薄层色谱TLC(点板)的基本原理

薄层色谱(点板)的基本原理

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薄层色谱，或称薄层层析(thin—1ayer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。

(一)基本原理

薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板，也可用涤纶布等)上形成薄层，然后用相应的溶剂进行展开。薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。

例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力与分配系数的不同，使混合物得以分离。当溶剂沿着吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。由于各组分在溶剂中的溶解度不同，以及吸附剂对它们的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列斑点。如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开，则可以根据这些已知化合物的Rf值（后面介绍Rf值）对各斑点的组分进行鉴定，同时也可以进一步采用某些方法

加以定量。

薄层层析有许多优点：它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点，同时展开速率快，一般仅需15～20分钟；混合物易分离，分辨力一般比以往的纸层析高10～100倍，它既适用于只有0．01μg的样品分离，又能分离大于500mg的样品作制备用，而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。

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薄层色谱TLC(点板)的基本原理

薄层色谱(点板)的基本原理 ★★ 薄层色谱，或称薄层层析(thin—1ayer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。 (一)基本原理薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板，也可用涤纶布等)上形成薄层，然后用相应的溶剂进行展开。薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。

物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。而处于固体表面的分子所受的力是不对称的，向内的一面受到固体内部分子的作用力大，而表面层所受的作用力小，因而气体或溶质分子在运动中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响，就会被吸引而停留下来。吸附过程是可逆的，被吸附物在一定条件下可以解吸出来。在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平衡。吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力与分配系数的不同，使混合物得以分离。当溶剂沿着吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。由于各组分在溶剂中的溶解度不同，以及吸附剂对它们的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列斑点。如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开，则可以根据这些已知化合物的Rf值（后面介绍Rf值）对各斑点的组分进行鉴定，同时也可以进一步采用某些方法

薄层色谱法原理

薄层色谱法原理薄层色谱法（TLC）是一种以固体膜为基础的分离和分析技术，它可以有效地对多组分的混合物进行分子级的分离和分析，使用简单、便捷、成本低廉，灵敏度高、分离效果好，同时收集物质的灵敏度也可以达到微克的水平，因此在分离和分析有机物中也广泛应用。薄层色谱法的原理是将被分析物质涂布在一个固体膜上，在被分析物质有该被可以溶解在固体膜上的溶剂中，经过固体膜上的移动和分离，被分析物质会在固体膜上形成一条条浓薄不一的条带。由于被分析物质和其它物质在溶剂上移动和分离的速度不同，当移动到一定高度时便可以形成不同的条带，由此可以区分出不同的被分析物质。薄层色谱法的实际操作也比较简单，首先需要将混合物分解，然后将分解出的溶质用一定的溶剂溶解，将溶液均匀地涂布在确定的固体膜上，当膜在移动到另外一端，条带便可以形成，然后便可以进行色谱检测，从而分析出不同的混合物组分，可以对不同的混合物组分进行定量分析。薄层色谱法在分析有机物方面应用最广泛，特别是配和染料荧光素类，可以做出比较精确的分析和分离。另外，薄层色谱法在解决一些复杂的混合体系和微量物质的分析学方面也有很好的作用。例如，薄层色谱法可以有效地对系统性染料进行分析和分离分析，可以定量分析矿物溶剂及其它物质，还可以运用色谱技术分析蛋白质和核酸分子等。薄层色谱法在实际应用中，还可以采用热法来获得更好的分离效

果，即在被分析或检测物质在固体膜上运动的过程中，采取一定的温度对它们进行加热，以提高它们的分离效果，也可以改变溶剂的浓度，增加移动溶剂的物理性质，从而获得更好的分离效果。总之，薄层色谱法是一种简单、便捷、成本低廉、灵敏度高、分离效果好的分离和分析技术，在有机物分析和检测以及复杂混合体系和微量物质的分析学等方面有着广泛的应用。它的操作简单，原理明确，灵敏度高，能够有效地分离和分析混合物中的各种组分，是一种有效的色谱分析方法。

