显微镜的使用与简单染色法

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普通微生物学实验
显微镜的使用与简单染色法
制作人:贾 乐 周 波 杜秉海 丁延琴
农业生物学实验教学中心
一 实验目的
1.熟练掌握显微镜的结构及使用方法 2.熟练掌握细菌涂片的制作及简单染色法 3.初步建立无菌操作的观念
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二 实验材料
1.双目电光源光学显微镜。 2. 香柏油、二甲苯、复红、接种环等。 3. 黄色四联球菌(24小时)。
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三 试验内容
(一)显微镜的使用
1.普通光学显微镜的构造 (1)机械装置 (2)光学系统
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2. 光学显微镜的工作原理
① N ·A = n sinθ ②D=λ/2 N ·A = λ/2 n sin θ
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3.油镜的使用及维护 (1)反向调节 (2)镜头维护:4~6层镜头纸,单向擦拭
绘图要求:
⑴圆规绘制视野图,直径为8cm; ⑵标注菌种名称,放大倍数,染色剂等信息。
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(二)简单染色法
1.操作步骤 ①涂片 ②干燥 ③固定
④染色 ⑤水洗 ⑥干燥 ⑦镜检
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无菌操作示意图
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无菌操作示意图
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四 结果与讨论
1.油镜的工作原理? 2.细菌涂片染色过程中,固定的目的是什么? 3.绘图表示所观察到的菌体形态。
①用镜头纸单向擦拭,擦除香柏油; ②用镜头纸蘸取二甲苯,擦除残余香柏油; ③用镜头纸单向擦拭,擦除残余二甲苯。
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4.其它类型的显微镜
①暗视野显微镜 ②相差显微镜 ③荧光显微镜 ④电子显微镜
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Hale Waihona Puke Baidu
研究型(相差、荧光)显微镜
相差显微镜的成像原理
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