紫薯中花青素的提取研究
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紫薯中花青素的提取研究
冯亮; 彭周羽; 谭曾勇; 杨艳
【期刊名称】《《广州化工》》
【年(卷),期】2019(047)013
【总页数】4页(P97-100)
【关键词】花青素; 紫薯; 提取; 正交实验
【作者】冯亮; 彭周羽; 谭曾勇; 杨艳
【作者单位】湖北民族大学化学与环境工程学院湖北恩施 445000
【正文语种】中文
【中图分类】TQ914.1
中国是薯类生产大国,约占世界薯类生产总量的65.0%[1]。紫薯不仅具有普通甘薯的营养成分,如:淀粉、可溶性糖、蛋白质、氨基酸、膳食纤维、脂肪、多种维生素(VA、VB1、VB2、VC、VE等)、胡萝卜素。同时它还富含Fe、Zn等多种微量元素,且营养成分含量普遍高出普通甘薯[2]。由于紫薯富含高花青素类成分,且根内部呈深紫色,也被俗称“黑红薯”[3]。花青素是一类广泛存在于自然植物中水溶性天然色素[4-6]。由于其食用安全、色泽鲜亮自然、无特殊气味,且兼具抗氧化、抗突变、降血脂等保健功能,而受到人们的青睐。近些年来,紫薯中花青素的含量及提取成为了人们研究的热点。花青素主要的提取方法有微生物发酵提取法[7-10]、超声波微波提取法、超临界CO2提取法、溶剂浸提法等。本论文主要
是将常见的食品添加剂类柠檬酸作为提取溶剂,考察各提取因素对紫薯中花青素提取量的影响,以探讨花青素的提取工艺条件,以确定较优的提取工艺参数。
1 实验
1.1 材料与仪器
1.1.1 材料与试剂
紫薯,购于恩施农贸市场。
柠檬酸、草酸、醋酸、甲醇等试剂,均为分析纯,均购于国药集团化学试剂有限公司;香草醛、原花青素,均购于合肥博美生物科技有限责任公司;水为二次蒸馏水。
1.1.2 仪器与设备
KQ2200B型超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司;FA1004B电子天平,上
海佑科仪器有限公司;800型离心机,上海云楼医用仪器厂;HH-2S型恒温水浴锅,上海天平仪器厂;SHZ-D(Ⅲ)型循环水式真空泵,上海华英仪器有限公司;
UV-2550型紫外-可见分光光度仪,日本岛津;XZ-1B型旋片真空泵,浙江温岭
市真空泵厂;高速多功能粉碎机,永康市铂欧五金制品有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 原料的前处理
将紫薯洗净,切成薄片,放置于干燥箱中,于60 ℃恒温风干至恒重,得到紫薯干。然后用粉碎机磨碎,并用60目标准筛过筛,得到紫薯粉,于干燥皿中避光保存备用。
1.2.2 原花青素最大吸收波长的确定
参考文献[11-14]对紫薯中花青素的含量进行测量。准确称取20.00 mg原花青素
标准品,溶解于20.0 mL甲醇,得到1.00 mg·mL-1的原花青素标准溶液,作为
母液备用。准确配制8.0%盐酸甲醇溶液和2.0%香草醛甲醇溶液,并以1:1混合,得到显色剂,现配现用。取1.0 mL母液于10 mL容量瓶,加入5.0 mL显色剂,
于30 ℃水浴避光反应30 min,然后在400~600 nm范围内测定吸收波长。1.2.3 原花青素标准曲线的绘制
分别取0、0.1、0.3、0.6、0.9、1.2 mL,浓度为1.0 mg·mL-1的原花青素标准溶液于10 mL容量瓶,加入2.5 mL,8.0%盐酸-甲醇溶液和2.5 mL,2.0%香草醛甲醇溶液,于30 ℃水浴避光反应30 min,用甲醇定容,然后在500 nm测定吸光度,并以原花青素质量浓度对吸光度进行线性回归分析。
1.2.4 最佳提取溶剂的选择
选用浓度为3.0%和5.0%的醋酸、草酸、柠檬酸分别进行试验,以选择合适的提取溶剂。
1.2.5 单因素实验
在此主要考察了时间、温度、次数、料液比以及提取剂浓度五个因素的影响,通过预实验结果,设计单因素实验时间为5~30 min,温度为20~70 ℃,次数为1~4次,料液比为(1:10)~(1:100),提取剂浓度为3.0%~20.0%。
1.2.6 正交实验设计
为寻找花青素最优的提取条件,实现最大提取率,在单因素的实验基础上,利用正交实验设计方法优化提取工艺。利用正交实验设计表L16(45)设计实验,设计表如表1所示。
表1 因素指标Table 1 The factors and levels水平因素提取温度/℃溶剂浓度/%(m/V)料液比/(g mL)提取时间/min提取次数/次12531 10051240101 25152350151 17203460201 10304
2 结果与讨论
2.1 原花青素最大吸收波长的确定及标准曲线
图1 原花青素紫外-可见吸收光谱图Fig.1 UV-visible absorption spectra of extracting solution from procyanidins
图2 原花青素标准曲线Fig.2 Standard curve of procyanidins
由图1可知,原花青素在500 nm处有最大吸收。线性回归方程为:Y=
5.9437×X-8.4518×10-4,R2=0.9995,如图2所示。吸光度在质量浓度0.01~0.12 mg·mL-1范围内线性关系较好。
2.2 提取溶剂的选择
不同溶剂对花青素提取量的影响如图3所示。
图3 不同溶剂对花青素提取量的影响Fig.3 The effect of solvent on the yield of procyanidins
2.3 单因素实验结果
2.3.1 温度影响
图4 温度对花青素提取量的影响Fig.4 The effect of temperature on the yield of anthocyanins
由图3可知,相同浓度下,柠檬酸和草酸的提取效果差别不大。但根据花青素类化合物的性质,其在酸性溶液中更易溶解而被提取,且相同浓度的草酸和柠檬酸,柠檬酸溶液的酸度较大,因此在单因素实验中,均选用柠檬酸作为提取剂。
温度对花青素提取量的影响如图4所示。在各因素条件下,花青素的提取率在20~50 ℃随着温度的升高而升高,但在在50~70 ℃时其提取率逐渐下降。这主要是因为花青素是一种含有较多酚羟基的类黄酮物质,容易氧化,且高温会促使对花青素有保护作用的3-糖苷结构水解,从而使花青素降解。另一方面,紫薯中含有大量的淀粉,升高温度会使淀粉溶胀,导致提取液变得浓稠,给实验操作带来困难,因此在以下的单因素实验中均以30 ℃为提取温度。
2.3.2 时间的影响
时间对提取率的影响如图5所示。
图5 时间对花青素提取量的影响Fig.5 The effect of time on the yield of