薄层层析硅胶板的色谱法相关简单介绍

薄层层析硅胶板的色谱法一.薄层色谱法（TLC）： 1.基本原理： ①.TLC定义：把吸附剂铺在玻璃板上，将样品点在其上，然后用溶剂展开，使样品中各个组分相互分离的方法，这是一种简便、快速、微量的分离分析技术，其应用范围非常广泛。 ②.分类：吸附薄层色谱、分配薄层色谱、离子交换薄层色谱、分子筛薄层色谱等。 2.吸附薄层色谱基本原理： ①.不同物质与吸附剂（固定相）之间的吸附力不同，不同物质在溶剂（流动相）中的溶解度不同。 ②.当达到吸附和溶解（解吸）平衡时，不同的物质在固定相和流动相之间便具有不同的质量分配比或平衡常数（K）。这一过程相当于一次固—液萃取。 ③.当流动相的向前移动时，相当于固—液萃取的固液分离。流动相中含有较多的吸附力小、溶解性大的成分，因此，相当于此成分进行了一次富集。到达前方的各成分会在新位置于固定相和流动相之间的重新形成分配平衡。同时，原位置残留的各成分因新鲜溶剂的到来也会在原位置重新形成分配平衡。此时相当于对原材料进行二次萃取。

④.只要移动相是连续的，那么对原位置各成分的“萃取”也就是不断的。经过多次“萃取”之后，原位置的易溶成分优先被萃取完全，残留的将是吸附力强、溶解相差的成分。这样便达到了分离的目的。 ⑤.分配薄层色谱的原理：相当连续多次的液—液萃取，与吸附色谱不同的是固定相和流动相均是液体，固定相的液体由其他材料（支持剂、载体或担体）来支持或载付，不随流动相的移动而移动。因此，物质的分离是依靠不同的物质在固定相和流动相之间以不同的分配系数（K）连续不断地形成分配平衡而实现的。二.相关厂家介绍：青岛邦凯十余年专注于硅胶基质材料的研发、生产和销售，并可以为顾客提供相应的技术服务，为国家级高新技术企业。我们拥有：各系列色谱材料的产品线，新型高效分离材料设计、硅胶吸附分离性能可控定制、分离制备整体方案的设计和应用等多项核心技术。能够为客户提供样品前处理-纯化-分析相关的多样色谱耗材产品，并确保产品质量稳定，批次间重复性良好。更可根据客户需求定制开发分离材料，提供分离纯化工艺的提升和改造等服务。

薄层色谱(TLC)

薄层色谱薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，属于固－液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，将样品点成一条线，则可分离多达500mg的样品。因此，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，在进行化学反应时，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。一、基本原理色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同，或和其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组份分开。薄层色谱是一种微量、快速和简便的色谱方法。由于各种化合物的极性不同，吸附能力不相同，在展开剂上移动，进行不同程度的解析，根据原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离，计算比移值（Rf）。化合物的吸附能力与它们的极性成正比，具有较大极性的化合物吸附较强，因此Rf值较小。在给定的条件下（吸附剂、展开剂、板层厚度等），化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的，即Rf值是化合物的物理常数，其大小只与化合物本身的结构有关，因此可以根据Rf值鉴别化合物，薄层色谱可适用小量样品（几到几十微克甚至0.01μg）的分离：也可用于多达500mg样品的分离，是近代有机化学中用于定性，定量的一种重要手段。特别适用于那些挥发性小的化合物，以及在高温下易发生化学变化而不能用气相色谱分析的物质。二、实验基本流程铺板点样展开显色计算Rf值铺板取7.5x2.5cm左右的载玻片5片，洗净晾干。在50mL烧杯中，放置3g硅胶G，逐渐加入0.5﹪羧甲基纤维素钠水溶液(CMC)8mL，调成均匀的糊状，涂于上述洁净的载玻片上，用手将带浆的玻片在水平的桌面上做上下轻微的颠动，制成薄厚均匀、表面光洁平整的薄层板，涂好的硅胶G的薄层板置于水平的玻璃板上，在室温放置0.5h后，放入烘箱中，缓慢升温至110℃，恒温0.5h 后取出，稍冷后置于干燥器中备用。（现在实验室基本上所用的板是买的）点样点样用的毛细管为内径< 1mm的管口平整的毛细管，将样品溶于低沸点的溶剂（乙醚、丙酮、乙醇、四氢呋喃等）配成溶液。点样前，可先用铅笔在小板上距一端5mm处轻轻划一横线，作为起始线，然后用毛细管吸取样品在起始线上小心点样，如需重复点样，则应待前次点样的溶剂挥发后方可重点。若在同一块板上点几个样，样品点间距离为5mm以上。展开展开剂的选择主要根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来考虑。薄层的展开在密闭的容器中进行。先将选择的展开剂放入广口瓶中，使广口瓶内空气饱和5－10min，再将点好试样的薄层板放入广口瓶中进行展开，点样的位置必须在展开剂液面之上，当展开剂上升到薄层的前沿（离前端5~10mm）或多组分已明显分开时，取出薄层板放平晾干，用铅笔划溶剂前沿的位置后，即可显色。

