯度法 (Etest ) 流式细胞仪
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纸片扩散法(Kirby-Bauer法)
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼 脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后 不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度,在纸片周 围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成无 菌生长的透明圈即为抑菌圈。
第四章 抗菌药物敏感试验
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抗菌药物敏感试验
测定抗菌药物在体外对病原微生物有无 抑菌或杀菌作用的方法称为抗菌药物敏 感性试验(Antimicrobial Susceptibility Test),简称药敏试验(AST)。
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药敏试验的意义
预测抗菌治疗的效果;
在我国主要遵循临床实验室标准化委员会(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)制定的抗菌药
物选择原则。
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CLSI的简单介绍
NCCLS (The National Committee for clinical laboratory Standards)
对倍稀释的优点:
操作容易 敏感株的MIC呈正态分布 区分异常(R)与敏感(S)的菌群
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药敏试验折点的建立
1. MIC的分布 2. 药代动力学和药效学 定 MIC的折点 3. 临床疗效和细菌清除率 4. 抑菌圈直径的分布 ………定抑菌圈折点
统计学的线性回归 计算错误率:尽可能减少极重要误差 (假敏感率)
抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度, 并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系。
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操作方法 :
1.将在约56℃恒温的无菌M-H琼脂倾注直径为90mm的平板,其 厚度4mm。 2.无菌挑取孵育16~24h的血平板上4~5个菌落。
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3.置于无菌生理盐水中,校正其浊度于McFarland No 0.5管。
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20 15 10 5 0
MIC的分布
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0.008 0.032 0.125
0.5
2
8
32 128 512
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药代动力学和药效学
药代动力学:药物吸收,分布,代谢,排泄 药效学:药物对机体的作用
时间依赖型(%T>MIC〕:β-内酰胺类,大环内酯类 浓度依赖型(AUC/MIC比率〕:AGS, FQ 这些参数可用于计算具有最佳药效的给药方案
MIC 5倍以上。
耐药(Resistance)
用常规用量治疗不能抑制细菌的生长 MIC高于药物在血、体液中可能达到的浓度
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敏感性分类(2)
中介 (Intermediate)
MIC接近血、体液中药物的浓度,治 疗反应率低于敏感株
药物生理浓集部位有效 (尿-FQ) 加大用药剂量可能有效
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