薄层色谱原理

薄层色谱原理薄层色谱（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种基于物质在固相和液相之间的分配行为进行分析和分离的技术。它主要利用了物质在固定相（涂覆在平板上）和移动相（溶液）之间的相互作用差异来实现分离。薄层色谱的原理可以归纳为以下几个步骤： 1. 准备薄层色谱板：将一层固定相涂覆在玻璃、铝箔或塑料板上，形成薄层色谱板。 2. 样品施加：将待分析的混合物溶解在合适的溶剂中，然后使用毛细管或其他适当的工具，将样品逐个施加到色谱板上的起点处，通常为色谱板底部。 3. 色谱板孵育：将施加好样品的色谱板放入密闭容器中，加热或保持室温，让样品在色谱板上扩散。 4. 移液相：选择一种适当的移动相，将其倒入所准备的密闭容器中，使其底部接触到已施加样品的色谱板，保证色谱板的部分或全部沉浸在移动相中。 5. 移相：移动相通过色谱板时，各个化合物根据其在固定相和移动相之间的相互作用不同而分别移动。这些作用包括吸附、离子交换、氢键等，导致各组分在色谱板上形成不同的斑点。 6. 给定反应时间后停止移相：当移动相达到特定高度时，停止

移相，避免混合物溶解。 7. 斑点可视化：将色谱板从容器中取出，使用发展剂或其他特定试剂进行可视化。不同化合物可因其在发展剂中的化学反应而呈现出可见的斑点。 8. 量化分析：通过测量斑点的色度或强度，可以对不同化合物之间的相对含量进行定量分析。总结起来，薄层色谱原理基于固定相和液相之间的相互作用差异，通过施加样品、移相、斑点可视化等步骤，实现了混合物中组分的分离和分析。它简单、快速、经济，并且可以在实验室内进行常规分析。

薄层色谱的原理

薄层色谱原理薄层色谱法（TLC），系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。介绍薄层色谱，或称薄层层析(thin—layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。基本原理薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。而处于固体表面的分子所受的力是不对称的，向内的一

TLC(薄层层析色谱)技术原理与应用

TLC（薄层层析色谱）技术原理与应用一、薄层层析（TLC）简介薄层层析是将吸附剂或者支持剂（有时加入固化剂）均匀地铺在一块玻璃上，形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上，然后用适宜的溶剂展开，使混合物得以分离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。薄层层析是一种微量、快速的层析方法。它不仅可以用于纯物质的鉴定，也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。还可以通过薄层层析来摸索和确定柱层析时的洗脱条件。根据分离的原理不同，薄层层析可以分为两类：用吸附剂铺成的薄层所进行的层析为吸附薄层层析，吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶；用纤维素粉、硅胶、硅藻土为支持剂铺成的薄层，属于分配薄层层析。吸附TLC→固定相为吸附剂→氧化铝、硅胶。（较多用） TLC→ 分配TLC→固定相为液态（通常为水）→固定相吸附在支持剂上。（一）吸附薄层的基本原理：吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。吸附作用主要由于物体表面作用力、氢键、络合、静电引力、范德华力等产生。吸附强度决定于吸附剂的吸附能力，还受被吸附成分的性质影响，更与展开剂的性质有关。 1.吸附薄层层析：在硅胶薄层板上，样品中的两成分是两种结构近似的染料，在展开剂四氯化碳的作用下。在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸，再吸附，再解吸，……。由于对氨基偶氮苯的极性比偶氮苯的极性稍强一些，层析的结果，对氨基偶氮苯受到的吸附作用稍强于偶氮苯，从而将两者分离。展开结束以后，会在薄层板上形成两个斑点，混合物中的成分得以分离。

中药中的有效成分复杂多样，结构近似者不少。特别是对未知结构的成分分析，设计并摸索出合理的层析条件是首要任务。只有先设计出可用的层析条件，再经摸索改进，才可能对未知或者已知成分进行成功地分离。然后才能谈得上进一步的分析研究。要设计出合理有效的层析条件，必须熟悉薄层层析条件的选择的基本要领。下面对薄层层析条件的选择做一初步介绍。薄层层析的三项基本构成物质是：样品组分、吸附剂、展开剂。摸索层析条件，实际上是协调上述三者的关系，寻求一种能够有效分离样品组分的配合方案及实际操作要领。很明显，一切层析都是针对分析任务，也就是围绕待分离的样品组分来进行调整适应的。可见，层析条件的选择是以样品中的各组分为中心，适当调适展开剂的吸附剂的极性来实现的。（二）薄层层析条件的选择： 1.概述：吸附剂的选择：薄层层析用的吸附剂与其选择原则和柱层析相同。主要区别在于薄层层析要求吸附剂（支持剂）的粒度更细，一般应小于250目，并要求粒度均匀。用于薄层层析的吸附剂或预制薄层一般活度不宜过高，以Ⅱ～Ⅲ级为宜。而展开距离则随薄层的粒度粗细而定，薄层粒度越细，展开距离相应缩短，一般不超过10厘米，否则可引起色谱扩散影响分离效果。展开剂的选择：薄层层析，当吸附剂活度为一定值时（如Ⅱ或Ⅲ级），对多组分的样品能否获得满意的分离，决定于展开剂的选择。中草药化学成分在脂溶性成分中，大致可按其极性不同而分为无极性、弱极性、中极性与强极性。基本思路是根据待分离样品组分的极性来确定吸附剂的极性（类型、活化度）和展开剂的极性（主要溶剂、调节溶剂、辅助溶剂等）。要协调、处理好吸附剂、展开剂、及被分离成分三者之间的关系，才能得到理想的薄层层析结果。 2.吸附剂：对吸附剂的基本要求是颗粒细致(薄层层析用的吸附剂与其选择原则和柱层析相同。主要区别在于薄层层析要求吸附剂/支持剂的粒度更细，一般应小于250目，并要求粒度均匀)、大

薄层色谱TLC(点板)的基本原理

薄层色谱(点板)的基起源基础理★★薄层色谱,或称薄层层析(thin—1ayer chromatography),是以涂布于支撑板上的支撑物作为固定相,以适合的溶剂为流淌相,对混杂样品进行分别.判定和定量的一种层析分别技巧.这是一种快速分别诸如脂肪酸.类固醇.氨基酸.核苷酸.生物碱及其他多种物资的特殊有用的层析办法,从50年月成长起来至今,仍被普遍采取. (一)基起源基础理薄层层析是把支撑物平均涂布于支撑板(经常运用玻璃板,也可用涤纶布等)上形成薄层,然后用响应的溶剂进行睁开.薄层层析可依据作为固定相的支撑物不合,分为薄层吸附层析(吸附剂).薄层分派层析(纤维素).薄层离子交流层析(离子交流剂).薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等.一般试验中运用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析. 吸附是概况的一个重要性质.任何两个相都可以形成概况,吸附就是个中一个相的物资或消融于个中的溶质在此概况上的密集现

象.在固体与气体之间.固体与液体之间.吸附液体与气体之间的概况上,都可能产生吸附现象. 物资分子之所以能在固体概况逗留,这是因为固体概况的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等.在固体内部,分子之间互相感化的力是对称的,其力场互相抵消.而处于固体概况的分子所受的力是不合错误称的,向内的一面受到固体内部分子的感化力大,而概况层所受的感化力小,因而气体或溶质分子在活动中碰到固体概况时受到这种残剩力的影响,就会被吸引而逗留下来.吸附进程是可逆的,被吸附物在必定前提下可以解吸出来.在单位时光内被吸附于吸附剂的某一概况积上的分子和统一单位时光内分开此概况的分子之间可以树立动态均衡,称为吸附均衡.吸附层析进程就是不竭地产生均衡与不服衡.吸附与解吸的动态均衡进程. 例如用硅胶和氧化铝作支撑剂,其重要道理是吸附力与分派系数的不合,使混杂物得以分别.当溶剂沿着吸附剂移动时,带着样品

薄层色谱总结

薄层色谱总结简介薄层色谱（Thin Layer Chromatography，简称TLC）是一种常用的分离技术，广泛应用于化学、生化、药学等领域。相比于其他分离方法，薄层色谱具有操作简便、分离效率高以及成本低廉等优点。本文将对薄层色谱的原理、实验操作和应用进行总结。原理薄层色谱的原理是通过样品组分在薄层固体质粒上的相互分配行为来实现分离。在薄层色谱中，固定相通常为一层薄薄的固体，被涂刷或吹扩在一种称为色谱板的玻璃、铝或塑料基质上。而液相则以毛细吸附相的形式存在，填充在固定相的孔隙中。当样品溶液通过色谱板时，不同组分会在固定相和液相之间发生分配。这是由于不同组分对固定相和液相的亲疏水性或极性的差异导致的。根据样品组分与固定相和液相的相互作用力强度的不同，不同组分会在色谱板上发生分离。实验操作材料准备进行薄层色谱实验需要准备的材料有： •薄层色谱板：选择合适的基质，可以根据需要选择不同的涂层（例如硅胶、氨基硅胶等）。 •涂层溶液：根据需要选择不同的涂层溶液，将其涂抹或吹扩在色谱板上。 •样品溶液：将待分离的化合物溶解在适当的溶剂中，使得其浓度适宜。 •原色标记剂：用于判定实验进展，一般为毒性较小的化合物。实验步骤 1.准备薄层色谱板：将涂层溶液涂抹或吹扩在色谱板上，注意均匀涂布以确保实验结果的准确性。 2.样品点样：使用微量注射器或毛细玻璃管，在色谱板上点样品溶液。 3.色谱板开发：将色谱板放入封闭的薄层色谱槽中，注入适当液相溶剂，待其上升至一定高度后取出。 4.开发结果观察：使用荧光灯、紫外灯或显色剂观察点样的位置、颜色和形态，并将其标记出来。

TLC技术原理与经验分享

TLC（硅胶板薄层色谱）被广泛的称为“化学家的眼睛”，当“眼睛”看不清楚的时候，才会借助放大镜或者近视镜（HPLC，GC等等）。熟练准确快速的使用TLC技术对提高化学工作的效率至关重要新药研发合成部分，在平时工作中，很多时候是靠TLC进行快速检测，如果仅靠紫外灯这种手段，会忽略掉很多有用的信息，导致重复劳动，或者武断放弃一种合成思路。一下为常用显色原理，均为个人理解整理，进攻参考。 TLC展开剂的显色原理介绍与讨论一、显色原理硫酸乙醇溶液喷洒10%硫酸乙醇溶液而显色，是利用硫酸的碳化效果。一般用来薄层层析分离的都是有机化合物，展开，溶媒挥发干以后，有机物就留在板上。浓硫酸理论上可以对任何有机物碳化。喷洒10%硫酸乙醇溶液，待烘干之后并继续加热，有机物就因为碳化而现实偏黑色。乙醇挥发很快，留下硫酸使得有机物脱水，看到的颜色可能是褐色、灰色、偏蓝色，所以我前面写了偏黑色，实际可能要淡一点的，有些扩散的样子。任何有机物都用可以用10%硫酸乙醇溶液。溴甲酚绿（pKa≤5.0，与pH区别）方法一：溴甲酚绿指示液：取溴甲酚绿0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液2.8ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围pH3.6～5.2（黄→蓝）方法二：溴甲酚绿指示液(1 g／L) ：称取0．1 g溴甲酚绿，溶于乙醇(95％)，用乙醇(95％)稀释至100 mL。 The acid dissociation constant (p K a) of this reaction is 4.8 2,4-二硝基苯肼

碘碘为广谱可逆显色试剂，尤其对具有不饱和键，共轭体系（芳烃），含有孤电子对的杂原子官能团（羟基、氨基、巯基等等）有明显效果。原理解释（仅供参考）为碘吸附作用，放置一段时间解吸附消失。可以理解为碘的较高极化性，是的带形式正电荷的碘正离子生成，对具有孤电子对、可极化的π电子产生亲电性吸附作用。茚三酮

薄层色谱原理

薄层色谱原理：薄层色谱法（TLC），系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。薄层色谱，或称薄层层析(thin—layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。原理：薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。而处于固体表面的分子所受的力是不对称的，向内的一面受到固体内部分子的作用力大，而表面层所受的作用力小，因而气体或溶质分子在运动中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响，就会被吸引而停留下来。吸附过程是可逆的，被吸附物在一定条件下可以解吸出来。在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平衡。吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力与分配系数的不同，使混合物得以分离。当溶剂沿着吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。由于各组分在溶剂中的溶解度不同，以及吸附剂对它们的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列斑点。如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开，则可以根据这些已知化合物的Rf值(后面介绍Rf值)对各斑点的组分进行鉴定，同时也可